CN117554151B - 一种胆固醇质控液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本申请提供一种胆固醇质控液及其制备方法，涉及体外诊断试剂技术领域。本申请的其胆固醇质控液包括胆固醇浓缩液、醛化红细胞和包含牛血清白蛋白的基础液；其中，胆固醇浓缩液中的基质为牛血清，胆固醇浓度为3000mg/dL‑7000mg/dL；基础液中的牛血清白蛋白浓度为1g/L‑10g/L；醛化红细胞和基础液的体积比为3：（3‑7）。本申请采用易溶于水的以牛血清为基质的胆固醇浓缩液，解决胆固醇的溶解问题，使用醛化红细胞和牛血清白蛋白用于模拟全血样本，解决基质效应，用以获得良好的线性测试关系，更好的适用于电化学胆固醇测试系统，保证质控结果的准确性和精密度。
Description
技术领域
本申请涉及体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种胆固醇质控液及其制备方法。
背景技术
在现有技术中，自测用总胆固醇采用的方法主要是电化学法，全血样本中的总胆固醇与胆固醇酯酶(CE)、胆固醇氧化酶(COD)反应，经电子媒介体导出反应电流，通过电流与总胆固醇的线性关系得出总胆固醇的浓度。而电化学检测方法中通常会使用到质控液，质控液是一种含有待测物质或含有与待测物性质相同的物质的溶液，其作用在于确认电化学检测系统的功能是否正常。当检测过程中出现偏差较大或者具有疑虑的结果时，可以将检测系统对质控液的检测结果作为依据，确认检测系统是否处于正常检测状态。
现有技术的胆固醇质控液或血脂复合质控液，只适用于采用光化学原理的血脂分析仪和血脂分析系统，或在反应区贴有滤血膜，测试经滤膜过滤红细胞后的血浆中的胆固醇的电化学胆固醇试纸条，其测试对象实质是全血样本中的血浆。该质控液不适合用于直接测试全血样本的电化学胆固醇试纸条，与测试全血样本往往存在基质效应，不能得到很好的线性响应关系。并且该质控液往往采用有机溶剂溶解胆固醇，会对电化学电极试纸条中的酶性能产生影响，影响测试的准确度。因此，需要提供一种胆固醇质控液，保证质控结果的准确性和精密度。
发明内容
本申请的目的在于提供一种胆固醇质控液及其制备方法，通过选用牛血清胆固醇浓缩液用来代替含有机溶剂和表面活性剂助溶的胆固醇母液，以醛化血红细胞和牛血清白蛋白为基质来模拟全血样本，解决基质效应，使得整个胆固醇质控液，具有极佳的稳定性，应用于电化学检测系统中保证质控结果的准确性和精确度。
为实现以上目的，本申请的技术方案如下：
一种胆固醇质控液，包括胆固醇浓缩液、醛化红细胞和包含牛血清白蛋白的基础液；
所述醛化红细胞和所述基础液的体积比为3：（3-7）；
所述胆固醇浓缩液中的基质为牛血清，胆固醇浓度为3000mg/dL- 7000mg/dL；
在所述基础液中，所述牛血清白蛋白的浓度为1g/L-10g/L；
在所述胆固醇质控液中，胆固醇的摩尔浓度为 0.1mmol/L-10mmol/L。
优选地，所述基础液还包括磷酸盐缓冲液、稳定剂和防腐剂。
进一步优选地，在所述基础液中，满足以下条件中的至少一个：
a.所述磷酸盐缓冲液的 pH为 6.5-7.5；
b.所述磷酸盐的浓度为 0.05mmol/L-0.2mmol/L，更优选为0.07mmol/L-0.15mmol/L；
c.所述稳定剂包括蔗糖、海藻糖、乳糖中的至少一种；
d.所述稳定剂的浓度为 10g/L-40g/L，更优选为15g/L-35g/L；
e.所述防腐剂包括叠氮化钠、Proclin300中的至少一种。
所述防腐剂为叠氮化钠时，所述叠氮化钠在所述基础液中的浓度为0.1g/L-lg/L，更优选为0.3g/L-0.7g/L。
所述防腐剂为Proclin300时，所述Proclin300在所述基础液中的浓度为0.5mL/L-3mL/L，更优选为1mL/L-2mL/L。
优选地，所述醛化红细胞包括猪红细胞、牛红细胞和绵羊红细胞中的至少一种。
优选地，所述胆固醇质控液的储存温度为2℃-8℃。
本申请还提供了上述胆固醇质控液的制备方法，包括：
将所述醛化红细胞和所述包含牛血清白蛋白的基础液按所述体积比混合，再根据胆固醇摩尔浓度需求加入所述胆固醇浓缩液，得到所述胆固醇质控液。
优选地，所述基础液通过将包含牛血清白蛋白在内的原料按浓度需求加入水中混合均匀制备得到。
优选地，所述醛化红细胞通过将醛化红细胞悬液进行离心分层后移取得到，所述醛化红细胞悬液中的醛化红细胞的体积占比为30%-50%。
本申请的有益效果：
（1）本申请通过选用以牛血清为基质的胆固醇浓缩液来配置不同胆固醇浓度水平的质控液，解决了胆固醇的溶解问题；该胆固醇浓缩液易溶于水，生物相容性好，无需有机溶剂和表活助溶，不会干扰生物化学反应过程，对酶化学反应等无抑制作用，不会对试纸条的测试性能产生影响；
（2）本申请以醛化血红细胞和含牛血清白蛋白的基础液混合组成，用于模拟临床血液样本，避免基质效应，使得胆固醇质控液与电化学胆固醇试纸条测试，能获得良好的线性信号响应关系，对电化学胆固醇测试系统起到质控作用。
