CN1092173A - Abo血型系统单克隆抗体分型试剂及其应用液的配制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种鉴定人类血型，特别涉及一种代 替人血清来鉴定人类血型的试剂及其应用液的配制 方法。本发明采用杂交瘤技术，以血型系统的A抗 原、B抗原，经过融合、筛选、克隆化，获得抗A、抗B 抗体应用液。采用本发明之应用液一滴与血样一滴， 即可迅速鉴定人血的血型，准确率达100％，其检测 方法与人血清试剂相同。本发明可以通过大批量、工 业化生产，免去从大量献血员所献血中分离人血清的 方法，节约了大量宝贵的人血，具有良好的社会效果， 而且本发明的试剂与人血清试剂相比，成本便宜一 半，本发明之试剂生产的质控、标准化易于掌握、控 制。

Description

本发明涉及一种鉴定人类血型，特别涉及一种代替人血清，鉴定人类血型的单克隆抗体分型试剂及其应用液的配制方法。

自1900年发现人类的ABO血型以来，对人类血型进行鉴定的试剂主要用人血清配制。这需要对大量的献血员进行筛选，不仅耗费大量宝贵的人血，筛选工作颇费工时，成本较高，而且由于献血员的个体差异，难以实现质量控制和标准化。不少学者曾先后对鱼类、蜗牛、扁豆等动、植物的组织浆液进行研究，但由于种种技术原因未能付诸于实际应用。

本发明的目的就是要克服上述缺陷，设计一种新型试剂以代替人血清用于血型鉴定。

本发明的技术方案：用血型系统的A型、B型血液中的红细胞膜分别免疫BALB/C小鼠，与骨髓瘤SP2/O细胞融合，筛选出杂交瘤细胞，用有限稀释法进行克隆化后，注入同系小鼠腹腔诱生腹水，即得ABO血型系统单克隆抗体分型试剂。

其应用液的配制方法：将小鼠腹水投入容器中进行稀释，稀释液配比：0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。

本发明的效果在于配制出优质的ABO分型试剂，其单克隆抗体分型试剂的效价、亲合力均优于人血清分型试剂，而且成本低，其成本仅为人血清分型试剂的一半，原材料取之不尽、用之不竭，能够进行大批量工业化生产，能够实现质量控制和标准化，可以节省大量宝贵的人血，具有良好的经济效益和社会效益。

本发明的效果和优点将在下面的说明中得到进一步阐述。

实施例：

首先，选择抗原性强的A型献血员和B型献血员的血液中的红细胞膜，然后分别免疫BALB/C小鼠，产生抗A、抗B抗体的小鼠脾细胞，采用淋巴细胞杂交瘤技术，将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞进行融合，筛选出杂交瘤细胞，采用有限稀释法对杂交瘤细胞进行克隆化，获得抗A的49H和抗B的5D杂交瘤细胞系，然后将其保存在-8℃的液氮中。当需要使用时，将杂交瘤细胞从液氮中取出，注入到同系小鼠腹腔中诱生腹水，其腹水中含有所需的高效价抗A、抗B抗体。这样，就可以进行大批量工业化生产，勿需大量的人血液。

在常温常压下，抗A、抗B的腹水用稀释液稀释，稀释液为：0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。1ml的腹水稀释1000倍，相当于2000ml人血液，可见其成本很低。将稀释后的应用液一滴与待鉴定的人血样一滴混合后进行反应，如与抗A抗体出现凝集，则血样为A型;如与抗B抗体出现凝集，则血样为B型;如与抗A、抗B抗体均出现凝集，则血样为AB型;如与抗A、抗B抗体均不凝集，则血样为O型。其鉴定方法与用人血清的方法相同。

配制抗A、抗B分型试剂应用液500ml，鉴定血型1亿人次，准确率达100%，可节省人血1000万ml。

Claims (2)

1、ABO血型系统单克隆抗体分型试剂，其特征在于A型、B型血液中的红细胞膜分别免疫BALB/C小鼠，产生抗A、抗B抗体的小鼠脾细胞，将此杂交瘤细胞，用有限稀释法进行克隆化后，注入同系小鼠腹腔，诱生腹水，即得ABO血型系统单克隆抗体分型试剂。

2、ABO血型系统单克隆抗体分型试剂的应用液的配制方法，其特征在于：

（1）将含ABO血型系统单克隆抗体分型试剂的小鼠腹水投入容器中;

（2）进行稀释，稀释液配比：0.1MPH7.4的PBS、5%小牛血清、20%右旋糖苷。