CN109287747A - 一种牛初乳素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：以牛初乳为原料，依次经过脱脂，除酪蛋白，除菌，超滤浓缩，冻干，超滤浓缩，包装步骤完成所述牛初乳素的制备。本发明所述产品加工中有进行除酪蛋白和除乳糖过程，产品十分安全且适用人群广。另外，本发明所述产品不仅含有免疫球蛋白，而且还含有乳铁蛋白，两者协同作用对提高婴幼儿的免疫功能有非常好的效果。特别的，乳铁蛋白的存在具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等功能对老幼体弱者具有很好的强身保健效果。
Description
技术领域
本发明属于乳制产品的制备领域，特别涉及一种牛初乳素的制备方法。
背景技术
在我国奶牛场多达几百个，一个奶牛场从几十头奶牛到几百头、几万头之多，一头奶牛产初乳达50～100公斤。由于初乳中带有血腥味，口服不易接收，新鲜初乳中含有激素，不适宜直接服用，加之初乳中的特殊成份，口服后又不易吸收，多年来牛初乳一直作为小牛的饲料或被丢弃。虽然牛初乳作为保健食品已有近二十年历史，农场一般会将牛初乳销售给工厂，或保留给小牛吃，丢弃的不多了，但是可以说利用度仍有待提高。现代科学研究证明，初乳中含有非常重要的免疫球蛋白、乳铁蛋白、多种生长因子以及调节肽、酶、牛磺酸、磷脂、胆碱、氨基酸、维生素等，因此将牛初乳进行深加工并加以利用不仅能充分利用资然，而且对人类的健康也有很大的帮助。特别的，牛初乳中的免疫球蛋白具有提高人体抵抗疾病的能力，乳铁蛋白是一种具有多种生物学功能的蛋白质，它能够参与铁的转运，对肠道中的铁离子具有增溶作用，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等功能([J].中国乳品工业,1999,27(1):24～25.，Enzyme and Microbial Technology[J].2000,76(1):87～107)。经加工后的牛初乳可以弥补婴幼儿早期发育不足，同时可以增强婴幼儿肌体免疫能力，提高抗病能力，小儿常见的复发性呼吸道感染，服用活性初乳素后，由于血清免疫球蛋白明显升高，临床症状改善有效率达90％，复发次数显著减少；也能抵抗消化道感染，以及促生长发育。对老幼体弱患者，牛初乳则具有明显促进食欲，增强体质，提高免疫功能，改善睡眠、恢复疲劳、提高智商等强身保健效果。中老年常见的II型糖代谢紊乱性糖尿病，服用3个月后各项血糖指征均显著改善；对单纯性胃炎、复发性口疮、更年期综合症、妇女骨质疏松症、习惯性便秘、关节痛、偏头痛等也都有一定的抗病作用。因此，牛初乳制品对老中妇幼强身抗病确是一种最有效的佳品。
但目前在牛初乳加工处理方面，还有许多缺点与不足。例如在牛初乳加工提取过程中，往往有加热过程，这对于牛初乳中的活性蛋白及其他有益活性物质的活性丧失，进一步使得牛初乳的功能减弱。如专利CN891054.57X，就采用加热除菌的方式对牛初乳进行处理。牛初乳中含有大量的酪蛋白，有部分人群对酪蛋白产生过敏反应，特别是婴幼儿对酪蛋白容易产生过敏反应。因此，在加工处理过程中需要出去酪蛋白。现有技术中大多只注重牛初乳制品中免疫球蛋白的保留，忽略乳铁蛋白的重要性。如专利CN106359617A，该专利忽略了保留乳铁蛋白的重要性，而且还缺少去除酪蛋白的意识，使得产品有效成分流失，产品安全性得不到保障。另外的，该专利用γ射线对牛初乳进行除菌处理，γ射线能量高，极易改变一些化学物的结构，对普通食品用γ射线除菌尚可，但对一些需要保持活性的食品，如牛初乳制品，则有可能会破坏有益物质的活性。虽然该专利表明对免疫球蛋白的活性影响很小，但对乳铁蛋白及其他有益活性成分的影响则并未说明。因此，针对现有技术的不足，提供一种低温提取牛初乳制品，去除酪蛋白提高产品安全性，同时保留免疫球蛋白和乳铁蛋白含量，保持牛初乳中有益活性物质的活性对于牛初乳提取方法而言十分重要。市场上乳铁蛋白的价格昂贵，95％级别的进口乳铁蛋白价格高达6000元/公斤，而人们日常饮食中能摄入到乳铁蛋白的机会较少。初乳作为乳铁蛋白的良好来源，如加以合理加工，制成膳食补充剂，可以廉价、有效的提高消费者摄入天然的乳铁蛋白。但现有技术中一般以牛初乳中的免疫球蛋白为主要提取对象，在加工过程中，并未注意乳铁蛋白的提取。乳铁蛋白与免疫球蛋相比，更容易受生产过程影响，并在生产中被破坏。本专利针对这一点，对牛初乳的提取过程进行了改进，以保留乳铁蛋白。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种更安全，有益成分含量更高，有益活性成分的活性保持更好的牛初乳的提取方法。
一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：
(1)收集初乳：收集母牛产仔后3天内的初乳，在收集过程中要求牛初乳清洁、无污染、新鲜，具体的表现为牛初乳颜色为淡黄色，有腥味，不得有杂质，在收集后，在不超过24小时内冷藏，冷藏温度不高于4℃，例如1分钟、3分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、16小时、20小时、24小时；
(2)脱脂：对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂(收集初乳后优选在12-24小时内进行脱脂处理)；
