CN109311924B - 针对肺炎链球菌3型的疫苗的改善的制备 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及制备代表肺炎链球菌3型荚膜多糖的重复单元的部分的合成四糖、六糖和八糖及其缀合物。所述缀合物特别用于预防和/或治疗与肺炎链球菌有关的疾病和更特别是与肺炎链球菌3型有关的疾病。所公开的合成方法相对现有技术合成方法具有巨大优势：中间体产品是结晶的，偶联反应收率更高，需要的反应步骤更少和中间体产品的纯化更容易。
Description
技术领域
本发明涉及制备代表肺炎链球菌3型荚膜多糖的重复单元的部分的合成四糖、六糖和八糖及其缀合物。所述缀合物特别用于预防和/或治疗肺炎链球菌有关的疾病和更特别是与肺炎链球菌3型有关的疾病。
发明背景
革兰氏阳性细菌肺炎链球菌主要病原体之一并且导致严重侵袭性疾病如脑膜炎，肺炎或菌血症。特别是婴儿、老年人和免疫受损的患者具有肺炎球菌感染的高风险。约超过90种血清型的肺炎链球菌已在全世界被鉴定出，而这些血清型中的少数导致绝大多数疾病。血清型通过其不同的核心荚膜多糖(CPS)结构鉴定。CPS由重复的低聚糖单元的聚合物组成，其代表细菌表位。这些CPS或它们的一部分常常是免疫原性的并且构成肺炎球菌疫苗的潜在候选物。
肺炎链球菌对抗生素的抗性是快速增加的问题。从而，提供对肺炎球菌感染的防护的肺炎球菌疫苗变得日益重要。目前可获得两类肺炎球菌疫苗，一类基于多糖和另一类基于缀合至载体蛋白质的多糖。多糖是胸腺独立性类型2抗原和从而诱导低亲和力抗体。此外，它们不诱发B-细胞记忆。肺炎球菌的缀合物疫苗能够绕开这些缺点，具有对荚膜多糖的增加的血清型特异性抗体应答。缀合物疫苗PCV-13含有免疫原性缀合物，包含13种不同肺炎链球菌血清型的纯化多糖，其共价连接至蛋白质比如CRM197。
肺炎链球菌3型(ST3)是目前的肺炎球菌疫苗的一部分。ST3的荚膜多糖由[→3)-β-D-GlcpA-(1→4)-β-D-Glcp-(1→]重复单元组成。采用缀合至CRM197的ST3低聚糖的免疫实验显示，随着链长增加(从单糖至四糖)发现IgG抗体滴定度增加和低聚糖/CRM197比率不影响免疫原性(参见Benaissa-Trouw等人,Infection and Immunity,2001,69,4698-4701)。
衍生自肺炎链球菌3型重复单元的低聚糖能够通过水解肺炎链球菌3型的荚膜多糖或合成获得。肺炎链球菌3型荚膜多糖的水解得到增加的低聚度级分的混合物。分离不同级分是困难的，实际考虑的原因是用于多糖-蛋白质缀合的缀合化学基本上受限于还原胺化反应(参见例如：Snippe等人,Infection and Immunity,1983,42,842-844)。另一方面，合成方法为低聚糖提供经定义的结构和使用显著较宽范围的缀合方法的能力。
Lefeber等人(Carbohydrate Research,2002,337,819-825)教导分离ST3低聚糖，具有重复单元[→3)-β-D-GlcpA-(1→4)-β-D-Glcp-(1→]n，其中n＝1-7。ST3低聚糖从肺炎链球菌3型荚膜多糖的部分酸水解产物通过Sepharose Q离子-交换色谱法分离。分离的部分被源自β-D-GlcpA-(1→4)-β-D-Glcp连接裂解的副产品污染。
Lefeber等人(Chemistry-Eur.J.2001,7,4411-4421)也公开合成衍生自连接至3-氨基丙醇的肺炎链球菌3型重复单元的四糖和合成衍生自肺炎链球菌3型重复单元的六糖(Canadian Journal of Chemistry 2002,80,76-81)。其途径包括依次将4,6-亚苄基保护的葡萄糖分子与6-苯甲酰基保护的葡萄糖偶联，获得二-、三-或四糖。随后选择性除去亚苄基和选择性氧化伯6-OH基团引入羧酸基团。糖基化通过三氯乙酰亚氨酸酯活化的葡萄糖基供体和O-烯丙基保护的葡萄糖基受体实现。3-氨基丙醇间隔物作为3-叠氮基-1-丙醇引入和在低聚糖脱保护期间将叠氮化物基团还原为氨基。用方形酸酯偶联方法将3-氨基丙基糖苷缀合至载体蛋白质(也即CRM197，KLH或TT)。该途径使得该合成对更长的低聚糖操作复杂(elaborate)，原因是在每个步骤能够引入仅1个葡萄糖单元。
Rathwell等人(EP 2 851 092)公开不含蛋白质和肽的针对肺炎链球菌3型的合成疫苗。衍生自肺炎链球菌3型重复单元的低聚糖以顺序方式合成，也即将适当保护的葡萄糖二糖片段反复偶联至含间隔物的片段和随后通过选择性氧化4,6-脱保护的葡萄糖部分引入羧酸基团。胺官能化的低聚糖缀合至衍生自半乳糖基神经酰胺的鞘糖脂(GSL)。该低聚糖合成仅以中等收率进行，原因是葡萄糖醛酸部分3位的TBS基团(叔丁基二甲基甲硅烷基)。在这些反应条件下观察到TBS基团部分裂解。虽然碳水化合物的延伸用二糖片段实现，合成更长的低聚糖仍是操作复杂的。
Szabó等人(Tetrahedron:Asymmetry 2005,16,83)报告合成全苄基化的α-L-Fucp-(1→2)-β-D-Galp-(1→OMe)，具有在C-2'、C-3'或C-4'位的单个游离OH基团，用O-(2-萘基)甲基(Nap)作暂时保护基团。Nap基团作为缩醛引入和充当非参与基团。糖基化反应的收率高于80％。Nap基团通过用DDQ氧化裂解除去。
从而，现有技术公开衍生自肺炎链球菌3型重复单元的低聚糖的合成以及它们与蛋白质和鞘糖脂的缀合
然而这些合成是操作复杂的，含有许多冗繁的反应步骤，具有低或中等收率，和因此对于合成衍生自肺炎链球菌3型重复单元的具有多于4个重复单元的低聚糖并不实用。从而，现有技术中迄今并不知晓方便的合成。
本发明的目的是，提供合成四糖、六糖和八糖的方法，其衍生自肺炎链球菌3型重复单元，适于共价结合至载体蛋白质比如CRM197或TT或者至鞘糖脂。所述缀合物的药物组合物可用于预防和/或治疗与肺炎链球菌有关的疾病，和更特别地与肺炎链球菌3型有关的疾病。用所述缀合物免疫能够引起抗体对ST3肺炎球菌荚膜多糖的高滴定度。抗体呈现调理吞噬活性和杀菌活性。
本发明的目的通过独立权利要求的教导来解决。本发明的其它有利特征、方面和细节通过本申请的从属权利要求、说明书、附图和实施例变得明显。
发明概要
本发明涉及制备衍生自肺炎链球菌3型重复单元的式1四糖、六糖和八糖的合成方法，
其中R1和R2代表正交的保护基团，R3是芳基或烷基，r是1(1-A)或2(1-B)或3(1-C)和W是苄基或保护的连接体-L-P，用于缀合至载体蛋白质或鞘糖脂。
式1糖的形成通过在催化剂存在下将式2和3的两种糖偶联实现，
其中X是离去基团，优选酰基或硫醚基团比如硫烷基，r是1、2或3和W是苄基或保护的连接体-L-P，用于缀合至载体蛋白质或鞘糖脂。式2和3糖的偶联是合成更长糖类比如四糖1-A或六糖1-B或八糖1-C的关键步骤。
该改善的合成创新的一个方面依赖使用2-萘基甲基保护基团(Nap)。Nap基团能够容易地安装和在温和条件下选择性地除去，也即在DDQ(2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌)或硝酸铈铵(CAN)存在下或通过氢化除去。尽管容易在温和条件下除去，但含Nap的中间体在偶联反应条件下稳定。在合成期间并不由于不希望的Nap基团除去而发生副反应。其它保护基团比如TBS-醚在偶联反应条件下显示部分裂解。因此通过使用Nap基团实现增加的收率，特别是在形成式1糖当中。
令人惊讶地发现，全部Nap-保护的产品和中间体是结晶的。这有利于在合成期间的纯化程序。全部Nap-保护的产品和中间体能通过重结晶或通过研磨纯化。在许多步骤中避免使用时间-和物质-消耗性的柱色谱法来纯化。从而，使用Nap基团有利于进行合成并且还允许放大合成而不显著增加需要的时间和物质。
本发明的又一方面是含有保护的连接体的式1四糖、六糖和八糖使得在脱保护之后的还原端与蛋白质或鞘糖脂缀合成为可能。
本发明的又一方面是在还原端具有苄基的式1四糖、六糖或八糖能被转化为式8'的肺炎链球菌血清3型四糖、六糖或八糖，其中r是1或2或3。
本发明的又一方面涉及携带保护的连接体的式1糖的脱保护。在加酸的情况下除去缩醛基团，随后选择性氧化伯6-OH-基团。随后除去剩余的保护性基团和同时脱保护连接体获得脱保护的式8糖，
其中L可以是脂族或芳族残基，例如烷基(亚烷基)基团或苯基(亚苯基)基团和r是1或2或3。
在又一方面，携带反应性连接体的未保护的式8糖缀合至载体蛋白质或鞘糖脂。载体蛋白质能够是本领域尤其是疫苗开发领域已知的任何载体蛋白质。更特别地，载体蛋白质选自包含下述的组：白喉类毒素CRM197，破伤风类毒素(TT)，外膜蛋白质(OMP)，牛血清白蛋白，(BSA)，镇眼帽贝血蓝蛋白(KLH)，白喉类毒素(DT)，霍乱类毒素(CT)，重组体绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A(rEPA)，艰难梭菌(Clostridium difficile)毒素A(TcdA)，艰难梭菌(Clostridium difficile)毒素B(TcdB)。
从而，本文公开的合成方法相对现有技术合成方法具有巨大的出乎意料的优势：中间体产品是结晶的，偶联反应收率更高，需要更少反应步骤和中间体产品纯化更容易。因此，改善的方法消耗更少的时间和物质，成本更低和更容易放大，原因是在许多反应步骤中不再需要柱色谱法。
发明详述
定义
本文公开的连接体或间隔基团可以是任何部分，其使得将低聚糖偶联至载体分子即载体蛋白质或鞘糖脂成为可能。种类繁多的所述连接体基团是本领域已知的并且适宜的连接体基团能够取决于各自的载体分子来选择。例如，连接体可以是脂族或芳族残基，例如烷基(亚烷基)基团或苯基(亚苯基)基团，包含反应性官能团，比如氨基，优选伯氨基，(活化的)羧基，醛，叠氮化物，烯基或炔基。在特定的实施方式中，连接体可以包含聚醚或聚酯链。尤其是，连接体选自包含下述的组：伯烷基胺，具有末端醛的烷基或芳烷基残基，叠氮化物，炔或烯烃基团或(活化的)羧基，和烷基芳基和芳基残基，例如苯基残基，包含反应性胺，醛或叠氮化物基团，或(活化的)羧基。
在本发明的特定实施方式中，连接体是-(CH2)n-NH2，其中n是2至10，优选2至8，更优选2至5的整数。在本发明的又一实施方式中，连接体是-C2H4-O-C2H4。
本发明涉及制备ST3四糖以及携带连接体的ST3四糖的合成方法。
本发明还涉及制备ST3六糖以及携带连接体的ST3六糖的合成方法。
本发明也涉及制备ST3八糖以及携带连接体的ST3八糖的合成方法。
本发明提供很有利且有效的方法，其选择性且高收率地合成ST3四糖、ST3六糖、ST3八糖以及ST3四糖缀合物、ST3六糖缀合物和ST3八糖缀合物。
逆合成分析
制备式8-A四糖的本发明方法描述于下述方案1。合成方法包括下述步骤：
-从式18硫糖苷构建式14单糖构造单元
-将式14和15单糖构造单元或15和18单糖构造单元偶联至式2二糖，其中尤其注意确保仅形成β-端基异构体，
-将式2二糖转化为式3-A二糖，其包括将式2二糖与苯甲醇或保护的连接体偶联和随后选择性除去Nap-基团，
-将式2二糖和3-A偶联至在还原端携带苄基或保护的连接体的完全保护的式1四糖，其中尤其注意确保仅形成β-端基异构体，
-选择性除去完全保护的式1-A四糖的缩醛基团，
-引入羧酸基团如下：选择性氧化保护的式4-A四糖的伯6-OH-基团，
-除去剩余的保护基团，也即Nap，R1，R2和连接体的保护基团，获得式8-A的携带连接体的脱保护的四糖；或除去剩余的保护基团和还原端苄基，获得式8'-A的脱保护的四糖。
方案1.式8-A四糖的逆合成分析。
制备式8-B六糖和式8-C八糖的本发明方法描述于下文方案2。合成方法包括下述步骤：
-通过选择性除去Nap-基团将式1-B/1-C糖转化为式3-B/3-C糖，
-将式2和3-B/3-C的糖偶联至在还原端携带苄基或保护的连接体的完全保护的式1-B/1-C的糖，其中尤其注意确保仅形成β-端基异构体，
-选择性除去完全保护的式1-B/1-C的糖的缩醛基团，
-引入羧酸基团如下：选择性氧化式4-B/4-C的保护的糖的伯6-OH-基团，
-除去剩余的保护基团，也即Nap，R1，R2和连接体的保护基团，获得式8-B/8-C的携带连接体的脱保护的糖；或除去剩余的保护基团和还原端苄基，获得式8'-B的脱保护的六糖或式8'-C的脱保护的八糖。
方案2.式8-B六糖和式8-C八糖的逆合成分析。
方法遵循的途径是：首先构建仅含葡萄糖片段的低聚糖和随后将每一个第二葡萄糖片段氧化为葡萄糖醛酸片段。
保护基团策略
四糖合成必需的是提供一组正交的保护基团。为了从式2二糖构建式8糖，在全部其它保护基团存在下选择性且独立除去Nap-基团和保护基团R3的能力是必需的。术语"保护基团"或"保护性基团"如本文所用是指有机合成中一般使用的基团，优选用于保护胺、羟基、硫醇、亚胺、羰基、羧基或其它常见官能团，和特别优选用于保护胺和羟基。保护基团的特征在于，它们在合成期间施用的反应条件下稳定，也即它们不裂解脱去或发生不希望的副反应和阻止它们所键合至的所保护的官能团的任何反应。额外地，保护基团加以选择从而在收率或立体选择性方面不阻碍或不影响所进行的反应步骤。
正交的保护基团R1和R2在合成期间存在和在最终脱保护步骤除去。R1和R2因此视为持久正交的保护基团。另一方面，Nap-基团和R3在合成期间除去和因此是暂时保护基团。
为了在持久正交的保护基团R1和R2存在下选择性且独立地除去Nap-基团，持久的保护基团必须对氧化剂也即DDQ和CAN稳定。如本文所用术语"氧化稳定的保护基团"是指保护基团，其在用DDQ或CAN作试剂进行的氧化反应期间稳定。从而，持久正交的保护基团R1和R2必须是氧化稳定的。此外，持久正交的保护基团R1和R2必须在酸性条件下稳定，所述条件用来除去糖1葡萄糖部分4和6位安装的缩醛保护基团并且其也用于糖基化反应当中。糖1葡萄糖部分4和6位安装的缩醛保护基团能够通过在催化量酸存在下用亲核物质处理而除去。从而，正交的保护基团R1和R2在用亲核物质和催化量酸处理糖的情况下必须是稳定的。能够用来除去糖1葡萄糖部分4和6位安装的缩醛保护基团的亲核物质的实例包括但不限于：水，醇和硫醇。优选，亲核物质是硫醇比如乙硫醇(EtSH)，甲苯基硫醇，苯硫醇，乙烯硫醇和更优选亲核物质是乙硫醇(EtSH)。能够以催化量用来除去糖1葡萄糖部分4和6位安装的缩醛保护基团的酸的实例包括但不限于下述质子酸：甲磺酸，对甲苯磺酸，樟脑磺酸(CSA)和三氟甲磺酸和路易斯酸Er(OTf)3。
糖基化反应发生在用活化剂或活化试剂处理供体和受体之时：技术人员已知的活化剂或活化试剂包括但不限于：AgOTf，BF3·OEt2，三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(TMSOTf)，三氟甲磺酸(TfOH)，三氟甲磺酸酐(Tf2O，三氟甲磺酸酐)，镧系元素(III)三氟甲磺酸盐，NIS/AgOTf，NIS/TfOH或二甲基(甲硫基)锍三氟甲磺酸盐(DMTST)。优选活化剂或活化试剂是NIS/TfOH。
于是，持久正交的保护基团R1和R2在用任何上述活化试剂处理糖的情况下必须是稳定的。
如本文所用术语"酸稳定的保护基团"是指保护基团，其在亲核物质和催化量酸存在下以及在活化试剂存在下是稳定的。
优选，酸稳定的正交保护基团R1和R2是保护基团，其在乙硫醇和对甲苯磺酸存在下以及在NIS/TfOH存在下是稳定的。
因而，持久正交的保护基团R1和R2必须是氧化稳定的，也即在用除去Nap保护基团所需要的氧化剂(例如DDQ或CAN)处理的情况下必须是稳定的，以及酸稳定的。
正交的保护基团R1，其也封闭2-OH-基团，其选择的目的是在糖基化反应中促进形成β-端基异构体，原因是ST3重复单元仅由葡萄糖醛酸和葡萄糖的β-端基异构体构成。形成β-端基异构体能够得到显著促进的条件是葡萄糖基供体2-OH-基团处所用的保护基团参与糖基化反应从而其阻隔异头物中心的下侧。因此，主要形成β-端基异构体。所述参与基团是现有技术已知的。从而，正交的保护基团R1优选是酯基团，更优选苯甲酰基，氯乙酰基(ClAc)，乙酰基或新戊酰基(Piv)基团和甚至更优选苯甲酰基。
对于正交的保护基团R2相同限制也适用，也即氧化稳定的和酸稳定的。然而，R2不需要参与偶联反应。R2可以是酯基团，苄基或TBS-基团。更优选，R2是苄基。
缩醛保护基团R3可以是任何烷基或芳基。优选是苯基和取代的苯基如4-甲氧基苯基，4-硝基苯基和2-硝基苯基。甚至更优选的是R3代表苯基。
相应地，在ST3四糖、ST3六糖或ST3八糖合成期间，连接体的官能团必须用氧化稳定的和酸稳定的保护基团保护。特别地，在官能团是伯胺的情况下，其能够优选但不排它地被保护为：-N(Bn)Cbz，-NHCbz，-N3，-NBn2，-NAllyl2或-NPhth。在保护的官能团能够描述为-NR’R”的情况下，-NPhth能够理解为R’和R”与它们连接至的氮原子一起形成邻苯二甲酰亚胺或者R’和R”一起形成邻苯二甲酰。脱保护或将所述基团转化为伯胺的方法是技术人员已知的。
本文所用的术语"偶联反应"是指在两个糖之间的反应，其中一个还原端发生反应，或者术语是指一个糖与醇之间的反应。因而，O-糖基化方法用于本发明合成方法的偶联反应步骤中。这些O-糖基化方法是现有技术已知的。一般地，它们需要在供体还原端的离去基团，其在催化剂存在下活化。离去基团能够取决于所用催化剂选择和可以是例如：卤素，-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc，-SR5，-SO-Ph，-O-(CH2)3-CH＝CH2，-O-P(OR5)2，-O-PO(OR5)2，-O-CO-OR5，-O-CO-SR5，-O-CS-SR5，-O-CS-OR5，
其中R5可以是任何烷基或芳基。
在偶联或糖基化反应中，可以使用本领域已知的用于O-糖基化反应的任何适宜的催化剂或助催化剂或活化剂或其组合，也即质子酸或路易斯酸。特别地，这些酸能够选自非穷举的列表，其包含AgOTf，BF3·OEt2，三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸盐(TMSOTf)，三氟甲磺酸(TfOH)，三氟甲磺酸酐(Tf2O，三氟甲磺酸酐)，镧系元素(III)三氟甲磺酸盐，NIS/AgOTf，NIS/TfOH或二甲基(甲硫基)锍三氟甲磺酸盐(DMTST)。
构建单糖构造单元14和18
单糖构造单元14制备自硫糖苷18。制备硫糖苷18是技术人员已知的，特别是在R1＝-Bz，R3＝-Ph和R5＝-Et的情况下。硫糖苷18能够起始自葡萄糖二丙酮化合物21(参见方案3)形成或也可商购，在R1＝-Bz，R3＝-Ph和R5＝-Et的情况下如此。硫糖苷18，25，26和27的残基R5可以含有任何烷基或芳基。优选，R5是乙基或甲苯基。
方案3.合成单糖构造单元18。反应条件和试剂：i)NapBr，NaH，DMF；ii)
IR120(H+)，H2O，80℃；iii)Ac2O，吡啶；iv)R5-SH，BF3·OEt2，CH2Cl2；v)NaOMe，MeOH；vi)R3-CH(OMe)2，CSA；vii)R1-Cl，吡啶。
起始自葡萄糖二丙酮化合物21，3-OH基团在氢化钠存在下被2-萘基甲基溴封闭。随后除去葡萄糖衍生物22的丙酮化合物基团得到3-Nap-保护的葡萄糖23，然后将其完全乙酰化的。全乙酰化的葡萄糖24然后转化为硫糖苷25。脱乙酰化实现如下：在碱存在下和用醛或优选相应的二烷基缩醛和强酸缩醛化，4-OH和6-OH基团被选择性地封闭。最终，26剩余的2-OH-基团作为酯保护。
制备式14单糖
根据本发明从式18的单糖构造单元合成式14单糖，如下文方案4所述。
方案4.从单糖构造单元18合成单糖10。反应条件和试剂：i)NIS，TfOH，CH2Cl2；ii)Et3N，CH2Cl2；iii)Z1引入。
本发明方法包括下述步骤：
a3)提供式18单糖
其中
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol；
b3)将式18单糖转化为式17单糖
其中
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基；和
c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖
其中
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基；
和
d3)将式16单糖转化为式14单糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基
和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol。
优选的是方法包括下述步骤：
a3)提供式18单糖，其中
R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖，其中Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5。
更优选，根据本发明的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1代表-Bz，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和；d3)将式14单糖转化为式14单糖，其中Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5。
更优选，根据本发明的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3代表，-Ph，R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph,和-Tol；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖，其中Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc或-SR5。
甚至更优选，根据本发明的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，R5代表-Et；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖，其中Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol。
甚至更优选，根据本发明的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖，其中Z1代表-O-C(＝NPh)-CF3。
甚至更优选，根据本发明的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1选自-Bz和-Ac，R3代表-Ph，R5代表-Et；
b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖，其中Z1代表-O-C(＝NPh)-CF3。
优选的是式18单糖向式17单糖的转化在NIS和催化量强酸存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-20℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式18单糖向式17单糖的转化在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在水和CH2Cl2的混合物中在0℃进行。
还优选的是式17单糖向式16单糖的反应在碱存在下在非质子非极性溶剂中进行。甚至更优选的是式17单糖向式16单糖的反应在三乙胺存在下在CH2Cl2中进行。
