CN108998389B - 对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有拮抗作用的假单胞菌及应用 - Google Patents

对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有拮抗作用的假单胞菌及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一株对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有显著拮抗作用的假单胞菌及其应用。该菌株分离自上海市奉贤区水稻根际土壤,本发明中的假单胞菌已于2018年5月7日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏名称为:摩氏假单胞菌Pseudomonas mosselii 923,保藏编号:CCTCC No:M 2018252。本发明的假单胞菌对稻黄单胞菌表现显著的抑制作用,同时对黄单胞属的其他植物病原细菌和稻瘟病菌均具有较强的抑制能力,具有生物防治应用价值。

Description

对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有拮抗作用的假单胞菌及应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,尤其是涉及一株对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有拮抗作用的假单胞菌及其应用。
背景技术
水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病分别由稻黄单胞菌的稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)和稻生致病变种(X.oryzae pv.oryzicola,Xoc)引起的。Xoo主要从水稻叶缘处的水孔或伤口侵入,系统性危害水稻维管束组织,引起水稻白叶枯病(Bacterial leaf blight,BLB);Xoc主要从水稻叶片的气孔或伤口处侵染,危害水稻薄壁细胞组织,受平行叶脉限制从而产生条斑病(Bacterial leaf streak,BLS)。BLB和BLS是世界水稻种植区的重要致灾细菌病害,我国长江以南水稻产区发生尤为严重,常造成水稻减产10%-30%的,严重时达60%以上,甚至绝产(Wei Guo,Lu-Lu Cai,Hua-Song Zou,Wen-Xiu Ma,Xi-Ling Liu,Li-Fang Zou,Yu-Rong Li,Xiao-Bin Chen,and Gong-YouChen.The Ketoglutarate Transport Protein KgtP is Secreted through the TypeIII Secretion System and Contributes to Virulence in Xanthomonas oryzaepv.oryzae.[J],Appl.Environ.Microbiol.2012doi:10.1128/AEM.07997-11.)。
目前,生产上对水稻两种细菌病害的防治措施主要包括选育抗病品种、培育无病壮秧及化学防治(祝晓芬,周明国.水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌对唾枯哩和链霉素的抗药性监测及室内抗药性风险评估.2010),而有关生物防治方面还比较受局限,主要原因在于过去所获得的生防微生物拮抗活性不高,拮抗谱不广。我国栽培的水稻品种所携带的抗病基因比较单一,存在着抗病性丧失的可能性(雷财林,凌忠专,王久林,万建民.水稻抗病育种研究进展[J].生物学通报,2004,39(11):4-6.)。长期大规模使用化学药剂既不经济也不安全,并且会使病原菌产生抗药性(沈寅初.农用抗生素研究开发的新进展.[J].国外医药抗生素分册,1998,19(2):155-160.)。生物防治不仅具有不易产生抗性、靶向性高、特异性好等优点,而且对生态环境友好,这取决于生防作用的微生物资源筛选和发掘。
假单胞菌(Pseudomonas sp.)作为一类根际促生菌(plant growth-promotingrhizobacteria(PGPR)),广泛应用于植物病害生物防治(李龚,刘娜,郑丽博.荧光假单胞菌植物病害防治及研究进展[J].分子植物育种,2018,16(11):3693-3697.)。该类微生物防治植物病害的机理主要包括:产生多种抗生素、有效的根际定殖及竞争根际营养、降解微生物的酶类及诱导系统抗性作用,使其可开发成微生物活菌制剂等一系列生物防治产品(杨海君,谭周进,肖启明,何可佳.假单胞菌的生物防治作用研究[J].中国生态农业学报,2004,12(03):158-161.)。摩氏假单胞菌(P.mosselii)普遍存在于土壤和水中,具有代谢多样性和降解各种芳香族化合物的功能(Park GS,Chu JH,Hong SJ,Kwak Y,Khan AR,Jung BK,Ullah I,Shin JH.Complete genome sequence of the caprolactam-degradingbacterium Pseudomonas mosselii SJ10isolated from wastewater of a nylon6production plant.[J],J Biotechnol.2014Dec 20;192Pt A:263-4.)。
