CN109021061A - 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用 - Google Patents

雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109021061A
CN109021061A CN201811147534.1A CN201811147534A CN109021061A CN 109021061 A CN109021061 A CN 109021061A CN 201811147534 A CN201811147534 A CN 201811147534A CN 109021061 A CN109021061 A CN 109021061A
Authority
CN
China
Prior art keywords
triptolide
preparation
arginine
salt
prodrug
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201811147534.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109021061B (zh
Inventor
郭可点
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201811147534.1A priority Critical patent/CN109021061B/zh
Publication of CN109021061A publication Critical patent/CN109021061A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109021061B publication Critical patent/CN109021061B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J73/00—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms
    • C07J73/001—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom
    • C07J73/003—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom by oxygen as hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明涉及医药技术领域，特别涉及靶向诱生型一氧化氮合酶(iNOS)雷公藤甲素前药及其制备方法和应用。该雷公藤甲素靶向前药的R1为L‑精氨酸、L‑精氨酸甲酯、L‑Nω‑NO‑精氨酸、L‑Nω‑NO‑精氨酸甲酯、L‑胍氨酸、L‑硫代胍氨酸、L‑赖氨酸或L‑鸟氨酸。本发明利用炎症部位诱生型一氧化氮合酶(iNOS)高表达的特点，以iNOS特异性底物(基团)对雷公藤甲素进行半合成制备前药，通过其靶向特性降低雷公藤甲素的毒性、改善其生物利用度，其抗炎效果显著好于雷公藤甲素，可以实现对雷公藤甲素有效开发和利用。

Description

雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及靶向诱生型一氧化氮合酶(iNOS)雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用。
背景技术
雷公藤甲素又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇，CAS编号为38748-32-2，分子式为C20H24O6，分子量为360.4，其化学结构式见式Ⅱ，它是从卫矛科植物雷公藤的根、叶、花及果实中提取的一种松香烷类二萜内酯。
现代药理研究表明，雷公藤甲素具有抗炎、抗肿瘤、免疫抑制等作用，特别是对类风湿性关节炎(RA)具有很好的疗效，雷公藤甲素能在短时间内明显减轻关节肿胀、疼痛，改善关节功能障碍，与传统的激素类药物、非甾体抗炎药相比有较大的优势。雷公藤甲素难溶于水，易溶于甲醇、二甲基亚砜、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿等；由于雷公藤甲素水溶性差，治疗窗窄，毒性大，不良反应率达到44％，因而其应用受到限制。在免疫系统中，一氧化氮(NO)既是白细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的效应分子，也是它们的调节分子。NO产生异常可能导致多种疾病的发生，如炎症、休克、哮喘等与NO过量生成有关，一氧化氮合酶是以L-精氨酸和L-瓜氨酸为底物催化合成NO的，因此一氧化氮合酶(NOS)可以作为药物靶点进行相关药物的研发。文献(European Journal of Pharmacology,2004,494(1):1-9.)报道雷公藤甲素可以阻断NF-κB以及JNK的磷酸化，从而抑制NO的合成和iNOS的表达来发挥抗炎和免疫抑制活性。US6569893公开了在雷公藤甲素C-14位引入水溶性氨基酸或多肽制备前药，以此来提高其水溶性和生物利用度。本发明利用炎症部位诱生型一氧化氮合酶(iNOS)高表达的特点，以iNOS特异性底物L-精氨酸、L-瓜氨酸及其类似物对雷公藤甲素进行半合成制备前药，化合物经体内吸收后靶向炎症部位，能有效降低雷公藤甲素毒性，同时也改善其生物利用度，其抗炎效果显著好于雷公藤甲素，可以实现对雷公藤甲素有效开发和利用。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了靶向诱生型一氧化氮合酶(iNOS)雷公藤甲素前药及其制备方法和应用。该雷公藤甲素靶向前药具有较高的生物活性。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种雷公藤甲素靶向前药，其为式I所示化合物：
其中，其中，R1为L-精氨酸、L-精氨酸甲酯、L-Nω-NO2-精氨酸、L-Nω-NO2-精氨酸甲酯、L-胍氨酸、L-硫代胍氨酸、L-赖氨酸或L-鸟氨酸。
本发明还提供了该雷公藤甲素靶向前药的制备方法，该制备方法包括：活化羧基：将雷公藤甲素琥珀酸酯加入有机溶剂-水混合溶剂中，在碱性环境中加入活化剂，得到雷公藤甲素琥珀酸酯活性酯中间体。酰胺化阶段：将氨基酸配成高浓度水溶液调节pH为该氨基酸的等电点，缓慢滴加至反应体系得雷公藤甲素靶向前药。
作为优选，该制备方法包括：将雷公藤甲素琥珀酸酯加入有机溶剂-水混合溶剂中，再加入碱使体系碱化，混合搅拌后，缓慢分批加入活化剂，反应活化完全后滴加pH为该氨基酸等电点的高浓度水溶液反应24h，旋干溶剂直接通过柱层析纯化得到雷公藤甲素靶向前药。
作为优选，碱为NaHCO3、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、碳酸钾、三乙胺、DIPEA、DMAP以及N-甲基吗啉中一种或两种。
作为优选，活化剂为六氟磷酸酯碳鎓盐、四氟磷酸酯碳鎓盐或六氟磷酸酯鏻鎓盐中的一种或几种。
作为优选，六氟磷酸酯碳鎓盐为：HATU、HBTU、HCTU、HApyU或HBpyU中的一种或几种。
作为优选，四氟磷酸酯碳鎓盐为：TBTU、TSTU或TNTU中的一种或几种。
作为优选，六氟磷酸酯鏻鎓盐为：BOP、pyBOP或pyAOP中的一种或几种。
作为优选，雷公藤甲素琥珀酸酯、碱、活化剂与氨基酸的重量比为1：(2.02～4.06)：(0.52～2.29)：(1.23～2.36)。
作为优选，有机溶剂-水混合溶剂中有机溶剂为DMF、THF、乙腈、DMSO、1,4二氧六环、丙酮或吡啶中的一种或几种。
作为优选，有机溶剂-水混合溶剂中，有机溶剂与水的体积比为(10:1.2)～(10:4.6)。
本发明还提供了该雷公藤甲素靶向前药在制备具有抗炎、抗肿瘤或免疫抑制作用的药物制剂中的应用。
本发明还提供了一种雷公藤甲素靶向前药的药物制剂，包括本发明雷公藤甲素靶向前药和药学上可接受的辅料。
本发明提供了雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用。该雷公藤甲素靶向前药为式Ⅱ所示化合物，其中，R1为L-精氨酸、L-精氨酸甲酯、L-Nω-NO-精氨酸、L-Nω-NO-精氨酸甲酯、L-胍氨酸、L-硫代胍氨酸、L-赖氨酸或L-鸟氨酸。
本发明通过化学半合成手段修饰雷公藤甲素得到能靶向炎症部位诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的雷公藤甲素前药，有效降低毒性，并改善其生物利用度，效果显著好于雷公藤甲素，可以实现对雷公藤甲素有效开发和利用。
附图说明
图1示实施例1甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺(TR-1)制备路线；
图2示实施例2甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺甲酯(TR-2)制备路线；
图3示实施例3甲素琥珀酸L-Nω-NO-精氨酸酰胺(TR-3)制备路线；
图4示实施例4甲素琥珀酸L-Nω-NO-精氨酸酰胺甲酯(TR-4)制备路线；
图5示实施例5甲素琥珀酸L-瓜氨酸酰胺(TR-5)制备路线；
图6示实施例6甲素琥珀酸L-硫代瓜氨酸酰胺(TR-6)制备路线；
图7示实施例7甲素琥珀酸L-赖氨酸酰胺(TR-7)制备路线；
图8示实施例8甲素琥珀酸L-鸟氨酸酰胺(TR-8)制备路线。
具体实施方式
本发明公开了雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的雷公藤甲素靶向前药的制备方法具体步骤为：