优选的是式16单糖向式14单糖的转化用亚氨代甲酰氯或三卤化乙腈在碱存在下在非质子非极性溶剂中实现。更优选的是，式16单糖向式14单糖的转化用2,2,2-三氟-N-苯基亚氨代乙酰氯在Cs2CO3和/或K2CO3存在下在二氯甲烷中实现。根据本发明，式14单糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式14单糖的方法包括下述步骤：a3)提供式18单糖其中R1代表苯甲酰基，R3是苯基和R5代表乙基；b3)将式18单糖转化为式17单糖；和c3)用三乙胺处理式17单糖，获得式16单糖；和d3)将式16单糖转化为式14单糖其中Z1代表-O-C(＝NPh)-CF3。
制备式2二糖
根据本发明制备式2二糖包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基
和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，
和单糖构造单元15
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，
-Ph和-Tol；
和
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol。
优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及单糖构造单元15其中R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
还优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1代表-Bz，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及单糖构造单元15其中R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
甚至更优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3代表-Ph和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及单糖构造单元15其中R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
甚至更优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及单糖构造单元15其中R2代表-Bn，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
甚至更优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及单糖构造单元15其中R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，X代表-OAc或-SEt；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
甚至更优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP和Z1代表-O-C(＝NPh)-CF3，以及单糖构造单元15其中R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖
甚至更优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1选自-Bz，和-Ac，R3代表-Ph，和Z1代表-O-C(＝NPh)-CF3，以及单糖构造单元15其中R2代表-Bn和X是-OAc或-SEt；b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量路易斯酸存在下在非质子非极性溶剂中在-78℃至-20℃的温度进行。更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量TMSOTf或TfOH存在下在非质子非极性溶剂中在-78℃至-20℃的温度进行。更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量TMSOTf或TfOH存在下在二氯甲烷或甲苯中在-78℃至-20℃的温度进行。更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量TMSOTf或TfOH存在下在非质子非极性溶剂中在-78℃至-20℃的温度进行。甚至更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量路易斯酸存在下在非质子非极性溶剂中在-60℃至-20℃的温度进行。甚至更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量路易斯酸存在下在非质子非极性溶剂中在-60℃至0℃的温度进行。甚至更优选，将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联在催化量TMSOTf或TfOH存在下在二氯甲烷或甲苯中在-40℃进行。根据本发明，式2二糖优选通过重结晶以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式2二糖的方法包括下述步骤：
a2)提供式14单糖构造单元其中R1代表-Bz，R3是苯基和Z1是-O-C(＝NPh)-CF3；和单糖构造单元15其中R2是-Bn和X代表-OAc或-SEt；
b2)在催化量TMSOTf或TfOH存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生式2二糖。
制备式3-A二糖
根据本发明制备式3-A二糖包括下述步骤：
a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基
或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；
b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖；
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基
或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；和b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
更优选，制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在催化剂存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或-N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；b6)通过用氧化剂处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
优选的是，将式2二糖与醇HO-W反应生成式9二糖在NIS和催化量强酸存在下在非质子非极性溶剂中在-30℃至10℃的低温进行。更优选的是，将式2二糖与醇HO-W反应生成式9二糖在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在非质子非极性溶剂中在-30℃至10℃的低温进行。更优选的是，将式2二糖与醇HO-W反应生成式9二糖在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-30℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，将式2二糖与醇HO-W反应生成式9二糖在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-20℃至0℃的低温进行。特别优选的是，将式2二糖与醇HO-W反应生成式9二糖在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-10℃至0℃的低温进行。根据本发明，式9二糖优选通过重结晶以晶体形式获得。
优选，将式9二糖转化为式3-A二糖通过用氧化剂处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式9二糖转化为式3-A二糖通过用DDQ处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式9二糖转化为式3-A二糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在-10℃至20℃的降低的温度进行。甚至更优选，将式9二糖转化为式3-A二糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在0℃至10℃的降低的温度进行。
从而，特别优选的是制备式3-A二糖的本发明方法包括下述步骤：a6)在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下将式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖其中R1代表-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；和b6)通过用DDQ处理将式9二糖转化为式3-A二糖。
式2二糖和式3糖偶联生成保护的式1糖
根据本发明制备保护的式1糖包括下述步骤：
A)提供式2二糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
和式3糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，
r是1，2或3；
B)在催化剂存在下将式2二糖与式3糖偶联，获得式1糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
式2二糖和式3-A二糖偶联生成保护的式1-A四糖
根据本发明制备保护的式1-A四糖包括下述步骤：
A)提供式2二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；和式3-A二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；
B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-,，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
在本发明的又一方面，制备保护的式1*四糖包括下述步骤：
A)提供式2二糖
其中
R1代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；和式3*二糖
其中
R1代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；
B)在催化剂存在下将式2二糖与式3*二糖偶联，获得式1*四糖
其中
R1代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5，和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu或-PMP，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac或-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SEt，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5而R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SEt和式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
优选，式2二糖与式3-A二糖的偶联反应在NIS和催化量强酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-A二糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-A二糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-20℃至5℃的低温进行。甚至更优选，式2二糖与式3-A二糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-10℃至0℃的低温进行。根据本发明，保护的式1-A四糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备保护的式1-A四糖的本发明方法包括下述步骤：A)提供式2二糖其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，X代表-OAc或-SEt和式3-A二糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下将式2二糖与式3-A二糖偶联，获得式1-A四糖。
制备式4-A四糖
根据本发明制备式4-A四糖包括下述步骤：
选择性除去缩醛基团通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行，产生式4-A四糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：通过在催化量酸存在下用亲核物质处理式1-A四糖来进行选择性除去缩醛基团，产生式4-A四糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是，选择性除去式1-A四糖的缩醛基团在催化量酸和亲核物质比如硫醇、水或醇存在下进行。甚至更优选的是，选择性除去式1-A四糖的缩醛基团在催化量磺酸和硫醇存在下进行。甚至更优选的是，选择性除去式1-A四糖的缩醛基团在催化量PTSA和硫醇存在下进行。特别优选的是，选择性除去式1-A四糖的缩醛基团在催化量PTSA和乙硫醇存在下进行。根据本发明，式4-A四糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式4-A四糖的本发明方法包括下述步骤：选择性除去缩醛基团通过用乙硫醇处理式1-A四糖在催化量PTSA存在下进行，产生式4-A四糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式11-A四糖
在本发明备择实施方式中，式11-A四糖制备如下：
缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用硼烷处理式1-A四糖在催化量路易斯酸存在下进行，产生式11-A糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，R3是-Ph，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式1-A四糖缩醛基团的还原性除去在催化量路易斯酸和硼烷比如BH3、BH3·NMe2、BH3·THF存在下进行。甚至更优选的是，式1-A四糖缩醛基团的还原性除去在催化量三氟甲磺酸银和BH3存在下进行。根据本发明，式11-A四糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式11-A四糖的本发明方法包括下述步骤：缩醛基团的还原性除去通过用BH3处理式1-A四糖在催化量三氟甲磺酸银存在下进行，产生式11-A糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式5-A四糖二酸
根据本发明制备式5-A四糖二酸包括下述步骤：
进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac，和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是，式4-A四糖的氧化在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式4-A四糖的氧化在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式4-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式4-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式4-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是，式4-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式5-A四糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式5-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式4-A四糖的氧化，产生式5-A四糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式12-A四糖二酸
根据本发明制备式12-A四糖二酸包括下述步骤：
进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是，式11-A四糖的氧化在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式11-A四糖的氧化在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式11-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式11-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是，式11-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是，式11-A四糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式12-A四糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式12-A四糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式11-A四糖的氧化，产生式12-A四糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式7-A四糖
根据本发明制备式7-A四糖包括下述步骤：在碱存在下进行式5-A四糖保护基团R1的除去，产生式7-A四糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式5-A四糖保护基团R1产生式7-A四糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式7-A四糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式7-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在甲醇钠存在下在甲醇中进行式5-A四糖保护基团R1的除去，产生式7-A四糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式13-A四糖
根据本发明制备式13-A四糖包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式12-A四糖保护基团R1产生式13-A四糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-A四糖保护基团R1产生式13-A四糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-A四糖保护基团R1产生式13-A四糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式12-A四糖保护基团R1产生式13-A四糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式13-A四糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式13-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在甲醇钠存在下在甲醇中进行式12-A四糖保护基团R1的除去，产生式13-A四糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式8-A四糖
根据本发明制备式8-A四糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式7-A四糖，产生式8-A四糖或式8'-A四糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-和
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式7-A四糖，产生式8-A四糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下进行式7-A四糖的氢化反应，产生式8-A四糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式7-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式7-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式7-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式7-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式7-A四糖，产生式8-A四糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
在本发明备择实施方式中，制备式8-A四糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式13-A四糖，产生式8-A四糖或式8'-A四糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-和
