CN109007842A - 具有防治过敏功效的益生菌组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种具有防治过敏功效的益生菌组合物及其应用。每100g所述过敏调节用益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：罗伊氏乳杆菌0.5～5g，副干乳酪杆菌2.5～18g，西兰花种子水提物1～8g，酵母β‑葡聚糖3～10g，低聚果糖15～30g，乳糖醇45～60g，草莓果粉10～25g。本发明通过将罗伊氏乳杆菌和副干乳酪杆菌与西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉搭配使用，特别是，并与酵母β‑葡聚糖、低聚果糖一起，形成特定的益生菌组合物配方。该益生菌组合物配方具有很好的防治过敏反应的效果。并且，以该益生菌组合物配方为活性成分制备的保健品，口感好。
Description
技术领域
本发明涉及功能性食品领域，具体涉及了一种具有防治过敏功效的益生菌组合物及其应用。
背景技术
过敏性疾病(变应性疾病)是当前世界性的卫生问题，包括变应性鼻炎哮喘、特应性皮炎和变应性胃肠炎等。大约影响世界范围30％以上的人群，据2002年数据显示，美国有近3100万人在一生中曾被诊断患过哮喘，约有4000万人患过季节性过敏性鼻炎。
目前对于过敏的治疗尚无良策，唯一途径就是严格控制饮食，避免摄入过敏食物。但由于食品配料多样化、食品标签制度不够完善、食品加工过程中存在交叉污染等原因，日常生活中总有不少患者误食花生制品。近年来，许多研究者希望借助益生菌调整肠道菌群平衡以及调节免疫的特性来预防及减缓过敏反应。
有研究指出，将乳酸杆菌和双歧杆菌研究已发现多数乳酸菌都具有健康促进作用，如免疫调节、防治过敏性疾病、预防癌症等功能。通常乳酸菌的免疫调节作用与其抗过敏作用是相互联系、密不可分的，已有不少研究指出机体免疫系统中Ⅰ型辅助T细胞(TH1细胞)/Ⅱ型辅助T细胞(TH2细胞)平衡的失衡，特别是平衡倾向于TH2细胞，是过敏性疾病发生的重要机制之一，乳酸菌进入机体后，通过其免疫调节作用，恢复机体的TH1/TH2细胞平衡，从而实现过敏性疾病的防治作用。
对过敏具有防治效果的乳酸菌产品，例如：现有技术公开的一种可抗过敏的益生菌粉，该可抗过敏的益生菌粉的组成成分为：低聚半乳糖300-1000份、低聚异麦芽糖300-800份、酵母β-葡聚糖400-900份、副干酪乳杆菌100-300份、鼠李糖乳杆菌100-300份、罗伊氏乳杆菌100-300份、嗜酸乳杆菌100-300份、长双歧杆菌100-300份以及赋形剂与稀释剂。虽然该乳酸菌产品对过敏反应能够起到一定的改善作用，但是改善程度非常有限。
因此，亟待提供一种能够具有较好的防治过敏效果的乳杆菌益生菌产品。
发明内容
基于此，本发明的主要目的是提供一种具有较好防治过敏功效的益生菌组合物。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种具有防治过敏功效的益生菌组合物，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
在其中一些实施例中，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
在其中一些实施例中，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
在其中一些实施例中，所述的罗伊氏乳杆菌为罗伊氏乳杆菌GL-104，所述的副干乳酪杆菌为副干乳酪杆菌AAP-1、副干乳酪杆菌AAP-2、副干乳酪杆菌GL-156的混合物。
在其中一些实施例中，每1.5g所述的益生菌组合物中，罗伊氏乳杆菌GL-104与副干乳酪杆菌GL-156的总活菌数为8.5×109～2.0×1010CFU，副干乳酪杆菌AAP-1的活菌数为1.5×109～5.5×109CFU，副干乳酪杆菌AAP-2含有活菌数1.5×109～5.5×109CFU。
