CN103830538A - 一种治疗脑血栓的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，特别涉及一种治疗脑血栓的中药组合物及其制备方法。针对目前脑血栓的化学治疗药物肝毒性较大，疗效不佳的现有技术不足，本发明的提供一种治疗或预防脑血栓的中药组合物，其包括如下组分：桃仁10-50份，羌活10-20份，槐花5-20份，徐长卿5-15份，熟地5-10份，百合5-15份，金银花5-15份，丹参1-10份，枸杞5-15份，茯苓9-15份，川芎9-15份，白芷5-15份，黄连素0.2-9份，白芍5.5-15份，红景天6-9份，甘草10-15份。该中药组合物在治疗或预防脑血栓方面均具有很好的治疗效果，且药物副作用低，具有显著的临床推广价值。

Description

一种治疗脑血栓的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗脑血栓的中药组合物及其制备方法。 

背景技术

脑血管病又称脑卒中，是由各种病因使供应脑部血液的血管发生病变所致的一种神经系统疾病。其主要病因为脑动脉系统病损( 如脑动脉硬化) 等原因导致的脑动脉管腔狭窄、血管痉挛、闭塞或破裂、血流减少或完全阻塞，脑部血液循环和功能障碍，脑组织受损而发生的一系列症状。主要包括缺血性和出血性脑血管病。其中(ICVD，又称缺血性卒中)占80％左右。 

缺血性脑血管病是指局部脑组织包括神经细胞、胶质细胞及联系纤维由于供血障碍发生的变性、坏死或一过性的功能丧失。血管内血栓形成、栓塞、血管狭窄导致的脑动脉阻塞是缺血性脑卒中的主要原因。缺血引起脑神经细胞损伤和死亡的作用机制多样、复杂，缺血性脑卒中( 即脑缺血) 后，由于脑部缺乏血液和氧气的供应，导致大脑能量代谢失衡，产生一系列病理性损伤，如氧化应激、兴奋性氨基酸毒性、钙超载、炎症反应等，从而导致神经元的大量死亡。它是临床上的常见病、多发病，死亡率及致残率很高，现已经成为世界公认的三大致死疾病之一。临床上治疗主要是溶栓、挽救缺血区域( 半暗带) 的濒临死亡的神经元和促进损伤后神经功能的恢复。防治缺血性脑血管疾病是目前人类迫切需要解决的医学难题。目前美国FDA 仅批准了组织纤溶酶原活化因子(tPA) 用于中风后的溶栓治疗，但其治疗时间窗很窄，只有在中风4.5 小时内使用才有效；而且还存在出血以及缺血再灌加重脑损伤的危险性。而目前针对缺血性中风治疗的神经保护药包括钙通道阻断剂如尼莫地平、谷氨酸受体拮抗剂如地佐环平(dizocilPine)、抗氧化剂或自由基清除剂如依达拉奉、NO 信号传导通路调节剂芦贝鲁哩(Iubeluzole) 以及炎症抑制剂恩莫单抗(enlimomab) 等。但它们中有的治疗作用不确切或特异性不强，有的毒副作用较大、耐受性小，有的还处于临床前或临床研究阶段，很难在防治缺血性脑卒中发挥积极影响。因而，研发出快速有效、安全稳定的防治脑缺血药物迫在眉睫。在此领域中医药发挥了不可忽视的积极作用。 

纵观世界新药的研究方向，80年代以前主要是研究开发单一的化学药物及其制剂，80年代以后开始发展生物技术和天然植物药物，药物研究方向趋于多样性。结合现代中医药发展理论，从提高药物疗效、降低副作用的角度出发，经过对中药成分进行筛选提取和/或配伍制得的制剂，其副作用小，安全性高，具有化学合成药不能比拟的优势。 

发明内容

现有技术中化学药物治标不治本，且容易损伤胃肠道粘膜，药物毒副作用大，而中药则存在疗效不确定，缺少相应药物制剂。为了克服现有脑血栓化学治疗药物毒副作用大，脑血栓治疗效果难以持续的现有技术不足，本发明提供了一种治疗脑血栓的中药组合物，该中药组合物疗效好，副作用小，它主要由以下原料制得：桃仁10-50份，羌活10-20份，槐花5-20份，徐长卿5-15份，熟地 5-10份，百合5-15份，金银花5-15份，丹参 1-10份，枸杞5-15份，茯苓 9-15份，川芎9-15份，白芷5-15份，黄连素0.2-9份，白芍5.5-15份，红景天6-9份，甘草10-15份。 

