CN108904868A - 一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，步骤包括：(1)肝素化处理：将敷料利用光诱发剂BP溶液处理后在高压汞灯下照射反应，随后将敷料与单体水溶液在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料与肝素溶液反应；(2)抗菌肽偶联反应：将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照射反应后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料加入链霉亲和素溶液进行反应；(3)银离子包埋反应：将敷料浸入生物素化的抗菌肽和银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育。本发明提供的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，提供了一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，制备得到的敷料具有多重长效抗菌能力，且能长效抗凝。

Description

一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法
技术领域
本发明涉及新材料、医疗器械领域，具体涉及一种双联抗菌及抗凝敷料的 制备方法。
背景技术
目前单效抗菌材料半衰期短，抗菌持久力差，金属离子浓度随时间推移而 降低，无法保证长期创面的长效抗菌，现有技术是金属银粒子包埋的抗菌材料 ；目前敷料由于血液在孔径中残留会造成凝固而堵塞，使得材料应用寿命大大 降低，因此解决多效抗菌和抗凝，使敷料同时具有多重长效抗菌能力，且能长 效抗凝是整个发明的关键。
发明内容
本发明的所要解决的技术问题在于提供一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方 法，制备得到的敷料具有多重长效抗菌能力，且能长效抗凝。
本发明采用以下技术方案解决上述技术问题的：
一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，包括以下步骤：
(1)肝素化处理：将敷料利用光诱发剂BP溶液处理后在高压汞灯下照射 反应，随后将敷料与单体水溶液在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料与肝 素溶液反应；
(2)抗菌肽偶联反应：将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照 射反应后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料 加入链霉亲和素溶液进行反应；
(3)银离子包埋反应：将敷料浸入生物素化的抗菌肽和银离子的磷酸盐缓 冲液中常温震荡孵育。
进一步地，所述肝素化处理包括以下步骤：将敷料进行第一次清洗后干燥 至硬化，将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照射反应后进行第二次 清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应； 将反应后的敷料进行超声清洗，然后干燥至恒重，加入肝素溶液反应后利用纯 水超声冲洗。
更进一步地，所述干燥温度为30-80℃。
进一步地，所述肝素溶液的溶剂包括水或甲醇中的一种或两种，浓度为 10-60％；所述加入肝素溶液反应温度为30-60℃反应，反应时间为2-24h。
进一步地，所述抗菌肽偶联反应包括以下步骤：将经过肝素化处理得到的 敷料进行第三次清洗后干燥至硬化；将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞 灯下照射反应后进行第四次清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入单体水溶液中， 在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料进行超声清洗，然后干燥至恒重，加 入链霉亲和素溶液反应后利用纯水超声冲洗，甩干。
更进一步地，所述干燥温度为30-80℃。
进一步地，所述链霉亲和素溶液浓度为10-60％；所述加入肝素溶液反应温 度为30-60℃反应，反应时间为2-24h。
进一步地，所述银离子包埋反应包括以下步骤：将经过抗菌肽偶联反应得 到的敷料浸入含有0.01-0.8M生物素化的抗菌肽和0.01％-0.1％浓度银离子的磷 酸盐缓冲液中常温震荡孵育0.5-3h，最后纯水超声、冲洗、甩干。
进一步地，所述敷料为医用高分子敷料，包括聚氨酯海绵或聚乙烯醇海绵 ；
所述光诱发剂BP溶液为含有0.02-0.8M的BP的甲醇溶液，所述光诱发剂 BP包括苯乙酮、二苯甲酮、(N,N-二甲胺基)二苯甲酮中的一种或几种；
所述单体水溶液的浓度为0.01-0.5M；所述单体包括丙烯酸、丙烯酸酯、丙 烯酸类缩水甘油酯类似物、聚乙二醇、及甲基丙烯酸-β-羟基酯中的一种或几种。
更进一步地，所述丙烯酸类缩水甘油酯类似物包括甲基丙烯酸缩水甘油酯。
进一步地，所述高压汞灯下照射反应的条件包括：反应在氮气氛围下进行， 反应时间为30-120min，高压汞灯的功率为300-500W，波长为220-365nm。
进一步地，所述第一次清洗的清洗方式包括：首先用甲醇和水的混合溶液 进行超声清洗，然后再用水清洗；所述第二次清洗的清洗方式包括：首先用甲 醇液进行超声清洗，然后再用水清洗。
进一步地，所述第三次清洗方法包括：首先使用甲醇和水的混合溶液超声 清洗，再利用纯水清洗后甩干2次；所述第四次清洗方法包括：首先使用甲醇 和水的混合液进行超声清洗，再用纯水清洗。
本发明的优点在于：
1、双联长效抗菌，增强抗菌效价和延长抗菌时间，可不依赖抗生素；
2、有效降低孔径堵塞，大大延长敷料使用时间，降低患者使用成本；
3、材料无免疫原性，抗菌肽生物相容性好。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明，以下实施例旨在说明本发 明而不是对本发明的进一步限定。
实施例1
一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，步骤包括：
