CN108863932B - 青藤碱衍生物、其盐类及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种青藤碱衍生物，其结构式如下：

Description

青藤碱衍生物、其盐类及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种青藤碱衍生物、其盐类及其制备方法和用途。

背景技术

青藤碱(Sinomenine)为防己科植物青风藤和毛青藤干燥藤茎中提取的吗啡烷类生物 碱，它由部分饱和的菲核及乙胺桥构成，结构与吗啡相似。青风藤在我国已有很久的历史， 在古书如《本草纲目》等上均有记载，而它的药用成分青藤碱是被Ishiwari等人首次发现， 我国发现青藤碱是在上个世纪60年代，由朱任宏学者在研究发现。

青藤碱具有广泛的药理作用，但是由于青藤碱的生物半衰期较短、药用剂量大、起效 缓慢等缺点，所以对于青藤碱衍生物的设计、合成，继而从中寻找新一代较高疗效，较低毒副作用的化合物意义重大。

发明内容

本发明的一个目的是解决上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种青藤碱衍生物，其对NFκB抑制活性要明显优于青藤碱的抑制活性，而NFκB的过度激活会引起一系列的疾病，如哮喘、类风湿性关节炎、 肠炎等，而青藤碱衍生物对NFκB具有良好的抑制活性，可成为防治这些疾病的有效药 物，且药用效果优于青藤碱。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种青藤碱衍生物，所述青藤碱 衍生物的结构式如下：

所述R为苯环取代物，苯环上的取代基为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、正戊基、环戊基、正己基、环己基、醚、酯、酰胺、卤素中的一种或两 种，当取代基为两个时，两个取代基可位于苯环的邻、间、对位。

优选的是，所述的青藤碱衍生物，所述R为杂环取代物，所述杂环为五元杂环或六元 杂环，所述杂环上的取代基的为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异 丁基、正戊基、环戊基、正己基、环己基、醚、酯、酰胺、卤素中的一种或两种，当取代 基为两个时，两个取代基可位于杂环的邻、间、对位。

优选的是，所述的青藤碱衍生物，所述五元杂环为呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、异恶唑、恶唑、四氢吡咯中的一种；所述六元环为哌啶、哌嗪、吗啉、吡啶、嘧啶、哒嗪 中的一种。

优选的是，所述的青藤碱衍生物，所述R为萘环取代物，所述萘环上取代基选自氢、卤素、硝基、氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、羰基、丙氧基或异 丙氧基中的一种。

优选的是，所述的青藤碱衍生物，卤素为氟。

本发明还提供了一种青藤碱衍生物的盐类，所述盐类包括：盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢 盐、氢溴酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐。

本发明还提供了一种的青藤碱衍生物的制备方法，包括以下步骤：

S1、将青藤碱、NBS溶解于氯仿中搅拌，萃取，将有机层浓缩，柱层析后得到中间 产物，中间产物的结构式为：

S2、将S1中得到的中间产物、Pd(PPh₃)₄溶解于甲苯中得到第一混合物，将与R对应的硼酸取代物R-B-(OH)₂溶解于乙醇中溶液中得第二混合物，将第一混合物、第二混合物混匀后加入K₂CO₃于温度为90～100℃下回流18～22h，萃取，过滤，干燥，柱层析后即得 青藤碱衍生物。

优选的是，所述的青藤碱衍生物的制备方法，青藤碱、NBS、Pd(PPh₃)₄、R-B-(OH)₂、甲苯、乙醇的摩尔体积比为1mmol:1.4～1.6mmol:0.05～0.14mmol:1.1～1.4 mmol:13～15ml:11～13ml。

本发明还提供了一种青藤碱衍生物的用途，所述青藤碱衍生物作为制备抗炎药物中的 应用。

本发明至少包括以下有益效果：

1、本发明的青藤碱衍生物对NFκB抑制活性要明显优于青藤碱的抑制活性，而NF κB的过度激活会引起一系列的疾病，如哮喘、类风湿性关节炎、肠炎等，而青藤碱衍生 物对NFκB具有良好的抑制活性，可成为防治这些疾病的有效药物，且药用效果优于青 藤碱。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明 的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实 施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其 它元件或其组合的存在或添加。

青藤碱衍生物，所述青藤碱衍生物的结构式如下：

所述R为苯环取代物，苯环上的取代基为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、正戊基、环戊基、正己基、环己基、醚、酯、酰胺、卤素中的一种或两 种，当取代基为两个时，两个取代基可位于于苯环的邻、间、对位。即苯环取代物的苯环 上的取代基为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、正戊基、环 戊基、正己基、环己基、醚、酯、酰胺、卤素中的一种或两种，当取代基为两个时，两个 取代基可位于苯环的邻、间、对位。

所述的青藤碱衍生物，所述R为杂环取代物，所述杂环为五元杂环或六元杂环，所述 杂环上的取代基的为氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、正戊 基、环戊基、正己基、环己基、醚、酯、酰胺、卤素中的一种或两种，当取代基为两个时， 两个取代基可位于杂环的邻、间、对位。

所述的青藤碱衍生物，所述五元杂环为呋喃、噻吩、吡咯、噻唑、咪唑、异恶唑、恶唑、四氢吡咯中的一种；所述六元环为哌啶、哌嗪、吗啉、吡啶、嘧啶、哒嗪中的一种。

所述的青藤碱衍生物，所述R为萘环取代物，所述萘环上取代基选自氢、卤素、硝基、 氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、羰基、丙氧基或异丙氧基中的一种。

所述的青藤碱衍生物，卤素为氟。

本发明的部分优选的青藤碱衍生物的化学结构、产率、质谱、分子式数据如表1所示。

表1-部分青藤碱衍生物的结构、产率、质谱和分子式

本发明的青藤碱衍生物的制备工艺流程如下：

本发明的几种青藤碱衍生物的制备方法如下：

实施例1

1-苯乙基青藤碱(表1中化合物4)的制备方法包括以下步骤：

S1、将3mmol的青藤碱和1.65mmol的NBS加入到20mL氯仿中。所得混合物在室 温下搅拌2-4h，然后再加入1.65mmol的NBS。将反应液再搅拌6h，然后加入20mL水。 水层用60mL的氯仿萃取，用20mL的盐水洗涤，将有机层合并，进一步干燥硫酸钠，并 真空浓缩。将褐红色的残余物溶于CH₂Cl₂中并在硅胶上纯化，用二氯甲烷-甲醇(30:1) 作洗脱剂，得到中间产物，其为深黄色粉末，产率为60％，中间产物的结构式为：

S2、将S1中得到的中间产物、58mg的Pd(PPh₃)₄溶于14ml甲苯中得到第一混合物，将0.6mmol的4-乙基苯硼酸溶解于12ml的乙醇中得到第二混合物，将第一混合物、第二 混合物混匀后加入1.1mmol的K₂CO₃于氮气保护下温度为90℃下回流20h，发生Suzuki 偶联反应，反应完成后加入饱和NaHCO₃，然后DCM萃取，有机层用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩后硅胶柱层析，洗脱剂二氯甲烷:甲醇(50:1)，即得1-苯乙基青藤碱白色固体 185mg，产率85.5％。

实施例2

1-苯乙醚青藤碱(表1中化合物8)的制备方法包括以下步骤：

S1、将3mmol的青藤碱和1.65mmol的NBS加入到20mL氯仿中。所得混合物在室 温下搅拌2-4h，然后再加入1.65mmol的NBS。将反应液再搅拌6h，然后加入20mL水。 水层用60mL的氯仿萃取，用20mL的盐水洗涤，将有机层合并，进一步干燥硫酸钠，并 真空浓缩。将褐红色的残余物溶于CH₂Cl₂中并在硅胶上纯化，用二氯甲烷-甲醇(30:1) 作洗脱剂，得到中间产物，中间产物的结构式为：

S2、将S1中得到的中间产物、58mg的Pd(PPh₃)₄溶于14ml甲苯中得到第一混合物，将0.6mmol的4-乙氧基苯硼酸溶解于12ml的乙醇中得到第二混合物，将第一混合物、第 二混合物混匀后加入1.1mmol的K₂CO₃于氮气保护下温度为90℃下回流20h，发生Suzuki 偶联反应，反应完成后加入饱和NaHCO₃，然后DCM萃取，有机层用无水硫酸钠干燥， 减压浓缩后硅胶柱层析，洗脱剂二氯甲烷:甲醇(50:1)，即得1-苯乙醚青藤碱白色固体 209mg，产率93.1％。

实施例3

1-吡啶青藤碱(表1中化合物10)的制备方法包括以下步骤：

S1、将3mmol的青藤碱)和1.65mmol的NBS加入到20mL氯仿中。所得混合物在 室温下搅拌2-4h，然后再加入1.65mmol的NBS。将反应液再搅拌6h，然后加入20mL的 水。水层用60mL的氯仿萃取，用20mL的盐水洗涤，将有机层合并，进一步干燥硫酸钠， 并真空浓缩。将褐红色的残余物溶于CH₂Cl₂中并在硅胶上纯化，用二氯甲烷-甲醇(30:1) 作洗脱剂，得到中间产物，中间产物的结构式为：

S2、将S1中得到的中间产物、58mg的Pd(PPh₃)₄溶于14ml甲苯中得到第一混合物，将0.6mmol的3-吡啶硼酸溶解于12ml的乙醇中得到第二混合物，将第一混合物、第二混 合物混匀后加入1.1mmol的K₂CO₃于氮气保护下温度为90℃下回流20h，发生Suzuki偶 联反应，反应完成后加入饱和NaHCO₃，然后DCM萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，减 压浓缩后硅胶柱层析，洗脱剂二氯甲烷:甲醇(50:1)，即得1-吡啶青藤碱白色固体93.3mg， 产率45.9％。

本发明还提供了一种青藤碱衍生物的盐类的制备方法：

将青藤碱衍生物溶于乙醚中，加入对应的酸中，搅拌，浓缩，析出沉淀，即得青藤碱衍生物的盐类，此处酸为盐酸、硫酸、氢硫酸、氢溴酸、草酸、柠檬酸、甲磺酸中的一种。

例如：1-苯乙基青藤碱盐酸盐的制备

取0.23mmol的1-苯乙基青藤碱溶于20ml的乙醚中，加入1ml盐酸，室温下搅拌2h。反应结束后减压浓缩反应液，析出沉淀，过滤即得1-苯乙基青藤碱盐酸盐98mg，产率91.4％。将青藤碱衍生物转换成盐类化合物，便于保存。

生物活性测试

试验方法：

将小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞2×10⁵个/孔接种于96孔板，培养24h。将300ng的pGL3.5XкB-luciferase质粒和30ng的pRL-TK-Renilla-luciferase质粒用25uL的DMEM培养基稀释，得质粒稀释液。用25uL的DMEM稀释转染试剂LipofectameTM2000，轻柔 混合并在室温下孵育5min，得转染试剂稀释液，将质粒稀释液与转染试剂稀释液混匀并 在室温下孵育20min，得到转染试剂和质粒的混合液。将培养24h后的每孔细胞用PBS洗 后每孔加入50uL的DMEM培养基，孵箱孵育2小时后再将50uL转染试剂和质粒的混合 液加入孔内；将细胞重新放入孵箱中培养6h后换完全培养基过夜，预先加入青藤碱及其 衍生物(5，10uL/ml)处理3h，加入脂多糖1uL/ml刺激6小时，同时设立空白组control 和只加入脂多糖LSP的对照组。在检测前先裂解细胞蛋白，将Promega公司的检测试剂 和底物混匀，每孔细胞加入100uL检测试剂，室温孵育5min，然后用荧光素酶检测法， 用Polar Star的Luminensence档进行检测，记录并分析数据。最后用TK报告基因校正， 进行数据处理。青藤碱衍生物采用表1中化合物编号的衍生物，测试结果如表2所示。

表2-不同青藤碱衍生物对NFκB转录活性的影响

从表1中可以看出青藤碱衍生物对NFκB抑制活性要明显优于青藤碱的抑制活性，而NFκB的过度激活会引起一系列的疾病，如哮喘、类风湿性关节炎、肠炎等，青藤碱 衍生物对NFκB具有良好的抑制活性，可成为防治这些疾病的有效药物，另外本发明的 本发明的青藤碱衍生物化合物还具有毒性低的优点。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运 用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限 于特定的细节。

Claims (5)

1.青藤碱衍生物，其特征在于，所述青藤碱衍生物的结构式如下：

所述R为

或

。

2.如权利要求1所述的青藤碱衍生物的盐类，其特征在于，所述盐类选自：盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氢溴酸盐、草酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐。

3.如权利要求1所述的青藤碱衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将青藤碱、NBS溶解于氯仿中搅拌，萃取，将有机层浓缩，柱层析后得到中间产物，中间产物的结构式为：

S2、将S1中得到的中间产物、Pd(PPh₃)₄溶解于甲苯中得到第一混合物，将与R对应的硼酸取代物R-B-(OH)₂溶解于乙醇中溶液中得第二混合物，将第一混合物、第二混合物混匀后加入K₂CO₃于温度为90~100℃下回流18~22h，萃取，过滤，干燥，柱层析后即得青藤碱衍生物。

4.如权利要求3所述的青藤碱衍生物的制备方法，其特征在于，青藤碱、NBS、Pd(PPh₃)₄、R-B-(OH)₂、甲苯、乙醇的摩尔体积比为1mmol:1.4~1.6 mmol:0.05~0.14mmol:1.1~1.4mmol:13~15ml:11~13ml。

5.如权利要求1所述的青藤碱衍生物的用途，其特征在于，所述青藤碱衍生物在制备抗炎药物中的应用。