CN109248219A - 一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用。该中药组合物由以下重量份的中药组成：大黑头草11～33重量份，长白蔷薇果9～27重量份，毛叶丁香罗勒10～30重量份，木蝴蝶树皮30～90重量份，藓生马先蒿6～18重量份，弹裂碎米荠15～45重量份，大金刀13～39重量份的原料药制成。本发明的中药组合物具有标本兼治，整体疗效高，疗程短，不易产生耐药性，残留低，毒副作用小等优点，对于促进养猪业的健康发展，具有十分重要的经济效益和社会效益。

Description

一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用

技术领域

本发明涉及中兽药领域，更具体地涉及一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用。

背景技术

自改革开放以来，我国的养猪业得以迅速发展。养猪规模不断扩大，养殖方式向工厂化、集约化方向发展，基本上满足了人们对猪肉的市场需要。然而，猪病仍然是危害和制约养猪业健康发展的重要因素。特别是某些传染病危害更甚，如猪丹毒等。该病是由猪丹毒杆菌引起的一种急热性、人畜共患传染病。猪丹毒是猪丹毒丝菌(Erysipelothrixrhusiopathiae)，俗称猪丹毒杆菌引起的一种急性热性传染病，其主要特征为高热、急性败血症、皮肤疹块(亚急性)、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎(慢性)。本病呈世界性分布，猪丹毒杆菌是一种革兰氏阳性菌，具有明显的形成长丝的倾向。本菌为平直或微弯纤细小杆菌，大小为0.2～0.4微米×0.8～2.5微米。在病料内的细菌，单独、成对或成丛排列，在白细胞内一般成丛存在，在陈旧的肉汤培养物内和慢性病猪的心内膜疣状物中，多呈长丝状，有时很细。本菌对盐腌、火熏、干燥、腐败和日光等自然环境的抵抗力较强。本菌的耐酸性较强，猪胃内的酸度不能杀死它，因此可经胃而进入肠道。猪丹毒在我国各地普遍流行，给养猪业造成了较大的经济损失。随着各地养猪的规模化和技术化，加之实施以免疫预防为主的综合防治措施，猪丹毒的防治水平不断提高，猪丹毒得到了有效控制。但由于近年来有的猪场忽略了猪丹毒等细菌性疾病的免疫预防，致使猪丹毒又有了流行的趋势。

目前猪丹毒的治疗，一直依赖抗生素及化学药品制剂，由于长期使用，使猪丹毒杆菌产生了很强的耐药性，药物用量越来越大，又给食品安全带来很大的危害。在今后的养猪生产中，抗生素及化学药品的大面积使用将逐步受到一定的限制。我国中药资源丰富，容易获取，价格低廉，毒副作用小，几乎无残留，无抗药性，不污染环境，还能达到标本兼治的效果。因此，研究中药制剂治疗猪丹毒，显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，该中药组合物能迅速杀灭猪体内猪丹毒杆菌，排泄体内毒素，提高机体免疫力，达到标本兼治的目的。

本发明的目的通过下列技术方案来实现：

一种治疗猪丹毒的中药组合物，该组合物由下列重量份的组分制成：

大黑头草11～33重量份，长白蔷薇果9～27重量份，毛叶丁香罗勒10～30重量份，木蝴蝶树皮30～90重量份，藓生马先蒿6～18重量份，弹裂碎米荠15～45重量份，大金刀13～39重量份。

上述组合物优选由下列重量份的组分组成：

大黑头草11～16克，长白蔷薇果9～12克，毛叶丁香罗勒10～14克，木蝴蝶树皮30～40克，藓生马先蒿6～10克，弹裂碎米荠15～20克，大金刀13～18克。

上述组合物最优选由下列重量份的组分组成：

大黑头草13～16重量份，长白蔷薇果10～12重量份，毛叶丁香罗勒12～14重量份，木蝴蝶树皮35～40重量份，藓生马先蒿8～10重量份，弹裂碎米荠17～20重量份，大金刀15～18重量份。

上述治疗猪丹毒的中药组合物通过下列步骤制备得到：

将大黑头草，长白蔷薇果，毛叶丁香罗勒，木蝴蝶树皮，藓生马先蒿，弹裂碎米荠、大金刀混合加水浸泡，煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，制成适当剂型。

上述治疗猪丹毒的中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂，优选制备剂型是散剂和注射液。

上述治疗猪丹毒的中药注射液包括以下步骤：

将大黑头草，长白蔷薇果，毛叶丁香罗勒，木蝴蝶树皮，藓生马先蒿，弹裂碎米荠，大金刀药材混合，加总重5～8倍的蒸馏水浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每毫升含1～2克生药量的药液，调pH7.0，制成注射液。

上述治疗猪丹毒的中药散剂包括以下步骤：

将大黑头草，长白蔷薇果，毛叶丁香罗勒，木蝴蝶树皮，藓生马先蒿，弹裂碎米荠，大金刀混合，加总药材重8倍水浸泡3～4小时，煮沸后维持0.5～1小时，过滤，滤渣再加总药材重6倍水，煮沸后维持1小时，两次滤液合并，在90℃条件浓缩后得到密度为1.15的浸膏，喷雾干燥(先开排风机，再打开进风机，然后开蒸汽阀门，等塔内温度到110℃时，打开高压均质机进行喷粉)，即得散剂。上述制备的中药组合物在治疗猪丹毒药物中应用。

本发明的有益效果：

本发明提供一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用。其中，大黑头草，为唇形科植物垂花香薷Elsholtzia penduliflora W.W.Smith的全草，功能有清热止咳，解热解毒。主治流感，肺炎，支气管炎，胆囊炎，尿路感染，扁桃体炎，乳腺炎，炭疽，外伤感染。长白蔷薇果，为蔷薇科植物长白蔷薇Rosa koreana Kom.的果实。功能有滋补强壮，健胃消食。主治身体衰弱，贫血，肺结核，气滞腹胀，胃溃疡。毛叶丁香罗勒，为唇形科植物毛叶丁香罗勒Ocimum gratissimum Linn.var.suave Willd.的全草。功能有疏风解表，化湿和中，散瘀止痛。主治外感风寒，头痛，脘腹胀痛，消化不良，泄泻，风湿痹痛，湿疹瘙痒，跌打损伤，蛇咬伤。木蝴蝶树皮，为紫薇科植物木蝴蝶Oraxylum indicum(Linn.)kurz的树皮，功能有清热利湿，退黄，利咽消肿。主治传染性黄疸肝炎，咽喉肿痛。藓生马先蒿，为玄参科植物藓生马先蒿Pedicularis muscicola Maxim的根，功能有补气固表，安神。主治气血不足，体虚多汗，心悸泛力。弹裂碎米荠，为十字花科植物弹裂碎米荠Cardamine impatiens L.的全草，功能有活血，清热解毒，利尿通淋。主治痈肿，淋证。大金刀，为水龙骨科植物盾蕨Neolepisorus ovatus(Bedd.)Ching的全草。功能有清热利湿，止血，解毒。主治高热，热淋，小便不利，肺痨咯血，痈肿，水火烫伤。

本发明采用上述中药组分并优选配比制成的中药组合物能迅速杀灭猪体内猪丹毒杆菌，排泄体内毒素，提高机体免疫力，达到标本兼治的目的，且整体疗效高，疗程短，不易产生耐药性，残留低，毒副作用小。

下面就本发明的临床效果进一步说明本发明的疗效：

一、实验室药敏试验

中药药敏片的制备：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆形纸片50片放入灭菌、干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15～20分钟高压灭菌后，放在37℃温箱中数天，使完全干燥。

中药药敏纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液(按实施例3制备得到)0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，同时在瓶口上记录药物名称，放在37℃温箱中过夜，干燥后即密盖，置阴凉干燥处存放，有效期6个月。

西药药敏片：青霉素、阿莫西林、头孢噻呋钠、四环素为对照，由杭州天和微生物试剂有限公司生产。

菌株：猪丹毒杆菌，由江苏农牧科技职业学院预防兽医教研室提供。用血液营养琼脂培养基将菌株在37℃培养复壮24小时，再接种于肉汤培养基中扩大培养24小时，培养物装瓶于4℃保存备用。

在超净工作台中，用酒精灯火焰灭菌的接种环挑取适量猪丹毒杆菌培养液于少量生理盐水中制成细菌混悬液,用灭菌绵拭子将待检细菌混悬液均匀地涂布于血液营养琼脂平板表面。

将镊子在酒精灯火焰灭菌后，取药敏片贴到血液营养琼脂平板培养基表面，用镊子轻按药敏片，使药敏片与培养基紧密相贴，在平皿中央贴一片，外周等距离贴若干片，标记每种药敏片的名称。将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时，观察结果。

