CN108888594A - 静脉注射给药的纳米脂肪乳剂 - Google Patents

Abstract

本发明揭示了一种静脉注射给药的纳米脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：桂利嗪，油成分，维生素E,司盘80，卵磷脂，柠檬酸三铵，和水，其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.15倍或更多，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。该乳剂中的活性成分(桂利嗪)的稳定性及乳剂稳定性被提高，并具有优异的透明度。

Description

静脉注射给药的纳米脂肪乳剂

【技术领域】

本发明涉及可通过静脉注射给药的含有桂利嗪的纳米脂肪乳剂、包含所述含有桂利嗪的脂肪乳剂的注射剂、以及制备载药注射器制剂的方法。本发明还涉及制备所述注射剂的方法。

【背景技术】

在临床上盐酸氟桂利嗪是用于治疗脑血管病症的药物，如治疗脑供血不足、椎动脉缺血、脑血栓形成后等脑血管疾病。临床证明，盐酸氟桂利嗪对脑血管的扩张作用比对冠状动脉及肠系膜动脉的扩张作用更强，在不致引起全身血压下降的剂量时即可增加脑血流量，而且还是目前钙通道阻滞剂中唯一能通过血脑屏障的药物。目前，该药物的传统制剂大都为胶囊剂、片剂。由于该药物的特性是在水中极微溶解，再加上各生产厂家的生产工艺不同，它直接影响到该药物在人体内的溶出速率，以此容易造成生物利用度的高低差别，从而影响疗效。

因而，现实上需开发一种新的桂利嗪制剂，一种可用于静脉注射的脂肪乳剂。然而，由于作为活性成分的桂利嗪容易分解，这比普通制剂的有效期短。这样的制剂导致了在配送阶段和临床领域中药品管理费用的增加。因此迫切期望开发具有长有效期的制剂。

通常，由于含有桂利嗪的脂肪乳剂具有乳白色的外观，因此难以发现杂质的夹杂(发生于安瓿开口上)、微生物的污染或出现在贮藏时生成的粗颗粒。因此，那些脂肪乳剂被认为是在临床领域中极难管理的制剂。

因此，现实上需要开发在活性成分(桂利嗪)的稳定性、乳剂稳定性和透明度方面优异的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

【发明内容】

本发明的第一方面的第一目的是提高桂利嗪的稳定性并且提供具有优异的乳剂稳定性和长贮存期的脂肪乳剂。第二目的是提供具有高透明度的脂肪乳剂。第三目的是提供各自含有或包含含有前列腺素的脂肪乳剂的注射剂和载药注射器，并且提供制备可被容易灭菌的注射剂的方法。

本发明的第二方面的第一目的是提高桂利嗪的稳定性并且提供具有优异的乳剂稳定性和长贮存期的脂肪乳剂。第二目的是提供具有高透明度的脂肪乳剂并且提供表现出高药效的脂肪乳剂。第三目的是提供包含含有前列腺素的脂肪乳剂的注射剂，并且提供制备可被容易灭菌的注射剂的方法。

解决所述问题的手段

本发明包括以下方面。

[1]、含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.15倍或更多，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，

并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

[2]、[1]的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中以0.01mmol/L至5mmol/L的量包含所述柠檬酸三铵。

[3]、[1]至[2]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中以质量计，所述脂肪乳剂中的所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3倍或更多。

[4]、[1]至[3]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中所述脂肪乳剂中的所述油成分的含量为基于所述脂肪乳剂的0.01-5质量％。

[5]、[1]至[4]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其特征在于还包含高级脂肪酸，以质量计，所述脂肪乳剂中的所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的至多0.06倍。

[6]、含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述桂利嗪的含量的500-5000倍，

以质量计，所述维生素E的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述司盘80的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3-10倍，

以质量计，所述桂利嗪的含量为所述油成分的含量的0.0001-0.1倍，

以质量计，所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少，

其中以的量所述柠檬酸三铵包含0.01mmol/L至5mmol/L，

其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，

并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

[7]、[6]的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中所述卵磷脂的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.4-2质量％。

[8]、[6]或[7]的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中以游离态形式存在于水相中的所述桂利嗪部分占所述脂肪乳剂中的所述桂利嗪的3％或更少。

[9]、[6]至[8]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中所述油成分的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.5-5质量％。

[10]、[1]至[9]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中通过光散射法测得的所述脂肪乳剂的平均粒径为30-150nm。

[11]、[1]至[10]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，

其中所述卵磷脂为包含磷脂酰胆碱的蛋黄卵磷脂，所述磷脂酰胆碱的量为98质量％或更多。

[12]、[1]至[11]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分为大豆油。

[13]、[1]至[12]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述含有桂利嗪的脂肪乳剂为已通过过滤灭菌的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

[14]、注射剂，其包含[1]至[13]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

[15]、载药注射器制剂，其包含注射器，所述注射器装有[1]至[14]中任一项的含有桂利嗪的脂肪乳剂或[14]的注射剂。

[16]、制备[14]或[15]的注射剂的方法，其包括通过过滤将[14]或[15]的含有桂利嗪的脂肪乳剂灭菌的步骤。

发明效果

根据本发明，不仅极大地提高了桂利嗪的稳定性，而且提高了脂肪乳剂的乳剂稳定性。此外，发现预料不到的粗颗粒减少的效果。也就是说，根据本发明，可提供可通过静脉注射给药并且与传统产品相比具有极大改善的贮存期的含有桂利嗪的脂肪乳剂、注射剂和载药注射器制剂。由于该脂肪乳剂具有提高的透明度，因此能够容易地发现杂质的夹杂，并且就临床领域的药品管理而言，所述制剂也是有效的。此外，可提供产生高药效的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

本发明的实施方式

根据本发明第一方面的可静脉给药的含有桂利嗪的脂肪乳剂为包含桂利嗪、油成分、维生素E、司盘80、卵磷脂、柠檬酸三铵、和水的脂肪乳剂，并且其特征在于以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.15倍或更多，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，而且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

通常广泛认为脂肪乳剂中脂肪酸的存在降低包含在所述脂肪乳剂中的桂利嗪的稳定性。然而，本发明的发明人发现了预料不到的效果，即通过使特定的柠檬酸三铵存在于脂肪乳剂中，从而使所述脂肪乳剂中包含的桂利嗪的稳定性显著提高。

