CN109020981A - 8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物 - Google Patents

8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物 Download PDF

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Abstract

本发明提供8,9‑二氢咪唑[1,2‑a]嘧啶并[5,4‑e]嘧啶‑5(6H)‑酮类化合物。具体而言，本发明提供式I的化合物，或其可药用盐或前药：其中A和R1‑R7为本文所定义。式I的化合物是Wee1激酶抑制剂。因此，本发明的化合物可用于治疗由Weel活性异常而导致的疾病。

Description

8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化 合物
技术领域
本发明属于药物化学领域。本发明特别涉及8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物，及其作为治疗上有效的Wee1激酶抑制剂，和抗癌药物的应用。
背景技术
真核细胞的生长、增殖的过程包括母细胞通过准确复制其包括遗传信息的基因组，通过细胞染色体的有丝分裂产生两个相同的子细胞。这种细胞的增殖、分裂过程被称为细胞周期(cell cycle)，这包括了细胞从一次分裂完成开始，到下一次分裂完成的整个过程。细胞周期包括四个生长阶段，有丝分裂后的蛋白质，RNA等大量合成的G1期，DNA合成复制的S期，有丝分裂前的准备阶段G2期和细胞进行有丝分裂的M期。细胞根据细胞状况和需要决定通过细胞周期进行分裂增殖，或停止。细胞增殖，分裂必须保持其遗传信息的完整和正确。是否进入细胞周期的下一阶段直至完成整个细胞周期是通过在细胞周期过程中的多个检验点(checkpoint)来保障并完成的。
在细胞周期的整个过程中有多个细胞周期检验点(cell cycle checkpoint)存在。每个细胞周期检验点都包括非常复杂的系统和由多个因子组成。在G1期内的检验点通过检验细胞内外的状态来决定是否进入细胞周期，从而决定细胞是否进入S期DNA合成。G1检验点是个复杂的系统，其中包括著名的CDK4/CDK6。另一个重要的检验点在细胞完成了DNA复制(S期)进入细胞生长期(G2期)，即所谓的G2-M检验点。这个检验点检验细胞合成DNA后是否有DNA损伤或缺损，从而决定细胞是否进行下面染色体分离的有丝分裂(M-期)。这一阶段的细胞周期检验点包括了复杂的激酶Cdk1复合体包括Cyclin-B-cdc2(Nurse,P.,1990,Nature 344,503-508)。Cdk1的活化导致有丝分裂的起始，其随后的失活伴随着有丝分裂的完成。Cdk1的活性是通过cdc2结合细胞周期蛋白A(Cyclin-A)或细胞周期蛋白B(Cyclin-B)以及其磷酸化来调节的。比如，细胞周期蛋白B-Cdk1复合物的激活能使细胞有丝分裂(Lindqvist,A.,等人,2009,The Journal of cell biology 185,193-202)。Cdc2在细胞进入有丝分裂前通过磷酸化维持在无活性的状态。其磷酸化状态是通过络氨酸激酶Wee1等来实现的。另外，还有M期细胞周期检验点。
Wee1磷酸化Cdk1上的酪氨酸15(Y15)从而抑制Cdk1的活性(McGowan,C.H.,等人,1993,The EMBO journal 12,75-85；Parker,L.L.,等人,1992,Science 257,1955-1957)。因此，Wee1是Cdk1活性的关键抑制性调节剂，在G2-M期检测点起重要作用，保证当DNA复制完成后在DNA没有损伤的情况下进入有丝分裂(O’Connell,等人,1997,The EMBO journal16,545-554)。Wee1的丧失或失活可以导致过早进入有丝分裂，引起有丝分裂的失败和细胞死亡(Stumpff,J.,等人,2004,Curr Biol14,2143-2148)。一些肿瘤细胞的G1期细胞周期检验点有功能缺陷，依赖G2-M期检测点来保障细胞周期的进行(Sancar,A.,等人,2004,Annual review of biochemistry 73,39-85)。在这些癌细胞中由于p53蛋白功能的缺失，丧失Wee1表达或抑制Wee1的活性会导致G2-M期检验点的丧失，使肿瘤细胞对DNA损伤非常敏感，这个敏感化在丧失G1期检验点能力的肿瘤细胞中尤其突出(Wang,Y.,等人,2004,Cancer biology&therapy 3,305-313)。
综上所述，抑制Wee1的活性可以有选择性促使细胞周期检验点有缺陷的癌细胞死亡；同时，对细胞周期检验点正常的正常细胞则作用甚小。因此，Wee1的抑制剂有可能用于癌症及其它细胞增殖病症的治疗的靶向药物。
另外，由于抑制Wee1活性使细胞对DNA损伤的敏感度提高，Wee1抑制剂可以和造成DNA损伤或抑制DNA修复机制有关的抗癌药物联合使用，这包括和PARP抑制剂奥拉帕尼(olaparib)、Niraparib、Rucaparib和Talazoparib；HDAC抑制剂伏立诺他、罗咪地辛、帕比司他和贝利司他等等用于治疗癌症或其它细胞增殖病症。Wee1抑制剂还可能和其他与细胞分裂细胞周期检测点有关的抗癌药物的联合共用，包括Chk1/2抑制剂，CDK4/6抑制剂如帕博西尼，ATM/ATR抑制剂等等用于治疗癌症等病症。
Karnak等人(Clin Cancer Res,2014,20(9):5085-5096)的研究表明Wee1抑制剂AZD1775和PARP抑制剂olaparib联合使用可对放射治疗胰腺癌增敏。其结果证实了Wee1抑制剂和PARP抑制剂联合使用治疗胰腺癌可增敏放射疗效，支持了Wee1抑制使细胞对PARP抑制剂增敏的假设—通过抑制DNA修复和G2检验点功能对辐射治疗增敏，最终可导致未修复的损伤的DNA的积累直至细胞死亡。
另外，有报道(BMC Cancer,2015,15:462)将Wee1抑制剂MK1775和Chk1/2抑制剂AZD7762联合使用用于恶性黑素瘤细胞和异种移植模型中。结果显示，在Wee1和Chk1/2抑制剂的联合使用可协同单一药物的抑制效果，从而降低肿瘤细胞的增殖能力及激活了细胞凋亡机制；在异种移植模型中二者的联合使用可更好地抑制肿瘤生长。
AZD1775是第一个在临床前模型中具有单药抗肿瘤活性的Wee1激酶抑制剂。I期临床研究显示出AZD1775对携带BRCA突变的实体瘤患者的单药疗效，并通过配对肿瘤活检发现跟靶向有关的变化和DNA损伤应答证实了其Wee1激酶抑制机制(J Clin Oncol,2015,33:3409-3415)。在AZD1775总共入组200多患者的一个临床I期中，研究了其在治疗晚期实体瘤患者的单药疗效和与吉西他滨、顺铂或卡铂联用的疗效，显示了其在一定的剂量下不管是单药还是与化药联用都是安全且可耐受的。在176例可评估疗效的患者中，94(53％)具有作为最佳应答的稳定疾病，以及17(10％)有部分应答。重要的是，AZD1775在TP53突变患者(n＝19)的应答率为21％，而在TP53野生型患者(n＝33)的应答率为12％，展现出其对TP53突变患者的巨大潜力(J Clin Oncol,2016Sep 6,pii:JCO675991)。
WO2012161812公开了以下三环化合物作为Wee1激酶抑制剂。其中，X是N或CR1；Y是N或CR2；Z是O、S或NH；R1和R2是H或C1-6烷基；R3是C1-8烷基，C2-8烯基，C3-8环烷基，芳基，或杂芳基等；R4是苯基，萘基，四氢萘基，茚基或茚满基，或5-16元单环、双环或三环杂环基等。
WO2005021551公开了以下四环嘧啶或吡啶化合物作为蛋白激酶抑制剂。其中，X是N或CH；Y是NH，N(CN)，O或S；L是由C和N原子组成的4-原子链；Ra是H，C1-8烷基，CN，苯基或苄基；R1和R2独立是可被取代的饱和或不饱和的5-，6-，或7-元单环，或6-，7-，8-，9-，10-或11-元双环(包含0，1，2，3或4个选自N，O和S的原子，其中O和S原子不同时存在，环中的C原子被0，1或2个氧基取代)等。
发明内容
如结构式I、II和III所示，本发明提供了新颖的8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物作为Wee1激酶抑制剂。
本发明还提供了包含一个有效量的式I、II和III化合物的药用组合物，用来治疗癌症。
在一具体实施例中，所述药用组合物还可含有一种或多种可药用载体或稀释剂，用来治疗癌症。
在一具体实施例中，所述药用组合物还可含有至少一种已知的抗癌药物或所述抗癌药物的可药用盐，用来治疗癌症。
本发明也涉及到结构式I、II和III的新颖化合物的制备方法。
具体实施方式
如式I、II和III所示，本发明发现新颖的8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物作为Wee1激酶抑制剂。
应理解的是，本文所述的各实施方案的特征可任意组合，形成本文的技术方案；本文对各基团的定义适用于本文所述任一实施方案，例如，本文对烷基的取代基的定义适用于本文所述任一实施方案，除非该实施方案已清楚定义了烷基的取代基。
具体来说，可用于本发明的化合物是式I化合物或其可药用盐或前药：
其中，A是N或CR8；
R1为可被取代的C1-C8烷基，可被取代的C2-C8烯基，可被取代的C3-C8环烷基，可被取代的芳基，可被取代的杂环基或可被取代的杂芳基；
R2为可被取代的碳环基，可被取代的杂环基，可被取代的芳基，或可被取代的杂芳基；
R3-R8独立为氢、卤素、可被取代的氨基、可被取代的烷氧基、可被取代的C1-C10烷基、卤烷基、烯基、炔基、羟基烷基、胺基烷基、羧基烷基、硝基、氰基、酰胺基、羟基、巯基、酰氧基、叠氮基、羧基、亚乙基二氧基，羟基酰胺基或可被取代的烷硫基。
在一个或多个实施方案中，A是N。
在前述一个或多个实施方案中，R1和R2为可被取代的芳基。
在前述一个或多个实施方案中，R3-R7为氢。
在前述一个或多个实施方案中，R1上的取代基为选自以下基团中的任意一个、任意两个或任意三个：卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基。
在前述一个或多个实施方案中，R1选自：C1-C8烷基，C2-C8烯基，C3-C8环烷基，杂芳基，和任选地被1－4个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基的取代基取代的芳基。
在前述一个或多个实施方案中，R1选自任选地被1－4个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基的取代基取代的苯基。
在前述一个或多个实施方案中，R1选自可被取代的吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基和咪唑基。
在前述一个或多个实施方案中，R1选自可被取代的C1-C8烷基、C3-C8环烷基和C2-C8烯基。
在前述一个或多个实施方案中，R2的取代基为选自以下基团中的任意一个、任意两个、任意三个或任意四个：可被取代的哌嗪基、C1-C6烷基、C1-C6酰基、可被取代的吗啉基、吗啉基-C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和硝基。
在前述一个或多个实施方案中，所述可被取代的哌嗪基为可被1、2或3个选自以下的基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基和C1-C6酰基。
在前述一个或多个实施方案中，所述哌嗪基至少在对位上具有1个取代基，任选地在间位上具有一个或两个取代基。
在前述一个或多个实施方案中，可被取代的吗啉基为可被1或2个选自C1-C6烷基的基团取代的吗啉基。
在前述一个或多个实施方案中，R2选自任选取代的苯基、吡啶基、四氢异喹啉基和2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基和4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基。
在前述一个或多个实施方案中，R2选自：被任选取代的哌嗪基取代的苯基和任选被1－3个C1-C6烷基取代的四氢异喹啉基。
在前述一个或多个实施方案中，所述哌嗪基任选地被1－3个选自C1-C6烷基和C1-C6酰基的取代基取代。
在前述一个或多个实施方案中，R4和R5各自独立选自H，C1-C6烷基和卤素。
在前述一个或多个实施方案中，R6和R7各自独立选自H，C1-C6烷基和卤素。
本发明优选化合物的其中一组表示为式II化合物或其可药用盐或前药：
其中，R3-R7如在式I中所述；
Ar1和Ar2为可被取代的芳基、可被取代的杂环基或可被取代的杂芳基；
在前述一个或多个实施方案中，R3-R7为氢。
