CN109001305B - 一种健儿清解液的检测方法 - Google Patents
一种健儿清解液的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109001305B CN109001305B CN201810554873.5A CN201810554873A CN109001305B CN 109001305 B CN109001305 B CN 109001305B CN 201810554873 A CN201810554873 A CN 201810554873A CN 109001305 B CN109001305 B CN 109001305B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- jian
- reference substance
- acid
- qingjie
- liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种健儿清解液的检测方法,采用高效液相色谱法测定健儿清解液中绿原酸、枸橼酸、苯甲醛和苯甲酸的含量,加强对健儿清解液的质量控制,保证健儿清解液的安全性和有效性。本发明方法具有准确可靠、精密度好、稳定性高和重复性好等优点。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂技术领域,具体涉及一种健儿清解液的检测方法。
背景技术
健儿清解液是儿科常用药,主要用于风热感冒初期如轻度发热、鼻塞、黄鼻涕或黏液性鼻涕,伴饮食积滞、食欲不振、恶心、舌苔发黄、舌质发红等。该制剂的处方为:
该制剂的制备方法为:以上六味,金银花、菊花、连翘、苦杏仁分别蒸馏提取芳香水,山楂用80%乙醇加热提取二次,每次2小时,滤过,合并滤液,滤液回收乙醇,浓缩成浸膏,加适量的水溶解;陈皮照流浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录IO),用60%乙醇作溶剂进行渗漉,收集渗漉液,回收乙醇,用适量的水稀释,滤过;合并上述药液及芳香水,加入枸橼酸0.05g、单糖浆300ml及苯甲酸适量,加水使成1000ml,搅匀,滤过,即得。
目前对健儿清解液的质量控制方法只对指标进行了化学鉴别,且检测指标单一,不利于对健儿清解液的质量控制和监管,不能保证药品的安全性和有效性。
发明内容
基于此,本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种健儿清解液的检测方法,具有准确可靠、精密度好、稳定性高和重复性好等优点,可有效控制健儿清解液的质量,保证其安全性和有效性。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案为:一种健儿清解液的检测方法,利用高效液相色谱对枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛含量进行测定。
优选地,对所述枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛含量进行测定包括以下步骤:
照高效液相色谱法中国药典2000年版一部附录VI D测定:
(1)取健儿清解液1mL,过0.45μm滤膜,为供试品溶液;
(2)取枸橼酸对照品4.3mg溶于1mL甲醇、绿原酸对照品0.660mg溶于100mL甲醇、苯甲酸对照品1.630mg溶于1mL甲醇、苯甲醛对照品20μL溶于50mL甲醇,摇匀,为对照品溶液;
(3)色谱条件与系统适用性试验:色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相以乙腈流动相A,以0.1%磷酸溶液流动相B,按0~11分钟,A:B→(10~18):(90~82),11~30分钟,A:B→(18~20):(82~80),30~45分钟,A:B→20:80,进行梯度洗脱;检测波长为210nm;
(4)测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。
优选地,所述步骤(3)中色谱柱温度为30℃。
优选地,所述步骤(3)中洗脱流速为1.00 mL/min。
本发明所述健儿清解液的处方如下:
所述健儿清解液的制备方法为:以上六味,金银花、菊花、连翘、苦杏仁分别蒸馏提取芳香水,山楂用80%乙醇加热提取二次,每次2小时,滤过,合并滤液,滤液回收乙醇,浓缩成浸膏,加适量的水溶解;陈皮用60%乙醇作溶剂,浸渍24小时后渗漉,以每分钟1~3ml/kg的速度放液,收集渗漉液,回收乙醇,用适量的水稀释,滤过;合并上述药液及芳香水,加入枸橼酸0.05g、单糖浆300ml及苯甲酸适量,加水使成1000ml,搅匀,滤过,即得。
相对于现有技术,本发明的有益效果为:本发明检测方法采用高效液相色谱法测定绿原酸、枸橼酸、苯甲醛和苯甲酸的含量,加强对健儿清解液的质量控制,保证健儿清解液的安全性和有效性。本发明方法具有准确可靠、精密度好、稳定性高和重复性好等优点。
附图说明
图1为本发明高效液相色谱检测图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点,下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
本发明健儿清解液的检测方法的一种实施例,包括以下步骤:
照高效液相色谱法中国药典2000年版一部附录VI D测定:
(1)按以下方法制备健儿清解液:按处方取金银花、菊花、连翘、苦杏仁分别蒸馏提取芳香水,山楂用80%乙醇加热提取二次,每次2小时,滤过,合并滤液,滤液回收乙醇,浓缩成浸膏,加适量的水溶解;陈皮用60%乙醇作溶剂,浸渍24小时后渗漉,以每分钟1~3ml/kg的速度放液,收集渗漉液,回收乙醇,用适量的水稀释,滤过;合并上述药液及芳香水,加入枸橼酸0.05g、单糖浆300ml及苯甲酸适量,加水使成1000ml,搅匀,滤过,即得;取上述健儿清解液1mL,过0.45μm滤膜,为供试品溶液;
(2)取枸橼酸对照品4.3mg溶于1mL甲醇、绿原酸对照品0.660mg溶于100mL甲醇、苯甲酸对照品1.630mg溶于1mL甲醇、苯甲醛对照品20μL溶于50mL甲醇,摇匀,为对照品溶液;
(3)色谱条件与系统适用性试验:采用C18色谱柱,流动相以乙腈流动相A,以0.1%磷酸溶液流动相B,按0~11分钟,A:B→10:90,11~30分钟,A:B→18:82,30~45分钟,A:B→20:80,进行梯度洗脱;柱温为30℃,流速为1.00mL/min;检测波长为210nm;
(4)测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。
样品的高效液相色谱图如图1所示。
仪器型号:日立Chromaster高效液相色谱仪;十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(粒径5μm,柱直径4.6mm×柱长250mm)。
试剂:绿原酸(C16H18O9)对照品,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司(编号C109403);苯甲酸(C6H5COOH)对照品,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司(编号B116254);苯甲醛(C6H5CHO)对照品,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司(编号B110460);枸橼酸(C6H8O7)对照品,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司(编号C108872);乙腈为色谱纯;水为纯净水。
实施例2
本发明健儿清解液的检测方法的一种实施例,包括以下步骤:
照高效液相色谱法中国药典2000年版一部附录VI D测定:
(1)按以下方法制备健儿清解液:按处方取金银花、菊花、连翘、苦杏仁分别蒸馏提取芳香水,山楂用80%乙醇加热提取二次,每次2小时,滤过,合并滤液,滤液回收乙醇,浓缩成浸膏,加适量的水溶解;陈皮用60%乙醇作溶剂,浸渍24小时后渗漉,以每分钟1~3ml/kg的速度放液,收集渗漉液,回收乙醇,用适量的水稀释,滤过;合并上述药液及芳香水,加入枸橼酸0.05g、单糖浆300ml及苯甲酸适量,加水使成1000ml,搅匀,滤过,即得;取上述健儿清解液1mL,过0.45μm滤膜,为供试品溶液;
(2)取枸橼酸对照品4.3mg溶于1mL甲醇、绿原酸对照品0.660mg溶于100mL甲醇、苯甲酸对照品1.630mg溶于1mL甲醇、苯甲醛对照品20μL溶于50mL甲醇,摇匀,为对照品溶液;
(3)色谱条件与系统适用性试验:采用C18色谱柱,流动相以乙腈流动相A,以0.1%磷酸溶液流动相B,按0~11分钟,A:B→18:82,11~30分钟,A:B→20:80,30~45分钟,A:B→20:80,进行梯度洗脱;柱温为30℃,流速为1.00mL/min;检测波长为210nm;
(4)测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。
本实施例所述仪器型号和试剂同实施例1。
实施例3
本发明健儿清解液的检测方法的一种实施例,包括以下步骤:
照高效液相色谱法中国药典2000年版一部附录VI D测定:
(1)按以下方法制备健儿清解液:按处方取金银花、菊花、连翘、苦杏仁分别蒸馏提取芳香水,山楂用80%乙醇加热提取二次,每次2小时,滤过,合并滤液,滤液回收乙醇,浓缩成浸膏,加适量的水溶解;陈皮用60%乙醇作溶剂,浸渍24小时后渗漉,以每分钟1~3ml/kg的速度放液,收集渗漉液,回收乙醇,用适量的水稀释,滤过;合并上述药液及芳香水,加入枸橼酸0.05g、单糖浆300ml及苯甲酸适量,加水使成1000ml,搅匀,滤过,即得;取上述健儿清解液1mL,过0.45μm滤膜,为供试品溶液;
(2)取枸橼酸对照品4.3mg溶于1mL甲醇、绿原酸对照品0.660mg溶于100mL甲醇、苯甲酸对照品1.630mg溶于1mL甲醇、苯甲醛对照品20μL溶于50mL甲醇,摇匀,为对照品溶液;
(3)色谱条件与系统适用性试验:采用C18色谱柱,流动相以乙腈流动相A,以0.1%磷酸溶液流动相B,按0~11分钟,A:B→15:85,11~30分钟,A:B→19:81,30~45分钟,A:B→20:80,进行梯度洗脱;柱温为30℃,流速为1.00mL/min;检测波长为210nm;
(4)测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。
本实施例所述仪器型号和试剂同实施例1。
实施例4本发明检测方法的检测限
采用信噪比法。把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较,算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。检测方法同实施例1。
以信噪比为3:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。空白样品的枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛相同保留时间处的峰面积分别为25789mAU*min、495mAU*min、7017mAU*min和27mAU*min,已知低浓度供试品的枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛峰面积分别为80367mAU*min、1559mAU*min、20048mAU*min和189mAU*min,可得枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛检测限分别为23.3μg/mL、2.4μg/mL、28.7μg/mL和0.0007μg/mL。
实施例5本发明检测方法的定量限
采用信噪比法。以信噪比为10:1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。检测方法同实施例1。
空白样品的枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛相同保留时间处的峰面积分别为25789mAU*min、495mAU*min、7017mAU*min和27mAU*min,已知低浓度供试品的枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛峰面积分别为281101mAU*min、5177mAU*min、62144mAU*min和615mAU*min,可得枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛定量限分别为62.25μg/mL、2.65μg/mL、33.8μg/mL和0.007μg/mL。
实施例6本发明检测方法的线性关系考察
1、实验方法
分别设置对照品进样量为3μL、6μL、9μL、12μL、15μL,即枸橼酸对应浓度分别为1290μg/mL、2580μg/mL、3870μg/mL、5160μg/mL、6450μg/mL;绿原酸对应浓度分别为5μg/mL、12μg/mL、50μg/mL、99μg/mL、198μg/mL;苯甲酸对应浓度分别为489μg/mL、978μg/mL、1467μg/mL、1956μg/mL、2445μg/mL;苯甲醛对应浓度分别为0.12μg/mL、0.24μg/mL、0.36μg/mL、0.40μg/mL、0.48μg/mL、0.60μg/mL。按实施例1所述方法进行高效液相色谱测定,在上述液相色谱条件下进行分析。
2、实验结果
以峰面积A对浓度C进行线性回归,得枸橼酸回归方程为y1=1317.71x+189868.30(R2=0.9994),绿原酸回归方程为y2=71190.88x-169652.60(R2=1.0000),苯甲酸回归方程为y3=62355.53x+264874.00(R2=1.0000),苯甲醛回归方程为y4=184752483.90x+4755820.40(R2=0.9981)。
结果表明,枸橼酸在1290μg/mL~6450μg/mL范围内呈良好线性关系;绿原酸在5μg/mL~198μg/mL范围内呈良好线性关系;苯甲酸在489μg/mL~2445μg/mL范围内呈良好线性关系;苯甲醛在0.12μg/mL~0.60μg/mL范围内呈良好线性关系。
实施例7本发明检测方法的精密度
按实施例1所述检测方法精密吸取对照品溶液10μL,重复进样5次,各测得枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛对应的平均色谱峰面积分别为2754565、581231、72546587和30784598mAU*min,RSD(relative standard deviation,RSD)分别为0.29%、0.31%、0.25%和0.11%,表明本方法具有良好的精密度。
实施例8本发明检测方法的稳定性
取对照品溶液10μL,分别于0h、0.5h、1h、2h、6h、12h和24h进样,按实施例1所述检测方法,测定枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛对应的色谱峰面积。
经检测,枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛对应平均色谱峰面积分别为2754565mAU*min、581231mAU*min、72546587mAU*min和30784598mAU*min,RSD分别为0.29%、0.31%、0.25%和0.11%。结果表明,本发明检测方法稳定性较好,在24h内测定结果稳定。
实施例9本发明检测方法的重复性
1、实验方法
取健儿清解液样品各6份,按实施例1所述检测方法,分别进样10μL,测定各对照品的峰面积。
2、实验结果
实验结果如表1所示:
表1重复性实验结果
上述结果表明,本方法检测方法重复性好。
实施例10本发明检测方法的准确度
采用加样回收法对本发明检测方法的准确度进行检测:称定已知对照品含量的健儿清解液各6份,分别加入已称定的枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛对照品,按实施例1所述检测方法进行各指标含量检测,计算回收率,结果如表2所示:
表2准确度检测结果
上述结果表明,本发明检测方法准确可靠。
实施例11
本实施例利用本发明检测方法对健儿清解液样品进行测定。
取3个批号、每个批号3个健儿清解液样品作为供试品溶液,分别进样10μL,按实施例1所述检测方法测定样品中枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛峰面积,按标准曲线外标法(枸橼y1=1317.71x+189868.30;绿原酸y2=71190.88x-169652.60;苯甲酸y3=62355.53x+264874.00;苯甲醛y4=184752483.90x+4755820.40)计算含量,结果如表3所示:
表3样品含量检测结果
最后所应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制,尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (3)
1.一种健儿清解液的检测方法,其特征在于,利用高效液相色谱对枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛含量进行测定;
对所述枸橼酸、绿原酸、苯甲酸和苯甲醛含量进行测定包括以下步骤:
照高效液相色谱法中国药典2000年版一部附录VI D测定:
(1)取健儿清解液1mL,过0.45μm滤膜,为供试品溶液;
(2)取枸橼酸对照品4.3mg溶于1mL甲醇、绿原酸对照品0.660mg溶于100mL甲醇、苯甲酸对照品1.630mg溶于1mL甲醇、苯甲醛对照品20μL溶于50mL甲醇,摇匀,为对照品溶液;
(3)色谱条件与系统适用性试验:色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相以乙腈流动相A,以0.1%磷酸溶液流动相B,按0~11分钟,A:B→(10~18):(90~82),11~30分钟,A:B→(18~20):(82~80),30~45分钟,A:B→20:80,进行梯度洗脱;检测波长为210nm;
(4)测定法:精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定。
2.根据权利要求1所述的健儿清解液的检测方法,其特征在于,所述步骤(3)中色谱柱温度为30℃。
3.根据权利要求1所述的健儿清解液的检测方法,其特征在于,所述步骤(3)中洗脱流速为1.00mL/min。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810554873.5A CN109001305B (zh) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | 一种健儿清解液的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810554873.5A CN109001305B (zh) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | 一种健儿清解液的检测方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN109001305A CN109001305A (zh) | 2018-12-14 |
CN109001305B true CN109001305B (zh) | 2019-05-24 |
Family
ID=64574310
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810554873.5A Active CN109001305B (zh) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | 一种健儿清解液的检测方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN109001305B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109738536B (zh) * | 2019-01-17 | 2022-04-01 | 天地恒一制药股份有限公司 | 一种运用高效液相色谱法分离苯甲醛和硝基苯甲醛的方法 |
CN113866321A (zh) * | 2021-11-19 | 2021-12-31 | 云南省食品药品监督检验研究院 | 一种健儿清解液的检测方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101040942A (zh) * | 2006-03-22 | 2007-09-26 | 国药控股深圳中药有限公司 | 健儿清解液有效成分组合及控制方法 |
CN101632741A (zh) * | 2008-07-25 | 2010-01-27 | 北京亚东生物制药有限公司 | 健儿清解液的质量控制方法 |
CN101744920A (zh) * | 2010-02-04 | 2010-06-23 | 国药控股深圳中药有限公司 | 健儿清解液指纹图谱控制方法 |
-
2018
- 2018-05-31 CN CN201810554873.5A patent/CN109001305B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101040942A (zh) * | 2006-03-22 | 2007-09-26 | 国药控股深圳中药有限公司 | 健儿清解液有效成分组合及控制方法 |
CN101632741A (zh) * | 2008-07-25 | 2010-01-27 | 北京亚东生物制药有限公司 | 健儿清解液的质量控制方法 |
CN101744920A (zh) * | 2010-02-04 | 2010-06-23 | 国药控股深圳中药有限公司 | 健儿清解液指纹图谱控制方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
RP-HPLC法测定健儿清解液中绿原酸的含量;郑宜贵;《江西中医学院学报》;20051031;第17卷(第5期) * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN109001305A (zh) | 2018-12-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105842373B (zh) | 一种建立金银花的药物制剂的指纹图谱的方法 | |
CN104502518B (zh) | 一种治疗小儿厌食症的中药制剂的检测方法 | |
CN105467059A (zh) | 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法 | |
CN101324546A (zh) | Hplc法同时测定蒲公英制剂中绿原酸、咖啡酸含量的方法 | |
CN109001305B (zh) | 一种健儿清解液的检测方法 | |
CN109991328A (zh) | 一种鼠曲草一测多评的质量评价方法 | |
CN109991327A (zh) | 一测多评法评价小蓟质量的方法 | |
CN110927311B (zh) | 一种罗布麻叶药材uplc特征图谱的构建方法及其黄酮类成分含量测定方法 | |
CN103424498B (zh) | 一种清毒安肾胶囊指纹图谱的建立方法及其应用 | |
CN103698432B (zh) | 测定荔枝核提取物中皂苷含量的方法 | |
CN108872410A (zh) | 一种润肺膏指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
CN104597139B (zh) | Hplc同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法 | |
CN109856270A (zh) | 一种用高效液相色谱法同时测定华盖散配方颗粒中7个指标成分的方法 | |
CN102879516B (zh) | 补阳还五汤的鉴别和含量测定方法 | |
CN110133158A (zh) | 一种酒蒸黄连的hplc指纹图谱检测方法 | |
CN112730674B (zh) | 一种罗汉茶的质量检测方法 | |
CN106290603B (zh) | 一种利用阀切换方法同时检测植物中的无机阴离子、有机酸和三种植物素的方法与应用 | |
CN104101657B (zh) | 中药组合物制剂中多种成分含量的测定方法 | |
CN106770764B (zh) | 一种血必净中间体多指标成分的含量测定方法 | |
CN106680414A (zh) | 一种复方矮地茶片的检测方法 | |
CN106706835A (zh) | 一种金莲花泡腾片的质量检测方法 | |
CN112578066A (zh) | 一种紫菀样品的质量评价方法 | |
CN106769964B (zh) | 一枝蒿提取物的质量控制方法 | |
CN113759010B (zh) | 一种月季花特征图谱的构建方法 | |
CN108072708B (zh) | 测定甘草制雪胆中甘草酸含量的hplc方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
CB02 | Change of applicant information |
Address after: 515000 Chaoyang Road, Jinyuan Industrial City, Shantou City, Guangdong Province, No. 08 Applicant after: Guangdong Wannianqing Pharmaceutical Co., Ltd. Address before: 515000 Chaoyang Road, Jinyuan Industrial City, Shantou City, Guangdong Province, No. 08 Applicant before: Guangdong Enterlife Pharmaceutical Co., Ltd. |
|
CB02 | Change of applicant information | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |