CN109394947A - 一种利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，有效解决个别药材含糖分多，不易充分揉搓在一起，易粘结粉碎机，治疗效果差，含量测定不稳定的问题，由重量百分比计的：枸杞子、菊花、熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻总量100%制成，枸杞子、酒萸肉和熟地黄放入液氮冷冻粉碎间冻结，放进冷冻粉碎机粉碎；菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻在常温粉碎机中粉碎；两种粉混合，灭菌，放凉，得灭菌极细粉；加水制成水丸；或加炼蜜，再加水，制成水蜜丸；或加炼蜜制成大蜜丸，即得，本发明有效成份的均一性、释出量和释出速度，单位时间内人体吸收药物有效成份的量高，起效时间显著缩短，疗效显著提高。

Description

一种利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法

技术领域

本发明涉及医学领域，特别是一种利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法。

背景技术

杞菊地黄丸收载于《中国药典》2015年版一部，是在经典名方六味地黄丸的基础上加枸杞子、菊花而成，具有滋阴、养肝、明目的功效，用于肝肾阴亏，眩晕耳鸣，羞明畏光，迎风流泪，视物昏花等症的疗效显著，为中医眼科经典方剂。中医认为，肝开窍于目，肝血上注于目则能视。枸杞子补肾益精，养肝明目；菊花善清利头目，宣散肝经之热。处方中重用熟地黄，滋阴补肾、填精益髓。山萸肉补养肝肾并能涩精；山药补脾固精，称为三补。泽泻清泻肾火，并防熟地黄之滋腻；茯苓健脾渗湿，以助山药之健运；丹皮清泻肝火，并制酒萸肉之温，谓之三泻。六药合用，三补三泻，其中“补药”用量重于“泻药”，以补为主；共奏滋阴、补肝、明目之效。制备工艺中将枸杞子、菊花、熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻八味中药粉碎成细粉直接入药，由于组方中枸杞子、熟地黄、酒萸肉中含糖分较多，质地较软，互相粘连，与其他药物不易充分揉搓在一起，粉碎时易粘结粉碎机，无法继续粉碎和过筛，影响后续工艺的进行。原处方的制备工艺上存在问题，在临床实践中，其治疗效果不理想，含量测定不稳定，故改进和创新势在必行。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明之目的就是提供一种利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，可有效解决个别药材含糖分多，与其他药材不易充分揉搓在一起，粉碎时易粘结粉碎机，影响后续工艺，治疗效果差，含量测定不稳定的问题。

本发明解决的技术方案是，由重量百分比计的：枸杞子5～9%、菊花5～9%、熟地黄25～30%、酒萸肉10～15%、牡丹皮8～12%、山药10～15%、茯苓8～12%和泽泻8～12%，总量100%作原料药制成，其中，酒萸肉为山茱萸用黄酒（每100斤山萸肉用黄酒20斤）拌匀，闷润至黄酒被吸尽，置蒸煮锅内，蒸4～8小时，取出，闷4～8小时，取出，摊晾至外皮微干，再将蒸时所得的蒸液拌入，吸尽，再晾至近干，所述的近干是指含水量不超过16%。

制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-30～-35℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-70℃～-90℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，于115～120℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加水，灭菌极细粉与水的重量比为1：0.5～1.5，制成水丸；或取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜35～50g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：2.5～3.0，制成水蜜丸；或取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜80～110g，制成大蜜丸，即得。

本发明利用超低温冷冻粉碎技术制备出的杞菊地黄丸，成功解决了药材在处理过程中出现的变软粘结的问题，使所泛的药丸更圆润光滑，其有效成份的均一性、释出量和释出速度，单位时间内人体吸收药物有效成份的量都比现有杞菊地黄丸高，明显提高了生物利用度，且药物起效时间显著缩短，疗效也显著提高。与现有杞菊地黄丸相比，无论在外观性状、质量和疗效上都有本质上的提高，药物有效成分得到了充分的利用，大大提高了药品的疗效，有实际的生产和临床意义，具有巨大的经济和社会效益。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1

本发明由重量百分比计的：枸杞子9%、菊花9%、熟地黄29%、酒萸肉15%、牡丹皮12%、山药10%、茯苓8%和泽泻8%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-30℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-70℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于120℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加水，灭菌极细粉与水的重量比为1：0.5～1.5，制成水丸，即得。

实施例2

本发明由重量百分比计的：枸杞子5%、菊花5%、熟地黄30%、酒萸肉15%、牡丹皮8%、山药13%、茯苓12%和泽泻12%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-32℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-75℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于115℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜35g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：2.5，制成水蜜丸。

实施例3

本发明由重量百分比计的：枸杞子8%、菊花7%、熟地黄25%、酒萸肉10%、牡丹皮11%、山药15%、茯苓12%和泽泻12%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-35℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-80℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于118℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜110g，制成大蜜丸，即得。

实施例4

本发明由重量计的：枸杞子400g、菊花400g、熟地黄1600g、酒萸肉800g、牡丹皮600g、山药800g、茯苓600g和泽泻600g作原料药制成，制备步骤如下：

制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-33℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-85℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于116℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜50g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：3.0，制成水蜜丸,即得。

上述药物中：

枸杞子：甘，平。归肝、肾经。滋补肝肾，益精明目。用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳痿遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明。

药理研究表明，枸杞子具有以下作用：

1.抗脂肪肝的作用：枸杞子的水浸液（20%，8毫升/天灌胃），对由四氯化碳毒害的小鼠，由轻度抑制脂肪肝在肝细胞内沉积、促进肝细胞新生的作用。水提取物的抗脂肪肝的作用还表现在，防止四氯化碳引起的肝功能紊乱(以胆碱酯酶、转氨酶的活性指标)。如给大鼠较长期（75天）口服枸杞水提取物或甜菜碱，可升高血及肝中的磷脂水平；受四氯化碳毒害之后之大鼠，肝中磷脂、总胆甾醇含量减低，事先或同时给甜菜碱或枸杞水提取物则有所提高；同时对BSP、SGPT、碱性磷酸酶、胆碱酯酶等试验均有改善作用。枸杞对脂质代谢或抗脂肪肝的作用，主要是由于其中所含的甜菜碱所引起，后者在体内起甲基供应体的作用。

2.拟胆碱样作用：枸杞的水提取物静脉注射，可引起兔血压降低，呼吸兴奋；阿托品或切断迷走神经可抑制此反应。它还能抑制离体兔心耳、兴奋离体肠管（在离体豚鼠小肠上，8毫米≌组胺1微克，其作用可被苯海拉明或阿托品所阻断）、收缩兔耳血管等。甜菜碱无此作用，对兔耳血管则为扩张作用。甲醇、丙酮、乙酸乙酯等提取物亦有轻度降压作用。故枸杞子的上述作用为甜菜碱以外的成分所引起。

菊花：甘、苦，微寒。归肺、肝经。散风清热，平肝明目，清热解毒。用于风热感冒，头痛眩晕，目赤肿痛，眼目昏花，疮痈肿毒。

药理研究表明，菊花具有以下作用：

1.抗菌、抗病毒作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白喉杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌均有不同程度的抑制作用。2.具有清热、抗炎功能；3.抗氧化、提高机体免疫力，对超氧阴离子自由基有明显的清除作用。

熟地黄：甘，微温。归肝、肾经。补血滋肾，益精填髓。用于血虚萎黄，心悸怔仲，月经不调，崩漏下血，肝肾阴虚，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，内热消渴，眩晕，耳鸣，须发早白。

药理研究表明，熟地黄具有以下作用：

1．对骨髓造血系统的影响：熟地黄水煎剂给失血性贫血小鼠灌服每只0.5g，每日1次，连续10日，可促进贫血动物红细胞、血红蛋白的恢复，加快多能造血干细胞（CFU-S）、骨髓红系造血祖细胞（CFU-E）的增殖、分化作用医|学教育网搜集整理。

2．对血液凝固的影响：熟地黄能显著抑制肝脏出血性坏死灶及单纯性坏死。对高脂食物引起的高脂血症，脂肪肝及大鼠内毒素引起的肝静脉出血症，均有抑制血栓形成的作用。认为对纤溶酶原的激活作用，是抗血栓形成的作用机制。