目前尚无利用摩氏假单胞菌防治水稻细菌病害的文献报道,其生防潜力有待于进一步开发。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一株对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有较好防治效果的生防菌株,命名为摩氏假单胞菌923。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现:
一株假单胞菌,分离自上海市奉贤区水稻根际,命名为摩氏假单胞菌923,所述摩氏假单胞菌923保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号是:CCTCC No:M 2018252,保藏日期为2018年5月7日,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内(武汉大学第一附小对面),武汉大学保藏中心。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923采用稀释涂板法获取:将不同梯度的土壤菌悬液,均匀涂布于KB平板上,挑取在365nm紫外灯下发荧光的菌落,在NA平板上划线进行纯化。进一步在已接种水稻条斑病菌RS105和水稻白叶枯病菌PXO99A的NA平板上进行培养,观察是否产生抑菌圈,挑取能够产生明显抑菌圈的菌落。在实施方式中,以在20ml NA平板上产生抑菌圈最大的菌落作为产生明显抑菌圈的菌落。
利用细菌16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增和构建系统进化树,所述摩氏假单胞菌923的16S rRNA基因如SEQ ID No.1所示,与P.mosselii的16S rRNA基因(为已知基因)具有99.6%的相似度。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923的生理生化测定:固体平板上培养,该假单胞菌株的菌落为乳白色,表面湿润、突起、边缘圆整,能够产生荧光色素。光学显微镜下观察,该菌株的细胞呈杆状,革兰氏染色阴性。生理生化测试结果显示,该假单胞菌能够分泌精氨酸双水解酶和蛋白酶,不能水解脲酶、β-半乳糖甙酶;能够同化葡萄糖、甘露糖、甘露醇、N-乙酰-葡萄糖胺和苯乙酸,不能同化阿拉伯糖、麦芽糖、葡萄糖酸盐、癸酸、已二酸、苹果酸、柠檬酸;能够利用糊精、吐温40、L-阿拉伯糖、D-果糖、α-D-葡萄糖、D-甘露醇等53种碳源。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对稻黄单胞菌具有显著的拮抗作用,其中稻黄单胞菌包括水稻条斑病菌和水稻白叶枯病菌。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对水稻条斑病菌具有拮抗作用。
在本发明的一个具体实施例中,所述水稻条斑病菌包括RS105、JSB1-39、AHB1-58、YNB01-3、YNB0-17、RSGD10、ZJB01-25、HNB3-17、RS85、HNB8-47、HANB1-19、JSB3-28、AHB3-7、HANB12-26、RS63。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对水稻条斑病菌Xoo和水稻白叶枯病菌Xoc均具有显著的拮抗作用。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对水稻白叶枯病菌具有拮抗作用。
在本发明的一个具体实施例中,所述水稻白叶枯病菌包括PXO99A、YC18、YC11、YC7、XZ35、LYG46、YC2、AH1、8569、JL1、JL4、JL3。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对多种黄单胞属的其他植物病原细菌,包括菜豆细菌性疫病菌(X.campestrispv.phaseoli)、大豆斑疹病菌(X.axonopodispv.glycines)、豌豆细菌性疫病菌(X.axonopodispv.vignicola)、香蕉细菌性青枯病菌(X.campestrispv.musacearum)、核桃黑斑病菌(X.campestrispv.juglandis)、番茄青枯病菌(Ralstonia solanacearum)具有拮抗活性。
在本发明的一个具体实施例中,所述摩氏假单胞菌923对稻瘟病菌(Magnaportheoryzae)具有拮抗活性。
在本发明的一个具体实施例中,通过平板对峙培养方法测定摩氏假单胞菌923的拮抗谱。
与现有技术相比,本发明提供的一株摩氏假单胞菌923,对稻黄单胞菌的两个致病变种:水稻条斑病菌Xoo和水稻白叶枯病菌Xoc均具有显著的拮抗作用,同时对多种黄单胞属的其他植物病原细菌和稻瘟病菌均表现较强的抑制效果,具有广谱的抑菌能力。为植物的细菌性病害和真菌性病害的生物防治提供了新资源。
附图说明
图1.摩氏假单胞菌923的显微镜(1000X)观察照片及菌落形态。
图2.摩氏假单胞菌923基于16S rRNA基因构建的系统发育树。
图3.摩氏假单胞菌923的PCR产物琼脂糖凝胶电泳图。其中M代表Marker;1代表16SrRNA基因产物。
图4.摩氏假单胞菌923对15种不同的水稻条斑病菌(X.oryzae pv.oryzicola,Xoc):A-O依次为RS105、JSB1-39、AHB1-58、YNB01-3、YNB0-17、RSGD10、ZJB01-25、HNB3-17、RS85、HNB8-47、HANB1-19、JSB3-28、AHB3-7、HANB12-26、RS63的拮抗效果图。
图5.摩氏假单胞菌923对12种不同的水稻白叶枯病菌(X.oryzae pv.oryzae,Xoo):A-L依次为PXO99A、YC18、YC11、YC7、XZ35、LYG46、YC2、AH1、8569、JL1、JL4、JL3的拮抗效果图。
图6.摩氏假单胞菌923对菜豆细菌性疫病菌(X.campestris pv.phaseoli)的拮抗效果图。
图7.摩氏假单胞菌923对大豆斑疹病菌(X.axonopodis pv.glycines)的拮抗效果图。
图8.摩氏假单胞菌923对豌豆细菌性疫病菌(X.axonopodis pv.vignicola)的拮抗效果图。
图9.摩氏假单胞菌923对香蕉细菌性青枯病菌(X.campestris pv.musacearum)的拮抗效果图。
图10.摩氏假单胞菌923对核桃黑斑病菌(X.campestris pv.juglandis)的拮抗效果图。
图11.摩氏假单胞菌923对番茄青枯病菌(Ralstonia solanacearum)的拮抗效果图。
图12.摩氏假单胞菌923对水稻稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的拮抗效果图,其中,A:稻瘟病菌(CK)B:摩氏假单胞菌923与稻瘟病菌的对峙培养效果图。
图13.摩氏假单胞菌923对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)的拮抗效果图,其中,A:小麦赤霉病菌(CK)B:摩氏假单胞菌923与赤霉病菌的对峙培养效果图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。
以下实施例中所用的菌种培养基如下:
牛肉膏蛋白胨培养基NA(g/L):牛肉浸膏3g,多聚蛋白胨5g,蔗糖10g,酵母粉1g,琼脂粉15g,加入水溶解,最后定容至1000mL,调节pH 7.0-7.2,分装后高压灭菌(121℃、20min)。
改良金氏(King)B培养基(g/L),简称KB培养基:蛋白胨20g,甘油10mL,K2HPO21.5g,MgSO4·7H2O 1.5g,琼脂粉18g,用无菌蒸馏水定容至1000mL,pH 7.0-7.2,高压灭菌(121℃、20min)。
PDA固体培养基(g/L):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH 7.0-7.2,高压灭菌(121℃、10min)。
实施例1假单胞菌923的分离、筛选与纯化
实验步骤如下:
1、土壤来源
上海市奉贤区未收割水稻田根际土壤
2、菌株的获得
(1)土样采集
Z字形5点采样法进行土样采集:每点采集200g土样,将按照Z形采取的5个点的土样混合均匀,以四分法取200g装入灭菌袋中,作为一个土样。每块地采集3个土样作为重复。记录好采样的时间、地点和种类。采集完成的土样置于4℃冰箱中保存,以备细菌筛选所用。
(2)菌株的分离
采用平板稀释法:每个土样称取10g放至无菌三角锥形瓶中,并加入90mL无菌水,然后置于200rpm,28℃摇床中振荡15min,取出三角瓶在室温中静置5min,制成土壤菌悬液原液。吸取土壤菌悬液原液于离心管中,进行梯度稀释,分别得到100、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,共7个梯度的菌悬液稀释液。从7个稀释度溶液中各取200μL,均匀涂布于KB平板上,每个梯度3个重复。置入28℃生化培养箱倒置培养24h,观察。
(3)拮抗菌的筛选
采用平板对峙培养方法:以水稻条斑病菌RS105和水稻白叶枯病菌PXO99A为指示病原菌,分别接种在NA液体培养基中,28℃、180rpm摇床中培养12h,吸取200μL菌悬液与NA固体培养基充分混匀后,倒板,然后在NA平板上匀称的粘上直径为6mm的滤纸片,每片滤纸点接5μL的供试菌(OD600约2.0),每个处理三个重复,待晾干后,置于28℃的生化培养箱中倒置培养24h,观察是否有抑菌圈出现,在实施方式中,以在20ml NA平板上产生抑菌圈最大的菌落作为产生明显抑菌圈的菌落,记录菌株编号,用于后续研究。
(4)菌株纯化与保存
挑取抑菌效果明显的菌落,在NA平板上进行划线纯化,置于28℃生化培养箱,倒置培养12h,挑取单菌落,编号。将菌株接种在NA液体培养基中,在28℃、180rpm摇床中培养12h后,吸取1mL菌液与1mL 50%的无菌甘油,轻轻振荡混匀,置于-80℃长期保存。
实施例2假单胞菌923的16S rRNA基因鉴定
提取假单胞菌923的基因组DNA,将其作为PCR模板,以27F 5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’和1492R 5’-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3’为引物;在50μL PCR反应体系中,按表1依次加入下述试剂,进行PCR反应:
表1 Taq聚合酶链式反应体系
Figure BDA0001744550460000071
PCR反应基本条件为:94℃预变性3min,94℃变性30s,56℃退火30s,72℃延伸90s(1kb/min),72℃预延伸8min,4℃保存,共30个循环。反应结束后,PCR产物均通过1%琼脂糖凝胶电泳检验,利用凝胶成像仪检测并记录结果(见附图3)。将PCR原液送铂尚生物技术(上海)有限公司进行测序。测序结果运用DNA Star进行分析,并在NCBI网站上进行BLAST比对,确定近缘株细菌的种属。
结果显示:菌株923与P.mosselii具有99.6%的相似度。使用MEGA6.0构建系统发育树,结果见附图2。
实施例3摩氏假单胞菌923的生理生化鉴定
本发明的摩氏假单胞菌923的生理生化特征为:能够产生荧光色素,能够分泌精氨酸双水解酶和蛋白酶,不能水解脲酶和β-半乳糖甙酶;能够同化葡萄糖、甘露糖、甘露醇、N-乙酰-葡萄糖胺和苯乙酸,不能同化阿拉伯糖、麦芽糖、葡萄糖酸盐、癸酸、已二酸、苹果酸、柠檬酸;能够利用糊精、吐温40、L-阿拉伯糖、D-果糖、α-D-葡萄糖、D-甘露醇等53种碳源,见表2和表3。
表2菌株923生理生化特性–酶活、碳源同化
Figure BDA0001744550460000072
Figure BDA0001744550460000081
+:阳性反应;-:阴性反应;
表3菌株923生理生化特性—利用碳源产酸
Figure BDA0001744550460000082
Figure BDA0001744550460000091
Figure BDA0001744550460000101
+:阳性反应;-:阴性反应;W:弱阳性反应
实施例4摩氏假单胞菌923的拮抗谱测定
(1)摩氏假单胞菌923对15种水稻条斑病菌的拮抗活性测定
将15种水稻条斑病菌和供试假单胞菌923分别接种于NA液体培养基中,28℃、180rpm摇床中培养12h后,统一OD600均为2.0;分别吸取200μL对应的病原菌液与NA固体培养基充分混匀后,倒板,然后在NA平板上匀称的粘上直径为6mm的滤纸片,每片滤纸点接5μL的供试假单胞菌923,每个处理三个重复,待晾干后,置于28℃的生化培养箱中倒置培养24h。如图4,观察是否有抑菌圈出现,并记录抑菌圈大小和计算相对抑菌率(表4)。
表4摩氏假单胞菌923对不同水稻条斑病菌的抑菌效果
Figure BDA0001744550460000102
(2)摩氏假单胞菌923对12种水稻白叶枯病菌的拮抗活性测定
将12种水稻白叶枯病菌和供试假单胞菌923分别接种于NA液体培养基中,28℃、180rpm摇床中培养12h后,统一OD600均为2.0;分别吸取200μL对应的病原菌液与NA固体培养基充分混匀后,倒板,然后在NA平板上匀称的粘上直径为6mm的滤纸片,每片滤纸点接5μL的供试假单胞菌923,每个处理三个重复,待晾干后,置于28℃的生化培养箱中倒置培养24h。如图5,观察是否有抑菌圈出现,并记录抑菌圈大小和计算相对抑菌率(表5)。
表5摩氏假单胞菌923对不同水稻白叶枯病菌的抑菌效果
Figure BDA0001744550460000111
(3)摩氏假单胞菌923对6种病原细菌的拮抗活性测定
将6种病原细菌和供试假单胞菌923分别接种于NA液体培养基中,28℃、180rpm摇床中培养12h后,统一OD600均为2.0;分别吸取200μL对应的病原菌液与NA固体培养基充分混匀后,倒板,然后在NA平板上匀称的粘上直径为6mm的滤纸片,每片滤纸点接5μL的供试假单胞菌923,每个处理三个重复,待晾干后,置于28℃的生化培养箱中倒置培养24h。如图6-11,观察是否有抑菌圈出现,并记录抑菌圈大小和计算相对抑菌率(表6)。
表6摩氏假单胞菌923对6种病原细菌的抑菌效果
Figure BDA0001744550460000112
(4)摩氏假单胞菌923对真菌性病害的拮抗活性测定
采用平板对峙培养法,将小麦赤霉病菌和水稻稻瘟病菌分别在PDA培养基上培养,待病原菌长满平板后,用打孔器在平板边缘打取菌块备用,取其中一个菌饼,菌丝面朝下,接种到新的PDA平板中央,采用十字交叉法在菌饼四周等距离(30mm)粘上相同大小的滤纸片(6mm),每片滤纸上点接上5μL的供试假单胞菌923,每个处理3个重复,同时,以不接假单胞菌只接病原真菌的平板为对照。在28℃生化培养箱中进行倒置培养,5天后观察并记录抑菌现象,抑菌情况如附图12和附图13。结果显示,假单胞菌923对稻瘟病菌具有显著的抑制效果。
由此,利用本发明提供的一株摩氏假单胞菌923,对稻黄单胞菌的两个致病变种:水稻条斑病菌Xoo和水稻白叶枯病菌Xoc均具有显著的拮抗作用,同时对多种黄单胞属的其他植物病原细菌和稻瘟病菌均表现较强的抑制效果,具有广谱的抑菌能力。为细菌性病害和真菌性病害的生物防治提供了新资源。
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改,并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此,本发明不限于上述实施例,本领域技术人员根据本发明的揭示,不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 上海交通大学
<120> 对稻黄单胞菌和稻瘟病菌具有拮抗作用的假单胞菌及应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1415
<212> DNA
<213> 假单胞菌(P. mosselii)
<400> 1
accatgcaag tcgagcggat gacgggagct tgctccttga ttcagcggcg gacgggtgag 60
taatgcctag gaatctgcct ggtagtgggg gacaacgttt cgaaaggaac gctaataccg 120
catacgtcct acgggagaaa gcaggggacc ttcgggcctt gcgctatcag atgagcctag 180
gtcggattag ctagtaggtg aggtaatggc tcacctaggc gacgatccgt aactggtctg 240
agaggatgat cagtcacact ggaactgaga cacggtccag actcctacgg gaggcagcag 300
tggggaatat tggacaatgg gcgaaagcct gatccagcca tgccgcgtgt gtgaagaagg 360
tcttcggatt gtaaagcact ttaagttggg aggaagggca gtaagctaat accttgctgt 420
tttgacgtta ccgacagaat aagcaccggc taactctgtg ccagcagccg cggtaataca 480
gagggtgcaa gcgttaatcg gaattactgg gcgtaaagcg cgcgtaggtg gttcgttaag 540
ttggatgtga aagccccggg ctcaacctgg gaactgcatc caaaactggc gagctagagt 600
atggtagagg gtggtggaat ttcctgtgta gcggtgaaat gcgtagatat aggaaggaac 660
accagtggcg aaggcgacca cctggactga tactgacact gaggtgcgaa agcgtgggga 720
gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac gatgtcaact agccgttgga 780
atccttgaga ttttagtggc gcagctaacg cattaagttg accgcctggg gagtacggcc 840
gcaaggttaa aactcaaatg aattgacggg ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt 900
aattcgaagc aacgcgaaga accttaccag gccttgacat gcagagaact ttccagagat 960
ggattggtgc cttcgggaac tctgacacag gtgctgcatg gctgtcgtca gctcgtgtcg 1020
tgagatgttg ggttaagtcc cgtaacgagc gcaacccttg tccttagtta ccagcacgtt 1080
atggtgggca ctctaaggag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca 1140
agtcatcatg gcccttacgg cctgggctac acacgtgcta caatggtcgg tacagagggt 1200
tgccaagccg cgaggtggag ctaatctcac aaaaccgatc gtagtccgga tcgcagtctg 1260
caactcgact gcgtgaagtc ggaatcgcta gtaatcgcaa atcagaatgt tgcggtgaat 1320
acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtgggttg caccagaagt 1380
agcatagtct aaccttcgag agaggcggtt gcaca 1415

Claims (10)

1.一株假单胞菌,其特征在于,命名为摩氏假单胞菌(Pseudomonas mosselii)923,所述摩氏假单胞菌923保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号是:CCTCC No:M2018252,保藏日期为2018年5月7日,保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内,武汉大学保藏中心。
2.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923的16SrRNA基因如SEQ ID No.1所示。
3.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923的平板培养菌落为乳白色,表面湿润、突起、边缘圆整,能够产生荧光色素,所述摩氏假单胞菌923在光学显微镜下观察:细胞呈杆状,革兰氏染色阴性。
4.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923对稻黄单胞菌具有拮抗作用。
5.根据权利要求4所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述稻黄单胞菌包括水稻条斑病菌和水稻白叶枯病菌。
6.根据权利要求5所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述水稻条斑病菌包括RS105、JSB1-39、AHB1-58、YNB01-3、YNB0-17、RSGD10、ZJB01-25、HNB3-17、RS85、HNB8-47、HANB1-19、JSB3-28、AHB3-7、HANB12-26和RS63,所述水稻白叶枯病菌包括PXO99A、YC18、YC11、YC7、XZ35、LYG46、YC2、AH1、8569、JL1、JL4和JL3。
7.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923对水稻条斑病菌和水稻白叶枯病菌同时具有拮抗活性。
8.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923对黄单胞属的植物病原细菌具有拮抗活性。
9.根据权利要求8所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述黄单胞属的植物病原细菌包括菜豆细菌性疫病菌、大豆斑疹病菌、豌豆细菌性疫病菌、香蕉细菌性青枯病菌和核桃黑斑病菌。
10.根据权利要求1所述的一株假单胞菌,其特征在于,所述摩氏假单胞菌923对稻瘟病菌具有拮抗活性。
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CN110079470B (zh) * 2019-03-04 2020-11-03 宁波城市职业技术学院 一株具有抑菌活性的假单胞菌
CN110331112B (zh) * 2019-07-30 2022-03-18 宁夏农林科学院植物保护研究所(宁夏植物病虫害防治重点实验室) 一株防治稻瘟病的荧光假单胞菌及其应用
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CN112048458B (zh) * 2020-10-16 2022-03-04 宁夏农林科学院植物保护研究所(宁夏植物病虫害防治重点实验室) 一种防治稻瘟病的嗜碱假单胞菌菌株、菌剂及其应用
CN112359000B (zh) * 2020-11-27 2022-05-10 江苏省农业科学院 一株高效生防假单胞菌及其在水稻病害防治中的应用
CN116083309A (zh) * 2023-01-12 2023-05-09 华南农业大学 一株假单胞菌l40-14及其在防治桑树病害方面的应用
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KR101556544B1 (ko) * 2013-12-27 2015-10-01 경북대학교 산학협력단 ε-카프로락탐 분해능을 가지는 슈도모나스 모셀리 SJ10 및 이를 이용한 ε-카프로락탐의 분해방법
KR20170005237A (ko) * 2015-07-01 2017-01-12 경기대학교 산학협력단 적조 제어를 위한 수처리 장치 및 방법
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