CN109432112B - 花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血脂药物的用途 - Google Patents

花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血脂药物的用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种花翠苷3‑[2‑(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血脂药物的用途。还提供了花翠苷3‑[2‑(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素‑3‑O‑葡萄糖苷作为活性成分制备降血脂药物的用途。本发明单独采用花翠苷3‑[2‑(木糖苷)半乳糖苷]或将花翠苷3‑[2‑(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素‑3‑O‑葡萄糖苷进行合理的配伍，使得两种有效成分协同作用，动物实验证明本发明能够显著降低小鼠血脂水平，从而为人们提供一种新的降血脂的药物组合物。

Description

花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血 脂药物的用途
技术领域
本发明属于药物组合技术领域，更具体地，涉及花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血脂药物的用途。
背景技术
花色苷一词是Marguart在1835年首先用来命名矢车菊花朵中的蓝色提取物时提出来的，现为同类物质的总称。由于花色苷的基本骨架结构与2-苯色原酮的黄酮结构十分相似，故花色苷类化合物现也统称为黄酮类化合物。花色苷类化合物是指两个苯环(A-与B-环)通过中央三碳链(C环)相互联结而成的一系列C6-C3-C6化合物，它的配基为花青素，由于B环各碳位上的取代基不同，形成各种各样的花青素。随着花青素结合的糖、有机酸种类及数量的不同，花色苷的种类也有所不同。目前有27个科，72个属的植物中含有花色苷，发现的花色苷种类已达250多种。Comeskey等从红猕猴桃中分离出5种花色苷，其中花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和花翠苷3-半乳糖苷2种为最新发现。已有研究表明矢车菊粗提物具有抗菌、抗炎、镇痛、抗肿瘤等多种药理作用。但是总黄酮的含量不低于85％的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为有效部位降血脂的药理活性未见报道。
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷是花色苷类的一种，主要存在于黑米，黑豆，紫薯等植物中。该化合物通常为盐酸盐，又称为氯化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷。目前仅韩国学者Lee等报道了黑豆皮中分离得到的5种花青素：矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、牵牛花色素-3-O-葡萄糖苷、锦葵花色素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素。另外，有文献报道矢车菊素-3-O-葡萄糖苷是黑豆皮重要的活性成分。现代药理学研究证明C3G具有显著的抗氧化、抗肿瘤、保护神经系统、恢复短暂性视力减弱等多种医疗保健作用。另有研究发现C3G可作为植物保护剂，保护棉花叶片免受棉铃虫的危害。但是总黄酮的含量不低于85％的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为有效部位降血脂的药理活性未见报道。
多种中药的提取物可从多方面机制产生降血脂的作用，提示中药在不同层次、多靶点发挥降血脂的作用特点，为进一步开发出具有降血脂作用的中药新药提供了新的思路。从文献上看，日前中药有效成分降血脂的药理作用研究多采用单味中药有效部位，很少进行中药复方有效部位的研究。但是临床上中药多以复方入药，因此开发出复方降血脂的有效部位组合，并进行作用机制的研究，是今后降血脂中药新药研究的重要方向。
发明内容
本发明的目的在于解决上述问题，提供一种用于降血脂的花色苷类药物，以期待对有效降血脂提供帮助。
为了实现上述目的，本发明的第一方面提供一种花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为活性成分用于制备降血脂药物的用途。
本发明的第二方面提供花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为活性成分制备降血脂药物的用途。
根据本发明，所述花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷可商购，或采用本领域技术人员常规采用的提取方法制得。
作为本发明优选的实施方式，花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的重量比为1～4:1～4；更优选的，花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的重量比为0.8～4:1；进一步优选的，花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的重量比为0.8～1.2:1。
作为本发明优选的实施方式，所述降血脂是降低总胆固醇。
作为本发明优选的实施方式，所述降血脂是降低甘油三酯。
根据本发明，所述降血脂药物是口服制剂或肠胃外给药制剂。
作为本发明优选的实施方式，所述花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]中总黄酮的含量≥85wt％。
作为本发明优选的实施方式，所述花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷中总黄酮的含量均≥85wt％。
本发明的有益效果：
本发明单独采用花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]或将花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷进行合理的配伍，使得两种有效成分协同作用，动物实验证明本发明能够显著降低小鼠血脂水平，从而为人们提供一种新的降血脂的药物组合物。
本发明的其它特征和优点将在随后具体实施方式部分予以详细说明。
具体实施方式
下面将更详细地描述本发明的优选实施方式。虽然以下描述了本发明的优选实施方式，然而应该理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了使本发明更加透彻和完整，并且能够将本发明的范围完整地传达给本领域的技术人员。
本发明实施例中，采用的自制药物的制备方法包括：
花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]的制备：
取产自江苏射阳矢车菊，粉碎，加10倍量(重量倍)浓度为70％(v/v)的乙醇回流提取2次，6倍和4倍，每次2小时，合并提取液，回收溶剂至相对密度为1.2流浸膏，加水稀释成每毫升相当0.2g生药，过滤，滤液备用(测得总黄酮含量为13.62mg/mL)；经过预处理的大孔吸附树脂，湿法装柱，装柱体积为100mL(湿重66g，干重18g)，径高比为1:8，精密吸取上柱液400mL上柱，控制流速为6mL/min，再分别用3倍柱体积量纯化水和1倍柱体积量的20％(v/v)乙醇洗脱杂质，控制流速为6mL/min，再用3倍柱体积量的60％(v/v)乙醇洗脱总黄酮，控制流速为6mL/min，收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥至恒重，即得花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]粗品。总黄酮的含量85％(UV和HPLC法测定)，得到的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]为A。
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备：
取产自黑龙江克山黑豆，粉碎，加10倍(重量倍)浓度为70％(v/v)的乙醇回流提取2次，6倍和4倍，每次1小时，提取液放冷，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释成每毫升相当0.2g生药每毫升，此为上柱液；经过预处理的大孔吸附树脂，湿法装柱，装柱体积为100mL(湿重66g，干重18g)，径高比为1:5，将三倍于树脂体积的上柱液上柱，控制流速为6mL/min，再分别用3倍柱体积量纯化水和1倍柱体积量的20％(v/v)乙醇洗脱杂质，控制流速为6mL/min，再用3倍柱体积量的60％(v/v)乙醇洗脱总黄酮，控制流速为6mL/min，收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥至恒重，即得矢车菊素-3-O-葡萄糖苷粗品。总黄酮的含量85％(UV和HPLC法测定)，得到的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为B。
采用的商购药物为：
花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷均购自成都曼思特生物科技有限公司，经测定，总黄酮的含量85％(UV和HPLC法测定)，花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]作为a，矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为b。
实施例1：
将自制得到的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]A作为活性成分用于制备降血脂药物。
实施例2：
将自制得到的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷](作为A)以及矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(作为B)作为活性成分用于制备降血脂药物，A与B的重量比为4:1。
实施例3：
将自制得到的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷](作为A)以及矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(作为B)作为活性成分用于制备降血脂药物，A与B的重量比为1:1。
实施例4：
将自制得到的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷](作为A)以及矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(作为B)作为活性成分用于制备降血脂药物，A与B的重量比为1:4。
实施例5：
将商购药物a、b作为活性成分用于制备降血脂药物，a与b的重量比为1:1。
对实施例1-5中采用的活性成分进行对小鼠血脂水平的影响测试，测试方案及结果如下：
1、材料
1.1动物
实验动物：小鼠，雄性，体重(22±2)g。饲养于室内通风柜内，恒温(22±2)℃，自然昼夜，自由食水。
1.2药物与试剂
研究药物两种，分别以大写A和B代表自制的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]粗品和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷粗品，以小写a和b代表商购的花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷。血脂康胶囊购自北京北大维信生物科技有限公司。
1.3仪器
日立全自动血液生化分析仪。
1.4统计学方法
计量数据以均数±标准差表示，应用SPSS20.0软件，采用方差分析进行比较。P<0.05为显著性差异，P<0.01为极显著性差异。
2、方法和结果
2.1单用药物A或B对小鼠血脂水平的影响
取小鼠100只，随机分为10组，每组10只，即：空白对照组；模型对照组；阳性对照血脂康组；不同剂量给药组(7组)。空白对照组小鼠给予鼠用颗粒饲料，其余各组灌服脂肪乳剂，乳剂成分比例：10％胆固醇，20％猪油，2％的胆酸钠和1％的甲基硫氧嘧啶。乳剂剂量0.5mL/20g，每日灌胃，连续给予2周，各组动物在造型的同时给予不同剂量的药物，模型对照组灌胃蒸馏水(0.2mL/10g)，各给药组分别灌胃相应药物(血脂康0.24g/kg，其余分别为：1.25，2.5，5.0，10.0，20.0，40.0，80.0mg/kg)。小鼠处死前12小时禁食，自小鼠眶动脉取血，分离血清测量TC及TG含量，结果见表1和表2。
表1药物A对高血脂症小鼠TC、TG的影响(
Figure BDA0001855839410000061
n＝10)
Figure BDA0001855839410000062
Figure BDA0001855839410000071
注：与模型对照组比较*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较##P<0.01。
表2药物B对高血脂症小鼠TC、TG的影响(
Figure BDA0001855839410000072
n＝10)
组别 剂量(mg/kg) TC(mmol/L) TG(mmol/L)
空白对照组 － 3.13±0.12 4.23±0.27
模型对照组 － 4.21±0.18## 5.22±0.11##
血脂康组 240 3.34±0.27** 3.69±0.27*
药物B 1.25 3.98±0.17 4.46±0.38
药物B 2.5 4.20±0.27 4.34±0.55
药物B 5.0 3.99±0.23 4.42±0.37
药物B 10.0 3.76±0.41 4.22±0.27
药物B 20.0 3.46±0.12* 3.97±0.37*
药物B 40.0 3.91±0.24 4.41±0.21*
药物B 80.0 3.89±0.37 4.66±0.42
注：与模型对照组比较*P<0.05，**P<0.01，与空白对照组比较##P<0.01。
由表1和表2可以看出，模型对照组与空自对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)，表明模型建立成功。药物A各组中，血清TC和TG与模型对照组相比较均有降低。其中5.0，10.0，20.0组TC的降低有统计学意义；而5.0，10.0，20.0，40.0组TG的变化也有统计学意义。但直观分析可以看到，该实验中以10mg/kg组效果最好。药物B各组中，血清TC和TG与模型对照组相比较均有降低。其中20.0组TC的降低有统计学意义；而20.0，40.0组TG的变化也有统计学意义。但直观分析可以看到，该实验中以20mg/kg组效果最好。
2.2不同配比的A和B联合用药协同作用的观察
实验方法同上，各给药组为A和B按不同比例配伍的混合物。具体为100％A，80％A+20％B，50％A+50％B，20％A+80％B，100％B，结果见表3。
表3药物A+B对高血脂症小鼠TC、TG的影响(
Figure BDA0001855839410000081
n＝10)
Figure BDA0001855839410000082
注：与模型对照组比较*P<0.05，**P<0.01。
由表3可以看出，药物A单独使用时显示良好的降血脂作用，与模型组相比有显著的统计学意义，当按不同比例配伍B药时，降血脂作用有所增强，其中以1:1配比组疗效最为明显，与单用药物A组相比，差异有显著性。结果显示，药物A和B在一定合理比例下配伍，显示出较明显的协同作用。
2.3两种药物1:1配比的组合物自制与市售之间作用比较
实验方法同上。结果见表4。
表4自制与市售的药物组合物(1:1配比)对高血脂症小鼠TC、TG的影响(
Figure BDA0001855839410000091
n＝10)
Figure BDA0001855839410000092
注：与模型对照组比较*P<0.05，**P<0.01。
由表4可以看出，自制和市售两组疗效相当，都显示良好的降血脂作用，与模型组相比都有显著的统计学意义。
由上述结果可知，药物组合物A和B在合适配比下联合用药以及A单独使用能够降低高血脂模型小鼠的TC及TG水平，具有明显的抗高血脂作用，自制和市售产品疗效相同。
以上已经描述了本发明的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。

Claims (6)

1.花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为活性成分制备降血脂药物的用途；
其中，花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的重量比为0.8～1.2:1。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述降血脂是降低总胆固醇。
3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述降血脂是降低甘油三酯。
4.根据权利要求1所述的用途，其中，所述降血脂药物是口服制剂或肠胃外给药制剂。
5.根据权利要求1所述的用途，其中，所述花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]中总黄酮的含量≥85wt％。
6.根据权利要求1所述的用途，其中，所述花翠苷3-[2-(木糖苷)半乳糖苷]和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷中总黄酮的含量均≥85wt％。
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