3．对免疫系统的影响：熟地黄醇提取物给小鼠灌服，对受角叉菜胶抑制的巨噬细胞功能有明显的保护作用；对抗体形成细胞有抑制作用。4．对心血管系统的影响：酒熟地黄及蒸熟地黄都有显著的降压作用，收缩压和舒张压均显著下降。

4．抗氧化作用。

5．其他作用：用三碘甲状腺原氨酸（T3）给予大鼠造成阴虚模型并给予熟地黄水煎剂3ml(70%浓度)灌胃，共6日，对甲亢型阴虚大鼠的体重改变，24小时饮水量及尿量、血浆T3、甲状腺素（T4）及醛固酮（AD）浓度有显著改善，即T3浓度降低，T4浓度升高，并趋于正常，说明熟地黄不仅能改善阴虚症状，并能调节异常的甲状腺激素状态。

酒萸肉：酸 、涩 ，微温。归肝、肾经。补益肝肾，收涩固脱。用于眩晕耳鸣，腰膝酸痛，阳痿遗精 , 遗尿尿频，崩漏带下，大汗虚脱，内热消渴。

药理研究表明，酒萸肉具有以下作用：

1.对免疫系统的影响：

山茱萸不同组分对免疫系统影响不同：①水煎液→抑制非特异性面、细胞免疫，促进体液免疫。②山茱萸总苷、熊果酸→抑制细胞免疫，对器官移植产生的排斥反应有对抗作用。

2.对心血管系统的作用：①强心作用：可改善心功能，增加心肌收缩性、医学|教育网心输出量，提高心脏效率。②升高血压。

3.抗炎、抗菌：①抗炎，机理：与增强垂体-肾上腺皮质功能有关，对PGE合成释放无明显抑制作用。②山茱萸→表皮葡萄球菌有较强的抑制作用；对肠球菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等也有抑制作用。

4.抗应激、抗氧化、降血脂、抗动脉硬化。

牡丹皮：苦、辛，微寒。归心、肝、肾经。清热凉血，活血化瘀。用于热入营血，温毒发斑，吐血衄血，夜热早凉，无汗骨蒸，经闭痛经，跌打伤痛，痈肿疮毒。

药理研究表明，牡丹皮具有以下作用：

1.对心血管的影响：牡丹皮对麻醉犬心能增加冠脉血流量，减少心输出量，降低左室作功的作用。对实验性心肌缺血有明显保护作用，并且持续时间较长，同时降低心肌耗氧量。丹皮煎剂，去牡丹酚后的煎剂1.0-3.0g/kg或牡丹酚80-120mg/kg静脉注射，对麻醉犬和大鼠均有降压作用。原发和肾型高血压犬，用牡丹皮煎剂5g/kg灌胃，连续5天，于第6天，第7天剂量增至10g/kg，血压明显下降。肾型高血压犬，用去牡丹酚后的煎剂10g/kg灌胃，连续10天血压下降。用牡丹酚0.5-1.0g/kg给肾型高血压犬和大鼠也出现一定的降压效果。牡丹酚能显著抑制正常心肌细胞快相（5分钟）和慢相（120分钟）45Ca摄取及搏动频率，显著抑制钙反常心肌细胞45Ca摄取和降低胞内过氧化脂质含量，且呈剂量依赖性，表明牡丹酚减轻钙反常损伤与阻止Ca2+内流及抗氧化有关。牡丹酚磺酸钠除能抑制钙离子摄取外，且能显著抑制钙反常心肌细胞的45Ca摄取及其胞膜SA含量，与剂量呈相关关系。另用食饵性动脉粥样硬化模型，研究牡丹酚的抗动脉粥样硬化作用。结果造型加牡丹酚组主动脉内膜病变肉眼定级及形态学组化分析，均比造型对照组显著减轻。表明腹腔注射牡丹酚100mg/kg·d，连续6周能明显抑制动脉粥样硬化斑块形成。

