CN109182403A - 一种富含dha的甘油酯的制备方法 - Google Patents
一种富含dha的甘油酯的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109182403A CN109182403A CN201811084331.2A CN201811084331A CN109182403A CN 109182403 A CN109182403 A CN 109182403A CN 201811084331 A CN201811084331 A CN 201811084331A CN 109182403 A CN109182403 A CN 109182403A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dha
- molecular distillation
- rich
- oil
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 title claims abstract description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 34
- 238000000199 molecular distillation Methods 0.000 claims abstract description 34
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims abstract description 28
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 241000222175 Diutina rugosa Species 0.000 claims abstract description 22
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 11
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N p-anisidine Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1 BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 4
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 abstract description 40
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 23
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 15
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 12
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 98
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 52
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 51
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 19
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 7
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 7
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 6
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- -1 glycerol ester Chemical class 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 description 1
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 241001125831 Istiophoridae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 208000007683 Pediatric Obesity Diseases 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008131 children development Effects 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013324 preserved food Nutrition 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 235000012976 tarts Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6436—Fatty acid esters
- C12P7/6445—Glycerides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
本发明涉及一种制备富含DHA的甘油酯的方法，该方法选择性地使用皱褶假丝酵母脂肪酶来水解金枪鱼油，并且采用特定的水油比和特定的脂肪酶添加量，以及特定的分子蒸馏处理参数，可以显著地提高甘油三酯型DHA的富集效果，并且同时还显著提高了富含DHA甘油酯的产率，以及EPA的含量也得到了一定提高。
Description
技术领域
本发明涉及一种富含DHA的甘油酯的制备方法，属于油脂加工技术领域。
背景技术
二十二碳六烯酸(DHA)属于ω-3系列脂肪酸，是细胞膜形成的主要成分、人的大脑发育、成长的重要组成物质之一，也是目前孕妇和儿童主要营养品之一。DHA能促进胎儿大脑发育、增进大脑细胞发育、促进视网膜光感细胞的成熟等。同时，DHA能促进婴幼儿的生长发育、提高认知能力的发展、降低婴幼儿患过敏症的危险、显著降低婴幼儿感冒的发生率及减少婴幼儿肥胖症的发生。此外，DHA对成年人也具有重要的保健作用。它能够降血压、降血脂、降胆固醇、改善智力等。DHA还能够有效抑制血栓的形成，起到防止心血管疾病发生的作用。同时，DHA在延缓衰老、预防神经性疾病如预防老年痴呆、减缓躁郁症病情、抗癌、抑制肿瘤，预防骨质疏松、预防糖尿病、抗炎症等方面也有显著的作用。由于DHA具有以上的生理活性和药理活性，使其在保健食品和药和中具有广阔的应用前景。
DHA产品的存在形式可以分为非甘油酯型(主要是乙酯型和游离脂肪酸型)和甘油三酯型两种。乙酯型DHA在人体中消化和吸收比较困难，而且可能存在安全隐患；游离型DHA虽然易于消化和吸收，但是容易氧化，而且有明显的脂肪酸味，口感差，直接食用难以被人们接受。只有甘油三酯型DHA性质稳定，易被人体消化吸收。
深海鱼油中的DHA天然存在形式是甘油三酯型。人们尝试着从深海鱼类提取甘油三脂型的DHA。其中，金枪鱼油约含有25％的甘油三酯型的DHA，并且，金枪鱼主要以生鱼片、寿司、罐装食品等方式被消费，未被利用的副产物高达35-40％，因此，金枪鱼的副产物是最合适提取甘油三脂型的DHA的原料之一，在食品和医药领域具有广阔的前景和较高的价值。
然而，甘油三酯型的DHA含量普遍偏低(<25％)，不能满足人们的保健需求。因此，有必要富集甘油三酯型的DHA含量，从而提升DHA保健功效。
DHA的富集方法主要可分为两大类，一类是传统理化法，包括低温分离法、尿素包合法、超临界流体萃取法、分子蒸馏法和银离子络合法；另一类是酶法。传统的理化法，有着反应时间长、产品收率低、涉及大量有机溶剂的使用以及DHA最总产品质量下降如聚合、氧化等问题。相对于理化法，酶法富集DHA具有绿色、安全、反应专一、副产物少等优点。
例如，中国发明专利申请公开号CN105821088A公开了以鱼油为原料，利用脂肪酶催化鱼油水解、酯化、酯交换等反应，并结合分子蒸馏、尿素包裹等方法，获得富含EPA和DHA的甘油三酯。甘三酯型鱼油中的DHA可提高到15％以上。该方法采用了多步酶法，结合分子蒸馏和尿素包裹来提高原料的利用率，然而，过程复杂，操作繁琐，增加生产成本。
本领域的技术人员希望能够进一步优化以金枪鱼油为原料富集甘油三酯型DHA的工艺，提高甘油三酯型DHA的富集效果，简化生产工艺。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明一方面提供了一种制备富含DHA的甘油酯的方法，该制备方法包括以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应容器中，密封反应容器，并将反应容器中的物质混合均匀后，加热至30℃～50℃反应2.25小时～5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为4：1～8：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的1％～5％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于85℃～105℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在4000rpm～7000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为0.5～1.5×10-3mbar、跨膜转速为250～350rpm/min、进料量速度为1.0～1.5ml/min，蒸馏温度为160℃～180℃；收集分子蒸馏处理所得重相即为富含DHA的甘油酯。
在本发明的一个优选实施方案中，在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为0.1-3.0mgKOH/g，过氧化值为0.5-3.5meq/kg，茴香胺值为2-16，pH为5-8.5。
在本发明的一个更优选的实施方案中，在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为0.5-2.0mgKOH/g，过氧化值为1～3meq/kg，茴香胺值为5～15，pH为6.5～8。
在本发明的一个更优选的实施方案中，在所述步骤1)中，在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为1mgKOH/g，过氧化值为2meq/kg，茴香胺值为5，pH为7.2。
在本发明的一个优选实施方案中，在所述步骤1)中，所述金枪鱼油与水的质量比为6：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的3％。
在本发明的一个优选实施方案中，在所述步骤1)中，加热温度为40℃，加热时间为4小时。
在本发明的一个优选实施方案中，在所述步骤3)中，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为10-3mbar、跨膜转速为300rpm/min、进料量速度为1.0ml/min，蒸馏温度为170℃。
本发明的制备富含DHA的甘油酯的方法，选择性地使用皱褶假丝酵母脂肪酶来水解金枪鱼油，并且采用特定的水油比和特定的脂肪酶添加量，以及特定的分子蒸馏处理参数，可以显著地提高甘油三酯型DHA的富集效果，并且同时还显著提高了富含DHA甘油酯的产率，以及EPA的含量也得到了一定提高。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的说明，但本发明并不限于这些具体实施方式。
关于术语的解释说明如下：
术语“皱褶假丝酵母脂肪酶”，是指来源皱褶假丝酵母菌的脂肪酶。
术语“分子蒸馏”，是指一种在高真空下操作的蒸馏方法，利用料液中各组分蒸发速率的差异，对液体混合物进行分离。
在本发明的一个具体实施方案中，提供了一种制备富含DHA的甘油酯的方法，该制备方法包括以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应容器中，密封反应容器，并将反应容器中的物质混合均匀后，加热至30℃～50℃反应2.25小时～5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为4：1～8：1所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的1％～5％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于85℃～105℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在4000rpm～7000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为0.5～1.5×10-3mbar、跨膜转速为250～350rpm/min、进料量速度为1.0～1.5ml/min，蒸馏温度为160℃～180℃；收集分子蒸馏处理所得重相即为富含DHA的甘油酯。
本发明的发明人在目前现有的鱼油酶法水解工艺的基础之上，做了大量的尝试以优化改进甘油三酯型DHA的富集效果。在目前的现有技术条件下，采用常规的酶法水解工艺和分子蒸馏处理的方法，只能将金枪鱼油原油中的DHA含量从20％左右提高到25％～35％左右。然而，本发明的发明人经过大量的筛选试验，发现当选择性地采用皱褶假丝酵母脂肪酶来水解金枪鱼油，并且采用特定的水油比和特定的脂肪酶添加量，以及相适应地调整后续分子蒸馏处理的重要参数，可以显著地提高甘油三酯型DHA的富集效果。此外，相比传统的方法，采用本发明方法获得的富含DHA甘油酯的产率也得到了显著提高。
实施例1
实施例1的制备富含DHA的甘油酯的方法包含以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油(原油)、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应釜中，将反应釜密封，并将反应釜中的物质混合均匀后，加热至40℃反应4小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为6：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的3％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于95℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在5000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为10-3mbar、跨膜转速为300rpm/min、进料量速度为1.0ml/min，蒸馏温度为170℃；收集分子蒸馏处理所得重相(即为富含DHA的甘油酯)491g，所得轻相(主要为脂肪酸)288g；实施例1制备获得的重相的产率为57.76％(注：产率＝重相质量/所述金枪鱼油原油的质量)。
经GC-MS分析，鉴定了实施例1制备获得的重相油脂的成分，鉴定结果如下表1。
表1
实施例2
实施例2的制备富含DHA的甘油酯的方法包含以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应釜中，将反应釜密封，并将反应釜中的物质混合均匀后，加热至50℃反应5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为7：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的2％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于95℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在6000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为1.5×10-3mbar、跨膜转速为300rpm/min、进料量速度为1.5ml/min，蒸馏温度为180℃；收集分子蒸馏处理所得重相(即为富含DHA的甘油酯)470g，所得轻相(主要为脂肪酸)345g，实施例2制备获得的重相的产率为55.29％。
经GC-MS分析，鉴定了实施例2制备获得的重相油脂的成分，鉴定结果如下表2。
表2
实施例3
实施例3的制备富含DHA的甘油酯的方法包含以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应釜中，将反应釜密封，并将反应釜中的物质混合均匀后，加热至45℃反应5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为4：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的1％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于105℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在7000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为0.5×10-3mbar、跨膜转速为250rpm/min、进料量速度为1ml/min，蒸馏温度为170℃；收集分子蒸馏处理所得重相(即为富含DHA的甘油酯)435g，所得轻相(主要为脂肪酸)330g，实施例3制备获得的重相的产率为51.17％。
经GC-MS分析，鉴定了实施例3制备获得的重相油脂的成分，鉴定结果如下表3。
表3
实施例4
实施例4的制备富含DHA的甘油酯的方法包含以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应釜中，将反应釜密封，并将反应釜中的物质混合均匀后，加热至30℃反应5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为8：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的5％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于85℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在4000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为10-3mbar、跨膜转速为350rpm/min、进料量速度为1ml/min，蒸馏温度为160℃；收集分子蒸馏处理所得重相(即为富含DHA的甘油酯)482g，所得轻相(主要为脂肪酸)290g，实施例4制备获得的重相的产率为56.71％。
经GC-MS分析，鉴定了实施例4制备获得的重相油脂的成分，鉴定结果如下表4。
表4
实施例5
实施例5的制备富含DHA的甘油酯的方法包含以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应釜中，将反应釜密封，并将反应釜中的物质混合均匀后，加热至45℃反应2.25小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为5：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的4％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于90℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在6000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为10-3mbar、跨膜转速为300rpm/min、进料量速度为1ml/min，蒸馏温度为160℃；收集分子蒸馏处理所得重相(即为富含DHA的甘油酯)503g，所得轻相(主要为脂肪酸)286g，实施例5制备获得的重相的产率为59.17％。
经GC-MS分析，鉴定了实施例5制备获得的重相油脂的成分，鉴定结果如下表5。
表5
综合实施例1-5的数据可以看出，金枪鱼油经过酶法水解和分子蒸馏处理后，可以有效地富集其中的甘油三酯型DHA的含量，将金枪鱼油原油中的甘油三酯型DHA含量从25％富集提高到40％-45％左右，特别是，分子蒸馏后富含DHA的甘油酯(重相油脂)的产率在50％～59％(然而，采用现有技术中的常规方法，富含DHA的甘油酯的产率一般不高于35％)。
因此，可以看出，当采用本发明的方法，选择性地使用皱褶假丝酵母脂肪酶来水解金枪鱼油，并且采用特定的水油比和特定的脂肪酶添加量，以及特定的分子蒸馏处理参数，可以显著地提高甘油三酯型DHA的富集效果，并且同时还显著提高了富含DHA甘油酯的产率，以及EPA的含量也得到了一定提高。
应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施方式中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施方式的具体说明，它们并非用以限制本发明的保护范围，凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施方式或变更均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种制备富含DHA的甘油酯的方法，其特征在于：
该制备方法包括以下步骤：
步骤1)：将金枪鱼油、水和皱褶假丝酵母脂肪酶加入到反应容器中，密封反应容器，并将反应容器中的物质混合均匀后，加热至30℃～50℃反应2.25小时～5小时；其中，所述金枪鱼油与水的质量比为4：1～8：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的1％～5％；
步骤2)：将步骤1)所得的反应产物置于85℃～105℃的水浴中2～3分钟灭酶活，然后在4000rpm～7000rpm的转速下进行离心分离，收集上层油相；
步骤3)：将步骤2)收集获得的所述上层油相进行分子蒸馏处理，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为0.5～1.5×10-3mbar、跨膜转速为250～350rpm/min、进料量速度为1.0～1.5ml/min，蒸馏温度为160℃～180℃；收集分子蒸馏处理所得重相即为富含DHA的甘油酯。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：
在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为0.1-3.0mgKOH/g，过氧化值为0.5-3.5meq/kg，茴香胺值为2-16，pH为5-8.5。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：
在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为0.5-2.0mgKOH/g，过氧化值为1～3meq/kg，茴香胺值为5～15，pH为6.5～8。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：
在所述步骤1)中，所述金枪鱼油的酸价为1mgKOH/g，过氧化值为2meq/kg，茴香胺值为5，pH为7.2。
5.如权利要求1至4中任意一项所述的方法，其特征在于：
在所述步骤1)中，所述金枪鱼油与水的质量比为6：1，所述皱褶假丝酵母脂肪酶的添加量为所述金枪鱼油的质量的3％。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：
在所述步骤1)中，加热温度为40℃，加热时间为4小时。
7.如权利要求1至4中任意一项所述的方法，其特征在于：
在所述步骤3)中，所述分子蒸馏处理的条件为真空度为10-3mbar、跨膜转速为300rpm/min、进料量速度为1.0ml/min，蒸馏温度为170℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811084331.2A CN109182403A (zh) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | 一种富含dha的甘油酯的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201811084331.2A CN109182403A (zh) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | 一种富含dha的甘油酯的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109182403A true CN109182403A (zh) | 2019-01-11 |
Family
ID=64912011
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811084331.2A Pending CN109182403A (zh) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | 一种富含dha的甘油酯的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109182403A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116103085A (zh) * | 2023-03-17 | 2023-05-12 | 福建省水产研究所（福建水产病害防治中心） | 一种甘油酯型鳗鱼脂质提取物的提取工艺及应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996037586A1 (en) * | 1995-05-24 | 1996-11-28 | Loders Croklaan B.V. | Production method for fats with long chain polyunsaturated fatty acids |
| CN102959083A (zh) * | 2010-05-28 | 2013-03-06 | 日本水产株式会社 | 利用脂肪酶的含高度不饱和脂肪酸的油脂的制造方法 |
| US20130196393A1 (en) * | 2010-06-25 | 2013-08-01 | Epax As | Process for separating polyunsaturated fatty acids from long chain unsaturated or less saturated fatty acids |
| CN105821088A (zh) * | 2016-05-26 | 2016-08-03 | 暨南大学 | 一种利用酶催化制备富含epa和dha甘油酯的方法 |
-
2018
- 2018-09-18 CN CN201811084331.2A patent/CN109182403A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996037586A1 (en) * | 1995-05-24 | 1996-11-28 | Loders Croklaan B.V. | Production method for fats with long chain polyunsaturated fatty acids |
| CN102959083A (zh) * | 2010-05-28 | 2013-03-06 | 日本水产株式会社 | 利用脂肪酶的含高度不饱和脂肪酸的油脂的制造方法 |
| US20130196393A1 (en) * | 2010-06-25 | 2013-08-01 | Epax As | Process for separating polyunsaturated fatty acids from long chain unsaturated or less saturated fatty acids |
| CN105821088A (zh) * | 2016-05-26 | 2016-08-03 | 暨南大学 | 一种利用酶催化制备富含epa和dha甘油酯的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Y. TANAKA等: "Concentration of Docosahexaenoic Acid in Glyceride by Hydrolysis of Fish Oil with Candida cylindracea Lipase", 《JOURNAL OF THE AMERICAN OIL CHEMISTS SOCIETY》 * |
| Y. TANAKA等: "Triglyceride Specificity of Candida cylindracea Lipase: Effect of Docosahexaenoic Acid on Resistance of Triglyceride to Lipase", 《JOURNAL OF THE AMERICAN OIL CHEMISTS SOCIETY》 * |
| 蔡秋声: "利用脂肪酶制取富含多不饱和脂肪酸油方法", 《粮食与油脂》 * |
| 陈莹等: "响应面法的脂肪酶富集金枪鱼油中二十二碳六烯酸甘油酯工艺优化的研究", 《中国粮油学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116103085A (zh) * | 2023-03-17 | 2023-05-12 | 福建省水产研究所（福建水产病害防治中心） | 一种甘油酯型鳗鱼脂质提取物的提取工艺及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110235959B (zh) | 一种新型植物调和油及其制备方法 | |
| CN101380130A (zh) | 一种刺梨醋饮料的制备方法 | |
| CN111088296B (zh) | 一种富集油脂中n-3多不饱和脂肪酸甘油酯的方法 | |
| CN106551365A (zh) | 一种可抑制槟榔返卤的食用槟榔卤水及其制备方法 | |
| CN101659917B (zh) | 块菌酒生产工艺 | |
| CN104273629A (zh) | 一种蜂蜜醋饮料 | |
| CN102007970A (zh) | 一种自乳化的软胶囊奶茶及其制备方法 | |
| CN102727571A (zh) | 牡蛎葛根天然解酒剂及其制备方法 | |
| GB2589967A (en) | Chinese yellow rice wine containing ingredients of mulberry leaves (morus alba L.) and silkworm pupae (bombyx mori) and production method thereof | |
| CN109182403A (zh) | 一种富含dha的甘油酯的制备方法 | |
| CN106901116B (zh) | 一种魔芋饮料的发酵方法 | |
| CN105936866B (zh) | 一种高钙高多酚含量山葡萄酿酒皮渣醋的酿制方法 | |
| CN101991166B (zh) | 一种解酒型米乳饮料及其制备方法 | |
| CN103966042A (zh) | 一种紫甘薯甜酒和紫甘薯果醋及其酿造方法 | |
| KR100946443B1 (ko) | 발효 인삼 조성물 | |
| CN105154304A (zh) | 一种黑蒜醋及其制备方法 | |
| CN110169572A (zh) | 一种具有解毒功能红茶菌发酵蓝莓酵素的制备方法 | |
| CN108949490A (zh) | 一种富含β胡萝卜素果醋的制备方法 | |
| TWI703211B (zh) | 一種生產富含白藜蘆醇米酒的生化製程 | |
| CN108719972A (zh) | 一种具有醒酒功能的复合酵素及其制备方法 | |
| CN102008078A (zh) | 无溶剂体系全酶法制备含1,3-甘油二酯乳脂的方法 | |
| CN101406307A (zh) | 一种中华真地鳖昆虫发酵饮料的制备方法 | |
| CN105154279A (zh) | 茵陈保健酒及其制备方法 | |
| CN110079420A (zh) | 一种菊芋红曲保健米酒的制备方法 | |
| RU2795070C1 (ru) | Способ получения йогурта, содержащего наноструктурированный сухой экстракт полыни |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190111 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |