CN108904685A - 贝母总生物碱提取物在制备防治桥本甲状腺炎的药物或保健品中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了贝母总生物碱提取物在制备预防和治疗桥本甲状腺炎的药物或保健品中的新用途,所述贝母总生物碱为川贝母总生物碱提取物和/或伊贝母总生物碱提取物。本发明证明了贝母总生物碱在治疗桥本甲状腺炎方面具有良好的药效,以其制备治桥本甲状腺炎的药物或保健品,具有良好的临床应用前景。
Description
技术领域
本发明属于中药领域,涉及中药提取物的用途,具体涉及贝母总生物碱提取物在制备防治桥本甲状腺炎的药物或保健品中的应用。
背景技术
桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis,HT),也称慢性淋巴细胞性甲状腺炎(chronic lymphocytic thyroiditis,CLT)、自身免疫性甲状腺炎和桥本氏甲状腺炎。桥本甲状腺炎是一种以自身甲状腺组织为抗原,甲状腺球蛋白抗体(Thyroglobulin Antibody,TgAb) 和甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroid Peroxidase Antibody,TPOAb) 为抗体的慢性自身免疫性疾病。甲状腺功能减退是桥本甲状腺炎最为常见的病因,以大量淋巴细胞浸润于甲状腺组织、滤泡细胞破坏为典型病理特征的免疫性疾病,血清学检测表现为甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和游离甲状腺素(FT4)浓度的显著升高。
桥本甲状腺炎多发生于30~50岁的女性,男女比例1:8左右,现代医学对其病因的阐述尚不明确。目前,西医治疗本病主要是采用甲状腺素代替治疗法、免疫治疗法及手术等治疗手段来缓解甲状腺局部症状,但对患者的全身症状疗效不佳。其中,最常规疗法为激素替代疗法,而激素没有免疫调节作用,不能降低甲状腺自身抗体滴度,并且患者需要终身服药。其次,患者需要不断的体检,根据甲状腺功能的指标调整服用激素的剂量,不良反应多,停药易反复。因此,寻求新的桥本甲状腺炎有效的药物具有明显的社会和经济价值。
《中国药典》(2015版)所记载的川贝母为百合科植物川贝母本品为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don、暗紫贝母 Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C. Hsia、甘肃贝母 Fritillaria przezvalskii Maxim.、梭砂贝母FritillariadelavayiFranch.、太白贝母 Fritillaria taipaiensis P. Y. Li或瓦布贝母 Fritillaria unibracteata Hsiao et K. C Hsiavan wabuensis(Y. Tang et S. C.Yue) Z. D. Liu, S. Wang et S. C. Chen的干燥鳞茎。《中国药典》(2015版)所记载的伊贝母为百合科植物新疆贝母Fritillaria walujewii Regel 或伊犁贝母 Fritillaria paLlidiflora Schrenk 的干燥鱗茎。川贝母和伊贝母的已知用途有清热润肺,化痰、止咳、平喘、降压、抗肿瘤、正性肌力作用、抗溃疡、抗炎、抗菌等作用,可以治疗哮喘、咳嗽、癌症、高血压、胃溃疡等疾病。迄今为止,尚未有报道贝母及其总生物碱提取物在防治桥本甲状腺炎上的用途。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供了贝母总生物碱提取物在制备预防和治疗桥本甲状腺炎的药物或保健品中的新用途。
药理研究表明,发明人用贝母总生物碱提取物预防和治疗桥本甲状腺炎,取得了满意的效果,发现了贝母总生物碱提取物的新用途。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案:
本发明提供贝母总生物碱提取物在制备防治桥本甲状腺炎的药物或保健品中的用途。
所述贝母总生物碱提取物为川贝母总生物碱提取物和/或伊贝母总生物碱提取物。
所述贝母总生物碱提取物的总生物碱含量在10%以上。即所述川贝母总生物碱提取物的总生物碱含量在10%以上;所述伊贝母总生物碱提取物的总生物碱含量在10%以上。这里所述的总生物碱含量指贝母总生物碱提取物中总生物碱的含量,即贝母总生物碱提取物中含有非生物碱类成分,但生物碱是最主要成分;总生物碱测定方法按中药药典《中国药典》(2015 版)川贝母项下【含量测定】方法测定的生物碱含量。
本发明贝母总生物碱提取物是根据本领域的常规方法从中药川贝母和/或伊贝母中提取纯化。所述的提取加工工艺,可以使用现有技术公知的中药生物碱提取方法进行制备,例如但不限于冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取、超临界萃取等,以及进行组合如冷浸-渗漉,冷浸-超声波,冷浸-索氏提取,冷浸-热回流提取等提取方法。所述贝母总生物碱提取物的纯化主要根据公知中药生物碱纯化方法,例如但不限于柱层析、溶剂萃取、固相萃取、离子交换等方法。优选的,本发明所述贝母总生物碱提取物的制备方法采用如下步骤:将川贝母或伊贝母药材按1 ∶ 6质量比例加入75%乙醇水溶液中;采用连续回流提取法,乙醇提取2 次,每次提取时间2 h,过滤;合并滤液,于旋转蒸发仪上减压浓缩至干,以离子交换柱进一步纯化,即得。
所述防治桥本甲状腺炎的药物保健品是以川贝母总生物碱和/或伊贝母总生物碱为活性成分,加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。本发明所述贝母总生物碱提取物可以直接或与药学上可接受的药物载体按本领域的常规方法制成各种中药内服常规药剂用于预防和治疗桥本甲状腺炎中。
所述的药物制剂形式可以是任何可药用的剂型,这些剂型包括:片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂;优选口服剂型,如:胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。所述的口服剂型可含有常用的赋形剂,诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂,必要时可对片剂进行包衣。适宜的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂;适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物,例如羟基乙酸淀粉钠;适宜的润滑剂包括,例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠等。
动物实验结果证明,本发明川贝母总生物碱提取物和/或伊贝母总生物碱提取物具有明显的治疗桥本甲状腺炎的作用。本发明贝母总生物碱提取物经实验动物证明,安全性好,疗效佳,能有效地治疗桥本甲状腺炎,该贝母总生物碱提取物是一种改善临床症状效果好,毒副作用小,具有良好的临床应用前景的中药提取物。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
实施例1:不同含量的川贝母总生物碱提取物的制备
川贝母药材采自中国四川省,经鉴定为《中国药典》(2015 版)“川贝母”项下所载药材。将5kg 药材按1∶6 比例加入30L75%乙醇水溶液中,采用连续回流提取法,乙醇提取2 次,每次提取时间2 h,过滤。合并滤液,于旋转蒸发仪上减压浓缩至干,即得川贝母总生物碱提取物450g。以离子交换柱进一步纯化,根据纯化的次数,分别得到不同含量的川贝母总生物碱提取物C-1、C-2、C-3、C-4。再参照《中国药典》(2015 版)川贝母项下【含量测定】方法,以用紫外吸收法对川贝母总生物碱提取物进行含量测定。经测定,川贝母总生物碱提取物C-1、C-2、C-3、C-4的生物碱含量分别为10.5%、32.5%、55.6%、78.2%。
实施例2:不同含量的伊贝母总生物碱提取物的制备
伊贝母药材采自中国新疆地区,参照“实施例1” 的川贝母总生物碱提取物的制备方法提取并纯化,得到不同含量的伊贝母总生物碱提取物Y-1、Y-2、Y-3、Y-4,经测定, 伊贝母总生物碱提取物Y-1、Y-2、Y-3、Y-4的生物碱含量分别为11.2%、35.6%、53.2%、77.6%。
实施例3:不同含量的川贝母和伊贝母总生物碱提取物的制备
川贝母药材采自中国四川省,伊贝母药材采自中国新疆地区,两者各取一半,参照“实施例1” 的川贝母总生物碱提取物的制备方法提取并纯化,得到不同含量的川贝母和伊贝母混合总生物碱提取物H-1、H-2、H-3、H-4,经测定, 伊贝母总生物碱提取物H-1、H-2、H-3、H-4的生物碱含量分别为10.7%、32.6%、54.5%、78.8%。
实施例4:本发明川贝母总生物碱提取物和伊贝母总生物碱提取物对桥本甲状腺炎小鼠疗效的作用
取“实施例1”和“实施例2”所制备的川贝母总生物碱提取物C-1、C-2、C-3、C-4和伊贝母总生物碱提取物Y-1、Y-2、Y-3、Y-4为实验对象,以SPF级昆明小鼠(雌性,体重14~16 g,购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司)作为实验动物。所有小鼠随机分为2组:空白组(12只)、模型组(120只),其中模型组采用皮下多点注射甲状腺球蛋白(PTg)抗原加高碘的方法制作桥本甲状腺炎小鼠模型。模型组小鼠于皮下多点注射含PTg(0.25 mg/ml)的完全弗氏佐剂抗原0.2 mL/只,连续2周,每周1次。第3周起皮下注射含PTg(0.25 mg/ml)的不完全弗氏佐剂抗原0.2 mL/只,连续3周,每周1次。整个实验周期模型组和药物组小鼠每天给予0.05%的高碘饮用水,并注意避光。
桥本甲状腺炎小鼠模型建立之后,将模型小鼠随机分为模型组、阳性药组(雷公藤多苷片0.2mg/kg体重, 黄石飞云制药有限公司生产);给药组分别为C-1组、C-2组、 C-3组,C-4组、Y-1组、Y-2组、 Y-3组,Y-4组、每组12只,剂量均为400mg/kg;每组灌胃8周,每天1次,空白组与模型组灌胃等体积普通饮用水。实验结束,小鼠处理前禁食12 h,摘眼球取血,离心取血清备用;取小鼠甲状腺,用4%多聚甲醛固定、脱水、包埋,制成蜡块,采用HE染色进行形态学观察。采用化学发光法测定小鼠血清中的抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)指标。
病理结果表明:正常组小鼠甲状腺细胞排列布局整齐,滤泡楠圆形,染色呈淡红,无异常浸润;模型组甲状腺滤泡排列杂乱、大小不等,显示出被大量破坏或萎缩至扁平形状,染色淡红色,滤泡内可见浆细胞浸润,滤泡四周有明显淋巴细胞浸润,且淋巴细胞浸润了40%以上的甲状腺。阳性药组甲状腺其形态尚可,但在甲状腺细胞间、滤泡内存在淋巴细胞和浆细胞,约有淋巴细胞浸润了10%~40%的甲状腺组织;不同含量的川贝母总生物碱提取物和伊贝母总生物碱提取物组各组的小鼠甲状腺滤泡布局排列均较好,甲状腺细胞间均没有淋巴细胞浸润,细胞形态布局良好,滤泡形态规则其间均未见浆细胞浸润。另外,抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)等指标,见表1,结果表明,造模后TgAb和TPOAb有非常显著升高(P < 0.01),而采用C-1、C-2、 C-3,C-4、Y-1、Y-2、Y-3,Y-4治疗后两项指标均有非常显著下降(P < 0.01),且随着生物碱的含量升高效果越好。实验结果表明,本发明川贝母总生物碱提取物和伊贝母总生物碱提取物均具有明显的治疗桥本甲状腺炎的作用,且随着生物碱的含量升高效果越好。
表1 贝母总生物碱提取物对桥本氏甲状腺模型大鼠TgAb和TPOAb影响结果
药物组别 | n | TgAb(pg/mL) | TPOAb(ng/mL) |
正常对照 | 12 | 17.28±1.88** | 1.54±0.17** |
模型组 | 12 | 45.38±2.57 | 4.52±0.56 |
阳性药组 | 12 | 26.18±2.06** | 3.42±0.23** |
C-4 | 12 | 18.43±1.22** | 1.60±0.35** |
C-3 | 12 | 19.22±2.33** | 1.72±0.16* |
C-2 | 12 | 21.17±1.49** | 1.83±0.17** |
C-1 | 12 | 22.15±1.25** | 1.91±0.27** |
Y-4 | 12 | 19.22±1.35** | 1.67±0.42** |
Y-3 | 12 | 19.48±1.58** | 1.79±0.26** |
Y-2 | 12 | 21.67±1.24** | 1.84±0.41** |
Y-1 | 12 | 23.14±1.44** | 2.11±0.32** |
注:**与模型组较有非常显著性差异, P < 0.01;
实施例5. 川贝母总生物碱提取物片剂的制备
成分 | 每片用量 |
川贝母总生物碱提取物 | 100 mg |
微晶纤维素 | 37.45 mg |
微粉硅胶 | 10.5 mg |
硬脂酸 | 17.5 mg |
乳糖 | 10.5 mg |
硬脂酸镁 | 1.05 mg |
按处方量将川贝母总生物碱提取物(按实施例1方法制得)加入微晶纤维素、微粉硅胶、硬脂酸、乳糖混匀,制成颗粒,加入硬脂酸镁,混匀,压片,即得(每片含生物碱 70mg)。成人推荐口服用量1-4片/次,每日2-3次。
实施例6. 伊贝母总生物碱提取物胶囊的制备
成分 | 每粒用量 |
伊贝母总生物碱提取物 | 100 mg |
微晶纤维素 | 37.45 mg |
微粉硅胶 | 10.5 mg |
硬脂酸 | 17.5 mg |
乳糖 | 10.5 mg |
按处方量将伊贝母总生物碱提取物(按实施例2方法制得)加入微晶纤维素、微粉硅胶、硬脂酸、乳糖混匀,制成颗粒后,填装入0号硬胶囊壳,打光即制得 (每粒胶囊含总生物碱70mg)。成人推荐口服用量1-4粒/次,每日2-3次。
实施例7. 川贝母和伊贝母混合总生物碱提取物胶囊的制备
成分 | 每粒用量 |
川贝母和伊贝母混合总生物碱提取物 | 100 mg |
微晶纤维素 | 37.45 mg |
微粉硅胶 | 10.5 mg |
硬脂酸 | 17.5 mg |
乳糖 | 10.5 mg |
按处方量将川贝母和伊贝母混合总生物碱提取物(按实施例3方法制得)加入微晶纤维素、微粉硅胶、硬脂酸、乳糖混匀,制成颗粒后,填装入0号硬胶囊壳,打光即制得 (每粒胶囊含总生物碱70mg)。成人推荐口服用量1-4粒/次,每日2-3次。
Claims (5)
1.贝母总生物碱提取物在制备防治桥本甲状腺炎的药物或保健品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述贝母总生物碱为川贝母总生物碱提取物和/或伊贝母总生物碱提取物。
3.根据权利要求1、2所述的用途,其特征在于:所述川贝母总生物碱提取物的总生物碱含量在10%以上;所述伊贝母总生物碱提取物的总生物碱含量在10%以上。
4.根据权利要求1、2、3所述的用途,其特征在于:所述防治桥本甲状腺炎的药物或保健品是以川贝母总生物碱或伊贝母总生物碱为活性成分,加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
5. 根据权利要求1、2、3、4所述的用途,其特征在于:所述贝母总生物碱提取物的制备方法采用如下步骤:将川贝母或伊贝母药材按1 ∶ 6质量比例加入75%乙醇水溶液中;采用连续回流提取法,乙醇提取2 次,每次提取时间2 h,过滤;合并滤液,于旋转蒸发仪上减压浓缩至干,以离子交换柱进一步纯化,即得。
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