(3)除酪蛋白：采用酸处理和离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行除酪蛋白处理，所得物质为混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过陶瓷膜(优选纳米级别的聚醚砜膜，由德国Membrana公司提供)进行除菌，所得物质为混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理(卷式膜由成都和诚过滤技术有限公司提供，型号为HC-MR10-40/1X)，处理的压力为0.5-2MPa(优选1.2-1.5MPa)温度为25-35℃，每次处理10-15分钟，一般要进行1-4次(优选2-3次)处理，超滤浓缩程度为原液的40％，即100kg混合物B超滤为40kg，除去水、乳糖和无机盐，所得物为混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为15-29Pa(优选20-25Pa)，温度为-28℃至-40℃下处理18-26小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：将步骤(6)制备的混合物D进行卷式膜处理(卷式膜由成都和诚过滤技术有限公司提供，型号为HC-MR10-40/1X)，处理的压力为0.5-2MPa(优选1.2-1.5MPa)温度为25-35℃，处理2-3次，得到牛初乳素。
进一步地，步骤(2)中离心脱脂的温度为25-35℃下，离心机(离心机由宜兴市海德分离机械有限公司提供，型号为NRSDH5碟式分离机)转速为3500-6000转/分，离心时间为5-15分钟。
优选的，步骤(2)中离心机转速为4000-6000转/分。
进一步地，步骤(3)中酸处理和离心的方法的具体过程为：先用1-3mol/L(优选1-2mol/L)的HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.0-5.0，静置，再用1-3mol/L(优选1-2mol/L)的NaOH调节pH至6.0-7.0，再用转速为4000-6000转/分的离心机进行离心处理，去除沉淀，得混合物A。
优选的，步骤(3)中，采用酸处理加离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行去酪蛋白处理，具体的步骤为：首先用2mol/L的HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.5-4.7，静置半小时，再用2mol/L的NaOH调节pH至6.6-6.9。
进一步地，步骤(4)中所述陶瓷膜的孔径大小为0.8-1.6μm。优选的，步骤(4)中的陶瓷膜孔径大小为0.8-1.4μm，更优选1.2μm。
优选的，步骤(6)中将步骤(5)制备的混合物C，在-30℃至-35℃处理24小时，得到混合物D。
优选的，所述制备方法在步骤(7)之后还进行步骤(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛(筛型号为ZS-515高效振荡筛，8-14个孔/平方厘米。)处理，然后进行包装。优选的，步骤(8)中在相对湿度为35-45％，更优选40％的环境下进行包装。
步骤(5)中牛初乳中含有较高的乳糖，由于乳糖的吸收依赖体内乳糖酶的存在，乳糖酶将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖后被人体吸收。随着年龄的增长，乳糖酶逐渐减少直至消失，因此老年人对乳糖吸收产生障碍，为了使本发明所述产品也利于老年人的吸收，故将牛初乳中的乳糖去除。
步骤(7)进行的超滤浓缩是为了进一步出去牛初乳中的水、无机盐、乳糖等其他杂质，可进一步提升牛初乳素的效果。
步骤(3)的酸化，步骤(5)和步骤(7)的超滤浓缩处理对提高本发明所述牛初乳素中乳铁蛋白的含量起到关键作用。本发明所述超滤浓缩虽然可以用离子交换法、混合式扩张床吸附法替代，但是离子交换法和混合式扩张床吸附法目前只在实验室应用较为广泛，由于其使用成本高，清洗麻烦，不适合在工业生产中的应用，超滤方法相比之下，性价比较高。现有技术中，专利CN1663961A专门用阳离子交换树脂来提取牛初乳中的乳铁蛋白，但是该专利提取过程温度可高达50℃，对乳铁蛋白的活性有一定影响，且只是针对乳铁蛋白进行提取，对牛初乳中的其他有益成分，如免疫球蛋白，牛磺酸等成分造成浪费，对牛初乳的利用率整体偏低。另外，用阳离子交换树脂的生产成本也会相对要高。而本发明用2次超滤浓缩处理，不仅能有效提取牛初乳中的乳铁蛋白，而且对其他有益成分如免疫球蛋白、牛磺酸、维生素E一起一些有益的矿物质元素也进行提取，对牛初乳利用充分，且保留的有益成分齐全。
所述牛初乳素不添加任何试剂，属于纯天然牛初乳制作的产品，经灌装成胶囊，每粒胶囊中牛初乳素为145-155mg。
另外的，所述初乳素还可制备成散剂、片剂或粉剂，可以与药学上可接受的载体或赋形剂组合。
本发明所述牛初乳素外观色泽为白色或微黄色，均匀一致，气味无异味，口感细腻，呈淡咸味。