在前述一个或多个实施方案中，Ar1和Ar2为可被取代的芳基，更优选的是可被取代的苯基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar1上的取代基为选自以下基团中的任意一个、任意两个或任意三个：卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar1选自：可被取代的杂芳基，和任选地被1－4个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基的取代基取代的芳基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar1选自任选地被1－4个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和卤代C1-C6烷基的取代基取代的苯基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar1选自可被取代的吡啶基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基和咪唑基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar2的取代基为选自以下基团中的任意一个、任意两个、任意三个或任意四个：可被取代的哌嗪基、C1-C6烷基、C1-C6酰基、可被取代的吗啉基、吗啉基-C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和硝基。
在前述一个或多个实施方案中，所述可被取代的哌嗪基为可被1、2或3个选自以下的基团取代的哌嗪基：C1-C6烷基和C1-C6酰基。
在前述一个或多个实施方案中，所述哌嗪基至少在对位上具有1个取代基，任选地在间位上具有一个或两个取代基。
在一个或多个实施方案中，可被取代的吗啉基为可被1或2个选自C1-C6烷基的基团取代的吗啉基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar2选自任选取代的苯基、吡啶基、四氢异喹啉基和2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基和4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基。
在前述一个或多个实施方案中，Ar2选自：被任选取代的哌嗪基取代的苯基，和任选被1－3个C1-C6烷基取代的四氢异喹啉基。
在前述一个或多个实施方案中，所述哌嗪基任选地被1－3个选自C1-C6烷基和C1-C6酰基的取代基取代。
在前述一个或多个实施方案中，R4和R5各自独立选自H，C1-C6烷基和卤素。
在前述一个或多个实施方案中，R6和R7各自独立选自H，C1-C6烷基和卤素。
在前述一个或多个实施方案中，R1或Ar1选自：
在前述一个或多个实施方案中，R2或Ar2选自：
其中，R8独立为氢、氟、氯、甲基和三氟甲基。
在前述一个或多个实施方案中，式II的化合物具有下式III所示的结构：
式中，
Ar1选自：被1个或2个选自卤素和C1-C6烷基的取代基取代的苯基；和
Ar2选自：取代的苯基，其取代基选自：卤素，卤代C1-C6烷基，C1-C6烷基，被1－3个选自C1-C6烷基和C1-C6酰基的取代基取代的哌嗪基和被1－3个C1-C6烷基取代的吗啉基；被1－3个C1-C6烷基取代的四氢异喹啉基；被1－3个选自C1-C6烷基和C1-C6酰基的取代基取代的2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基；和被1－3个C1-C6烷基取代的4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基。
在前述一个或多个实施方案中，式III中，
Ar1选自：被两个选自卤素和C1-C6烷基的取代基取代的苯基；和
Ar2选自：取代的苯基，其取代基选自：卤素，卤代C1-C6烷基，C1-C6烷基，被1－3个选自C1-C6烷基和C1-C6酰基的取代基取代的哌嗪基和被1－3个C1-C6烷基取代的吗啉基；被1－3个C1-C6烷基取代的四氢异喹啉基；被1－3个C1-C6烷基取代的2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基；和被1－3个C1-C6烷基取代的4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基。
在前述一个或多个实施方案中，式I优选的化合物包括但不限于：
6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例1)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例2)；
4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮(实施例3)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例4)；
6-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例5)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例6)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例7)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例8)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例9)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例10)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-乙酰基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例11)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例12)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例13)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例14)；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例15)；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例16)；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例17)；
6-异丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例18)；
6-叔丁基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例19)；
6-环丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例20)；
6-环己基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例21)；
6-烯丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例22)；
6-(噻吩-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例23)；
6-(呋喃-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例24)；
6-(1H-吡咯-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例25)；
6-(1H-咪唑-5-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例26)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,8-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例27)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-9,9-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例28)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啡啉)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例32)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(吗啉基甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例33)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例34)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例35)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例36)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例37)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例38)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氯-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例39)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例40)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-三氟甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例41)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例42)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例43)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例44)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例45)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例46)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氯-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例47)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例48)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-三氟甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例49)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例50)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例51)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例52)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例53)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例54)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例55)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3,5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例56)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例57)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-异丙基-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例58)；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例59)；
6-(2,6-二氟苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例60)；
6-(2-氟-6-三氟甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例61)；
6-(2-氟-6-甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例62)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例63)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例64)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例65)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-氟-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例66)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-氯-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例67)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-三氟甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例68)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例69)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氟-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例70)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例71)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氯-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例72)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例73)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-三氟甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例74)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例75)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例76)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例77)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例78)；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例79)；
6-(2-氯-6-三氟甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例80)；
6-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例81)；
6-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例82)；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例83)；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例84)；
6-(4-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例85)；
6-(3-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例86)；
6-(2,4-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例87)；
6-(2-氯-4-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例88)；
6-(2-氯-3-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例89)；
6-(2,5-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例90)；
6-(2,3-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例91)；
6-(嘧啶-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例92)；
或其可药用盐或前药。
本文所用“烷基”是指烷基本身或是直链或支链高达十个碳原子的基团。有用的烷基包括直链或支链C1-C10烷基，优选C1-C6烷基。典型的C1-C10烷基包括可被任意取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、3-戊基、己基和辛基。
本文所用“烯基”是指直链或支链含有2-10个碳原子，除非碳链长度被另外限制，其中至少是链中的两个碳原子之间含有一个双键的基团；优选C2-C6烯基。典型的链烯基包括乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基和2-丁烯基。
本文所用“炔基”是指直链或支链含有2-10个碳原子，除非碳链长度被另外限制，其中至少是链中的两个碳原子之间含有一个叁键的基团；优选C2-C6炔基。典型的炔基包括乙炔基、1-丙炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基和2-丁炔基。
有用的烷氧基包括被上述C1-C10烷基、优选C1-C6烷基取代的氧基，例如甲氧基、乙氧基等。烷氧基中的烷基可被任意取代。烷氧基的取代基包括但不限于卤素、吗啉基、氨基，所述氨基包括烷氨基和二烷氨基以及羧基(包括其酯基)。
有用的烷硫基包括被上述C1-C10烷基、优选C1-C6烷基取代的硫基，烷硫基中的烷基可被任意取代。同时还包括这类烷硫基的亚砜和砜。
有用的氨基和可被任意取代的氨基包括-NH2、-NHR’和-NR’R”，其中R’和R”是可被任意取代的C1-C10烷基，环烷基，芳基，杂芳基或氨基。或者R’和R”与N一起形成5－-8员杂环例如哌啶，或者R’和R”与N以及与其它N或O一起形成5－8员杂环例如哌嗪。所述烷基和杂环可被任意取代。
本文中，除非另有说明，当被取代时，烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、环烷基、羰基、碳环和杂环、芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、杂芳基和杂芳基烷基可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、C1-C6酰氨基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基、芳氧基、烷硫基、C1-C6烷基、C1-C6酰基、C6-C10芳基、C3-C8环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基(C2-C6)链烯基、C6-C10芳基(C2-C6)炔基、饱和和不饱和的杂环基或杂芳基、亚甲基二氧基、C1-C6卤代烷基、C6-C10芳基(C1-C6)烷基、C1-C6羟烷基、脲基、巯基、叠氮基、羰基、二(C1-C10烷基)氨基、烷磺酰基、氨磺酰基、二烷基氨磺酰基和烷基亚磺酰基等。其中取代基本身也可被任意取代。
除非另有说明，当被取代时，优选地，烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、环烷基、羰基、碳环和杂环可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、C1-C6酰氨基、C1-C6酰基、C1-C6酰氧基、C1-C6烷氧基、芳氧基、烷硫基、C6-C10芳基、C3-C8环烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基(C2-C6)链烯基、C6-C10芳基(C2-C6)炔基、饱和和不饱和的杂环基或杂芳基。
除非另有说明，当被取代时，芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、杂芳基和杂芳基烷基可被一个或多个(例如1、2、3或4个)选自以下基团的取代基取代：卤素、亚甲基二氧基、C1-C6卤代烷基、C6-C10芳基、C3-C8环烷基、C1-C6烷基、C2-C6链烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基(C1-C6)烷基、C6-C10芳基(C2-C6)链烯基、C6-C10芳基(C2-C6)炔基、C1-C6羟基烷基、硝基、氨基、脲基、氰基、C1-C6酰基胺基、羟基、巯基、C1-C6酰氧基、叠氮基、C1-C6烷氧基、羰基、羧基、二(C1-C10烷基)胺基、烷基磺酰基、氨基磺酰基、二烷基胺基磺酰基或烷基亚磺酰基。
本文所用“芳基”是指芳基本身或是作为其它基团的一部分，指含有6到14个碳原子的单环、双环或三环芳族基团。
有用的芳基包括C6-C14芳基，优选的是C6-C10芳基。典型的C6-C14芳基包括苯基、萘基、菲基、蒽基、茚基、薁基、联苯、亚联苯基和茀基。
这里所指“碳环”包括环烷基和部分饱和的碳环基团。有用的环烷基是C3-C8环烷基。典型的环烷基包括环丙级、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
有用的饱和的或是部分饱和的碳环基团是上面所描述的环烷基和环烯基，例如环戊烯基、环庚烯基和环辛烯基。
有用的卤素或卤素基团包括氟、氯、溴和碘。
本文所用“芳基烷基”包括被任一上述C6-C14芳基取代的C1-C10烷基。优选的芳基烷基是苄基、苯乙基或萘甲基。
本文所用“芳基烯基”包括被任一上述C6-C14芳基取代的C2-C10烯基。
本文所用“芳基炔基”包括被任一上述C6-C14芳基取代的C2-C10炔基。
本文所用“芳氧基”包括被任一上述C6-C14芳基取代的氧基，其芳基可被任意取代。有用的芳氧基包括苯氧基和4-甲基苯氧基。
本文所用“芳基烷氧基”包括被任一上述芳基取代的C1-C10烷氧基，其芳基可被任意取代。有用的芳基烷氧基包括苄氧基和苯基乙氧基。
有用的卤代烷基包括被一个或多个氟、氯、溴或碘原子取代的C1-C10烷基，优选C1-C6烷基，例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、五氟乙基、1,1-二氟乙基、氯甲基、氯氟甲基和三氯甲基。
有用的酰基胺基(酰胺基)是连接在胺基氮上的任何C1-C6酰基(烷酰基)，例如乙酰胺基、氯乙酰胺基、丙酰胺基、丁酰胺基、戊酰胺基和已酰胺基，以及芳基取代的C1-C6酰基胺基，例如苯甲酰胺基和五氟苯甲酰胺基。有用的酰基包括C1-C6酰基，如乙酰基。
有用的酰氧基是连接在氧(-O-)上的任何C1-C6酰基(烷酰基)，例如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、戊酰氧基和己酰氧基。
本文所用杂环(杂环基)是指饱和或部分饱和的3－7员单环，或7－10员双环体系，它是由碳原子和从O、N、S中任选1-－4个杂原子组成的，其中杂原子氮和硫都可以被任意氧化，氮也可以任意季胺化，并且包括双环体系中上述定义的任意杂环与苯环的融合。如果产生的化合物是稳定的话，那么杂环的碳原子或氮原子可被取代。
有用的饱和或部分饱和杂环基团包括四氢呋喃基、吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、奎宁环基、吗啉基、异色满基、色满基、吡唑烷基、吡唑啉基、四氢异喹啉基、2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基、4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基、tetronoyl和tetramoyl，这些基团可被任意取代。
本文所用“杂芳环”是指含有5－14个环原子，并且有6个，10个或14个π电子在环体系上共用。而且所含环原子是碳原子和从氧、氮、硫中任选的1－3个杂原子。
