CN109089886A - 一种铁皮石斛幼苗培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种铁皮石斛幼苗培养基，包括以下重量份材料，包括：香蕉5‑10重量份，蔗糖8‑12重量份，马铃薯18‑24重量份，活性炭3‑5重量份，细胞分裂素5‑8重量份，琼脂2‑5重量份，无菌水20‑27重量份、萘乙酸2‑3重量份和75％酒精4‑6重量份。本发明通过在培养基中添加马铃薯和香蕉的配方，成本低廉，制取方便，材料以获取，种子萌发的很好，通过使用萘乙酸和6‑苄氨基腺嘌呤作为培养料的营养剂，两者配合可以加快铁皮石斛成熟种子萌发，使萌发时间、数量、生长速度均达到理想的水平。
Description
技术领域
本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种铁皮石斛幼苗培养基。
背景技术
铁皮石斛为兰科石斛属多年生草本植物，是一种十分珍贵的中药材植物。但由于铁皮石斛生长条件十分苛刻，自然产量极少，加上农民的过度采挖，致使野生资源已濒临绝种，国内市场供应紧缺。近年来，很多研究者在铁皮石斛栽培方面做了大量研究，铁皮石斛成分分离鉴定方而也有不少报道，同时利用组织培养培育铁皮石斛也较多涉及，但是铁皮石斛仍存在增长率不高、移栽成活率低、产量有限等许多问题。其中，生根壮苗是组培苗移栽成活的关键因素，因此在组织培养过程中提高组培苗生根率和生根数量尤为重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种铁皮石斛幼苗培养基，以解决上述背景技术中提出的移栽成活率低、产量有限的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种铁皮石斛幼苗培养基，包括以下重量份材料，包括：香蕉5-10重量份，蔗糖8-12重量份，马铃薯18-24重量份，活性炭3-5重量份，细胞分裂素5-8重量份，琼脂2-5重量份，无菌水20-27重量份、萘乙酸2-3重量份和75％酒精4-6重量份。
所述培养基的具体制作步骤如下：
步骤一：称取相应重量份的香蕉，蔗糖，马铃薯，活性炭，细胞分裂素，琼脂，无菌水、萘乙酸和75％酒精，备用。
步骤二：将铁皮石斛成熟种子经自来水冲洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗3次备用。
步骤三：将培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒通过自来水进行清洗，并用无菌水冲洗3次，随即将清洗洁净后的培养皿放入干燥箱内进行灭菌，备用。
步骤四：将马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭分别放入粉碎机内进行粉碎处理，再执行步骤五。
步骤五：将粉碎后的马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭粉碎物一起放入烧杯中，加入剩下的无菌水，并使用玻璃棒进行混合搅拌，再执行步骤六。
步骤六：将烧杯放置在电加热陶瓷炉上进行加热灭菌处理，加热时间为30min，再执行步骤七。
步骤七：将烧杯内加热好的混合物悬浊液使用过滤漏斗进行过滤，过滤后的清液存储锥形烧瓶，并加入细胞分裂素，琼脂和萘乙酸，盖上密封塞，备用，再执行步骤八。
步骤八：将锥形烧瓶内的清液分成5组均匀倒入灭菌后的培养皿内，再执行步骤九。
步骤九：通过人工或者机器将铁皮石斛成熟种子通过无菌接种器接种到培养皿内进行培养，再执行步骤十。
步骤十：将接种后的培养皿放置在培养箱内，并开启植物补光灯进行补光培养。
进一步地，所述步骤三中培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒在干燥箱内灭菌时间至少为30min。
进一步地，所述步骤五中玻璃棒搅拌时间为15min。
进一步地，所述步骤六中电加热陶瓷炉的加热温度为100℃-120℃。
进一步地，所述步骤十中接种后的培养皿培养时间为20天以上。
进一步地，所述步骤一或步骤七中所使用的细胞分裂素具体为6-苄氨基腺嘌呤。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1.通过在培养基中添加马铃薯和香蕉的配方，成本低廉，制取方便，材料以获取，种子萌发的很好。
2.利用萘乙酸和6-苄氨基腺嘌呤作为培养料的营养剂，两者配合可以加快铁皮石斛成熟种子萌发，使萌发时间、数量、生长速度均达到理想的水平。
3.通过在培养料中添加活性炭，活性炭可以一定程度减少铁皮石斛幼苗发生褐化的可能性。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种铁皮石斛幼苗培养基，包括以下重量份材料，包括：香蕉5-10重量份，蔗糖8重量份，马铃薯18重量份，活性炭3重量份，细胞分裂素5重量份，琼脂2重量份，无菌水20重量份、萘乙酸2重量份和75％酒精4重量份。
所述培养基的具体制作步骤如下：