1.雷公藤甲素琥珀酸端位羧基的活化(活性酯中间体)
以THF-水(v:v)＝10:1.5为溶剂、重量份数为1的雷公藤甲素琥珀酸酯搅拌溶解，加入重量份数为2.02～4.06的三乙胺搅拌均匀，分批缓慢加入重量份数0.52～2.29的活化剂，室温搅拌活化45min～1h，TLC检测活化完全后，于低温反应器冷却至-5℃～-30℃,搅拌备用。
2.活性酯中间体酰胺化阶段
另称取重量份数为1.23～2.36的氨基酸，溶于500μL水中，将该氨基酸的水溶液调节pH为该氨基酸的等电点，使用微量移液枪分五次将氨基酸的水溶液滴加至冷却好的活化体系中，20min内滴完，缓慢恢复至室温反应2～24h。TLC检测反应完毕后，旋干溶剂，于层析柱上纯化，流动相：CHCl3:MeOH＝20:1。
本发明提供的雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用中所用原料药或辅料均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺的制备
雷公藤甲素靶向前药的制备方法，包括以下步骤：
A1：雷公藤甲素琥珀酸端位羧基的活化
如图1所示的制备工艺。以THF-水(v:v)＝10:1.5为溶剂、重量份数为1的雷公藤甲素琥珀酸酯搅拌溶解，加入重量份数为2.02～4.06的三乙胺搅拌均匀，分批缓慢加入重量份数0.52～2.29的活化剂，室温搅拌活化45min～1h，TLC检测活化完全后，于低温反应器冷却至-5℃～-30℃,搅拌备用。
B1：活性酯中间体酰胺化阶段
另称取L-精氨酸25mg(0.141mmol)，溶于500μL水中，将L-精氨酸的水溶液调节pH为11，使用微量移液枪分五次将氨基酸的水溶液滴加至冷却好的活化体系中，20min内滴完，缓慢恢复至室温反应2～24h。TLC检测反应完毕后，旋干溶剂，于层析柱上纯化，流动相：CHCl3:MeOH＝20:1，得白色固体65mg，收率97％。投料配比见表1。
表1雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺1H NMR(600MHz,)δ5.05(s,1H),4.24(dd,J＝7.3,5.3Hz,1H),3.93(d,J＝3.0Hz,1H),3.60(d,J＝2.8Hz,1H),3.44(d,J＝5.6Hz,1H),3.30–3.27(m,2H),3.17(ddt,J＝20.7,13.6,6.8Hz,2H),2.77–2.65(m,3H),2.58(t,J＝7.1Hz,2H),2.27–2.19(m,2H),2.05(t,J＝10.6Hz,1H),1.91–1.82(m,3H),1.69(dt,J＝13.7,7.3Hz,1H),1.64–1.59(m,2H),1.47(dd,J＝12.5,4.9Hz,1H),1.35–1.25(m,1H),1.02(d,J＝15.1Hz,3H),0.92(t,J＝7.5Hz,3H),0.81(t,J＝7.4Hz,3H).MS-EI(m/z):639.26[M+Na]+。
实施例2雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺甲酯制备
雷公藤甲素靶向前药的制备方法，包括以下步骤：
A2：雷公藤甲素琥珀酸端位羧基的活化
如图2所示的制备工艺。以THF-水(v:v)＝10:1.5为溶剂、重量份数为1的雷公藤甲素琥珀酸酯搅拌溶解，加入重量份数为2.02～4.06的三乙胺搅拌均匀，分批缓慢加入重量份数0.52～2.29的活化剂，室温搅拌活化45min～1h，TLC检测活化完全后，于低温反应器冷却至-5℃～-30℃,搅拌备用。
B2：活性酯中间体酰胺化阶段
另称取L-精氨酸25mg(0.141mmol)，溶于500μL水中，将L-精氨酸的水溶液调节pH为11，使用微量移液枪分五次将氨基酸的水溶液滴加至冷却好的活化体系中，20min内滴完，缓慢恢复至室温反应2～24h。TLC检测反应完毕后，旋干溶剂，于层析柱上纯化，流动相：CHCl3:MeOH＝20:1，得白色固体62mg，收率91％。投料配比见表2。
表2雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺甲酯制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-精氨酸酰胺甲酯1H NMR(600MHz,)δ5.04(s,1H),4.42(dd,J＝8.9,5.2Hz,1H),3.94(d,J＝3.0Hz,1H),3.70(s,3H),3.60(d,J＝2.9Hz,1H),3.43(d,J＝5.7Hz,1H),3.28(dd,J＝3.0,1.3Hz,2H),3.22–3.15(m,2H),2.77–2.66(m,3H),2.58(t,J＝6.9Hz,2H),2.28–2.18(m,3H),2.11–2.00(m,1H),1.91–1.85(m,3H),1.67(dddd,J＝13.3,9.2,8.0,2.9Hz,3H),1.49–1.43(m,1H),1.37–1.25(m,5H),1.00(s,3H),0.91(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(d,J＝6.9Hz,3H).MS-EI(m/z):631.29[M+H]+。
实施例3雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺制备
余下实施例均采用实施例1以及实施例2的操作步骤，不再重复赘述，只是所用的溶剂、碱、投料量的不同，这些改变将在附图说明以及投料配比中体现。
如图3所示合成线路，制备投料配比见表3。
表3雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺，白色固体粉末，54mg，收率75％。1H NMR(600MHz,)δ8.52(d,J＝3.9Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),7.33(dd,J＝8.4,4.4Hz,1H),5.04(s,1H),4.78(dd,J＝25.4,8.2Hz,2H),4.29(s,1H),3.92(d,J＝3.1Hz,1H),3.59(d,J＝2.9Hz,1H),3.44(d,J＝5.6Hz,1H),3.32(s,2H),2.74(s,2H),2.68–2.60(m,2H),2.55(s,1H),2.22(s,2H),2.04(td,J＝12.3,3.2Hz,1H),1.87(dd,J＝17.5,10.7Hz,3H),1.69(d,J＝14.5Hz,3H),1.47(dd,J＝12.5,5.1Hz,1H),1.34–1.25(m,5H),1.00(s,3H),0.90(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(d,J＝6.9Hz,3H).MS-EI(m/z):662.26[M+H]+。
实施例4雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺甲酯制备
如图4所示合成线路，制备投料配比见表4：
表4雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-Nω-NO2-精氨酸酰胺甲酯，白色固体粉末，50mg，收率68％。1H NMR(600MHz,)δ5.04(s,1H),4.76(ddd,J＝17.7,9.3,1.5Hz,2H),4.43(s,1H),3.92(d,J＝3.2Hz,1H),3.69(s,3H),3.59(d,J＝2.8Hz,1H),3.44(d,J＝5.7Hz,1H),3.21(dd,J＝13.8,7.0Hz,1H),2.74(dd,J＝10.9,5.4Hz,2H),2.65(dd,J＝11.7,5.5Hz,1H),2.62(t,J＝6.7Hz,1H),2.58(dd,J＝7.7,5.9Hz,1H),2.53(dt,J＝13.7,6.6Hz,1H),2.23(dt,J＝11.8,4.4Hz,2H),2.04(s,1H),1.88(s,2H),1.84(d,J＝3.4Hz,6H),1.47–1.45(m,1H),1.37(s,1H),1.30(d,J＝5.4Hz,1H),1.26(s,1H),0.99(s,3H),0.90(d,J＝7.0Hz,3H),0.79(d,J＝6.9Hz,3H).MS-EI(m/z):676.28[M+H]+。
实施例5雷公藤甲素琥珀酸甲素琥珀酸L-瓜氨酸酰胺制备
如图5所示合成线路，制备投料配比见表5：
表5雷公藤甲素琥珀酸L-瓜氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-瓜氨酸酰胺，白色固体粉末，56mg，收率83％。1H NMR(600MHz,)δ5.05(d,J＝3.1Hz,1H),4.79(dd,J＝16.7,1.4Hz,2H),4.25(dd,J＝7.8,4.9Hz,1H),3.93(d,J＝3.2Hz,1H),3.60(d,J＝2.8Hz,1H),3.44(d,J＝5.8Hz,1H),3.09(t,J＝6.7Hz,2H),2.77–2.53(m,6H),2.23(ddd,J＝17.9,12.0,4.3Hz,2H),2.05(d,J＝3.0Hz,1H),1.92–1.81(m,3H),1.65(dd,J＝13.8,7.1Hz,1H),1.55–1.50(m,2H),1.48(dd,J＝12.5,5.0Hz,1H),1.30(ddd,J＝19.5,11.7,5.3Hz,3H),1.01(s,3H),0.91(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(d,J＝6.9Hz,3H).MS-EI(m/z):618.26[M+H]+。
实施例6雷公藤甲素琥珀酸甲素琥珀酸L-硫代瓜氨酸酰胺制备