2.对中枢神经系统的影响：丹皮酚对口服伤寒、副伤寒菌苗引起的小鼠发热有解热作用，并降低正常小鼠体温。口服丹皮酚能抑制腹腔注射醋酸所致小鼠扭体反应及鼠尾压痛反应，并能对抗咖啡因所致小鼠的运动亢进，能明显延长环己巴比妥钠所致小鼠睡眠时间，大剂量时可使小鼠翻正反射消失，能明显对抗戊四氮、士的宁、烟碱和电休克所致的惊厥。作用部位在中脑网状结构和丘脑。

3.抗炎作用：用丹皮酚灌胃，对大鼠因右旋糖酐或醋酸或角叉菜胶引起的足跖浮肿有抑制作用，并能抑制醋酸或5-羟色胺引起的小鼠腹腔或豚鼠皮肤毛细血管通透性增强，抑制小鼠应激性溃疡的发生。实验证明丹皮水煎剂对角叉菜胶性浮肿、佐剂性关节炎及Arthus反应等所致多种炎症反应具有抑制作用，这与其抑制炎症组织的通透性和抑制PGE2的生物合成有关，丹皮不能抑制残存肾上腺的代偿性增生，对肾上腺维生素C的代谢也无明显影响，提示它既无类可的松样的作用，也无类促肾上腺皮质激素样作用，即其抗炎作用不依赖于垂体肾上腺系统。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型变态反应是由特异性抗体介导的反应，丹皮对抗体的形成并无明显影响，但对之均有抑制作用，可能是通过非特异性抗炎机制发挥作用，而抑制血清补体活性，也就增强其抗炎效应。丹皮不抑制特异性抗体的产生，不影响补体旁路途径的溶血活性，提示牡丹皮在发挥抗炎作用的同时，不能抑制正常体液免疫功能。

4.抑菌作用：体外实验表明，牡丹皮煎剂对枯草杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、霍乱弧菌等均有较强的抗菌作用，牡丹叶煎剂对痢疾杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌有显著抗菌作用，其有效成份为没食子酸。鸡胚实验表明，牡丹皮煎剂对流感病毒有抑制作用，但小鼠治疗实验结果不一致，故其抗病毒效果尚不能肯定。对牡丹皮不同煎煮时间其水煎剂的抑菌成份对热稳定性关系进行探讨。提示牡丹皮经30分钟煎煮后体外抑菌能力明显优于煎剂时间为15分钟的水煎剂，而与煎煮时间为60、90分钟的水煎剂抑菌能力未见显著差异。

5.抗凝作用：体外对人血小板试验，发现牡丹皮水提物及芍药酚均能抑制血小板花生四烯酸产生血栓素A2，进而抑制血小板聚集，这是由于抑制从花生烯酸至前列腺H2的环氧化酶反应的结果。牡丹皮甲醇提取物有抑制内毒素所致实验性血栓的作用。研究表明，牡丹皮抗血栓形成的机理是：丹皮酚、苯甲酰芍药甙及苯甲酰氧化芍药甙抑制血小板凝聚，而丹皮酚、芍药甙、氧化芍药甙有抗调理素作用；苯甲酰芍药甙有阻断纤维蛋白溶酶原活化及抗纤维蛋白溶菌酶的作用；氧化芍药甙、苯甲酰氧化芍药甙，苯甲酰芍药甙对红的胞膜有较强的稳定作用，从而抑制血栓形成。用芍药甙给大鼠腹腔注射或在体外均能抑制ADP或胶原诱导的血小板聚集。

6.对免疫系统的影响：给小鼠分别灌胃牡丹皮，丹皮酚、芍药甙、氧化芍药甙、苯甲酰芍药甙，均能促进静脉注射的碳粒在血中的廓清速度，即使单核巨噬细胞系统功能处于低下状态也有促进作用，显微镜检查见肝中枯氏细胞及脾中巨噬细胞吞噬力增强。芍药甙、氧化芍药甙在体外亦能增强小鼠腹腔巨噬细胞对乳液的吞噬功能。丹皮液给小鼠腹腔注射能使其脾脏溶血后斑数增加。用丹皮酚给小鼠腹腔注射每大25mg/kg，连用6天，能使脾重明显增加，且可对抗考的松、环磷酰胺所致胸腺重量的减轻。由上可见牡丹皮对体液及细胞免疫均有增强作用。

7.对脂质代谢的影响：丹皮及其所含丹皮酚，芍药甙对肾上腺素所致的脂细胞的脂肪分解有抑制作用；丹皮水提物能增加脂细胞中葡萄糖生成脂肪，而且明显增加胰岛素所致的葡萄糖生成脂肪。

8.其他作用：用20%丹皮红藤灌入腹腔，对家兔损伤性腹腔粘连有显著预防效果。注入福氏佐剂引起的慢性关节炎鼠，在两个月内于大鼠皮下注射致炎剂酪蛋白，可引起关节炎性的足、尾的变性继续恶化，足、尾的皮下纤维化、骨增生，骨纤维症明显，腹部皮下组织中亦有结缔组织增殖，若在给予酶蛋白的同时连续喂饲牡丹皮或桂枝茯苓丸，则能抑制酶蛋白的新诱发损害。丹皮甲醇提取物体内对小鼠艾氏腹水癌细胞，子宫颈癌细胞均有抑制作用。丹皮酚对苯并芘在大鼠肝微粒体中的代谢有一定抑制作用，对小鼠有抗早孕作用，对大鼠有利尿作用。

山药：甘，平。归脾、肺、肾经。补脾养胃，生津益肺，补肾涩精。用于脾虚食少，久泻不止，肺虚咳喘，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴。麸炒山药补脾健胃。用于脾虚食少，泄泻便溏，白带过多。

药理研究表明，山药具有以下作用：

1.健脾益胃、助消化：山药含有淀粉酶、多酚氧化酶等物质，有利于脾胃消化吸收功能，是一味平补脾胃的药食两用之品。不论脾阳亏或胃阴虚，皆可食用。临床上常与胃肠饮同用治脾胃虚弱、食少体倦、泄泻等病症。

2.滋肾益精：山药含有多种营养素，有强健机体，滋肾益精的作用。大凡肾亏遗精，妇女白带多、小便频数等症，皆可服之。

茯苓：甘、淡、平。归心、肺、脾、肾经。利水渗湿，健脾，宁心。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠。

药理研究表明，茯苓具有以下作用：

1.利尿作用 ：茯苓利尿机转不明，而且复方较单味药作用明显。

2．镇静作用 ：茯苓煎剂对小鼠腹腔注射，可以抑制自发活动，并能对抗咖啡因所致小鼠兴奋过度，对巴比妥的麻醉有协同作用。

3．心血管系统 ：乙醇提取物使心肌收缩力加强，心率增加。

4．消化系统 ：茯苓对于四氯化碳所引起的小鼠肝损伤，有明显的保护作用。

5．抗肿瘤作用：茯苓多糖对小鼠肉瘤有抑制作用，其作用与胸腺有关，可激活局部补体。

（1）在体内具抗癌活性，并能促进人体的免疫功能；所含茯苓聚糖对肉瘤S-180的抑制效率可达96.88%。

（2）浸剂对正常兔作腹腔注射有利尿作用；乙醚或乙醇提取物能使离体蛙心收缩加强，对家兔血糖则先使升高而后降低。

（3）茯神煎剂对小鼠有镇静作用，茯苓的镇静作用次于茯神。

泽泻：甘、淡、寒。归肾、膀胱经。利水渗湿，泄热，化浊降脂。用于小便不利，水肿胀满，泄泻尿少，痰饮眩晕，热淋涩痛，高脂血症。

药理研究表明，泽泻具有以下作用：

1、利尿作用：4-乙酰泽泻醇 A、23-B 乙酰泽泻醇 B灌胃给药，能使大鼠尿液的钠含量增加，钾含量不变；泽泻醇 B 有增加尿量的倾向。泽泻利尿作用的强弱因采集季节、药用部位及炮制方法的不同而异。以冬季采集的泽泻利尿作用最强，大鼠皮下注射泽泻醇 B 显示尿量增加、钠排出增多，皮下注射泽泻醇 A、24 乙酸酯显示钠排出增加, 由此认为泽泻醇A、24 乙酸酯和泽泻醇B 是泽泻的利尿成分。用盐水负载的小鼠或大鼠做利尿实验，小鼠皮下注射泽泻醇 A 乙酸酯 100mg/kg 能增加尿液中 K+的分泌量，但口服同样剂量则无效。大鼠口服泽泻醇 A 乙酸酯或泽泻醇 B 30mg/kg 剂量时，明显增加 Na+的分泌量，与对照组比较差别明显（P＜0.05 或0.01）。

