CN109136140A - 一种生物基凝固胶 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种生物基凝固胶，属于生物技术领域。本发明对木醋杆菌进行活化，再超高压预处理，对菌种进行诱变，添加透明质酸作为发酵培养基的成分，提供了很好的传送载体，生物纤维素和海藻酸钠大分子之间的氢键作用，提高粘结力，对藤壶进行斜面培养，以明胶、卵磷脂等作为培养基料，提高分子离子级的粘接效果，提供强大的内聚力及抗生物降解性能；本发明所用贻贝粘蛋白为贻贝足丝腺所分泌，DOPA中的一些酚羟基即可氧化成醌，冷凝后的水因压力瞬间降低而快速溢出，使蛋白结构得以展开，表面活性官能团数量增多，使得本发明的稳定性和胶合强度得到有效提升。本发明解决了目前常用生物基凝固胶内部机械性能及粘结力差的问题。

Description

一种生物基凝固胶
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种生物基凝固胶。
背景技术
胶乳的生物凝固是指通过添加微生物繁殖所需的糖类物质，使割胶后污染的微生物或后来人为接种微生物的活性增强，并在较短时间内大量繁殖，从而加速了胶乳自然凝固的过程。研究资料表明，采用生物凝固工艺能改进生胶的内在性能，可以广泛用于生产。
作为一个天然橡胶的生产大国，同时又是一个天然橡胶的的消耗大国，目前，标准天然橡胶的产量已占天然橡胶产量的85%。标准橡胶存在着强伸性能低、一致性能差、硫化速度慢等缺点，不能适应子午线轮胎工业生产的要求。据研究资料表明，生物凝固工艺可改进生胶的内在性能，所得产品具有较快的硫化速度，较好的拉伸性能和较低的生热性。胶乳的生物凝固是指通过添加微生物繁殖所需的糖类物质，使割胶后污染的微生物或后来人为接种微生物的活性增强，并在较短时间内大量繁殖，从而加速了胶乳自然凝固的过程。但采用生物凝固法凝固胶乳时，所得生胶的P0和门尼粘度较高，而过高的P0及门尼粘度反映生胶可塑性小，塑混炼工艺困难；当然PRI值高橡胶的抗氧化性能就越好。恒粘天然橡胶是一种粘度恒定的生胶，在贮存和运输过程中可保持门尼粘度的稳定，从而可以稳定混炼和挤出工艺，缩短混炼时间，保证产品质量，提高生产效率。但是，传统的生物凝固胶还存在着机械性能不佳以及粘结力差的问题，所以还需对其加以进一步研究。因此需开发一种粘结力及机械性能强的生物基凝固胶。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对目前常用生物基凝固胶内部机械性能及粘结力差的问题，提供一种生物基凝固胶。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
一种生物基凝固胶，包括如下组分：2~5份苯甲酸钠、4~8份聚丙烯酰胺、3~7份甘油、1~4份助剂，还包括：20~40份生物胶料、15~30份复合作用料。
所述生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于28~33℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，振荡培养，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋密封，于23~28℃、200MPa下保持15~20min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：10~15加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按5~10%的接种量接种至发酵培养基，密封，于25~32℃静置发酵3~5天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：7~12加入海藻酸钠、无菌水混合搅拌，保温，冷却，抽滤，取滤渣干燥，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于斜面培养，斜面平铺藤壶幼虫2~5倍质量的培养基料，控制温度为27~35℃、湿度为60~75%，每隔4~7h喷淋藤壶幼虫质量2~4倍的促进液，培养5~8天，将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量3~5倍的热水混合，保温静置，去除藤壶，得混合胶液，于28~32℃，取混合胶液按质量比5~8：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合搅拌，即得生物胶料。
所述步骤（1）中的活化培养基：按质量份数计，取30~50份葡萄糖、12~25份马铃薯、6~10份酵母粉、1~4份磷酸二氢钾、600~800份水混合，灭菌，即得活化培养基。
所述步骤（2）中的发酵培养基：按质量份数计，取5~8份透明质酸、20~40份西瓜汁、3~5份蛋白胨、1~3份磷酸氢二钠、1~3份磷酸二氢钾、0.8~1.5份柠檬酸、4~7份酵母膏、800~1000份水混合，灭菌，即得发酵培养基。
所述步骤（3）中的培养基料：于50~65℃，按质量比1：3~7：20~40取明胶、山梨醇、水混合搅拌，降温至28~40℃，加入明胶质量20~35%的卵磷脂混合，即得培养基料。
所述步骤（3）中的促进液：取大米按质量比1：4~8加入水混合搅拌，静置，过滤，取淘米水按质量比12~18：1：0.3加入橘子皮、山楂捣碎匀浆，即得促进液。
所述步骤（3）中的辅料：按质量比3~6：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
所述复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比15~20：1取贻贝粘蛋白、甘油混合，按球料质量比20~35：1加入氧化锆球磨珠，球磨，得球磨料，取球磨料汽爆处理，泄压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料干燥，得干燥料，按重量份数计，取20~30份干燥料、2~5份乙二醇、0.1~0.4份消泡剂、8~14份十二烷基苯磺酸钠、40~60份水，先于75~85℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇混合搅拌，升温至90~100℃，加入消泡剂和干燥料混合搅拌，即得复合作用料。
所述步骤S2中的消泡剂：按质量比3~5：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
所述助剂：助剂：按质量比7~14：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明对木醋杆菌进行活化，再超高压预处理，对菌种进行诱变，提高生物纤维体的含量，配合发酵制得具有精细纳米三维网络的结构，透气性强，且具有良好的生物相容性，可以与生物胶成分、复合作用料复配，可改善内部的和易性，添加透明质酸作为发酵培养基的成分，提供了很好的传送载体，可搭载多种活性成分进行，使得发酵物表面网孔有透明质酸覆盖，生物纤维与透明质酸粘结过程中，可提高内部的活性及联结力，海藻酸钠的加入有利于生物纤维素大分子链的规整排列，使其结晶发生变化，使得组分间形成的复合膜拉伸强度变大，改善本凝固胶的机械性能，生物纤维素和海藻酸钠大分子之间的氢键作用，使得大分子排列较紧密，亲水基团与水分子形成氢键而使分子链产生网状结构，提高粘结力，对藤壶进行斜面培养，以明胶、卵磷脂等作为培养基料，方便收集培养过程中，藤壶产生的生物胶质，又可对生物胶进行包裹，充分发挥其作用，提高分子离子级的粘接效果，提供强大的内聚力及抗生物降解性能；
（2）本发明所用贻贝粘蛋白为贻贝足丝腺所分泌，可形成强韧的蛋白丝，其蛋白肽链片段中有10%的DOPA基团，pH值较高时，DOPA中的一些酚羟基即可氧化成醌，氧化的DOPA和未氧化的DOPA交联，形成高分子网状聚合物，提高粘附性，而用甘油和贻贝粘蛋白球磨混合的过程中，甘油渗透进入蛋白结构内部，有利于贻贝粘蛋白在后续处理过程中被润湿，在蒸汽爆破过程中，在加压过程中，水蒸气渗透进入其内部，在泄压过程中，冷凝后的水因压力瞬间降低而快速溢出，使蛋白结构得以展开，表面活性官能团数量增多，配合较高温度使蛋白质发生降解，分子量降低，活性基团数量进一步增多，再辅以表面活性剂的修饰作用，使体系粘度降低，使得本发明的稳定性和胶合强度得到有效提升，且两者缩合的反应产物具有优异的抗氧化和抑菌性能，有利于贮存稳定性的提高和长期使用。
具体实施方式
活化培养基：按质量份数计，取30~50份葡萄糖、12~25份马铃薯、6~10份酵母粉、1~4份磷酸二氢钾、600~800份水混合，于121℃灭菌15~20min，即得活化培养基。
发酵培养基：按质量份数计，取5~8份透明质酸、20~40份西瓜汁、3~5份蛋白胨、1~3份磷酸氢二钠、1~3份磷酸二氢钾、0.8~1.5份柠檬酸、4~7份酵母膏、800~1000份水混合，于121℃灭菌15~20min，即得发酵培养基。
助剂：按质量比7~14：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
培养基料：于水浴50~65℃，按质量比1：3~7：20~40取明胶、山梨醇、去离子水于容器混合，以400~600r/min磁力搅拌20~45min，降温至28~40℃，加入明胶质量20~35%的卵磷脂混合，即得培养基料。
促进液：取大米按质量比1：4~8加入水混合搅拌4~8min，静置5~10min，过滤，取淘米水按质量比12~18：1：0.3加入橘子皮、山楂于组织捣碎机进行捣碎匀浆20~35min，即得促进液。
辅料：按质量比3~6：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
消泡剂：按质量比3~5：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于28~33℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，以160~200r/min振荡培养18~24h，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋中，密封，于23~28℃、200MPa下保持15~20min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：10~15加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按5~10%的接种量接种至发酵培养基，密封，于25~32℃静置发酵3~5天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：7~12加入海藻酸钠、无菌水混合，以400~700r/min磁力搅拌30~50min，于90~100℃保温50~60min后，自然冷却至室温，抽滤，取滤渣于70~85℃烘箱干燥12~18h，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于30°倾角的斜面培养箱培养，且斜面平铺藤壶幼虫2~5倍质量的培养基料，控制温度为27~35℃、湿度为60~75%，每隔4~7h喷淋藤壶幼虫质量2~4倍的促进液，如此培养5~8天，用刀将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量3~5倍的50~65℃热水混合，保温静置1~3h，去除藤壶，得混合胶液，于水浴28~32℃，取混合胶液按质量比5~8：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合，以700~1000r/min磁力搅拌1~3h，即得生物胶料。
复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比15~20：1取贻贝粘蛋白、甘油于球磨罐混合，按球料质量比20~35：1加入氧化锆球磨珠，以350~550r/min球磨1~3h，得球磨料，取球磨料于汽爆罐，控制罐内气压为2.5~4MPa，按水料质量比18~25：1进行汽爆处理1~3min后，以0.04~0.08MPa/min速率泄压至常压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料于85~100℃烘箱干燥3~5h，得干燥料，按重量份数计，取20~30份干燥料、2~5份乙二醇、0.1~0.4份消泡剂、8~14份十二烷基苯磺酸钠、40~60份水，先于75~85℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇于反应釜混合，以400~600r/min搅拌20~45min后，升温至90~100℃，加入消泡剂和干燥料，以600~800r/min搅拌3~5h，即得复合作用料。
一种生物基凝固胶，按质量份数计，包括如下组分：2~5份苯甲酸钠、4~8份聚丙烯酰胺、3~7份甘油、1~4份助剂、20~40份生物胶料、15~30份复合作用料。 一种生物基凝固胶的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取2~5份苯甲酸钠、4~8份聚丙烯酰胺、3~7份甘油、1~4份助剂、20~40份生物胶料、15~30份复合作用料；
（2）于40~55℃，先取苯甲酸钠、聚丙烯酰胺、甘油、复合作用料于反应釜混合，以400~600r/min磁力搅拌40~60min后，降温至28~36℃，加入生物胶料、助剂混合，以500~800r/min搅拌1~3h后，注入模具密闭静置2~4天，脱模，得厚凝块，取厚凝块锤磨造粒，于65~80℃真空干燥，即得生物基凝固胶。
活化培养基：按质量份数计，取30份葡萄糖、12份马铃薯、6份酵母粉、1份磷酸二氢钾、600份水混合，于121℃灭菌15min，即得活化培养基。
发酵培养基：按质量份数计，取5份透明质酸、20份西瓜汁、3份蛋白胨、1份磷酸氢二钠、1份磷酸二氢钾、0.8份柠檬酸、4份酵母膏、800份水混合，于121℃灭菌15min，即得发酵培养基。
助剂：按质量比7：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
培养基料：于水浴50℃，按质量比1：3：20取明胶、山梨醇、去离子水于容器混合，以400r/min磁力搅拌20min，降温至28℃，加入明胶质量20%的卵磷脂混合，即得培养基料。
促进液：取大米按质量比1：4加入水混合搅拌4min，静置5min，过滤，取淘米水按质量比12：1：0.3加入橘子皮、山楂于组织捣碎机进行捣碎匀浆20min，即得促进液。
辅料：按质量比3：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
消泡剂：按质量比3：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于28℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，以160r/min振荡培养18h，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋中，密封，于23℃、200MPa下保持15min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：10加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按5%的接种量接种至发酵培养基，密封，于25℃静置发酵3天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：7加入海藻酸钠、无菌水混合，以400r/min磁力搅拌30min，于90℃保温50min后，自然冷却至室温，抽滤，取滤渣于70℃烘箱干燥12h，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于30°倾角的斜面培养箱培养，且斜面平铺藤壶幼虫2倍质量的培养基料，控制温度为27℃、湿度为60%，每隔4h喷淋藤壶幼虫质量2倍的促进液，如此培养5天，用刀将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量3倍的50℃热水混合，保温静置1h，去除藤壶，得混合胶液，于水浴28℃，取混合胶液按质量比5：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合，以700r/min磁力搅拌1h，即得生物胶料。
复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比15：1取贻贝粘蛋白、甘油于球磨罐混合，按球料质量比20：1加入氧化锆球磨珠，以350r/min球磨1h，得球磨料，取球磨料于汽爆罐，控制罐内气压为2.5MPa，按水料质量比18：1进行汽爆处理1min后，以0.04MPa/min速率泄压至常压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料于85℃烘箱干燥3h，得干燥料，按重量份数计，取20份干燥料、2份乙二醇、0.1份消泡剂、8份十二烷基苯磺酸钠、40份水，先于75℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇于反应釜混合，以400r/min搅拌20min后，升温至90℃，加入消泡剂和干燥料，以600r/min搅拌3h，即得复合作用料。
一种生物基凝固胶，按质量份数计，包括如下组分：2份苯甲酸钠、4份聚丙烯酰胺、3份甘油、1份助剂、20份生物胶料、15份复合作用料。
一种生物基凝固胶的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取2份苯甲酸钠、4份聚丙烯酰胺、3份甘油、1份助剂、20份生物胶料、15份复合作用料；
（2）于40℃，先取苯甲酸钠、聚丙烯酰胺、甘油、复合作用料于反应釜混合，以400r/min磁力搅拌40min后，降温至28℃，加入生物胶料、助剂混合，以500r/min搅拌1h后，注入模具密闭静置2天，脱模，得厚凝块，取厚凝块锤磨造粒，于65℃真空干燥，即得生物基凝固胶。
活化培养基：按质量份数计，取40份葡萄糖、18份马铃薯、8份酵母粉、3份磷酸二氢钾、700份水混合，于121℃灭菌18min，即得活化培养基。
发酵培养基：按质量份数计，取6份透明质酸、30份西瓜汁、4份蛋白胨、2份磷酸氢二钠、2份磷酸二氢钾、1.2份柠檬酸、5份酵母膏、900份水混合，于121℃灭菌18min，即得发酵培养基。
助剂：按质量比12：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
培养基料：于水浴60℃，按质量比1：5：30取明胶、山梨醇、去离子水于容器混合，以500r/min磁力搅拌35min，降温至30℃，加入明胶质量25%的卵磷脂混合，即得培养基料。
促进液：取大米按质量比1：6加入水混合搅拌6min，静置8min，过滤，取淘米水按质量比16：1：0.3加入橘子皮、山楂于组织捣碎机进行捣碎匀浆30min，即得促进液。
辅料：按质量比5：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
消泡剂：按质量比2：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于30℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，以180r/min振荡培养22h，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋中，密封，于26℃、200MPa下保持18min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：12加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按8%的接种量接种至发酵培养基，密封，于28℃静置发酵4天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：10加入海藻酸钠、无菌水混合，以500r/min磁力搅拌40min，于95℃保温55min后，自然冷却至室温，抽滤，取滤渣于75℃烘箱干燥16h，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于30°倾角的斜面培养箱培养，且斜面平铺藤壶幼虫4倍质量的培养基料，控制温度为32℃、湿度为72%，每隔5h喷淋藤壶幼虫质量3倍的促进液，如此培养6天，用刀将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量4倍的55℃热水混合，保温静置2h，去除藤壶，得混合胶液，于水浴30℃，取混合胶液按质量比6：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合，以800r/min磁力搅拌2h，即得生物胶料。
复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比18：1取贻贝粘蛋白、甘油于球磨罐混合，按球料质量比32：1加入氧化锆球磨珠，以450r/min球磨2h，得球磨料，取球磨料于汽爆罐，控制罐内气压为3MPa，按水料质量比22：1进行汽爆处理2min后，以0.06MPa/min速率泄压至常压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料于95℃烘箱干燥4h，得干燥料，按重量份数计，取25份干燥料、3份乙二醇、0.3份消泡剂、12份十二烷基苯磺酸钠、50份水，先于80℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇于反应釜混合，以500r/min搅拌35min后，升温至95℃，加入消泡剂和干燥料，以700r/min搅拌4h，即得复合作用料。
一种生物基凝固胶，按质量份数计，包括如下组分：3份苯甲酸钠、6份聚丙烯酰胺、5份甘油、3份助剂、30份生物胶料、20份复合作用料。
一种生物基凝固胶的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取4份苯甲酸钠、6份聚丙烯酰胺、5份甘油、3份助剂、30份生物胶料、20份复合作用料；
（2）于45℃，先取苯甲酸钠、聚丙烯酰胺、甘油、复合作用料于反应釜混合，以500r/min磁力搅拌50min后，降温至32℃，加入生物胶料、助剂混合，以600r/min搅拌2h后，注入模具密闭静置3天，脱模，得厚凝块，取厚凝块锤磨造粒，于70℃真空干燥，即得生物基凝固胶。
活化培养基：按质量份数计，取50份葡萄糖、25份马铃薯、10份酵母粉、4份磷酸二氢钾、800份水混合，于121℃灭菌20min，即得活化培养基。
发酵培养基：按质量份数计，取8份透明质酸、40份西瓜汁、5份蛋白胨、3份磷酸氢二钠、3份磷酸二氢钾、1.5份柠檬酸、7份酵母膏、1000份水混合，于121℃灭菌20min，即得发酵培养基。
助剂：按质量比14：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
培养基料：于水浴65℃，按质量比1：7：40取明胶、山梨醇、去离子水于容器混合，以600r/min磁力搅拌45min，降温至40℃，加入明胶质量35%的卵磷脂混合，即得培养基料。
促进液：取大米按质量比1：8加入水混合搅拌8min，静置10min，过滤，取淘米水按质量比18：1：0.3加入橘子皮、山楂于组织捣碎机进行捣碎匀浆35min，即得促进液。
辅料：按质量比6：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
消泡剂：按质量比5：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于33℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，以200r/min振荡培养24h，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋中，密封，于28℃、200MPa下保持20min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：15加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按10%的接种量接种至发酵培养基，密封，于32℃静置发酵5天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：12加入海藻酸钠、无菌水混合，以700r/min磁力搅拌50min，于100℃保温60min后，自然冷却至室温，抽滤，取滤渣于85℃烘箱干燥18h，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于30°倾角的斜面培养箱培养，且斜面平铺藤壶幼虫2~5倍质量的培养基料，控制温度为35℃、湿度为75%，每隔7h喷淋藤壶幼虫质量4倍的促进液，如此培养8天，用刀将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量5倍的65℃热水混合，保温静置3h，去除藤壶，得混合胶液，于水浴32℃，取混合胶液按质量比8：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合，以1000r/min磁力搅拌3h，即得生物胶料。
复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比20：1取贻贝粘蛋白、甘油于球磨罐混合，按球料质量比35：1加入氧化锆球磨珠，以550r/min球磨3h，得球磨料，取球磨料于汽爆罐，控制罐内气压为4MPa，按水料质量比25：1进行汽爆处理3min后，以0.08MPa/min速率泄压至常压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料于100℃烘箱干燥5h，得干燥料，按重量份数计，取30份干燥料、5份乙二醇、0.4份消泡剂、14份十二烷基苯磺酸钠、60份水，先于85℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇于反应釜混合，以600r/min搅拌45min后，升温至100℃，加入消泡剂和干燥料，以800r/min搅拌5h，即得复合作用料。
一种生物基凝固胶，按质量份数计，包括如下组分：5份苯甲酸钠、8份聚丙烯酰胺、7份甘油、4份助剂、40份生物胶料、30份复合作用料。
一种生物基凝固胶的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取5份苯甲酸钠、8份聚丙烯酰胺、7份甘油、4份助剂、40份生物胶料、30份复合作用料；
（2）于55℃，先取苯甲酸钠、聚丙烯酰胺、甘油、复合作用料于反应釜混合，以600r/min磁力搅拌60min后，降温至36℃，加入生物胶料、助剂混合，以800r/min搅拌3h后，注入模具密闭静置4天，脱模，得厚凝块，取厚凝块锤磨造粒，于80℃真空干燥，即得生物基凝固胶。
对比例1：与实施例1的制备方法基本相同，唯有不同的是缺少生物胶料。
对比例2：与实施例1的制备方法基本相同，唯有不同的是缺少复合作用料。
对比例3：无锡市某公司生产的生物基凝固胶。
将实施例所得生物基凝固胶与对比例所得生物基凝固胶按照GB-T528-1998、GB/T529-2008、GB-T531-1999的标准进行对比测试，测试结果如表1所示。
表1
测试项目 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
拉伸强度（MPa） 37.91 36.83 37.55 33.19 34.56 22.92
撕裂强度（KN·m<sup>-1</sup>） 57.82 55.63 56.69 53.28 54.79 35.52
绍尔A硬度（度） 40 36 37 32 33 21
粘度（mPa·s） 154.1 153.3 153.6 141.5 142.9 104.5
本发明所得微生物凝固胶拉伸强度、撕裂强度和硬度都较高，具有良好的机械性能及粘结力，相比于市售产品效果更好，值得大力推广。
以上所述仅为本发明的较佳方式，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种生物基凝固胶，按质量份数计，包括如下组分：2~5份苯甲酸钠、4~8份聚丙烯酰胺、3~7份甘油、1~4份助剂，其特征在于，还包括：20~40份生物胶料、15~30份复合作用料。
2.根据权利要求1所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述生物胶料的制备方法，包括如下步骤：
（1）于28~33℃，取木醋杆菌粉按5%的接种量接种至活化培养基，振荡培养，得活化菌液，取活化菌液置于铝箔聚丙烯袋密封，于23~28℃、200MPa下保持15~20min，得预处理菌液，取预处理菌液按质量比1：10~15加入生理盐水混合，得稀释菌液；
（2）取稀释菌液按5~10%的接种量接种至发酵培养基，密封，于25~32℃静置发酵3~5天，出料，得发酵料，取发酵料按质量比3：1：7~12加入海藻酸钠、无菌水混合搅拌，保温，冷却，抽滤，取滤渣干燥，得发酵处理料；
（3）取藤壶幼虫于斜面培养，斜面平铺藤壶幼虫2~5倍质量的培养基料，控制温度为27~35℃、湿度为60~75%，每隔4~7h喷淋藤壶幼虫质量2~4倍的促进液，培养5~8天，将培养基料连同藤壶取出，得混料，取混料加入混料质量3~5倍的热水混合，保温静置，去除藤壶，得混合胶液，于28~32℃，取混合胶液按质量比5~8：2：0.1加入发酵处理料、辅料混合搅拌，即得生物胶料。
3.根据权利要求2所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤（1）中的活化培养基：按质量份数计，取30~50份葡萄糖、12~25份马铃薯、6~10份酵母粉、1~4份磷酸二氢钾、600~800份水混合，灭菌，即得活化培养基。
4.根据权利要求2所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤（2）中的发酵培养基：按质量份数计，取5~8份透明质酸、20~40份西瓜汁、3~5份蛋白胨、1~3份磷酸氢二钠、1~3份磷酸二氢钾、0.8~1.5份柠檬酸、4~7份酵母膏、800~1000份水混合，灭菌，即得发酵培养基。
5.根据权利要求2所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤（3）中的培养基料：于50~65℃，按质量比1：3~7：20~40取明胶、山梨醇、水混合搅拌，降温至28~40℃，加入明胶质量20~35%的卵磷脂混合，即得培养基料。
6.根据权利要求2所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤（3）中的促进液：取大米按质量比1：4~8加入水混合搅拌，静置，过滤，取淘米水按质量比12~18：1：0.3加入橘子皮、山楂捣碎匀浆，即得促进液。
7.根据权利要求2所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤（3）中的辅料：按质量比3~6：1取十二烷基三甲基溴化铵、甜菊糖混合，即得辅料。
8.根据权利要求1所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述复合作用料的制备，包括如下步骤：
S1.按质量比15~20：1取贻贝粘蛋白、甘油混合，按球料质量比20~35：1加入氧化锆球磨珠，球磨，得球磨料，取球磨料汽爆处理，泄压，出料，得汽爆料；
S2.取汽爆料干燥，得干燥料，按重量份数计，取20~30份干燥料、2~5份乙二醇、0.1~0.4份消泡剂、8~14份十二烷基苯磺酸钠、40~60份水，先于75~85℃，取水、十二烷基苯磺酸钠、乙二醇混合搅拌，升温至90~100℃，加入消泡剂和干燥料混合搅拌，即得复合作用料。
9.根据权利要求8所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述步骤S2中的消泡剂：按质量比3~5：1取二甲基硅油、蓖麻油混合，即得消泡剂。
10.根据权利要求1所述一种生物基凝固胶，其特征在于，所述助剂：助剂：按质量比7~14：1取对苯二甲醛、硫代硫酸钠混合，即得助剂。
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