如图6所示合成线路，制备投料配比见表6：
表6雷公藤甲素琥珀酸L-硫代瓜氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-硫代瓜氨酸酰胺，淡黄色固体粉末，58mg，收率84％。MS-EI(m/z):634.24[M+H]+。
实施例7雷公藤甲素琥珀酸甲素琥珀酸L-赖氨酸酰胺制备
如图7所示合成线路，制备投料配比见表7：
表7雷公藤甲素琥珀酸L-赖氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-赖氨酸酰胺，米白色固体粉末，35mg，收率54％。1H NMR(600MHz,METHANOL-D4)δ5.05(s,1H),4.79(d,J＝17.7Hz,2H),3.94(s,1H),3.60(s,1H),3.44(s,1H),3.32(dd,J＝2.4,1.1Hz,1H),3.15(d,J＝3.4Hz,1H),2.80–2.71(m,2H),2.72–2.54(m,3H),2.53–2.48(m,1H),2.23(dd,J＝20.8,12.8Hz,2H),2.05(s,1H),1.87(dd,J＝17.4,10.7Hz,3H),1.70–1.62(m,1H),1.54–1.45(m,2H),1.43–1.36(m,1H),1.35–1.20(m,5H),1.00(s,3H),0.91(d,J＝6.4Hz,3H),0.80(d,J＝5.9Hz,3H).
MS-EI(m/z):589.27[M+H]+。
实施例8雷公藤甲素琥珀酸甲素琥珀酸L-鸟氨酸酰胺制备
如图8所示合成线路，制备投料配比见表8：
表8雷公藤甲素琥珀酸L-鸟氨酸酰胺制备投料配比
目标化合物验证数据：雷公藤甲素琥珀酸L-赖氨酸酰胺，白色固体粉末，45mg，收率72％。1H NMR(600MHz,METHANOL-D4)δ5.05(s,1H),4.82–4.73(m,2H),3.94(t,J＝3.0Hz,1H),3.60(d,J＝3.1Hz,1H),3.44(dd,J＝5.7,3.0Hz,1H),3.18(dd,J＝12.1,5.6Hz,1H),2.78–2.48(m,6H),2.24(ddd,J＝27.6,14.7,9.8Hz,2H),2.08–2.00(m,1H),1.90–1.83(m,3H),1.70–1.54(m,2H),1.47(dd,J＝12.5,5.4Hz,1H),1.31–1.26(m,3H),1.00(s,3H),0.91(d,J＝7.0Hz,3H),0.80(dd,J＝6.9,1.1Hz,3H).MS-EI(m/z):575.26[M+H]+。
试验例1抗炎活性测定试验
2.1实验材料
2.1.1药品与供试动物
雷公藤甲素，西安乐森生物科技有限公司提供，(纯度99％)；TR-1～TR-8由成都大学药学与生物工程学院药物化学实验室合成并经HPLC验证其纯度均在99.5％以上。实验动物为BLBC种小鼠，8～12周龄，体重18～22g,雌雄随机；BNFB(2,4-二硝基氟苯)，Adamas试剂公司提供。
2.1.2供试药品的配制
致敏剂：BNFB，由丙酮-橄榄油(4:1)配置成0.5％的溶液现配现用。
供试药物：雷公藤甲素、TR-1～TR-8由0.1％的CMC-Na配成0.4μg/mL的溶液备用。
2.2实验方法
2.2.1一次致敏
小鼠随机分为4组，头尾标记，称重，记录。去除小鼠腹部部分鼠毛，使用0.5％BNFB涂布裸露部位25μL，持续2d，1次/d。
2.2.2二次致敏
在第一次致敏后5d，配0.5％DNFB溶液，在小鼠左耳二侧各涂布0.5％DNFB 10μL，右耳二侧涂布溶剂(丙酮-橄榄油4:1)。
2.3给药
腹腔注射于第二次致敏前12h、1h及第二次致敏后12h进行，共注射3次。分为4个组，设置阴性对照组，腹腔注射0.1％CMC-Na，其余腹腔注射按4μg/kg的剂量取供试药品注射。
2.4处死
处死小鼠后，用8mm打孔器在小鼠左右耳相同位置打孔，耳片称重记录计算耳肿胀度，耳肿胀度＝M(左耳-右耳)/M右耳，计算平均值。
2.5数据分析
动物实验后获得的数据，经分析归纳后得表9。
表9雷公藤甲素及其靶向前药对小鼠的抗炎活性
衍生物及对照 剂量(μg/kg) 耳肿胀度
阴性对照 0 0.91±0.02
Triptolide 4 0.54±0.02
TR-1 4 0.44±0.03
TR-2 4 0.39±0.01
TR-3 4 0.33±0.01
TR-4 4 0.42±0.01
TR-5 4 0.24±0.04
TR-6 4 0.14±0.01
TR-7 4 0.38±0.01
TR-8 4 0.35±0.01
2.6结果
本发明中合成的靶向诱生型一氧化氮合酶(iNOS)雷公藤甲素前药TR-1～TR-8经过初步的小鼠实验，在相同的给药剂量、给药方式条件下，其抗炎活性均普遍优于参考药物(雷公藤甲素)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种雷公藤甲素衍生物，其特征在于，其为式I所示化合物：