2、降血糖、血脂及抗动脉粥样硬化作用:泽泻水提物和醇提物能明显降低肥胖小鼠血清总胆固醇 (TC)和甘油三酯（TG），升高高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）的浓度[10]。其水提醇沉物（RAE）具有明显的降血糖和降血

脂作用，并能保护胰岛组织免受损伤，RAE 降低血糖作用与促进胰岛素的释放有关[11]。另外，泽泻提取物也有抗血小板聚集、抗血栓形成及增强纤溶酶活性等作用。能从降低血脂、抑制内皮细胞损伤、抗血栓等多方面抑制或减轻动脉粥样硬化的发生、发展。醋酸乙酯提取物每日口服1g/kg，对饲以普通饲料的正常大鼠亦有明显的降胆固醇作用。用同位表标记法证明，泽泻醇A 有抑制小鼠小肠酯化胆固醇的能力，并可使胆固醇在大鼠小肠内的吸收率降低 34%，但不影响亚油酸的吸收。

3、抗肾结石形成作用:泽泻水提取物在人工尿液中能有效地抑制草酸钙结晶体的生长和自发性结晶，并随着人工尿液离子强度降低和 pH 值升高，抑制活性逐渐增强。泽泻水提取液体外能抑制草酸钙结晶生长和聚集。近年研究表明，泽泻醋酸乙酯提取物能通过抑制肾组织内草酸钙晶体的形成和减少肾间琢胰蛋白酶抑制物的表达与抑制肾骨蛋白的表达来抑制尿结石的形成。对醋酸乙酯提取物的进一步研究显示，有 1 个四环三萜化合物对草酸钙晶体生长抑制作用最强，呈时间、剂量依赖性，可能是泽泻抑制尿草酸钙结石形成的活性成分。

4、抗肾炎活性:使用免疫复合物（IC）肾炎大鼠对泽泻的抗肾炎活性进行药理学研究,发现甲醇热提取物具有：（1）抑制尿蛋白排泄量。（2）抑制肾小球细胞浸润、肾小管变性及再生。（3）抑制 IC 肾炎大鼠各种并发症的发生，如颈动脉血压升高，血中胆固醇及尿素氮含量升高，红细胞及血红蛋白含量减少，凝血机制亢进及纤溶功能低下等。表明泽泻对水代谢异常疾患的作用机制之一是与抗肾炎活性有关。

5、对神经内分泌的影响:观蔡了以泽泻为主药的更年安怡片对去卵巢大鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响。以去卵巢大鼠模型模拟更年期卵巢功能减退，观察更年安怡片大、中、小剂量（0.6g/ml，0.3g/ mL，0.15g/ml）对自主神经功能调节作用。结果显示，去卵巢大鼠与正常对照组相比，脑组织中 5-经色胺（5-HT），5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的含量及5-HT/NE（去甲肾上腺素）的比值均显著升高. NE 含量及 HIAA/5-HT 比值各组间无显著性差异,更年安怡片大、中剂量可使升高的5-HT,5-HIAA 的含量及 5-HT/NE 比值下降，说明去卵巢后，大鼠下丘脑自主神经递质发生了变化，更年安怡片能有效调整自主神经递质的含量，使其达到平衡。

6、抗脂肪肝作用:泽泻经甲醇、苯和丙酮提取的组分对各种原因引起的动物脂肪肝有良好效应,对低蛋白饮食、乙基硫氨酸所致脂肪肝有不同程度的抑制作用,对 CCl4 所致急性肝损害亦显示保护作用,能抑制肝内脂肪堆积，改善肝功能。研究还发现，泽泻中的胆碱、卵磷脂等成分亦有一定抗脂肪肝作用。泽泻醇 A 乙酸酯、泽泻醇 B 乙酸酯和泽泻醇C 乙酸酯可保护因四氯化碳中毒的小鼠肝脏，其中以泽泻醇 C 乙酸酯效果最好。