本发明所述牛初乳素产品按质量分数计，蛋白质含量大于或等于40％(例如40％、45％、50％、55％)，其中免疫球蛋白含量大于等于10％(例如10％、15％、20％、25％、30％)，乳铁蛋白含量大于等于5％(例如5％、6％、8％、10％、15％)，脂肪含量小于2.5％，水分含量小于10％。另外，本发明所述牛初乳素中还含有维生素C不低于23％，牛磺酸不低于5％，维生素E不低于5.5％，钙不低于1.8％，锌高达8％，铁不低于1.6％。
与现有技术相比，本发明有益效果如下：
(1)本发明所述产品加工过程无超过30℃的情况，使得牛初乳中的营养成分保存完好。
(2)本发明所述产品有除酪蛋白和除乳糖过程，产品对小孩十分安全，对一般人群更是适用，也十分适合老年人。
(3)本发明所述产品用陶瓷膜进行除菌，不会破坏产品中的有益活性成分，如免疫球蛋白和乳铁蛋白的活性保存完好。
(4)本发明所述产品中不仅含有免疫球蛋白，而且还含有乳铁蛋白(含量超过5％)，两者协同作用对提高婴幼儿的免疫功能有非常好的效果。特别的，乳铁蛋白的存在具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等功能对老幼体弱患者，具有很好的强身保健效果。
具体实施方式
为了进一步使本领域技术人员明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例。
实施例1
一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：
(1)收集初乳：母牛产仔后3天内收集的初乳，在收集过程中要求牛初乳清洁、无污染、新鲜，具体的表现为牛初乳颜色为淡黄色，有腥味，不得有杂质，收集后，在24小时内冷藏；
(2)脱脂：在25℃下，离心机转速为3500转/分，离心时间为5分钟，对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂；
(3)除酪蛋白：采用酸处理加离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行去酪蛋白处理，具体的步骤为：首先用1mol/L HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.0，静置半小时，再用1mol/L NaOH调节pH至6.0，再用转速为4000-6000转/分的离心机进行离心处理，将沉淀部分去除，所得物质为混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过陶瓷膜进行除菌，陶瓷膜孔径大小为0.8μm，所得物质为混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理，处理的压力为0.5MPa温度为25℃，每次处理10分钟，处理1次，除去水、乳糖和无机盐，所得物为混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为15Pa，温度为-28℃下处理18小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：就步骤(6)制备的混合物D进行卷式膜处理，处理的压力为0.5MPa温度为25℃，每次处理10分钟，处理2次得到牛初乳素；
(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛处理，再在相对湿度为35％的环境下进行包装成胶囊状，每粒胶囊中牛初乳素重量为145mg。
实施例2
一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：
(1)收集初乳：母牛产仔后3天内收集的初乳，在收集过程中要求牛初乳清洁、无污染、新鲜，具体的表现为牛初乳颜色为淡黄色，有腥味，不得有杂质，在收集后，在12小时内冷藏；
(2)脱脂：在28℃下，离心机转速为5000转/分，离心时间为10分钟，对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂；
(3)除酪蛋白：采用酸处理加离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行去酪蛋白处理，具体的步骤为：首先用2mol/L HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.6，静置半小时，再用2mol/L NaOH调节pH至6.8，再用转速为5000转/分的离心机进行离心处理，将沉淀部分去除，所得物质为混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过纳米级别的聚醚砜膜进行除菌，纳米级别的聚醚砜膜孔径大小为1.2μm，所得物质为混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理，处理的压力为1.2MPa温度为30℃，每次处理11分钟，处理2次，除去水、乳糖和无机盐，所得物为混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为20Pa，温度为-30℃，处理24小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：就步骤(6)制备的混合物D进行卷式膜处理，处理的压力为1.2MPa温度为25-35℃，每次处理11分钟，处理3次，得到牛初乳素；
