CN109223876A

CN109223876A - 一种用于人乳头状瘤病毒（hpv）的组合物

Info

Publication number: CN109223876A
Application number: CN201710561985.9A
Authority: CN
Inventors: 李娟�; 时贞平; 郭英球
Original assignee: Changsha Oubang Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Changsha Oubang Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2017-07-11
Filing date: 2017-07-11
Publication date: 2019-01-18

Abstract

本发明公开了一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，主要由苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、蟾酥组成。还可以加入菊苣和/或车前子，本发明的组合物可用于制备成适当的药物、消毒品制剂，广泛应用于人乳头状瘤病毒（HPV）疾病治疗范畴。

Description

一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物

技术领域

本发明涉及一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，本发明的组合物可用于制备成适当的药物或消毒品制剂，广泛应用于人乳头状瘤病毒（HPV）的疾病治疗范畴。

背景技术

人乳头瘤病毒( HPV) 感染全球发病率均很高，可以引起许多皮肤黏膜良性增生性疾病、宫颈癌、头颈癌以及肛门直肠肿瘤等，对健康危害很大，且每年用于诊治的费用巨大。

流行病学资料显示，100%宫颈癌患者的高危型 HPV检测阳性，97%宫颈上皮内高度瘤变检测阳性，HPV感染与宫颈癌密切相关，因此，早期诊治HPV感染对防控宫颈癌具有重要意义。一项综合78项研究宫颈细胞学正常人群HPV感染率的meta分析显示，全球范围内 HPV感染率为10.41%，非洲地区最高(22.1% )，亚洲地区最低(8.0% )。另一项针对全球宫颈癌患者HPV型别的meta分析指出，宫颈癌患者的常见HPV型别依次为16、18、45、31、33、58和52型，亚洲地区58和52型高于欧美地区 31、33、45 型。不同国家及地区HPV感染率差异较大，范围波动在1.4%～25.6%。国内报道正常宫颈HPV感染率为11%～37%。

HPV感染主要通过性接触传播，性活跃妇女HPV感染率最高。研究显示，高危型HPV感染率的年龄分布呈现先高后低，之后再度升高的现象，年龄曲线呈现明显的双高峰特点，与宫颈癌高发双峰曲线相符。一项针对15～59岁女性HPV感染情况的调查发现，在15～24岁女性中HPV感染达到第1个高峰，在35～54岁达到第2个高峰，高危型HPV感染出现同样的年龄差异，分别于15～24及35～49岁达到高峰，而低危型感染不存在明显的年龄差异。

综上所述，HPV对于15岁以上的女性感染率高居不下，部分感染者通过免疫力的完善可以在感染后的6个月内好转，大部分感染者尤其是高危HPV的感染者需要正规的治疗，但是目前临床上几乎没有作用于HPV的药物用于临床，目前临床仅仅使用干扰素外用凝胶或栓剂用于HPV感染的治疗，效果很难达到理想。

所以，顺应HPV感染率高发需求和临床治疗手段亏乏的需求，研究用于HPV的制品就显得非常具有意义，所以本组合物的研究具有顺应临床需求的意义。

本发明的用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物原料，通过常规和/或非常规提取手段提取药材的活性成分，制备成适当的药物、消毒品制剂，用于人乳头状瘤病毒（HPV）疾病的治疗，通过中医外治的原理起到作用，长期使用安全有效，完全符合绿色需求，所以本组合物也具有明显的创新性和产业化的社会效益。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种安全有效，以天然药材为主要原料、人们容易接受的一种人乳头状瘤病毒（HPV）疾病治疗的组合物，疗效确切，质量可控，适合于工业生产。

为了达到上述目的，本发明所采取的解决方案是：

具体方法如下：

一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，由下述重量原料组成：苦参100～200份、蛇床子50～150份、牛蒡50～150份、黄连5～15份、蟾酥1～5份。

所述的用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，还含有重量原料菊苣和/或车前子各10～30份。

所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，药材通过常规和/或非常规提取手段提取药材的活性成分。