其中，R1为L-精氨酸、L-精氨酸甲酯、L-Nω-NO-精氨酸、L-Nω-NO-精氨酸甲酯、L-胍氨酸、L-硫代胍氨酸、L-赖氨酸或L-鸟氨酸。
2.权利要求1所述雷公藤甲素衍生物的制备方法，其特征在于，将雷公藤甲素琥珀酸酯加入有机溶剂-水混合溶剂中，加入碱使体系碱化，在活化剂的作用下活化羧基，得到雷公藤甲素琥珀酸酯活性中间体，之后加入氨基酸的水溶液反应，得到雷公藤甲素衍生物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述碱为NaHCO3、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、碳酸钾、三乙胺、DIPEA、DMAP以及N-甲基吗啉中一种或两种。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述活化剂为六氟磷酸酯碳鎓盐、四氟磷酸酯碳鎓盐以及六氟磷酸酯鏻鎓盐。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述雷公藤甲素琥珀酸酯、碱、活化剂、氨基酸质量比为1：(2.02～4.06)：(0.52～2.29)：(1.23～2.36)。
6.根据权利要求4所述的活化剂种类，其特征在于，所述活化剂为六氟磷酸酯碳鎓盐、四氟磷酸酯碳鎓盐或六氟磷酸酯鏻鎓盐中的一种或几种，所述六氟磷酸酯碳鎓盐为：HATU、HBTU、HCTU、HApyU或HBpyU中的一种或几种；所述四氟磷酸酯碳鎓盐为：TBTU、TSTU或TNTU中的一种或几种；所述六氟磷酸酯鏻鎓盐为：BOP、pyBOP或pyAOP中的一种或几种。
7.根据权利要求2至7中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂-水混合溶剂中有机溶剂为DMF、THF、乙腈、DMSO、1,4二氧六环、丙酮或吡啶中的一种或几种。
8.权利要求1所述雷公藤甲素衍生物在制备具有抗炎、抗肿瘤或免疫抑制作用的药物制剂中的应用。
9.一种雷公藤甲素衍生物药物制剂，其特征在于，包括权利要求1所述雷公藤甲素衍生物和药学上可接受的辅料。
CN201811147534.1A 2018-09-29 2018-09-29 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用 Active CN109021061B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811147534.1A CN109021061B (zh) 2018-09-29 2018-09-29 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811147534.1A CN109021061B (zh) 2018-09-29 2018-09-29 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109021061A true CN109021061A (zh) 2018-12-18
CN109021061B CN109021061B (zh) 2019-07-12

Family

ID=64615016

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811147534.1A Active CN109021061B (zh) 2018-09-29 2018-09-29 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109021061B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109762038A (zh) * 2019-03-04 2019-05-17 成都大学 一种落新妇苷氨基酸类衍生物靶向前药及其制备方法和应用
CN110229210A (zh) * 2019-06-25 2019-09-13 河南中医药大学 雷公藤红素的氨基酸共晶物及其制备方法和用途
CN111518157B (zh) * 2020-06-11 2021-02-23 山东大学 一种雷公藤甲素衍生物及其制备方法和应用
CN113480590A (zh) * 2021-08-12 2021-10-08 云南西力生物技术股份有限公司 雷公藤大戟酮(wilfordeuphone)及其制备方法和在药物上的应用

Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1246121A (zh) * 1996-03-01 2000-03-01 法玛吉尼西斯公司 免疫抑制化合物及方法
CN1437468A (zh) * 2000-04-13 2003-08-20 法马西亚公司 用作一氧化氮合酶抑制剂的卤代2－氨基－5,6－庚烯酸衍生物
WO2008087202A1 (en) * 2007-01-18 2008-07-24 Pierre Fabre Medicament Triptolide derivatives for use in the treatment of acute myeloid leukemia
CN102786576A (zh) * 2012-07-18 2012-11-21 中国医学科学院药物研究所 雷公藤甲素衍生物、其制法和其药物组合物与用途
CN104327152A (zh) * 2014-10-14 2015-02-04 厦门大学 雷公藤甲素衍生物及其应用
WO2015085447A1 (zh) * 2013-12-11 2015-06-18 香港浸会大学 新的雷公藤甲素衍生物及其制备方法和用途
CN104788532A (zh) * 2015-04-30 2015-07-22 成都健腾生物技术有限公司 一种雷公藤甲素的提取制备方法
CN106589049A (zh) * 2015-10-19 2017-04-26 中国中医科学院中医临床基础医学研究所 一种改进的雷公藤甲素-适配子偶合物的合成方法
WO2017070878A1 (zh) * 2015-10-29 2017-05-04 徐荣臻 C14-位羟基酯化的雷公藤甲素氨基酸衍生物、及其制备方法和应用
CN106749496A (zh) * 2016-12-05 2017-05-31 张奇军 新型雷公藤甲素衍生物、及其制备和用途
CN106946975A (zh) * 2017-03-16 2017-07-14 上海天氏利医药科技有限公司 一种雷公藤甲素衍生物及其制备方法与制剂
CN107698653A (zh) * 2017-10-11 2018-02-16 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种雷公藤甲素半抗原及其制备方法与应用
CN107899022A (zh) * 2017-12-07 2018-04-13 深圳市老年医学研究所 一种隐形化脑靶向雷公藤甲素纳米脂质体及制备方法

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1246121A (zh) * 1996-03-01 2000-03-01 法玛吉尼西斯公司 免疫抑制化合物及方法
CN1437468A (zh) * 2000-04-13 2003-08-20 法马西亚公司 用作一氧化氮合酶抑制剂的卤代2－氨基－5,6－庚烯酸衍生物
WO2008087202A1 (en) * 2007-01-18 2008-07-24 Pierre Fabre Medicament Triptolide derivatives for use in the treatment of acute myeloid leukemia
CN102786576A (zh) * 2012-07-18 2012-11-21 中国医学科学院药物研究所 雷公藤甲素衍生物、其制法和其药物组合物与用途
WO2015085447A1 (zh) * 2013-12-11 2015-06-18 香港浸会大学 新的雷公藤甲素衍生物及其制备方法和用途
CN104327152A (zh) * 2014-10-14 2015-02-04 厦门大学 雷公藤甲素衍生物及其应用
CN104788532A (zh) * 2015-04-30 2015-07-22 成都健腾生物技术有限公司 一种雷公藤甲素的提取制备方法
CN106589049A (zh) * 2015-10-19 2017-04-26 中国中医科学院中医临床基础医学研究所 一种改进的雷公藤甲素-适配子偶合物的合成方法
WO2017070878A1 (zh) * 2015-10-29 2017-05-04 徐荣臻 C14-位羟基酯化的雷公藤甲素氨基酸衍生物、及其制备方法和应用
CN106749496A (zh) * 2016-12-05 2017-05-31 张奇军 新型雷公藤甲素衍生物、及其制备和用途
CN106946975A (zh) * 2017-03-16 2017-07-14 上海天氏利医药科技有限公司 一种雷公藤甲素衍生物及其制备方法与制剂
CN107698653A (zh) * 2017-10-11 2018-02-16 中国农业科学院蜜蜂研究所 一种雷公藤甲素半抗原及其制备方法与应用
CN107899022A (zh) * 2017-12-07 2018-04-13 深圳市老年医学研究所 一种隐形化脑靶向雷公藤甲素纳米脂质体及制备方法

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109762038A (zh) * 2019-03-04 2019-05-17 成都大学 一种落新妇苷氨基酸类衍生物靶向前药及其制备方法和应用
CN110229210A (zh) * 2019-06-25 2019-09-13 河南中医药大学 雷公藤红素的氨基酸共晶物及其制备方法和用途
CN110229210B (zh) * 2019-06-25 2022-07-12 河南中医药大学 雷公藤红素的氨基酸共晶物及其制备方法和用途
CN111518157B (zh) * 2020-06-11 2021-02-23 山东大学 一种雷公藤甲素衍生物及其制备方法和应用
CN113480590A (zh) * 2021-08-12 2021-10-08 云南西力生物技术股份有限公司 雷公藤大戟酮(wilfordeuphone)及其制备方法和在药物上的应用
CN113480590B (zh) * 2021-08-12 2023-02-17 云南西力生物技术股份有限公司 雷公藤大戟酮(wilfordeuphone)及其制备方法和在药物上的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN109021061B (zh) 2019-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109021061B (zh) 雷公藤甲素靶向前药及其制备方法和应用
CA3062265C (en) Process for preparing intermediate of antibody drug conjugate
WO1990010443A1 (en) Derivatives of taxol, pharmaceutical compositions thereof and methods for the preparation thereof
CA2334598A1 (en) Vitamin b12 derivatives and methods for their preparation
CN104448296A (zh) 炔基多臂聚乙二醇衍生物
Grzybowska et al. N-methyl-ND-fructopyranosylamphotericin B methyl ester, new amphotericin B derivative of low toxicity
CN101948500A (zh) 喜树碱20位偶合胆酸的新衍生物
EP1631545A2 (de) Reagenzien zur modifikation von biopharmazeutika, deren herstellung und anwendung
CN108610384B (zh) 基于肠道mct1载体蛋白设计的前药及其制备方法
JP3113880B2 (ja) パートリシン誘導体
Pagé et al. Synthesis of divalent α-D-mannopyranosylated clusters having enhanced binding affinities towards concanavalin A and pea lectins
CN101302199B (zh) 桂德霉素及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN102516351A (zh) 一种具有抗癌活性的熊果酸衍生物及其制备方法
CN109705187B (zh) 一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与应用
CN109762037B (zh) 一种落新妇苷氨基吡啶类衍生物靶向前药及其制备方法和应用
CN107652348B (zh) 一种焦磷酸盐化胆固醇及其制备方法和用途
CN112138001A (zh) 一种槲皮素-低分子肝素-紫杉醇结合物、制备方法及应用
CN105732651A (zh) 一种小分子肺靶向药物
CN109762038A (zh) 一种落新妇苷氨基酸类衍生物靶向前药及其制备方法和应用
CN110183504A (zh) 一种具有肿瘤靶向性的吉西他滨前体药物及其制备方法和用途
CN114767884B (zh) 一种可视化的前药激活化合物、前药体系及其制备方法和应用
CN105085614B (zh) 一种链丝菌素甲磺酸钠及其制备方法和用途
CA3076714C (en) Method for producing antibody-drug conjugate intermediate by addition of acid and use thereof
Borse et al. Dipeptide Conjugates: An Important Class of Therapeutic Agents
CN114306632B (zh) 一种与人血清白蛋白非共价结合型7-乙基-10-羟基喜树碱衍生物前药、制备及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant