CN109010440A - 一种莲子心提取液的纯化除杂方法 - Google Patents

一种莲子心提取液的纯化除杂方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：1)取莲子心适量，用乙醇水溶液提取，将提取液过滤，滤液回收乙醇，加纯化水适量制成药液提取液；2)取壳聚糖适量配置成壳聚糖澄清剂；3)往药液提取液中加入壳聚糖澄清剂适量，纯化除杂，过滤，得到澄清液；4）将澄清液进一步纯化，分离出生物碱类物质，用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量从而计算该有效成分的保留率。当莲子心药液提取液比为1：5，壳聚糖加入量为1.4g/ml，作用温度为60℃，PH值为6.0的工艺条件时，甲基莲心碱保留率最大。本发明工艺简单，步骤简便，便于操作；且不涉及有毒有机溶剂的使用，对环境和人体无危害，无溶剂残留，适合大规模工业生产。

Description

一种莲子心提取液的纯化除杂方法
技术领域
本发明属于中药提取纯化技术领域，具体涉及一种莲子心提取液的纯化除杂方法。
背景技术
莲子心（Plumula Nelumubinis）为睡莲科莲属植物莲（Nelumbo nuciferaGaertn）成熟种子中的绿色幼叶及胚根，其主要产地为我国湖南、湖北、福建、江苏、浙江、江西等省。莲子心气微，味苦，归心、肾经，是我国传统的中药之一。历代医药书籍均有记载:《本草纲目》谓其苦寒无毒，《大明一统志》记载“清心去热”，《全国中草药汇编》中载其具有清心火，退热，降血压，强心等功用，中国药典年2015版记载，莲子心能清心安神，交通心肾，涩精止血，用于治疗热入心包、心肾不交、神昏澹语、失眠遗精、血热吐血等症状。现代药理学研究表明莲子心具有多种生物活性，对心血管系统、糖尿病、中枢神经系统、肿瘤、抗氧化等均有不同程度的药理作用。因此，对莲子心有效部位进行系统的分离纯化具有重要的意义。
目前对莲子心中生物碱的分离纯化常使用有毒的有机溶剂，处理繁琐，对环境及人身危害较大，不适合大规模工业生产。
壳聚糖是天然的阳离子型絮凝剂，具有优良的絮凝效果，在中药提取液除杂澄清工艺中应用较多。它能选择性地与提取液中的胶质、蛋白质、叶绿素、果胶、靴质等络合而共沉除去，加快提取液过滤速度，为后续分离纯化提供方便。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种莲子心提取液的纯化除杂方法，该方法具有成本低、操作简单、生产周期短、安全无毒、无残余等优点。
为解决上述问题，本发明提供的技术方案如下：
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心，用乙醇水溶液提取，将提取液过滤，滤液回收乙醇，加纯化水制成药液提取液；
步骤二 取壳聚糖，用醋酸溶液将其配置成壳聚糖澄清剂；
步骤三 往药液提取液中加入壳聚糖澄清剂纯化除杂，过滤，得到澄清液；
步骤四 将澄清液进一步纯化，分离出生物碱类物质。
进一步地，所述步骤一中，乙醇水溶液用量为莲子心药材重量的8-15倍，回流提取2-3次，每次提取 0.8-1.5 h，莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:（2.5～ 10）；所述步骤二中，壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为0.7～ 2.8g/ml；所述步骤三中，加入壳聚糖澄清剂纯化除杂的工艺条件为温度20～80℃，PH值4.2～8.2。
优选地，所述乙醇水溶液中乙醇的质量浓度为70%。
优选地，所述莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:5，所述壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为1.4g/ml，所述加入壳聚糖澄清剂除杂的工艺条件为温度60℃，PH值6.2。
所述步骤三中澄清液的进一步纯化是采用离子交换树脂法进行的。
所述离子交换树脂为阳离子交换树脂。
更进一步地，所述步骤四得到的产品用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量从而计算得到有效成分的保留率，高效液相的条件为：色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。
有益效果：本发明的方法具有成本低、操作简单、生产周期短、安全无毒、无残余、适合大规模工业生产等优点；且当莲子心药液提取液比为1：5，壳聚糖加入量为1.4g/ml，作用温度为60℃，PH值为6.0的工艺条件时，甲基莲心碱保留率最大，达到93%。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
实施例1
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心，用乙醇水溶液提取，将提取液过滤，滤液回收乙醇，加纯化水制成药液提取液；
步骤二 取壳聚糖，用醋酸溶液将其配置成壳聚糖澄清剂；
步骤三 往药液提取液中加入壳聚糖澄清剂纯化除杂，过滤，得到澄清液；
步骤四 将澄清液进一步纯化，分离出生物碱类物质。
进一步地，所述步骤一中，乙醇水溶液用量为莲子心药材重量的8-15倍，回流提取2-3次，每次提取 0.8-1.5 h，莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:（2.5～ 10）；所述步骤二中，壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为0.7～ 2.8g/ml；所述步骤三中，加入壳聚糖澄清剂纯化除杂的工艺条件为温度20～80℃，PH值4.2～8.2。
优选地，所述乙醇水溶液中乙醇的质量浓度为70%。
优选地，所述莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:5，所述壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为1.4g/ml，所述加入壳聚糖澄清剂除杂的工艺条件为温度60℃，PH值6.2。
所述步骤三中澄清液的进一步纯化是采用离子交换树脂法进行的。
所述离子交换树脂为阳离子交换树脂，当然，也可以采用其他可分离生物碱类物质的离子交换树脂。
进一步地，所述步骤四得到的产品用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量从而计算得到有效成分的保留率，高效液相的条件为：色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。
实施例2
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材10倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次1h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至300ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:3的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖140g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度60℃，PH值为6.0条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为89%。
实施例3
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材12倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次1.5h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至500ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:5的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖140g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度60℃，PH值为6.0条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为93%。
实施例4
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材15倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取三次，每次1h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至700ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:7的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖200g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度40℃，PH值为5.0条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为90%。
实施例5
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材8倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次1.2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至700ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:7的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖240g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度80℃，PH值为8.2条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为88%。
实施例6
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材9倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取三次，每次1.5h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至250ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:2.5的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖70g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度20℃，PH值为4.2条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为70%。
实施例7
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材14倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次0.8h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至900ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:9的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖280g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度50℃，PH值为7.0条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为80%。
实施例8
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材11倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次1.1h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至600ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:6的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖100g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度70℃，PH值为5.5条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为92%。
实施例9
一种莲子心提取液的纯化除杂方法，包括以下步骤：
步骤一 取莲子心100g，置三口烧瓶中，加入莲子心药材13倍量重的70%乙醇水溶液，加热回流提取两次，每次0.9h，过滤，合并滤液，回收乙醇至完全，加纯化水定容至400ml，即得药材量与纯化水的量之比为1:4的药液提取液，备用。
步骤二 称取壳聚糖260g，先用少量1%醋酸溶液将其搅成糊状，然后用1%醋酸溶液定容至100 ml，溶胀24h，充分搅拌均匀后得到壳聚糖澄清剂，备用。
步骤三 在温度55℃，PH值为6.0条件下，将壳聚糖澄清剂加入药液提取液中，搅拌20min，保温1h，室温静置12h。过滤，得到澄清液。
步骤四 将澄清液采用离子交换树脂法进一步纯化，分离出生物碱类物质，其中，离子交换树脂为阳离子交换树脂；用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量。液相使用条件为色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。经检测，甲基莲心碱的保留率为90%。

