CN109316439A

CN109316439A - 一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液

Info

Publication number: CN109316439A
Application number: CN201811414598.3A
Authority: CN
Inventors: 范馨仪; 王玉玲; 郭学平; 刘建建; 毛华; 陈衍玲; 徐松堂
Original assignee: BLOOMAGE FREDA BIOPHARM Co Ltd; Shandong Bloomage Hyinc Biopharm Co Ltd
Current assignee: Bloomage Biotech Co Ltd
Priority date: 2018-11-26
Filing date: 2018-11-26
Publication date: 2019-02-12
Anticipated expiration: 2038-11-26
Also published as: CN109316439B

Abstract

本发明提供了一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液，包括以下质量百分含量的组分：海茴香干细胞0.01‑0.5%，丙三醇1‑10%，山梨醇0.1‑10%，琼脂0.1‑5%，透明质酸盐0.01‑2%，泊洛沙姆0.05‑2%。所述海茴香干细胞与透明质酸盐的质量比为1:1‑5。所述海茴香干细胞是海茴香愈伤组织培养物的冻干粉，其粒径为50nm‑300nm。本发明的混悬修护精华液，较于含有海茴香干细胞的其他剂型化妆品如乳液、面霜等不仅功效性显著增强，而且更加稳定，不会产生有效成分析出、沉淀的现象。

Description

一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液

技术领域

本发明涉及一种混悬修护精华液，具体涉及一种含有植物干细胞的混悬修护精华液及其制备方法，属于化妆品技术领域。

背景技术

随着全球气候以及生态环境的变化，空气中的有害物质如可吸入颗粒物、二氧化硫、氮氧化合物、一氧化碳、臭氧等不仅危害人体呼吸道的健康，还极易造成面部皮肤红肿、过敏，然而，市面上的抗污染化妆品少之又少，加之晒伤、术后等一些外在因素所造成的影响，受损皮肤的防护、修复一并成为越来越多人渴望被解决的问题。

海茴香是一种生长在海岸边的伞形科芳香植物，其干细胞中的酚酸、绿原酸和类黄酮等使其能够抵御高盐、高紫外线的极端环境，并能快速修复受损部位，促进细胞、组织的再生，故能够帮助人体真皮层重建，增强真皮层屏障功能，是一种安全、有效的天然抗污染化妆品原料。然而市面所售的海茴香干细胞大多为冻干粉制剂，其既不溶于油也不溶于水，因而限制了其在化妆品领域的应用使用。应用于霜类产品中其添加量比较低，作用有限。虽然添加到液体化妆品中可以提高其含量，带来明显的功能提升，但是添加后往往出现分散不均或者经时稳定性不好，逐渐产生沉淀的现象，大大影响了产品的稳定性和功效性。例如，CN 201610322016.3中公开了一种水光幼肌液，由海藻糖、泛醇、海茴香干细胞、聚丙烯酸钠等组成，该溶液经过《中华人民共和国药典》（2015版）中加速稳定试验后发生了成分沉淀、结块的现象。

因此，亟待开发一种能够充分发挥海茴香干细胞修复、抗污染功效的稳定性高的剂型，并应用于化妆品领域中。

发明内容

针对目前海茴香干细胞在化妆品中稳定性差的问题，本发明提供一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液，海茴香干细胞分散性、稳定性好。

本发明的另一目的在于提供一种方法简单、适于工业化的上述混悬修护精华液的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液，包括以下质量百分含量的组分：海茴香干细胞0.01-0.5%，丙三醇1-10%，山梨醇0.1-10%，琼脂0.1-5%，透明质酸盐0.01-2%，泊洛沙姆0.05-2%。优选的，包括以下质量百分含量的组分：海茴香干细胞0.1-0.5%，丙三醇5-10%，山梨醇1-5%，琼脂1-3.5%，透明质酸盐0.5-2%，泊洛沙姆0.5-2%。所述海茴香干细胞与透明质酸盐的质量比为1:1-5。

所述海茴香干细胞是海茴香愈伤组织培养物的冻干粉。优选的，粒径为50nm-300nm。所述透明质酸盐可以选用本领域常规公知的盐类，如钠盐、钾盐、铵盐等。

所述泊洛沙姆的型号优选为407或188。

所述混悬修护精华液还含有基质；所述基质包括保湿剂、防腐剂和酸碱调节剂。基质中还可以包括香精。

作为优选，上述混悬修护精华液，由以下成分组成：

（a）海茴香干细胞0.01-0.5%，丙三醇1-10%，山梨醇0.1-10%，琼脂0.1-5%，透明质酸盐0.01-2%，泊洛沙姆0.05-2%，和

（b）基质。

所述保湿剂、防腐剂和酸碱调节剂可以选择本领域公知的原料。所述保湿剂选自但不限于甜菜碱、尿囊素、乙酰壳糖胺、β-葡聚糖和聚谷氨酸钠中的一种或多种。所述防腐剂选自但不限于戊二醇、辛酰羟肟酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯中的一种或多种。所述酸碱调节剂选自但不限于柠檬酸、氢氧化钠、三乙醇胺和氨基苯甲醇中的一种或多种。

基质中各成分可以参照本领域在精华液中常用的浓度范围。优选的，各组分在精华液中的质量百分含量为：甜菜碱0.1-3%，尿囊素0.05-1%，乙酰壳糖胺0.1-3%，β-葡聚糖0.1-1%，聚谷氨酸钠0.1-1%；戊二醇1-5%，辛酰羟肟酸1-3%，羟苯甲酯0.01-0.5%，羟苯乙酯0.01-0.5%，羟苯丙酯0.01-0.5%。

优选的，所述混悬修护精华液的pH为6.0-7.0。

上述混悬修护精华液的制备方法，包括以下步骤：

（1）取适量丙三醇润湿山梨醇、泊洛沙姆以及海茴香干细胞，边研磨边加入剩余山梨醇和丙三醇的液体，得到混合物；

（2）将混合物加入适量水，送入高压均质机中均质；

（3）取适量纯化水，升温后溶解琼脂和透明质酸盐，边搅拌边加入步骤（2）中所得的混合物，匀速搅拌均匀即得混悬修护精华液；

（4）加入基质成分，调节pH值，搅拌至混合均匀。

步骤（2）中，均质条件为10000-15000rpm/min，均质时间为3-5min。优选的，均质次数为1-3次。

步骤（3）中，升温温度为40℃-60℃。

本发明具有以下优点：

本发明的混悬修护精华液特别添加天然高分子助悬剂琼脂，形成的混悬液体系不仅稳定，而且能够均匀分散海茴香干细胞冻干粉，使其发挥最大功效，保证了产品的功效性；并通过添加天然保湿因子透明质酸钠和泊洛沙姆，利用其辅助悬剂的功能减短混悬修护精华液重新分散的时间，稳定混悬体系，避免有效成分分散不均或者沉淀，增强了产品的稳定性。此外本发明中的海茴香干细胞成分与透明质酸钠具有协同修复、保湿，增强真皮层屏障的功效。本发明的混悬修护精华液，较于含有海茴香干细胞的其他剂型化妆品如乳液、面霜等不仅功效性显著增强，而且更加稳定，不会产生有效成分析出、沉淀的现象。本发明还提供了上述含有海茴香愈伤组织培养物/海洋植物干细胞的混悬修护精华液及其制备法，该方法工艺简单、易于操作，便于工业化应用。

附图说明

图1为实施例6中混悬修护精华液的修复效果；

图2为实施例6中混悬修护精华液的协同修复效果。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.2%、琼脂1.5%、透明质酸钠1%，泊洛沙姆407 0.8%、丙三醇8%、山梨醇5%、基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。

制备方法：

（1）取适量丙三醇和山梨醇润湿泊洛沙姆以及海茴香愈伤组织培养物冻干粉，边研磨边加入剩余丙三醇和山梨醇液体，使冻干粉末粉碎彻底；

（2）将上述混合物加入适量纯化水，送入高压均质机中均质2次，转速12000rpm/min，每次3分钟；

（3）取适量纯化水，升温至45℃，溶解琼脂和透明质酸钠液体后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）将基质加入基质成分，调节pH值在6.5左右，搅拌至混合均匀。

实施例2 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.01%、琼脂0.1%、透明质酸钠0.01%，泊洛沙姆4070.05%、丙三醇1%、山梨醇1%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；羟苯甲酯0.1%、羟苯丙酯0.05%；氢氧化钠适量）。

制备方法：

（2）将上述混合物加入适量纯化水，送入高压均质机中均质3次，转速10000rpm/min，每次3分钟；

（3）取适量纯化水，升温至40℃，溶解琼脂和透明质酸钠液体后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

实施例3含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.5%、琼脂5%、透明质酸钠1.5%，泊洛沙姆407 2%、丙三醇10%、山梨醇10%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；羟苯甲酯0.1%、羟苯丙酯0.05%；氢氧化钠、柠檬酸适量）。

制备方法：

（2）将上述混合物加入适量纯化水，送入高压均质机中均质2次，转速15000rpm/min，每次3分钟；

（3）取适量纯化水，升温至60℃，溶解琼脂和透明质酸钠液体后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

