CN109072151A - 细胞培养容器及细胞培养容器的固定用夹具 - Google Patents

Abstract

本发明提供细胞培养容器及其固定用夹具。具体而言，本发明的细胞培养容器具备具有俯视时为环状的被密闭了的培养空间的容器部、以及连通所述培养空间的内部与外部的口部。所述容器部具备在培养时成为上侧的第一容器壁、以及在培养时成为下侧的第二容器壁。优选至少所述第一容器壁具有柔软性。

Description

细胞培养容器及细胞培养容器的固定用夹具

技术领域

本发明涉及具备被密闭了的培养空间的细胞培养容器、以及细胞培养容器的固定用夹具。

背景技术

近年来，ES细胞、iPS细胞的研究及开发尤其得到推进。由于此种推进，可以实现各种各样的细胞的制作，对于利用了细胞的细胞治疗、再生治疗的期待正在提高。另外，对用于大量地、稳定地并且容易地获取用于在这些治疗中利用的细胞的新的细胞培养技术的要求也在提高。

例如，有时出于医疗目的使用经过培养的细胞等。该情况下，所使用的培养容器优选满足下面的特性。

培养性能高。

可以容易地观察培养状态。

培养中的细胞难以被细菌污染。

处置容易。

即，希望使用具有优异的无菌操作性的培养容器。

从无菌操作性的观点考虑，尝试过不是使用以往的培养皿、烧瓶等，而是使用袋状的容器(袋)作为用于细胞培养的容器。袋状的容器(袋)具备内容液的填充及排出用的口、与口连结的管。袋状的容器例如具有透气性高的容器壁。细胞在袋状容器中得到培养。细胞的生长所必需的氧被经由容器壁供给。作为细胞的代谢产物之一的二氧化碳被经由容器壁排出。

此种袋状容器记载于日本特开2009－027944号公报中。

另外，在日本特开2010－136628号公报中记载有适于振荡培养的细胞培养容器。该容器在俯视时为椭圆形。该容器被载放于振荡台(跷跷板)上。容器内的培养液因振荡台的摇摆而在容器内成跷跷板状移动。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2009－027944号公报

专利文献2：日本特开2010－136628号公报

发明内容

发明所要解决的问题

以往的细胞培养容器具备被密闭了的培养空间。但是，以往的细胞培养容器不适于旋转培养。所谓旋转培养，是使培养容器水平地旋转而使容器内的液体培养基中产生旋转流的方法。另外，根据细胞培养的目的，也存在如下情况，即，希望在培养容器的旋转时阻止在液体培养基中产生朝向培养容器的中心的涡流的情况。

本发明是鉴于此种情况而研究出的发明。本发明的目的在于，提供一种适于旋转培养的细胞培养容器。本发明的目的在于，提供一种细胞培养容器，其具备被密闭了的培养空间，并且在培养容器的旋转时，可以阻止在液体培养基中产生朝向培养容器的中心的涡流。另外，本发明的目的在于，提供一种夹持细胞培养容器的固定用夹具。