有用的杂芳基包括噻吩基(苯硫基)、苯并[d]异噻唑-3-基、苯并[b]噻吩基、萘并[2,3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、色烯基、夹氧蒽基、噻吩恶基(phenoxanthiinyl)、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基(包括但不限制于2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基)、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、萘嵌间二氮(杂)苯基、菲咯啉基、吩嗪基、异噻唑基、吩噻嗪基、异恶唑基、呋咱基、吩恶嗪基、1,4-二氢喹喔啉-2,3-二酮、7-氨基异香豆素、吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮、四氢化五员[c]吡唑-3-基、吡唑[1,5-a]嘧啶基、苯并异恶唑基如1,2-苯并异恶唑-3-基、苯并咪唑基、2-羟吲哚基、噻重氮基和2-氧代苯并咪唑基。当杂芳基在环中含有氮原子时，这样的氮原子可以呈N-氧化物形式，例如吡啶基N-氧化物、吡嗪基N-氧化物和嘧啶基N-氧化物。
本文所用“杂芳氧基”包括被任一上述杂芳基取代的氧基，其中杂芳基上可有取代基。有用的杂芳氧基包括吡啶氧基、吡嗪氧基、吡咯氧基、吡唑氧基、咪唑氧基和苯硫基氧基。
本文所用“杂芳基烷氧基”是指被任一上述杂芳基取代的任一上述C1-10烷氧基，其中杂芳基上可有取代基。
一些本发明化合物可能作为立体异构体，包括旋光异构体存在。本发明包括所有立体异构体和这样的立体异构体的外消旋混合物，以及可以根据本领域技术人员众所周知的方法分离出来的单独的对映体。
可药用盐的例子包括无机和有机酸盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐和草酸盐；以及与碱例如钠羟基、三(羟基甲基)胺基甲烷(TRIS，胺丁三醇)和N-甲基葡糖胺形成的无机和有机碱盐。
本发明化合物的前药的实施例包括含有羧酸的化合物的简单酯(例如依据本领域已知方法通过与C1-4醇缩合而获得的酯)；含有羟基的化合物的酯(例如依据本领域已知方法通过与C1-4羧酸、C3-6二酸或其酸酐例如琥珀酸酐和富马酸酐缩合而获得的酯)；含有氨基的化合物的亚胺(例如依据本领域已知方法通过与C1-4醛或酮缩合而获得的亚胺)；含有氨基的化合物的氨基甲酸酯，例如Leu等人(J.Med.Chem.42:3623-3628(1999))和Greenwald等人(J.Med.Chem.42:3657-3667(1999))描述的那些酯；含有醇的化合物的醛缩醇或酮缩醇(例如依据本领域已知方法通过与氯甲基甲基醚或氯甲基乙基醚缩合而获得的那些缩醇)。
本发明化合物可使用本领域技术人员已知的方法或本发明新方法制得。具体来说，具有式Ⅰ的本发明化合物可如反应方案1中的反应实施例所示制得。N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺和取代异氰酸苯酯，如邻氯苯异氰酸酯，在乙醚中在室温下反应，得到产物(2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。该氨基甲酸叔丁酯和盐酸二氧六环溶液在二氯甲烷中室温反应，得到产物1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲(盐酸盐)。该脲(盐酸盐)和4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯，二异丙基乙基胺在乙腈中加热反应，得到产物4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯。4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯在三氯氧磷中加热反应，得到产物6-(2-氯苯基)-2-(甲硫基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。6-(2-氯苯基)-2-(甲硫基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮和间氯过氧苯甲酸在氯仿中室温反应，得到产物6-(2-氯苯基)-2-(甲磺酰基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。该酮和4-(4-甲基哌嗪)苯胺在异丙醇中加热反应，得到目标化合物6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。
反应方案1
其它相关化合物可用类似方法制得。例如，用1-氯-3-氟-2-异氰酸苯酯替代邻氯苯异氰酸酯可制得目标化合物6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯胺替代4-(4-甲基哌嗪)苯胺可制得目标化合物6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺替代4-(4-甲基哌嗪)苯胺可制得目标化合物6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。
本发明化合物可如反应方案2中的反应实施例所示制得。1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲和4,6-二氯烟酸甲酯，二异丙基乙基胺混合于乙腈中加热反应，得到产物6-氯-4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)烟酸甲酯。6-氯-4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)烟酸甲酯在三氯氧磷中加热反应，得到产物8-氯-4-(2-氯苯基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮。8-氯-4-(2-氯苯基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮，4-(4-甲基哌嗪)苯胺，三(二亚苄基丙酮)二钯，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯和磷酸钾混合于叔丁醇和水中加热反应，得到目标化合物4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮。
反应方案2
本发明化合物可如反应方案3中的反应实施例所示制得。应用类似于反应方案1所示方法可制得2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮、4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺和三氟乙酸在乙腈中室温反应，得到目标化合物6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。
反应方案3
其它相关化合物可用类似方法制得。例如，用2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺替代4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺可制得目标化合物2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯胺替代4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺可制得目标化合物2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用2-甲磺酰基-6-(2-氯-4-氟苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮替代2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮可制得目标化合物2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-6-(2-氯-4-氟苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用2-甲磺酰基-6-异丙基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮替代2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮可制得目标化合物6-异丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用2-甲磺酰基-6-(嘧啶-2-基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮替代2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮可制得目标化合物2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-6-(嘧啶-2-基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。用2-甲亚磺酰基-6-(2-氯-6-氟苯基)-8,8-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮替代2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮可制得目标化合物6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,8-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮。
本发明的一个重要方面是发现了式I(包括本文所述的式II和式III化合物)是Wee1激酶抑制剂。因此，这些化合物可用于治疗Wee1相关疾病，例如癌症。
本发明还包括给动物施用有效量的式I、式II或式III化合物或其可药用盐或前药的治疗方法。其中所述治疗方法用于治疗Wee1相关疾病，例如癌症。可由本发明的方法或药物组合物治疗或预防的这类疾病包括但不限于肝癌、黑素瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴白血病、慢性淋巴白血病、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈癌、睾丸癌、软组织肉瘤、原发性巨球蛋白血症、膀胱癌、慢性粒细胞白血病、原发性脑癌、恶性黑素瘤、小细胞肺癌、胃癌、结肠癌、恶性胰腺胰岛瘤、恶性类癌性癌症、绒毛膜癌、蕈樣肉芽腫、头颈癌、骨原性肉瘤、胰腺癌、急性粒细胞白血病、毛细胞白血病、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤、泌尿生殖系统肿瘤病、甲状腺癌、食管癌、恶性高钙血症、子宫颈增生症、肾细胞癌、子宫内膜癌、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、肾上腺皮质癌、皮肤癌和前列腺癌。
本发明也包括用于治疗或预防因Wee1活性异常而引起的其他疾病，例如神经病学或神经精神疾病或病症，例如抑郁症患者。
在实施本发明治疗方法时，给有一种或多种这些症状的病人施用有效量的药物制剂。所述药物制剂含有有效治疗浓度的式I、式II或式III化合物，被配制成用于口服、静脉注射、局部或外用给药的形式，用于治疗癌症和其他疾病。给药量是有效地改善或消除一个或多个病症的药量。对于特定疾病的治疗，有效量是足以改善或以某些方式减轻与疾病有关的症状的药量。这样的药量可作为单一剂量施用，或者可依据有效的治疗方案给药。给药量也许可治愈疾病，但是给药通常是为了改善疾病的症状。一般需要反复给药来实现所需的症状改善。
在另一个实施方案中提供了一种药用组合物，其中含有Wee1抑制剂的式I、式II或式III化合物或其可药用盐与可药用载体。
本发明另一个实施方案涉及能有效地治疗癌症的药用组合物，其中包含Wee1激酶抑制剂的式I、式II或式III化合物，或其可药用盐或前药，与至少一种已知的抗癌药物或抗癌药物的可药用盐联合共用。特别是和其他与DNA损伤和修复机理有关的抗癌药物的联合共用，包括PARP抑制剂奥拉帕尼、Niraparib、Rucaparib和Talazoparib；HDAC抑制剂伏立诺他、罗咪地辛、帕比司他和贝利司他；等等。以及和其他与细胞分裂检测点有关的抗癌药物的联合共用，包括Chk1/2抑制剂，CDK4/6抑制剂如帕博西尼，ATM/ATR抑制剂等等。其他可用于抗癌联合治疗的已知抗癌药物包括但不限于烷化剂例如白消安、马法兰、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、苯达莫司汀、顺铂、丝裂霉素C、博莱霉素和卡铂；拓扑异构酶Ⅰ抑制剂例如喜树碱、伊立替康和托泊替康；拓扑异构酶Ⅱ抑制剂例如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、米托蒽醌、甲基羟基玫瑰树碱和铭托泊普；RNA/DNA抗代谢物例如5-氮杂胞苷、吉西他滨、5-氟尿嘧啶和甲氨蝶呤；DNA抗代谢物例如5-氟-2′-去氧尿苷、氟达拉滨，奈拉滨、阿糖胞苷、普拉曲沙、培美曲塞、羟基脲和硫代鸟嘌呤；抗有丝分裂剂例如秋水仙碱、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇，伊沙匹隆、卡巴他赛和多西他赛；抗体例如单抗，帕尼单抗、耐措妥珠单抗、纳武单抗、派姆单抗、雷莫芦单抗、贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、利妥昔单抗、阿仑单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗、本妥昔单抗、达雷木单抗、埃罗妥珠单抗、T-DM1、Ofatumumab、Dinutuximab、Blinatumomab、易普利姆玛、阿瓦斯丁、赫赛汀和美罗华；激酶抑制剂例如伊马替尼、吉非替尼、厄洛替尼、奥斯替尼、阿法替尼、赛立替尼、艾乐替尼、克唑替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉非尼、瑞格非尼、维罗非尼、达拉非尼、阿柏西普、舒尼替尼、尼罗替尼、达沙替尼、博舒替尼、普拉替尼、依鲁替尼、卡博替尼、乐伐替尼、凡德他尼、曲美替尼、卡比替尼、阿昔替尼、替西罗莫司、Idelalisib、帕唑帕尼、特癌适和依维莫司。其他可用于抗癌组合治疗的已知抗癌药物包括他莫昔芬、来曲唑、氟维司群、米托胍腙、奥曲肽、视黄酸、砒霜、唑来膦酸、硼替佐米、卡非佐米、Ixazomib、维莫德吉、索尼德吉、狄诺塞麦、萨力多胺、来那度胺、Venetoclax、Aldesleukin(重组人白介素-2)和Sipueucel-T(前列腺癌治疗疫苗)。
在实施本发明的方法时，本发明化合物与至少一种已知的抗癌药物可作为单一的药用组合物一起给药。另外，本发明化合物也可与至少一种已知抗癌药分开给药。在一个实施方案，本发明化合物和至少一种已知的抗癌药差不多同时给药，即所有的药物同时施用或陆续施用，只要化合物在血液中同时达到治疗浓度即可。在另外一个实施方案，本发明的化合物和至少一种已知的抗癌药根据各自的剂量方案给药，只要化合物在血液中达到治疗浓度即可。
本发明的另一个实施方案，是一种由所述化合物组成的能有效的抑制肿瘤的，作为Wee1抑制剂的生物耦合物。这个能抑制肿瘤的生物耦合物由所述化合物与至少一种已知的有医疗作用的抗体，如赫赛汀或美罗华，或生长素，如DGF或NGF，或细胞激素，如白细胞介素2或4，或任意能与细胞表面结合的分子组成。该抗体与其他分子能把所述化合物递送到其靶点，使之成为有效的抗癌药物。此生物耦合物也可以提高有医疗作用的抗体，如赫赛汀或美罗华的抗癌效果。
本发明的另一实施例涉及一种能有效的抑制肿瘤的药用组合物，包含式I、式II或式III所示的Wee1抑制剂，或其可用药盐或前药，与放射疗法联合治疗。在此实施例，本发明化合物与放射治疗可在相同时间或不同时间给药。
本发明的另一实施例涉及一种能有效的用于癌症手术后治疗的药用组合物，包含式I、式II或式III所示的Wee1抑制剂，或其可用药盐或前药。本发明还涉及用手术切除肿瘤，然后用本发明的药用组合物治疗该哺乳动物的癌症的治疗方法。
本发明的药用组合物包括所有本发明化合物的含有量能有效地实现其预期目标的药品制剂。虽然每个人的需求各不相同，本领域技术人员可确定药品制剂中每个部分的最佳剂量。一般情况下，所述化合物，或其可用药盐，对哺乳动物每天口服给药，药量按照约0.0025到50毫克/公斤体重。但最好是每公斤口服给药约0.01到10毫克/公斤。如果也施用一个已知的抗癌药物，其剂量应可有效地实现其预期的目的。这些已知的抗癌药物的最佳剂量是本领域技术人员所熟知的。
单位口服剂量可以包括约0.01到50毫克，最好是约0.1到10毫克的本发明化合物。单位剂量可给予一次或多次，每天为一片或多片，每片含有约0.1到50毫克，合宜地约0.25到10毫克的本发明化合物或其溶剂化物。
在外用制剂中，本发明化合物的浓度可以是每克载体约0.01到100毫克。
本发明化合物可作为未加工药品给药。本发明化合物也可以作为含有可药用载体(包括辅料和助剂)的一个合适的药物制剂的一部分给药。这些可药用载体有利于把化合物加工成可药用的药物制剂。优选的药物制剂，特别是那些口服的和优选的给药方式类型，如片剂，锭剂和胶囊，以及适合于注射或口服的溶液，包含约0.01％到99％，最好从约0.25％到75％的活性化合物以及辅料。
本发明的范围也包括本发明化合物的无毒性可药用盐。酸加成盐由混合一个无毒性可药用酸溶液和本发明的化合物溶液而形成。所述酸例如盐酸，富马酸，马来酸，琥珀酸，乙酸，柠檬酸，酒石酸，碳酸，磷酸，草酸等。碱加成盐由混合一个无毒性可药用碱溶液和本发明的化合物溶液而形成。所述碱例如氢氧化钠，氢氧化钾，氢胆碱，碳酸钠，三羟甲基氨基甲烷，N-甲基-葡萄糖胺等。
本发明的药物制剂可以给予任何哺乳动物，只要他们能获得本发明化合物的治疗效果。在这些哺乳动物中最为重要的是人类和兽医动物，虽然本发明不打算如此受限。
本发明的药物制剂可通过任何途径给药以达到其预期目的。例如，可以通过肠外，皮下，静脉，肌肉，腹腔内，透皮，口腔，鞘内，颅内，鼻腔或外用途径给药。作为替代或并行地，可以通过口服给药。药的剂量将根据病人的年龄，健康与体重，并行治疗的种类，治疗的频率，以及所需治疗效益来决定。
本发明的药物制剂可用已知的方式制造。例如，由传统的混合，制粒，制锭，溶解，或冷冻干燥过程制造。制造口服制剂时，可结合固体辅料和活性化合物，选择性研磨混合物。如果需要或必要时加入适量助剂后，加工颗粒混合物，获得片剂或锭剂芯。
合适的辅料特别是填料，例如糖类如乳糖或蔗糖，甘露醇或山梨醇；纤维素制剂和/或钙磷酸盐，例如磷酸三钙或磷酸氢钙；以及粘结剂，例如淀粉糊，包括玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄芪胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，可增加崩解剂，比如上面提到的淀粉，以及羧甲基淀粉，交联聚乙烯吡咯烷酮，琼脂，或褐藻酸或其盐，如海藻酸钠。辅助剂特别是流动调节剂和润滑剂，例如，硅石，滑石，硬脂酸或其盐，如硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇。如果需要，可以给锭剂核芯提供可以抵抗胃液的合适包衣。为此，可以应用浓缩糖类溶液。这个溶液可以含有阿拉伯树胶，滑石，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙二醇和/或二氧化钛，漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。为了制备耐胃液的包衣，可使用适当的纤维素溶液，例如醋酸纤维素邻苯二甲酸或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸。可向药片或锭剂核芯的包衣加入染料或色素。例如，用于识别或为了表征活性成分剂量的组合。
其他可口服的药物制剂包括明胶制成的压接式胶囊，以及用明胶和甘油或山梨醇等增塑剂制成的密封软胶囊。该压接式胶囊可含有颗粒形式的活性化合物，与填料例如乳糖；粘结剂例如淀粉；和/或润滑剂例如滑石粉或硬脂酸镁，以及稳定剂混合而成。在软胶囊，活性化合物最好是溶解或悬浮在适当的液体例如油脂或液体石蜡中，其中可加入稳定剂。
合适于肠外给药的制剂包括活性化合物的水溶液，如水溶性盐的溶液和碱性溶液。此外，可施用适当的活性化合物的油性注射悬浮液。合适的亲脂性溶剂或载体包括油脂例如香油，合成脂肪酸酯例如油酸乙酯或甘油三酯或聚乙二醇400，或氢化蓖麻油，或环糊精。水性注射悬浮液可含有增加悬浮液黏度的物质，例如羧甲基纤维素钠，山梨醇，和/或葡聚糖。也可以含有悬浮稳定剂。
按照本发明的一个方面，本发明的化合物采用外用和肠外配方，并用于治疗皮肤癌。
本发明的外用制剂可通过优选合适的载体来制成油剂，霜剂，乳液剂，药膏等。合适的载体包括植物或矿物油，白矿油(白软石蜡)，支链脂肪或油脂，动物脂肪和高分子醇(大于C12)。优选的载体是活性成分能溶解在其中的那些载体。也可包括乳化剂，稳定剂，保湿剂和抗氧化剂，以及如果需要的话，给予颜色或香味的试剂。此外，这些外用制剂可包含透皮渗透增强剂。这种增强剂的例子可参见美国专利号3，989，816和4，444，762。
霜剂优选用矿物油，自乳化蜂蜡和水的混合物配制，与溶解于少量油例如杏仁油的活性成分混合而成。一个典型的霜剂例子包括约40份水，20份蜂蜡，40份矿物油和1份杏仁油。
药膏可以这样配制，将含有活性成分的植物油例如杏仁油和温热的软石蜡混合，然后使该混合物冷却。一个典型的药膏例子包括约30％重量的杏仁油和70％重量的白软石蜡。
本发明也涉及应用本发明的化合物制备治疗对抑制Wee1活性有效果的临床病症的药物。这些药物可包括上述药用组合物。
下列实施例是举例说明，而不是限制本发明的方法和制剂。其他对于本领域技术人员来说是显而易见的，和在临床治疗中通常会遇到的对各种条件和参数的适当修改和改进，都在本发明的精神和范围内。
实施例
一般性说明
所用试剂均是商品品质，溶剂均按照标准方法干燥纯化。使用电喷雾的单四级杆质谱仪(平台Ⅱ，安捷伦6110)分析质谱样品。使用Brücker Ascend 400核磁仪在400MHz记录1HNMR光谱，化学位移记录为以TMS作为内标(0.00ppm)从低场始以ppm为单位，耦合常数J值以Hz为单位。
实施例1
6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
a)(2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯：在0℃下，将邻氯苯异氰酸酯(500mg，3.26mmol)缓慢加入到N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺(1.56g，9.76mmol)的乙醚(20mL)溶液中。反应液在室温下搅拌3小时后，过滤，滤饼用少量乙醚洗涤，抽干后得到目标化合物(2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(622mg，62％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)314.37/316.35。
b)1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲(盐酸盐)：将(2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(622mg，1.98mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入盐酸二氧六环溶液(4N，20mL)。反应液在室温下搅拌4小时后，减压除去溶剂，得到目标化合物1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲(盐酸盐)(470mg，95％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)214.42/216.45。
c)4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯：将1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲(盐酸盐)(200mg，0.8mmol)，4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(284mg，1.22mmol)和二异丙基乙基胺(485mg，3.75mmol)混合于乙腈(8mL)中。氮气保护，在80℃下搅拌反应3小时后冷却至室温，抽滤，滤饼用少量甲醇洗涤，固体抽干后得到目标化合物4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(270mg，82％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)410.33/412.31。
d)6-(2-氯苯基)-2-(甲硫基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：将4-((2-(3-(2-氯苯基)脲基)乙基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(200mg，0.49mmol)溶解于三氯氧磷(8mL)中，加热至110℃下反应过夜。减压除去溶剂后加入乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。柱层析分离纯化(硅胶，石油醚:乙酸乙酯＝1:1为洗脱剂)，得到目标化合物6-(2-氯苯基)-2-(甲硫基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(92mg，54％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)346.37/348.30。
e)6-(2-氯苯基)-2-(甲磺酰基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：将6-(2-氯苯基)-2-(甲硫基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(92mg，0.27mmol)溶于氯仿(10mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(80％，122mg，0.56mmol)。反应液在室温下搅拌4小时后，加入饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取分液。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。柱层析分离纯化(硅胶，二氯甲烷:甲醇＝20:1为洗脱剂)，得到目标化合物(54mg，53％收率，浅黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)378.31/380.25。
f)6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：将6-(2-氯苯基)-2-(甲磺酰基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(54mg，0.14mmol)和4-(4-甲基哌嗪)苯胺(27mg，0.14mmol)混合于异丙醇(2mL)中。反应液在80℃下搅拌1小时后，减压除去溶剂得到粗产物。用制备液相色谱(C18柱，0-100％乙腈/水为流动相)分离纯化，得到目标化合物(12mg，18％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)489.39/491.39。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.61(s,1H),8.24–8.13(m,2H),7.69–7.62(m,2H),7.53–7.45(m,3H),6.96–6.88(m,2H),4.17–4.07(m,2H),3.78(t,J＝8.8Hz,2H),3.13–3.07(m,4H),2.48–2.42(m,4H),2.23(s,3H)。
实施例2
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
应用类似于所描述的实施例1的合成方法制得，起始原料为1-氯-3-氟-2-异氰酸苯酯、N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和4-(4-甲基哌嗪)苯胺，纯化后得到目标化合物6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(58mg，38％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)507.36/509.37。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.64(s,1H),8.17–8.16(m,1H),7.74–7.51(m,4H),7.48–7.43(m,1H),6.92(d,J＝8.9Hz,2H),4.19–4.11(m,2H),3.84–3.77(m,2H),3.15–3.05(m,4H),2.49–2.45(m,4H),2.24(d,J＝5.7Hz,3H)。
实施例3
4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮
a)8-氯-4-(2-氯苯基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮：依次应用类似于所描述的实施例1c和1d的合成方法制得，起始原料为1-(2-氨基乙基)-3-(2-氯苯基)脲(盐酸盐)和4,6-二氯烟酸甲酯，纯化后得到目标化合物8-氯-4-(2-氯苯基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮(173mg，66％收率，浅黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)333.26/335.28。
b)4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮：将8-氯-4-(2-氯苯基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮(120mg，0.36mmol)，4-(4-甲基哌嗪)苯胺(83mg，0.43mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(33mg，0.036mmol)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(34mg，0.072mmol)和磷酸钾(229mg，1.08mmol)混合于叔丁醇(4mL)和水(1mL)中。反应液在氮气保护下在80℃下搅拌过夜后，减压除去溶剂得到粗产物，用制备液相色谱(C18柱，0-100％乙腈/水为流动相)分离纯化，得到目标化合物4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1,2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮(55mg，31％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)488.40/490.38。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.37(s,1H),8.49(s,1H),7.64–7.59(m,1H),7.51–7.37(m,5H),6.96–6.88(m,2H),5.95(s,1H),4.01–3.89(m,2H),3.80–3.72(m,2H),3.12–3.06(m,4H),2.48–2.43(m,4H),2.23(s,3H)。
实施例4
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
a)2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：应用类似于所描述的实施例1a-1e的合成方法制得，起始原料为N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和1,3-二氯异氰酸苯酯。
b)6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：室温下将2-(甲磺酰基)-6-(2,6-二氯苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(40mg，0.1mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(30mg，0.15mmol)溶于乙腈(1mL)中，加入三氟乙酸(0.2mL)。反应液在室温下搅拌过夜后，减压浓缩得到粗产物，用制备液相色谱(C18柱，0-100％乙腈/水为流动相)分离纯化，得到目标化合物(18mg，36％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z(M/2+1)263.16。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.27(s,1H),8.65(s,1H),7.75–7.59(m,3H),7.61–7.41(m,2H),6.93(d,J＝8.9Hz,2H),4.23–4.08(m,2H),3.87–3.75(m,2H),3.19–2.99(m,4H),2.49–2.45(m,4H),2.24(s,3H)。
应用类似于所描述的实施例1的合成方法制得下述实施例6－8的化合物，起始原料为2-(甲磺酰基)-6-(2-氯-6-氟苯基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(应用类似于实施例1a-1e的合成方法制得，起始原料为N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和1-氯-3-氟-2-异氰酸苯酯)和相应的取代苯胺或取代四氢异喹啉胺。
应用类似于所描述的实施例4b的合成方法可制得下述实施例5、9—26的化合物，起始原料为2-(甲(亚)磺酰基)-6-取代基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(应用类似于实施例1a-1e的合成方法制得，起始原料为N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和相应的取代异氰酸苯酯)和相应的取代胺。
应用类似于所描述的实施例1a-e和4b的合成方法制得实施例27和28的化合物，起始原料为1-氯-3-氟-2-异氰酸苯酯、(1-氨基-2-甲基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯或2-氨基-2-甲基丙基氨基甲酸叔丁酯、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和4-(4-甲基哌嗪)苯胺。
实施例27
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,8-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
白色固体(60mg，63％收率)。LC-MS(ESI):m/z(M/M+2)535.28/537.28。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.25(br s,1H),8.64(s,1H),7.76-7.59(m,2H),7.58–7.49(m,2H),7.49–7.42(m,1H),6.94(d,J＝8.5Hz,2H),3.93–3.81(m,2H),3.10(t,J＝4.6Hz,4H),2.45(t,J＝4.8Hz,4H),2.22(s,3H),1.23(d,J＝4.4Hz,6H)。
实施例28
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-9,9-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
黄色固体(10mg，19％收率)。LC-MS(ESI):(M/M+2)535.24/537.24。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.17(br s,1H),8.66(s,1H),7.60–7.42(m,5H),6.94(d,J＝8.9Hz,2H),3.55(s,2H),3.11(t,J＝4.8Hz,4H),2.47(t,J＝4.8Hz,4H),2.23(s,3H),1.76–1.57(m,6H)。
实施例29
2-甲磺酰基-6-(嘧啶-2-基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮
a)(4-硝基苯基-嘧啶-2-基)氨基甲酸酯：将2-氨基嘧啶(1g，10.5mmol)溶于无水二氯甲烷(30mL)中，加入吡啶(1.66mL，21mmol)。在0℃下，滴入对硝基苯基氯甲酸酯(2.1g，10.5mmol)的无水二氯甲烷(15mL)溶液。滴加完毕后，反应液在0℃下搅拌反应10min，抽滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，干燥得到目标化合物(1.6g，60％收率，白色固体)。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+261.08。
b)(2-(3-(嘧啶-2-基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯：将(4-硝基苯基-嘧啶-2-基)氨基甲酸酯(1g，3.8mmol)和(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.85g，11.5mmol)加入到无水四氢呋喃(30mL)中，反应混合物在微波反应器中80℃反应1h。冷却至室温，减压浓缩得到粗产物。柱层析分离纯化(硅胶，二氯甲烷:甲醇＝10:1为洗脱剂)，得到目标化合物(760mg，70％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+282.21。
c)2-甲磺酰基-6-(嘧啶-2-基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮：应用类似于实施例1b-1e的合成方法制得，起始原料为(2-(3-(嘧啶-2-基)脲基)乙基)氨基甲酸叔丁酯和4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯，纯化后得到浅黄色固体。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+346.11。
实施例30
2-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯胺
a)(2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-(3-氟-4-硝基苯基)哌嗪：室温下，将(2S,6R)-1,2,6-三甲基哌嗪(403mg，3.14mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入N,N-二异丙基乙基胺(0.82mL，4.71mmol)和2,4-二氟硝基苯(500mg，3.14mmol)。反应液在80℃下搅拌反应3h后，冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL)与水(20mL)萃取分液。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。柱层析分离纯化(硅胶，二氯甲烷:甲醇＝20:1为洗脱剂)得到目标化合物(268mg，32％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+268.21。
b)2-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯胺：室温下，向溶有(2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-(3-氟-4-硝基苯基)哌嗪(268mg，1.0mmol)的乙酸乙酯(15mL)溶液中加入10％钯/碳(30mg)。反应液用氢气置换三次，室温氢化过夜后，抽滤除去钯/碳，滤液减压浓缩得到目标化合物(230mg，96％收率，黄色固体)。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+238.32。
实施例31
2-氯-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯胺
室温下，向溶有(2S,6R)-1,2,6-三甲基-4-(3-氯-4-硝基苯基)哌嗪(应用类似于实施例30a的合成方法制得，起始原料为(2S,6R)-1,2,6-三甲基哌嗪和2-氯-4-氟-1-硝基苯。200mg，0.71mmol)的乙醇/水(10/2.5mL)溶液中加铁粉(185mg，3.31mmol)和氯化铵(188mg，3.52mmol)。反应液用氮气置换三次，50℃下搅拌反应4h后冷却至室温，抽滤除去铁粉，滤液减压浓缩。粗产物溶于乙酸乙酯(20mL)和水(10mL)，分液，有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。柱层析分离纯化(硅胶，二氯甲烷:甲醇＝15:1为洗脱剂)得到目标化合物(160mg，89％收率，黄色油状物)。LC-MS(ESI):m/z[M+H]+254.24。
其它的取代胺可应用类似于上述实施例30或实施例31的合成方法制得，或者由本领域技术人员按已知方法合成制得。
应用类似于所描述的实施例1的合成方法制得下述实施例32－33、36、54－56和85－87的化合物，起始原料为2-(甲磺酰基)-6-取代基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(应用类似于实施例1a-1e的合成方法制得，起始原料为N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和相应的取代异氰酸苯酯)和相应的取代苯胺。
应用类似于所描述的实施例4b的合成方法制得下述实施例34－35、37－53、57－84和88－92的化合物，起始原料为2-(甲(亚)磺酰基)-6-取代基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(应用类似于实施例1a-1e的合成方法制得，起始原料为N-叔丁氧羰基-1,2-乙二胺、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯和相应的取代异氰酸苯酯；实施例29)和相应的取代胺。
实施例93
应用Wee1激酶(人源)检测法测定6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对Wee1激酶的酶活性的抑制效应
在含20mM Tris/HCl pH 8.5，0.2mM EDTA，500μM LSNLYHQGKFLQTFCGSPLYRRR，10mM醋酸镁和10μM[γ-33P]-ATP的反应液中加入Wee1激酶(人源)孵育，而后加入50倍浓度的溶于100％DMSO中的待测化合物储液至终浓度10/1/0.1/0.01μM，混匀。加入Mg/ATP混合物启动反应，在室温下孵育40分钟后，加入磷酸溶液至终浓度0.5％淬灭反应。取10μL反应液滴到P30滤纸上用0.425％磷酸溶液洗4次之后用甲醇洗1次，干燥，液闪计数。每个化合物样品一式二份重复。实验阴性对照为缺少Wee1酶的所有组成部分，阳性为加入30％磷酸终止反应。在相同实验条件下对Wee1抑制剂AZD1775在10μM下进行了检测。表1汇总了化合物的Wee1激酶抑制数据(计数和活性)。
表1. 6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对Wee1激酶活性的抑制效应
因此，经Wee1激酶(人源)检测法测定，6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例1)与其相似物对Wee1激酶酶活性有好的抑制效应。其中10μM的实施例1和实施例2化合物对Wee1激酶的酶活性的抑制分别为96％和95％，活性与参考化合物AZD1775相似。实施例4在0.01μM时对Wee1激酶酶活性的抑制率达51％，显示实施例4对Wee1激酶有很高的抑制活性。
实施例94
对Wee1离解常数(Kd)的测定
测量化合物对Wee1亲和力的离解常数(Kd)是在DiscoveRx公司的KINOMEscanTMKdELECT平台上测定的。KINOMEscanTM实验是基于竞争性结合实验，通过qPCR精确测量通过和固定的配体竞争后结合在酶活性中心的化合物来计算其对Wee1的亲和性指标Kd的。
Wee 1激酶标记的T7噬菌体是用大肠杆菌BL21菌株制备的。生长期大肠杆菌(指数生长期)感染T7噬菌体后在32℃下振动孵育直到细胞溶解。将溶菌产物离心，过滤除去细胞碎片。部分序列的人Wee1(对应参考序列NP_003381.1的氨基酸M291到K575)表达在T7噬菌体外壳上。一条短的DNA序列嵌入到T7噬菌体基因组内做为扩增子通过qPCR进行放大检测。
链霉亲和素包裹的磁珠(Dynal M280)与生物素标记的小分子配体在室温下反应30分钟作为用于结合试验的亲和树脂。结合配体的树脂用过量生物素封闭，用封闭缓冲液(SeaBlock(Pierce),1％BSA,0.05％Tween 20,1mM DTT)充分洗涤以去除未结合的配体来减少非特异性结合。
结合反应是将16μl噬菌体裂解物，3.8μl结合配体的树脂，和0.18μl待测化合物(PBS/0.05％Tween 20/10mM DTT/0.1％BSA/2μg/ml超声波降解的鲑鱼精液DNA)混合。待测化合物在100％DMSO中配制成111x的贮存溶液。Kd值由11个3倍系列稀释浓度的化合物和三个DMSO空白液来计算。所测化合物最高浓度为100,000nM，DMSO的终浓度为0.9％。所有反应在384孔的聚丙烯检测板中进行，每孔终体积为0.02mL。在室温下振动孵育1h，然后将树脂集中，用缓冲液(1x PBS,0.05％Tween 20)洗涤，除去被取代的激酶和待测化合物。洗涤后的树脂被重新悬浮在洗脱缓冲液(1x PBS,0.05％Tween 20,0.5μM无生物素标记的亲和配体)中，在室温下振动孵育30分钟。洗脱液中的激酶浓度通过qPCR检测。qPCR反应是将2.5μL含激酶的洗脱液加入到7.5μL含有0.15μM扩增子引物和0.15μM扩增子检测探针的qPCR反应液中。qPCR方案包含在95℃下的10分钟热启动，然后15秒95℃及1分钟60℃的35轮放大。实验中每个浓度重复两次。
每个化合物的Kd值用标准的剂量-响应曲线计算的Hill方程计算：响应＝背景+(信号-背景)/(1+(Kd Hill斜率/剂量Hill斜率))。其中，Hill斜率设置为-1，曲线用非线性最小二乘方与Levenberg Marquardt算法拟合(Levenberg,K.,Q.Appl.Math.2,164-168(1944))。
计算出的Kd值显示了6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对Wee1激酶酶活性的抑制效应，汇总在表2中。
表2. 6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对Wee1激酶酶活性的抑制效应(Kd值)
实施例 1 2
Kd(nM) 250 34
因此，经Kd的测定，6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例1)与其相似物对Wee1激酶酶活性有好的抑制效应。
实施例95
应用MTT检测法测定6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对LoVo细胞增长的抑制作用
将新复苏的LoVo细胞培养传代至第三代后，且生长状态良好、融合度90％左右，开始用于实验。用胰酶消化LoVo细胞，800rpm离心5min，弃上清，用新鲜培基重悬，并计数，以6000个细胞每孔密度接种至96孔细胞培养板，置于37℃5％CO2培养箱培养过夜。受试物(包括待测化合物和参考化合物AZD1775)母液用DMSO按1:3和1:10比例分别进行连续系列稀释至8个浓度(最后一个浓度为DMSO阴性对照)：10μM，3.3μM，1μM，0.33μM，0.1μM，0.033μM，0.01μM，0μM(DMSO终浓度为1‰)。每个浓度取5μL加入到120μL培基(25倍稀释)，振荡混匀。取培养过夜的细胞，除去培养基，每孔加入195μL新鲜培基，再分别加入5μL稀释好的含相应浓度受试物的培基，随后将培养板置于37℃5％CO2培养箱培养3d。除去原液，每孔加100μL含MTT(0.5mg/mL)的新鲜无血清DMEM培基后，继续培养。4h后除去原液，每孔加入100μL DMSO，避光震荡10min，置于多功能读数仪读取552/630/690nm波长的吸光值(OD值)。用软件GraphPad Prism 5.0分析数据，化合物对细胞增值的抑制活性以细胞存活率和化合物浓度为坐标绘图。IC50值以S形剂量反应曲线方程拟合，曲线方程为：Y＝100/(1+10^(LogC-LogIC50))，其中C是化合物浓度。
表3汇总了化合物对LoVo细胞增长的抑制作用数据(IC50)。
表3. 6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对LoVo细胞增长的抑制作用
因此，经MTT检测法测定，6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例1)与其相似物对LoVo细胞增长有抑制作用。其中多个实施例，例如实施例75，对LoVo细胞增长的抑制作用比AZD1775强。
实施例96
应用MTT检测法测定6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对NCI-H1299细胞增长的抑制作用
将新复苏的NCI-H1299细胞培养传代至第三代后，且生长状态良好、融合度90％左右，开始用于实验。用胰酶消化NCI-H1299细胞，800rpm离心5min，弃上清，用新鲜培基重悬，并计数，以1000个细胞每孔密度接种至96孔细胞培养板，置于37℃5％CO2培养箱培养过夜。受试物(包括待测化合物和参考化合物AZD1775)母液用DMSO按1:3和1:10比例分别进行连续系列稀释至8个浓度(最后一个浓度为DMSO阴性对照)：10μM，3.3μM，1μM，0.33μM，0.1μM，0.033μM，0.01μM，0μM(DMSO终浓度为1‰)。每个浓度取5μL加入到120μL培基(25倍稀释)，振荡混匀。取培养过夜的细胞，除去培养基，每孔加入195μL新鲜培基，再分别加入5μL稀释好的含相应浓度受试物的培基，随后将培养板置于37℃5％CO2培养箱培养3d。除去原液，每孔加100μL含MTT(0.5mg/mL)的新鲜无血清DMEM培基后，继续培养。4h后除去原液，每孔加入100μL DMSO，避光震荡10min，置于多功能读数仪读取552/630/690nm波长的吸光值(OD值)。用软件Graph Pad Prism 5.0分析数据，化合物对细胞增值的抑制活性以细胞存活率和化合物浓度为坐标绘图。IC50值以S形剂量反应曲线方程拟合，曲线方程为：Y＝100/(1+10^(LogC-LogIC50))，其中C是化合物浓度。
表4汇总了化合物对NCI-H1299细胞增长的抑制作用数据(IC50)。
表4. 6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮与其相似物对NCI-H1299细胞增长的抑制作用
因此，经MTT检测法测定，6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮(实施例1)与其相似物对NCI H1299细胞增长有抑制作用。其中多个实施例，例如实施例75，对NCI H1299细胞增长的抑制作用比AZD1775强。
虽然已经充分地描述了本发明，但是本领域技术人员应当理解，可在不影响本发明范围或其任何实施方案的情况下，在广泛且等同的条件、制剂和其它参数范围内进行相同实施。本文所引用的所有专利、专利申请和出版物都全文引入本文以供参考。