所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，活性成分制备成适当的药物、消毒品制剂。

所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，主要用于人乳头状瘤病毒（HPV）疾病的治疗范畴。

本发明组合物有益的技术效果：

（1）本发明所述的组合物，可以在用药三天内就可以抑制人乳头状瘤病毒（HPV）的复制。

（2）本发明所述的组合物，质量可控，使用安全方便。

（3）本发明所述的组合物，适合于工业化生产。

本发明组合物的特点：

（1）以天然植物和动物药材为主，天然活性。

（2）标本兼治，药性温和安全。

（3）除了抑制和清除HPV，还能修复局部炎症组织，彻底防止HPV的再次感染。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明的保护范围。

实施例1.本发明组合物对于HPV的治疗效果

（1）实验材料

实验分组：治疗组（本发明制剂）和对照组（重组人干扰素α2b乳膏，100万IU/5g/支，安徽安科生物工程（集团）股份有限公司。）

HPV DNA检测试剂盒：新型人乳头瘤病毒核酸检测试剂购自广东凯普生物科技股份有限公司。

（2）实验方法

①疣体标本的采集与处理：疣体标本来源于中科院皮肤病研究所，每1份用电子天平精确称重后，使用匀浆器加生理盐水研磨匀浆，并配成每毫升含疣体组织0.10g浓度的疣体组织混悬液备用。

②药物处理方法：药物处理分组：实验组：20、100、500mg/ml；对照组(干扰素组，20μg/ml)。每组2管。每管先加入0.10g/ml的疣体组织块匀浆液0.5ml，然后从各组第1管开始分别为空白组，干扰素组、实验组各0.5ml，震荡摇匀。

③与药物孵育：将上述所有管置37℃恒温水浴锅中温育，期间经常摇匀，尽可能使药物与疣体组织充分作用。在温育的第1天和第3天分别取标本进行HPV的PCR检测。

④HPV病毒DNA的实时定量荧光PCR检测：

DNA的提取: 疣样本碾磨后，加入1ml生理盐水（震荡混匀15S，3000rpm，15S），取100-500ul上清液到1.5ml离心管中12000rpm，5min，去上清，加入50ul“核酸释放剂”，充分震荡混匀（100度加热10min），12000rpm，5min后，每管加入5ul提取后的模板（上清液），加40ul反应试剂，盖上PCR反应管盖即可上机扩增。

DNA的扩增：ABI7500 PCR仪器：1）选择FAM通道（Reporter：FAM，Quencher：none）检测HPV6/11-DNA；2）选择HEX或VIC通道（Reporter：HEX/VIC，Quencher：none）检测内标；3）参比荧光（Passive Reference）设置为none。设置Sample Volume为50。

循环参数设定（ABI7500 PCR仪器）：

⑤检测结果分析

对于测定Ct值≤39的样本，报告为HPV阳性。

对于测定Ct值≥39的样本，同时，内标检测为阳性（Ct值≤40），报告注明HPV低于试剂盒检测下限。

（3）实验结果

如表1所示，生理盐水组处理0.1g/ml浓度疣体1天的HPV-DNA的Ct值为16.485，显示疣体中检测到HPV的DNA复制，为阳性表现。干扰素处理的疣体样本中经检测其Ct值大于39，表明该体系中HPV的DNA复制被明显抑制，检测结果为阴性。实验组作用疣体1天后的结果显示，测定的Ct值均大于39，显示实验组对疣体HPV的DNA复制有抑制作用。

延长作用时间处理3天后，实验组对HPV-DNA复制表现基本与处理1天类似（见表2），延长作用时间各浓度表现与作用1天相似。

表1 蟾酥注射液作用1天对疣体HPV病毒DNA的影响

表2 蟾酥注射液作用3天对疣体HPV病毒DNA的影响

通过以上实验表明，本发明具有明确的抑制和清除HPV的作用。

实施例2.处方：苦参100份、蛇床子50份、牛蒡50份、黄连5份、蟾酥1份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连，用6倍水，煎煮2次，每次3小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤2、取蟾酥，用5倍75%乙醇，50℃回流提取2.0小时，提取1次，过滤得提取液，提取液回收乙醇，干燥粉碎，既得到提取物。

步骤3、取“步骤1-2”的提取物混合，加入投料量10倍的水，加入总体积2%卡波姆，充分混匀，调PH值至4.0-6.5，即得本发明组合物的凝胶。

实施例3.处方：苦参150份、蛇床子75份、牛蒡75份、黄连7份、蟾酥3份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连，用8倍水，煎煮2次，每次2小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤2、取蟾酥，用5倍85%乙醇，50℃回流提取1.5小时，提取1次，过滤得提取液，提取液回收乙醇，干燥粉碎，既得到提取物。