(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛处理，再在相对湿度为40％的环境下进行包装胶囊状，每粒胶囊中牛初乳素重量为150mg。
实施例3
一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：
(1)收集初乳：母牛产仔后3天内收集的初乳，在收集过程中要求牛初乳清洁、无污染、新鲜，具体的表现为牛初乳颜色为淡黄色，有腥味，不得有杂质，在收集后，在12小时内冷藏；
(2)脱脂：在30℃下，离心机转速为5000转/分，离心时间为8分钟，对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂；
(3)除酪蛋白：采用酸处理加离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行去酪蛋白处理，具体的步骤为：首先用2mol/L HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.7，静置半小时，再用2mol/L NaOH调节pH至6.6，再用转速为5000转/分的离心机进行离心处理，将沉淀部分去除，所得物质为混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过纳米级别的聚醚砜膜进行除菌，纳米级别的聚醚砜膜孔径大小为1.2μm，所得物质为混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理，处理的压力为1.5MPa温度为30℃，每次处理12分钟，处理3次，除去水、乳糖和无机盐，所得物为混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为25Pa，温度为-35℃，处理24小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：就步骤(6)制备的混合物D进行卷式膜处理，处理的压力为1.5MPa温度为30℃，每次处理12分钟，处理3次，得到牛初乳素；
(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛处理，再在相对湿度为40％的环境下进行包装胶囊状，每粒胶囊中牛初乳素重量为150mg。
实施例4
一种牛初乳素的制备方法，包括以下步骤：
(1)收集初乳：母牛产仔后3天内收集的初乳，在收集过程中要求牛初乳清洁、无污染、新鲜，具体的表现为牛初乳颜色为淡黄色，有腥味，不得有杂质，在收集后，在1小时内冷藏；
(2)脱脂：在35℃下，离心机转速为6000转/分，离心时间为15分钟，对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂；
(3)除酪蛋白：采用酸处理加离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行去酪蛋白处理，具体的步骤为：首先用2mol/L HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至5.0，静置半小时，再用2mol/L NaOH调节pH至7.0，再用转速为6000转/分的离心机进行离心处理，将沉淀部分去除，所得物质为混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过陶瓷膜进行除菌，陶瓷膜孔径大小为1.4μm，所得物质为混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理，处理的压力为2MPa温度为35℃，每次处理15分钟，处理4次除去水、乳糖和无机盐，所得物为混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为29Pa，温度为-40℃，处理26小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：就步骤(6)制备的混合物D进行卷式膜处理，处理的压力为2MPa温度为35℃，每次处理15分钟，处理3次，得到牛初乳素；
(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛处理，再在相对湿度为45％的环境下进行包装胶囊状，每粒胶囊中牛初乳素重量为155mg。
产品安全性能测试
实施例5
昆明种小白鼠20只，每只体重为18-22克，雌雄各占一半。将本发明所述实施例2制备的牛初乳素配制成1g/mL的生理盐水液，然后分别用按1mL/20g体重，给20只小鼠灌胃，每天5次，灌胃后连续观察7天，没有发现有异常现象和死亡。
实验动物饲养环境合格证书号：苏动(环)950047，实验动物质量合格证书号：苏动(质)95010。
由此可知，昆明种小鼠口服剂量为250g/kg/天，在如此高摄入量的情况下仍无毒性反应。
实施例6
SD大鼠(大鼠的一个品系，产自美国)60只，雌雄各半，每只体重为120±20g，将60只SD大鼠随机分成3组，每组20只，雌雄各占一半，分别编号为A，B，C，其中C组作为空白对照，A组按1g/kg/天，B组按5g/kg/天剂量用本发明的实施例4制备的牛初乳素每天灌胃一次，连续13周。期间每周对SD大鼠称重一次，以实验前SD大鼠体重为基础，记录每周SD大鼠的体重占实验前体重的百分比(结果如表1所示)，13周后对每组SD大鼠测定血常规(结果如表2所示)、血液生化(结果如表3所示)、脏器系数(结果如表4所示)及组织切片，实验动物饲养环境合格证书号：苏动(环)950047，实验动物质量合格证书号：苏动(质)95010。
表1：大鼠体重增长情况
由表1可以看出，A组和B组服用不同量本发明实施例4制备的牛初乳素，大鼠的体重增长情况明显比空白对照组的大鼠体重增加得快。且服用量高的B组大鼠体重增长比服用量相对低的A组大鼠体重增长更快。可见本发明所述的牛初乳素有利于大鼠体重的增加，且服用13周大鼠活动正常，说明长期服用本发明所述产品也不会对大鼠造成伤害。
表2：13周后大鼠血常规指标
从表2可以看出，服用本发明所述牛初乳素的大鼠血常规各指标参数与未服用本发明所述牛初乳素的血常规各指标参数几乎一样。
表3：13周后大鼠血液生化指标
| 项目 | A组 | B组 | C组 |
| 谷草转氨酶(u/L) | 23±12 | 23±12 | 26±14 |
| 谷丙转氨酶(u/L) | 66±11 | 60±15 | 67±9 |
| 碱性磷酸酶(u/L) | 17.2±4.8 | 16.4±5.4 | 16.8±5.2 |
| 血尿素氮(mmol/L) | 5.4±1.3 | 4.8±0.9 | 5.1±1.0 |
| 总蛋白(g/L) | 72.5±5.0 | 71.0±5.0 | 70.5±6.5 |
| 血清白蛋白(mmol/L) | 42.5±10.6 | 42.0±8.5 | 40.8±9.2 |
| 总胆红素(umol/L) | 4.3±1.8 | 5.0±1.9 | 4.8±2.1 |
| 血肌酐(umol/L) | 58.4±7.9 | 57.2±10.2 | 61.5±8.2 |
| 总胆固醇(mmol/L) | 2.2±0.4 | 2.5±0.7 | 2.6±0.6 |
| 尿糖(mmol/L) | 3.8±0.9 | 4.2±1.1 | 4.0±0.5 |
从表3可以看出，服用本发明所述牛初乳素的大鼠生化指标参数与未服用本发明所述牛初乳素的血常规各指标参数几乎一样。
13周后，剖解各组大鼠，取出心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸或子宫、脑及前列腺，称重并换算出脏器系数(脏器重g/100g体重)，结果见表4，从结果看，活性初乳素并不影响动物脏器系数。
表4：13周后大鼠主要脏器系数
对各组动物的主要脏器心、肝、脾、肺、肾、脑、胰、膀胱、胃、十二指肠、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、睾丸、甲状腺、淋巴结、胸骨进行病理学检查，结果未见因服活性初乳素而引起的病理性改变。
综上所述，通过对大鼠连续用本发明所述牛初乳素(剂量1g/kg和5g/kg)，灌胃13周的毒性试验测试，结果并未发现因用本发明所述牛初乳素而引起的各种病理性变化，表明长期服用本发明所述牛初乳素，不会对动物机体产生毒性，可长期服用。
本发明所述牛初乳素保健功能试验
实施例7
NIH种小白鼠(由美国国立卫生研究院培育而成)30只，每只体重为17-21g，雌雄各半，按性别体重随机分成3组，每组10只。分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水，表示每10g的小鼠体重注射0.25mL的生理盐水)，本发明实施例3制备的牛初乳素低剂量组(50mg/kg，表示每1kg的小鼠体重注射50mg的牛初乳素)和本发明实施例3制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg，表示每1kg的小鼠体重注射150mg的牛初乳素)。对各组小白鼠连续灌胃5天后，于第5天灌胃后1小时后，对小白鼠眼眶取血做E玫瑰花环形成试验，具体操作如下：取小鼠血液加肝素钠抗凝，用蒸馏水溶解红细胞，再加NaCl溶液，使其等渗，离心沉淀，经HanK's液(是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液)反复洗涤后加绵羊红细胞于37℃水浴后，置4℃冰箱2小时，再用戊二醛固定，涂片，染色，镜检，凡吸附3个以上绵羊红细胞的淋巴细胞即为一个玫瑰花，镜下计数200个淋巴细胞，换算出E玫瑰花的百分率。结果如表5所示。
表5：本发明实施例3制备的牛初乳素对小白鼠T淋巴细胞E花环形成的影响
| 组别 | 牛初乳素剂量(mg/kg) | E花环形成率(％) |
| 空白对照组 | 0 | 25.6±0.8 |
| 低剂量组 | 50 | 36.7±1.3 |
| 高剂量组 | 150 | 42.4±1.6 |
从表5中可见，本发明所述牛初乳素的小鼠E花环形成率明显高于空白对照组。
实施例8
昆明种小鼠30只，每只体重为18-22克，雌雄各半，按性别体重随机分成3组，每组10只，分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水)，本发明实施例1制备的牛初乳素低剂量组(50mg/kg)和本发明实施例1制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg)。对各组小鼠连续灌胃7天，于第7天灌胃后1小时各组小鼠腹腔注射无菌肉汤(0.5mL/10g)，第2天再次腹腔注射无菌肉汤(0.5mL/10g)，于1小时后各组小鼠腹腔注射5％鸡红细胞悬液(0.25mL/10g)，间隔1小时后剖腹吸收腹腔液，涂片、染色、镜检计数200个巨噬细胞及吞噬鸡红细胞数，计算出吞噬率，结果如表6所示。
表6：本发明实施例1制备的牛初乳素对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的影响
| 组别 | 牛初乳素剂量(mg/kg) | 吞噬率(％) |
| 空白对照组 | 0 | 21.7±0.5 |
| 低剂量组 | 50 | 30.4±0.8 |
| 高剂量组 | 150 | 38.6±0.7 |
从表6可以看出本发明实施例1制备的牛初乳素对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的提高起到明显的作用。
通过小鼠E玫瑰花环形成实验和腹腔巨噬细胞吞噬功能实验，发现活性初乳素具有增强机体特异细胞免疫功能和非特异性免疫功能的作用。
实施例8
NIH小鼠30只，每只体重为18-22g，雌雄各半，小鼠随机分成3组，分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水)，本发明实施例1制备的牛初乳素低剂量组(50mg/kg)和本发明实施例1制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg)，各组小鼠每天灌胃给本发明实施例1制备的牛初乳素及生理盐水，连续10天，小鼠予给药第二天时用体积分数为20％的羊红细胞0.2mL免疫致敏，于第10天后眼眶取血，离心，取血清稀释333.3倍，以稀释血清1mL加5％羊红细胞0.5mL及1：10稀释的豚鼠血清1mL，加都氏试液3mL，摇匀放置10分钟，于540nm波长比色读取吸收度，量取5％羊红细胞0.25mL加都氏液至4mL，比色读取吸收光度值，得到实验中所用羊红细胞半数溶血时的吸收光，度值，按HC50＝样品的吸光值x稀释倍数/羊红细胞半数溶血时的吸光计算每只鼠的血清HC50值，结果如表7所示。
表7：本发明实施例1制备的牛初乳素对正常小鼠血清溶血素值的影响
| 组别 | 剂量(mg/lg) | 吸光度值 | HC50 |
| 对照组 | 0 | 0.26±0.07 | 205.7±60.8 |
| 低剂量组 | 50 | 0.27±0.09 | 210.8±70.2 |
| 高剂量组 | 150 | 0.30±0.11 | 237.7±85.0 |
由表7可以看出，通过对小鼠血清溶血素HC50值的测定，发现服用牛初乳素的动物的HC50明显高于空白对照组，说明本发明所述牛初乳素能提高小鼠的HC50值。
实施例9
NIH小鼠48只，每只体重为18-22克，雌雄各半，随机分成3组，分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水)，本发明实施例1制备的牛初乳素低剂量组(10mg/kg，表示按1kg小鼠体重给药10mg，下同)，本发明实施例1制备的牛初乳素中等剂量组(50mg/kg)和本发明实施例1制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg)，PHA(PHA为植物血凝素，注射植物血凝素会改变大鼠淋巴细胞)组(50mg/kg)各组小鼠连续灌胃5天，在停止给受试物第5天拉颈椎处死，浸泡在75％的酒精中3分钟取出，将四肢固定在蜡技上，用无菌手术大剪刀剖腹取脾，取出后立即放入Hank's培养液中，然后用挤压方法取出脾细胞于无菌的塑料管中，在1000转/分低温离心机中离心10分钟，吸去上清，用0.2％的低渗盐水1-2mL，溶解红细胞，在15秒钟内立即加入生理盐水1-2mL。再用Hank's液稀释10-15mL，1000转离心10分钟，离心后吸取上清，加入2mL 1640培养液(1640是培养液代号，在行业内通用)，计数，使每毫升含淋巴细胞数2x106个。取无菌处理的96孔培养板，将计数的淋巴细胞，每孔加入200微升，放入含5％CO2的培养箱内，分别培养三天，在培养结束前4小时加入3H-TdR(氚标记的胸腺嘧啶核苷)，0.5uci/孔，实验结束后将培养板放入冰浴，并终止反应。中，15分钟，然后用可调加样器将培养液吸出，滴在49型国产微孔泸膜上，并用生理盐水反复冲洗四次，然后用95％酒精三氯醋酸洗一次，取下泸膜使其充分干燥后放入，装有PPO(聚苯醚)。二甲苯的闪烁杯中，做CPM计数(即射线每分钟的计数次数)。体外淋巴细胞3H-TdR参入的实验过程同上。取未经体内给药的小鼠，取出脾细胞，计数装板，加入不同浓度的受试物，培养测定方法同上。淋巴细胞转化率＝[实验组(CPM)-单纯淋巴细胞(CPM)]x100/单纯淋巴细胞(CPM)。结果如表8所示。
表8：牛初乳素对小鼠脾淋巴细胞转化的影响
由表8可以看出，通过小鼠脾淋巴细胞转化实验，可见服用牛初乳素组的小鼠，体内给给药小鼠脾淋巴细胞增殖率较体外高，且发现本发明所述牛初乳素具有诱导小鼠脾淋巴细胞转化的作用。
实施例10
SD大鼠，30只，体重180±20g，雌雄各半，按性别体重随机分成3组，分别为空白对照组，本发明实施例3制备的牛初乳素低剂量组(40mg/kg)和高剂量组(120mg/kg)。每天一次，连续灌胃5天，然后测定大鼠外周血中血红蛋白含量，结果如表9所示。
表9：牛初乳素连续服用对大鼠外周血中血红蛋白含量的影响
由表9可知，本发明所述牛初乳素能提高动物体内的血红蛋白含量。
实施例11
实验用幼小白鼠30只，体重12±3g，昆明种，雌雄各半，小鼠随机分成3组，分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水)，本发明实施例1制备的牛初乳素低剂量组(50mg/kg)和本发明实施例1制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg)，连续7天，第7天未对各组幼鼠进行“Y”形迷宫学习记忆测试，按连续9次进行安全区为学习成功，记录各组小鼠所需训练的次数，结果如表10所示。
表10：牛初乳素对幼鼠学习记忆成功所需的训练次数
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 次数 |
| 空白对照组 | 13.4±5.2 | |
| 低剂量组 | 50 | 11.4±3.9 |
| 高剂量组 | 150 | 10.2±4.6 |
由表10可知，服用本发明所述牛初乳素的幼鼠学习和记忆能力更强。
实施例12
昆明种小鼠，体重20±2g，36只，雌雄各半，小鼠随机分成3组，每组12只分别为空白对照组(0.25mL/10g生理盐水)，本发明实施例3制备的牛初乳素低剂量组(50mg/kg)和本发明实施例3制备的牛初乳素高剂量组(150mg/kg)，连续灌胃4天后，在30±0.5℃的水池中各组小鼠负重(体重的20％)游泳。记录小鼠自游泳开始到下沉时所需时间，结果如表11所示。
表11：牛初乳素对小鼠游泳时间的影响
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 时间(s) | 延长率(％) |
| 空白对照组 | 137±21 | ||
| 低剂量组 | 50 | 148±25 | 8.0 |
| 高剂量组 | 150 | 153±32 | 11.7 |
从表11结果看出本发明所述初乳素有延长动物游泳时间的作用，即有增强小鼠体能耐力的作用。
从实施例7-12结果，可以看出本发明所述牛初乳素具有促进幼体生长发育，提高智力、体力、耐力、增强血色素和提高机体特异性和非特异性免疫功能的作用，表明本发明所述牛初乳素可作为婴幼儿生长发育，发展智力、体力、预防贫血和增强机体免疫的功能食品。
Claims (10)
1.一种牛初乳素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)收集初乳：收集母牛产仔后3天内分泌的乳，在24小时内冷藏；
(2)脱脂：对步骤(1)中的牛初乳进行离心脱脂；
(3)除酪蛋白：采用酸处理和离心的方法对步骤(2)中经过离心脱脂处理的牛初乳进行除酪蛋白处理，得混合物A，备用；
(4)除菌：将步骤(3)制备的混合物A经过陶瓷膜进行除菌，得混合物B，备用；
(5)超滤浓缩：用卷式膜对步骤(4)制备的混合物B进行处理，得混合物C；
(6)冻干：将步骤(5)制备的混合物C，在真空度为15-29Pa，温度为-28℃至-40℃下处理18-26小时，得到混合物D，备用；
(7)超滤浓缩：将步骤(6)得到的混合物D用卷式膜进行处理，得到牛初乳素。
2.根据权利要求1所述的牛初乳素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中离心脱脂的温度为25-35℃，离心机转速为3500-6000转/分，离心时间为5-15分钟。
3.根据权利要求1所述的牛初乳素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中酸处理和离心的方法的具体过程为：先用1-3mol/L的HCl调节步骤(2)中经过脱脂的牛初乳的pH至4.0-5.0，静置，再用1-3mol/L的NaOH调节pH至6.0-7.0，再用转速为4000-6000转/分的离心机进行离心处理，去除沉淀，得混合物A。
4.根据权利要求1所述的牛初乳素的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述陶瓷膜的孔径大小为0.8-1.6μm。
5.根据权利要求1所述的牛初乳素的制备方法，其特征在于，所述制备方法在步骤(7)之后还进行步骤(8)包装：将步骤(7)得到的牛初乳素经过筛处理，然后进行包装。
6.根据权利要求5所述的牛初乳素的制备方法，其特征在于，步骤(8)中在相对湿度为35-45％的环境下进行包装；将所述牛初乳素包装成胶囊、片剂或粉剂。
7.一种牛初乳素，其特征在于，由权利要求1-6中任一项所述的方法制备得到。
8.根据权利要求7所述的牛初乳素，其特征在于，按质量分数计，所述牛初乳素中蛋白质含量大于或等于40％，脂肪含量小于2.5％，水分含量小于10％。
9.根据权利要求7-8中任一项所述的牛初乳素，其特征在于，按质量分数计，所述牛初乳素中免疫球蛋白含量大于等于10％，乳铁蛋白含量大于等于5％。