在其中一些实施例中，每1.5g所述的益生菌组合物中，罗伊氏乳杆菌GL-104与副干乳酪杆菌GL-156的总活菌数为1.0×1010～1.5×1010CFU，副干乳酪杆菌AAP-1的活菌数为2.0×109～2.5×109CFU，副干乳酪杆菌AAP-2含有活菌数2.0×109～2.5×109CFU。
在其中一些实施例中，以CFU计，所述罗伊氏乳杆菌GL-104和副干乳酪杆菌GL-156的比例为1：1。
本发明活菌数是根据菌的作用起效量确定的菌添加量，添加活菌数≥起效量。
本发明的另一目的是提供一种上述的益生菌组合物在制备防治过敏的保健品中的应用。
在其中一些实施例中，所述的保健品为含片剂。
在其中一些实施例中，所述的保健品为颗粒剂。
在其中一些实施例中，所述的过敏是机体IgE含量上升所致的过敏或/和IgA含量下降所致的过敏。
本发明的再一目的是提供一种防治过敏的保健品，所述的保健品的活性成分包括上述的益生菌组合物。
与现有技术相比，本发明具备如下有益效果：
本发明通过将罗伊氏乳杆菌和副干乳酪杆菌与西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉搭配使用，特别是，挑选合适的罗伊氏乳杆菌菌株和副干乳酪杆菌菌株与西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉搭配使用，并与酵母β-葡聚糖、低聚果糖一起，形成特定的益生菌组合物配方。该益生菌组合物配方具有很好的防治过敏反应的效果。并且，以该益生菌组合物配方为活性成分制备的保健品，口感好。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明所采用的原料均来源于市购。
实施例1
本实施例提供一种具有防治过敏功效的益生菌组合物。
该益生菌组合物的配方参见表1。
该益生菌组合物的制备方法，包括如下步骤：
根据表1取原料，除罗伊氏乳杆菌、副干乳酪杆菌外，其他原料分别于50℃～70℃条件下干燥至水分含量低于3％、过50目～70目筛截取粒径超出50目～70目的筛选物，将筛选物与罗伊氏乳杆菌、副干乳酪杆菌混合均匀，即得。
本实施例获得的益生菌组合物，可以根据需要，按照该行业常规工艺，将其制备成含片、咀嚼片、固体饮料等等。
本实施例中，罗伊氏乳杆菌GL-104和副干乳酪杆菌GL-156是通过添加市售二者的益生菌复合菌粉加入的，加入该益生菌复合菌粉后，所得每1.5g的益生菌组合物中罗伊氏乳杆菌GL-104与副干乳酪杆菌GL-156的总活菌数为1.0×1010CFU～1.5×1010CFU，该益生菌复合菌粉购自台湾丰华生物科技；所得每1.5g所述的益生菌组合物中副干乳酪杆菌AAP-1的活菌数为2.0×109CFU～2.5×109CFU，该副干乳酪杆菌AAP-1购自台湾景岳；所得每1.5g所述的益生菌组合物中副干乳酪杆菌AAP-2的活菌数为2.0×109CFU～2.5×109CFU，该副干乳酪杆菌AAP-2购自台湾景岳；西兰花种子水提物，购自美国Brassica ProtectionProducts LLC。
实施例2～4
实施例2～4分别提供一种具有防治过敏功效的益生菌组合物。
益生菌组合物的配方参见表1。制备方法等均与实施例1相同。
实施例5～6
实施例5～6分别提供一种具有防治过敏功效的益生菌组合物。
益生菌组合物的配方参见表1。制备方法等均与实施例1相同。
表1
对比例1～2
对比例1～2均是实施例1的对比例，相对于实施例1的差别之处包括：
对比例1中，不含有西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉。
对比例2中，采用罗伊氏乳杆菌DSMZ17938代替罗伊氏乳杆菌GL-104，并且仅采用副干乳酪杆菌AAP-1这一种副干乳酪杆菌而非是采用干乳酪杆菌AAP-1与副干乳酪杆菌AAP-2、副干乳酪杆菌GL-156的混合物。
对比例1～2的配方参见表2。
表2
| 对比例1 | 对比例2 | |
| 罗伊氏乳杆菌GL-104 | 1.34 | - |
结果测试
一、防治过敏效果的测试
(1)动物分组和过敏模型建立及给药