实施例4含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.3%、琼脂2.5%、透明质酸钠0.75%，泊洛沙姆1881%、丙三醇5%、山梨醇5%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；羟苯甲酯0.1%、羟苯丙酯0.05%；氢氧化钠、柠檬酸适量）。

制备方法：

（2）将上述混合物加入适量纯化水，送入高压均质机中均质2次，转速12500rpm/min，每次3分钟；

（3）取适量纯化水，升温至50℃，溶解琼脂和透明质酸钠液体后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）加入基质成分，调节pH值在6.5，搅拌至混合均匀。

对比例1 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备（不含透明质酸钠）

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.2%、琼脂1.5%、泊洛沙姆407 0.8%、丙三醇8%、山梨醇5%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。

制备方法如下：

（3）取适量纯化水，升温至45℃，溶解琼脂液体后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）加入基质成分，调节pH值在6.5左右，搅拌至混合均匀。

对比例2 含有海茴香干细胞的水光幼肌液的制备

参照CN 01610322016.3中的水光幼肌液最优实施例进行。原料组成：海藻糖：1.5%、泛醇：2%、小分子透明质酸：0.06%、果聚糖：1.1%、β-葡聚糖：0.7%、海茴香干细胞：0.03%、EGF：1%、复合氨基酸：1.2%、甘油：5%、丁二醇：3%、聚丙烯酸钠：0.2%、羟苯甲酯：0.1%、苯氧乙醇：0.6%、PEG-60氢化蓖麻油：0.05%、香精：0.005%、橙花精油：0.001%；

制备方法：称好水后，一次性加入除PEG-60氢化蓖麻油、香精、橙花精油以外的原料，开启搅拌加热至50-55℃溶解完全后，降温至45℃，加已预混合均匀的PEG-60氢化蓖麻油、香精、橙花精油，搅拌至完全透明均一。

对比例3 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备（不加助悬剂）

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.05%、丙三醇8%、山梨醇5%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。

制备方法：

（1）取适量丙三醇和山梨醇润湿以及海茴香愈伤组织培养物冻干粉，边研磨边加入剩余丙三醇和山梨醇液体，使冻干粉末粉碎彻底；

（3）取适量纯化水，升温至45℃，边搅拌边加入（b）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

（4）加入基质成分，调节pH值在6.5左右，搅拌至混合均匀。

对比例4 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备（不含透明质酸盐和泊洛沙姆）

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.2%、琼脂1.5%、丙三醇8%、山梨醇5%、基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。

制备方法：

（1）取适量丙三醇和山梨醇润湿海茴香愈伤组织培养物冻干粉，边研磨边加入剩余丙三醇和山梨醇液体，使冻干粉末粉碎彻底；

（3）取适量纯化水，升温至45℃，溶解琼脂后，边搅拌边加入（2）中所得的混合物，匀速搅拌至混悬液形成；

对比例5 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备（低琼脂含量）

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.2%、琼脂0.05%、透明质酸钠1%，泊洛沙姆4070.8%、丙三醇8%、山梨醇5%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。制备方法如实施例1。

对比例6 含有海茴香干细胞的混悬修护精华液的制备（高琼脂含量）

原料组成：海茴香愈伤组织培养物0.2%、琼脂6%、透明质酸钠1%，泊洛沙姆407 0.8%、丙三醇8%、山梨醇5%，基质（甜菜碱2%、尿囊素0.2%、乙酰壳糖胺0.5%、β-葡聚糖1%、聚谷氨酸钠0.2%；戊二醇2%、辛酰羟肟酸1%；三乙醇胺0.1%）。制备方法如实施例1。

实施例5 稳定性试验

按照《中华人民共和国药典》（2015版）中对混悬剂稳定性的重点考察项目：沉降容积比和再分散性分别进行测定，考察混悬修护精华液的稳定性。

1.1 沉降容积比

取实施例1-4以及对比例1-6各20 mL，置于量筒中，混匀，测定液体的起始高度H，静止30min后，观察沉降面不再改变时沉降物的最终高度H’，按下式计算其沉降容积比F:F=H’/H

F值在0-1之间，若在0.90以上，则说明该产品符合《中国药典2015版》中对混悬液的规定且F值越大代表混悬剂越稳定。实验结果见下表：

*：对比例2的剂型为水剂，故无法采用混悬液标准进行比较，其按照《中国药典》中加速稳定试验在40℃环境下放置1个月后，发生了成分沉淀、结块的现象。

1.2 再分散性

取实施例1-4以及对比例1-6各10mL放于离心管内，以20r/min的速度转动，经过一定时间的旋转，观察离心管底部的沉降物是否重新均匀分散，若分散均匀，则证明混悬剂的再分散性好。同时观察沉降物重新均匀分散的时间，所用时间越短，则证明混悬剂的稳定性高。实验结果见下表：

由以上两表数据可知，从沉降容积比和再分散性上，适当浓度的琼脂可以有效的悬浮、分散海茴香干细胞；泊洛沙姆与透明质酸盐也具有一定的稳定作用，添加后有助于海茴香干细胞的悬浮稳定性。

实施例5 修复效果

1.1 修复效果

选用人永生化表皮细胞，采用细胞划痕法测定细胞迁移运动与修复能力，在培养皿中培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后与实施例1、对比例2接触，继续培养细胞48h，拍照观察周边细胞是否生长迁移至中央划痕区，以此判断细胞的生长迁移能力即实施例1和对比例2对皮肤的修复能力。结果如图1所示，其中，a与b为实施例1获得的样品加入前和加入48h后细胞生长状态；c与d为对比例2获得的样品加入前和加入48h后细胞生长状态。由图1可见，添加了对比例2获得的样品48h后，仍能够观察到划痕区域，而添加了实施例1获得的样品48h后，划痕处细胞与其他区域细胞已无差异。由此可知，与现有技术相比，实施例1获得的样品的有更好的细胞修复效果。

1.2 协同修复作用

选用人永生化表皮细胞，采用细胞划痕法测定细胞迁移运动与修复能力，在培养皿中培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后与1%透明质酸钠溶液、实施例1、不含透明质酸钠的对比例1接触，继续培养细胞48h，拍照观察周边细胞是否生长迁移至中央划痕区，以此判断细胞的生长迁移能力即实施例1、对比例1对皮肤的修复能力。结果如图2所示，其中，a与b为实施例1获得的样品加入前和加入48h后细胞生长状态；c与d为对比例1获得的样品加入前和加入48h后细胞生长状态；e与f为1%透明质酸钠溶液加入前和加入48h后细胞生长状态。由此可知，相比单独使用海茴香干细胞或透明质酸，两者联用具有更好的细胞修复功效。

Claims

1.一种含有海茴香干细胞的混悬修护精华液，其特征在于，包括以下质量百分含量的组分：海茴香干细胞0.01-0.5%，丙三醇1-10%，山梨醇0.1-10%，琼脂0.1-5%，透明质酸盐0.01-2%，泊洛沙姆0.05-2%。

2.根据权利要求1所述的混悬修护精华液，其特征在于，包括以下质量百分含量的组分：海茴香干细胞0.1-0.5%，丙三醇5-10%，山梨醇1-5%，琼脂1-3.5%，透明质酸盐0.5-2%，泊洛沙姆0.5-2%。

3.根据权利要求1或2所述的混悬修护精华液，其特征在于，所述海茴香干细胞与透明质酸盐的质量比为1:1-5。

4.根据权利要求1所述的混悬修护精华液，其特征在于，所述海茴香干细胞为海茴香愈伤组织培养物的冻干粉，其粒径为50nm-300nm。

5.根据权利要求1所述的混悬修护精华液，其特征在于，所述混悬修护精华液还含有基质；所述基质包括保湿剂、防腐剂和酸碱调节剂。

6.根据权利要求5所述的混悬修护精华液，其特征在于，所述保湿剂选自甜菜碱、尿囊素、乙酰壳糖胺、β-葡聚糖和聚谷氨酸钠中的一种或多种；所述防腐剂选自戊二醇、辛酰羟肟酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯中的一种或多种；所述酸碱调节剂选自柠檬酸、氢氧化钠、三乙醇胺和氨基苯甲醇中的一种或多种。

7.根据权利要求6所述的混悬修护精华液，其特征在于，基质中的成分的在精华液中的质量百分含量为：甜菜碱0.1-3%，尿囊素0.05-1%，乙酰壳糖胺0.1-3%，β-葡聚糖0.1-1%，聚谷氨酸钠0.1-1%；戊二醇1-5%，辛酰羟肟酸1-3%，羟苯甲酯0.01-0.5%，羟苯乙酯0.01-0.5%，羟苯丙酯0.01-0.5%。

8.根据权利要求1-7所任一所述的混悬修护精华液，其特征在于，所述混悬修护精华液的pH为6.0-7.0。

9.一种如权利要求1-8所任一所述的混悬修护精华液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（2）将混合物加入适量水，送入高压均质机中均质；

（4）选择性加入基质成分，调节pH值，搅拌至混合均匀。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，均质条件为10000-15000rpm/min，均质时间为3-5min；均质次数为1-3次；

步骤（3）中，升温温度为40℃-60℃。