步骤一：称取相应重量份的香蕉，蔗糖，马铃薯，活性炭，细胞分裂素，琼脂，无菌水、萘乙酸和75％酒精，备用。
步骤二：将铁皮石斛成熟种子经自来水冲洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗3次备用。
步骤三：将培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒通过自来水进行清洗，并用无菌水冲洗3次，随即将清洗洁净后的培养皿放入干燥箱内进行灭菌，备用。
步骤四：将马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭分别放入粉碎机内进行粉碎处理，再执行步骤五。
步骤五：将粉碎后的马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭粉碎物一起放入烧杯中，加入剩下的无菌水，并使用玻璃棒进行混合搅拌，再执行步骤六。
步骤六：将烧杯放置在电加热陶瓷炉上进行加热灭菌处理，加热时间为30min，再执行步骤七。
步骤七：将烧杯内加热好的混合物悬浊液使用过滤漏斗进行过滤，过滤后的清液存储锥形烧瓶，并加入细胞分裂素，琼脂和萘乙酸，盖上密封塞，备用，再执行步骤八。
步骤八：将锥形烧瓶内的清液分成5组均匀倒入灭菌后的培养皿内，再执行步骤九。
步骤九：通过人工或者机器将铁皮石斛成熟种子通过无菌接种器接种到培养皿内进行培养，再执行步骤十。
步骤十：将接种后的培养皿放置在培养箱内，并开启植物补光灯进行补光培养。
其中，所述步骤三中培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒在干燥箱内灭菌时间至少为30min。
其中，所述步骤五中玻璃棒搅拌时间为15min。
其中，所述步骤六中电加热陶瓷炉的加热温度为100℃-120℃。
其中，所述步骤十中接种后的培养皿培养时间为20天以上。
其中，所述步骤一或步骤七中所使用的细胞分裂素具体为6-苄氨基腺嘌呤。
实施例2
一种铁皮石斛幼苗培养基，包括以下重量份材料，包括：香蕉5-10重量份，蔗糖12重量份，马铃薯24重量份，活性炭5重量份，细胞分裂素8重量份，琼脂5重量份，无菌水27重量份、萘乙酸3重量份和75％酒精6重量份。
所述培养基的具体制作步骤如下：
步骤一：称取相应重量份的香蕉，蔗糖，马铃薯，活性炭，细胞分裂素，琼脂，无菌水、萘乙酸和75％酒精，备用。
步骤二：将铁皮石斛成熟种子经自来水冲洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗3次备用。
步骤三：将培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒通过自来水进行清洗，并用无菌水冲洗3次，随即将清洗洁净后的培养皿放入干燥箱内进行灭菌，备用。
步骤四：将马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭分别放入粉碎机内进行粉碎处理，再执行步骤五。
步骤五：将粉碎后的马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭粉碎物一起放入烧杯中，加入剩下的无菌水，并使用玻璃棒进行混合搅拌，再执行步骤六。
步骤六：将烧杯放置在电加热陶瓷炉上进行加热灭菌处理，加热时间为30min，再执行步骤七。
步骤七：将烧杯内加热好的混合物悬浊液使用过滤漏斗进行过滤，过滤后的清液存储锥形烧瓶，并加入细胞分裂素，琼脂和萘乙酸，盖上密封塞，备用，再执行步骤八。
步骤八：将锥形烧瓶内的清液分成5组均匀倒入灭菌后的培养皿内，再执行步骤九。
步骤九：通过人工或者机器将铁皮石斛成熟种子通过无菌接种器接种到培养皿内进行培养，再执行步骤十。
步骤十：将接种后的培养皿放置在培养箱内，并开启植物补光灯进行补光培养。
其中，所述步骤三中培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒在干燥箱内灭菌时间至少为30min。
其中，所述步骤五中玻璃棒搅拌时间为15min。
其中，所述步骤六中电加热陶瓷炉的加热温度为100℃-120℃。
其中，所述步骤十中接种后的培养皿培养时间为20天以上。
其中，所述步骤一或步骤七中所使用的细胞分裂素具体为6-苄氨基腺嘌呤。
实施例3
一种铁皮石斛幼苗培养基，包括以下重量份材料，包括：香蕉7.5重量份，蔗糖10重量份，马铃薯21重量份，活性炭4重量份，细胞分裂素6.5重量份，琼脂3.5重量份，无菌水23.5重量份、萘乙酸2.5重量份和75％酒精5重量份。
所述培养基的具体制作步骤如下：
步骤一：称取相应重量份的香蕉，蔗糖，马铃薯，活性炭，细胞分裂素，琼脂，无菌水、萘乙酸和75％酒精，备用。
步骤二：将铁皮石斛成熟种子经自来水冲洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗3次备用。