用于解决问题的方法

本发明如下所示。

[1]一种细胞培养容器，所述细胞培养容器具备：

具有俯视时为环状的被密闭了的培养空间的容器部、以及

连通所述培养空间的内部与外部的口部，

所述容器部具备在培养时成为上侧的第一容器壁、和在培养时成为下侧的第二容器壁。

[2]根据[1]中记载的细胞培养容器，其中，所述第一容器壁具有柔软性。

[3]根据[1]中记载的细胞培养容器，其中，所述第一容器壁及所述第二容器壁双方具有柔软性。

[4]根据[1]中记载的细胞培养容器，其中，所述第一容器壁具有柔软性，所述第二容器壁具有形状维持性。

[5]根据[4]中记载的细胞培养容器，其具备从所述第二容器壁的外周部立起的环状的外周壁、和从所述第二容器壁的内周部立起的环状的内周壁。

[6]根据[1]中记载的细胞培养容器，其中，所述第一容器壁及所述第二容器壁双方具有形状维持性。

[7]根据[2]～[5]中任一项记载的细胞培养容器，其中，在从所述容器部内排出包含气体的内容物时，所述第一容器壁的内表面与所述第二容器壁的内表面实质性地密合。

[8]根据[1]～[7]中任一项记载的细胞培养容器，其中，所述第一容器壁及所述第二容器壁的至少一方具有透氧性。

[9]一种固定用夹具，是用于固定[1]～[8]中任一项记载的细胞培养容器的夹具，

所述固定用夹具具备：

用于夹持所述容器部的第一板及第二板、以及

用于将所述第一板及所述第二板保持为夹持住所述容器部的状态的保持机构。

发明效果

本发明的细胞培养容器由于具备具有被密闭了的培养空间的容器部，因此可以降低细胞培养中的污染的风险。

本发明的细胞培养容器可以在培养容器的旋转时，使容器内的液体培养基中产生沿着环状的培养空间的旋转流。因此，本发明的细胞培养容器适合于旋转培养。

此外，本发明的细胞培养容器具有形成环状的培养空间的内周缘、内周壁等。因此，根据本发明，可以阻止在液体培养基中产生朝向容器部的中心的涡流。

附图说明

图1是表示本发明的细胞培养容器的一个实施方式(救生圈型袋)的立体图。

图2是表示本发明的细胞培养容器的其他实施方式(双重圆形托盘状袋)的立体图。

图3是图2所示的细胞培养容器(双重圆形托盘状袋)的容器部的示意性剖视图。

图4是表示图1所示的细胞培养容器(救生圈型袋)由夹具固定了的状态的立体图。

图5是表示图1所示的细胞培养容器(救生圈型袋)由夹具固定了的状态的侧视图。

图6是表示图1所示的细胞培养容器(救生圈型袋)由夹具固定的状态的分解图。

具体实施方式

本发明的实施方式的细胞培养容器具备具有俯视时为环状的被密闭了的培养空间的容器部、和连通培养空间的内部与外部的口部。容器部具备在培养时成为上侧的第一容器壁、和在培养时成为下侧的第二容器壁。优选第一容器壁及第二容器壁当中的至少第一容器壁具有柔软性。例如用软质片形成第一容器壁。

需要说明的是，在本发明的实施方式的细胞培养容器被用于旋转培养的情况下，俯视时为环状的被密闭了的培养空间成为环状的流路。另外，同样地，在细胞培养容器被用于旋转培养的情况下，例如在可以在旋转时阻止在液体培养基中产生朝向培养容器的中心的涡流的范围中确定培养空间的内径。

作为本发明的实施方式，也可以第一容器壁及第二容器壁双方具有柔软性。例如，可以用软质片形成第一容器壁及第二容器壁。图1所示的救生圈型袋是具有此种第一容器壁及第二容器壁的细胞培养容器的一例。

作为本发明的其他实施方式，也可以第一容器壁具有柔软性。例如，可以用软质片形成第一容器壁。也可以第二容器壁具有形状维持性。例如，可以用硬质片形成第二容器壁。

也可以第二容器壁具有从其外周部立起的环状的外周壁、和从其内周部立起的环状的内周壁。可以用硬质片形成第二容器壁。图2所示的双重圆形托盘状袋是具有此种第二容器壁的细胞培养容器的一例。需要说明的是，只要具有形状维持性，则也可以用软质片形成双重圆形托盘状袋的第二容器壁。

作为本发明的其他实施方式，也可以第一容器壁及第二容器壁双方具有形状维持性。例如，可以用硬质片形成第一容器壁及第二容器壁。

第一容器壁及第二容器壁的厚度例如可以根据细胞培养容器的内径及外径的大小、向容器部内供给的液体培养基的重量等来确定。第一容器壁及第二容器壁的厚度不会由“片”这样的用语限定在特定的范围中。

图1所示的救生圈型袋中，第一容器壁及第二容器壁的厚度可以相同，也可以不同。第一容器壁及第二容器壁的厚度例如可以根据袋的内径及外径的大小、向袋内供给的液体培养基的重量等来确定。所确定的第二容器壁的厚度可以大于第一容器壁的厚度。图2所示的双重圆形托盘状袋中也同样。

第一容器壁及第二容器壁可以具有柔软性。此处，所谓“柔软性”，例如是指容器壁的追随性。在容器壁具有追随性的情况下，可以没有空气向容器部内的出入地使液体培养基等内容液向容器部内流入或从容器部内流出。这是因为，具有追随性的容器壁发生变形，从而确保容器部的容积。容器壁的追随性并不单纯地由形成容器壁的材料的物理数值决定。容器壁的追随性有时也会因容器的形态、存在于容器内的空气的量等而改变。因而，不适合笼统地利用形成容器壁的材料的物理数值来限制本发明。

也可以至少第一容器壁具有柔软性。

通过经由口部向容器部内供给液体培养基、气体等，由此，具有柔软性的第一容器壁就会变形，容器部的内容积增大。另一方面，通过经由口部从容器部内将液体培养基、气体等排出，由此，具有柔软性的第一容器壁就会变形，容器部的内容积减小。

在从容器部内排出液体培养基、气体等内容物时，优选第一容器壁的内表面与第二容器壁的内表面实质性地密合。

图1所示的救生圈型袋中，因向容器部供给液体培养基、气体等，容器部鼓起而变为立体形状。因从容器部排出液体培养基、气体等，容器部萎缩而变为平面形状。因此，由液体培养基、气体等的供给及排出造成的容器部的内容积的变化大。

图2所示的双重圆形托盘状袋中，如后所述，从最初起就形成了立体形状的容器部。因此，由液体培养基、气体等的供给及排出造成的容器部的内容积的变化一般比救生圈型袋小。

图1所示的救生圈型袋中，可以在将液体培养基等内容液向容器部供给后，再供给空气等气体。通过供给气体，第一容器壁的内表面就易于从液体培养基的液面分离，因此可以防止液体培养基的旋转流与第一容器壁的内表面的不需要的干涉。

图2所示的双重圆形托盘状袋中，也可以在将液体培养基等内容液向容器部供给后，再供给空气等气体。通过供给气体，第一容器壁的内表面就易于从液体培养基的液面分离，因此可以防止液体培养基的旋转流与第一容器壁的内表面的不需要的干涉。

另一方面，第二容器壁也可以具有形状维持性。此处，所谓“形状维持性”，是指例如即使将液体培养基等内容液向容器部供给，第二容器壁的形状也不会实质性地改变。

在容器部的旋转时，内容液流动。因内容液流动，而会有第二容器壁变形的情况。

另外，例如，在观察细胞、更换培养基等时，细胞培养容器被拿起。在容器被拿起时，因内容液的重量，而会有第二容器壁变形的情况。

通过使第二容器壁具有形状维持性，就可以抑制这些变形。

需要说明的是，随着细胞培养容器(容器部)的直径变大，容器部内的液体培养基的重量增加。因此，即使在第二容器壁具有形状维持性的情况下，在拿起细胞培养容器(容器部)时，也会有因内容液的重量而使第二容器壁以某个程度弯曲的情况。

在第二容器壁具有形状维持性的情况下，第二容器壁当中的成为环状流路的底面的部分优选像以往的盘子的底面那样为平面。

构成细胞培养容器的第一容器壁及第二容器壁的材料是任意的材料。从成形性、经济性、以及处置性等观点考虑，材料为天然树脂或合成树脂，优选为合成树脂。

作为合成树脂的例子，可以举出聚苯乙烯树脂、聚酯树脂、聚碳酸酯树脂、聚甲基丙烯酸甲酯树脂、环烯烃树脂、聚乙烯树脂、乙烯－乙酸乙烯酯共聚树脂、聚丙烯树脂、以及它们的混合物等。例如，也可以用由这些树脂形成的单层片、或包含这些树脂的复合片来形成第二容器壁。此处，所谓复合片，是指由多种树脂形成的片。由多种树脂形成的片例如为由树脂混合物形成的片、层合膜、向树脂膜上的树脂涂覆、向树脂膜上的树脂印刷等。

细胞培养容器的第一容器壁及第二容器壁也可以由软质片构成。作为形成软质片的树脂的例子，可以举出低密度聚乙烯树脂、乙烯－乙酸乙烯酯共聚树脂、聚丙烯树脂、乙烯－丙烯共聚树脂、聚丁二烯树脂、苯乙烯－丁二烯共聚树脂及它们的氢化树脂、聚氨酯树脂、以及这些树脂的混合物等。也可以使用它们作为形成硬质片的树脂。

低密度聚乙烯当然包括一般的低密度聚乙烯，还包括直链状低密度聚乙烯树脂、茂金属催化剂系低密度聚乙烯树脂。聚丙烯树脂包括立构嵌段聚丙烯树脂、以及聚丙烯树脂与立构嵌段聚丙烯树脂的混合物。

为了防止细胞的粘附，第一容器壁及第二容器壁的内侧(培养空间一侧)的面优选为疏水性表面。第一容器壁及第二容器壁的内侧(培养空间一侧)的面优选由疏水性树脂形成。或者优选对第一容器壁及第二容器壁的内侧(培养空间一侧)的面预先实施疏水化处理或阻碍细胞的粘附的处理。作为此种处理的例子，可以举出琼脂糖涂覆、聚甲基丙烯酸羟基乙酯(poly-HEMA)涂覆、2－甲基丙烯酰氧基乙基磷酸胆碱(MPC)涂覆等。

第一容器壁及第二容器壁的内侧(培养空间一侧)的面并不限定为疏水性表面。第一容器壁及第二容器壁的内侧(培养空间一侧)的面也可以是疏水性表面或亲水性表面。对于是疏水性表面或亲水性表面的哪种为好，可以根据所培养的细胞的种类、液体培养基的种类、添加物、培养容器的大小、以及培养容器的旋转速度等来确定。

在优选亲水性表面的情况下，利用亲水性树脂来形成第一容器壁及第二容器壁的内侧的面。或者对第一容器壁及第二容器壁的内侧的面预先实施亲水化处理或促进细胞的粘附的处理。作为此种处理的例子，可以举出向表面附加羟基及羧基的电晕放电处理、胶原蛋白I涂覆、聚－D－赖氨酸涂覆等。

另外，优选培养容器的第一容器壁及第二容器壁的至少一方具有透气性。特别优选培养容器的第一容器壁及第二容器壁的至少一方具有氧及二氧化碳的透过性。可以经由容器壁进行细胞所必需的氧向容器内的供给、和二氧化碳向容器外的排出。该情况下，由于容器的内部与外部不直接连通，因此可以维持容器的内部的无菌性。

此处，透气性主要是指氧及二氧化碳的透过性。氧的透过性和二氧化碳的透过性对于各种材料而言有类似的趋势。而且，二氧化碳的透过性与氧的透过性相比明显更大。基于此种理由，一般是利用透氧性来评价细胞的培养中所用的容器的透气性。

因而，第一容器壁及第二容器壁可以具有透氧性。透氧性根据所培养的细胞量、和氧所透过的容器壁的面积而变化。通常而言，容器壁所必需的透氧性与所培养的细胞量成正比，与氧所透过的容器壁的面积成反比。

第一容器壁及第二容器壁也可以分别具有不同的透氧性。例如，在最有效地培养细胞的情况下，可以假定所培养的细胞的量与培养基的量成正比。通过用25℃时的第一容器壁的每单位实际有效面积的透氧性与第二容器壁的每单位实际有效面积的透氧性的和除以内容液的量，可以得到数值。可以以使该数值为0.2cc/atm·day·ml以上的方式来设计培养用的容器。所设计出的容器在细胞的培养时可以防止向细胞供给的氧不足。

此处，透氧性如下所示。

在25℃时，在对容器壁持续24小时地施加压差为1atm的氧压时，用透过容器壁的氧量除以容器壁的面积，由此可以得到表示透氧性的数值。

容器壁的每单位实际有效面积的透氧性是在容器壁的透氧性上乘以容器壁的面积而得的数值。

容器壁的每单位实际有效面积的透氧性表示容器壁向容器内供给氧的能力。

一个容器中所含的全部容器壁的每单位实际有效面积的透氧性的总和表示该容器向容器内供给氧的能力。

此外，用每单位实际有效面积的透氧性的总和除以向本发明的细胞培养容器供给的液体培养基的量，由此可以得到表示容器能够向每1ml培养基供给的氧量的数值。

以下，基于附图对本发明的实施方式进行详细说明。

图1是表示本发明的一个实施方式的细胞培养容器(救生圈型袋)1的立体图。需要说明的是，图1表示向细胞培养容器1中注入接种有细胞的液体培养基等、和通过了无菌过滤器的给定量的空气而使细胞培养容器1鼓起的状态。

细胞培养容器1的容器部具备俯视时为环状的第一容器壁2、和与之大致相同形状的第二容器壁3。第一容器壁2及第二容器壁3由具有柔软性的平面状的软质片构成。构成第一容器壁2及第二容器壁3的平面状的软质片在各自的外周缘及内周缘被相互接合。由此，容器部构成具有外周缘部4及内周缘部5的俯视时为环状(救生圈型)的被密闭了的培养空间。需要说明的是，第一容器壁2及第二容器壁3双方由软质片形成。

细胞培养容器1的容器部在包含气体的内容物的供给前、以及它们的排出后，第一容器壁2的内表面与第二容器壁3的内表面实质性地密合而成为平面形状。

当向容器部供给包含气体的内容物时，细胞培养容器1的容器部就会因第一容器壁2和第二容器壁3的柔软性，使容器部鼓起，变为救生圈型的立体形状。

第一容器壁2及第二容器壁3可以由软质片构成。作为软质片，可以例示出具有柔软性和透氧性、由乙烯－乙酸乙烯酯共聚树脂形成的厚140μm的单层片。需要说明的是，也可以使用这些片的复合片作为后述的细胞培养容器(双重圆形托盘状袋)的第二容器壁。

例如，细胞培养容器1的外周缘部的直径为80mm，内周缘部的直径为45mm。

在第一容器壁2及第二容器壁3具有柔软性的情况下，可以使第一容器壁2的内表面与第二容器壁3的内表面易于密合。通过使第一容器壁2的内表面与第二容器壁3的内表面密合，例如在更换液体培养基时，可以将液体培养基从容器部容易地排出。

环状的容器部具有后述的口。可以用夹子等夹持与口相面对的一侧的容器部的一部分。通过用夹子等夹持容器部，由此可以使第一容器壁2的一部分和与之相面对的第二容器壁3的一部分暂时地密合。通过用夹子等夹持容器部的一部分，由此可以将环状的容器部内的空间暂时地分割为口侧的大的空间和不具有口的一侧的小的空间。可以将培养中或培养后的细胞暂时地隔离在不具有口的一侧的小的空间中。通过隔离培养中或培养后的细胞，可以仅将液体培养基容易地排出及更换。

细胞培养容器1的口部至少具备连通容器部的培养空间的内部与外部的口6。此外，口部也可以具备与口6的开口端连接的管7、设于管7的前端的导出口8、和安装于导出口8的前端的帽9。

需要说明的是，在口部仅由口6构成的情况下，优选在口6的前端安装有帽。也可以利用热熔接等将口6的前端堵住来代替安装帽。

可以向细胞培养容器1的容器部注入接种有细胞的液体培养基等、和通过了无菌过滤器的给定量的空气。当向容器部注入这些物质时，容器部鼓起。容器部鼓起时，容器部变为救生圈状的立体形状。在将容器部载放于旋转装置的台面时，救生圈状的容器部在具有给定的直径的圆环的区域与台面接触。

因此，在容器部的旋转时，容器部不会在旋转台上摇动。另外，在容器部的旋转时，容器部可以维持稳定的姿势。

在使细胞培养容器1旋转时，例如也可以将细胞培养容器1安置于图4所示的夹具。通过将细胞培养容器1安置于夹具，并压迫容器部，就可以增大容器部(环状流路)的底面的直径方向的宽度。另外，通过将细胞培养容器1安置于夹具，还可以防止拿起细胞培养容器1时的变形，因此例如也适合于细胞观察。此种夹具只要是不会对细胞的悬浮培养造成影响的夹具，就没有特别限定。例如，夹具可以是配备于培养设备的夹具，也可以是独立于培养设备的夹具。

图4～图6中表示出使用独立于培养设备的夹具来固定细胞培养容器1的例子。图4是表示细胞培养容器1由夹具20固定了的状态的俯视图。图5是其侧视图。图6是它们的分解图。

夹具20具备第一板24、第二板25、连结螺栓21、螺母22、和垫圈23。第一板24及第二板25夹持细胞培养容器1的容器部。第一板24及第二板25被穿过设于各个板的4角的螺栓孔利用连结螺栓21及螺母22连结。第一板24与第二板25的间隔由垫圈23来调整。

第一板24与第二板25的间隔可以利用垫圈23的使用片数来调整。为了观察细胞培养容器1的内部，第一板24及第二板25优选为透明的。

需要说明的是，也可以使图5所示的夹具20上下反转。即，也可以以使连结螺栓21的头部与旋转装置的台面接触的方式将夹具20载放于台面上。

另外，用于将第一板24及第二板25保持为夹持住细胞培养容器1的容器部的状态的保持机构没有限定。例如，保持机构并不限定为连结螺栓21、螺母22及垫圈23。保持机构的构成是任意的。例如，也可以取代多片垫圈23而使用给定的长度的管状构件(pipe)。

图2是表示本发明的另一实施方式的细胞培养容器(双重圆形托盘状袋)10的立体图。图3是细胞培养容器10的容器部的示意性剖视图。

细胞培养容器10的容器部由第一容器壁11和第二容器壁12构成。第一容器壁11由软质片形成，具有柔软性。第二容器壁12由硬质片形成，具有形状维持性。

第二容器壁12具备从外周部延伸出来并立起的环状的外周壁13、和从内周部延伸出来并立起的环状的内周壁14。内周壁14的顶部的内径侧由上表面14a闭塞。如此所述，在第二容器壁12中，一体化地形成外周壁13及内周壁14等。

本实施方式中，第二容器壁12自最初起具备外周壁13、内周壁14，以托盘状形成。如此所述，第二容器壁12自最初起具有凹型的立体结构。通过使第二容器壁12具有立体结构，由此可以不使第二容器壁12变形地向容器部内供给液体培养基等内容液。需要说明的是，如果具有形状维持性，则也可以由软质片形成第二容器壁12。

外周壁13与内周壁14的高度优选大致相同。本实施方式中，也如图2及图3所示，外周壁13与内周壁14的高度大致相同。第二容器壁12的外周壁13的顶部接合于第一容器壁11的外周缘。可以将第二容器壁12的内周壁14的顶部接合于第一容器壁11的内表面、或能够分离地密合。或者，也可以将内周壁14的顶部的内径侧的上表面14a接合于相面对的第一容器壁11的内表面、或能够分离地密合。通过上述，构成俯视时为环状的被密闭了的培养空间15。

只要构成俯视时为环状的被密闭了的培养空间15，则也可以没有内周壁14的顶部的内径侧的上表面14a。该情况下，内周壁14的顶部接合于第一容器壁11的内表面。另外，在内周壁14的顶部接合于第一容器壁11的内表面的情况下，在第一容器壁11中也可以自该接合部位起没有内径侧的容器壁。

细胞培养容器10的第二容器壁12具有形状维持性。在第二容器壁12形成有内周壁14和上表面14a。利用此种构成，只要至少第二容器壁12的外周壁13的顶部与第一容器壁11的外周缘接合，就可以构成俯视时为环状的被密闭了的培养空间15。

需要说明的是，也可以代替在第二容器壁12一体化地设置内周壁14，而是第二容器壁12的底面为盘子之类的平面。之后可以在其底面的中央部，接合相当于内周壁14的环状构件。

构成细胞培养容器10的第一容器壁11的软质片可以在直径方向上有松弛。该情况下，在从容器部内排出包含气体的内容物时，第一容器壁11的内表面与第二容器壁12的内表面(底面)会实质性地密合。

构成细胞培养容器10的第一容器壁11的软质片可以在直径方向上有松弛。该情况下，在向容器部内注入通过了无菌过滤器的空气时，第一容器壁11可以向上方鼓起。

细胞培养容器10的口部至少具备连通容器部的培养空间的内部与外部的口16。此外，口部可以具备与口16的开口端连接的管17、设于管17的前端的导出口18、和安装于导出口18的前端的帽19。

需要说明的是，在口部仅由口16构成的情况下，优选在口16的前端安装有帽。也可以将口16的前端利用热熔接等堵住来代替安装帽。

优选细胞培养容器1(10)的第一容器壁2(11)及第二容器壁3(12)的至少一方为透明的。更优选第一容器壁2(11)及第二容器壁3(12)双方为透明的。

在细胞培养中，利用显微镜观察细胞的形状、颜色等。另外，一般而言，在利用显微镜观察培养的进展情况、以及细胞的状态后，进行下面的处置。

因而，优选至少配置显微镜的一侧的容器壁透明至可以利用显微镜观察细胞的程度。即，优选第一容器壁2(11)及第二容器壁3(12)当中的至少配置显微镜的一侧的容器壁的光线透射率为80％以上。

图1所示的细胞培养容器1只要可以旋转培养即可，其大小是任意的。细胞培养容器1的大小例如为外径40mm×内径30mm左右到外径2000mm×内径400mm左右。

图2所示的细胞培养容器10也只要可以旋转培养即可，其大小是任意的。细胞培养容器10的大小例如为外径40mm×内径30mm×高5mm左右至外径2000mm×内径400mm×高1000mm左右。

在图1所示的细胞培养容器1及图2所示的细胞培养容器10中，构成环状的培养空间的外周缘部4(外周壁13)及内周缘部5(内周壁14)为圆环状。在本发明的细胞培养容器中，构成俯视时为环状的培养空间的外周缘部(外周壁)及内周缘部(内周壁)并不限定于圆环状。例如，在将细胞培养容器用于旋转培养的情况下，在不妨碍旋转培养的范围中，外周缘部(外周壁)及内周缘部(内周壁)也可以是多边形等。

如此所述，本发明的细胞培养容器易于构建封闭系统。利用本发明的容器培养的细胞及蛋白质等由一般的细菌造成的污染的危险性小。另外，利用本发明的容器培养的细胞及蛋白质等由交叉污染造成的来自他人的体液的病毒污染等的危险性小。

本发明的细胞培养容器尤其可以用于悬浮系细胞的培养。如果利用各种蛋白质来涂覆容器，则可以将本发明的细胞培养容器作为粘附性细胞的培养用或悬浮系细胞刺激用的容器使用。

本发明的细胞培养容器适合于旋转培养。本发明的细胞培养容器的用途并不限定于旋转培养。本发明的细胞培养容器的用途是任意的。此外，通过在本发明的细胞培养容器中预先密封液体培养基等，就可以制造加入有培养基的细胞培养容器。

产业上的可利用性

本发明的细胞培养容器由于具备具有被密闭了的培养空间的容器部，因此可以降低细胞培养中的污染的风险。另外，本发明的细胞培养容器由于可以使容器内的液体培养基产生沿着环状的培养空间的旋转流，因此适合于旋转培养。

符号说明

1细胞培养容器，2第一容器壁，3第二容器壁，4外周缘部，5内周缘部，6口，7管，8导出口，9帽，10细胞培养容器，11第一容器壁，12第二容器壁，13外周壁，14内周壁，15培养空间，16口，17管，18导出口，19帽，20夹具，21连结螺栓(保持机构)，22螺母(保持机构)，23垫圈(保持机构)，24第一板，25第二板。

Claims (9)

1.一种细胞培养容器，所述细胞培养容器具备：

具有俯视时为环状的被密闭了的培养空间的容器部、以及

连通所述培养空间的内部与外部的口部，

所述容器部具备在培养时成为上侧的第一容器壁、和在培养时成为下侧的第二容器壁。

2.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，

所述第一容器壁具有柔软性。

3.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，

所述第一容器壁及所述第二容器壁双方具有柔软性。

4.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，

所述第一容器壁具有柔软性，

所述第二容器壁具有形状维持性。

5.根据权利要求4所述的细胞培养容器，其具备：

从所述第二容器壁的外周部立起的环状的外周壁、以及

从所述第二容器壁的内周部立起的环状的内周壁。

6.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，

所述第一容器壁及所述第二容器壁双方具有形状维持性。

7.根据权利要求2～5中任一项所述的细胞培养容器，其中，

在从所述容器部内排出包含气体的内容物时，所述第一容器壁的内表面与所述第二容器壁的内表面实质性地密合。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的细胞培养容器，其中，

所述第一容器壁及所述第二容器壁的至少一方具有透氧性。

9.一种固定用夹具，是用于固定权利要求1～8中任一项所述的细胞培养容器的夹具，

所述固定用夹具具备：

用于夹持所述容器部的第一板及第二板、以及

用于将所述第一板及所述第二板保持为夹持住所述容器部的状态的保持机构。