Claims (7)

1.一种莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一 取莲子心，用乙醇水溶液提取，将提取液过滤，滤液回收乙醇，加纯化水制成药液提取液；
步骤二 取壳聚糖，用醋酸溶液将其配置成壳聚糖澄清剂；
步骤三 往药液提取液中加入壳聚糖澄清剂纯化除杂，过滤，得到澄清液；
步骤四 将澄清液进一步纯化，分离出生物碱类物质。
2.根据权利要求1所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述步骤一中，乙醇水溶液用量为莲子心药材重量的8-15倍，回流提取2-3次，每次提取 0.8-1.5 h，莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:（2.5～ 10）；所述步骤二中，壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为0.7～ 2.8g/ml；所述步骤三中，加入壳聚糖澄清剂纯化除杂的工艺条件为温度20～80℃，PH值4.2～8.2。
3.根据权利要求2所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述乙醇水溶液中乙醇的质量浓度为70%。
4.根据权利要求2所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述莲子心药材量与加入纯化水的质量之比为1:5，所述壳聚糖澄清剂中壳聚糖浓度为1.4g/ml，所述加入壳聚糖澄清剂除杂的工艺条件为温度60℃，PH值6.2。
5.根据权利要求1所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述步骤三中澄清液的进一步纯化是采用离子交换树脂法进行的。
6.根据权利要求5所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述离子交换树脂为阳离子交换树脂。
7.根据权利要求1-4任一项所述的莲子心提取液的纯化除杂方法，其特征在于：所述步骤四得到的产品用高效液相测其有效成分甲基莲心碱的含量从而计算得到有效成分的保留率，高效液相的条件为：色谱柱为HypersilBDSC18柱，流动相为甲醇-水（0.1%三乙胺），梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30℃，检测波长282nm。
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