（3）本申请的胆固醇质控液相对于现有技术中的胆固醇质控液而言，对检测系统的质控测试结果的影响更小，所测数据更接近真实值，更适用于电化学胆固醇测试系统；同时本申请的胆固醇质控液，具有极佳的稳定性，储存期限长，能够良好的应用于电化学检测系统，保证质控结果的准确性和精确度。
具体实施方式
如本文所用之术语：
“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
在这些实施例中，除非另有指明，所述的份和百分比均按质量计。
“质量份”指表示多个组分的质量比例关系的基本计量单位，1份可表示任意的单位质量，如可以表示为1g，也可表示2.689g等。假如我们说A组分的质量份为a份，B组分的质量份为b份，则表示A组分的质量和B组分的质量之比a：b。或者，表示A组分的质量为aK，B组分的质量为bK（K为任意数，表示倍数因子）。不可误解的是，与质量份数不同的是，所有组分的质量份之和并不受限于100份之限制。
“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。
本申请提供的胆固醇质控液，包括胆固醇浓缩液、醛化红细胞和包含牛血清白蛋白的基础液。其中，胆固醇浓缩液中的基质为牛血清，胆固醇浓度为3000mg/dL-7000mg/dL；基础液中的牛血清白蛋白的浓度为1g/L-10 g/L，例如可以是1g/L、2.5g/L、4g/L、5g/L、7.5g/L、8g/L、10g/L或者是1g/L-10g/L之间的任意值，更优选为2.5g/L-7.5g/L。
需要说明的是，本申请的胆固醇浓缩液选用的是Medix Biochemica公司生产的cholesterol concentrate（Total Cholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。本申请选用以牛血清为基质的胆固醇浓缩液，可以解决胆固醇的溶解问题，提供不同胆固醇浓度的质控液水平。
在胆固醇质控液中，醛化红细胞和基础液的体积比为3：（3-7），例如可以是3：3、3：4、3：4.5、3：5、3：5.5、3：6、3：7或者是3：（3-7）之间的任意值，更优选为3：4.5，即1：1.5；胆固醇的摩尔浓度为 0.1mmol/L-10mmol/L，例如可以是0.1mmol/L、1mmol/L、3mmol/L、5mmol/L、6mmol/L、8mmol/L、10mmol/L或者是0.1mmol/L-10mmol/L之间的任意值。
在本申请的一种优选实施方式中，醛化红细胞包括猪红细胞、牛红细胞和绵羊红细胞中的至少一种。更优选地，醛化红细胞为绵羊红细胞。
在本申请的一种优选实施方式中，醛化红细胞通过将醛化红细胞悬液进行离心分层后移取得到。在醛化红细胞悬液中，醛化红细胞的体积占比为30%-50%，例如可以是30%、35%、40%、45%、50%或者是30%-50%之间的任意值，更优选为40%。
在本申请的一种优选实施方式中，基础液中除了牛血清白蛋白之外，还包括磷酸盐缓冲液、稳定剂和防腐剂。
需要说明的是，牛血清白蛋白用于模拟人血清；磷酸盐缓冲液为整个质控液和醛化红细胞提供一个合适的缓冲环境；稳定剂的作用在于在质控过程中提高试条酶的稳定性和生物相容性，使质控结果更准确，同时加强质控液的存放稳定性；防腐剂的作用是避免质控液生产和存放过程中细菌的产生，延长质控液保存期限。
在一种实施方式中，基础液中的磷酸盐缓冲液的pH为6.5-7.5，更优选为7.0；磷酸盐的浓度为0.05mmol/L-0.2mmol/L，更优选为0.07mmol/L- 0.15mmom/L，最优选为0.1mmom/L。磷酸盐可以是磷酸钠、磷酸钾中的至少一种。
在一种实施方式中，稳定剂包括蔗糖、海藻糖、乳糖中的至少一种；稳定剂在基础液中的浓度为10g/L-40g/L，更优选为15g/L-35g/L，最优选为25g/L。
在一种实施方式中，防腐剂包括叠氮化钠、Proclin300中的至少一种。当防腐剂为叠氮化钠时，叠氮化钠在基础液中的浓度为0.1g/L-lg/L，更优选为0.3g/L-0.7g/L，最优选为0.5g/L。当防腐剂为Proclin300时，Proclin300在基础液中的浓度为0.5mL/L-3mL/L，更优选为1mL/L-2mL/L，最优选为1.5mL/L。
在本申请的一种优选实施方式中，胆固醇质控液的储存温度为2℃-8℃。
本申请还提供了胆固醇质控液的制备方法，包括：将醛化红细胞和包含牛血清白蛋白的基础液按比例混合，再根据胆固醇的浓度需求加入胆固醇浓缩液，得到胆固醇质控液。
在本申请的一种优选实施方式中，基础液的制备方法包括：将包含牛血清白蛋白在内的原料按浓度需求加入水中混合均匀。具体地，可以先将磷酸盐和水配制为磷酸盐缓冲液，再根据浓度需求向缓冲液中加入牛血清白蛋白、稳定剂和防腐剂等物质，配制得到基础液。
下面将结合具体实施例对本申请的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本申请，而不应视为限制本申请的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；牛血清白蛋白5g/L；海藻糖25g/L；Proclin300 1mL/L。
醛化血红细胞：将体积百分比为40%的绵羊红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的绵羊红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，按照基础液和醛化血红细胞的体积比为6：4进行混合，得到基液之后，将基液分为三份。然后，在三份基液中分别加入胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
实施例2
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；牛血清白蛋白5g/L；海藻糖20g/L；蔗糖5g/L；叠氮化钠0.5g/L。
醛化血红细胞悬液：将体积百分比为30%的牛红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的牛红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，基础液和醛化血红细胞的体积比为7：3，按照该比例混合得到基液之后，分为三份。然后，在三份基液中分别加入胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
实施例3
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；牛血清白蛋白5g/L；海藻糖20g/L；蔗糖5g/L；Proclin300 1mL/L。
醛化血红细胞悬液：将体积百分比为50%的猪红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的猪红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，基础液和醛化血红细胞的体积比为5：5，按照该比例混合得到基液之后，分为三份。然后，在三份基液中分别加入胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
实施例4
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：配置Proclin300浓度分别为0.25mL/L、0.5mL/L、1.5mL/L、3mL/L的4种基础液，基础液中其它物质均为磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；牛血清白蛋白5g/L；海藻糖25g/L；
醛化血红细胞悬液：将体积百分比为40%的绵羊红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的绵羊红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，基础液和醛化血红细胞的体积比为6：4，混合得到4种基液之后，每种比例基液分为三份。然后，在三份基液中分别加入胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
实施例5
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；牛血清白蛋白5g/L；海藻糖25g/L；Proclin300 1.5mL/L。
醛化血红细胞悬液：将体积百分比为40%的绵羊红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的绵羊红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，基础液和醛化血红细胞的体积比分别为8：2；7：3；6：4；5：5；4：6；按照比例混合得到5种基液之后，每种比例的基液分为三份，再配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
实施例6
本实施例的胆固醇质控液，包括以下组分及浓度：
基础液：配置牛血清白蛋白浓度分别为0.5g/L、1g/L、10g/L、12g/L的4种基础液，基础液中其它物质均为磷酸盐缓冲液（pH7.0）0.1mol/L；海藻糖25g/L；Proclin300 1.5mL/L。
醛化血红细胞悬液：将体积百分比为40%的绵羊红细胞悬液进行离心分层后，用移液枪移取底层的绵羊红细胞。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
其中，基础液和醛化血红细胞的体积比为6：4，混合得到4种基液之后，每种比例基液分为三份。然后，在三份基液中分别加入高浓度胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
对比例1
本对比例的胆固醇质控液为水基胆固醇质控液，其中的组分除了胆固醇之外，还包含：体积浓度为10%的聚乙二醇20000、体积浓度为10%的聚乙二醇20000异丙醇、体积浓度为10%的聚乙二醇20000TritonX-100、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液以及0.5g/L苯甲酸钠。
对比例2
本对比例的胆固醇质控液为血清基质的胆固醇质控液，包括胆固醇浓缩液、和以血清为基质的基础液。
其中，血清基质源自人血清（由临床机构或血液捐献站提供）；按照常规方法对人血清进行无害化预处理，以避免环境污染和疾病传播，经测试，血清基质呈现选自以下的任一项或组合：HIV1抗体阴性、HIV2抗体阴性、肝炎B表面抗原阴性、肝炎C病毒抗体阴性。在血清基质的胆固醇质控液。
以血清为基质的基础液中还包括：牛血清白蛋白5g/L；海藻糖25g/L；Proclin3001mL/L。
胆固醇浓缩液：Medixbio Chemica公司生产的Cholesterol concentrate（TotalCholesterol：3000mg/dL-7000 mg/dL）。
将上述配置的血清为基质的基础液分成三份，在三份基液中分别加入不同量的胆固醇浓缩液，配置成3mmol/L（水平1）、6mmol/L（水平2）、9mmol/L（水平3）三个浓度水平的胆固醇质控液。
1、稳定性测试
将上述实施例1-4制备得到的三个浓度水平的胆固醇质控液分别用2mL离心管以每份1mL体积进行分装，密封后中置到2℃-8℃的冰箱中。每隔一个月取不同浓度水平的胆固醇质控液各一瓶，离心取上层清液，采用贝克曼AU680生化仪对其进行测试，测试试剂盒为复星诊断科技有限公司生产的胆固醇测定试剂盒（CHOD-POP法）。测试完毕后，分别计算每一个月与第0天（胆固醇质控液制备的当天）放置的胆固醇质控液的生化仪测试值偏差，连续测试6个月。
下表的表1列出了实施例1制备的胆固醇质控液的质控测试结果；表2列出了实施例2制备的胆固醇质控液的质控测试结果；表3列出了实施例3制备的胆固醇质控液的质控测试结果；表4列出了实施例4制备的胆固醇质控液的质控测试结果。
表1 实施例1的质控测试结果
表2 实施例2的质控测试结果
表3 实施例3的质控测试结果
根据表1-表3的质控测试结果可知，本申请实施例1-实施例3提供的胆固醇质控液，在2-8℃条件下具有良好的储存稳定性，放置6个月后与第0天的胆固醇质控液相比，偏差均在5%以内。由此可以看出，本申请提供的胆固醇质控液在2-8℃下具有较好的稳定性，储存期限可达6个月。
表4 实施例4的质控测试结果
根据表4的质控测试结果可知，含量为0.5mL/L、1.5mL/L以及3mL/L的Proclin300的质控液在2-8℃条件下具有良好的储存稳定性，放置6个月后与第0天的胆固醇质控液相比，偏差均在5%以内。含量为0.25mL/L的Proclin300的质控液在2-8℃条件下放置5个月后与第0天的胆固醇质控液相比，偏差超出5%。由此可以看出，基础液中适宜的Proclin300含量为0.5mL/L-3mL/L。
2、精确度验证
将上述实施例1-3以及实施例6中制备得到的三个浓度水平的胆固醇质控液，采用贝克曼AU680生化仪对其进行测试，测试试剂盒为复星诊断科技有限公司生产的胆固醇测定试剂盒（CHOD-POP法）。通过质控测试结果计算胆固醇质控液的生化测试值与理论浓度值的偏差，结果如表5、表6所示。
表5 实施例6的质控测试结果
由表5的结果表明：含量为1g/L、10g/L的牛血清白蛋白质控液，其配置生化测试值与理论浓度值的偏差极小，含量为0.5g/L的牛血清白蛋白质控液其配置生化测试值与理论浓度值的偏差较大，呈正偏差，含量为12g/L的牛血清白蛋白质控液其配置生化测试值与理论浓度值的偏差较大，呈负偏差。由此可以看出，基础液中适宜的牛血清白蛋白的含量为1g/L-10g/L。
表6 实施例1-3的质控测试结果
由表6的结果表明：本申请实施例1-3提供的胆固醇质控液，其生化测试值与理论浓度值的偏差极小，因此，本申请制备得到的胆固醇质控液能有效保证质控测试结果的准确性和精确度。
3、线性响应关系验证
将上述实施例、对比例配制的胆固醇质控液分别采用市售电化学胆固醇试纸条（试纸条无滤血膜），测试仪器为上海辰华电化学工作站，连接好试纸条的工作电极和对电极，测试电压为250mV，测试时间为50s，统计第50s的电流信号值。测试结果如表7、表8所示。
表7 实施例5的质控液测试结果
根据表7的质控测试结果可知，基础液和醛化血红细胞的体积比不同，则制备得到的质控液具有不同的信号响应，体积比为8：2的质控液在高浓度胆固醇水平时出现信号响应小，信号值上不去的现象，无良好的线性响应关系；体积比为4：6的质控液整体信号响应值较小，信号梯度值较小，影响质控液测试灵敏度；体积比为7：3、6：4、5：5的质控液均具有良好的线性信号响应，以6：4的体积比为最佳，具有最佳的信号梯度值和响应灵敏度。
表8 实施例1-3和对比例1-2的质控测试结果
根据表8的质控测试结果可知，本申请实施例1-3制备的胆固醇质控液搭配市售电化学胆固醇试纸条（试纸条无滤血膜）具有良好的线性信号响应。而对比例1配置的水基胆固醇质控液以及对比例2配置的血清基质胆固醇质控液虽然使用生化仪测试得到了不同的胆固醇浓度，但是不同胆固醇浓度对应测试得到的电流值的数值较为接近，并无明显地线性梯度。
与配置的水基、血清基质的胆固醇质控液相比，本申请的胆固醇质控液对检测系统的质控测试结果的影响更小，所测数据更接近真实值，更适用于电化学胆固醇测试系统。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本申请进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的范围。
此外，本领域的技术人员能够理解，尽管在此的一些实施例包括其它实施例中所包括的某些特征而不是其它特征，但是不同实施例的特征的组合意味着处于本申请的范围之内并且形成不同的实施例。例如，上述所要求保护的实施例的任意之一都可以以任意的组合方式来使用。公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在加深对本申请的总体背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域技术人员所公知的现有技术。
Claims (8)
1.一种胆固醇质控液，其特征在于，由胆固醇浓缩液、醛化红细胞和基础液组成；
所述基础液由牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液、稳定剂和防腐剂组成；
所述醛化红细胞和所述基础液的体积比为3：（3-7）；
所述胆固醇浓缩液中的基质为牛血清，胆固醇浓度为3000mg/dL- 7000mg/dL；
在所述基础液中，所述牛血清白蛋白的浓度为1g/L-10g/L；
在所述胆固醇质控液中，胆固醇的摩尔浓度为 0.1mmol/L-10mmol/L；
所述胆固醇质控液的制备方法，包括：
将所述醛化红细胞和所述基础液按所述体积比混合，再根据胆固醇摩尔浓度需求加入所述胆固醇浓缩液，得到所述胆固醇质控液。
2.如权利要求1所述的胆固醇质控液，其特征在于，在所述基础液中，满足以下条件中的至少一个：
a.所述磷酸盐缓冲液的 pH为 6.5-7.5；
b.所述磷酸盐的浓度为 0.05mmol/L-0.2mmol/L；
c.所述稳定剂包括蔗糖、海藻糖、乳糖中的至少一种；
d.所述稳定剂的浓度为 10g/L-40g/L；
e.所述防腐剂包括叠氮化钠、Proclin300中的至少一种。
3.如权利要求2所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述防腐剂为叠氮化钠时，所述叠氮化钠在所述基础液中的浓度为0.1g/L-lg/L。
4.如权利要求2所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述防腐剂为Proclin300时，所述Proclin300在所述基础液中的浓度为1mL/L-3mL/L。
5.如权利要求1所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述醛化红细胞包括猪红细胞、牛红细胞和绵羊红细胞中的至少一种。
6.如权利要求1-5任一项所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述胆固醇质控液的储存温度为2℃-8℃。
7.如权利要求1所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述基础液通过将所述牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液、稳定剂和防腐剂按浓度需求加入水中混合均匀制备得到。
8.如权利要求1所述的胆固醇质控液，其特征在于，所述醛化红细胞通过将醛化红细胞悬液进行离心分层后移取得到，所述醛化红细胞悬液中的醛化红细胞的体积占比为30%-50%。
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Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0105923A1 (en) * | 1982-04-20 | 1984-04-25 | Cooper Laboratories, Inc. | Method and composition for elevated lipid quality control materials |