10.一种牛初乳素的应用，其特征在于，根据权利要求7-8中任一项所述的牛初乳素应用于婴幼儿或年老体弱者提高免疫力。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110250268A (zh) * | 2019-07-22 | 2019-09-20 | 北京泓恩生物科技有限公司 | 一种牛奶提取物的制备方法 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2605322B1 (fr) * | 1986-10-20 | 1989-04-28 | Applic Tech Nles | Procede de separation de certaines proteines du lactoserum ou du lait. |
| CN1249903A (zh) * | 1999-07-28 | 2000-04-12 | 王俊华 | 营养强化初乳素及其制造方法 |
| CN1647663A (zh) * | 2005-03-23 | 2005-08-03 | 哈尔滨康普乳品有限公司 | 牛、羊初乳粉的制备方法及其制备的牛、羊初乳粉 |
| CN1849903A (zh) * | 2006-05-22 | 2006-10-25 | 江南大学 | 一种从牛初乳中工业化分离纯化乳铁蛋白的方法 |
| CN101248819A (zh) * | 2008-03-04 | 2008-08-27 | 江苏星驰生物科技有限公司 | 富含IgG的牛初乳粉的制备方法 |
| CN101724013A (zh) * | 2008-10-24 | 2010-06-09 | 哈尔滨康普乳品有限公司 | 从牛初乳中工业化分离纯化免疫球蛋白a、免疫球蛋白g和乳铁蛋白的方法 |
| RU2400106C1 (ru) * | 2009-06-11 | 2010-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Способ получения бад "л-пфи" из вторичного молочного сырья и полученная этим способом бад "л-пфи" |
| CN104186916A (zh) * | 2014-08-06 | 2014-12-10 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 从乳清中分离制备乳清蛋白粉的方法 |
-
2018
- 2018-08-28 CN CN201810986276.XA patent/CN109287747A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2605322B1 (fr) * | 1986-10-20 | 1989-04-28 | Applic Tech Nles | Procede de separation de certaines proteines du lactoserum ou du lait. |
| CN1249903A (zh) * | 1999-07-28 | 2000-04-12 | 王俊华 | 营养强化初乳素及其制造方法 |
| CN1647663A (zh) * | 2005-03-23 | 2005-08-03 | 哈尔滨康普乳品有限公司 | 牛、羊初乳粉的制备方法及其制备的牛、羊初乳粉 |
| CN1849903A (zh) * | 2006-05-22 | 2006-10-25 | 江南大学 | 一种从牛初乳中工业化分离纯化乳铁蛋白的方法 |
| CN101248819A (zh) * | 2008-03-04 | 2008-08-27 | 江苏星驰生物科技有限公司 | 富含IgG的牛初乳粉的制备方法 |
| CN101724013A (zh) * | 2008-10-24 | 2010-06-09 | 哈尔滨康普乳品有限公司 | 从牛初乳中工业化分离纯化免疫球蛋白a、免疫球蛋白g和乳铁蛋白的方法 |
| RU2400106C1 (ru) * | 2009-06-11 | 2010-09-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Способ получения бад "л-пфи" из вторичного молочного сырья и полученная этим способом бад "л-пфи" |
| CN104186916A (zh) * | 2014-08-06 | 2014-12-10 | 中国科学院新疆理化技术研究所 | 从乳清中分离制备乳清蛋白粉的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 卢蓉蓉 等: "预分离初乳中乳铁蛋白的超滤工艺", 《食品与生物技术》 * |
| 谷鸣: "《乳品工程师实用技术手册》", 31 January 2009, 中国轻工业出版社 * |
| 郭本恒 等: "《干酪科学与技术》", 31 May 2015, 中国轻工业出版社 * |
| 陈清艳 等: "膜技术在乳品工业的应用", 《食品工业》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110250268A (zh) * | 2019-07-22 | 2019-09-20 | 北京泓恩生物科技有限公司 | 一种牛奶提取物的制备方法 |
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