根据本发明第二方面的含有桂利嗪的脂肪乳剂为包含桂利嗪、油成分、维生素E、司盘80、卵磷脂、柠檬酸三铵和水的脂肪乳剂，并且其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述桂利嗪的含量的500-5000倍，以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3-10倍，并且以质量计，所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，而且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

根据本发明第二方面的含有桂利嗪的脂肪乳剂可静脉给药，并且所述桂利嗪、油成分、维生素E、司盘80、卵磷脂、柠檬酸三铵、和水的比例已被限定至特定的范围。由于这些组分的比例在特定的范围内，因此可提供能够满足桂利嗪的稳定性、乳剂稳定性、脂肪乳剂的透明度以及药效的药物制剂。

在本文中，表述“以质量计，……倍”意指其量为所述组分质量的多少倍。

<桂利嗪>

本发明的含有桂利嗪的脂肪乳剂包含桂利嗪。具体地，本发明的每种脂肪乳剂中所述桂利嗪的含量优选为0.00001-0.01质量％，更优选为0.0001-0.005质量％，甚至更优选为0.0003-0.001质量％。

在本发明的第二方面中，以游离态形式存在于水相中的桂利嗪部分占包含在所述脂肪乳剂中的桂利嗪的比例优选为2％或更少，更优选0.0001-1％，甚至更优选0.001-0.5％，特别优选0.001-0.1％。已知在含有桂利嗪的脂肪乳剂中，表现出药效的桂利嗪被包含在脂肪颗粒中，并且因此防止了所述桂利嗪在体内失活，并增强了对脑血管部位的靶向性质。因此，通过降低以游离态形式存在于水相中的桂利嗪占所述脂肪乳剂中包含的全部桂利嗪的比例，可防止药效降低。顺便地，可通过透析或超滤来分离水相中的游离桂利嗪。

<司盘80、维生素E>

司盘80、维生素E共同用于提高桂利嗪在油中的分散性及稳定性，并提高乳剂的稳定性。

<卵磷脂>

本发明的脂肪乳剂包含卵磷脂。

在本文中，所述卵磷脂为单独的磷脂酰胆碱或为至少包含磷脂酰胆碱的混合物。所述包含磷脂酰胆碱的混合物通常为除磷脂酰胆碱外还可包含磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、N-酰基磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酸、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸、神经鞘磷脂、神经乙醇胺(sphingoethanolamine)等的混合物。

所述卵磷脂可为合成产品或来源于天然物质的卵磷脂。其实例通常包括蛋黄卵磷脂(来源于蛋黄的卵磷脂；下文中同样适用)、大豆卵磷脂、棉籽卵磷脂、油菜籽卵磷脂和玉米卵磷脂。本发明中使用的卵磷脂优选为蛋黄卵磷脂和大豆卵磷脂。更优选为蛋黄卵磷脂。

优选通过纯化蛋黄卵磷脂而得到的纯化蛋黄卵磷脂，并且更优选高纯度蛋黄卵磷脂。本发明中的卵磷脂优选为蛋黄卵磷脂，其包含磷脂酰胆碱并且具有96％或更高的磷脂酰胆碱含量，并且更优选为具有98质量％或更高的磷脂酰胆碱含量的蛋黄卵磷脂。所述卵磷脂适用于通过静脉注射给药的脂肪乳剂中。

对于具有98质量％或更高的磷脂酰胆碱含量的蛋黄卵磷脂，可使用IyakuhinTenkabutsu Jiten 2007(Yakuji Nippo Ltd.)中列举的名称为“高纯度蛋黄卵磷脂”的产品。具体地，其实例包括PC-98N(由Q.P.Corp.生产)。

以质量计，根据本发明第一方面的脂肪乳剂中的卵磷脂的含量优选为桂利嗪的含量的100-20,000倍，更优选500-10,000倍，特别优选1,000-5,000倍。同时，基于所述脂肪乳剂，卵磷脂的含量期望为0.1质量％或更高，优选0.2质量％或更高，更优选0.3质量％或更高，甚至更优选0.5质量％或更高，特别优选1.2质量％或更高。其含量优选为3质量％或更低，更优选2质量％或更低。当卵磷脂的含量在该范围内时，乳剂稳定性高，且所述脂肪乳剂的以游离态形式存在于水中的桂利嗪的量少，从而产生高药效。因此该卵磷脂含量范围是优选的。

根据本发明第二方面的脂肪乳剂的特征在于以质量计，卵磷脂的含量为桂利嗪的含量的500-5,000倍。以质量计，卵磷脂的含量优选为桂利嗪的含量的1,000-5,000倍，特别优选2,000-4,500倍。此外，本发明的脂肪乳剂中的卵磷脂的含量优选为0.4-2质量％，更优选0.5-1.9质量％，特别优选0.6-1.8质量％。当卵磷脂的含量在该范围内时，可提高乳剂稳定性，并且可降低以游离态形式存在于水中的桂利嗪占所述脂肪乳剂中全部桂利嗪的比例，从而产生高药效。因此该卵磷脂含量范围是优选的。

<油成分>

本发明的脂肪乳剂包含油成分。

作为本发明中使用的油成分，其优选使用脂肪酸甘油酯(单甘油酯、二甘油酯、三甘油酯、以及其两种或更多种的混合物)。

作为脂肪酸甘油酯，可使用中链脂肪酸甘油酯或长链脂肪酸甘油酯。

所述中链脂肪酸甘油酯是具有6-12个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物，并且其实例包括TCG-M(Kokyu Alcohol Kogyo)、Crodamol GTCC(Croda Japan)、Coconard MK(Kao)、Coconard RK(Kao)、Sunfat MCT-7(Taiyo Kagaku)、Deriosu(Cognis Japan)、Panasate(Nippon Oil&Fats)、Miglyol 810(Mitsuba Trading)、Miglyol 812(Mitsuba Trading)、Myritol318(Cognis Japan)和Panasate 810(Yuka Sangyo)。

所述长链脂肪酸甘油酯是具有14个或更多个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物，并且其实例包括大豆油、橄榄油、芝麻油、油菜籽油、花生油、葵花油、玉米油、红花油和棉籽油。在这些长链脂肪酸甘油酯中，优选大豆油、橄榄油和芝麻油。特别优选大豆油。

这些脂肪酸甘油酯可在通过水蒸汽蒸馏等进行进一步纯化后使用。

就使得容易保持乳剂稳定性和透明度同时防止卵磷脂水解而言，根据本发明第一方面的脂肪乳剂中的油成分的含量优选为基于所述脂肪乳剂的0.01-10质量％，更优选0.01-5质量％，特别优选0.01-2质量％。同时，就进一步减少产生的粗颗粒以达到所述脂肪乳剂可通过静脉注射给药的程度而言，所述油成分的含量优选为基于所述脂肪乳剂的0.01-10质量％，更优选0.01-5质量％，特别优选2-5质量％。

就使得容易保持乳剂稳定性和透明度同时防止卵磷脂水解而言，根据本发明第二方面的脂肪乳剂中的油成分的含量期望地为基于所述脂肪乳剂的0.04-5质量％，优选0.15质量％，更优选0.2-5质量％，甚至更优选0.2-3质量％，特别优选0.2-2质量％。同时，就进一步减少产生的粗颗粒以达到所述脂肪乳剂可通过静脉注射给药的程度而言，所述油成分的含量优选为基于所述脂肪乳剂的0.04-10质量％，更优选0.2-7质量％，甚至更优选0.2-5质量％，特别优选2-5质量％。

<卵磷脂与油成分的质量比>

在根据本发明第一方面的脂肪乳剂中，就抑制粒径随时间推移的改变以及实现乳剂稳定性而言，以质量计，所述卵磷脂的含量优选为所述油成分的含量的0.15-50倍，更优选0.5-20倍，特别优选0.7-10倍，最优选0.7-6倍。同时，就进一步减少产生的粗颗粒以达到所述脂肪乳剂可通过静脉注射给药的程度而言，以质量计，所述卵磷脂的含量优选为所述油成分的含量的0.15-50倍，更优选0.2-10倍，特别优选0.3-1倍，最优选0.3-0.7倍。

根据本发明第二方面的脂肪乳剂的特征在于以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3-10倍。以质量计，所述卵磷脂与所述油成分的质量比更优选为0.7-8倍，特别优选1-5倍。当卵磷脂的含量在此范围内时，可抑制所述卵磷脂的水解，并且所述脂肪乳剂具有高的乳剂稳定性，并且以游离态形式存在于水中的桂利嗪的量降低，从而产生高药效。因此该卵磷脂含量范围是优选的。同时，就进一步减少产生的粗颗粒以达到所述脂肪乳剂可通过静脉注射给药的程度而言，所述油成分的含量优选为基于所述脂肪乳剂的0.3-10质量％，更优选0.3-1质量％，特别优选0.3-0.7质量％。

<高级脂肪酸>

为了提高乳剂稳定性的目的，可将高级脂肪酸加入到本发明的脂肪乳剂中。

所述高级脂肪酸为具有10个或更多个碳原子的脂肪酸，并且可为饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸。在本发明中，所述高级脂肪酸起到用于提高所述脂肪乳剂的乳剂稳定性的乳化助剂的作用。用于本发明的高级脂肪酸的实例包括油酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸和亚麻酸。特别优选油酸。

根据本发明第一方面的脂肪乳剂优选包含高级脂肪酸，并且以质量计，所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少。以质量计，所述高级脂肪酸的含量优选为所述卵磷脂的含量的0.0001-0.06倍，更优选0.0001-0.03倍，特别优选0.0001-0.01倍。最优选实质上不添加高级脂肪酸。

在根据本发明第二方面的脂肪乳剂中，为了提高乳剂稳定性的目的可加入高级脂肪酸。然而，以质量计，其含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少，优选0.0001-0.06倍。

在高级脂肪酸的质量比超过0.06的情况下，尽管乳剂稳定性提高，但桂利嗪的稳定性降低。也就是说，不可能获得延长的贮存期。

就抑制桂利嗪分解而言，所述高级脂肪酸与所述卵磷脂的质量比更优选为0.0001-0.03，特别优选0.0001-0.01。最优选实质上不添加高级脂肪酸。

在本文中，表述“实质上不添加高级脂肪酸”意指不特意加入任何高级脂肪酸。例如，通过油成分或磷脂分解而产生的游离高级脂肪酸以及偶然混入并包含的游离高级脂肪酸是排除在外的。

<乳化剂和分散剂>

在本发明的脂肪乳剂中，为了提高乳剂稳定性的目的还可添加乳化剂或分散剂。

所述乳化剂的实例包括泊洛沙姆(聚氧乙烯/聚氧丙烯共聚物)、聚乙二醇35蓖麻油、聚乙二醇40氢化蓖麻油、聚乙二醇60氢化蓖麻油、聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单棕榈酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单硬脂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇三硬脂酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、12-羟基硬脂酸/聚氧乙烯酯、d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、失水山梨醇/脂肪酸酯和倍半油酸山梨坦。

所述分散剂的实例包括人血清白蛋白、精制明胶、聚乙烯吡咯烷酮、熊脱氧胆酸、熊脱氧胆酸盐、脱氧胆酸和脱氧胆酸盐。

只要这些添加剂不影响所述脂肪乳剂的稳定性，对这些乳化剂和分散剂的添加量没有特别的限制。然而，在添加乳化剂或分散剂的情况下，以质量计，其量通常为所述油成分的量的0.1倍或更高，并且以质量计，其量优选为20倍或更少，更优选10倍或更少，甚至更优选5倍或更少。

<pH调节剂>

在本发明的脂肪乳剂中，可以合适的组合使用适当量的氨水、盐酸、磷酸、磷酸铵盐、柠檬酸和柠檬酸铵盐作为pH调节剂，以调节pH至所述值。特别地，优选添加柠檬酸/磷酸缓冲剂或柠檬酸缓冲剂作为pH调节剂，以使pH在贮藏过程中保持在优选范围内的值。

<其他成分>

本发明的脂肪乳剂可视需要包含等渗剂(如甘油、葡萄糖)、抗氧剂(如抗坏血酸、二丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、α-生育酚或D-山梨醇)等。

<脂肪乳剂的粒径>

本发明的每种脂肪乳剂(乳化后立即获得)通过动态光散射法测得的平均粒径优选为30-150nm，更优选30-120nm，特别优选30-100nm。通过调节所述脂肪乳剂使其具有在上述范围内的粒径，从而提高了所述脂肪乳剂的透明度，并且因此使发现杂质的夹杂或微生物的污染变得容易。因此，在临床领域，可容易地发现其中已经出现涉及其用途的问题的任何制剂。此外，由于所述脂肪乳剂可通过过滤灭菌，因此就减少分解产物而言，所述粒径范围也是优选的。在将本发明的脂肪乳剂通过过滤灭菌的情况中，只要所述脂肪乳剂的粒径在所述范围内，则所述脂肪乳剂可通过过滤介质以通过过滤灭菌而不堵塞所述过滤介质。

可通过使用以下所述的任意乳化剂并且通过控制处理压力和处理次数来得到所述粒径。

可用市售粒度分布分析仪等测量所述脂肪乳剂的粒径。已知用于分析粒度分布的方法为光显微术、共聚焦激光显微术、电子显微镜术、原子力显微镜检查、静态光散射法、激光衍射法、动态光散射法、离心法、电脉冲计数法、色谱法、超声波衰减法等。根据各原理的设备在市场上有售。

就粒径范围以及容易测量而言，用于本发明中的粒径测量的方法优选光散射法，更优选动态光散射法或激光衍射法。应用动态光散射法的市售测量装置的实例包括Nanotrac UPA(Nikkiso Co.,Ltd.)、动态光散射型粒度分布分析仪LB-550(Horiba Ltd.)以及用于稠密系统(thick system)的粒度分析仪FPAR-1000(Otsuka Electronics Co.,Ltd.)。

特别地，本发明中的脂肪乳剂的粒径是用FPAR-1000测得的值。具体地，把通过CONTIN法获得的散射强度分布的中间粒径作为所述粒径。

<脂肪乳剂的pH>

本发明的每种脂肪乳剂的pH优选为7.1-7.4。

通常情况下，极小一部分的桂利嗪以游离态形式存在于水相中，这部分的桂利嗪不够稳定，它们降解后，油相中的桂利嗪补充溶出并进入水相，从而又降解，如此反复，加剧桂利嗪不稳定性。

通过调节其pH至上述范围内，能够进一步增强桂利嗪的稳定性。在脂肪乳剂pH低于7.0的情况下，碱性的桂利嗪从脂肪粒中溶出性增加，稳定性也降低，而且在有些情况下上述脂肪乳剂具有降低的乳剂稳定性。另一方面，在其pH超过7.4的情况下，乳剂的稳定性也降低，桂利嗪的稳定性随着pH升高而降低。

顺便说明，在25℃下测量氢离子当量浓度指数pH的值。

<制备脂肪乳剂的方法>

例如，本发明的脂肪乳剂可通过视需要向桂利嗪、维生素E、司盘80、卵磷脂的混合物中添加含柠檬酸三铵的水来制备。尽管对制备本发明的脂肪乳剂的方法没有特别限制，但特别优选的方法为以下述的方式组合使用两种或更多种乳化剂，所述方式例如：将所述混合物使用常规乳化剂乳化(在乳化过程中利用剪切例如搅拌器、叶轮、均匀混合器或连续流动式剪切装置)，并将得到的乳剂通过高压匀浆器。通过使用高压匀浆器，可将乳化颗粒转化为甚至更细微的液滴。

所述高压匀浆器的实例包括具有室(具有供待处理液体的固定通道)的室式高压匀浆器以及具有均质阀(homogenizing valve)的均质阀式高压匀浆器。在这些匀浆器中，均质阀式高压匀浆器广泛用于制备特别是食品、化妆品等的乳化领域，因为所述供待处理液体的通道的宽度可被容易调节，并且因此可在大范围内任意设定操作期间的压力和流速。与此相反，室式高压匀浆器在需要超高压的应用中使用，因为其中容易构建用于升高压力的机制，但操作的自由度低。

所述室式高压匀浆器的实例包括Microfluidizer(Microfluidics Corp.)、Nanomizer(Yoshida Kikai Co.,Ltd.)和Ultimizer(Sugino Machine Ltd.)。

所述均质阀式高压匀浆器的实例包括Gaulin型匀浆器(PVA Inc.)、Rannie型匀浆器(Rannie Inc.)、高压匀浆器(Niro Soavi S.p.A.)、匀浆器(Sanwa Engineering Ltd.)、高压匀浆器(Izumi Food Machinery Co.,Ltd.)以及超高压匀浆器(Ika Company)。

使用高压匀浆器的分散过程被认为是归因于当液体在高速下通过非常窄(小)的间隙时产生的高剪切力。所述剪切力的大小与压力大致成比例。也就是说，压力越高，则剪切力越高，即施加于在液体中分散的颗粒的分散力。然而，由于高速流动的液体的动能大部分转化为热，因此随着压力增加，液体的温度升高。因此有些情况下，由于升高的温度，分散液体的组分变质并且颗粒的复凝聚(re-agglomeration)加速。因此，尽管高压匀浆器具有最佳压力点，但认为该最佳点取决于待分散的物质以及目标粒径而变化。在本发明中，优选在50MPa或更高，更优选50-250MPa，甚至更优选100-250MPa的匀浆器压力下进行处理。通过在该范围内的高压条件下进行分散过程，可调节乳剂以使其具有所述粒径。因此所述压力范围是优选的。优选地，在穿过所述室后，应将所述乳剂30s内，优选3s内通过穿过任意冷却器进行冷却。

用于获得微细乳化颗粒的另一有效方法为使用超声波匀浆器。具体地，已知的方法为使用常规乳化剂乳化混合物(在乳化过程中使用如上所述的剪切)，然后以15-40kHz的频率向乳剂传送超声波。大功率超声波匀浆器的实例包括超声波匀浆器US-1200T、RUS-1200T和MUS-1200T(均由Nihonseiki Kaisha Ltd.制造)以及超声波处理器UIP2000、UIP-4000、UIP-8000和UIP-16000(均由Hielscher GmbH制造)。通过在以下条件下使用这些大功率超声波传送器中的任一种，所述混合物可被精细地乳化：25kHz或更低、优选15-20kHz的频率，以及分散部分中100W/cm2或更高、优选120W/cm2的能量密度。

超声波匀浆器可与上述的超高压匀浆器组合使用。也就是说，通过使用常规乳化剂乳化混合物(在乳化过程中使用剪切)，然后将得到的乳剂用超高压匀浆器进行分散处理，提高了用超高压匀浆器的分散效率，并且可减少回数(number of passes)。此外，减少了粗颗粒，使得获得高品质乳剂成为可能。此外，通过在用超高压匀浆器乳化后进一步进行超声处理，可减少粗颗粒。也可以任意期望的顺序重复进行这些步骤，例如交替进行超高压下的分散过程和超声处理。

<制剂的形式>

本发明还涉及包含含有桂利嗪的脂肪乳剂的注射剂。

只要制剂适合用作注射剂，对于包含脂肪乳剂的该制剂的形式没有限制。其具体实例包括装入容器(如安瓿、小瓶、载药注射器和袋)中的制剂。

可就待装入的含有桂利嗪的脂肪乳剂的量以及使用方便而言适当地选择此类容器的容量、材料以及形状。优选减少占用空间的气体，或在填充过程中进行氮气置换，因为由此进一步提高稳定性。

此外，优选那些容器的内表面已用硅涂层(silicoating)等处理。

在那些制剂中，安瓿制剂或载药注射器制剂是优选的。更优选的为载药注射器制剂。

本发明还涉及载药注射器制剂，其中所述注射器已装有含有桂利嗪的脂肪乳剂或注射剂。

载药注射器制剂为这样的注射器，其中已装有使用量的具有使用时浓度的制剂，以避免制备时稀释中的错误或者服用错的药物的错误，或者防止由于安装使用(installment use)或由于贮存的细菌污染、活性降低等。就降低感染的风险以及提高医务人员的劳动生产力而言，这样的载药注射器制剂也是优选的。

对于用于所述注射剂和所述载药注射器制剂的注射器没有特别限制，并且通常已知的注射器可为适合的。

依照本发明的注射器可由注射器筒、垫圈等构成。所述注射器筒优选为圆柱体，其中一端的开口(底端开口)已配有垫圈，并且所述圆柱体在另一端(前端开口)具有排出口，通过该排出口，通过推动所述垫圈排出所述含有桂利嗪的脂肪乳剂。使用前，所述排出口通常配有盖子，这样可用所述盖子和所述垫圈保留所述药物制剂。柱塞杆可已连接至所述垫圈。可根据所要装的药物制剂(含有桂利嗪的脂肪乳剂)的体积适当地确定从所述注射器筒的底端至盖子端的距离以及所述注射器筒的内径。

用于本发明的注射器筒和柱塞杆的材料的实例包括常规塑料或玻璃。所述塑料的实例包括聚烯烃(如聚乙烯和聚丙烯)以及环状聚烯烃(cyclic polyolefins)。可根据临床上使用的所述制剂的量适当地确定容量。其具体实例包括具有1-20mL容量的注射器。

根据需要，由玻璃或塑料制成的注射器筒可用硅酮等通过烘烤或施加涂层液进行处理，从而降低垫圈的滑动阻力以促进所述垫圈在所述注射器筒内运动。就便于连接至注射器针头或血管导管而言，已形成排出口的前端开口优选应具有对应于欲与之连接的装置的形状的路厄端(lure tip)形状。

对于本发明使用的盖子没有特别限制。然而，用弹性体(如橡胶或热塑性弹性体)制成的盖子是优选的。所述垫圈可优选具有用于连接至柱塞杆的工具(如螺纹元件)。可将柱塞杆和垫圈模塑以相互结合。

当给药该制剂时，可使用作为注射剂的本发明的脂肪乳剂并进行静脉注射，或可通过用输液(如生理盐水)适当稀释后滴注给药。

用于灭菌所述脂肪乳剂的方法的实例包括高压蒸汽灭菌和过滤灭菌。就抑制脂肪乳剂在灭菌过程中经历药物分解或破乳而言，所述脂肪乳剂优选通过过滤灭菌。在制备所述脂肪乳剂前将液体成分本身通过过滤灭菌或将液体成分和/或固体成分的溶液通过过滤灭菌也是优选的。

本发明还涉及制备所述注射剂的方法，所述方法包括通过过滤将所述含有桂利嗪的脂肪乳剂灭菌的步骤。

通常，可在已制备含有桂利嗪的脂肪乳剂后进行过滤灭菌。

在过滤灭菌中优选使用孔径为0.01-0.22μm的过滤介质。更优选孔径为0.1-0.22μm的用于过滤灭菌的过滤介质。市售的过滤介质可用于过滤灭菌。所述用于过滤灭菌的过滤介质的具体实例包括Sartopore 2和Sartobran(Sartorius StedimJapan)、Durapore(Millipore Japan)、Fluorodyne II、Supor、Fluorodyne EX、Ultipor N66和Posidyne(Pall Japan)。

当进行过滤灭菌时，可使用压滤器施加压差，并且所述压差优选为0.01MPa至1MPa，更优选0.05MPa至0.3MPa。本文中的术语“压差”意指过滤中上游侧(内侧)和下游侧(外侧)的压力差。通常，所述下游侧的压力为大气压。

这些条件可根据所使用的桂利嗪、油成分和卵磷脂的浓度，可包含的添加剂的种类和浓度等进行适当的选择。

优选实施技术方案：

实施技术方案1.含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.15倍或更多，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

实施技术方案2.根据实施技术方案1所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述卵磷脂的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.4-2质量％。

实施技术方案3.根据实施技术方案1所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中以游离态形式存在于水相中的所述桂利嗪化合物部分占所述脂肪乳剂中的所述桂利嗪化合物的2％或更少。

实施技术方案4.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.5-5质量％。

实施技术方案5.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分的含量为基于整个所述脂肪乳剂的1-4质量％。

实施技术方案6.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述脂肪乳剂中的所述柠檬酸三铵的含量为0.01mmol/L至5mmol/L。

实施技术方案7.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述桂利嗪的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.00001-0.01质量％。

实施技术方案8.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中通过光散射法测得的所述脂肪乳剂的平均粒径为30-150nm。

实施技术方案9.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述卵磷脂为包含磷脂酰胆碱的蛋黄卵磷脂，所述磷脂酰胆碱的量为98质量％或更多。

实施技术方案10.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分为脂肪酸甘油酯，所述脂肪酸甘油酯选自中链脂肪酸甘油酯及长链脂肪酸甘油酯，所述中链脂肪酸甘油酯是具有6-12个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物，所述长链脂肪酸甘油酯是具有14个或更多个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物。

实施技术方案11.根据实施技术方案10所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分为大豆油。

实施技术方案12.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述含有桂利嗪的脂肪乳剂为已通过过滤灭菌的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

实施技术方案13.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.45-10倍。

实施技术方案14.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中以质量计，所述司盘80的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍。

实施技术方案15.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中以质量计，所述维生素E的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍。

实施技术方案16.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述高级脂肪酸为具有10个或更多个碳原子的饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸。

实施技术方案17.根据实施技术方案1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述高级脂肪酸实质上不添加。

实施技术方案18.含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述桂利嗪的含量的500-5000倍，

以质量计，所述维生素E的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述司盘80的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3-10倍，

以质量计，所述桂利嗪的含量为所述油成分的含量的0.0001-0.1倍，

以质量计，所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少，

其中以的量所述柠檬酸三铵包含0.01mmol/L至5mmol/L，

其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，

并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

实施技术方案19.一种注射剂，其包含实施技术方案1至18中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

实施技术方案20.一种载药注射器制剂，其包含注射器，所述注射器装有实施技术方案1至18中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂或实施技术方案19所述的注射剂。

实施技术方案21.制备实施技术方案19所述的注射剂的方法，其包括通过过滤将实施技术方案1至18中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂灭菌的步骤。

【实施例】

在下文中参考实施例对本发明进行更详细的解释，但是本发明不应被解释为仅限于以下实施例。

在说明书中，除非有另外说明，“％”表示“质量％”。

实施例1

将桂利嗪、维生素E、司盘80以10mg/mL、30mg/mL、30mg/mL的浓度溶于热乙醇。将其42μL部分(就桂利嗪而言为420μg)与0.252g大豆油(由Kaneda Co.,Ltd.生产)和0.504g高纯度蛋黄卵磷脂PC-98N(由Q.P.Corp.生产)混合。

(以下操作温度25℃下进行)通过将根据日本药典的浓缩甘油(由Kao Corp.生产)与纯净水混合单独得到的2.5质量％的甘油水溶液加入上述混合物中(其加入量使得总量为60mL)，并且搅拌所得的混合物。将混合物用均相搅拌器(15,000rpm，12分钟)处理以将所述成分大致分散，并且进一步用室式高压匀浆机处理以使混合物乳化。将柠檬酸三铵溶液加入乳剂中以使最终浓度为0.5mM，并调节乳剂的pH至7.2(用柠檬酸或氨水调pH)。从而制得分散液1(具有100nm或更小的粒径)。

比较例1-1

除实施例1中维生素E被水替换外，其他(含制备方法)均与实施例1相同。

比较例1-2

除实施例1中司盘80被水替换外，其他(含制备方法)均与实施例1相同。

比较例1-3

除实施例1中柠檬酸三铵被柠檬酸等量替换及乳剂的pH至6.5(用柠檬酸或氢氧化钠调pH)外，其他(含制备方法)均与实施例1相同。

比较例1-4

除实施例1中柠檬酸三铵被柠檬酸三钠等量替换及乳剂的pH至8.0(用柠檬酸或氢氧化钠调pH)外，其他(含制备方法)均与实施例1相同。

对脂肪乳剂的评价

<粒径测量>

在乳化后，立即将实施例和比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)各自用纯净水稀释10-100倍。将用光散射粒度分布分析仪(FPAR-1000，由Otsuka Electronics Co.,Ltd.生产)通过CONTIN法得到的散射强度分布的中间粒径记录为粒径,其结果在表1中显示。

<粒径变化>

从实施例和比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)中各自取出2mL部分，并引入硅化小瓶(silicoated vial，CS-10，由Fuji Glass Co.,Ltd.生产)中，将该瓶装备橡胶塞，并用铝密封。将这些分散液在40℃下贮存30天或60天，然后进行如上所述的粒径测量。根据下述标准评价与制备后立即测量的粒径所产生的变化，并且其结果在表1中显示。

A：未观察到粒径增长。

B：粒径增长为10nm或更少。

C：粒径增长为大于10nm但小于20nm。

D：粒径增长为20nm或更大。

<主药稳定性的评价>

从实施例和比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)中各自取出2mL部分，并引入硅化小瓶(CS-10，由Fuji Glass Co.,Ltd.生产)中，将该瓶装备橡胶塞，并用铝密封。将这些分散液在40℃下贮存30天或60天，并且然后通过高效液相色谱法检测桂利嗪及有关物质的量及分散液的pH,其结果在表1中显示。

表1-1实施例1和比较例1在40℃下贮存0天稳定性的评价

	中间粒径	粒径变化	桂利嗪含量	有关物质	pH
						实施例1	72nm	-	99.7％	0.4％	7.2
比较例1-1	70nm	-	99.8％	0.3％	7.2
						比较例1-2	78nm	-	99.6％	0.5％	7.2
比较例1-3	73nm	-	99.8％	0.3％	6.5
						比较例1-4	69nm	-	99.9％	0.2％	8.0

表1-2实施例1和比较例1在40℃下贮存30天稳定性的评价

	中间粒径	粒径变化	桂利嗪含量	有关物质	pH
						实施例1	-	A	98.9％	1.2％	7.3
比较例1-1	-	B	92.8％	8.9％	7.7
						比较例1-2	-	C	97.6％	3.2％	7.4
比较例1-3	-	B	94.8％	6.1％	6.6
						比较例1-4	-	B	95.3％	5.8％	8.4

表1-3实施例1和比较例1在40℃下贮存60天稳定性的评价

	中间粒径	粒径变化	桂利嗪含量	有关物质	pH
						实施例1	-	A	96.8％	3.4％	7.3
比较例1-1	-	C	83.5％	17.7％	7.9
						比较例1-2	-	D	93.6％	7.6％	7.5
比较例1-3	-	C	88.7％	13.5％	6.8
						比较例1-4	-	C	89.6％	12.8％	8.7

实施例2

将桂利嗪、维生素E、司盘80以5mg/mL、150mg/mL、150mg/mL的浓度溶于乙醇。将其42μL部分(就桂利嗪而言为210μg)与0.125g菜籽油(由Kaneda Co.,Ltd.生产)和0.735g高纯度蛋黄卵磷脂PC-98N(由Q.P.Corp.生产)混合。

(以下操作温度25℃下进行)通过将根据日本药典的浓缩甘油(由Kao Corp.生产)与纯净水混合单独得到的3.5质量％的甘油水溶液加入上述混合物中(其加入量使得总量为60mL)，并且搅拌所得的混合物。将混合物用均相搅拌器(15,000rpm，12分钟)处理以将所述成分大致分散，并且进一步用室式高压匀浆器处理以使混合物乳化。将柠檬酸三铵溶液加入乳剂以使最终浓度为0.5mM，并调节乳剂的pH至7.3(用柠檬酸或氨水调pH)。从而制得分散液2(具有150nm或更小的粒径)。

比较例2-1

除实施例2中维生素E被水替换外，其他(含制备方法)均与实施例2相同。

比较例2-2

除实施例2中司盘80被水替换外，其他(含制备方法)均与实施例2相同。

比较例2-3

除实施例2中柠檬酸三铵被柠檬酸等量替换及乳剂的pH至6.7(用柠檬酸或氢氧化钠调调pH)外，其他(含制备方法)均与实施例2相同。

比较例2-4

除实施例2中柠檬酸三铵被柠檬酸三钠等量替换及乳剂的pH至7.8(用柠檬酸或氢氧化钠调pH)外，其他(含制备方法)均与实施例2相同。

对脂肪乳剂的评价

<粒径测量>

在乳化后，立即将实施例和比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)各自用纯净水稀释10-100倍。将用光散射粒度分布分析仪(FPAR-1000，由Otsuka Electronics Co.,Ltd.生产)通过CONTIN法得到的散射强度分布的所述中间粒径记录为粒径。其结果在表2中显示

<粒径变化>

从实施例和比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)中各自取出2mL部分，并引入硅化小瓶(silicoated vial，CS-10，由Fuji Glass Co.,Ltd.生产)中，将该瓶装备橡胶塞，并用铝密封。将这些分散液在40℃下贮存30天或60天，然后进行如上所述的粒径测量。根据下述标准评价与制备后立即测量的粒径所产生的变化，并且其结果在表2中显示。

<耐贮性测试>

从实施例和比较例中制备的分散液中各自取出2mL部分，并且引入硅化小瓶(CS-10，由Fuji Glass Co.,Ltd.生产)中。将该小瓶配备橡胶塞，并用铝密封。将这些分散液在40℃下贮存30天或60天，然后进行下列测试。其结果在表2中显示

<主药稳定性的评价>

通过高效液相色谱法检查处于刚制备好的状态的分散液和已在40℃下贮存30天或60天的分散液，并且然后测定桂利嗪及有关物质的量及分散液的pH。其结果在表2中显示

<游离脂肪酸含量增长的测定>

取出1mL部分的实施例/比较例中制备的分散液(脂肪乳剂)并引入20mL小瓶中。向其中加入5mL液体混合物，所述液体混合物为2-丙醇/庚烷/0.5M硫酸＝40/10/1(以体积计)。搅拌所述液体并混合在一起。在10分钟之后，向其中加入3mL庚烷和3mL纯净水，并且将所述成分通过颠倒混合在一起。将得到的混合物放置15分钟，然后取出3mL上层液体并且引入10mL小瓶中。向其中加入1mL液体混合物，所述液体混合物为0.02质量％尼罗蓝水溶液/乙醇＝1/9(以体积计)。将所述液体搅拌并混合在一起。将得到的液体混合物用0.02M氢氧化钠滴定，并且使用以下等式计算游离脂肪酸的量。将所述脂肪酸的量转化为油酸的浓度以计算基于整个脂肪乳剂的含量(以质量％计)。未经历在40℃下贮存30天的分散液与经历所述贮存的分散液的浓度(以质量％计)差如表3所示。

顺便地，15mmol/L的油酸庚烷溶液被用作参比溶液，并且V表示所滴定的量。

游离脂肪酸的量(meq/L)＝[V(样品)]/[V(参比溶液)]×15

<游离桂利嗪含量的测定>

分别将40mL部分的分散液2和比较分散液2-1～4各自引入小瓶中，并且向其中添加0.2mL pH为5.0的0.1M柠檬酸缓冲液。将透析管Spectra/Por2(分级分子量(fractionalmolecular weight)，12-14K)用纯净水水化，并将2.5质量％的甘油水溶液以每20g所述分散液1mL的量装入所述透析管中。将该管浸入所述分散液中，并且在100rpm和室温下实施搅拌24小时。

通过HPLC测定透析前和透析后的所述分散液中的桂利嗪浓度，并且从通过透析的浓度变化计算水相中的游离桂利嗪的浓度。得到的结果如表4所示。

表2-1实施例2和比较例2在40℃下贮存0天稳定性的评价

	中间粒径	粒径变化	桂利嗪含量	有关物质	pH
						实施例2	93nm	-	99.8％	0.3％	7.3
比较例2-1	106nm	-	99.6％	0.5％	7.3
						比较例2-2	88nm	-	99.9％	0.3％	7.3
比较例2-3	85nm	-	99.7％	0.5％	6.7
						比较例2-4	69nm	-	99.9％	0.2％	7.8

表2-2实施例2和比较例2在40℃下贮存30天稳定性的评价

	中间粒径	粒径变化	桂利嗪含量	有关物质	pH
						实施例2	-	A	98.6％	1.5％	7.4
比较例2-1	-	B	92.2％	9.9％	7.7
						比较例2-2	-	C	97.2％	3.5％	7.5
比较例2-3	-	B	93.8％	6.7％	6.8
						比较例2-4	-	B	94.6％	6.2％	8.2

表2-3实施例2和比较例2在40℃下贮存60天稳定性的评价

表3实施例2和比较例2在40℃下贮存30天游离脂肪酸含量增长的测定

实施例2	0.0042％
		比较例2-1	0.0126％
比较例2-2	0.0061％
		比较例2-3	0.0087％
比较例2-4	0.0082％

表4实施例2和比较例2游离桂利嗪含量的测定

实施例2	1.2％
		比较例2-1	2.6％
比较例2-2	1.8％
		比较例2-3	5.6％
比较例2-4	6.6％

实施例3

将桂利嗪、维生素E、司盘80以10mg/mL、50mg/mL、50mg/mL的浓度溶于热乙醇。将其42μL部分(就桂利嗪而言为420μg)与0.306g芝麻油和0.453g高纯度蛋黄卵磷脂PC-98N(由Q.P.Corp.生产)混合。

(以下操作温度25℃下进行)通过将根据日本药典的浓缩甘油(由Kao Corp.生产)与纯净水混合单独得到的3.5质量％的甘油水溶液加入上述混合物中(其加入量使得总量为60mL)，并且搅拌所得的混合物。将混合物用均相搅拌器(15,000rpm，12分钟)处理以将所述成分大致分散，并且进一步用室式高压匀浆机处理以使混合物乳化。将柠檬酸三铵溶液加入乳剂中以使最终浓度为0.25mM，并调节乳剂的pH至7.2(用柠檬酸或氨水调pH)。从而制得分散液3(具有100nm或更小的粒径)。

实施例4

将桂利嗪、维生素E、司盘80以10mg/mL、250mg/mL、250mg/mL的浓度溶于热乙醇。将其42μL部分(就桂利嗪而言为420μg)与0.816g芝麻油和0.253g高纯度蛋黄卵磷脂PC-98N(由Q.P.Corp.生产)混合。

(以下操作温度25℃下进行)通过将根据日本药典的浓缩甘油(由Kao Corp.生产)与纯净水混合单独得到的3.5质量％的甘油水溶液加入上述混合物中(其加入量使得总量为60mL)，并且搅拌所得的混合物。将混合物用均相搅拌器(15,000rpm，12分钟)处理以将所述成分大致分散，并且进一步用室式高压匀浆机处理以使混合物乳化。将柠檬酸三铵溶液加入乳剂中以使最终浓度为0.25mM，并调节乳剂的pH至7.2(用柠檬酸或氨水调pH)。从而制得分散液4(具有150nm或更小的粒径)。

<分散液的灭菌>

1、从上述分散液1-4中取出10mL部分，并引入硅化小瓶(CS-10，由Fuji GlassCo.,Ltd.生产)中，将该瓶装备橡胶塞，并用铝密封。使用高压灭菌器(高压灭菌器SP200；Yamato Scientific Co.,Ltd.)，在使小瓶在121℃下保持1-3分钟的条件下进行高压蒸汽灭菌。

检查经灭菌前后的分散液的外观、粒径、pH和桂利嗪含量、有关物质。作为结果，未观察到与灭菌前测定的状态或值的明显变化。

2、将500毫升的分散液1-4进行过滤灭菌，其中Sartopore 2(直径，47mm；孔径，0.2μm；Sartorius Stedim Japan)被用作用于灭菌的过滤介质，并且用压滤器施加0.2MPa的压差。全部分散液可通过过滤灭菌而不导致阻塞。

检查经灭菌前后的分散液的外观、粒径、pH和桂利嗪含量、有关物质。作为结果，未观察到与过滤前测定的状态或值的明显变化。

分散液1-4为透明至半透明的(分散液的粒径各自为150nm或更小的)。因此，容易检测在所述分散液中的杂质夹杂。

工业适用性

也就是说，根据本发明，可提供可通过静脉注射给药并且与传统产品相比具有极大改善的贮存期的含有桂利嗪的脂肪乳剂、注射剂以及载药注射器制剂。此外，由于该脂肪乳剂具有提高的透明度，因此能够容易地发现杂质的夹杂，并且所述脂肪乳剂也可为在临床领域的药品管理方面有效的制剂。而且，可提供获得高药效的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

尽管本发明已详细描述并且参考其具体实施方式，但本领域技术人员明显能够在不脱离本发明的精神和范围的情况下进行多种改变和修改。

Claims (10)

1.含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.15倍或更多，其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

2.根据权利要求1所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述卵磷脂的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.4-2质量％。

3.根据权利要求1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分的含量为基于整个所述脂肪乳剂的0.5-5质量％。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述脂肪乳剂中的所述柠檬酸三铵的含量为0.01mmol/L至5mmol/L。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中通过光散射法测得的所述脂肪乳剂的平均粒径为30-150nm。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂，其中所述油成分为脂肪酸甘油酯，所述脂肪酸甘油酯选自中链脂肪酸甘油酯及长链脂肪酸甘油酯，所述中链脂肪酸甘油酯是具有6-12个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物，所述长链脂肪酸甘油酯是具有14个或更多个碳原子的脂肪酸与甘油的缩合物。

7.含有桂利嗪的脂肪乳剂，所述脂肪乳剂为包含以下成分的脂肪乳剂：

桂利嗪，

油成分，

维生素E,

司盘80，

卵磷脂，

柠檬酸三铵，和

水，

其中，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述桂利嗪的含量的500-5000倍，

以质量计，所述维生素E的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述司盘80的含量为所述桂利嗪的含量的2-50倍，

以质量计，所述卵磷脂的含量为所述油成分的含量的0.3-10倍，

以质量计，所述桂利嗪的含量为所述油成分的含量的0.0001-0.1倍，

以质量计，所述高级脂肪酸的含量为所述卵磷脂的含量的0.06倍或更少，

其中以的量所述柠檬酸三铵包含0.01mmol/L至5mmol/L，

其中桂利嗪、维生素E、司盘80基本上存于油成分形成的微粒中，

并且所述脂肪乳剂的pH为7.1至7.4。

8.一种注射剂，其包含权利要求1至16中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂。

9.一种载药注射器制剂，其包含注射器，所述注射器装有权利要求1至16中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂或权利要求17所述的注射剂。

10.制备权利要求17所述的注射剂的方法，其包括通过过滤将权利要求1至16中任一项所述的含有桂利嗪的脂肪乳剂灭菌的步骤。