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式13-A四糖，产生式8-A四糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下进行式13-A四糖的氢化反应，产生式8-A四糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式13-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式13-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式13-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式13-A四糖生成式8-A四糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-A四糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式13-A四糖，产生式8-A四糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式3-B四糖
根据本发明制备式3-B四糖包括下述步骤：
b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖；
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基
或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-A四糖的本发明方法包括下述步骤b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
更优选，制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或-N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
优选，将式1-A四糖转化为式3-B四糖通过用氧化剂处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式1-A四糖转化为式3-B四糖通过用DDQ处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式1-A四糖转化为式3-B四糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在-10℃至20℃的降低的温度进行。甚至更优选，将式1-A四糖转化为式3-B四糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在0℃至10℃的降低的温度进行。
从而，特别优选的是制备式3-B四糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用DDQ处理将式1-A四糖转化为式3-B四糖，其中R1代表-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
式2二糖和式3-B四糖偶联生成保护的式1-B六糖
根据本发明制备保护的式1-B六糖包括下述步骤：
A)提供式2二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；和式3-B四糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；
B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-,，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5，和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu或-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac或-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SEt，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式3-B四糖与式2二糖偶联，获得式1-B六糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SEt，以及式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
优选，式2二糖与式3-B四糖的偶联反应在NIS和催化量强酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-B四糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-B四糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-20℃至5℃的低温进行。甚至更优选，式2二糖与式3-B四糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-10℃至0℃的低温进行。根据本发明，保护的式1-B六糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备保护的式1-B六糖的本发明方法包括下述步骤：A)提供式2二糖其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，X代表-OAc或-SEt和式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下将式2二糖与式3-B四糖偶联，获得式1-B六糖。
制备式4-B六糖
根据本发明制备式4-B六糖包括下述步骤：
在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是选择性除去式1-B六糖的缩醛基团在催化量酸和亲核物质比如硫醇、水或醇存在下进行。甚至更优选的是选择性除去式1-B六糖的缩醛基团在催化量磺酸和硫醇存在下进行。甚至更优选的是选择性除去式1-B六糖的缩醛基团在催化量PTSA和硫醇存在下进行。特别优选的是，选择性除去式1-B六糖的缩醛基团在催化量PTSA和乙硫醇存在下进行。根据本发明，式4-B六糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式4-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量PTSA存在下通过用乙硫醇处理式1-B六糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-B六糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式11-B六糖
在本发明备择实施方式中，式11-B六糖制备如下：
在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B六糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，R3是-Ph，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式1-B六糖缩醛基团的还原性除去在催化量路易斯酸和硼烷比如BH3、BH3·NMe2、BH3·THF存在下进行。甚至更优选的是式1-B六糖缩醛基团的还原性除去在催化量三氟甲磺酸银和BH3存在下进行。根据本发明，式11-B六糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式11-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量三氟甲磺酸银存在下通过用BH3处理式1-B六糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-B糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式5-B六糖二酸
根据本发明制备式5-B六糖二酸包括下述步骤：
进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式4-B六糖的氧化在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式4-B六糖的氧化在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式4-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式4-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式4-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是式4-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式5-B六糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式5-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式4-B六糖的氧化，产生式5-B六糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式12-B六糖二酸
根据本发明制备式12-B六糖二酸包括下述步骤：
进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac，和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式11-B六糖的氧化在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式11-B六糖的氧化在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式11-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式11-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是式11-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是，式11-B六糖的氧化在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式12-B六糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式12-B六糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式11-B六糖的氧化，产生式12-B六糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式7-B六糖
根据本发明制备式7-B六糖包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式5-B六糖保护基团R1生成式7-B六糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-B六糖保护基团R1生成式7-B六糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-B六糖保护基团R1生成式7-B六糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式5-B六糖保护基团R1生成式7-B六糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式7-B六糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式7-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在甲醇钠存在下在甲醇中进行式5-B六糖保护基团R1的除去，产生式7-B六糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式13-B六糖
根据本发明制备式13-B六糖包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在碱存在下进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式12-B六糖保护基团R1生成式13-B六糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-B六糖保护基团R1生成式13-B六糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-B六糖保护基团R1生成式13-B六糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式12-B六糖保护基团R1生成式13-B六糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式13-B六糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式13-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在甲醇钠存在下在甲醇中进行式12-B六糖保护基团R1的除去，产生式13-B六糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式8-B六糖
根据本发明制备式8-B六糖或式8'-B六糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式7-B六糖，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-和
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式7-B六糖，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下进行式7-B六糖的氢化反应，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式7-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式7-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行的。甚至更优选的是式7-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式7-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式7-B六糖，产生式8-B六糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数或式8'-B六糖。
在本发明备择实施方式中，制备式8-B六糖或式8'-B六糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式13-B六糖，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式13-B六糖，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下进行式13-B六糖的氢化反应，产生式8-B六糖或式8'-B六糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式13-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式13-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式13-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是，式13-B六糖生成式8-B六糖或式8'-B六糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-B六糖或式8'-B六糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式13-B六糖，产生式8-B六糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数或式8'-B六糖。
制备式3-C六糖
根据本发明制备式3-C六糖包括下述步骤：
b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖；
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基
或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
更优选，制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用氧化剂处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或-N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
优选，将式1-B六糖转化为式3-C六糖通过用氧化剂处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式1-B六糖转化为式3-C六糖通过用DDQ处理在非质子非极性溶剂中在-10℃至20℃的降低的温度进行。更优选，将式1-B六糖转化为式3-C六糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在-10℃至20℃的降低的温度进行。甚至更优选，将式1-B六糖转化为式3-C六糖通过用DDQ处理在二氯甲烷中在0℃至10℃的降低的温度进行。
从而，特别优选的是制备式3-C六糖的本发明方法包括下述步骤：b6)通过用DDQ处理将式1-B六糖转化为式3-C六糖，其中R1代表-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数。
式2二糖和式3-C六糖偶联生成保护的式1-C八糖
根据本发明制备保护的式1-C八糖包括下述步骤：
A)提供式2二糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
和式3-C六糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；
B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-,，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5，和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu或-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac或-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SEt和式3-B四糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式3-C六糖与式2二糖偶联，获得式1-C八糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-，n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3选自-Me，-Et，-Ph，-tBu和-PMP，X代表-OAc或-SR5和R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
甚至更优选的是本发明方法包括下述步骤：
A)提供式2二糖其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3代表-Ph，X代表-OAc或-SEt，以及式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在催化剂存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
优选，式2二糖与式3-C六糖的偶联反应在NIS和催化量强酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-C六糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在非质子非极性溶剂中在-20℃至10℃的低温进行。更优选，式2二糖与式3-C六糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-20℃至5℃的低温进行。甚至更优选，式2二糖与式3-C六糖的偶联反应在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下在二氯甲烷中在-10℃至0℃的低温进行。根据本发明，保护的式1-C八糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备保护的式1-C八糖的本发明方法包括下述步骤：A)提供式2二糖其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是苯基，X代表-OAc或-SEt和式3-C六糖其中W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-(CH2)n-，n是选自2，3，4和5的整数；B)在NIS和催化量三氟甲磺酸存在下将式2二糖与式3-C六糖偶联，获得式1-C八糖。
制备式4-C八糖
根据本发明制备式4-C八糖包括下述步骤：
在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量酸存在下通过用亲核物质处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是选择性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量酸和亲核物质比如硫醇、水或醇存在下进行。甚至更优选的是选择性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量磺酸和硫醇存在下进行。甚至更优选的是选择性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量PTSA和硫醇存在下进行。特别优选的是选择性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量PTSA和乙硫醇存在下进行。根据本发明，式4-C八糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式4-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量PTSA存在下通过用乙硫醇处理式1-C八糖进行选择性除去缩醛基团，产生式4-C八糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式11-C八糖
在本发明备择实施方式中，式11-C八糖制备如下：
在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C八糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量路易斯酸存在下通过用硼烷处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，R3是-Ph，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是还原性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量路易斯酸和硼烷比如BH3、BH3·NMe2、BH3·THF存在下进行。甚至更优选的是还原性除去式1-C八糖的缩醛基团在催化量三氟甲磺酸银和BH3存在下进行。根据本发明，式11-C八糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式11-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化量三氟甲磺酸银存在下通过用BH3处理式1-C八糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11-C八糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式5-C八糖二酸
根据本发明制备式5-C八糖二酸包括下述步骤：
进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是氧化式4-C八糖在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式4-C八糖在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式4-C八糖在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式4-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式4-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是氧化式4-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式5-C八糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式5-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式4-C八糖的氧化，产生式5-C八糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式12-C八糖二酸
根据本发明制备式12-C八糖二酸包括下述步骤：
进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选，制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是氧化式11-C八糖在至少一种氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式11-C八糖在催化量的第一氧化剂和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式11-C八糖在催化量的TEMPO和第二氧化剂存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式11-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和非质子非极性溶剂的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。甚至更优选的是氧化式11-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在-10℃至10℃的低温进行。特别优选的是氧化式11-C八糖在催化量的TEMPO和二(乙酰氧基)碘苯(BAIB)存在下在水和二氯甲烷的混合物中在0℃进行。根据本发明，式12-C八糖二酸优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式12-C八糖二酸的本发明方法包括下述步骤：用催化量的TEMPO和BAIB进行式11-C八糖的氧化，产生式12-C八糖二酸，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式7-C八糖
根据本发明制备式7-C八糖包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式7-C八糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式5-C八糖的保护基团R1生成式7-C八糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-C八糖的保护基团R1生成式7-C八糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式5-C八糖的保护基团R1生成式7-C八糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式5-C八糖的保护基团R1生成式7-C八糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式7-C八糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式7-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式5-C八糖的保护基团R1在甲醇钠存在下在甲醇中进行，产生式7-C八糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式13-C八糖
根据本发明制备式13-C八糖包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1代表-Bz，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
更优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2代表-Bn，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz，L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
甚至更优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，R2选自-Bz，-Ac，-Piv，-Bn和-TBS，R3是芳基，W代表-L-P或-Bn，P是-NR’R”，R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
甚至更优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在碱存在下进行，产生式13-C八糖，其中R1选自-Bz和-Ac，R2代表-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)Cbz或N3，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选，除去式12-C八糖的保护基团R1生成式13-C八糖在碱存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-C八糖的保护基团R1生成式13-C八糖在甲醇钠存在下在质子溶剂中在25℃至60℃的升高的温度进行。更优选，除去式12-C八糖的保护基团R1生成式13-C八糖在甲醇钠存在下在醇中在30℃至50℃的升高的温度进行。甚至更优选，除去式12-C八糖的保护基团R1生成式13-C八糖在甲醇钠存在下在甲醇中在40℃进行。根据本发明，式13-C八糖优选通过重结晶或研磨以晶体形式获得。
从而，特别优选的是制备式13-C八糖的本发明方法包括下述步骤：除去式12-C八糖的保护基团R1在甲醇钠存在下在甲醇中进行，产生式13-C八糖，其中R1是-Bz，R2是-Bn，R3是-Ph，W代表-L-P或-Bn，P是-N(Bn)CBz，L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
制备式8-C八糖
根据本发明制备式8-C八糖或式8'-C八糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式7-C八糖，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-和
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式7-C八糖，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：式7-C八糖的氢化反应在催化剂存在下进行，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式7-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式7-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式7-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式7-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式7-C八糖，产生式8-C八糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数或式8'-C八糖。
在本发明备择实施方式中，制备式8-C八糖或式8'-C八糖包括下述步骤：
在催化剂存在下氢化式13-C八糖，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-和
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数。
优选，制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在催化剂存在下氢化式13-C八糖，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，其中L代表-C2H4-O-C2H4-或-(CH2)n-和n是选自2，3，4，5，6，7和8的整数。更优选，制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：式13-C八糖的氢化反应在催化剂存在下进行，产生式8-C八糖或式8'-C八糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数。
优选的是式13-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。更优选的是式13-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯催化剂存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式13-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在醇和非质子非极性溶剂的混合物中进行。甚至更优选的是式13-C八糖生成式8-C八糖或式8'-C八糖的氢化反应在钯/碳(Pd/C)和/或Pd(OH)2/C存在下在tBuOH和二氯甲烷的混合物中进行。
从而，特别优选的是制备式8-C八糖或式8'-C八糖的本发明方法包括下述步骤：在Pd/C和/或Pd(OH)2/C存在下氢化式13-C八糖，产生式8-C八糖，其中L代表-(CH2)n-和n是选自2，3，4和5的整数或式8'-C八糖。
本发明提供很有利且有效的方法，用于选择性且高收率地合成式8-A和式8'-A的四糖，式8-B和式8'-B的六糖和式8-C和式8'-C的八糖以及它们的缀合物。
这些方法牵涉使用通式1’、1”、1”'、1e、1f、1h、2a、4’、4”、4e、4f、5’、5”、5e、5f、7’、7”、7e、7f、9’、9”、9e、9f和14a分子中的一种或多种，其中n是选自2、3、4、5、6、7、8、9和10的整数，而r是1或2或3，如下文显示或定义。优选n是选自2，3，4和5的整数。特别优选的是，n选自2和5的情况。
ST3糖类缀合物
制备本发明ST3四糖缀合物，ST3六糖缀合物或ST3八糖缀合物的方法一般包括将本发明的携带连接体或间隔基团的ST3四糖、ST3六糖或ST3八糖，尤其是其中连接体是-(CH2)n-NH2，其中n是2至10优选2至5的整数，也即式8糖，与载体蛋白质或鞘糖脂偶联。
更特别地，制备本发明ST3四糖缀合物，ST3六糖缀合物或ST3八糖缀合物的方法一般包括下述2个步骤：
a4)在加碱的情况下将式8糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4，5，6，7，8，9和10；与连接体J1-L2-J2反应，产生式28糖，
其中L代表-(CH2)n-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，
r是1或2或3，
J3是J1或J2，
L2选自：
-C(O)-，-E-，-C(O)-NH-NH-C(O)-,
E选自
m，n1，o和p相互独立地代表1至10的整数和
J1和J2相互独立地选自
和b4)将式28糖偶联至载体蛋白质或鞘糖脂。
更优选，制备本发明ST3四糖缀合物的方法包括a4)在加碱的情况下将式8-A四糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-A四糖，和b4)将式28-A四糖偶联至载体蛋白质或鞘糖脂。
在根据本发明的一种优选实施方式中，制备ST3四糖缀合物的所述方法包括a4)在加碱的情况下将式8-A四糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-A四糖，和b4)将式28-A四糖偶联至载体蛋白质。
在根据本发明甚至更优选的实施方式中，制备ST3四糖缀合物的所述方法包括a4)在加入三乙胺的情况下将式8-A四糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-A四糖，和b4)将式28-A四糖偶联至CRM197载体蛋白质。
更优选，制备本发明ST3六糖缀合物的方法包括a4)在加碱的情况下将式8-B六糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-B六糖，和b4)将式28-B六糖偶联至载体蛋白质或鞘糖脂。
在根据本发明的一种优选实施方式中，制备ST3六糖缀合物的所述方法包括a4)在加碱的情况下将式8-B六糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-B六糖，和b4)将式28-B六糖偶联至载体蛋白质。
在根据本发明甚至更优选的实施方式中，制备ST3六糖缀合物的所述方法包括a4)在加入三乙胺的情况下将式8-B六糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-B六糖，和b4)将式28-B六糖偶联至CRM197载体蛋白质。
更优选，制备本发明ST3八糖缀合物的方法包括a4)在加碱的情况下将式8-C八糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-C八糖，和b4)将式28-C八糖偶联至载体蛋白质或鞘糖脂。
在根据本发明的一种优选实施方式中，制备ST3八糖缀合物的所述方法包括a4)在加碱的情况下将式8-C八糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-C八糖，和b4)将式28-C八糖偶联至载体蛋白质。
在根据本发明甚至更优选的实施方式中，制备ST3八糖缀合物的所述方法包括a4)在加入三乙胺的情况下将式8-C八糖其中L是-(CH2)n-，其中n选自2，3，4和5；与连接体二(N-琥珀酰亚胺基)己二酸酯反应，产生式28-C八糖，和b4)将式28-C八糖偶联至CRM197载体蛋白质。
包括下述实施例以展示本发明的优选实施方式。本领域技术人员应认识到，下述实施例中公开的技术遵循发明人发现的技术良好地在本发明实践中起作用，并且从而能够视为构成其实施的优选模式。然而，鉴于本公开，本领域技术人员应理解在已公开的特定实施方式中能够进行许多变化，并且仍然获得相同或相似的结果而不背离本发明的主旨和范围。
鉴于本申请的描述，本发明的进一步变型和各方面的备择实施方式对本领域技术人员来说是明显的。相应地，本说明书仅解释为示例性的并且用于教导本领域技术人员进行本发明的一般方式的意图。应理解，本文显示和描述的本发明的形式是实施方式的实例。要素和物质可以取代本文说明和描述的那些，部分和过程可以颠倒，并且本发明的某些特征可以独立地使用，在获益于本发明的描述之后这全部对本领域技术人员来说是明显的。可以对本文描述的要素进行可以而不背离权利要求中描述的本发明主旨和范围。
实施例
缩写
NIS N-碘琥珀酰亚胺；
TfOH 三氟甲磺酸
h 小时
d 天
DCM 二氯甲烷
TLC 薄层色谱法
MS 分子筛
TEMPO 2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧基，自由基
Cbz 羰氧基苄基
Nap 2-萘基甲基
BAIB 二(乙酰氧基)碘苯
PTSA 对甲苯磺酸
PMP 对-甲氧基苯基
r.t./RT 室温
RM 反应混合物
一般信息
除非另有说明，使用商业级溶剂。无水溶剂得自Waters无水溶剂系统。色谱法溶剂在使用前蒸馏。敏感反应在加热干燥的玻璃仪器和在氩气氛下进行。分析薄层色谱(TLC)在硅胶60F254玻璃板上进行，预涂有0.25mm厚的硅胶。斑点通过用香草醛溶液(6％(w/v)香草醛和10％(v/v)硫酸，在95％EtOH中)或Hanessian染剂(5％(w/v)钼酸铵、1％(w/v)硫酸铈(II)和10％(v/v)硫酸，在水中)染色而可视化。二氧化硅柱色谱法在Fluka硅胶60(230-400目)上进行。
1H，13C和二维NMR谱图用Varian 400-MR，600-MR和Bruker Avance 700光谱仪于296K测量。化学位移(δ)报告为相对各自残余溶剂峰(CDCl3：δ7.27，在1H NMR中和77.16，在13C NMR中；CD3OD：δ3.31，在1H NMR中和49.00，在13C NMR中；D2O：δ4.80，在1H NMR中；丙酮-d6：δ2.05，在1H NMR中和29.92，在13C NMR中)的百万分数(ppm)。下述缩写用来指出峰多重性：s单峰；d二重峰；dd双二重峰；t三重峰；dt双三重峰；q四重峰；m多重峰。耦合常数(J)按Hertz(Hz)报告。旋光(OR)测量用Schmidt&Haensch UniPol L1000旋光仪在λ＝589nm进行和浓度(c)按g/100mL表达，溶剂在括号中注明。高分辨率质谱(HRMS)在Free UniversityBerlin质谱核心设施用Agilent 6210TOF质谱进行。红外(IR)谱图用Perkin Elmer100FTIR光谱仪测量。
A.合成单糖构造单元
实施例A.1合成C3-NAP保护的葡萄糖23
a)在0℃将二丙酮葡萄糖21(16.2g，62.2mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(80mL)。向该溶液加入氢化钠(1.17g，74.7mmol，60％，在矿物油中)和搅拌溶液直至全部气体产生停止的(2小时)。向该溶液加入2-(溴甲基)萘(40.8g，184mmol)，在氩下搅拌反应16小时。缓慢加入饱和aq.NH4Cl溶液猝灭反应。混合物用二乙醚萃取和有机层用盐水洗涤。有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩，提供粘稠的油状物。
b)将水(0.5L)和
IR120(50g，H+)加入上述粘稠的油状物和反应在80℃搅拌16小时。在冷却至室温后，滤出
IR120和水层用Et2O-EtOAc 1:1混合物洗涤。蒸发水层，产生白色膏状物，将其用甲苯共沸干燥。获得纯化合物3-O-(2-萘基甲基)-D-吡喃葡萄糖23，是白色固体(13.3g，67％，2步)。1H NMR(400MHz，CD3OD)：δ7.89-7.77(m，4H)，7.55(d，J＝8.8Hz，1H)，7.44-7.39(m，2H)，5.05-4.98(m，2H)，4.48(d，J＝7.8Hz，1H)，3.83(dd，J＝11.9，1.9Hz，1H)，3.63(dd，J＝11.8，5.9Hz，1H)，3.41(dt，J＝23.8，8.8Hz，2H)，3.30-3.25(m，2H)。
实施例A.2合成C3-NAP保护的全乙酰化的葡萄糖24
将单糖23(16.3g，50.9mmol)和乙酸钠(8.35g，102mmol)在搅拌的乙酸酐(96mL)中合并，和加热至60℃持续2小时。反应混合物倾至水中，形成白色沉淀。将白色沉淀溶于二氯甲烷和用饱和aq.NaHCO3溶液和盐水洗涤。有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩溶液，产生1,2,4,6-四-O-乙酰基-3-O-(2-萘基甲基)-D-吡喃葡萄糖24，是纯的白色固体(24.1g，97％，α：β＝2:9)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.80(dd，J＝8.7，3.2Hz，3H)，7.67(s，1H)，7.52-7.40(m，2H)，7.32(d，J＝8.2Hz，1H)，5.63(d，J＝8.2Hz，1H)，5.18(td，J＝9.3，5.0Hz，2H)，4.76(s，2H)，4.21(dd，J＝12.5，4.8Hz，1H)，4.07(dd，J＝12.4，2.1Hz，1H)，3.78(t，J＝9.3Hz，1H)，3.74-3.69(m，1H)，2.09(s，3H)，2.07(s，3H)，1.92-1.90(bs，6H)。13C NMR(100MHz，CDCl3)：δ170.7，169.3，169.2，169.1，134.9，133.1，133.0，128.3，127.9，127.6，126.5，126.3，126.1，125.6，91.9，79.9，74.3，73.0，71.5，69.0，61.7，20.9，20.8，20.7，20.7。
实施例A.3合成单糖25a
将单糖24(5.45g，11.16mmol)，乙硫醇(1.45g，20.08mmol)和干燥酸洗
分子筛丸粒加入无水二氯甲烷(35mL)和在氩下搅拌1小时。将溶液冷却至0℃，随后在40分钟内滴加三氟化硼乙醚合物(2.83mL，22.31mmol)。搅拌反应混合物2小时，随后用二氯甲烷稀释。有机层用饱和aq.NaHCO3溶液，水和盐水洗涤。有机层在MgSO4上干燥。减压浓缩展示产品乙基2,4,6-三-O-乙酰基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷25a，是白色沫状物(5.37g，98％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.84-7.76(m，3H)，7.67(s，1H)，7.51-7.43(m，2H)，7.32(d，J＝7.9Hz，1H)，5.11(ABq，J＝9.8Hz，2H)，4.78-4.72(m，2H)，4.38(d，J＝10Hz，1H)，4.19-4.08(m，2H)，3.74(t，J＝9.3Hz，1H)，3.62-3.55(m，1H)，2.75-2.61(m，2H)，2.06(s，3H)，1.96(s，3H)，1.91(s，3H)，1.24(t，J＝7.4Hz，3H)。
实施例A.4合成单糖18a
a)将单糖25a(5.37g，10.90mmol)和甲醇钠(1.77g，32.7mmol)溶于无水甲醇(30mL)和在氩下搅拌16小时。所得溶液过滤通过
IR120(3g，H+)。减压浓缩展示产品乙基3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷26a，是纯的白色固体。
b)将该白色固体加入搅拌的苯甲醛溶液(11mL)。加入三氟乙酸(0.52mL，7.03mmol)引起白色沉淀在10分钟之后形成。在1小时之后，加入三乙胺(1.5mL)猝灭反应。过滤，随后用冷二乙醚研磨，提供产品乙基4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷27a，是白色固体。
c)随后，在氩下将白色固体27a转移至搅拌的吡啶(2mL)二氯甲烷溶液(20mL)。加入苯甲酰氯(0.91mL，7.79mmol)和搅拌反应混合物1小时。反应用甲醇(3mL)淬灭，随后用二氯甲烷稀释。有机层用饱和aq.NaHCO3溶液，水和盐水洗涤。有机层在MgSO4上干燥。真空浓缩溶液，产生标题化合物乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷18a，是纯的白色固体(2.54g，44％，3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.93(d，J＝7.2Hz，2H)，7.68(d，J＝7.6Hz，1H)，7.69-7.21(m，14H)，5.64(s，1H)，5.36(dd，J＝8.5，1.5Hz，1H)，4.97(d，J＝12.2Hz，1H)，4.85(d，J＝12.2Hz，1H)，4.59(d，J＝10.0Hz，1H)，4.41(dd，J＝10.5，4.9Hz，1H)，3.96-3.81(m，3H)，3.61-3.51(m，1H)，2.75-2.66(m，2H)，1.21(t，J＝7.4Hz，2H)。13C NMR(100MHz，CDCl3)：δ165.2，137.2，135.3，133.2，133.1，132.9，129.9，129.7，129.1，128.4，128.1，127.9，127.6，127.0，126.2，126.1，125.9，125.8，101.4，84.3，81.8，79.0，74.2，71.8，70.7，68.7，24.1，14.8。HRMS(ESI+)C33H32O6Na[M+Na]+计算值579.1817，实测值579.1788。
实施例A.5合成单糖14a
a)在氮下将单糖18a(1.5g，2.63mmol)和NIS(591mg，2.63mmol)加入搅拌的DCM溶液(30mL)和H2O(6mL)。在0℃向该溶液加入三氟甲磺酸(26μL，0.26mmol)。在3小时之后，加入饱和NaHCO3溶液猝灭反应和产品用DCM萃取和用饱和Na2S2O3溶液洗涤。分相之后，有机相在MgSO4上干燥和减压浓缩。纯化通过硅胶快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(2:5)实现。如此提供产品1-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-α-D-吡喃葡萄糖17a，是灰白固体。
b)将化合物17a溶于DCM(40mL)，加入三乙胺(7.0mL)和在氮气氛下搅拌反应混合物过夜。减压浓缩反应混合物，然后通过硅胶快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(2:5)纯化，产生4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-D-吡喃葡萄糖16a，是纯的白色固体(1.21g，89％)。
c)向搅拌的化合物16a(1.2g，2.34mmol)的DCM(30ml)溶液，加入碳酸铯(1.52g，4.68mmol)和2,2,2-三氟-N-苯基亚氨代乙酰氯(0.76mL，4.68mmol)。在氮下搅拌反应混合物过夜。反应混合物过滤通过C
和减压浓缩滤液。粗制产品通过用二乙醚研磨纯化，产生标题化合物2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-D-葡萄糖吡喃糖基2,2,2-三氟-N-苯基乙酰亚氨酸酯14a，是纯的白色固体(1.1g，69％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03-7.00(m，22H)，6.67(d，J＝7.7Hz，2H)，5.65(s，1H)，5.55(t，J＝7.7Hz，1H)，5.08-4.81(m，2H)，4.42(dd，J＝10.3，4.9Hz，1H)，3.99(d，J＝7.8Hz，2H)，3.87(t，J＝10.2Hz，1H)。13CNMR(101MHz，CDCl3)δ164.9，143.1，137.2，135.2，133.5，133.2，133.1，130.0，129.4，129.3，128.9，128.6，128.5，128.3，128.0，127.8，127.1，126.2，126.1，126.0，124.6，119.4，101.7，81.3，77.7，74.1，72.5，68.7，67.1。
以较大规模合成单糖14a：
a)在氮下将单糖18a(10g，18mmol)和NIS(3.94g，17.5mmol)加入搅拌的DCM(80mL)和H2O(4mL)溶液。在0℃向该溶液加入三氟甲磺酸(310μL，3.50mmol)。在5小时之后，加入饱和NaHCO3溶液猝灭反应。产品用DCM萃取和用饱和Na2S2O3溶液洗涤。分相之后，有机相在MgSO4上干燥和减压浓缩。纯化通过硅胶快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(2:5)实现。如此提供产品1-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-α-D-吡喃葡萄糖17a，是灰白固体。
b)将化合物17a溶于DCM(40mL)，加入三乙胺(24mL)和在氮气氛下搅拌反应混合物过夜。减压浓缩反应混合物，然后通过硅胶快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(2:5)纯化，产生2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-D-吡喃葡萄糖16a，是纯的白色固体(6.89g，76％)。
c)向搅拌的化合物16a(3.5g，6.83mmol)的DCM(25ml)溶液加入碳酸铯(4.45g，13.66mmol)和2,2,2-三氟-N-苯基亚氨代乙酰氯(3.54g，17.07mmol)。在氮下搅拌反应混合物过夜。反应混合物过滤通过C
和减压浓缩滤液。粗制产品通过用二乙醚研磨纯化，产生标题化合物2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-D-葡萄糖吡喃糖基2,2,2-三氟-N-苯基乙酰亚氨酸酯14a，是纯的白色固体(3.9g，84％)。
合成单糖16a(步骤a)和步骤b))以及合成单糖14a进一步以不同规模进行：
步骤a)+步骤b)
步骤c)
a粗产品，仅过滤
实施例A.6合成单糖
在0℃将乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷29a(4g，7.7mmol)溶于DCM(50mL)。加入
分子筛和搅拌所得混合物10分钟。然后加入三乙基硅烷(8.4mL，52.4mmol)和三氟乙酸(3.8mL，52.4mmol)，在室温下搅拌反应混合物16小时。在0℃加入三乙胺猝灭反应，过滤和减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法用乙酸乙酯/正己烷(1:3至1:1)纯化，提供标题化合物乙基2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷15a，是多泡胶状物(3.53g，88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10-7.79(m，4H)，7.55-7.15(m，11H)，5.56-5.31(m，2H)，4.76-4.68(m，1H)，4.68-4.57(m，2H)，3.98(td，J＝9.3，3.3Hz，1H)，3.93-3.80(m，2H)，3.72(ddd，J＝9.3，4.9，4.2Hz，1H)，3.23(d，J＝3.4Hz，1H)，2.83-2.64(m，2H)，1.27(t，J＝7.5Hz，3H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ167.2，165.5，137.8，133.5，133.3，130.1(2C)，130.0(2C)，129.5，129.2，128.6，128.5(2C)，128.4，128.0，127.9，83.1，78.9(2C)，73.9，71.2，70.4，70.3，24.3，15.1。
以较大规模合成单糖15a：
在0℃将乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷29a(15g，28.9mmol)溶于DCM(120mL)。加入
分子筛，搅拌所得混合物10分钟。然后加入三乙基硅烷(32mL，202mmol)和三氟乙酸(15mL，202mmol)，在室温下搅拌反应混合物12小时。加入饱和aq.NaHCO3溶液(100mL)猝灭反应，用二氯甲烷(3x 50mL)萃取。有机层用盐水洗涤(150mL)，在MgSO4上干燥和真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法用乙酸乙酯/正己烷(1:10至1:1)纯化，提供标题化合物乙基2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷11a，是多泡胶状物(11.16g，74％)。
合成单糖15a以不同规模进一步进行：
B.合成携带氨基乙基连接体的ST3四糖
实施例B.1合成二糖2a
将单糖14a(0.85g，1.24mmol)和单糖15a(0.78g，1.49mmol)溶于DCM(12mL)，然后加入活化的
酸洗分子筛。所得悬浮液搅拌30分钟，随后冷却至-10℃。加入TMSOTf(34μL，0.186mmol)，悬浮液在-10℃搅拌1小时。允许溶液温热至0℃持续30分钟，随后加入Et3N(0.5mL)猝灭反应。过滤所得混合物，真空浓缩。加入冷二乙醚沉淀纯产品。额外用二乙醚研磨，提供标题化合物乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷2a，是纯的白色固体(950mg，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(d，J＝7.1Hz，2H)，7.93-7.90(m，2H)，7.81(d，J＝7.1Hz，2H)，7.68(d，J＝7.8Hz，1H)，7.58-7.31(m，20H)，7.22-7.09(m，5H)，5.61(t，J＝9.3Hz，1H)，5.38(t，J＝9.7Hz，1H)，5.29(s，1H)，5.17(dd，J＝9.0，8.1Hz，1H)，4.88(d，J＝12.4Hz，1H)，4.75(d，J＝12.4Hz，1H)，4.57-4.50(m，3H)，4.25(d，J＝12.2Hz，1H)，4.13(t，J＝9.3Hz，1H)，3.65(dt，J＝8.0，7.1Hz，2H)，3.58-3.50(m，2H)，3.45(d，J＝9.8Hz，2H)，3.17-3.05(m，1H)，2.75-2.60(m，3H)，1.20(t，J＝7.5Hz，2H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.3，165.1，164.6，138.0，137.2，135.3，133.2，133.1，133.0，132.9，130.2，129.8，129.7，129.5，129.3，129.0，128.4，128.3(2C)，127.9，127.8(2C)，127.6，126.9，126.1，126.0，125.9，125.7，101.2，101.1，83.4，81.4，78.7，77.5，75.6，74.6，73.7，73.4(2C)，70.6，67.9，67.4，65.8，24.1，14.8。HRMS(ESI+)[M+H]+计算值1017.3520，实测值1017.3514。
以较大规模合成单糖2a：
将单糖14a(1.96g，2.87mmol)和单糖15a(1.0g，1.91mmol)溶于DCM(12mL)，随后加入活化的
酸洗分子筛。所得悬浮液搅拌30分钟，随后冷却至-30℃。加入TMSOTf(69μL，0.383mmol)，和溶液在-20℃搅拌1小时。允许混合物温热至0℃持续30分钟，此后加入Et3N(0.5mL)猝灭反应。过滤所得溶液和减压浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:1)实现，其提供标题化合物乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷2a，是白色固体(570mg，31％)。
合成二糖2a以不同规模和不同条件进一步进行：
acc：柱色谱法
实施例B.2合成二糖9a
将二糖2a(150mg，0.147mmol)和2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-乙醇(50.5mg，0.177mmol)用甲苯共沸干燥。加入DCM(5mL)，随后加入活化的
酸洗分子筛和溶液在室温下搅拌30分钟，随后冷却至-10℃。加入NIS(40mg，0.177mmol)和TfOH(1.3μL，0.015mmol)和在-10℃至0℃搅拌反应混合物1.5小时。反应混合物通过加入Et3N(50μL)、随后加入10％aq.Na2S2O3溶液(10mL)猝灭。产品用DCM(3x 10mL)萃取和经合并的有机层用盐水(10mL)洗涤。所得有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:2)实现，其提供产品2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷9a，是白色固体(163mg，89％)。[α]D 20＝16.3°(c＝2，CHCl3)。IR(薄膜，cm-1)：νmax：3033，2875，1733，1700，1454，1267，1094，1072。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.86(dd，J＝7.6，5.0Hz，2H)，7.76(dd，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.66-7.39(m，5H)，7.53-7.38(m，12H)，7.37-7.21(m，20H)，7.14-7.12(m，2H)，5.62(s，1H)，5.31(dd，J＝9.1，8.0Hz，1H)，5.17(d，J＝8.0Hz，2H)，5.00(dd，J＝11.6，5.0Hz，2H)，4.90-4.80(m，3H)，4.77-4.51(m，5H)，4.30-4.14(m，3H)，4.01-3.96(m，1H)，3.80(dt，J＝36.0，9.2Hz，3H)，3.64-3.27(m，9H)，3.08(dd，J＝49.9，9.8Hz，1H)13C NMR(101MHz，CDCl3)δ164.9，156.6，156.3，139.2，138.6，138.5，138.1，138.0，137.9，137.4，136.7，136.6，135.5，133.4，133.2，133.0，129.9，129.6，129.2，128.6，128.5(2C)，128.4，128.3，128.1(2C)，128.0(2C)，127.9(2C)，127.7(2C)，127.5，127.3，127.0，126.2，126.0，125.9，103.7，101.4，100.8，82.8，82.1，81.8，77.7，76.6，75.5，75.0，74.9，74.4，74.3，74.0，73.6，68.8，68.0，67.6，67.4，67.3，66.1，51.6，47.2，46.1。HRMS(ESI+)C75H73NO14Na[M+Na]+计算值1234.4929，实测值1234.4957。
合成二糖9a也以较大规模进行。在根据上述程序使用11.3g的二糖2a的情况下，获得9.75g的二糖9a(93％收率)。
实施例B.3合成二糖3a
将二糖9a(155mg，0.13mmol)转移至搅拌的二氯甲烷(7mL)和水(135μL)混合物，和随后冷却(5至10℃)5分钟。在2.5小时期间内缓慢加入DDQ(128mg，0.56mmol)，直至全部初始二糖9a已消耗(TLC分析观察)。加入饱和aq.NaHCO3(5mL)猝灭反应和用二氯甲烷(2x50mL)萃取。有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:1)实现，其提供产品2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷3a，是白色固体(115mg，84％)。[α]D 20＝-6.7°(c＝1，CHCl3)。IR(薄膜，cm-1)：νmax：3424，3033，2881，1732，1700，1455，1269，1094，1056，1029。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(t，J＝7.3Hz，2H)，7.61(t，J＝7.5Hz，1H)，7.52-7.44(m，4H)，7.43-7.17(m，27H)，7.11-7.07(m，1H)，5.48(s，1H)，5.18-5.12(m，3H)，4.93(d，J＝10.8Hz，1H)，4.84-4.75(m，3H)，4.72-4.63(m，2H)，4.59-4.48(m，2H)，4.32(d，J＝12.1Hz，1H)，4.27-4.11(m，2H)，4.03-3.78(m，3H)，3.73-3.32(m，9H)，3.27(td，J＝9.7，5.0Hz，1H)，3.10(dd，J＝47.0，9.8Hz，1H)，2.58(br s，1H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.6，156.6，156.3，139.2，138.6，138.5，138.2，138.0，137.9，137.0，136.7，136.6，133.6，130.0，129.5，128.7，128.6，128.5，128.4，128.3，128.1(2C)，128.0，127.9，127.6(2C)，127.5，127.3，126.4，103.7，102.0，100.7，82.8，81.8，81.1，76.8，75.5，75.1，75.0(2C)，74.5，74.4，73.6，72.6，68.7，68.0，67.9，67.5，67.4，66.2，51.6，47.2，46.1。HRMS(ESI+)C64H65NO14Na[M+Na]+计算值1094.4303，实测值1094.4311。
以较大规模合成二糖3a：
将二糖9a(3.0g，2.42mmol)转移至搅拌的二氯甲烷(100mL)和水(2mL)混合物，和随后冷却(5至10℃)5分钟。在2.5小时期间内缓慢加入DDQ(2.47g，10.88mmol)，直至全部初始二糖9a已消耗(TLC分析观察)。加入饱和aq.NaHCO3(40mL)猝灭反应和用二氯甲烷(2x25mL)萃取。有机层在Na2SO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:1)实现，其提供产品2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷3a，是白色固体(2.1g，79％)。
合成二糖3a以不同规模进一步进行：
实施例B.4合成四糖1a
将二糖3a(110mg，0.10mmol)和二糖2a(132mg，0.13mmol)用甲苯共沸干燥。加入DCM(4mL)和
分子筛。溶液在室温下搅拌30分钟和随后冷却至-10℃。加入NIS(30mg，0.135mmol)和TfOH(0.9μL，0.01mmol)和在-10℃至0℃搅拌反应混合物1.5小时。加入饱和aq.NaHCO3溶液(1mL)猝灭反应和过滤。向滤液加入10％aq.Na2S2O3溶液(20mL)和所得溶液用DCM稀释，随后用DCM(3x 15mL)萃取。经合并的有机相用饱和aq.NaHCO3溶液(15mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:1)实现，其提供产品2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷1a，是白色固体(139mg，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(d，J＝7.7Hz，1H)，7.97-7.82(m，3H)，7.70(d，J＝7.7Hz，1H)，7.67-7.59(m，1H)，7.58-6.84(m，26H)，5.59-5.42(m，1H)，5.41-5.31(m，1H)，5.26(s，1H)，5.19(d，J＝1.4Hz，1H)，5.12(td，J＝14.9，8.0Hz，1H)，5.02(d，J＝7.0Hz，1H)，4.95(s，1H)，4.87(d，J＝12.4Hz，1H)，4.74(d，J＝12.4Hz，1H)，4.60(d，J＝8.0Hz，1H)，4.55(d，J＝11.4Hz，1H)，4.47(dd，J＝15.7，7.9Hz，1H)，4.42-4.32(m，1H)，4.32-4.27(m，1H)，4.24(d，J＝12.1Hz，1H)，4.15-4.02(m，1H)，3.94(t，J＝9.3Hz，1H)，3.80(t，J＝8.4Hz，1H)，3.71-3.58(m，1H)，3.56-3.36(m，2H)，3.33-3.18(m，2H)，3.18-3.02(m，2H)，2.69-2.57(m，1H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.3，165.0，164.7，164.5，138.1，137.2，136.8，135.2，133.2，133.0，132.9，132.5，130.1，129.9，129.8，129.8，129.6，129.2，129.1，128.5，128.4，128.3，128.3，128.1，128.0，127.8，127.8，127.7，127.6，127.2，126.9，126.2，126.0，126.0，125.9，125.7，101.3，101.1，101.0，101.0，100.8，100.1，81.4，79.3，77.4，77.2，77.0，76.7，75.8，75.4，74.1，73.7，73.6，73.3，73.1，72.1，68.8，67.7，67.0，66.1，65.7，51.5。MALDI MS(TOF)：[M+K]+计算值：2092.7，实测值：2093.1。
以较大规模合成四糖1a：
将二糖3a(1.0g，0.91mmol)和二糖2a(1.12g，1.18mmol)用甲苯共沸干燥。加入DCM(25mL)和
分子筛(2.0g)。溶液在室温下搅拌30分钟和随后冷却至-10℃。加入NIS(0.27g，1.18mmol)和TfOH(16μL，0.18mmol)和在-10℃至0℃搅拌反应混合物1.5小时。加入饱和aq.NaHCO3溶液(1mL)猝灭反应和过滤。向滤液加入10％aq.Na2S2O3溶液(20mL)和所得溶液用DCM稀释，随后用DCM(3x 20mL)萃取。经合并的有机相用饱和aq.NaHCO3溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层在Na2SO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:9至1:4)实现，其提供产品2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷1a，是白色固体(1.2g，64％)。
合成四糖1a也用6.5g的二糖3a进行。然后获得11.0g的四糖1a(91％收率)。
实施例B.5合成四糖4a
将化合物1a(139mg，0.068mmol)，PTSA(1.9mg，0.012mmol)和EtSH(73μL，1.02mmol)加入DCM(5mL)和所得溶液在室温下搅拌4小时。反应混合物用Et3N(50μL)淬灭和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:5至100％乙酸乙酯)实现，获得2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷4a，是白色沫状物(120mg，94％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.97(d，J＝7.5Hz，1H)，7.93-7.81(m，3H)，7.77-7.70(m，1H)，7.70-7.64(m，1H)，7.57(ddd，J＝14.0，12.4，7.7Hz，2H)，7.52-7.12(m，22H)，5.52(t，J＝9.2Hz，1H)，5.47-5.32(m，1H)，5.27(dd，J＝9.6，7.8Hz，1H)，5.14(t，1H)，5.06(dd，J＝10.5，6.6Hz，1H)，5.00(dd，J＝13.5，8.1Hz，1H)，4.81(d，J＝11.9Hz，1H)，4.75(d，J＝7.5Hz，1H)，4.61(t，J＝11.9Hz，1H)，4.51(d，J＝7.8Hz，1H)，4.46-4.31(m，2H)，4.27(dd，J＝12.8，8.6Hz，1H)，4.18(d，J＝11.8Hz，1H)，4.15(d，J＝7.2Hz，1H)，4.10-4.03(m，1H)，4.00(t，J＝9.3Hz，1H)，3.93-3.85(m，1H)，3.64-3.49(m，3H)，3.45(d，J＝8.1Hz，1H)，3.36(dd，J＝14.7，6.8Hz，2H)，3.29-3.16(m，2H)，3.07-2.96(m，1H)。MALDI MS(TOF)：[M+K]+计算值：1916.6，实测值：1917.0。
以较大规模合成四糖4a：
将化合物1a(400mg，0.20mmol)，PTSA(18.7mg，0.09mmol)和EtSH(210μL，2.92mmol)加入DCM(5mL)和所得溶液在室温下搅拌4小时。反应混合物用Et3N(500μL)淬灭和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:5至100％乙酸乙酯)实现，获得2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷4a，是白色沫状物(250mg，68％)。
合成四糖4a以不同规模进一步进行：
a粗产品
实施例B.6合成四糖11a
在氮气氛下将化合物1a(8.79g，4.28mmol)在无水DCM(85mL)中搅拌，加入BH3.THF(1M，在THF中，43mL，43.0mmol)、随后AgOTf(315mg，1.22mmol)，在RT搅拌反应混合物4.5小时直至反应完成(60％EtOAc/甲苯)。反应然后用甲醇(17mL)淬灭(仔细进行：起泡-氢气释放)。反应混合物在rt额外搅拌2小时，随后用三乙胺(6mL)碱化和再搅拌30分钟。RM然后蒸发至最小体积和用DCM(100mL)和水(50mL)稀释。在分层之后，水层用DCM萃取(25mL X 3)。合并的有机相然后用稀HCl(50mL)、饱和NaHCO3(50mL X 2)、盐水溶液(50mL)洗涤，在无水Na2SO4(～25g)上干燥，过滤，蒸发，获得无色树胶状液体。粗制产品通过二氧化硅柱色谱法用丙酮/甲苯纯化。获得标题化合物11a，是无色固体(6.85g，78％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.13-6.66(m，67H)，5.54-5.24(m，3.5H)，5.17-4.95(m，5H)，4.88-4.46(m，7.5H)，4.46-4.23(m，6H)，4.17-4.01(m，3H)，4.00-3.74(m，2H)，3.72-2.96(m，19H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.5，165.3，165.1，165.0，164.8，163.8，138.6，138.1，137.9，135.4，133.6，133.2，133.0，132.8，130.0，129.8，129.76，129.7，129.5，129.4，129.1，128.8，128.7，128.6，128.5，128.47，128.3，128.2，128.1，128.0，127.9，127.7，127.6，127.3，126.7，126.0，125.99，125.9，101.1，100.7，100.66，100.3，82.3，80.2，77.5，76.0，75.6，75.5，75.0，74.7，74.6，73.7，73.6，73.5，72.3，68.8，67.9，67.2，61.9，61.3，51.7。
实施例B.7合成四糖5a
将四糖4a(34mg，0.018mmol)加入DCM-水(0.7mL/0.14mL)混合物和冷却至0℃。加入TEMPO(0.57mg，0.004mmol)和BAIB(35mg，0.109mmol)。混合物在0℃搅拌20分钟和缓慢温热至室温，随后额外搅拌4小时。反应混合物然后用DCM(10mL)和水(5mL)稀释和水层用DCM(4x 10mL)萃取。经合并的有机萃取物在MgSO4上干燥和真空浓缩。粗制产品然后通过快速色谱法用DCM(100％)、DCM-丙酮(10:1)和最终DCM-丙酮-AcOH(100:10:1)纯化，获得标题化合物2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷5a，是灰白固体。该化合物转移至后续反应而不进行额外纯化。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01-6.74(m，57H)，5.50-5.36(m，2H)，5.18-5.03(m，2H)，5.02-4.83(m，5H)，4.71-4.59(m，3H)，4.49-4.45(m，3H)，4.41-4.02(m，7H)，3.93-3.35(m，13H)，3.26-3.06(m，3H)。MALDI MS(TOF)：[M+Na]+计算值：1929.946，实测值：1929.967。
以较大规模合成四糖5a：
将四糖4a(100mg，0.05mmol)加入DCM-水(3mL/0.6mL)混合物和冷却至0℃。加入TEMPO(2mg，0.01mmol)和BAIB(103mg，0.32mmol)和溶液在0℃搅拌20分钟和缓慢温热至室温，随后额外搅拌4-6小时。反应混合物然后用DCM(5mL)和水(5mL)稀释和水层用DCM(3x15mL)萃取。经合并的有机相在Na2SO4上干燥和减压浓缩。粗制产品然后通过快速色谱法用DCM(100％)，DCM-丙酮-AcOH(9:1:0至9:1:0.2)纯化，获得标题化合物2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷5a，是灰白固体(63mg，62％)。
合成四糖5a也用145mg四糖4a进行。然后获得39mg四糖5a(62％收率)。
实施例B.8合成四糖12a
在氮气氛下向DCM(125mL)-水(25mL)混合物中的四糖11a(6.35g，3.08mmol)加入TEMPO(0.12g，0.77mmol)和加入BAIB(5.96g，18.50mmol)和溶液在0℃搅拌20分钟然后在10℃持续2小时。反应混合物缓慢温热至室温，随后额外搅拌2小时。加入更多TEMPO(50mg)和继续在rt再搅拌2小时。反应通过TLC(30％丙酮/DCM+2％AcOH)监测。反应显示存在中间体和产品，因此再加入TEMPO(70mg)和继续在rt搅拌20小时。反应混合物然后用DCM(50mL)和水(50mL)稀释。分层，和水层用DCM(50mL X 3)萃取。合并的有机萃取物在Na2SO4(～25g)上干燥，过滤，滤液在30-35℃浴温的旋蒸仪减压浓缩，获得制产品。纯化在硅胶柱色谱法上用DCM-10％丙酮/DCM+1％AcOH完成。获得标题化合物12a，是灰白固体(5.48g，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08-6.87(m，67H)，5.64-5.56(m，1H)，5.50-5.35(m，1H)，5.31-4.86(m，9H)，4.81-4.73(m，3H)，4.63-4.09(m，12H)，4.02-3.18(m，17H)，3.03-2.81(m，1H)。
实施例B.9合成四糖7a
将来自先前步骤的粗制化合物5a(34.5mg，0.018mmol)和甲醇钠(20mg，0.36mmol)溶于甲醇(3mL)。所得溶液在40℃搅拌4d。所得溶液通过加入
IR120H+树脂中和，随后搅拌10分钟。过滤透明悬浮液和用甲醇彻底洗涤。真空浓缩滤液和随后用乙酸乙酯/己烷(1:10)研磨。获得标题化合物2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷7a，是灰白固体(20.2mg，87％，2步)，将其转移至后续步骤而不加任何额外纯化。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.16-6.99(m，27H)，5.11(d，J＝9.2Hz，2H)，5.05(s，2H)，4.67-4.32(m，9H)，4.20(dd，J＝31.8，8.0Hz，1H)，4.00-3.15(m，24H)。MALDI MS(TOF)：[M-H+Na]+计算值：1304.2898，实测值：1304.764。
以较大规模合成四糖7a：
将化合物5a(62mg，0.032mmol)加入THF(4mL)和向其加入0.5M的甲醇钠的甲醇溶液(2.1mL，1.07mmol)。所得溶液在40℃搅拌16小时。反应混合物减压蒸发，然后用甲醇(5mL)稀释和加入
120H+树脂中和。过滤混合物和用甲醇彻底洗涤。减压浓缩滤液，获得淡黄色固体。粗制产品随后用二乙醚(3x 2mL)研磨。获得标题化合物2-(苄基(苄氧基羰基)氨基)乙基3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷7a，是灰白固体(35mg，84％)，其转移至后续步骤而不加任何额外纯化。
合成四糖7a也用90mg四糖5a进行。然后获得55mg四糖7a(91％收率)。
实施例B.10合成四糖13a
在500mL RBF中在氮气氛下将二酸12a(5.15g，2.47mmol)加入THF(100mL)，配备搅拌子并在RT在250rpm搅拌。加入0.5M的甲醇钠的甲醇溶液(247mL，123.37mmol)。所得溶液在50℃搅拌25小时。反应通过NMR和TLC[(30％MeOH/丙酮+～2滴AcOH和30％丙酮/DCM+～1-2％AcOH)监测。制备反应混合物的等分试样和用NMR]分析。反应混合物在30-35℃浴温的旋蒸仪减压蒸发15分钟至最小体积，然后用乙酸乙酯(～150mL)和水(50mL)稀释。反应混合物用50％aq.AcOH溶液(50mL)酸化，分开各层。水层然后用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取。合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，在30-35℃浴温的旋蒸仪中在100mL RBF中在真空下减压浓缩，获得黄色固体。然后将～2％乙酸乙酯/己烷(～25mL)加入RBF中的固体，在水浴中温热RBF至45℃并研磨，冷却至rt和过滤。固体用温热的～2％乙酸乙酯/己烷再洗涤4次，在高真空中干燥，提供淡黄色固体，是所希望的产品13a(3.0g，83％)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.08-6.88(m，37H)，5.10-4.93(m，5H)，4.76(d，J＝7.8Hz，1H)，4.75-4.63(m，2H)，4.61-4.54(m，4H)，4.51-4.37(m，5H)，4.27-4.17(m，1H)，3.94-3.36(m，23H)，3.27-3.21(m，1H)。
实施例B.11合成四糖8a
将四糖7a(20mg)加入H2O-tBuOH-DCM(1mL/2mL/0.2mL)混合物，和加入20％Pd(OH)2/C(22mg)。使溶液脱气和随后在氢气氛搅拌24小时。反应混合物然后过滤通过PTFE疏水滤器和滤器用甲醇(5x 3mL)、水-甲醇(5x 3mL)和最终用NH4OH/甲醇(3mL/15mL)彻底洗涤。在蒸发滤液之后和减压干燥，获得靶标化合物2-氨基乙基β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖苷8a(9.2mg，79％)，是白色物质。1H NMR(400MHz，D2O)δ4.84(d，J＝8.0Hz，1H)，4.56(d，J＝8.0Hz，2H)，4.53(d，J＝7.9Hz，1H)，4.14(dt，J＝11.5，4.9Hz，1H)，4.04-3.92(m，3H)，3.89-3.75(m，5H)，3.72-3.49(m，10H)，3.43-3.34(m，3H)，3.29(t，J＝5.1Hz，2H)13C NMR(101MHz，D2O)δ175.4，175.2，102.3，102.2，102.0，101.8，82.7，78.9，78.6，75.7，75.65，75.2，74.8，74.7，74.1(2C)，73.1，72.9，72.87，72.7，71.6，70.1，65.7，60.0，59.84，39.3。HRMS(ESI+)：C26H43NNaO23[M+Na]+计算值760.2124，实测值760.2134。
以较大规模合成四糖8a：
将四糖7a(35mg)加入H2O-tBuOH-DCM(0.2mL/1mL/0.5mL)混合物，和将10％Pd/C(10mg)的tBuOH(1mL)悬浮液加入。反应混合物在氢气下冲洗和随后在氢气氛在rt搅拌24小时。反应混合物然后过滤通过PTFE疏水滤器和滤器用甲醇(5x 3mL)、水-甲醇(6:4，5x 3mL)彻底洗涤。滤液减压蒸发至干，获得灰白固体(17mg，84.5％粗制收率)。粗制产品然后通过C18Sepak柱色谱法用水和水-甲醇纯化，获得水级分中的希望的主要产品。冻干水级分，产生所希望的产品2-氨基乙基β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖苷8a，是白色膨胀固体(13mg，65％)。
合成四糖8a也用55mg四糖7a进行。然后获得19mg纯的四糖8a(60％收率；73％收率的粗制产品)。
合成四糖8a也用800mg四糖13a进行。然后获得360mg纯的四糖8a(89％收率)。
C.合成携带氨基戊基连接体的ST3四糖
实施例C.1合成二糖9b
将乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷2a(150mg，0.147mmol)和保护的氨基醇HO-(CH2)5-N(Bn)Cbz(62.8mg，0.192mmol)用甲苯共沸干燥。加入二氯甲烷(5mL)，随后加入活化的酸洗
MS和溶液在室温下搅拌30分钟，随后冷却至-10℃。加入NIS(40mg，0.177mmol)和TfOH(1.3μL，0.015mmol)和在-10℃至0℃搅拌反应混合物1.5小时。反应混合物用Et3N(50μL)、随后加入10％aq.Na2S2O3溶液(10mL)淬灭。产品用DCM(3x 10mL)萃取和经合并的有机相用盐水(10mL)洗涤。所得有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:2)实现，其提供产品5-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-戊基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷9b，是白色固体(189mg，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(d，2H)，7.86(d，J＝7.6Hz，2H)，7.81(d，J＝7.3Hz，2H)，7.67(d，J＝7.7Hz，1H)，7.58-7.03(m，35H)，5.57(t，J＝9.4Hz，1H)，5.34-5.24(m，2H)，5.16(t，1H)，5.11(s，2H)，4.87(d，J＝12.4Hz，1H)，4.75(d，J＝12.4Hz，1H)，4.58-4.40(m，3H)，4.34(d，J＝10.4Hz，2H)，4.23(d，J＝12.3Hz，1H)，4.08(t，J＝9.4Hz，1H)，3.72(s，1H)，3.68-3.59(m，2H)，3.58-3.47(m，2H)，3.41(d，J＝10.5Hz，2H)，3.36-3.23(m，1H)，3.17-3.05(m，1H)，3.05-2.84(m，2H)，2.70(t，J＝10.4Hz，1H)，1.45-1.25(m，4H)，1.18-0.95(m，2H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.1，164.6，137.2，135.3，133.2，133.0，132.9，129.8，129.8，129.6，129.5，129.0，128.4，128.4，128.2，127.9，127.8，127.8，127.6，126.9，126.1，126.0，125.9，125.7，101.2，101.0，100.9，81.4，75.8，74.5，73.7，73.4，67.0，65.8，50.3，47.0，46.1，29.0，28.9，22.9。HRMS(ESI+)C78H76NO16Na[M+Na]+计算值1305.5062，实测值1305.5056。
实施例C.2合成二糖3b
将二糖9b(145mg，0.113mmol)转移至搅拌的二氯甲烷(7mL)和水(122μL)溶液，和随后冷却(5至10℃)5分钟。在2.5小时期间内缓慢加入DDQ(115mg，0.51mmol)，直至全部初始二糖9b已消耗(TLC分析观察)。反应用饱和aq.NaHCO3溶液(5mL)淬灭和用二氯甲烷(2x50mL)萃取。有机层在无水MgSO4上干燥和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:4至1:1)实现，其提供产品5-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-戊基2,3-二-O-苯甲酰基-4-O-(2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷3b，是白色沫状物(112mg，87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(d，J＝8.1Hz，4H)，7.86(d，J＝7.6Hz，2H)，7.65-7.14(m，29H)，5.58(t，J＝9.4Hz，1H)，5.31(t，1H)，5.21(s，1H)，5.14-5.01(m，3H)，4.66(d，J＝7.9Hz，1H)，4.62(d，J＝12.3Hz，1H)，4.54-4.39(m，1H)，4.36(d，J＝12.0Hz，3H)，4.14(t，J＝9.3Hz，1H)，3.84-3.71(m，2H)，3.68(dd，J＝11.1，3.1Hz，1H)，3.61(dd，J＝10.6，5.0Hz，1H)，3.52(d，J＝10.8Hz，1H)，3.47-3.39(m，1H)，3.31(t，J＝9.3Hz，2H)，3.12(td，J＝9.7，5.1Hz，1H)，3.03-2.83(m，2H)，2.66(t，J＝10.3Hz，1H)，1.39-1.24(m，4H)，1.13-0.98(m，2H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.4，165.1，136.7，133.4，133.0，129.9，129.7，129.6，128.5，128.5，128.4，128.3，128.2，127.9，127.9，127.8，126.2，101.6，101.0，100.9，80.5，75.9，74.7，74.6，73.5，71.8，67.1，65.8，50.0，45.3，28.8，22.8。HRMS(ESI+)C67H67NO16Na[M+Na]+计算值1164.4358，实测值1164.4353。
实施例C.3合成四糖4b
a)将二糖3b(129mg，0.113mmol)和供体二糖2b(149mg，0.147mmol)用甲苯共沸干燥。加入二氯甲烷(3mL)和
MS，混合物在室温下搅拌30分钟和随后冷却至-10℃。加入NIS(34mg，0.152mmol)和TfOH(0.9μL，0.01mmol)，在-10℃至0℃搅拌反应混合物1.5小时。加入饱和aq.NaHCO3溶液(1mL)猝灭反应和过滤。向滤液加入10％aq.Na2S2O3溶液(20mL)和所得溶液用二氯甲烷稀释，随后用二氯甲烷(3x15mL)萃取。经合并的有机相用饱和aq.NaHCO3溶液(15mL)和盐水(10mL)洗涤。有机层在MgSO4上干燥和真空浓缩。
b)将随后的粗制固体(含有1b)转移至搅拌的PTSA(3.7mg，0.02mmol)和EtSH(141μL，1.95mmol)的二氯甲烷(3.5mL)溶液，所得溶液在室温下搅拌3小时。反应混合物用Et3N(50μL)淬灭和真空浓缩。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷(1:5至100％乙酸乙酯)实现，获得四糖产品5-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-戊基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷4b，是白色沫状物(161mg，64％，2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(d，J＝7.2Hz，2H)，7.85(dd，J＝13.4，7.3Hz，6H)，7.73-7.17(m，49H)，5.54-5.39(m，2H)，5.33-5.21(m，2H)，5.14-5.05(m，3H)，4.96(t，J＝8.5Hz，1H)，4.80-4.69(m，2H)，4.58(d，J＝12.3Hz，1H)，4.49(dd，J＝7.6，5.9Hz，2H)，4.40-4.29(m，5H)，4.28-4.20(m，1H)，4.16(d，J＝11.7Hz，1H)，4.01(dt，J＝27.9，9.2Hz，3H)，3.93-3.83(m，1H)，3.76-3.61(m，1H)，3.60-3.51(m，2H)，3.48(t，J＝7.9Hz，2H)，3.46-3.37(m，3H)，3.34(dd，J＝15.4，6.8Hz，3H)，3.28-3.12(m，4H)，3.07-2.94(m，4H)，2.94-2.87(m，2H)，1.37-1.21(m，4H)，1.14-0.98(m，2H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δ165.1(2C)，165.0，164.9，164.6，163.7，137.93，137.2，135.2，133.4，133.0，133.0，132.9，132.8，132.5，130.0，129.6，129.59，129.5，129.4，129.3，128.8，128.7，128.5，128.4，128.3，128.2，128.2，128.1，128.0，127.9，127.9，127.8，127.6，127.2，126.6，126.1，125.9，125.6，100.9(2C)，100.1，84.9，82.0，77.2，75.7，75.5，75.3，74.8，74.50，74.5，74.1，73.6，73.4，73.2，72.0，71.7，71.5，70.2，69.2，67.0，62.3，61.6，50.5，47.0，46.0，28.9，28.8，22.9。HRMS(ESI+)C111H109NO29Na[M+Na]+计算值1942.6983，实测值1942.7086。
实施例C.4合成四糖
a)将四糖4b(160mg，0.083mmol)加入二氯甲烷(2.5mL)和水(0.5mL)混合物，冷却至0℃。加入TEMPO(2.6mg，0.017mmol)和BAIB(188mg，0.583mmol)，混合物在0℃搅拌20分钟和缓慢温热至室温，随后额外搅拌5小时。反应混合物然后用二氯甲烷(10mL)和水(5mL)稀释，水层用二氯甲烷(4x 10mL)萃取。经合并的有机萃取物在Mg2SO4上干燥和真空浓缩。粗制产品然后通过快速色谱法用二氯甲烷(100％)、二氯甲烷/丙酮(10:1)和最终二氯甲烷/丙酮/AcOH(100:10:1)纯化，获得5-(苄基(苄氧基羰基)氨基)戊基2-O-苯甲酰基-3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-苯甲酰基-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-2,3-二-O-苯甲酰基-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷5b，是灰白固体。该二酸5b转移至后续反应而不加额外纯化，假定完全转化为所希望的产品(100％收率)。
b)将四糖5b(143mg，0.073mmol)加入0.5M的甲醇钠的甲醇溶液(20mL，1.07mmol)和二氯甲烷(1-4mL)，所得溶液在50℃搅拌4天。反应混合物减压蒸发，然后用甲醇(5mL)稀释和加入
IR120H+树脂中和。过滤透明悬浮液和用甲醇彻底洗涤。减压浓缩滤液。剩余的无色固体5-(苄基(苄氧基羰基)氨基)-戊基3-O-(2-萘基甲基)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-6-O-苄基-β-D-葡萄吡喃糖苷7b转移至后续步骤而不加额外纯化。
c)将四糖7b(97mg，0.073mmol)加入H2O(2mL)、tBuOH(4mL)和二氯甲烷(0.3mL)的混合物，和加至20％Pd/C(97mg)。溶液减压脱气和随后在氢气氛搅拌24小时。反应混合物然后过滤通过PTFE疏水滤器和滤器用水和甲醇彻底洗涤。在蒸发滤液和减压干燥之后，获得靶标化合物5-氨基戊基β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄糖吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄糖酸吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖苷8b，是灰白固体(35mg，61％，3步)。1H NMR(600MHz，D2O)δ4.49-4.30(m，3H)，3.98(dd，J＝12.5，9.9Hz，1H)，3.88-3.76(m，5H)，3.73-3.64(m，6H)，3.63-3.33(m，16H)，3.29-3.21(m，3H)，3.16(t，J＝7.4Hz，1H)，2.88(t，J＝7.5Hz，2H)，1.61-1.50(m，4H)，1.38-1.29(m，2H)。HRMS(ESI-)C29H48NO29[M-H]-计算值778.2617，实测值778.2672。
D.合成携带叠氮基乙基连接体的ST3四糖
实施例D.1合成二糖9c
在室温下将乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷18a(2.6g，4.67mmol)和1-叠氮基乙基2,3-二-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-1-β-D-葡萄吡喃糖苷(3.07g，5.60mmol)溶于DCM(60mL)持续5分钟，然后冷却至0℃(冰-水混合物)。在0℃将NIS(1.26g，5.60mmol)和三氟甲磺酸(0.1141mL，5.60mmol)加入反应混合物。在30分钟之后，反应完成。TLC分析(正-Hex/EtOAc＝1:1)显示供体斑点消失和出现新斑点。加入饱和NaHCO3溶液(50mL)和饱和Na2S2O3溶液(100mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(100mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(100mL X 2)和盐水(100mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～20g)上干燥，过滤，减压浓缩，获得粗制品。粗制有机产品通过短硅胶色谱法(柱
X 450mm)用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化。获得标题化合物9c(5.58g，66％)，是白褐色固体。HRMS(ESI+)C60H55O14N3Na+[M+Na]+计算值1064.3582，实测值1064.3695。
备择合成二糖9c
在50mL RBF中在室温下将二糖2a(0.9g，0.88mmol)和氯乙醇(0.14g mg，01.77mmol)溶于DCM(4.5mL)持续5分钟，然后冷却至0℃(等温冰-水混合物)。在0℃将NIS(0.24mg，1.06mmol)和三氟甲磺酸(22uL，0.18mmol)加入反应混合物。在30分钟之后，反应完成。加入饱和NaHCO3溶液(20mL)和饱和Na2S2O3溶液(50mL)猝灭反应。粗制化合物萃取入DCM(20mL X 2)和用饱和Na2S2O3溶液(40mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(40mL X 2)和盐水(50mLX 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～20g)上干燥，过滤，在30-35℃浴温的旋蒸仪中在250mL RBF中浓缩30-45分钟，获得粗制品。粗制有机产品通过短硅胶色谱法用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化。减压浓缩含级分产品，然后干燥16小时，提供0.8g(87％)氯化的中间体，是白色固体。HRMS(ESI+)C60H55ClO14Na+[M+Na]+计算值1057.3178，实测值1057.3191。
将氯化的中间体0.76g(0.24mmol)溶于无水DMF(8mL)，加入叠氮化钠(0.10g，1.48mmol)和18-冠-6(0.2130g，0.81mmol)。反应混合物加热至60℃过夜。在反应完成之后，将其冷却至室温和用水(30mL)稀释。混合物用DCM萃取，用盐水洗涤和在MgSO4上干燥。减压浓缩有机层，然后残余物通过硅胶柱色谱法(Hex/EtOAc：梯度)纯化。产品在高真空下干燥16小时，提供9c(0.61g，80％)，是白色固体。
实施例D.2合成二糖3c
将二糖9c(0.5g，0.48mmol)转移至搅拌的DCM(17mL)和水(0.3mL)溶液，和随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟。DDQ(0.49g，2.15mmol)在2.5小时期间内缓慢加入，TLC分析(40％EtOAc/己烷)显示在4小时之后原料消失和出现产品。加入饱和aq.NaHCO3(40mL)猝灭反应和萃取入DCM(25mL X 3)。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(10mL)、盐水(50mL)洗涤，在无水MgSO4(～50g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制品，是淡黄色油状物。纯化通过硅胶柱快速色谱法(12g柱)用乙酸乙酯/己烷完成。获得标题化合物3c，是蓬松白色固体(0.32g，75％)。HRMS(ESI+)C49H47O14N3Na+[M+Na]+计算值924.2956，实测值924.2997。
实施例D.3合成四糖1c
将二糖2a(0.21g，0.20mmol)和二糖3c(0.14g，0.16mmol)加入50mL无水甲苯，减压蒸发30分钟至干，再重复该共沸干燥过程2次。物质在高真空下干燥12h。然后在氩气氛下加入无水DCM(6mL)和于300rpm搅拌。加入约400mg干燥4A分子筛(MS)和在室温下搅拌45分钟，然后冷却至-5℃(冰-丙酮混合物)。将NIS(0.045g，0.20mmol)和三氟甲磺酸(3μmL，0.03mmol)加入反应混合物和搅拌15分钟。然后将其缓慢温热至10℃持续0.5小时，然后在RT搅拌1小时。TLC分析(40％乙酸乙酯/正己烷))显示二糖2a消失而出现新斑点。在5℃加入饱和NaHCO3溶液(10mL)和饱和Na2S2O3溶液(20mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(25mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(50mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(50mL X 2)和盐水(50mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，和减压浓缩，获得粗制品。粗制有机产品通过快速色谱法(柱12g柱)用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化。获得标题化合物1c(0.1447g，50％)，是白色固体。HRMS(ESI+)C107H97O27N3Na+[M+Na]+计算值1878.6207实测值1878.6294。
实施例D.4合成四糖1g
将四糖1c(0.1g，0.05mmol)溶于无水DCM(3mL)。加入乙酸(150μl)和锌(106mg，1.62mmol)。混合物在室温下搅拌1小时。反应过滤通过C盐垫(1cm)。该垫用DCM(30mL)洗涤和减压浓缩滤液。
纯化通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH)完成。收集含有纯产品的级分，减压浓缩和在高真空下干燥，提供1g(98mg，100％)。
HRMS(ESI+)C107H99O27NH+[M+H]+计算值1830.6483，实测值1830.6445。
实施例D.4合成四糖1h
将四糖1g(0.04g，0.02mmol)和N-琥珀酰亚胺基3-(硫乙酰基)丙酸酯(0.107g，0.44mmol)溶于无水DCM(3mL)和加入三乙胺(0.1mL)。混合物在室温下搅拌3小时。纯化通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH)完成。收集含有希望产品的级分，减压浓缩和在高真空下干燥，提供1h(29mg，65％)。
HRMS(ESI+)C112H105O29NSNa+[M+Na]+计算值1982.6391，实测值1982.6362。
E.合成携带叠氮基癸基连接体的ST3四糖
实施例E.1合成二糖9d
在室温下将乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷18a(0.25g，0.25mmol)和10-叠氮基-1-癸醇(0.098g，0.50mmol)溶于DCM(0.5mL)持续5分钟，然后冷却至0℃(冰-水混合物)。在0℃将NIS(67mg，0.29mmol)和三氟甲磺酸(6μL，0.05mmol)加入反应混合物。在30分钟之后，反应完成。TLC分析(正-Hex/EtOAc＝2:1)显示供体斑点消失和新斑点出现。加入饱和NaHCO3溶液(20mL)和饱和Na2S2O3溶液(50mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(20mL X 2)，饱和NaHCO3溶液(20mL X 2)，和盐水(30mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，和减压浓缩，获得粗制品。粗制有机产品通过柱色谱法在二氧化硅上用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化。获得标题化合物9d(0.2064g，73％)，是白色固体。HRMS(ESI+)C68H71O14N3Na+[M+Na]+计算值1176.4834，实测值1176.4812。
实施例E.2合成二糖3d
将二糖9d(0.2g，0.19mmol)转移至搅拌的DCM(6mL)和水(0.12mL)溶液，和随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟和于400rpm搅拌。DDQ(0.2g，0.86mmol)在2.5小时期间内缓慢加入，TLC分析(40％EtOAC/己烷)显示甚至在2小时之后稍极性的新斑点出现和主要量的原料，因此在RT再搅拌反应混合物额外2小时。TLC分析(40％EtOAc/己烷)显示在4小时之后原料消失和产品出现。加入饱和aq.NaHCO3(40mL)猝灭反应和萃取入DCM(25mL X 3)。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(10mL)、盐水(50mL)洗涤，在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制产品，是淡黄色油状物。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/己烷完成。获得标题化合物3d，是蓬松白色固体(0.11g，57％)。HRMS(ESI+)C57H63O14N3Na+[M+Na]+计算值1036.4208，实测值1036.4194。
实施例E.3合成四糖1d
将二糖2a(0.130g，0.13mmol)和二糖3d(0.1g，0.099mmol)加入无水甲苯(10mL)和减压蒸发30分钟至干，再重复该共沸干燥过程2次。物质在高真空下干燥12h。然后在氩气氛下加入无水DCM(2.5mL)和于300rpm搅拌。加入约1g干燥4A分子筛(MS)和在室温下搅拌45分钟，然后冷却至-5℃(冰-丙酮混合物)。将NIS(0.029g，0.13mmol)和三氟甲磺酸(2μL，0.02mmol)加入反应混合物和搅拌30分钟。然后将其缓慢温热至0℃持续0.5小时，10℃持续30分钟，然后在RT搅拌1h。TLC分析(40％乙酸乙酯/正己烷))显示供体斑点消失和新斑点出现。在5℃加入饱和NaHCO3溶液(10mL)和饱和Na2S2O3溶液(20mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(20mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(20mL X 2)和盐水(20mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，和减压浓缩，获得粗制产品。粗制有机产品通过快速色谱法(12g二氧化硅)用正-Hex/EtOAc纯化(0.1104mg，59％)。HRMS(ESI+)C115H113O27N3Na+[M+Na]+计算值1990.7459，实测值1990.7459。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.06-6.83(m，57H)，5.51(dd，J＝9.8，9.0Hz，1H)，5.37-5.21(m，3H)，5.19-5.01(m，3H)，4.93(s，1H)，4.88-4.66(m，2H)，4.64-4.40(m，5H)，4.23(dd，J＝12.2，9.0Hz，2H)，4.14-3.99(m，2H)，3.92(t，J＝9.4Hz，1H)，3.86-3.71(m，2H)，3.69-3.39(m，5H)，3.40-3.18(m，5H)，3.17-2.97(m，4H)，2.73-2.50(m，2H)，1.54(s，6H)，1.47-0.85(m，12H)。
F.合成携带2-(2-叠氮基乙氧基)乙基连接体的ST3四糖
实施例F.1合成二糖9e
在室温下将乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷18a(0.25g，0.25mmol)和2-(2-叠氮基乙氧基)乙醇(0.07g，0.50mmol)溶于DCM(0.5mL)持续5分钟，然后冷却至0℃(冰-水混合物)。在0℃将NIS(67mg，0.29mmol)和三氟甲磺酸(6μL，0.05mmol)加入反应混合物。在30分钟之后，反应完成。TLC分析(正-Hex/EtOAc＝2:1)显示供体斑点消失和新斑点出现。加入饱和NaHCO3溶液(20mL)和饱和Na2S2O3溶液(50mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(20mL X 2)，饱和NaHCO3溶液(20mL X 2)和盐水(30mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，和减压浓缩，获得粗制产品。粗制有机产品通过柱色谱法(12g柱)用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化。获得标题化合物9e(0.1925g，72％)，是白色固体。HRMS(ESI+)C62H59O15N3Na+[M+Na]+计算值1108.3844，实测值1108.3839。
实施例F.2合成二糖3e
将二糖9e(0.18g，0.17mmol)转移至搅拌的DCM(6mL)和水(0.12mL)溶液，和随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟和于400rpm搅拌。DDQ(0.17g，0.75mmol)在2.5小时期间内缓慢加入。TLC分析(40％EtOAc/己烷)显示在4小时之后原料消失和产品出现。加入饱和aq.NaHCO3(40mL)猝灭反应和用DCM(25mL X 3)萃取。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(10mL)、盐水(50mL)洗涤，在无水MgSO4(～50g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制品，是淡黄色油状物。纯化通过快速色谱法用乙酸乙酯/正己烷完成。获得标题化合物3e，是蓬松白色固体(0.102g，65％)。HRMS(ESI+)C51H51O15N3Na+[M+Na]+计算值968.3218，实测值968.3218。
实施例F.3合成四糖1e
将二糖2a(0.126g，0.12mmol)和二糖3e(0.09g，0.095mmol)加入无水甲苯(10mL)和蒸发30分钟至干和再重复该共沸干燥过程2次。物质在高真空下干燥12h。然后在氩气氛下加入无水DCM(2mL)和于300rpm搅拌。加入约1g干燥4A分子筛(MS)和在室温下搅拌45分钟，然后冷却至-5℃(冰-丙酮混合物)。将NIS(0.028g，0.12mmol)和三氟甲磺酸(2μL，0.02mmol)加入反应混合物和搅拌30分钟。然后将其缓慢温热至0℃持续0.5小时，10℃持续30分钟，然后在RT搅拌1h。TLC分析(40％乙酸乙酯/正己烷)显示供体斑点消失和新斑点出现。在5℃加入饱和NaHCO3溶液(10mL)和饱和Na2S2O3溶液(20mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(20mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(20mL X 2)和盐水(20mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，减压浓缩，获得粗制产品。粗制有机产品通过快速色谱法(柱12g柱)用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化(64.2mg，36％)。HRMS(ESI+)C109H101O28N3Na+[M+Na]+计算值1922.6469，实测值1922.6470。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.07-6.86(m，57H)，5.52(t，J＝9.4Hz，1H)，5.37-5.26(m，2H)，5.23(s，1H)，5.20-5.00(m，3H)，4.93(s，1H)，4.88-4.66(m，2H)，4.63-4.42(m，5H)，4.22(dd，J＝12.1，7.8Hz，2H)，4.15-4.01(m，2H)，3.97-3.73(m，3H)，3.71-3.19(m，13H)，3.18-2.93(m，7H)，2.63(dt，J＝20.5，10.4Hz，2H)。
G.合成ST3四糖
实施例G.1合成二糖9f'
在室温下将乙基2-O-苯甲酰基-4,6-O-亚苄基-3-O-(2-萘基甲基)-1-硫代-β-D-葡萄吡喃糖苷18a(1g，9.83mmol)和无水苯甲醇(0.20mL，1.2mmol)溶于DCM(5mL)持续5分钟，然后冷却至0℃(冰-水混合物)。在0℃将NIS(0.27mg，1.18mmol)和三氟甲磺酸(24μL，0.20mmol)加入反应混合物。在30分钟之后，反应完成。TLC分析(正-Hex/EtOAc＝2:1)显示供体斑点消失和新斑点出现。加入饱和NaHCO3溶液(20mL)和饱和Na2S2O3溶液(50mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(20mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(40mL X 2)，饱和NaHCO3溶液(40mL X 2)和盐水(50mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～20g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制产品。粗制有机产品通过Büchi Combiflash系统用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化两次。获得标题化合物9f(0.8414g，80％)，是白色固体。HRMS(ESI+)C65H58O14Na+[M+Na]+计算值1085.3724实测值1085.3747。
实施例G.2合成二糖3f
将二糖3f(0.245g，0.23mmol)转移至搅拌的DCM(9mL)和水(0.15mL)溶液，和随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟和于400rpm搅拌。DDQ(0.24g，1.04mmol)在2.5小时期间内缓慢加入。TLC分析(40％EtOAc/己烷)显示在4小时之后原料消失和产品出现。加入饱和aq.NaHCO3(40mL)猝灭反应和用DCM(25mL X 3)萃取。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(10mL)、盐水(50mL)洗涤，在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制品，是淡黄色油状物。纯化通过硅胶柱快速色谱法(12g柱)用乙酸乙酯/己烷完成。获得标题化合物3f，是蓬松白色固体(0.1765g，84％)。HRMS(ESI+)C54H50O14Na+[M+Na]+计算值945.3098，实测值945.3137。
实施例G.3合成四糖1f
将二糖2a(0.4g，0.43mmol)和二糖3f(0.57g，0.56mmol)加入无水甲苯(10mL)和减压蒸发30分钟至干，再重复该共沸干燥过程2次。物质在高真空下干燥12h。然后在氩气氛下向其加入无水DCM(10mL)和于300rpm搅拌。加入约1g干燥4A分子筛(MS)和在室温下搅拌45分钟，然后冷却至-5℃(冰-丙酮混合物)。将NIS(0.127g，0.56mmol)和三氟甲磺酸(8μL，0.09mmol)加入反应混合物和搅拌15分钟。然后将其缓慢温热至10℃持续0.5小时，然后在RT搅拌1h。TLC分析(40％乙酸乙酯/正己烷)显示供体斑点消失和新斑点出现。在5℃加入饱和NaHCO3溶液(50mL)和饱和Na2S2O3溶液(100mL)猝灭反应。粗制化合物用DCM(50mL X 2)萃取和用饱和Na2S2O3溶液(50mL X 2)，饱和NaHCO3溶液(250mL X 2)和盐水(50mL X 2)洗涤。分离之后，有机层在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤和减压浓缩，获得粗制化合物。粗制有机产品通过快速色谱法(柱24g柱)用正-Hex/EtOAc梯度系统纯化，获得标题化合物1f(0.575g，70％)，是白色固体。HRMS(ESI+)C112H100O27Na+[M+Na]+计算值1899.6350，实测值1899.6342。
实施例G.4合成四糖11f
在氮气氛下于350-400rpm搅拌无水DCM(5mL)中的四糖1f(0.45g，0.24mmol)。加入BH3·THF(1M，在THF中，2.4mL，2.4mmol)、随后AgOTf(18.5mg，0.07mmol)，用铝箔遮蔽反应混合物避光，在RT搅拌反应混合物2小时。TLC分析(60％EtOAc/甲苯和10-15％丙酮/甲苯)显示甚至在2小时之后稍极性的新斑点出现和主要量的原料，因此再搅拌反应混合物额外2.5小时。反应然后用甲醇(18mL)仔细淬灭。反应混合物在rt搅拌额外的2小时，随后用三乙胺(9mL)碱化和再搅拌30分钟。反应混合物然后蒸发至最小体积和用DCM(20mL)和水(20mL)稀释。各层分开。含水层用DCM萃取(10mL X 3)。合并的有机相然后用稀HCl(20mL)，饱和NaHCO3(20mL X 2)，盐水溶液(20mL)洗涤，在无水MgSO4(～5g)上干燥，过滤，减压蒸发，获得无色树胶状液体。粗制产品通过二氧化硅柱色谱法用丙酮/甲苯纯化。获得标题化合物11f，无色蓬松(0.302g，68％)。HRMS(ESI+)C112H104O27Na+[M+Na]+计算值1903.6663，实测值1903.6657。
实施例G.5合成四糖12f
在氮气氛下于400-450rpm搅拌DCM(3mL)-水(0.6mL)混合物中的四糖11f(0.15g，3.08mmol)，冷却至0℃(冰-水)。加入TEMPO(6mg，0.04mmol)和BAIB(0.15g，0.48mmol)，溶液在0℃搅拌20分钟，然后在10℃持续2小时。反应混合物缓慢温热至室温，随后额外搅拌2小时。再加入TEMPO(50mg)和在rt再继续搅拌2小时。反应通过TLC(25％丙酮/DCM和30％丙酮/DCM+2％AcOH)监测。反应显示出现中间体和产品；因此加入更多TEMPO(70mg)，在rt继续搅拌20分钟。反应混合物然后用DCM(20mL)和水(20mL)稀释。各层分开，水层用DCM萃取(10mLX 3)。合并的有机萃取物在MgSO4上干燥(～5g)，过滤，减压浓缩滤液，获得粗制产品。纯化通过硅胶柱色谱法(柱
X 300mm)用DCM-10％丙酮/DCM+1％AcOH完成。获得标题化合物12f，是灰白固体(0.1220g，80％)。HRMS(ESI+)C112H100O29Na+[M+Na]+计算值1931.6248，实测值1931.6268。
实施例G.6合成四糖13f
将二酸12f(0.117g，0.06mmol)加入THF(2.5mL)和在氮气氛下在RT于250rpm搅拌。加入0.5M的甲醇钠的甲醇溶液(6.2mL，3.076mmol)。所得溶液在50℃搅拌25小时。反应通过NMR和TLC[(30％MeOH/丙酮+～2滴AcOH和30％丙酮/DCM+～1-2％AcOH)监测。蒸发反应混合物，然后用乙酸乙酯(～25mL)和水(50mL)稀释。混合物用50％aq.AcOH溶液(50mL)酸化和各层分开。水层然后用乙酸乙酯(50mL X 3)萃取。合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和减压浓缩，获得黄色固体。然后将～2％乙酸乙酯/己烷(～25mL)加入固体，温热至45℃和研磨，冷却至rt和过滤。固体用温热的～2％乙酸乙酯/己烷再洗涤6次和在高真空中干燥，提供淡黄色固体，是标题化合物13f(0.05g，59)。HRMS(ESI+)C70H76O23-[M-H]-计算值1283.4705，实测值1283.4688。
实施例G.7合成ST3四糖8'
将二酸13f(15mg，0.012mmol)加入tBuOH(1.625mL)、DCM(0.375mL)和H2O(0.25mL)的溶剂混合物，在氮下在RT于250rpm搅拌。向其加入10％Pd/C(5mg)的tBuOH(1mL)悬浮液。反应混合物用氢气冲洗，和随后在压力3巴在RT搅拌24小时。反应混合物然后过滤通过PTFE疏水滤器(0.45μm)和滤器用甲醇(3mL X 5)和水-甲醇(6:4，3mL X 5)彻底洗涤。滤液减压蒸发至干，获得灰白固体，是粗制产品。粗制产品的1H NMR显示反应完成和不存在任何二酸13f和中间体存在。粗制产品然后通过色谱法用C18Sepak柱用水和甲醇作为洗脱液纯化，获得希望的纯产品。获得标题化合物8'，是白色泡沫状固体(4.8mg，60％)。HRMS(ESI+)C24H38O23Na+[M+Na]+计算值717.1702，实测值717.1680.1H NMR(400MHz，氘氧化物，端基异构体混合物)δ5.28(d，J＝3.6Hz，0.5H)，4.86(d，J＝7.8Hz，1H)，4.71(d，J＝8.1Hz，0.5H)，4.68-4.57(m，2H)，4.13-3.95(m，4H)，3.95-3.81(m，4H)，3.79-3.60(m，10H)，3.44-3.31(m，2H)。
H.合成ST3六糖
实施例H.1合成ST3四糖3a-B
将四糖1a(0.4g，0.195mmol，不纯)转移至搅拌的DCM(10mL)和水(0.2mL)溶液，随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟，配备搅拌子和在400-450rpm搅拌。DDQ(0.2g，0.876mmol)在2小时期间内分批缓慢加入，在RT搅拌反应混合物额外2.5小时直至反应完成，通过TLC分析监测(20％EtOAc/甲苯)。加入饱和aq.NaHCO3(25mL)猝灭反应和萃取入DCM(15mL X 3)。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(5mL)、盐水(10mL)洗涤，在无水Na2SO4(～5g)上干燥，过滤和在30-35℃浴温旋蒸仪中在100mL RBF中减压浓缩1小时，获得粗制品，是深褐色蓬松固体。纯化在硅胶柱色谱法上用乙酸乙酯/甲苯完成，提供白色固体(225mg，60％)。MALDI分析：C111H103NNaO29[M+Na]+计算值1938.01，实测值1938.86。
实施例H.2合成ST3六糖1a-B
将硫糖苷供体2a(118mg，0.062mmol)和四糖受体3a-B(188mg，0.185mmol)加入25mL RBF，加入无水甲苯(10mL)和减压蒸发30分钟至干和重复该共沸干燥过程。物质在高真空下干燥2-3小时。然后在氩气氛下向其加入DCM(2mL)，配备搅拌子和在600rpm搅拌。加入0.1g的微波干燥
分子筛(MS)和在室温下搅拌30分钟。将NIS(34.7mg，0.154mmol)和TfOH(～1μL，0.012mmol)加入反应混合物和在rt搅拌2小时和用TLC分析(20％EtOAc/甲苯和15％丙酮/甲苯)监测。反应然后用饱和aq.NaHCO3(5mL)淬灭和在RT搅拌反应混合物10分钟。RM过滤通过C
床和用DCM(5mL X 2)洗涤和分层。然后水层用DCM萃取(15mL X 2)。合并的有机层用10％aq.Na2S2O3溶液(5mL X 2)、饱和NaHCO3溶液(5mL)、盐水(5mL)洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤和在30-35℃浴温旋蒸仪中在100mL RBF中减压浓缩1小时，获得粗制品，是淡黄色固体。纯化在硅胶柱色谱法用乙酸乙酯/甲苯完成，产生灰白固体，是所希望的产品(125mg，70.7％)。MALDI分析：C169H153NKO42[M+K]+计算值2909.15，实测值2909.92。
J.合成ST3八糖
实施例J.1合成ST3六糖3a-C
在10mL RBF中将六糖1a-B(80mg，0.03mmol)转移至搅拌的DCM(3mL)和水(0.1mL)溶液，和随后在氮气氛下冷却(5至10℃)5分钟，配备搅拌子和在400-450rpm搅拌。DDQ(29mg，0.13mmol)在2小时期间内分批缓慢加入和在RT搅拌反应混合物额外2.5小时，反应用TLC分析(20％EtOAc/甲苯)监测直至反应完成。加入饱和aq.NaHCO3(10mL)猝灭反应和萃取入DCM(15mL X 3)。经合并的有机层用饱和NaHCO3溶液(5mL)、盐水(5mL)洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤和在30-35℃浴温旋蒸仪中在50mL RBF中减压浓缩1小时，获得粗制品，是深褐色蓬松固体。纯化在硅胶柱色谱法上用乙酸乙酯/甲苯完成，提供白色固体(45mg，59％)。MALDI分析：C158H145NKO42[M+K]+计算值2768.96，实测值2768.44。
实施例J.2合成ST3八糖1a-C
将硫糖苷供体2a(39.1mg，0.039mmol)和六糖受体3a-C(35mg，0.013mmol)加入25mL RBF，加入无水甲苯(5mL)和减压蒸发30分钟至干和重复该共沸干燥过程。物质在高真空下干燥2-3小时。然后在氩气氛下向其加入DCM(2mL)，配备搅拌子和在400rpm搅拌。加入～0.05g的微波干燥
分子筛(MS)和在室温下搅拌30分钟。将NIS(7.2mg，0.032mmol)和TfOH(～1μL，0.003mmol)加入反应混合物，在rt搅拌2小时，反应用TLC分析(15％EtOAc+5％丙酮)/甲苯)监测直至反应完成。反应然后用饱和aq.NaHCO3(3mL)淬灭，在RT搅拌反应混合物10分钟。RM过滤通过C
床和用DCM(5mL X 2)洗涤，分开各层。然后水层用DCM(5mL X2)萃取。合并的有机层用10％aq.Na2S2O3溶液(5mL)、饱和NaHCO3溶液(3mL)、盐水(3mL)洗涤，在无水Na2SO4上干燥，过滤和在30-35℃浴温旋蒸仪中在100mL RBF中减压浓缩1小时，获得粗制品，是淡黄色固体。纯化在硅胶柱色谱法上用乙酸乙酯/甲苯和(EtOAc+5％丙酮)/甲苯完成，获得灰白树胶状固体(15mg，31.8％)。MALDI分析：C216H195KNO55[M+K]+计算值3723.99，实测值3725.94。
Claims (13)
1.合成方法，包括下述步骤：
a)提供式2二糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
X代表-OAc或-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol；
和式3糖
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，
r是1，2或3；
b)在催化剂存在下将式2二糖与式3糖偶联，获得式1糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
2.根据权利要求1的方法，还包括通过在催化量酸存在下用亲核物质处理根据权利要求1的式1糖进行缩醛基团的选择性除去，产生式4糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3；
或者
在催化量路易斯酸存在下用硼烷处理根据权利要求1的式1糖进行缩醛基团的还原性除去，产生式11糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
3.根据权利要求2的方法，还包括进行根据权利要求2的式4糖的氧化，产生式5糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3；
或者
进行根据权利要求2的式11糖的氧化，产生式12糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
4.根据权利要求3的方法，还包括在碱存在下进行根据权利要求3的式5糖的保护基团R1的除去，产生式7糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3；
或者
在碱存在下进行根据权利要求3的式12糖的保护基团R1的除去，产生式13糖，
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
5.根据权利要求4的方法，还包括在催化剂存在下氢化根据权利要求4的式7或式13的糖，产生式8糖或式8'糖，
其中L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1，2或3。
6.根据权利要求1-5中任一项的方法，还包括
a6)在催化剂存在下将根据权利要求1的式2二糖与醇HO-W反应，产生式9二糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
W代表-L-P或-Bn，
P是-NR’R”或-N3，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基或
R’和R”一起形成邻苯二甲酰，
L代表-(CH2)n-或-C2H4-O-C2H4-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数；和
b6)通过用氧化剂处理将根据权利要求6的式9二糖转化为根据权利要求1的式3-A糖
7.根据权利要求1-5中任一项的方法，还包括
b6)通过用氧化剂处理将根据权利要求1的式1糖转化为式3糖。
8.根据权利要求1-5中任一项的方法，还包括：
a2)提供式14单糖构造单元
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，
和Z1选自-O-C(＝NH)-CCl3，-O-C(＝NPh)-CF3，-OAc和-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph和-Tol，
和单糖构造单元15
其中
R1代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R2代表正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，和
X代表-SR5，其中R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，
-Ph和-Tol；
和
b2)在催化剂存在下将式14单糖构造单元与式15单糖构造单元偶联，产生根据权利要求1的式2二糖。
9.根据权利要求8的方法，还包括：
a3)提供式18单糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基，和
R5选自-Me，-Et，-Pr，-Bu，-Ph，和-Tol；
和
b3)将式18单糖转化为式17单糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基；
和
c3)用碱处理式17单糖，获得式16单糖
其中
Nap代表2-萘基甲基，
R1是正交的氧化稳定的和酸稳定的保护基团，
R3是芳基或烷基；
和
d3)将式16单糖转化为根据权利要求8的式14单糖。
10.根据权利要求1-5中任一项的方法，其中
R1选自-Bz，-ClAc，-Ac和-Piv，
R2代表-Bn，
R3选自-Ph，-PMP和-Me，
P是-NR’R”，
R’和R”相互独立地代表-Bn，-Cbz，-烯丙基，和
n是选自2，3，4和5的整数。
11.下述通式的中间体：
1'Y＝-O-(CH2)n-N(Bn)Cbz
1”Y＝-O-(CH2)n-N3
1”'Y＝-O-(CH2)n-NH2
1e Y＝-O-C2H4-O-C2H4-N3
1f Y＝-O-Bn
1h Y＝-O-(CH2)2NH-CO-(CH2)2-S-Ac
2a Y＝-SEt
9'Y＝-O-(CH2)n-N(Bn)Cbz
9”Y＝-O-(CH2)n-N3
9e Y＝-O-C2H4-O-C2H4-N3
9f Y＝-O-Bn
4'Y＝-O-(CH2)n-N(Bn)Cbz
4”Y＝-O-(CH2)n-N3
4e Y＝-O-C2H4-O-C2H4-N3
4f Y＝-O-Bn
5'Y＝-O-(CH2)n-N(Bn)Cbz
5”Y＝-O-(CH2)n-N3
5e Y＝-O-C2H4-O-C2H4-N3
5f Y＝-O-Bn
7'Y＝-O-(CH2)n-N(Bn)Cbz
7”Y＝-O-(CH2)n-N3
7e Y＝-O-C2H4-O-C2H4-N3
7f Y＝-O-Bn
其中Nap代表2-萘基甲基，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，和
r是1或2或3。
12.根据权利要求11的中间体，其中中间体1’，1”，1”'，1e，1f，1h，2a，4’，4”，4e，4f，5’，5”，5e，5f，7’，7”，7e，7f，9’，9”，9e，9f和14a是结晶的。
13.根据权利要求5的方法，还包括：
a4)在加碱的情况下将式8糖与连接体J1-L2-J2反应，产生式28糖，
其中L代表-(CH2)n-，
n是选自2，3，4，5，6，7，8，9和10的整数，
r是1，2或3，
J3是J1或J2，
L2选自：
-C(O)-，-E-，-C(O)-NH-NH-C(O)-,
E选自
m，n1和p相互独立地代表1至10的整数，
和
J1和J2相互独立地选自：
和
b4)将式28糖偶联至载体蛋白质。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
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| Synthesis of Streptococcus pneumoniae Type 3 Neoglycoproteins Varying in Oligosaccharide Chain Length, Loading and Carrier Protein;Dirk J. Lefeber等;《Chem. Eur. J.》;20011231;第7卷(第20期);第4411-4421页 * |
| Synthetic Polysaccharide Type 3-Related Di-, Tri-, and Tetrasaccharide–CRM197 Conjugates Induce Protection against Streptococcus pneumoniae Type 3 in Mice;BARRY BENAISSA-TROUW等;《INFECTION AND IMMUNITY》;20010731;第69卷(第7期);第4698-4701页 * |
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