CN109342168A - 一种甘油三酯质控液及其配制方法 - Google Patents

一种甘油三酯质控液及其配制方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于体外诊断试剂领域，公开了一种甘油三酯质控液及其配制方法，一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯，TritonX‑100，乙二醇，胎牛血清，BSA；稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇，胎牛血清，BSA，本发明不但能够完全溶解甘油三酯，并且能够形成相对均一稳定的状态，更有利于实验室产品检测，克服了目前血清甘油三酯质控购买问题。

Description

一种甘油三酯质控液及其配制方法
技术领域
本发明属于体外诊断试剂领域，特别是涉及一种甘油三酯质控液及其配制方法。
背景技术
甘油三酯(Triglyceride,TG)又称中性脂肪，由三分子脂肪酸和一分子甘油酯化合而成，是体内能量的主要来源。甘油三酯的水平不仅与总胆固醇(TC)、体质指数(BMI)和血糖(GLU)呈正相关，而且与肥胖密切相关。人体血液中甘油三酯检测十分重要，因为它的高浓度(正常范围男性40-160mg/dL和女性35-135mg/dL)会导致高脂血症，高甘油三脂血症是冠心病的主要表现之一，及时检测有助于诊断和治疗糖尿病、肾病、肝阻塞和其他疾病有关脂质代谢各种内分泌紊乱。另外，专利CN201710106097验证了甘油三酯可作为抑郁症相关的疾病生物标志物，其可为针对抑郁症的药物疗效评估等提供一个更准确的客观指标。
甘油三酯的检测方法有很多种，不可避免需要一定的甘油三酯质控品。但是用于检测甘油三酯的质控品出于成本及溶解问题，实验室本身尚未有明确的制备方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的甘油三酯质控液及其配制方法，质控品采用乙二醇和TritonX-100进行配制，克服了现有技术中甘油三酯质控品成本高及溶解问题，不但能够完全溶解甘油三酯，并且能够形成相对均一稳定的状态，更有利于实验室产品检测，克服了目前血清甘油三酯质控品购买问题。
本发明提供了一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9-10％(质量占比)，TritonX-100 0.5-1％(体积占比)，乙二醇70-75％(体积占比)，胎牛血清10-15％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60-61％(体积占比)，胎牛血清34-36％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)。
上述一种甘油三酯质控液的配制方法，包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
采用上述技术方案，本发明实现的有益效果如下：
1、本发明采用乙二醇对三油酸甘油酯进行一个初步较好的溶解，再加入乳化剂TritonX-100后进一步对三油酸甘油酯进一步充分的溶解；
2、本发明为使质控品更接近临床血清样本基质，质控品采用胎牛血清与BSA进行配制，用试纸条对其进行检测，显色梯度与临床血清样本一致，且显色明显，有效地减少了基质效应的干扰；
3、本发明配置的质控溶液的浓度理论值与生化仪测试的测试值吻合度高，偏离度低，且与理论值误差在4.7％以内；
4、本发明能够为甘油三酯实验室研发提供模拟临床样本的检测结果，避免了没有合适水平样本时无法检测的情况。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或者现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍。
图1为本发明的原料乙二醇的含量与实际值与检测值的吻合度曲线图；
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9-10％(质量占比)，TritonX-100 0.5-1％(体积占比)，乙二醇70-75％(体积占比)，胎牛血清10-15％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60-61％(体积占比)，胎牛血清34-36％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)。
上述一种甘油三酯质控液的配制方法，包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
实施例一：
一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯10％(质量占比)，TritonX-100 0.5％(体积占比)，乙二醇70％(体积占比)，胎牛血清14.5％(体积占比)，BSA 5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60％(体积占比)，胎牛血清36％(体积占比)，BSA 5％(质量占比)。
上述一种甘油三酯质控液的配制方法，包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
实施例二：
一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9.5％(质量占比)，TritonX-100 1％(体积占比)，乙二醇75％(体积占比)，胎牛血清10％(体积占比)，BSA 4.5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60.5％(体积占比)，胎牛血清35％(体积占比)，BSA 4.5％(质量占比)。
上述一种甘油三酯质控液的配制方法，包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
实施例三：
一种甘油三酯质控液，包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9.5％(质量占比)，TritonX-100 0.8％(体积占比)，乙二醇72.5％(体积占比)，胎牛血清12.5％(体积占比)，BSA 4％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇61％(体积占比)，胎牛血清34％(体积占比)，BSA 4％(质量占比)。
上述一种甘油三酯质控液的配制方法，包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
经过多次实验尝试最终确定了各个药品的比例，如图1所示的乙二醇的含量与实际值与检测值的吻合度。
BSA的含量参考人体中白蛋白的含量(35-50g/L)，最终确定BSA的含量为4％-5％。
采用上述技术方案，本发明配置的质控溶液的浓度理论值与生化仪测试的测试值吻合度高，偏离度低，且与理论值误差在4.7％以内，如下表一，证明了配置的质控溶液溶解完全度较好，并且配置的质控溶液浓度准确。将配置好的溶液隔夜静置后观察仍然是均一稳定的，且未出现分层现象。最后，在本发明中采用胎牛血清与BSA进行配制，用试纸条对其进行检测，显色梯度与临床血清样本一致，且显色明显，有效地减少了基质效应的干扰；另外本发明的质控能够为甘油三酯实验室研发提供模拟临床样本的检测结果，避免了没有合适水平样本时无法检测的情况。
表一：
序号 理论值 测量值
1 1.30 1.32
2 1.50 1.54
3 1.70 1.71
4 2.00 2.06
5 2.30 2.20
6 2.70 2.66
7 3.10 3.13
8 3.30 3.34
9 4.10 4.15
10 4.70 4.73
11 5.30 5.27
12 5.70 5.65
13 6.10 6.15

Claims (5)

1.一种甘油三酯质控液，其特征在于：包括甘油三酯血清质控品母液和稀释液；
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9-10％(质量占比)，TritonX-100 0.5-1％(体积占比)，乙二醇70-75％(体积占比)，胎牛血清10-15％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60-61％(体积占比)，胎牛血清34-36％(体积占比)，BSA 4-5％(质量占比)。
2.一种甘油三酯质控液的配制方法，其特征在于：包括甘油三酯血清质控品母液配制方法和稀释液配制方法；
所述甘油三酯血清质控品母液配制方法，包括如下步骤：
(1)将乙二醇中逐滴加入到三油酸甘油酯中，在45℃条件下超声溶解，超声时间为60分钟；
(2)将TritonX-100原液加入上步溶液后，继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(3)加入BSA继续在45℃条件下继续超声30分钟；
(4)加入胎牛血清在45℃条件下继续超声30分钟，得到均一稳定的甘油三酯血清质控品母液；
所述稀释液配制方法，包括如下步骤：将乙二醇、胎牛血清、BSA在45℃条件下混合，超声30分钟溶解后，得到稀释液；
将得到的稀释液对上述甘油三酯血清质控品母液进行稀释，从而得到不同浓度的甘油三酯质控液。
3.根据权利要求1所述的一种甘油三酯质控液，其特征在于：
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯10％(质量占比)，TritonX-100 0.5％(体积占比)，乙二醇70％(体积占比)，胎牛血清14.5％(体积占比)，BSA 5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60％(体积占比)，胎牛血清36％(体积占比)，BSA 5％(质量占比)。
4.根据权利要求1所述的一种甘油三酯质控液，其特征在于：
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9.5％(质量占比)，TritonX-100 1％(体积占比)，乙二醇75％(体积占比)，胎牛血清10％(体积占比)，BSA4.5％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇60.5％(体积占比)，胎牛血清35％(体积占比)，BSA 4.5％(质量占比)。
5.根据权利要求1所述的一种甘油三酯质控液，其特征在于：
所述甘油三酯血清质控品母液为含有三油酸甘油酯、表面活性剂的甘油三酯溶液，其主要成分为：三油酸甘油酯9.5％(质量占比)，TritonX-100 0.8％(体积占比)，乙二醇72.5％(体积占比)，胎牛血清12.5％(体积占比)，BSA 4％(质量占比)；
所述稀释液为含有一定表面活性剂的溶液，其主要成分为：乙二醇61％(体积占比)，胎牛血清34％(体积占比)，BSA 4％(质量占比)。
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GR01 Patent grant
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