CN108835626A - 一种桑葚益生菌酵素及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于酵素生产技术领域，具体涉及一种桑葚益生菌酵素及其制备方法。该桑葚益生菌酵素以桑葚、桂圆、刺梨、苹果、葡萄、杏为主要原料，经过三次发酵而成。本发明原料的营养成分在科学合理的搭配上更加丰富，在益生菌的发酵作用下，同时严格控制益生菌的种类、用量以及发酵时长，保证原料的发酵更加充分，最终使得原料中的营养物质、活性物质、抗氧化物质能够完全释放分解出来，最终得到一种营养丰富、抗氧化、延缓衰老、预防动脉粥样硬化的桑葚益生菌酵素。

Description

一种桑葚益生菌酵素及其制备方法

技术领域

本发明属于酵素生产技术领域，具体涉及一种桑葚益生菌酵素及其制备方法。

背景技术

酵素指通过微生物对水果蔬菜发酵，提取的一种含生物活性成分的液体。上述生物活性成分包括酶但是不限于酶，包括活性抗氧化成分、生物质化素等，来自发酵参与菌和用于发酵的食材。

合理制作的酵素，所萃取的植物活性物质都是来自于食材，且发酵参与菌更是人体微生态系统的组成部分。因此，酵素的副作用几乎为零，强大的功效，极小的副作用，近年来一直呈爆炸性增长趋势。

桑葚是一种药食同源的果品，口感酸甜，深受人们喜爱，但是由于桑葚果体成熟期比较集中，且难以保存，限制了其应用。桑葚现有的进一步开发有桑葚白酒(CN103103101A)、桑葚汁(CN108112847A)、桑葚饮品(CN105029587A)、桑葚酵素(CN108157954A)，但这些产品对原料中营养物质成分的提取不够充分。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种桑葚益生菌酵素及其制备方法，解决了传统桑葚应用途径窄的问题。

本发明所采用的技术方案为：

一种桑葚益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：

S1将桑葚400-700kg、桂圆50-100kg、刺梨50-100kg、苹果50-100kg、葡萄50-100kg、杏50-100kg、赤砂糖50kg加入发酵设备中；

S2向发酵设备中继续加入酵母菌5-10g和发酵乳杆菌1-5g进行初发酵，发酵时间为7-9个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌1-5g、植物乳杆菌1-5g、保加利亚乳杆菌1-5g、鼠李糖乳杆菌1-5g进行第二次发酵，发酵时间7-9个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5-10g、罗伊氏乳杆菌1-5g、醋酸菌1-5g继续第三次发酵7-9个月；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。(需按国标GB/T31121检测微生物指标、重金属指标达标，其他指标达到行业标准T/CBFIA08003-2016。)

所述S2中初发酵时，发酵过程定期搅拌，需氧、常温发酵，第二次发酵和第三次发酵时，隔绝空气进行厌氧发酵。

发酵设备为发酵桶。

采用以上制备方法制得的桑葚益生菌酵素。

桑葚益生菌酵素原液进行灌装得到终产品。

灌装条件：控制室内洁净度达到10万级规定要求，车间工人进入车间前必须洗手、更衣、消毒，严格按灌装机及旋盖机的操作规程进行操作，在灌装进行中随时检查灌装量，封口质量等环节，确保产品符合标准技术要求。在灌装前后将设备及管道进行彻底清洗和消毒；灌装为瓶装，瓶及瓶盖清洗：瓶子先用纯净水翻转冲洗，再用洁净压缩空气吹干，盖子用消毒柜进行消毒处理，保证达到无菌要求。

优选以下技术方案：在S2中，专用发酵桶为850个，每个发酵桶容量1200升(每次加入原料总量1000kg左右)，电子称2台，每发酵桶装料量1吨，发酵温度为常温，车间密封，保持洁净，常温发酵，发酵时间为24个月。

在S5中，静置纯化罐为50个，每个静置纯化罐容量为30吨，使用材质为食品级塑料材质。

灌装时，灌装机的型号为TD-8，灌装机的数量为2套；旋盖机的型号TD-SP1，旋盖机的数量为2套，灌装速度为2000瓶/小时，瓶器为30ml玻璃瓶。

瓶及瓶盖清洗时，理瓶器2台；全自动翻转冲瓶机2台，全自动翻转冲瓶机的型号为CP-15；消毒柜1台，消毒柜的型号为ZTP-390。

与现有技术相比，本发明的有益技术效果是：

本发明以桑葚、桂圆、刺梨、苹果、葡萄、杏为主要原料，原料的营养成分在科学合理的搭配上更加丰富，在益生菌的发酵作用下，同时严格控制益生菌的种类、用量以及发酵时长，保证原料的发酵更加充分，发酵过程分为三个阶段且根据不同阶段的特性分别加入不同的菌种，使发酵具有层次更加合理；特别是二次发酵阶段，自然发酵，不再增加糖源，最终使得原料中的营养物质、活性物质、抗氧化物质能够完全释放分解出来，最终得到一种营养丰富、抗氧化、延缓衰老、预防动脉粥样硬化的桑葚益生菌酵素，增加了桑葚益生菌酵素营养价值。

本发明制得的桑葚益生菌酵素不含任何食品添加剂，安全健康，无毒副作用，可放心享用，适宜于各类人群；解决了传统桑葚应用途径窄、产品形态单一问题。

具体实施方式

下面结合实施例来说明本发明的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本发明，并不以任何方式限制本发明的范围。

以下实施例中原料加入发酵桶之前经过清洗、吹干、紫外消毒、粉碎。

实施例1：一种桑葚益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：

S1将桑葚700kg、桂圆50kg、刺梨50kg、苹果50kg、葡萄50kg、杏50kg、赤砂糖50kg加入发酵桶中；

S2向发酵桶中继续加入酵母菌10g和发酵乳杆菌5g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为8个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌5g、植物乳杆菌5g、保加利亚乳杆菌5g、鼠李糖乳杆菌5g进行第二次发酵，发酵时间8个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌10g、罗伊氏乳杆菌5g、醋酸菌5g继续第三次发酵8个月；

第二次发酵和第三次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜，隔绝空气进行厌氧发酵；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。

采用以上制备方法制得的桑葚益生菌酵素。

实施例2：一种桑葚益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：

S1将桑葚400kg、桂圆100kg、刺梨50kg、苹果100kg、葡萄50kg、杏100kg、赤砂糖50kg加入发酵桶中；

S2向发酵桶中继续加入酵母菌5g和发酵乳杆菌5g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为7个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌1g、植物乳杆菌5g、保加利亚乳杆菌1g、鼠李糖乳杆菌5g进行第二次发酵，发酵时间9个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5g、罗伊氏乳杆菌5g、醋酸菌1g继续第三次发酵7个月；

第二次发酵和第三次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜，隔绝空气进行厌氧发酵；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。

实施例3：一种桑葚益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：

S1将桑葚500kg、桂圆50kg、刺梨100kg、苹果60kg、葡萄100kg、杏60kg、赤砂糖50kg加入发酵桶中；

S2向发酵桶中继续加入酵母菌10g和发酵乳杆菌1g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为9个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌5g、植物乳杆菌1g、保加利亚乳杆菌5g、鼠李糖乳杆菌1g进行第二次发酵，发酵时间7个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌10g、罗伊氏乳杆菌1g、醋酸菌5g继续第三次发酵9个月；

第二次发酵和第三次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜，隔绝空气进行厌氧发酵；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。

实施例4：一种桑葚益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：

S1将桑葚600kg、桂圆80kg、刺梨80kg、苹果80kg、葡萄80kg、杏80kg、赤砂糖50kg加入发酵桶中；

S2向发酵桶中继续加入酵母菌8g和发酵乳杆菌3g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为8个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌3g、植物乳杆菌3g、保加利亚乳杆菌3g、鼠李糖乳杆菌3g进行第二次发酵，发酵时间8个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌8g、罗伊氏乳杆菌3g、醋酸菌3g继续第三次发酵8个月；

第二次发酵和第三次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜，隔绝空气进行厌氧发酵；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。。

实施例1-4得到桑葚益生菌酵素原液后，需按国标GB/T31121检测微生物指标、重金属指标达标，其他指标达到行业标准T/CBFIA08003-2016，然后桑葚益生菌酵素原液经专用管道输送至灌装车间，灌装得到桑葚益生菌酵素成品。

效果实验：实施例1-3所制得的桑葚益生菌酵素对衰老小鼠抗氧化能力影响。

试剂与实验动物

SOD、GSH-Px、MDA、TC、TG测定试剂盒、D-半乳糖；健康小鼠，体重(20±2)g，雌雄兼用

分组、衰老模型的建立及给样

D-半乳糖致衰老动物模型能够模拟动物老化过程，能使SOD、GSH-PX活性下降、MDA含量增加。

小鼠适应性饲养3d后，随机分为5个实验小组，即正常对照组，衰老模型组，实验组1-3组，每组10只。除正常对照组外，其余各组动物每只按体重剂量150mg/kg皮下注射D-半乳糖溶液，每日1次，正常对照组注射等量生理盐水。同时实验组1-3组每只分别按体重给予实施例1-3中所制得的桑葚益生菌酵素5g/kg给予灌胃，每日一次，衰老模型组与正常对照组给予等量生理盐水灌胃，连续40d。

血清中SOD、GSH-PX、MDA、TC、TG含量的测定

从小鼠眼眶取血，37℃水浴静置30min，3000r/min离心10min，分离得血清，参照试剂盒说明书的方法步骤分别测定血清中SOD、MDA、GSH-PX的含量。

统计学处理

实验数据用表示，采用方差分析处理数据、相关数据用SPSS11.5统计软件进行处理。

各组小鼠血清中SOD、GSH-PX活性和MDA、TC、TG含量变化情况

注:与正常对照组比较，^aP＜0.05，^bP＜0.0；与衰老模型组比较，^cP＜0.05，^dP＜0.01.

由上表结果显示，衰老模型组与正常对照组比较，血清SOD活性明显降低(P＜0.01)，而MDA含量明显升高(P＜0.05)。实验组1-3组与正常对照组比较，SOD活性明显降低(P＜0.05)；实验组1-2的GSH-PX活性明显降低(P＜0.05)；实验组3的MDA含量明显降低(P＜0.05)。实验组1-3组与衰老模型组比较，实验组3血清SOD、GSH-PX活性明显升高(P＜0.05)，而实验组1，实验组3MDA含量明显降低(P＜0.05)。

衰老模型组与正常对照组相比，血清TC、TG的含量明显升高(P＜0.05、P＜0.01)。实验组1-3组与正常对照组比较，血清TC、TG含量均明显降低(P＜0.01、P＜0.05)。

D-半乳糖致衰老动物模型能够模拟动物老化过程，能使SOD、GSH-PX活性下降、MDA含量增加。因SOD能分解氧自由基，被称为人体的“清道夫”。GSH-PX主要依靠其还原作用，从而起到保护生物酶免受过氧化物损害的作用。MDA是脂质氧化分解的产物，其生成的多少可以间接反映组织损伤程度。所以测定SOD、GSH-PX、MDA有助于了解机体内衰老的情况。本次实验结果表明，实施例1-3所制得的桑葚益生菌酵素能提高血清中SOD、GSH-PX活性和降低MDA含量，提示实施例1-3所制得的桑葚益生菌酵素在抗氧化、抗衰老方面具有重要作用，且以实施例1所制得桑葚益生菌酵素效果最为显著。另外本实验中实验组1-3均能显著降低小鼠血清中TC、TG的水平，而降低血清中TC、TG水平能有效预防动脉粥样硬化，验证了实施例1-3所制得的桑葚益生菌酵素能具有预防动脉粥样硬化的作用，且以实施例1所制得的桑葚益生菌酵素效果最为显著。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (4)

1.一种桑葚益生菌酵素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1将桑葚400-700kg、桂圆50-100 kg、刺梨50-100 kg、苹果50-100 kg、葡萄50-100kg、杏50-100 kg、赤砂糖50 kg加入发酵设备中；

S2向发酵设备中继续加入酵母菌5-10g和发酵乳杆菌1-5g进行初发酵，发酵时间为7-9个月；初发酵结束后加入植副干酪乳杆菌1-5g、植物乳杆菌1-5g、保加利亚乳杆菌1-5g、鼠李糖乳杆菌1-5g进行第二次发酵，发酵时间7-9个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5-10g、罗伊氏乳杆菌1-5g、醋酸菌1-5g继续第三次发酵7-9个月；

S3三阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.2-3.6之间，酒精度＜0.5%时，发酵完成；

S4将发酵完成的发酵液进行过滤；

S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5%、乳酸菌总数≥1×10⁶CFU/ml时纯化完成，得到桑葚益生菌酵素原液。

2.根据权利要求1所述桑葚益生菌酵素的制备方法，其特征在于：所述S2中初发酵时，发酵过程定期搅拌，需氧、常温发酵，第二次发酵和第三次发酵时，隔绝空气进行厌氧发酵。

3.根据权利要求1所述的桑葚益生菌酵素的制备方法，其特征在于：发酵设备为发酵桶。

4.采用权利要求1-3任一项制备方法制得的桑葚益生菌酵素。