选取一定量的4周龄雌性健康小鼠，将小鼠随机分为空白对照组组、模型组和实验组。其中，试验组分为八组，每组所用益生菌组合物分别对应实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6、对比例1、对比例2，每组小鼠10只。
实验开始前将模型组和实验组的小鼠用花生粗蛋白(CPE)致敏，空白对照组不致敏，在确定小鼠过敏后，模型组和空白组用0.2mL的PBS缓冲液灌胃3次，实验组每日使用实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6、对比例1、对比例2所述的益生菌组合物溶液(浓度是100mg/kg，以37℃温开水中制备而成)灌胃3次，每次灌胃0.2mL。
(2)血清中总lgE抗体的检测
激发30min后，收集各组小鼠的粪便。称取0.1g粪便重悬于1mL的PBS中，充分振荡后于4℃下7000r/min离心5min，取上清，于–20℃保存。
收集粪便后，摘除小鼠眼球取血。室温静置2h后，于4000r/min离心10min，小心取出上层血清于–20℃保存。
血清中总IgE抗体的含量采用ELISA试剂盒进行检测，参照说明书进行。
(3)粪便中IgA抗体的检测
小鼠粪便中组胺和IgA的含量使用ELISA试剂盒进行检测，具体步骤按照试剂盒说明书进行。
(4)结果：血清中总lgE抗体和粪便中IgA抗体的水平如表3：
表3鼠IgE和IgA检测结果
| 组别 | n | IgE(ng/mL) | IgA(ng/mL) |
| 空白组 | 10 | 235.9±48.6 | 68.9±0.6 |
| 模型组 | 10 | 2053.7±64.8 | 69.8±4.5 |
| 实施例1 | 10 | 923.6±56.2 | 85.6±1.4 |
| 实施例2 | 10 | 1003.4±67.9 | 81.5±2.2 |
| 实施例3 | 10 | 1142.9±50.3 | 79.3±2.7 |
| 实施例4 | 10 | 1275.2±70.7 | 76.7±3.5 |
| 实施例5 | 10 | 1257.5±58.4 | 75.9±3.3 |
| 实施例6 | 10 | 1261.9±64.7 | 75.1±3.4 |
| 对比例1 | 10 | 1647.3±72.5 | 69.4±2.5 |
| 对比例2 | 10 | 1342.6±68.3 | 70.5±3.1 |
IgE介导的过敏反应占71％，血清中IgE抗体是过敏反应发生的关键作用因子。与小鼠过敏症状的变化相对应，本研究中模型组小鼠的血清总IgE含量达到2053.7ng/mL(表3)，超过空白组8倍，而实施例1的小鼠血清的总IgE含量分别降至模型组的一半多，实施例2～4小鼠血清的总IgE含量也下降了将近一半，但效果没有实验组1好，实施例5、6的测试稍次于实施例2～4，这说明，本发明的技术方案存在优选的方案。IgA抗体在胃肠道防护中起着至关重要的作用，是肠粘膜主要的保护性抗体。肠道中IgA抗体含量较高能降低肠道炎症和IgE介导的过敏性疾病的发生率，而含量低或选择性IgA缺乏都容易引起过敏反应，由表3可知，模型组与空白组中IgA抗体水平基本接近，并没有明显的差别(P>0.05)；而实施例1中，小鼠粪便中IgA的含量较空白组和模型组均有明显的上升，说明本发明得到的益生菌组合物能有效的改善小鼠的过敏反应。
对比例1相对于实施例1，没有不含有西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉，结果对比例1的IgE(ng/mL)较高、IgA(ng/mL)较低，对过敏反应起不到非常显著的抑制效果，这说明西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉在本发明的组合物配方中发挥显著的促进增效作用。另外，对比例2相对于实施例1，改变了菌株，结果对比例2的产品对过敏反应的作用就稍差于实施例1，这说明，菌株的选择对本申请效果的实现也发挥着一定作用。
二、口感风味的测试
(1)实验人群分组
选取80名志愿者，对实施例1～6和对比例1～2的8种益生菌组合物进行口感评价，纳入标准是没有任何处方药物的健康成年人。排除标准是吸烟者，全身性疾病，长期使用抗生素。
益生菌组合物的包装一致，重量一致。采用感官评分标准来评价口感。
试验组分为8组：分别采用实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5、实施例6、对比例1、对比例2的产品，使用37℃温开水冲服3次，每次服用2g；
对照组：每日给安慰剂，使用37℃温开水冲服3次，每次服用2g；
(2)感官评价评分标准
感官评价总共纳入3个指标：产品色泽、物理(组织)形态、整体口感。色泽从杂质较多到色泽均匀，评分为0到10；物理(组织)形态从粉质结块到粉质细腻，评分为0～10；整体口感从难吃到好吃，评分为0到10。
(3)结果：参与的人群进行感官评价后，样品的得分结果如表4所示。
表4
| 组别 | n | 色泽 | 组织形态 | 整体口感 |
| 实施例1 | 10 | 9.3±0.3 | 9.5±0.4 | 9.3±0.4 |
| 实施例2 | 10 | 8.5±0.5 | 8.7±0.3 | 8.6±0.7 |
| 实施例3 | 10 | 8.4±0.5 | 8.6±0.2 | 7.9±0.6 |
| 实施例4 | 10 | 8.2±0.6 | 8.0±0.5 | 7.7±0.8 |
| 实施例5 | 10 | 7.8±0.6 | 7.5±0.1 | 7.4±0.8 |
| 实施例6 | 10 | 7.3±0.4 | 7.4±0.1 | 7.0±0.9 |
| 对比例1 | 10 | 6.9±0.6 | 7.0±0.4 | 6.7±0.7 |
| 对比例2 | 10 | 7.1±0.5 | 7.2±0.2 | 6.8±0.8 |
由表4可知，实施例1总体风味口感评分优于实施例2至实施例4，而实施例2至4的风味口感优于实施例5、实施例6，这说明，本发明的益生菌组合物配方存在优选方案。对比例1、2风味口感略差于实施例1，对比例1风味口感比对比例2略差。这说明，西兰花种子水提物、乳糖醇、草莓果粉以及菌株的选取对风味口感提升具有一定的促进作用。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种具有防治过敏功效的益生菌组合物，其特征在于，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
2.根据权利要求1所述的益生菌组合物，其特征在于，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
3.根据权利要求2所述的益生菌组合物，其特征在于，每100g所述益生菌组合物中包括如下含量的各活性成分：
4.根据权利要求1至3任一项所述的益生菌组合物，其特征在于，所述的罗伊氏乳杆菌为罗伊氏乳杆菌GL-104，所述的副干乳酪杆菌为副干乳酪杆菌AAP-1、副干乳酪杆菌AAP-2、副干乳酪杆菌GL-156的混合物。
5.根据权利要求4所述的益生菌组合物，其特征在于，每1.5g所述的益生菌组合物中，罗伊氏乳杆菌GL-104与副干乳酪杆菌GL-156的总活菌数为8.5×109～2.0×1010CFU，副干乳酪杆菌AAP-1的活菌数为1.5×109～5.5×109CFU，副干乳酪杆菌AAP-2含有活菌数1.5×109～5.5×109CFU。
6.根据权利要求1至5任一项所述的益生菌组合物在制备防治过敏的保健品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的过敏是机体IgE含量上升所致的过敏或/和IgA含量下降所致的过敏。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的保健品为粉剂。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的保健品为片剂。
10.一种防治过敏的保健品，其特征在于，所述的保健品的活性成分包括权利要求1至5任一项所述的益生菌组合物。
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