Claims (10)

1.式I的化合物，或其可药用盐或前药：
其中，A是N或C；
R1为可被取代的C1-8烷基，可被取代的C2-8烯基，可被取代的C3-8环烷基，可被取代的芳基，或可被取代的杂芳基；
R2为可被取代的杂环基，可被取代的芳基，或可被取代的杂芳基；
R3-R7独立为氢、卤素、可被取代的氨基、可被取代的烷氧基、可被取代的C1-10烷基、卤烷基、烯基、炔基、羟基烷基、胺基烷基、羧基烷基、硝基、氰基、酰胺基、羟基、巯基、酰氧基、叠氮基、羧基、亚乙基二氧基，羟基酰胺基或可被取代的烷硫基。
2.权利要求1的化合物，其中A为N，R1和R2为可被取代的芳基，R3-R7为氢。
3.权利要求1的化合物，其中为式II的化合物，或其可药用盐或前药:
其中，R3-R7独立为氢、卤素、可被取代的氨基、可被取代的烷氧基、可被取代的C1-10烷基、卤烷基、烯基、炔基、羟基烷基、胺基烷基、羧基烷基、硝基、氰基、酰胺基、羟基、巯基、酰氧基、叠氮基、羧基、亚乙基二氧基，羟基酰胺基或可被取代的烷硫基；
Ar1和Ar2为可被取代的芳基或可被取代的杂芳基。
4.权利要求3的化合物，其中R3-R7为氢，Ar1和Ar2为可被取代的苯基。
5.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自：
6-(2-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
4-(2-氯苯基)-8-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1，2-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-5(4H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-乙酰基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((2'-甲基-2',3'-二氢-1'H-螺(环丙烷-1,4'-异喹啉)-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-异丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-叔丁基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-环丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-环己基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-烯丙基-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(噻吩-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(呋喃-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(1H-吡咯-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(1H-咪唑-5-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,8-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-9,9-二甲基-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啡啉)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(吗啉基甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-氯-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-三氟甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2-甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氟-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-氯-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-三氟甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲基-4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-3-甲基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)-3-硝基苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((3,5-二甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((2'-异丙基-2',3'-二氢-1'H-螺[环丙烷-1,4'-异喹啉]-7'-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-氟苯基)-2-((5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氟苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氟-6-三氟甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氟-6-甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-氟-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-氯-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((2-三氟甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氟-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-氯-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((4-(4甲基哌嗪-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-三氟甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-((3S,5R)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((3-甲基-4-((3S,5R)-4-异丙基-3,5-二甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二氯苯基)-2-((5-甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-三氟甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-((3-甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,6-二甲基苯基)-2-((4-((3R,5S)-3,4,5-三甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(4-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(3-氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,4-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-4-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2-氯-3-氟苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,5-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(2,3-二氯苯基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
6-(嘧啶-2-基)-2-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-8,9-二氢咪唑并[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮；
或其可药用盐或前药。
6.权利要求1～5中任一项所述的化合物在制备治疗或预防Wee1介导的疾病的药物中的用途。
7.权利要求6的用途，其中所述疾病是癌症；优选地，所述癌症选自肝癌、黑素瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴白血病、慢性淋巴白血病、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈癌、睾丸癌、软组织肉瘤、慢性淋巴细胞白血病、原发性巨球蛋白血症、膀胱癌、慢性粒细胞白血病、原发性脑癌、恶性黑素瘤、小细胞肺癌、胃癌、结肠癌、恶性胰腺胰岛瘤、恶性类癌性癌症、恶性黑素瘤、绒毛膜癌、蕈樣肉芽腫、头颈癌、骨原性肉瘤、胰腺癌、急性粒细胞白血病、毛细胞白血病、横纹肌肉瘤、卡波西肉瘤、泌尿生殖系统肿瘤、甲状腺癌、食管癌、恶性高钙血症、子宫颈增生症、肾细胞癌、子宫内膜癌、真性红细胞增多症、特发性血小板增多症、肾上腺皮质癌、皮肤癌和前列腺癌。
8.一种药用组合物，包括权利要求1～5中任一项所述的化合物与可药用载体。
9.权利要求8的药用组合物，其中所述组合物还含有至少一种已知的抗癌药物，或所述抗癌药物的可药用盐。
10.权利要求8或9的药用组合物，其中，所述组合物还含有至少一种选自下组的抗癌药物：白消安、马法兰、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、替莫唑胺、苯达莫司汀、顺铂、丝裂霉素C、博莱霉素、卡铂、喜树碱、伊立替康、托泊替康、阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、米托蒽醌、甲基羟基玫瑰树碱、铭托泊普、5-氮杂胞苷、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、5-氟-2'-去氧尿苷、氟达拉滨、奈拉滨、阿糖胞苷、普拉曲沙、培美曲塞、羟基脲、硫代鸟嘌呤、秋水仙碱、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇、伊沙匹隆、卡巴他赛、多西他赛、单抗、帕尼单抗、耐措妥珠单抗、纳武单抗、派姆单抗、雷莫芦单抗、贝伐珠单抗、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、利妥昔单抗、阿仑单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗、本 妥昔单抗、达雷木单抗、埃罗妥珠单抗、T-DM1、Ofatumumab、Dinutuximab、Blinatumomab、易普利姆玛、阿瓦斯丁、赫赛汀、美罗华、伊马替尼、吉非替尼、厄洛替尼、奥斯替尼、阿法替尼、赛立替尼、艾乐替尼、克唑替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉非尼、舒尼替尼、尼罗替尼、达沙替尼、帕唑帕尼、特癌适、依维莫司、伏立诺他、罗咪地辛、帕比司他、贝利司他、他莫昔芬、来曲唑、氟维司群、米托胍腙、奥曲肽、视黄酸、砒霜、唑来膦酸、硼替佐米、卡非佐米、Ixazomib、维莫德吉、索尼德吉、狄诺塞麦、萨力多胺、来那度胺、Venetoclax、Aldesleukin(重组人白介素-2)、Sipueucel-T(前列腺癌治疗疫苗)、帕博西尼、奥拉帕尼、Niraparib，Rucaparib和Talazoparib。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110141664A (zh) * 2019-05-28 2019-08-20 宁波市鄞州人民医院 一种治疗急性髓系白血病的药物组合物
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CN114072411A (zh) * 2019-09-03 2022-02-18 微境生物医药科技(上海)有限公司 作为Wee1抑制剂的嘧啶衍生物
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