桃仁具有活血祛瘀，润肠通便，止咳平喘的功效。临床用于经闭，痛经，癓瘕痞块，跌扑损伤，肠燥便秘等症。桃仁中富含多种化学成分，富含苦杏仁苷、苦杏仁酶、挥发油、脂肪油，油中主要含有油酸甘油酯和少量亚油酸甘油酯。现代药理学研究显示，桃仁提取液能明显增加脑血流量，增加犬股动脉的血流量，降低血管阻力，改善血流动力学状况。提取物能改善动物的肝脏表面微循环，并促进胆汁分泌。桃仁可使小鼠的出血及凝血时间明显延长，煎剂对体外血栓有抑制作用，水煎液有纤维促进作用。桃仁中含45%的脂肪油可润滑肠道，利于排便。桃仁能促进初产妇子宫收缩及出血。水煎剂及提取物有镇痛、抗炎、抗菌、抗过敏作用。桃仁中的苦杏仁苷有镇咳平喘及抗肝纤维化的作用。 

羌活为常用中药。药用历史悠久，始见于《神农本草经》，列 于独活项下。羌活味苦、辛、性温。具有散表寒去风湿，利关节之功效。治外感风寒、头痛无汗、风寒湿痹、项强筋急、骨节酸痛、风水浮 肿、痛肿疮毒等。现代分析表明，羌活主要含有菠烯，拧橡烯，话品烯醇和乙酸龙胆脑醋等成分。临床用于阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治白癜风，斑秃。解表散寒，祛风胜湿，止痛等症。现代药理学研究羌活具有显著的解热抗炎以及阵痛效果。 

槐花又叫槐蕊，槐花的功效：凉血止血、清肝明目，槐花的的作用：治肠风便血、痔疮下血、尿血血淋、肝热头痛、目赤肿痛，槐花用药禁忌：脾胃虚寒者慎服槐花，槐花可以煎水代茶饮，槐花亦可与夏枯草、菊花、徐长卿等同用，以增清肝泻火明目之效。临床主治：肠风便血；痔疮下血；血痢；尿血；血淋；崩漏；吐血；衄血；肝热头痛；目赤肿痛；痈肿疮疡。 

徐长卿，主治:镇痛，止咳，利水消肿，活血解毒。治胃痛，牙痛，风湿疼痛，经期腹痛，慢性气管炎，腹水，水肿，痢疾，肠炎，跌打损伤，湿疹，荨麻疹，毒蛇咬伤。1、用于风湿痹痛、腰痛、跌打损伤疼痛、脘腹痛、牙痛等各种痛症。徐长卿有较好的祛风止痛作用，广泛地用于风湿、寒凝、气滞、血瘀所致的各种痛症。近年来也用于手术后疼痛及癌肿疼痛，有一定的止痛作用。可单味应用，或随证配伍有关的药物。2、用湿疹、风疹块、顽癣等皮肤病。本品有祛风止痒作用。可单用内服或煎汤外洗，亦可配伍苦参、地肤子、白鲜皮等清利湿热的药物。此外，本品还能解蛇毒，治毒蛇咬伤。可与半边莲同用内服或外用。 

熟地为玄参科植物地黄的块根，又名熟地黄或伏地，经加工炮制而成。熟地是一种上好中药材，具有补血滋阴功效，可用于血虚萎黄，眩晕，心悸失眠，月经不调，崩漏等症，亦可用于肾阴不足的潮热骨蒸、盗汗、遗精、消渴等症，是虚证类非处方药药品六味地黄丸主要成分之一。 熟地黄始见于《神农本草经》，临床使用有鲜、生、熟三种。均有养阴生津之功，而治阴虚津亏诸证。鲜地黄甘苦大寒，滋阴之力虽弱，但长于清热凉血，泻火除烦，多用于血热邪盛，阴虚津亏证；生（干）地黄甘寒质润凉血之力稍逊但长于养心肾之阴，故血热阴伤及阴虚发热者宜之；熟地黄性味甘温，入肝肾而功专养血滋阴，填精益髓，凡真阴不足，精髓亏虚者，皆可用之。熟地用于肾阳不足，命门火衰，畏寒肢冷，阳痿遗精，小便遗沥，或火不生土之食少便溏，多与附子、肉桂等温阳之品配用，此即所谓“善补阳者，必于阴中求阳”之意。用治阴疽寒凝，本品常与鹿角胶、肉桂、麻黄等配用以温经养血，散寒通脉。 

中医认为百合具有润肺止咳、清心安神的作用，尤其是鲜百合更甘甜味美。百合特别适合养肺、养胃的人食用，比如慢性咳嗽、肺结核、口舌生疮、口干、口臭的患者。百合不仅具有良好的营养滋补功效，而且对于病后虚症、结核病、神经官能症等患者大有裨益，对各种癌症都有较好的疗效。在肿瘤的预防和治疗方面，百合多用于治疗肺癌、鼻咽癌、皮肤癌等。在对上述癌症进行放射治疗后出现的体虚乏力、口干、心烦、干咳痰等症状时，用鲜百合与粳米一起煮粥，再调入适量的冰糖或蜂蜜后食用，对增强体质、抑制癌细胞生长、缓解放疗的反应，具有较好的效果。再如，将鲜百合与白糖适量共捣敷患处，对皮肤癌破溃出血、渗水者也有一定的治疗作用。 

金银花性寒，味甘，入肺、心、胃经，具有清热解毒、抗炎、补虚疗风的功效，主治胀满下疾、温病发热，热毒痈疡和肿瘤等症。其对于头昏头晕、口干作渴、多汗烦闷、肠胃炎、菌痢、麻疹、肺炎、乙脑、流脑、急性乳腺炎、败血症、阑尾炎、皮肤感染、痈疽疔疮、丹毒、腮腺炎、化脓性扁桃体炎等病症均有一定疗效。同时金银花茶有独特的减肥功能，还能抑制与杀灭咽喉部的病原菌，对老人和儿童有抗感染功效。所以，经常服用金银花浸泡或煎剂有利于风火目赤、咽喉肿痛、肥胖症、肝热症和肝热型高血压的治疗与康复。 

丹参又名赤参，紫丹参，红根等。为双子叶植物唇形科，干燥根及根茎。具有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神的功效。现代药理学研究中丹参用于抗肝纤维化治疗研究较多。其机制可能为：①改善肝内微循环、保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死；②增强网状内皮细胞的吞噬作用；③增强调理素活性，提高纤维蛋白连接水平，减轻肝细胞损伤；④抑制脂质过氧化物，减少氧自由基对肝细胞损害。以上机制可保护肝细胞，减少肝细胞损伤、坏死等对星状细胞的刺激，抑制肝纤维化的启动和发展;肝内胶原蛋白含量明显降低，尿HPP排出量升高，提示该药可促进已形成的胶原降解，增生的胶原重新被水解吸收。 

枸杞（学名：Lycium chinense）是茄科枸杞属的多分枝灌木植物，高0.5-1米，栽培时可达2米多。国内外均有分布。枸杞全身是宝，明李时珍《本草纲目》记载：“春采枸杞叶，名天精草；夏采花，名长生草；秋采子，名枸杞子；冬采根，名地骨皮”。枸杞嫩叶亦称枸杞头，可食用或作枸杞茶。现代研究，枸杞子有降低血糖、 抗脂肪肝作用，并能抗动脉粥样硬化的效果。 

茯苓，俗称云苓、松苓、茯灵，为寄生在松树根上的菌类植物，形状像甘薯，外皮黑褐色，里面白色或粉红色。古人称茯苓为“四时神药”，因为它功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、温、风、湿诸疾，都能发挥其独特功效。茯苓味甘、淡、性平，入药具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功用。现代医学研究：茯苓能增强机体免疫功能，茯苓多糖有明显的抗肿瘤及保肝脏作用。 

川芎辛温香燥，走而不守，既能行散，上行可达巅顶；又入血分，下行可达血海。活血祛瘀作用广泛，适宜瘀血阻滞各种病症；祛风止痛，效用甚佳，可治头风头痛、风湿痹痛等症。 昔人谓川芎为血中之气药，殆言其寓辛散、解郁、通达、止痛等功能。 本品辛温升散，凡阴虚阳亢及肝阳上亢者不宜应用；月经过多、孕妇亦忌用。 

白芷，性温，味辛微甘，具有祛风除湿；通窃止痛；消肿排脓的功效。主感冒头痛；眉棱骨痛；牙痛；鼻塞；鼻渊；湿胜久泻；妇女白带；痈疽疮疡；毒蛇咬伤。临床用于感冒头痛，眉棱骨痛，鼻塞，鼻渊，牙痛，白带，疮疡肿痛。也可用于解表散寒，祛风止痛，通鼻窍，燥湿止带，消肿排脓。治头痛，眉棱骨痛，齿痛，鼻渊，寒湿腹痛，肠风痔漏，赤白带下，痈疽疮疡，皮肤燥痒，疥癣。苍术具有燥湿健脾，祛风散寒，明目的功效，用于湿阻脾胃、脘腹胀满，寒湿白带，湿温病以及湿热下注、脚膝肿痛、痿软无力。治湿阻脾胃，而见脘腹胀满、食欲不振、倦怠乏力、舌苔白腻厚浊等症，常与厚朴、陈皮等配伍应用。 

黄连素在临床中一直作为非处方药用于治疗腹泻，但是现代药理学研究证实黄连素具有显著的抗心力衰竭、抗心律失常、降低胆固醇、抗制血管平滑肌增殖、改善胰岛素抵抗、抗血小板、抗炎等作用，因而在心血管系统和神经系统疾病方面将可能有广泛、重要的应用前景，日益受到重视。黄连素是一种重要的生物碱，是我国应用很久的中药。可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取。它具有显著的抑菌作用。常用的盐酸黄连素又叫盐酸小檗碱。黄连素能对抗病原微生物，对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌及白喉杆菌等都有抑制作用，其中对痢疾杆菌作用最强，常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。临床主要用于治疗细菌性痢疾和肠胃炎，它无抗药性和副作用。 

白芍为我国著名的传统常用中药材，应用历史悠久，芍药始载于东汉《神农本草经》，列为中品，记有“主邪气，白芍腹痛，除血痹，破坚积，寒热疝瘕，止痛，利小便，益气”。养血柔肝，缓中止痛，敛阴收汗。治胸腹胁肋疼痛，泻痢腹痛，自汗盗汗，阴虚发热，月经不调，崩漏，带下等症。现代药理学研究显示，芍药甙对豚鼠、大鼠的离体肠管和在胃运动，以及大鼠子宫平滑机均表现抑制，并能拮抗催产素所引起的收缩;用醋酸注射于小鼠腹腔，以扭体反应作为疼痛的指标，芍药甙有显著的镇痛效果;芍药的浸膏能拮抗士的宁所引起的惊厥;白芍煎剂在试管内对志贺氏痢疾杆菌有抑菌作用，浸剂对某些致病性真菌亦有抑制作用。芍药甙对小白鼠正常体温有降温作用，对人工发热的小鼠也有解热作用。对大鼠实验性后足跖浮肿有抗炎作用；芍药甙在试管内或静脉注射时对二磷酸腺苷诱导的大鼠血小板聚集有抑制作用；芍药甙对由于紧张剌激而诱发的大鼠消化道溃疡有明显的抑制作用。 

红景天为景天科植物大花红景天的干燥根和根茎，红景天的功效与作用是能补肾，理气养血，有活血止血、清肺止咳、解热，并止带下的功效，红景天的副作用暂时没有发现。 其性味甘，苦，平，归肺、心经，具有益气活血，通脉平喘功效，主治用于气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘。《现代实用本草》言其作用有七，即“一、中枢抑制作用。二、抗疲劳作用。三、强心作用。四、抗炎作用。五、抑制血糖升高作用。六、抗过氧化作用。七、抗微波辐射作用”。 

本发明中药组合物在中药组分选择上以除积痹、散风寒、祛风湿、强筋骨为主要标准，本发明中药组合物组合后具有显著的抗炎、镇痛和活血化淤效果。本发明对上述诸味中药的重量份数进行了优选，优选的条件是中西药配伍使用后药物对脑血栓治疗效果的增强。作为本发明的一个优选实施例，本发明中药组合物主要由以下重量份的原料制得：桃仁30份，羌活15份，槐花15份，徐长卿10份，熟地8份，百合10份，金银花10份，丹参6份，枸杞10份，茯苓12份，川芎12份，白芷10份，黄连素5.5份，白芍10份，红景天8份，甘草12份。 

优选地，本发明的中药组合物还进一步含有香橼5份，远志9份。香橼又名枸橼，为芸香科柑橘属植物，香橼味辛、微苦、酸，性温；归肝、肺、脾经；气香行散，可升可降；具有疏肝理气，宽胸化痰，除湿和中的效果，主治胸胁胀痛，咳嗽痰多，脘腹痞痛，食滞呕逆，水肿脚气。远志为常用中药，最早记载于《神农本草经》，列为上品，并被视为养命要药，性温，味苦、辛，具有安神益智、祛痰、消肿的功能，用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸，神志恍惚，咳痰不爽，疮疡肿毒，乳房肿痛。 

为了更好地表达本发明的中药组合物，本发明的中药组合物可以制备成临床上常用的剂型。比如，粉状制剂、散剂、丸剂、丹剂、膏剂、颗粒剂、口服液、糖浆、片剂、胶囊剂等制剂。优选地，本发明中药组合物按照常规制备工艺制备成散剂、水剂、片剂或胶囊剂。 

本发明还提供了一种上述所述中药组合物的制备方法，其主要包含下述步骤：取处方量上述中药材碎成粗粉，按照粗粉总重量的4-9倍加入体积浓度为40%-95%的乙醇溶液，回流提取三次，回流时间为2-5h，滤过，滤液回收乙醇，冷却过滤，用水洗涤，干燥后即得中药浸膏；将其粉碎制成干膏粉后加入处方量的黄连素和丹参即可得到本发明中药组合物。本领域技术人员可在该制备方法技术上制备得到临床上常用中药药物剂型，如片剂、胶囊剂等。 

本发明还请求保护上述中药组合物在制备治疗脑血栓药物中的用途。本发明药物组合物在治疗脑血栓时，显示出显著的抗炎镇痛、活血化淤活性。本发明药效实施例19显示，与模型组比较，本发明中药组合物低中高三个剂量组均可以显著降低二甲苯所致小鼠的耳肿胀值（P＜0.01），表明本发明中药组合物具有显著抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀的作用，且其对耳肿胀的降低效果存在显著的量效关系。同样实验条件下，阳性对照药血栓通胶囊组也显著降低耳肿胀值（P＜0.05），但其抗炎效果明显不及本发明中药组合物。本发明本发明药效实施例20显示，模型组与正常对照比较，全血低切指数、红细胞聚集指数、卡松粘度和血浆粘度均有显著增高（P＜0.05）。与模型组比较，本发明中药组合物低、中、高各个剂量组均显著或极显著地降低了全血低切指数、红细胞聚集指数、卡松粘度和血浆粘度，降低幅度存在量效关系，其中高剂量有显著差异（P＜0.05）。同样实验条件下，阳性对照药天欣泰心脉宁片组也降低了全血高切指数、全血低切指数、红细胞聚集指数，但其对血液流变学指数的改善效果均不及本发明中药组合物。 

总之，本发明药物组合物在治疗脑血栓方面，与现有技术相比具有如下优势： 

1）与阳性对照药天欣泰心脉宁片或血栓通胶囊相比，本发明药物组合物中药物成分不仅在抗炎和镇痛方面更为显著，而且在活血化淤方面也显著优于阳性药物，这表明本发明组合物在脑血栓治疗中具有显著的协同作用，不仅能够显著改善脑血栓的症状，还能延缓脑血栓的发展，有助于脑血栓患者的痊愈过程；

2）与当前治疗脑血栓的化学治疗药物相比，本发明中药组合物为天然纯中药制剂，不良反应和副作用显著降低，特别是其对于肠道黏膜不产生任何破坏作用，且本发明中药组合物作用全面，药物治疗效果更佳，显著提高了脑血栓患者的用药依从性，并提高了患者的生活质量；

3）现有的抗生素药物在脑血栓初期治疗效果尚可，但随着治疗时间的延长均出现明显的药物耐受问题，其对于脑血栓的治疗效果下降；本发明中药组合物中含有多种药物组分，作用靶点众多，有效地解决了脑血栓治疗药物的耐受问题，其对脑血栓的治疗效果不因治疗时间延长而下降。