7、对心血管系统的作用:实验表明，泽泻醇提物的水溶性部分能显著增加冠脉流量，对心率无明显影响，对心肌收缩力呈轻度的抑制作用。体外实验发现泽泻对正常和肝硬变大鼠具有明显的血管扩张作用。这可能是通过血管内皮细胞增加前列环素（PGI2）和一氧化碳（NO）的释放而发挥扩血管作用[16]，该作用具有血管内皮依赖性；但实验表明，还存在其他扩血管机制。

8、免疫调节作用:泽泻的多种活性成分具有增强网状内皮系统活性和抗补体活性,抑制脂多糖激活的巨噬细胞产生 NO 和抗过敏等免疫调节作用。

由上述可知，本发明是将含有糖分及质地粘软类中药利用冷冻粉碎技术加工制备而成，经试验测定，与原工艺生产的杞菊地黄丸，在有效成分的溶出和样品的均匀度方面均有实质性的改进和提高，以高效液相法测定杞菊地黄丸中莫诺苷和马钱苷总量作为有效成分溶出和均匀度考察的指标，其试验数据如下：

由以上检验数据得出，本发明利用冷冻粉碎技术生产的杞菊地黄丸在含量溶出度及含量均匀度方面均优于常规粉碎技术生产的杞菊地黄丸，药物有效成分的充分溶出必然提高药品的临床疗效，有实际的生产和临床意义，冷冻粉碎技术的应用必将带来巨大的经济效益和良好的社会效益。

Claims (5)

1.一种利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，其特征在于，由重量百分比计的：枸杞子5～9%、菊花5～9%、熟地黄25～30%、酒萸肉10～15%、牡丹皮8～12%、山药10～15%、茯苓8～12%和泽泻8～12%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-30～-35℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-70℃～-90℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，于115～120℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加水，灭菌极细粉与水的重量比为1：0.5～1.5，制成水丸；或取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜35～50g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：2.5～3.0，制成水蜜丸；或取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜80～110g，制成大蜜丸，即得。

2.根据权利要求1所述的利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，其特征在于，由重量百分比计的：枸杞子9%、菊花9%、熟地黄29%、酒萸肉15%、牡丹皮12%、山药10%、茯苓8%和泽泻8%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-30℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-70℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于120℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加水，灭菌极细粉与水的重量比为1：0.5～1.5，制成水丸，即得。

3.根据权利要求1所述的利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，其特征在于，由重量百分比计的：枸杞子5%、菊花5%、熟地黄30%、酒萸肉15%、牡丹皮8%、山药13%、茯苓12%和泽泻12%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-32℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-75℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于115℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜35g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：2.5，制成水蜜丸。

4.根据权利要求1所述的利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，其特征在于，由重量百分比计的：枸杞子8%、菊花7%、熟地黄25%、酒萸肉10%、牡丹皮11%、山药15%、茯苓12%和泽泻12%，总量100%作原料药制成，制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-35℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-80℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于118℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜110g，制成大蜜丸，即得。

5.根据权利要求1所述的利用冷冻粉碎技术生产杞菊地黄丸的制备方法，其特征在于，由重量计的：枸杞子400g、菊花400g、熟地黄1600g、酒萸肉800g、牡丹皮600g、山药800g、茯苓600g和泽泻600g作原料药制成，制备步骤如下：

制备步骤如下：

（1）取枸杞子、酒萸肉和熟地黄三味原料药放入液氮冷冻粉碎间，在-33℃的温度下冻结15分钟，放进冷冻粉碎机，在-85℃的低温状态下粉碎成过75µm孔径筛的极细粉；

（2）取菊花、牡丹皮、山药、茯苓和泽泻，放在常温粉碎机中粉碎成过75µm孔径筛的极细混合粉；

（3）将极细粉和极细混合粉装入筒式混合机内混合30分钟后，置流通蒸汽灭菌器内，于116℃温度下灭菌30分钟，放凉，得灭菌极细粉；

（4）取灭菌极细粉加炼蜜，每100g灭菌极细粉用炼蜜50g，再加水，炼蜜和水的重量比为1：3.0，制成水蜜丸,即得。