| US5529933A (en) * | 1992-02-24 | 1996-06-25 | Coulter Corporation | Suspension media for hematological composition and method for its use |
| CN104807920A (zh) * | 2015-05-21 | 2015-07-29 | 上海迪安医学检验所有限公司 | 高效液相色谱串联质谱技术检测血清中10种类固醇激素的试剂盒 |
| CN108333175A (zh) * | 2018-01-18 | 2018-07-27 | 青岛汉唐生物科技有限公司 | 一种总胆固醇检测方法 |
| CN109342713A (zh) * | 2018-08-27 | 2019-02-15 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种用于血脂检测的质控物质 |
| CN109342168A (zh) * | 2018-11-07 | 2019-02-15 | 青岛汉唐生物科技有限公司 | 一种甘油三酯质控液及其配制方法 |
| CN112180095A (zh) * | 2020-06-04 | 2021-01-05 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种心脑血管和糖尿病相关四高指标复合质控品及其制备方法 |
| CN116625773A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-22 | 桂林中辉科技发展有限公司 | 一种甘油三酯与胆固醇混合质控液及其配制方法与应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2005282773B2 (en) * | 2004-09-01 | 2010-07-08 | Maine Standards Company, Llc | Stable lipid standards |
-
2024
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Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0105923A1 (en) * | 1982-04-20 | 1984-04-25 | Cooper Laboratories, Inc. | Method and composition for elevated lipid quality control materials |
| US5529933A (en) * | 1992-02-24 | 1996-06-25 | Coulter Corporation | Suspension media for hematological composition and method for its use |
| CN104807920A (zh) * | 2015-05-21 | 2015-07-29 | 上海迪安医学检验所有限公司 | 高效液相色谱串联质谱技术检测血清中10种类固醇激素的试剂盒 |
| CN108333175A (zh) * | 2018-01-18 | 2018-07-27 | 青岛汉唐生物科技有限公司 | 一种总胆固醇检测方法 |
| CN109342713A (zh) * | 2018-08-27 | 2019-02-15 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种用于血脂检测的质控物质 |
| CN109342168A (zh) * | 2018-11-07 | 2019-02-15 | 青岛汉唐生物科技有限公司 | 一种甘油三酯质控液及其配制方法 |
| CN112180095A (zh) * | 2020-06-04 | 2021-01-05 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种心脑血管和糖尿病相关四高指标复合质控品及其制备方法 |
| CN116625773A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-22 | 桂林中辉科技发展有限公司 | 一种甘油三酯与胆固醇混合质控液及其配制方法与应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 血清胆固醇和甘油三酯测定质控物和室内质控小结;孟苹苹;检验医学;19900630(第02期);第110-111页 * |
| 血细胞分析仪质控物的初步研究;赵蕾;唐晓英;颜箫;;生命科学仪器;20070330(第03期);第35-38页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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