具体实施方式

以下通过具体实施例进一步描述本发明，本发明不仅仅限于以下实施例。在本发明的范围内或者在不脱离本发明的内容、精神和范围内，对本发明进行的变更、组合或替换，对于本领域的技术人员来说是显而易见的，且包含在本发明的范围之内。 

第一部分本发明中药组合物制剂、制备及其使用方法

实施例1-6 中药组合物散剂

表1 本发明中药组合物散剂处方

实施例1制备方法：取组合物中各药材，按照常规工艺研磨成粉状，过100目筛，小火烘干备用，加入处方量的黄连素和丹参即得散剂。使用时，用水溶解后直接冲服。实施例2-6制备方法同实施例1。

实施例7-12 中药组合物水剂

表2 本发明中药组合物水剂处方

实施例7制备方法：取处方中各药材，按照常规中药煎煮工艺操作，滤除药渣后加入处方量的黄连素和丹参即得。该水剂（或称汤剂）用于脑血栓治疗时，每日服用2-3次。实施例8-12制备方法和使用方法同实施例7。

实施例13-18 本发明中药组合物片剂/胶囊剂

表3 本发明中药组合物片剂/胶囊剂处方

实施例13制备工艺：取处方量的各中药材粉碎成粗粉，按照粗粉总重量的5倍加入体积浓度为80%的乙醇溶液，回流提取三次，回流时间每次3h，滤过，滤液回收乙醇，冷却过滤，用水洗涤，干燥后即得中药浸膏；将中药浸膏经干燥、粉碎制成干膏粉，向干膏粉中加入处方量的黄连素和丹参，再加入常规辅料成分利用现有技术制备成片剂或胶囊剂。

实施例14-18制备工艺同实施例13。 

第二部分本发明中药组合物药效学研究

实施例19 本发明中药组合物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

取健康ICR小鼠72只，♀♂各半，分6组，12只/组，即模型组、天欣泰心脉宁片（海南三叶制药厂有限公司，下同）、血栓通胶囊组（海口康力元制药有限公司）、本发明中药组合物（按实施例1所述中药组合物处方和制备工艺制得）低剂量组、中剂量组和高剂量组。每只ig给药1次/d；给药14 d，末次药后60 min，小鼠右耳均匀涂抹二甲苯0.03 mL/只致肿，2h后剪下双耳打耳片称重，计算耳肿胀值(mg)。肿胀值=右耳重量- 左耳重量。

结果显示，与模型组比较，本发明中药组合物低中高三个剂量组均可以显著降低二甲苯所致小鼠的耳肿胀值（P＜0.01），表明本发明中药组合物具有显著抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀的作用，且其对耳肿胀的降低效果存在显著的量效关系。同样实验条件下，阳性对照药血栓通胶囊组也显著降低耳肿胀值（P＜0.05），但其抗炎效果明显不及本发明中药组合物。 

表4  本发明中药组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（

）

注：与模型组比较，*P＜0.05，** P＜0.01。

实施例20本发明中药组合物对大鼠血瘀模型的改善作用

取健康SD大鼠，体重180-200g，70只，雌雄各半，按体重随机分为7组：正常对照组、模型组、天欣泰心脉宁片组、血栓通胶囊组、以及本发明中药组合物（按实施例1所述中药组合物处方和制备工艺制得）低、中、高组，每组10只。灌胃给药，连续给药14天，正常对照组和模型组给0.5%CMC，其余给对应的药物，给药剂量如表14所示。给药第13天、14天，除正常对照组外，其余组动物按1mg/Kg皮下注射盐酸肾上腺素，2次/天，间隔4h，第一次注射后2h将动物放进4℃冰水中15min。给药第15天取4-5ml血肝素抗凝测定血液流变学参数，取肝脏称重折算脏器系数。

结果显示，模型组与正常对照比较，全血低切指数、红细胞聚集指数、卡松粘度和血浆粘度均有显著增高（P＜0.05）。与模型组比较，本发明中药组合物低、中、高各个剂量组均显著或极显著地降低了全血低切指数、红细胞聚集指数、卡松粘度和血浆粘度，降低幅度存在量效关系，其中高剂量有显著差异（P＜0.05）。同样实验条件下，阳性对照药天欣泰心脉宁片组和血栓通胶囊组也降低了全血高切指数、全血低切指数、红细胞聚集指数，但其对血液流变学指数的改善效果均不及本发明中药组合物。肝脏指数的结果统计显示，模型组与正常对照比较，肝脏指数显著增高。而与模型组比较，本发明中药组合物低、中、高各个剂量组显著降低了肝脏指数（P＜0.01），阳性对照药天欣泰心脉宁片和本发明中药组合物本发明中药组合物高剂量组能够显著的降低肝脏指数（P＜0.05），但效果不及本发明中药组合物。 

表5 本发明中药组合物对大鼠血瘀模型血流变的影响（）

注：与正常对照比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，** P＜0.01。

实验例21：本发明中药组合物对RHRSP 脑血栓后血脑屏障(BBB) 通透性的影响 

1 试验方法

2.1.1 动物模型的制备：

取2 -3 个月龄、体重(100±20)g 的雄性SD 大鼠用双肾双夹法狭窄肾动脉建立RHRSP 模型：大鼠腹腔麻醉，经剑突下腹正中纵行约5cm 长切口，切开皮肤、腹肌，钝性分离双侧肾动脉，用内径为0.3mm 的环形银夹分别夹住双侧肾动脉起始部。于手术前测血压一次，手术后每周测一次，连续12 周。另取10 只体重相当的SD 大鼠，测其血压作为正常对照。剔除：手术中及术后死亡，术后12 周血压低于160mmHg 大鼠，有卒中症状及体征、解剖见左基底节区小的软化灶及蛛网膜下腔出血的大鼠。16周后血压≥160mmHg、且无脑卒中症状的RHRSP 为成功模型。将制备成功的RHRSP 用光化学方法造成大脑中动脉闭塞(MCAO) 模型致大脑中动脉(MCA) 血栓形成：2％戊巴比妥钠按40mg/kg 体重腹腔注射麻醉后，经左颞侧入路，在颧弓和颞骨鳞部结合处前下方1mm 处，用牙科钻钻一直径为5mm 的骨窗，透过硬脑膜可清楚看到左MCA 主干及其分支。经股静脉按40mg/kg 体重的剂量注射2.5％虎红，5min 后用YAG 激光仪发生的532nm 的绿色激光束(光斑直径2mm，光照强度0.37W) 持续照射MCA 主干15min，可见该MCA 远端及各分支血流中断，并在手术显微镜下见局部白色血栓提示该MCA 血栓形成、MCAO 模型复制成功。术中大鼠肛温保持在(37±0.3)℃。局部伤口缝合前用青霉素稀释液冲洗，术后常规肌注青霉素8 万U/只。剔除术中及术后1d 死亡的以及出血多或手术显微镜下未明确供血是否中断的大鼠。

将动物随机分6组：假手术组、模型对照组、本发明中药组合物高、中、低剂量组、尼莫地平组。假手术组仅开骨窗，不作激光照射；模型手术成功后的4.5h，各组分别尾静脉注射本发明中药组合物40mg/kg、20mg/kg、10mg/kg，尼莫地平20mg/kg ；假手术组和模型组尾静脉注射同体积的生理盐水。各组大鼠分别分批于MCAO 术后( 即脑血栓缺血后)6h、12h、24h 处死取脑组织标本，并于处死前1h 尾静脉注射2％伊文思蓝(EvansBlue，EB) 生理盐水溶液2ml/kg 体重，待充分循环后，深麻动物，剖胸经心脏灌注生理盐水冲洗血管内染料，断头取脑。 

各组随机抽取3 只大鼠的脑组织，立即冰冻切片，连续行厚约30um 的冠状切片，用70％甘油PBS 缓冲液(pH8.5-9.0) 封片，于Bio-Rad Radiance2100 激光扫描共聚焦显微镜下观察脑组织中EB 的渗出情况，观察BBB 开放区域及程度。未观察时切片置4℃冰箱避光保存。各组随机另取5 只大鼠的脑组织，吸干表面水分后称量脑湿重；将脑组织置于匀浆器中，加入50％三氯乙酸制成组织匀浆，移入试管密封静置60min 以上；3000rpm/min 离心10min，取上清液，荧光分光光度计测荧光值：激发波长620nm，发射波长680nm；按标准曲线计算出上清液中EB含量，再计算出每克脑组织EB含量，以此反应各大鼠BBB 通透性。 

2 实验结果 

2.1 激光扫描共聚焦显微镜观察结果

EB在激发光状态下呈鲜艳明亮的红色荧光。激光显微镜下观察到各组动物脑组织无BBB 脑区( 如松果体、最后区和脑垂体) 呈现均一、弥漫性EB 浸染，边界清晰，脑膜可见红色荧光勾勒出的线样轮廓。而在BBB 脑区，除假手术组之外的其他各组脑组织均可见光斑，且主要分布在丘脑、下丘脑、小脑、海马等处，光斑大小不一，荧光强度从光斑的中心向外周逐渐减弱，边界模糊。各组的光斑数和分布明显不同：模型组光斑最多，约有120 个左右直径约100-200um 的光斑，密集处呈片状。各本发明中药组合物药物组光斑数目较模型组显著减少，各剂量组比较，呈现显著剂量差异性；其中以低剂量组光斑较多，在相同平面上光斑约有50 个，但是融合成片状的较少；中剂量组光斑较少，散在分布；高剂量组光斑很少而散在，且荧光很弱。

2.2 大鼠脑组织EB 含量检测血脑屏障的通透性结果 

各组大鼠脑组织标本由测得的荧光值计算出EB 含量，数据统计分析见表6。

表6本发明中药组合物对RHRSP 脑血栓后血脑屏障通透性的影响 

注：与假手术组比较，##P＜0.01 ；与模型组比较，*P＜0.01,**P＜0.01。

2.3 结论 

EB 为水溶性染料，入血后能百分之百迅速与白蛋白结合，正常情况下不能透过血脑屏障。由2.1 及2.2 结果可见，假手术组BBB 脑区，脑组织显微镜下未见EB 渗出光斑；而模型组大鼠脑组织显微镜下有大量EB 渗出光斑，且脑组织荧光分光光度计检出高含量的EB，较假手术组有显著差异(P＜0.01)，表明脑血栓后脑组织血脑屏障破坏，通透性增加，EB 结合白蛋白可通过开放的BBB 进入脑组织。实验结果显示本发明中药组合物各剂量组大鼠脑组织显微镜下EB 光斑数以及脑组织EB 检出含量明显减少，与模型组比较均有显著差异(P＜0.01)，提示本发明中药组合物对脑损伤后血脑屏障通透性增加具有抑制作用，能保护血脑屏障，而保护脑组织进一步受损伤。

Claims (7)

1.一种治疗脑血栓的中药组合物，其特征在于它主要由以下重量份的原料制得：桃仁10-50份，羌活10-20份，槐花5-20份，徐长卿5-15份，熟地 5-10份，百合5-15份，金银花5-15份，丹参 1-10份，枸杞5-15份，茯苓 9-15份，川芎9-15份，白芷5-15份，黄连素0.2-9份，白芍5.5-15份，红景天6-9份，甘草10-15份。

2.如权利要求1所述的治疗脑血栓的中药组合物，其特征在于它还含有如下重量份的原料：香橼5份和远志9份。

3.如权利要求1所述的治疗脑血栓的中药组合物，其特征在于它主要由以下重量份的原料制得：桃仁30份，羌活15份，槐花15份，徐长卿10份，熟地8份，百合10份，金银花10份，丹参6份，枸杞10份，茯苓12份，川芎12份，白芷10份，黄连素5.5份，白芍10份，红景天8份，甘草12份。

4.如权利要求3所述的治疗脑血栓的中药组合物，其特征在于它还含有如下重量份的原料：香橼5份和远志9份。

5.如权利要求1-4任一所述的治疗脑血栓的中药组合物，其特征在于：它是散剂、水剂、片剂或胶囊剂。

6.一种制备如权利要求4所述的治疗脑血栓的中药组合物的方法，其特征在于它包括以下步骤：取处方量上述中药材碎成粗粉，按照粗粉总重量的4-9倍加入体积浓度为40%-95%的乙醇溶液，回流提取三次，回流时间为2-5h，滤过，滤液回收乙醇，冷却过滤，用水洗涤，干燥后即得中药浸膏，将其粉碎制成干膏粉后加入处方量的黄连素和丹参即可得到本发明中药组合物。

7.如权利要求1-4任一所述的中药组合物在制备治疗脑血栓药物中的用途。