药敏试验结果观察：按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准，抑菌圈直径(毫米)敏感度：＞20为极度敏感，15～20为高度敏感，10～14为中度敏感，＜10为低度敏感，无抑菌圈为不敏感。结果见表1。

表1猪丹毒杆菌药敏试验结果

从表1可以看出，本发明中药口服液对猪丹毒杆菌的抑菌效果和阿莫西林、头孢噻呋钠相似，好于青霉素，比四环素强的多。

二、人工诱发猪丹毒模型

1.试验动物与分组

本试验用50日龄鸽子，试验前剔除过大、过小、体弱的鸽子，随机分组，每组30只。试验设计了6个组，即本发明样品1(按实施例2制备)高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药对照组、感染对照组和空白对照组。

2.试验方法

(1)致死量测定经测定1×10⁶个/毫升的菌液，每只鸽子胸部肌肉注射0.5毫升。

(2)操作空白对照组的鸽子不用药，不接种菌液，其余5组的鸽子在同一时间每只胸部肌肉注射猪丹毒杆菌菌液0.5毫升，菌液浓度为1×10⁶个/毫升。

(3)用药方法与疗效鸽子在接种猪丹毒杆菌后第二天，用本发明样品2肌肉注射。高剂量组，每只肌肉注射2毫升每天2次，连用4天；中剂量组，每只肌肉注射1毫升每天2次，连用4天；低剂量组，每只肌肉注射0.5毫升每天2次，连用4天；西药对照组，每只肌肉注射青霉素4万单位，每天2次，连用4天；感染对照组与空白对照组的鸽子不用任何药物，结果见表2。

表2人工诱发猪丹毒模型治疗结果

三、本发明中药组合物对猪丹毒临床治疗效果

2018年4月，江苏省东台市某猪场，饲养322头肉猪，平均体重在45kg左右，在4月11日发病，体温升高至41.2℃左右，食欲减退，少数猪有呕吐，精神不振，常躺卧地上，不愿走动，少部分猪的背部、胸部、颈部和四肢外侧的皮肤上出现大小和数量不等的疹块，多呈菱形和方形，用手按压疹块褪色，有2头猪发病3小时后死亡。根据临床症状，初步诊断为猪丹毒杆菌病，为了确诊，进行了实验室诊断。

1.细菌学诊断

细菌培养：无菌采取病死猪的脾脏，划线接种血液营养琼脂平板，于37℃培养箱中培养24小时，可见平板上长出针尖大小露滴状溶血的菌落，经革兰氏染色、镜检，观察到革兰氏阳性的细长小杆菌，易形成长丝状，两端钝圆，与猪丹毒杆菌特征相符。

细菌生化试验：对分离纯化的细菌，接种于生化试验微量发酵管，37℃培养24小时，符合猪丹毒杆菌的特征。

2.治疗情况

第1组40头猪，用实施例1制剂治疗，每公斤体重0.15毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。第2组40头猪，用实施例2制剂治疗，每公斤体重0.2毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。第3组40头猪，用实施例3制剂治疗，每公斤体重0.1毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。第4组40头猪，用实施例4制剂治疗，每吨饲料加中药粉剂1公斤，自由采食，连用4天。第5组40头猪，用青霉素治疗，每公斤体重1万单位肌肉注射，每头2次，连用4天。第6组40头猪，用对比例1制剂治疗，每公斤体重0.15毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。第7组40头猪，用对比例2制剂治疗，每公斤体重0.15毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。第8组40头猪，用对比例3制剂治疗，每公斤体重0.15毫升肌肉注射，每天2次，连用4天。见表3。

表3发明中药对猪丹毒临床治疗结果

四、安全性评价

取ICR小鼠40只，体重在25～30克，按体重随机分成5组，每组8只，雌雄各半，口服溶液给药(按实施例2制备得到)，给药量分别为0.2毫升/只、0.4毫升/只、0.6毫升/只和0.8毫升/只，每天口服2次，连续给药5天，停药后连续观察20天。对照组自由饮水。结果所有小鼠健存，其活动、饮食、毛发、排泄物未发现异常，未见毒性反应。对小鼠口腔和破损皮肤进行刺激性试验，未见有刺激性反应和其它不良反应。

具体实施方式：

为了更清晰的理解本发明，以下结合实施例对本发明做进一步描述。但实施例的具体细节仅用于解释本发明，不以任何方式限制本发明。

实施例1：

组方：大黑头草13克，长白蔷薇果10克，毛叶丁香罗勒12克，木蝴蝶树皮35克，藓生马先蒿8克，弹裂碎米荠17克，大金刀15克。

具体制备过程如下：

将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠、大金刀混合，加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加4倍量的蒸馏水，冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药1.5克的药液，调pH 7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

实施例2：

组方：大黑头草11克，长白蔷薇果9克，毛叶丁香罗勒10克，木蝴蝶树皮30克，藓生马先蒿6克，弹裂碎米荠15克，大金刀13克。

具体制备过程如下：

将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠、大金刀混合，加药材总重3倍的蒸馏水浸泡24小时，煎煮2次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，静置48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为80％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药1克的药液，调pH7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

实施例3：

组方：大黑头草24克，长白蔷薇果20克，毛叶丁香罗勒16克，木蝴蝶树皮50克，藓生马先蒿14克,弹裂碎米荠28克，大金刀28克。

具体制备过程如下：

将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠、大金刀混合，加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时，煎煮2次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，静置48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量的蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药2g的药液，调pH7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

实施例4：

组方：大黑头草33克、长白蔷薇果26克、毛叶丁香罗勒30克、木蝴蝶树皮85克、藓生马先蒿16克、弹裂碎米荠45克、大金刀38克。

具体制备过程如下：

将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠混合，加总药材重8倍水浸泡8小时，煮沸并维持1.5小时，过滤，滤渣再加总药材重6倍水，煮沸并维持1小时，两次滤液合并，在90℃条件浓缩后得到密度为1.15的浸膏，喷雾干燥(先开排风扇，再打开进风机，然后开蒸汽阀门，等塔内温度到110℃时，打开高压均质机进行喷雾)，即得散剂。

对比例1

组方：大黑头草110克。

具体制备过程如下：

将大黑头草加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加4倍量的蒸馏水，冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药1.5克的药液，调pH 7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

对比例2

组方：弹裂碎米荠110克。

具体制备过程如下：

将弹裂碎米荠加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加4倍量的蒸馏水，冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药1.5克的药液，调pH 7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

对比例3

组方：大金刀110克。

具体制备过程如下：

将大金刀加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加4倍量的蒸馏水，冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每毫升含生药1.5克的药液，调pH 7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

Claims (8)

1.一种中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其中，该组合物由以下重量份的中药组分组成：大黑头草11～33重量份，长白蔷薇果9～27重量份，毛叶丁香罗勒10～30重量份，木蝴蝶树皮30～90重量份，藓生马先蒿6～18重量份，弹裂碎米荠15～45重量份，大金刀13～39重量份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述的中药组合物由以下重量份的组分组成：大黑头草11～16克，长白蔷薇果9～12克，毛叶丁香罗勒10～14克，木蝴蝶树皮30～40克，藓生马先蒿6～10克，弹裂碎米荠15～20克，大金刀13～18克。

3.根据权利要求1所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述的中药组合物由以下重量份的组分组成：大黑头草13～16重量份，长白蔷薇果10～12重量份，毛叶丁香罗勒12～14重量份，木蝴蝶树皮35～40重量份，藓生马先蒿8～10重量份，弹裂碎米荠17～20重量份，大金刀15～18重量份。

4.根据权利要求1、2或3所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂。

5.根据权利要求4所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述制剂剂型为散剂和注射液。

6.根据权利要求1、2或3所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于该组合物的制备方法包括以下步骤：将大黑头草，长白蔷薇果，毛叶丁香罗勒，木蝴蝶树皮，藓生马先蒿，弹裂碎米荠、大金刀混合加水浸泡，煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状。

7.根据权利要求5所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述中药散剂的制备方法包括以下步骤：将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠、大金刀混合，加总药材重7～8倍量水浸泡8～12小时，煮沸后，维持1～1.5小时，过滤，滤渣再加5～6倍量水，煮沸后维持0.5～1小时，过滤，两次滤液合并，浓缩，喷雾干燥，粉碎。

8.根据权利要求5所述的中药组合物在制备治疗猪丹毒的药物中的应用，其特征在于所述中药注射液的制备方法包括以下步骤：将大黑头草、长白蔷薇果、毛叶丁香罗勒、木蝴蝶树皮、藓生马先蒿、弹裂碎米荠、大金刀混合，加药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每毫升含1～2克生药量的药液，调pH7.0，制成注射液。