步骤三：将培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒通过自来水进行清洗，并用无菌水冲洗3次，随即将清洗洁净后的培养皿放入干燥箱内进行灭菌，备用。
步骤四：将马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭分别放入粉碎机内进行粉碎处理，再执行步骤五。
步骤五：将粉碎后的马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭粉碎物一起放入烧杯中，加入剩下的无菌水，并使用玻璃棒进行混合搅拌，再执行步骤六。
步骤六：将烧杯放置在电加热陶瓷炉上进行加热灭菌处理，加热时间为30min，再执行步骤七。
步骤七：将烧杯内加热好的混合物悬浊液使用过滤漏斗进行过滤，过滤后的清液存储锥形烧瓶，并加入细胞分裂素，琼脂和萘乙酸，盖上密封塞，备用，再执行步骤八。
步骤八：将锥形烧瓶内的清液分成5组均匀倒入灭菌后的培养皿内，再执行步骤九。
步骤九：通过人工或者机器将铁皮石斛成熟种子通过无菌接种器接种到培养皿内进行培养，再执行步骤十。
步骤十：将接种后的培养皿放置在培养箱内，并开启植物补光灯进行补光培养。
其中，所述步骤三中培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒在干燥箱内灭菌时间至少为30min。
其中，所述步骤五中玻璃棒搅拌时间为15min。
其中，所述步骤六中电加热陶瓷炉的加热温度为100℃-120℃。
其中，所述步骤十中接种后的培养皿培养时间为20天以上。
其中，所述步骤一或步骤七中所使用的细胞分裂素具体为6-苄氨基腺嘌呤。
本发明的工作原理及使用流程：铁皮石斛成熟种子在萘乙酸和6-苄氨基腺嘌呤作为培养料的营养剂的共同作用下，其萌发时间、数量、生长速度均达到理想的水平，通过在培养料中添加活性炭，铁皮石斛幼苗发生褐化的可能性明显减低。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (6)
1.一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于，包括以下重量份材料，包括：香蕉5-10重量份，蔗糖8-12重量份，马铃薯18-24重量份，活性炭3-5重量份，细胞分裂素5-8重量份，琼脂2-5重量份，无菌水20-27重量份、萘乙酸2-3重量份和75％酒精4-6重量份。
所述培养基的具体制作步骤如下：
步骤一：称取相应重量份的香蕉，蔗糖，马铃薯，活性炭，细胞分裂素，琼脂，无菌水、萘乙酸和75％酒精，备用。
步骤二：将铁皮石斛成熟种子经自来水冲洗30min，用75％酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗3次备用。
步骤三：将培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒通过自来水进行清洗，并用无菌水冲洗3次，随即将清洗洁净后的培养皿放入干燥箱内进行灭菌，备用。
步骤四：将马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭分别放入粉碎机内进行粉碎处理，再执行步骤五。
步骤五：将粉碎后的马铃薯、香蕉、蔗糖和活性炭粉碎物一起放入烧杯中，加入剩下的无菌水，并使用玻璃棒进行混合搅拌，再执行步骤六。
步骤六：将烧杯放置在电加热陶瓷炉上进行加热灭菌处理，加热时间为30min，再执行步骤七。
步骤七：将烧杯内加热好的混合物悬浊液使用过滤漏斗进行过滤，过滤后的清液存储锥形烧瓶，并加入细胞分裂素，琼脂和萘乙酸，盖上密封塞，备用，再执行步骤八。
步骤八：将锥形烧瓶内的清液分成5组均匀倒入灭菌后的培养皿内，再执行步骤九。
步骤九：通过人工或者机器将铁皮石斛成熟种子通过无菌接种器接种到培养皿内进行培养，再执行步骤十。
步骤十：将接种后的培养皿放置在培养箱内，并开启植物补光灯进行补光培养。
2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于：步骤三中培养皿、烧杯、锥形烧瓶和玻璃棒在干燥箱内灭菌时间至少为30min。
3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于：步骤五中玻璃棒搅拌时间为15min。
4.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于：步骤六中电加热陶瓷炉的加热温度为100℃-120℃。
5.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于：步骤十中接种后的培养皿培养时间为20天以上。
6.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛幼苗培养基，其特征在于：步骤一或步骤七中所使用的细胞分裂素具体为6-苄氨基腺嘌呤。
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