CN102435683A - 一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 - Google Patents
一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102435683A CN102435683A CN2011102781524A CN201110278152A CN102435683A CN 102435683 A CN102435683 A CN 102435683A CN 2011102781524 A CN2011102781524 A CN 2011102781524A CN 201110278152 A CN201110278152 A CN 201110278152A CN 102435683 A CN102435683 A CN 102435683A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- finger
- volatile oil
- root
- dahurain angelica
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，它包括下述步骤：(1)挥发油的提取；(2)白芷挥发油化学成分的GC/MS分析；(3)挥发油的GC/MS总离子流图的确定，对各组分的相对含量采用峰面积归一化法进行定量；(4)指纹图谱的建立；(5)指纹图谱的方法学考察；本发明方法明确了白芷挥发油的最优提取方法，并对气相色谱条件、质谱条件进行了优化选择，构建了白芷挥发油的GC/MS指纹图谱，反映了白芷主要挥发性组分的化学成分及其比例，有效地表征了白芷挥发油的质量；本发明方法建立的白芷挥发油GC/MS指纹图谱还具有很好的重现性和可靠性，为白芷挥发油的质量控制和产地鉴定提供了可靠的途径。
Description
技术领域
本发明涉及中药白芷的分析测试领域，特别是涉及白芷挥发油成分的分析检测方法。
背景技术
白芷始载于《神农本草经》，是传统中药之一，为伞形科当归属植物白芷(Angelica dahurica)或杭白芷(Angelca dahurica var.formosana)的干燥根。白芷为白芷商品药材的主流品种，约占全国商品白芷产量的70％。白芷性温，味辛，有散风寒、燥湿、排脓、止痛的功能，用于风寒感冒、头痛、鼻炎、牙痛等。白芷含挥发油，香豆素及其衍生物，如当归素、白当归醚、欧前胡乙素、白芷毒素等，挥发油中有3-亚甲基-6-环己烯、十一炭烯-4、榄香烯、十六烷酸、壬烯醇等。
白芷的产地加工方法对白芷质量影响较大，目前主要采用硫磺烟熏法，但是，大量实验证实熏硫后其香豆素及挥发油类成分大大降低，白芷的药效不稳定，因此控制白芷药材质量至关紧要。
关于白芷质量控制方法的报道有：《中国药典》2000年版对白芷药材的质量控制只限于原植物品种、药材性状和简单的理化鉴别，缺乏一套行之有效的内在质量控制方法和量化指标。聂红，沈映君，白芷挥发油的GC-MS分析，贵阳中医学院学报，2002年6月第24卷第2期，公开了一种白芷挥发油的GC-MS分析方法；马逾英、王娜，不同前处理方法所得白芷挥发油成分的GC-MS分析，成都中医药大学学报，2009年12月第32卷第4期，也公开了一种白芷挥发油的GC-MS分析方法，但是它们都没有对白芷挥发油的建立系统可靠的指纹图谱分析方法，不能有效地控制白芷挥发油的质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，用于白芷挥发油的质量评价，为白芷挥发油的质量控制和产地鉴定提供有效地途径。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，包括以下步骤：
1、挥发油的提取
白芷：蒸馏水(体积比)＝1∶8～15，浸泡10～15h，回流提取至馏出液无明显油珠为止；将流出液用乙醚萃取，用无水硫酸钠等无水无机盐干燥萃取液，去除乙醚，即得白芷挥发油。
优选地，乙醚萃取液的用量为流出液与乙醚的体积比为1∶6；
优选地，萃取中至少用乙醚进行两次萃取；
优选地，干燥后的萃取液在50℃水浴下挥发去除乙醚。
2、白芷挥发油化学成分的GC/MS分析
1)挥发油溶于乙醚中供GC/MS分析使用；
2)设置气相色谱条件：HB-5毛细管柱(30m×0.25μm×0.25μm)，进样口温度250℃，载气为高纯氦气，载气流速为1.0mL/min，程序升温：起始温度40℃，保持3.0min，3℃/min升至80℃，保持1min，再以15℃/min升至230℃保持5.0min，进样1μL。
3)设置质谱条件：EI离子源；电子能量70eV；四级杆温度150℃，接口温度260℃；电子倍增器电压1654V；离子源温度230℃；采用标准方式调谐；选用全扫描(SCAN)模式，质量扫描范围：45～550amu。
3、对白芷挥发油进行GC/MS分析，得到挥发油的GC/MS总离子流图。通过质谱数据系统检索，鉴定化合物，并对各组分的相对含量采用峰面积归一化法进行定量。
4、指纹图谱的建立
4.1指纹图谱的制备方法
将3～5批次白芷提取挥发油后得供试品溶液，分别进行GC/MS测定，记录总离子流图。
4.2共有峰的确定
对所有批次测定的GC/MS总离子流图进行对比，筛选出强度较大的共有峰，选择其中色谱峰分离度好、强度高的峰为参照物峰。
5、指纹图谱的方法学考察
5.1精密度实验
取同一试样溶液，连续进样5～10次，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差。
5.2稳定性实验
取同一试样溶液，分别放置0，2，4，8，16，24h后进样测定，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差。
5.3重现性实验
取同一批白芷挥发油5～10份，制备平行试样溶液，进样，计算每个峰的相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差。
本发明所具有的有益效果：
本发明通过大量的实验研究，明确了白芷挥发油的最优提取方法，并对气相色谱条件、质谱条件进行了优化选择，构建了白芷挥发油的GC/MS指纹图谱，反映了白芷主要挥发性组分的化学成分及其比例，有效地表征了白芷挥发油的质量；并且，本发明方法建立的白芷挥发油GC/MS指纹图谱还具有很好的重现性和可靠性，为白芷挥发油的质量控制和产地鉴定提供了可靠的途径。
附图说明
图1为按本发明方法获得的白芷挥发油成分总离子流图。
图2为按本发明方法获得的白芷挥发油的指纹图谱。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但不限制本发明。
1.材料
1.1仪器
安捷伦6890-5975气相色谱-质谱仪，HB-5毛细管柱
(30m×0.25μm×0.25μm)，样品管，水浴锅，分液漏斗。
1.2样品
白芷样品产自四川。
2.方法
2.1挥发油的提取
将20g白芷置于挥发油提取器中，加入10倍样品量的二次蒸馏水浸泡12h，回流提取5h，至馏出液无明显油珠为止。将馏出液转入分液漏斗中，用60mL乙醚分两次进行萃取，合并萃取液，用无水硫酸钠干燥，然后在50℃水浴下挥发去除乙醚，即得白芷挥发油。
2.2白芷挥发油化学成分GC-MS分析
2.2.1取少量挥发油溶于10mL乙醚中供GC/MS分析使用。
2.2.2设置气相色谱条件：HB-5毛细管柱(30m×0.25μm×0.25μm)，进样口温度250℃，载气为高纯(≥99.999％)氦气，载气流速为1.0mL/min，程序升温：起始温度40℃，保持3.0min，3℃/min升至80℃，保持1min，再以15℃/min升至230℃保持5.0min，进样1μL。
2.2.3设置质谱条件：EI离子源；电子能量70eV；四级杆温度150℃，接口温度260℃；电子倍增器电压1654V；离子源温度230℃；采用标准方式调谐；选用全扫描(SCAN)模式，质量扫描范围：45～550amu。
2.2.4对白芷挥发油进行GC/MS分析，得到挥发油的GC/MS总离子流图(见附图1)。通过NIST05质谱数据系统检索，共鉴定出48种化合物，占总质量分数的95.98％。各组分的相对含量采用峰面积归一化法进行定量，鉴定结果见表1：
表1 白芷挥发油成分
2.3指纹图谱的建立
2.3.1指纹图谱的制备方法
将5批次白芷挥发油供试品溶液，精密吸取各供试品溶液各1μL，分别进行GC/MS测定，记录总离子流图。
2.3.2共有峰的确定
对5批次测定的GC/MS总离子流图进行对比，筛选出7个强度较大的共有峰(见表2和图2)，其中以2号峰α-蒎烯的色谱峰分离度好、强度高，并且为所有批次图的共有峰，因此选择为参照物峰。
表2 白芷挥发油的指纹图谱组分表
3.指纹图谱的方法学考察
3.1精密度实验
取同一试样溶液，连续进样5次，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差。结果表明，各共有峰相对保留时间基本一致，RSD值都在1.2％以下，都＜3％；共有峰相对峰面积的RSD值均在±25％内，相对保留时间和相对峰面积的RSD都符合指纹图谱检测要求。
3.2稳定性实验
取同一试样溶液，分别放置0，2，4，8，16，24h后进样测定，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差。结果表明，各峰相对保留时间基本一致，RSD都在1.06％以下，都＜3％；共有峰相对峰面积的相对标准偏差均在±25％以内，相对保留时间和相对峰面积的RSD都符合指纹图谱检测要求。
3.3重现性实验
取同一批白芷挥发油5份，制备平行试样溶液，进样，计算每个峰的相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差。结果表明，各峰相对保留时间的RSD都＜1.54％，其值在3％以内；共有峰相对峰面积的相对标准偏差在±25％范围内，符合指纹图谱检测要求。
Claims (6)
1.一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)挥发油的提取
白芷∶蒸馏水(体积比)＝1∶8～15，浸泡10～15h，回流提取至馏出液无明显油珠为止；将流出液用乙醚萃取，用无水无机盐干燥萃取液，去除乙醚，即得白芷挥发油；
(2)白芷挥发油化学成分的GC/MS分析
1)挥发油溶于乙醚中供GC/MS分析使用；
2)设置气相色谱条件：HB-5毛细管柱(30m×0.25μm×0.25μm)，进样口温度250℃，载气为高纯氦气，载气流速为1.0mL/min，程序升温：起始温度40℃，保持3.0min，3℃/min升至80℃，保持1min，再以15℃/min升至230℃保持5.0min，进样1μL；
3)设置质谱条件：EI离子源；电子能量70eV；四级杆温度150℃，接口温度260℃；电子倍增器电压1654V；离子源温度230℃；采用标准方式调谐；选用全扫描(SCAN)模式，质量扫描范围：45～550amu；
(3)对白芷挥发油进行GC/MS分析，得到挥发油的GC/MS总离子流图；通过质谱数据系统检索，鉴定化合物，并对各组分的相对含量采用峰面积归一化法进行定量；
(4)指纹图谱的建立
1)指纹图谱的制备方法
将3～5批次白芷提取挥发油后得供试品溶液，分别进行GC/MS测定，记录总离子流图；
2)共有峰的确定
对所有批次测定的GC/MS总离子流图进行对比，筛选出强度较大的共有峰，选择其中色谱峰分离度好、强度高的峰为参照物峰。
2.根据权利要求1所述的一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：最后还包括步骤：指纹图谱的方法学考察，具体为：
1)精密度实验
取同一试样溶液，连续进样5～10次，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差；
2)稳定性实验
取同一试样溶液，分别放置0，2，4，8，16，24h后进样测定，比较各共有峰相对保留时间和相对峰面积，计算每个峰的相对标准偏差；
3)重现性实验
取同一批白芷挥发油5～10份，制备平行试样溶液，进样，计算每个峰的相对保留时间和相对峰面积的相对标准偏差。
3.根据权利要求1所述的一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：步骤(1)中乙醚萃取液的用量为流出液与乙醚的体积比为1∶6。
4.根据权利要求1所述的一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：步骤(1)中至少用乙醚进行两次萃取。
5.根据权利要求1所述的一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：步骤(1)中的无水无机盐优选无水硫酸钠。
6.根据权利要求1所述的一种白芷挥发油成分的GC/MS指纹图谱的分析方法，其特征在于：步骤(1)中干燥后的萃取液在50℃水浴下挥发去除乙醚。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110278152 CN102435683B (zh) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | 一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110278152 CN102435683B (zh) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | 一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102435683A true CN102435683A (zh) | 2012-05-02 |
| CN102435683B CN102435683B (zh) | 2013-10-16 |
Family
ID=45983848
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110278152 Expired - Fee Related CN102435683B (zh) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | 一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102435683B (zh) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107703217A (zh) * | 2016-08-09 | 2018-02-16 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种过敏性鼻炎颗粒指纹图谱的制备方法及获得的指纹图谱 |
| CN109438166A (zh) * | 2018-11-08 | 2019-03-08 | 石药集团远大(大连)制药有限公司 | （1S,2S,4S）-β-榄香烯及其制备方法和应用 |
| CN109917039A (zh) * | 2019-03-28 | 2019-06-21 | 广州白云山维一实业股份有限公司 | 植物精油的检测方法 |
| CN110305734A (zh) * | 2019-07-03 | 2019-10-08 | 亳州职业技术学院 | 一种白芷叶挥发油的提取工艺 |
| CN113025429A (zh) * | 2021-04-09 | 2021-06-25 | 湖南国华制药有限公司 | 一种白芷、当归挥发油的提取工艺、装置及检验工艺 |
| CN114894917A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-08-12 | 山东步长制药股份有限公司 | 一种甘松挥发性成分的检测及指纹图谱构建方法 |
| CN115248271A (zh) * | 2022-06-07 | 2022-10-28 | 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司 | 鼠尾草挥发性成分定性分析方法 |
-
2011
- 2011-09-19 CN CN 201110278152 patent/CN102435683B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 张国彬等: "杭白芷挥发油化学成分的研究", 《宁夏医学院学报》 * |
| 王婷婷: "中药白芷质量评价方法研究", 《沈阳药科大学硕士学位论文》 * |
| 马逾英等: "白芷挥发油的研究进展", 《中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集》 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107703217A (zh) * | 2016-08-09 | 2018-02-16 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种过敏性鼻炎颗粒指纹图谱的制备方法及获得的指纹图谱 |
| CN109438166A (zh) * | 2018-11-08 | 2019-03-08 | 石药集团远大(大连)制药有限公司 | （1S,2S,4S）-β-榄香烯及其制备方法和应用 |
| CN109438166B (zh) * | 2018-11-08 | 2021-06-04 | 石药集团远大(大连)制药有限公司 | (1S,2S,4S)-β-榄香烯及其制备方法和应用 |
| CN109917039A (zh) * | 2019-03-28 | 2019-06-21 | 广州白云山维一实业股份有限公司 | 植物精油的检测方法 |
| CN110305734A (zh) * | 2019-07-03 | 2019-10-08 | 亳州职业技术学院 | 一种白芷叶挥发油的提取工艺 |
| CN113025429A (zh) * | 2021-04-09 | 2021-06-25 | 湖南国华制药有限公司 | 一种白芷、当归挥发油的提取工艺、装置及检验工艺 |
| CN114894917A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-08-12 | 山东步长制药股份有限公司 | 一种甘松挥发性成分的检测及指纹图谱构建方法 |
| CN114894917B (zh) * | 2022-04-06 | 2023-10-20 | 山东步长制药股份有限公司 | 一种甘松挥发性成分的检测及指纹图谱构建方法 |
| CN115248271A (zh) * | 2022-06-07 | 2022-10-28 | 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司 | 鼠尾草挥发性成分定性分析方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102435683B (zh) | 2013-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102435683B (zh) | 一种白芷挥发油成分的gc/ms指纹图谱的分析方法 | |
| Cui et al. | Analysis of the HPLC fingerprint and QAMS from Pyrrosia species | |
| Gao et al. | Overview of the quality standard research of traditional Chinese medicine | |
| Li et al. | Comparative analysis of main aromatic acids and phthalides in Angelicae Sinensis Radix, Chuanxiong Rhizoma, and Fo-Shou-San by a validated UHPLC–TQ-MS/MS | |
| Chun et al. | GC/MS combined with chemometrics methods for quality control of Schizonepeta tenuifolia Briq: Determination of essential oils | |
| CN105738546B (zh) | 毛郁金药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| Xu et al. | Discrimination of the seeds of Notopterygium incisum and Notopterygium franchetii by validated HPLC-DAD–ESI-MS method and principal component analysis | |
| CN104931605A (zh) | 一种基于成分分析的花椒粉质量检测方法 | |
| CN103235060B (zh) | 烟草致香物同时蒸馏萃取(sde)的优化萃取检测方法 | |
| Lu et al. | Quality evaluation of Corydalis yanhusuo by high-performance liquid chromatography fingerprinting coupled with multicomponent quantitative analysis | |
| Nguyen et al. | Chiral high-performance liquid chromatographic separation of evodiamine enantiomers and rutaecarpine, isolated from Evodiae fructus | |
| CN105021748A (zh) | 一种茶叶挥发性香气成分分析方法 | |
| Li et al. | Determination of bioactive compounds in the nonmedicinal parts of Scrophularia ningpoensis using ultra‐high‐performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry and chemometric analysis | |
| Yang et al. | GC‐MS fingerprints for discrimination of Ligusticum chuanxiong from Angelica | |
| CN104297373A (zh) | 一种草果与草豆蔻的指纹图谱鉴别方法 | |
| Shi et al. | Aconitum diterpenoid alkaloid profiling to distinguish between the official traditional Chinese medicine (TCM) fuzi and adulterant species using LC-qToF-MS with chemometrics | |
| Kong et al. | Multi-component analysis of bile acids in natural Calculus bovis and its substitutes by ultrasound-assisted solid–liquid extraction and UPLC-ELSD | |
| Avula et al. | Quantitative determination of vasicine and vasicinone in Adhatoda vasica by high performance capillary electrophoresis | |
| Li et al. | Simultaneous determination of phenols in Radix Polygalae by high performance liquid chromatography: quality assurance of herbs from different regions and seasons | |
| CN104655748B (zh) | 一种灯盏花颗粒指纹图谱及其建立方法与应用 | |
| CN103389354A (zh) | 香荚兰豆药材中挥发性成分的分析方法 | |
| CN109342600A (zh) | 一种小茴香产地的鉴别方法 | |
| CN105548411A (zh) | 一种正天丸制剂中挥发性成分的特征图谱的构建方法及正天丸制剂中挥发性成分的检测方法 | |
| CN102478552B (zh) | 一种普洱茶挥发油的检测方法 | |
| CN103336086B (zh) | 咖啡豆药材中挥发油化学成分的分析方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131016 Termination date: 20180919 |