步骤3、取“步骤1-2”的提取物混合，加入投料量10倍的水，加入总体积1.5%卡波姆，充分混匀，调PH值至4.0-6.5，即得本发明组合物的凝胶。

实施例4.处方：苦参200份、蛇床子150份、牛蒡150份、黄连15份、蟾酥5份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连，用10倍水，煎煮2次，每次1小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤2、取蟾酥，用5倍95%乙醇，50℃回流提取1.0小时，提取1次，过滤得提取液，提取液回收乙醇，干燥粉碎，既得到提取物。

步骤3、取“步骤1-2”的提取物混合，加入投料量10倍的水，加入总体积1.0%卡波姆，充分混匀，调PH值至4.0-6.5，即得本发明组合物的凝胶。

实施例5.处方：苦参100份、蛇床子50份、牛蒡50份、黄连5份、蟾酥1份、菊苣10份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣，用6倍水，煎煮2次，每次3小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤3、取“步骤1-2”的提取物混合，加入投料量10倍的水，，充分混匀，调PH值至4.0-6.5，即得本发明组合物的洗剂。

实施例6.处方：苦参150份、蛇床子75份、牛蒡75份、黄连7份、蟾酥3份、菊苣15份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣，用8倍水，煎煮2次，每次2小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例7.处方：苦参200份、蛇床子150份、牛蒡150份、黄连15份、蟾酥5份、菊苣30份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣，用10倍水，煎煮2次，每次1小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例8.处方：苦参100份、蛇床子50份、牛蒡50份、黄连5份、蟾酥1份、车前子10份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、车前子，用6倍水，煎煮2次，每次3小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤3、取“步骤1-2”的提取物混合，加入适量辅料，充分混匀，调PH值至4.0-6.5，压制，即得本发明组合物的栓剂。

实施例9.处方：苦参150份、蛇床子75份、牛蒡75份、黄连7份、蟾酥3份、车前子15份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、车前子，用8倍水，煎煮2次，每次2小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例10.处方：苦参200份、蛇床子150份、牛蒡150份、黄连15份、蟾酥5份、车前子30份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、车前子，用10倍水，煎煮2次，每次1小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例11.处方：苦参100份、蛇床子50份、牛蒡50份、黄连5份、蟾酥1份、菊苣10份、车前子10份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣、车前子，用6倍水，煎煮2次，每次3小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例12.处方：苦参150份、蛇床子75份、牛蒡75份、黄连7份、蟾酥3份、菊苣15份、车前子15份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣、车前子，用8倍水，煎煮2次，每次2小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

实施例13.处方：苦参200份、蛇床子150份、牛蒡150份、黄连15份、蟾酥5份、菊苣30份、车前子30份。

步骤1、取苦参、蛇床子、牛蒡、黄连、菊苣、车前子，用10倍水，煎煮2次，每次1小时，合并滤液过滤，浓缩至稠膏。

步骤2、取蟾酥，用5倍95%乙醇，50℃ 回流提取1.0小时，提取1次，过滤得提取液，提取液回收乙醇，干燥粉碎，既得到提取物。

上述的组合物中具有用于人乳头状瘤病毒（HPV）疾病治疗的功效。

本组合物与同类品相比，本发明所述的药品原材料质优易得，疗效确切，具有简便、高效、安全，且成本较低、操作简单、可推广性强、应用前景广泛的优点。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。

Claims

1.一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，由下述重量原料组成：苦参100～200份、蛇床子50～150份、牛蒡50～150份、黄连5～15份、蟾酥1～5份。

2.权利要求1所述用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，其特征在于：还含有重量原料菊苣和/或车前子各10～30份。

3.权利要求1所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，其特征在于：通过常规和/或非常规提取手段提取药材的活性成分。

4.权利要求1所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，其特征在于：制备成适当的药物或消毒品制剂。

5.权利要求1所述的一种用于人乳头状瘤病毒（HPV）的组合物，其特征在于：用于人乳头状瘤病毒（HPV）的疾病治疗。