(1)肝素化处理：将敷料进行第一次清洗，首先用甲醇和水的混合溶液进 行超声清洗，以除去敷料孔的有机污物，然后再用水清洗，清洗后在45℃下干 燥至硬化，将敷料加入含有0.4M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为220-365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为 70min，然后进行第二次清洗，首先用甲醇液进行超声清洗，然后再用水清洗， 清洗后在45℃下干燥至硬化，随后将敷料浸入0.25M的单体水溶液中，在功率 为400W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反 应时间为70min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重， 最后加入浓度为35％的肝素溶液反应，反应温度为45℃反应，反应时间为13h ，反应后利用纯水超声冲洗；所述肝素溶液的溶剂包括水或甲醇中的一种或两 种，浓度为35％；
(2)抗菌肽偶联反应：将经过肝素化处理得到的敷料进行第三次清洗，首 先使用甲醇和水的混合溶液超声清洗，再利用纯水清洗后甩干2次；，清洗后干 燥至硬化；将敷料加入含有0.4M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为220-365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为 70min，然后进行第四次清洗，首先使用甲醇和水的混合液进行超声清洗，再用 纯水清洗，清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入0.25M的单体水溶液中，在功 率为400W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为70min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重 ，最后加入浓度为35％的链霉亲和素溶液反应，反应温度为45℃反应，反应时 间为13h，反应后利用纯水超声冲洗，甩干；所述加入肝素溶液反应温度为45 ℃反应，反应时间为13h；
(3)银离子包埋反应：将经过抗菌肽偶联反应得到的敷料浸入含有0.4M 生物素化的抗菌肽和0.05％浓度银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育1.5h，最 后纯水超声、冲洗、甩干。
所述敷料为医用高分子敷料，具体是聚氨酯海绵；
所述光诱发剂BP为苯乙酮、二苯甲酮和(N,N-二甲胺基)二苯甲酮的混合物 ；
所述单体为丙烯酸、丙烯酸酯、甲基丙烯酸缩水甘油酯、聚乙二醇、及甲 基丙烯酸-β-羟基酯中的混合物。
实施例2
一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，步骤包括：
(1)肝素化处理：将敷料进行第一次清洗，首先用甲醇和水的混合溶液进 行超声清洗，以除去敷料孔的有机污物，然后再用水清洗，清洗后在30℃下干 燥至硬化，将敷料加入含有0.02M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为220-365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为 30min，然后进行第二次清洗，首先用甲醇液进行超声清洗，然后再用水清洗， 清洗后在30℃下干燥至硬化，随后将敷料浸入0.01M的单体水溶液中，在功率 为400W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为30min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重， 最后加入浓度为10％的肝素溶液反应，反应温度为30℃反应，反应时间为2h， 反应后利用纯水超声冲洗；所述肝素溶液的溶剂包括水或甲醇中的一种或两种 ，浓度为10％；
(2)抗菌肽偶联反应：将经过肝素化处理得到的敷料进行第三次清洗，首 先使用甲醇和水的混合溶液超声清洗，再利用纯水清洗后甩干2次；，清洗后干 燥至硬化；将敷料加入含有0.02M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为220-365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为 30min，然后进行第四次清洗，首先使用甲醇和水的混合液进行超声清洗，再用 纯水清洗，清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入0.01M的单体水溶液中，在功 率为400W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为30min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重 ，最后加入浓度为10％的链霉亲和素溶液反应，反应温度为30℃反应，反应时 间为2h，反应后利用纯水超声冲洗，甩干；所述加入肝素溶液反应温度为30 ℃反应，反应时间为2h；
(3)银离子包埋反应：将经过抗菌肽偶联反应得到的敷料浸入含有0.01生 物素化的抗菌肽和0.01％浓度银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育0.5，最后 纯水超声、冲洗、甩干。
所述敷料为医用高分子敷料，具体是聚乙烯醇海绵；
所述光诱发剂BP为苯乙酮；
所述单体为丙烯酸、丙烯酸酯、聚乙二醇及甲基丙烯酸-β-羟基酯的混合物。
实施例3
一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，步骤包括：
(1)肝素化处理：将敷料进行第一次清洗，首先用甲醇和水的混合溶液进 行超声清洗，以除去敷料孔的有机污物，然后再用水清洗，清洗后在60℃下干 燥至硬化，将敷料加入含有0.8M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为120min ，然后进行第二次清洗，首先用甲醇液进行超声清洗，然后再用水清洗，清洗 后在60℃下干燥至硬化，随后将敷料浸入0.5M的单体水溶液中，在功率为400 W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为120min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重，最后加 入浓度为60％的肝素溶液反应，反应温度为60℃反应，反应时间为24h，反应 后利用纯水超声冲洗；所述肝素溶液的溶剂包括水或甲醇中的一种或两种，浓 度为60％；
(2)抗菌肽偶联反应：将经过肝素化处理得到的敷料进行第三次清洗，首 先使用甲醇和水的混合溶液超声清洗，再利用纯水清洗后甩干2次；，清洗后干 燥至硬化；将敷料加入含有0.8M的BP的甲醇溶液中，在功率为400W，波长 为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间为120min ，然后进行第四次清洗，首先使用甲醇和水的混合液进行超声清洗，再用纯水 清洗，清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入0.5M的单体水溶液中，在功率为400 W，波长为365nm的高压汞灯下照射反应，反应在氮气氛围下进行，反应时间 为120min；将反应后的敷料进行超声清洗，然后在60℃下干燥至恒重，最后加 入浓度为60％的链霉亲和素溶液反应，反应温度为60℃反应，反应时间为24h ，反应后利用纯水超声冲洗，甩干；所述加入肝素溶液反应温度为60℃反应， 反应时间为24h；
(3)银离子包埋反应：将经过抗菌肽偶联反应得到的敷料浸入含有0.8M 生物素化的抗菌肽和0.1％浓度银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育3h，最后 纯水超声、冲洗、甩干。
所述敷料为医用高分子敷料，具体是聚氨酯海绵；
所述光诱发剂BP为二苯甲酮、(N,N-二甲胺基)二苯甲酮的混合物；
所述单体丙烯酸、甲基丙烯酸缩水甘油酯、聚乙二醇、及甲基丙烯酸-β- 羟基酯中的混合物。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述 的技术方案；本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或 等同替换；而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵 盖在本发明的权利要求范围中。

Claims (10)

1.一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)肝素化处理：将敷料利用光诱发剂BP溶液处理后在高压汞灯下照射反应，随后将敷料与单体水溶液在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料与肝素溶液反应；
(2)抗菌肽偶联反应：将经过肝素化处理得到的敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照射反应后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料加入链霉亲和素溶液进行反应；
(3)银离子包埋反应：将经过抗菌肽偶联反应得到的敷料浸入生物素化的抗菌肽和银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育，即得到双联抗菌及抗凝敷料。
2.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述肝素化处理包括以下步骤：将敷料进行第一次清洗后干燥至硬化，将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照射反应后进行第二次清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料进行超声清洗，然后干燥至恒重，加入肝素溶液反应后利用纯水超声冲洗。
3.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述肝素溶液的溶剂包括水或甲醇中的一种或两种，浓度为10-60％；所述加入肝素溶液反应温度为30-60℃反应，反应时间为2-24h。
4.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述抗菌肽偶联反应包括以下步骤：将经过肝素化处理得到的敷料进行第三次清洗后干燥至硬化；将敷料加入光诱发剂BP溶液中，在高压汞灯下照射反应后进行第四次清洗后干燥至硬化，随后将敷料浸入单体水溶液中，在高压汞灯下照射反应；将反应后的敷料进行超声清洗，然后干燥至恒重，加入链霉亲和素溶液反应后利用纯水超声冲洗，甩干。
5.根据权利要求1所述的具有一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述链霉亲和素溶液浓度为10-60％；所述加入肝素溶液反应温度为30-60℃反应，反应时间为2-24h。
6.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述银离子包埋反应包括以下步骤：将经过抗菌肽偶联反应得到的敷料浸入含有0.01-0.8M生物素化的抗菌肽和0.01％-0.1％浓度银离子的磷酸盐缓冲液中常温震荡孵育0.5-3h，最后纯水超声、冲洗、甩干。
7.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述敷料为医用高分子敷料，包括聚氨酯海绵或聚乙烯醇海绵；
所述光诱发剂BP溶液为含有0.02-0.8M的BP的甲醇溶液，所述光诱发剂BP包括苯乙酮、二苯甲酮、(N,N-二甲胺基)二苯甲酮中的一种或几种；
所述单体水溶液的浓度为0.01-0.5M；所述单体包括丙烯酸、丙烯酸酯、丙烯酸类缩水甘油酯类似物、聚乙二醇、及甲基丙烯酸-β-羟基酯中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述高压汞灯下照射反应的条件包括：反应在氮气氛围下进行，反应时间为30-120min，高压汞灯的功率为300-500W，波长为220-365nm。
9.根据权利要求2所述的一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述第一次清洗的清洗方式包括：首先用甲醇和水的混合溶液进行超声清洗，然后再用水清洗；所述第二次清洗的清洗方式包括：首先用甲醇液进行超声清洗，然后再用水清洗。
10.根据权利要求4所述的具有一种双联抗菌及抗凝敷料的制备方法，其特征在于，所述第三次清洗方法包括：首先使用甲醇和水的混合溶液超声清洗，再利用纯水清洗后甩干2次；所述第四次清洗方法包括：首先使用甲醇和水的混合液进行超声清洗，再用纯水清洗。
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