CN108794569A - 天然产物Symplostatin4衍生物及其在制备抗癌症干细胞药物中的应用 - Google Patents

天然产物Symplostatin4衍生物及其在制备抗癌症干细胞药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种天然产物Symplostatin 4的衍生物及其在制备抗癌症干细胞药物中的应用，该衍生物的结构通式为：本发明所述的天然产物Symplostatin 4衍生物可有效抑制多种癌症细胞增殖，可应用于抗癌药物中。

Description

天然产物Symplostatin4衍生物及其在制备抗癌症干细胞药 物中的应用
技术领域
本发明属于药物领域，尤其是涉及一种天然产物Symplostatin 4衍生物及其在制备抗癌症干细胞药物中的应用。
背景技术
癌症干细胞(CSCs)在癌症的形成、发展、复发、转移和耐药性中起到重要作用。从本质上讲，癌症干细胞通过不断的自我更新和无限增殖，并且生长基本不受机体的调控，从而维持着肿瘤细胞群的生命力；癌症干细胞的运动能力和侵袭能力又使肿瘤细胞的转移成为可能；癌症干细胞具有长时间处于休眠状态的能力，对大多数药物具有很强的抵抗力，这是因为癌症干细胞拥有多种耐药分子，因此，大多数药物能够杀伤肿瘤细胞却对癌症干细胞无效。癌症干细胞抗凋亡的分子也比肿瘤细胞多，对DNA的修复能力也有所增强，癌症干细胞的这些特性使得临床上常用的治疗方法对肿瘤干细胞作用微弱甚至几乎无效，导致在治疗癌症过程中出现复发和转移，成为临床治疗癌症的一大难题。目前，针对癌症干细胞的药物分子的发展是医药研究领域中的热点问题。然而，能选择性地清除癌症干细胞的分子是罕见的。由于缺乏清除癌症干细胞的先导化合物，限制了癌症干细胞治疗药物的研发。
从天然产物中寻找先导化合物，探索构效关系，并进行结构优化，是新药分子研发的主要来源之一。天然产物Symplostatin 4是2009年由Luesch 和其同事在蓝藻中首次分离并确定结构的链状脂肽类化合物。该化合物具有优良的抗恶性疟原虫活性而引起药物化学家的关注。以往报道的 Symplostatin 4合成路线收率低，且只能通过制备HPLC纯化。这些合成路线不易大量获得Symplostatin 4及其类似物。这极大的阻碍了对天然产物Symplostatin 4及其衍生物的药物化学研究。
发明内容
有鉴于此，本发明旨在提出一种天然产物Symplostatin 4衍生物或其药学上可接受的盐。
本发明的另一目的是提供一种天然产物Symplostatin 4衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗癌症干细胞药物中的应用。
本发明的又一目的是提供一种抗癌症干细胞的药物组合物。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
一种天然产物Symplostatin 4衍生物或其药学上可接受的盐，该衍生物的结构通式如式(I)所示：
式中：
X独立地选自O或N；
R1和R2独立地选自氢、甲基、取代芳基羰基、烷基羰基；
R3选自脂基、二级胺、三级胺、含N杂环。
进一步的，所述的R1和R2独立地选自Cbz、 4-炔基-1-羰基。
进一步的，所述的R3为甲脂、叔丁氨基、二乙氨基、吗啉基或取代的氨基戊烯酰基。
进一步的，所述的R3为
进一步的，所述的天然产物Symplostatin 4衍生物为化合物1、化合物 19、化合物21a、化合物21b、化合物21c、化合物24a、化合物24b、化合物24c、化合物33a、化合物33b、化合物35a、化合物35b、化合物35c、化合物35d、化合物35e、化合物40a、化合物40b、化合物40c，其结构式如下：
本发明还提供一种上述天然产物Symplostatin 4衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗癌症干细胞药物中的应用。
本发明还提供一种抗癌症干细胞的药物组合物，该药物组合物中的活性成分为权利要求1-5任一所述的天然产物Symplostatin 4衍生物或其药学上可接受的盐。
进一步的，所述的癌症为实体瘤。
进一步的，所述的癌症为妇科癌类、内分泌癌类、骨癌类、肺癌类、脑肿瘤、CNS肿瘤、胃肠癌类、泌尿生殖器癌类、头部肿瘤类、颈部肿瘤类、淋巴癌类、眼癌类、皮肤癌类、软组织肉瘤类或泌尿系统类癌症。
进一步的，所述的癌症为卵巢癌、子宫颈癌、阴道癌、阴部癌、子宫/ 子宫内膜癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输卵管癌、子宫肉瘤、肾上腺皮质癌、脑垂体癌、胰癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、胸腺癌、多发性内分泌肿瘤、骨肉瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经母细胞瘤、听神经瘤、神经胶瘤、脊髓肿瘤、结肠直肠癌、晚期结肠直肠腺癌、肝癌、肝外胆管癌、胃肠类癌性肿瘤、胆囊癌、胃癌、食道癌、小肠癌、阴茎癌、翠丸癌、前列腺癌、鼻癌、鼻窦癌、鼻咽癌、口腔癌、唇癌、唾腺癌、喉头癌、下咽癌、正咽癌、霍奇金病、非霍奇金氏淋巴瘤、周围T-细胞林巴瘤、皮肤型T-细胞淋巴瘤、AIDS相关性淋巴瘤、视网膜母细胞瘤、葡萄膜黑色素瘤、非黑色素瘤皮肤癌、梅克尔细胞癌、卡波希肉瘤、儿童软组织肉瘤、成人软组织肉瘤、肾癌维尔姆斯肿瘤、膀肤癌、尿道癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌、肺癌或转移性细胞癌。
相对于现有技术，本发明具有以下优势：
本发明通过对天然产物Symplostatin 4进行结构改造，提供了可以有效清除癌症干细胞的化合物，研究表明，本发明提供的天然产物Symplostatin 4 衍生物可有效抑制多种癌症细胞增殖，可应用于抗癌药物中。
附图说明
图1为对A375和B16F10连续给化合物35b 7天的细胞生长情况；
图2为对A375和B16F10连续给化合物35b 7天的细胞生长情况的定量分析(*代表P<0.05；**代表P<0.01，下同)；
图3为用不同浓度的化合物35b诱导凋亡的A375和B16F10细胞的流式细胞分析；
图4为用不同浓度的化合物35b诱导凋亡的A375和B16F10细胞的流式细胞分析的定量分析；
图5为不同浓度的化合物35b处理A375 48h后的蛋白印迹；
图6为不同浓度的化合物35b处理B16F10 48h后的蛋白印迹；
图7为用0.25μM的35b处理A375细胞进行划痕愈合实验(分别在0h, 24h和48h进行记录)；
图8为用0.25μM的35b处理B16F10细胞进行划痕愈合实验(分别在 0h,24h和48h进行记录)；
图9为用0.25μM的35b处理A375细胞进行划痕愈合实验的定量分析；
图10为用0.25μM的35b处理B16F10细胞进行划痕愈合实验的定量分析；
图11为将细胞接种在transwell的上室中，A375和B16F10细胞与0.25 μM化合物35b孵育24h的迁移图；
图12为将细胞接种在transwell的上室中，A375和B16F10细胞与0.25 μM化合物35b孵育24h的定量分析图；
图13为将细胞接种在transwell的上室中，A375和B16F10细胞与0.25 μM化合物35b孵育24h的侵袭图；
图14为将细胞接种在transwell的上室中，A375和B16F10细胞与0.25 μM化合物35b孵育24h的定量分析图；
图15为用35b处理A375和B16F10细胞48h，然后收集细胞并铺于24 孔超低附着板中，培养1周后收集的球状菌落；
图16为用35b处理B16F10细胞48h，然后收集细胞并铺于24孔超低附着板中，培养1周后的球形菌落的定量分析图；
图17为用35b处理A375细胞48h，然后收集细胞并铺于24孔超低附着板中，培养1周后的球形菌落的定量分析图；
图18为用35b处理A375细胞48h，流式细胞仪检测ALDH+细胞的比率图；
图19为用35b处理A375细胞48h，流式细胞仪检测ALDH+细胞的定量分析图；
图20为用35b处理B16F10细胞48h，流式细胞仪检测ALDH+细胞的比率图；
图21为用35b处理B16F10细胞48h，流式细胞仪检测ALDH+细胞的定量分析图；
图22为用不同浓度的35b处理TCF/LEF报告质粒转染的293T细胞48h 后，收集细胞进行萤光素酶测定结果；
图23为用不同浓度的35b处理A375细胞48h，用Western blot法检测 Stat3,p-Stat3,β-catenin和c-myc含量；
图24为用不同浓度的35b处理B16F10细胞48h，用Western blot法检测Stat3,p-Stat3,β-catenin和c-myc含量；
图25为用不同浓度化合物35b处理A375细胞48小时，通过流式细胞仪分析CD133+细胞的定量分析图；
图26为用不同浓度化合物35b处理A375细胞48小时，通过流式细胞仪分析CD133+细胞的定量分析直方图；
图27为用不同浓度化合物35b处理B16F10细胞48小时，通过流式细胞仪分析CD133+细胞的定量分析图；
图28为用不同浓度化合物35b处理B16F10细胞48小时，通过流式细胞仪分析CD133+细胞的定量分析直方图；
图29为对照组和给药组小鼠体重的增长对比图；
图30为对照组与给药组肿瘤对比；
图31为对照组与给药组肿瘤重量直方图；
图32为对照组与给药组肿瘤体积变化对比图。
具体实施方式
除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下面结合实施例及附图来详细说明本发明。
天然产物Symplostatin 4逆合成分析如下：
化合物6的制备：
化合物9的合成：取250mL反应瓶，将原料L-Leu-OH(10.0g,76.2mmol) 加入50mL水中，逐滴滴加浓硫酸至溶解，0℃下滴加NaNO2(7.89g,114 mmol)的水溶液50mL，逐渐升到室温并搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，乙酸乙酯萃取3次(100mL×3)，饱和氯化钠溶液洗3次(100mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，得到9.50g油状目标产物化合物9，产率95％。1H NMR(400MHz,CDC3)δ4.29(dd,J＝8.1,5.3Hz,1H), 1.91(dp,J＝13.4,6.7Hz,1H),1.63(ddd,J＝8.1,5.4,1.9Hz,2H),0.97(d,J＝ 6.6Hz,6H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ180.7,69.0,43.4,24.6,23.3,21.5.
化合物10的合成：取250mL反应瓶，0℃氩气保护下，将化合物9(5.00 g,37.8mmol)溶解在70mL干燥的DMF中，加入K2CO3(10.5g,75.7mmol)，然后向体系中逐滴滴加溴丙烯(9.15g,75.7mmol)，室温下搅拌过夜，TLC 检测反应完毕后，向体系中加入100mL水，乙酸乙酯萃取3次(100mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝20:1至5:1)得到5.80g油状目标产物化合物10，产率89％。1H NMR (400MHz,CDCl3)δ5.92(ddt,J＝17.1,10.4,5.8Hz,1H),5.40–5.22(m,2H), 4.72–4.61(m,2H),4.22(ddd,J＝8.3,5.9,4.9Hz,1H),2.67(d,J＝6.0Hz,1H), 1.90(ddt,J＝14.5,13.2,6.7Hz,1H),1.61–1.52(m,2H),0.95(dd,J＝6.7,4.2 Hz,6H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ175.7,131.6,119.1,69.2,66.2,43.6, 24.5,23.3,21.7.
化合物11的合成：取500mL反应瓶，0℃下，将N-Cbz-L-Ile-OH(13.0 g,49.0mmol)，化合物10(2.80g,16.3mmol)溶解在55mL二氯甲烷中，向体系中加入DIC(6.18g,49.0mmol)，搅拌15min后，加入DMAP(599 mg,4.90mmol)，逐渐升至室温搅拌6小时，TLC检测反应完毕后，用1N 的盐酸溶液和饱和碳酸钠溶液各萃取有机相3次，再用饱和氯化钠洗1次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝30:1至20:1)得到6.50g油状目标产物化合物11，产率95％。1H NMR (400MHz,CDCl3)δ7.26(d,J＝4.4Hz,5H),5.85–5.72(m,1H),5.27–5.10 (m,3H),5.01(s,2H),4.52(d,J＝5.7Hz,2H),4.33(dd,J＝9.0,4.3Hz,1H), 1.88(dt,J＝10.9,5.5Hz,1H),1.70(ddt,J＝23.9,12.7,5.6Hz,2H),1.57(td,J＝ 8.2,4.1Hz,1H),1.51–1.39(m,1H),1.21–1.06(m,1H),0.96–0.74(m,12H). 13CNMR(100MHz,CDCl3)δ171.8,170.0,156.2,136.4,131.6,128.7,128.3, 128.2,119.1,71.9,67.1,66.0,58.3,39.9,38.1,24.7,24.6,23.1,21.7,15.4,11.8.
化合物6的合成：取25mL反应瓶，将化合物11(4.00g,9.40mmol) 溶解在10mL四氢呋喃中，向体系中加入吗啉(1.60g,18.8mmol)，Pd(Ph3)4 (543mg,0.47mmol)，室温反应约7h，TLC检测反应完毕后，用1N的盐酸洗一次，乙酸乙酯萃取3次(20mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，得到油状化合物3.60g。取该油状物(2.30g,6.06mmol) 溶解在DMF(20mL)中，向体系中加入PyBOP(3.15g,6.06mmol)和DIPEA (783mg,6.06mmol)，室温搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，用1N的盐酸溶液洗有机相，乙酸乙酯萃取3次(20mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得到2.60g油状目标产物化合物6，两步产率86％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.34 (ddd,J＝16.0,14.1,8.5Hz,10H),5.40(dd,J＝9.4,3.6Hz,1H),5.33(d,J＝9.2 Hz,1H),5.13(s,2H),4.50(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),2.11(dd,J＝10.0,6.5Hz, 1H),1.94–1.66(m,3H),1.54(ddd,J＝13.2,7.4,4.0Hz,1H),1.27(d,J＝2.9 Hz,1H),1.04(d,J＝6.8Hz,3H),1.01–0.91(m,10H).13CNMR(100MHz, CDCl3)δ196.7,171.33,156.7,136.8,136.2,129.7,128.6,128.3,128.2,124.6, 77.9,67.2,58.6,40.9,37.5,24.5,24.4,23.1,21.6,15.7,11.6.
化合物7的制备：
化合物13的合成：取250mL反应瓶，0℃下，将N-Boc-L-Ala-OH(5.00 g,26.4mmol)溶解在100mL二氯甲烷中，向体系中分别加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐(3.10g,31.7mmol)，HOBT(4.30g,31.7mmol)，DIPEA(17.0 g,132mmol)和EDCI(6.10g,31.7mmol)，慢慢升至室温搅拌过夜，TLC 检测反应完毕后，1N的盐酸溶液(100mL)洗一次，饱和的碳酸氢钠溶液(100mL)洗一次，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1至3：1)，得到5.51g白色固体目标产物化合物13，产率90％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.25(d,J＝ 7.4Hz,1H),4.66(t,J＝7.6Hz,1H),3.75(s,3H),3.19(s,3H),1.42(s,9H),1.29 (d,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ173.8,155.3,79.6,61.7, 46.6,32.2,28.4,18.8.
化合物14的合成：取50mL反应瓶，0℃氩气保护下，将化合物13(3.00 g,11.2mmol)溶解在9mL二氯甲烷中，向体系中慢慢加入三氟乙酸(12.7g, 111mmol)，反应2h，TLC检测反应完毕后，由于产物容易被旋转蒸发仪抽走，所以保留其三氟乙酸盐的形式，将体系直接旋干，产物不做纯化直接投下一步。0℃氩气保护下，取该产品(1.40g,6.20mmol)溶解在二氯甲烷(40mL)中，向体系中分别加入N-Fmoc-L-Leu-OH(2.20g,6.20mmol)， HOBT(1.00g,7.44mmol)，DIPEA(4.00g,31.0mmol)和EDCI(1.40g,7.44 mmol)，慢慢升至室温搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，饱和氯化钠洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1至1：1)得到2.25g白色固体目标产物化合物14，两步产率78％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(d,J＝7.5Hz,2H),7.61–7.57(m, 2H),7.39(t,J＝7.3Hz,2H),7.30(t,J＝7.3Hz,2H),6.83(d,J＝7.1Hz,1H), 5.35(d,J＝8.6Hz,1H),4.92(t,J＝6.7Hz,1H),4.39(dt,J＝17.6,10.4Hz,2H), 4.29–4.19(m,2H),3.77(s,3H),3.21(s,3H),1.69–1.51(m,3H),1.35(d,J＝ 6.8Hz,3H),0.94(d,J＝5.7Hz,6H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ172.8, 171.8,156.2,144.0,143.8,141.3,127.8,127.1,125.2,120.1,67.0,61.7,53.5, 47.2,45.8,42.1,32.3,24.7,23.1,21.9,18.3.
化合物7的合成：将化合物14(1.00g,2.14mmol)溶解在30mL二氯甲烷中，向体系中加入15mL二乙胺，室温反应2h，TLC检测反应完毕后，用饱和的氯化钠溶液洗一次，乙酸乙酯萃取3次(30mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1：1至乙酸乙酯：甲醇＝4：1)得到406mg白色固体目标产物化合物7，产率77％。 1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(d,J＝7.7Hz,1H),4.83–4.64(m,1H), 3.73(s,3H),3.15(dd,J＝9.2,4.9Hz,1H),3.11(s,3H),1.73(dtd,J＝15.0,8.6, 8.0,4.7Hz,3H),1.39(ddd,J＝13.5,8.7,4.9Hz,1H),1.24–1.14(m,3H),0.86 (dd,J＝14.5,6.6Hz,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ175.3,61.2,52.7, 44.3,44.2,24.0,23.3,21.7,17.5.
化合物5的制备：
化合物16的合成：取250mL反应瓶，将化合物15(2.00g,15.7mmol) 溶解在60mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，向体系中滴加NaHMDS 7.90mL，搅拌10min后滴加溴乙酰溴(2.60g,13.0mmol)，搅拌3h后， TLC检测反应完毕后，加饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取3次(60mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到2.90g黄色固体目标产物化合物20，产率75％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.95(s,1H),4.51–4.42(m,2H),4.37(d,J＝12.8 Hz,1H),3.77(s,3H),1.37(d,J＝6.6Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 181.1,169.3,165.1,92.5,59.0,56.0,30.7,16.6.
化合物5的合成：将化合物16(1.00g，4.00mmol)溶解在亚磷酸三乙酯(3.30g，20.0mmol)中，55℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，用旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2：1至乙酸乙酯：甲醇＝10： 1)得到1.18g油状目标产物化合物5，产率89％。1H NMR(400MHz,CDCl3) δ5.02(s,1H),4.57(d,J＝6.3Hz,1H),4.14(t,J＝6.9Hz,4H),3.93(dd,J＝ 22.2,14.2Hz,1H),3.84(s,3H),3.93(dd,J＝22.2,14.2Hz,1H),1.45(d,J＝6.3Hz,3H),1.29(t,J＝6.9Hz,6H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ180.8,168.5, 164.1,164.0,92.1,62.5,58.9,55.9,36.4,35.1,16.9,16.4,16.3.
化合物1的制备
化合物17的合成：取250mL反应瓶，将化合物6(1.84g,7.50mmol) 溶解在140mLDMF中，向体系中加入化合物7(4.50g,9.00mmol)，室温搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，体系用200mL水洗一次，乙酸乙酯萃取 3次(300mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)得到3.70g油状目标产物化合物17，产率 82％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.30(m,5H),6.95(d,J＝7.8Hz,1H), 6.77(d,J＝7.1Hz,1H),5.25-5.07(m,4H),4.94-4.85(m,1H),4.53-4.44(m,1H), 4.38-4.36(m,1H),3.74(s,3H),3.19(s,3H),2.07-1.99(m,1H),1.77-1.54(m, 6H),1.47-1.39(m,2H),1.31(d,J＝6.7Hz,3H),1.27-1.22(m,1H),1.00(d,J＝ 6.4Hz,3H),0.96-0.83(m,14H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ172.7,171.2, 171.1,170.1,157.1,136.0,128.8,128.5,128.1,74.1,67.3,61.7,59.0,51.5,45.6, 41.0,40.6,37.2,32.2,25.1,24.8,24.7,23.3,21.7,18.2,16.0,11.8.
化合物18的合成：取250mL反应瓶，将化合物17(1.30g,2.15mmol) 溶解在60mL甲醇中，加入钯碳500mg，置换氢气，室温搅拌约2h，TLC 检测CBZ已全部被脱掉，注射37％的甲醛溶液8mL，室温搅拌24h，TLC 检测反应完毕后，加硅藻土抽滤，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至2：1)得到861mg白色固体目标产物化合物18，产率80％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.73(d,J＝5.7 Hz,1H),6.51(d,J＝6.8Hz,1H),5.29–5.09(m,1H),4.85(s,1H),4.48(s,1H), 3.74(s,3H),3.20(s,3H),2.93(d,J＝10.1Hz,1H),2.30(s,6H),1.77(dd,J＝ 25.3,13.0Hz,3H),1.58(d,J＝28.0Hz,4H),1.30(d,J＝6.2Hz,3H),1.18– 1.10(m,1H),0.89(dd,J＝17.8,6.4Hz,19H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 172.6,170.9,170.8,170.1,72.5,72.4,61.7,51.3,45.8,41.8,41.6,41.0,33.5,32.3,25.1,24.7,24.5,23.3,23.1,22.1,21.5,18.3,15.8,10.5.
化合物4的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物18(290mg, 0.58mmol)溶解在6mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加 DIBAL-H(1.00mL，1.50mmol)，搅拌约4h，TLC检测反应完毕后，加 0.2mL甲醇淬灭，将体系倒入200mL饱和的酒石酸钠钾的饱和溶液并加入 200mL乙醚搅拌约1小时，用分液漏斗分液，水相用乙酸乙酯萃取(100mL× 3)，合并有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，为做进一步纯化直接投下一步。
实施例1：化合物1的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物5(0.19g,0.60mmol)溶解在 4mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.60mL，0.60 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物4(180mg,0.41mmol)的四氢呋喃溶液(2mL)搅拌3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL× 3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到146mg白色固体目标产物化合物1(Symplostatin 4)，产率60％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41(dd,J＝15.5,1.4Hz,1H),6.96(dd,J＝ 15.5,5.1Hz,1H),6.41(d,J＝8.2Hz,1H),6.17(d,J＝8.2Hz,1H),5.15(dd,J＝ 9.5,4.0Hz,1H),5.03(s,1H),4.71(dd,J＝12.8,6.2Hz,1H),4.61(q,J＝6.5Hz, 1H),4.42(td,J＝8.7,5.5Hz,1H),3.86(s,3H),2.93(d,J＝10.3Hz,1H),2.31(s, 6H),1.74(td,J＝13.2,12.0,4.6Hz,4H),1.69–1.59(m,4H),1.48(d,J＝6.6Hz, 3H),1.29(d,J＝7.0Hz,3H),1.14(dt,J＝22.2,7.6Hz,1H),1.03–0.79(m, 18H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ180.8,171.2,170.7,170.6,169.8,164.3, 148.3,122.5,93.1,72.6,58.9,55.8,51.6,46.3,41.7,41.0,40.8,33.5,25.1,24.8, 24.5,23.3,23.0,22.0,21.4,20.0,17.1,15.7,10.5。
化合物19、21a-c的合成路线如下：
具体地，化合物21a-c的结构和产率如下表：
实施例2：化合物19的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物4(100mg,0.23mmol)溶解在2mL的二氯甲烷中，加入三苯基亚正磷基乙酸甲酯(151mg,0.45mmol) 的二氯甲烷溶液2mL。TLC检测反应完毕后，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10：1至5：1)得到109 mg白色固体目标产物化合物19，产率95％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.85(dd,J＝15.7,5.0Hz,1H),6.65(d,J＝ 8.0Hz,1H),6.45(d,J＝8.1Hz,1H),5.88(dd,J＝15.7,1.6Hz,1H),5.10(dd,J ＝9.5,3.9Hz,1H),4.63(h,J＝6.8Hz,1H),4.45(td,J＝8.6,5.6Hz,1H),3.71(s, 3H),2.93(d,J＝10.3Hz,1H),2.29(s,6H),1.87–1.80(m,1H),1.67(ddt,J＝ 31.7,12.8,7.6Hz,6H),1.23(d,J＝7.0Hz,3H),1.13(dd,J＝14.2,7.7Hz,1H), 0.96–0.82(m,19H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ171.3,170.8,170.7,166.9, 148.7,120.2,72.6,72.5,51.7,51.5,45.8,41.7,40.9,40.8,33.4,25.1,24.9,24.5, 23.3,23.1,22.0,21.4,19.8,15.9,10.5。
实施例3：化合物21a的合成
首先进行化合物20的合成：取50mL反应瓶，将化合物19(1.00g,2.01 mmol)溶解在20mL四氢呋喃的水溶液中(THF:H2O＝1:1)，再向体系加入LiOH(253mg,6.03mmol)，TLC检测反应完成后，用1N的盐酸调pH 到4左右，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，直接用于下一步反应。
取20mL反应瓶，将化合物20(200mg,0.41mmol)溶解在5mL二氯甲烷中，降温至0℃，向体系中依次加入叔丁胺(36.6mg,0.50mmol)， HOBT(67.6mg,0.50mmol)，DIPEA(265mg,2.05mmol)，EDCI(95.9mg, 0.50mmol)。慢慢升至室温反映过夜，反应完毕后用1N的盐酸洗一次，饱和碳酸氢钠溶液洗一次，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1至1：1)得到143mg 油状目标产物化合物21a，产率65％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.65(dd,J＝15.2,5.1Hz,1H),6.30(dd,J＝ 20.3,7.9Hz,1H),5.78(d,J＝15.0Hz,1H),5.52(s,1H),5.16–5.04(m,1H), 4.60(d,J＝7.0Hz,1H),4.45–4.30(m,1H),2.95(d,J＝10.3Hz,1H),2.31(s, 6H),1.82–1.72(m,4H),1.70–1.59(m,4H),1.37(s,9H),1.23(d,J＝7.6Hz, 5H),0.98–0.84(m,18H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ170.5,169.9,163.7, 155.9,141.8,123.1,71.8,71.4,52.4,50.8,50.3,44.8,41.1,40.6,39.7,39.4,32.4, 27.7,24.0,23.8,23.5,22.5,22.5,22.2,20.6,20.3,19.1,17.2,14.7,9.3.
实施例4：化合物21b的合成
首先进行化合物20的合成：取50mL反应瓶，将化合物19(1.00g,2.01 mmol)溶解在20mL四氢呋喃的水溶液中(THF:H2O＝1:1)，再向体系加入LiOH(253mg,6.03mmol)，TLC检测反应完成后，用1N的盐酸调pH 到4左右，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，直接用于下一步反应。
取20mL反应瓶，将化合物20(200mg,0.41mmol)溶解在5mL二氯甲烷中，降温至0℃，向体系中依次加入二乙胺(36.6mg,0.50mmol)， HOBT(67.6mg,0.50mmol)，DIPEA(265mg,2.05mmol)，EDCI(95.9mg, 0.50mmol)。慢慢升至室温反映过夜，TLC检测反应完毕后，用1N的盐酸洗一次，饱和碳酸氢钠溶液洗一次，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1) 得到115mg黄色固体目标产物化合物21b，产率52％。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ6.69(dd,J＝15.0,5.1Hz,1H),6.37(d,J＝ 15.2Hz,1H),5.07(d,J＝6.0Hz,1H),4.62–4.54(m,1H),4.48–4.40(m,1H), 3.44(dt,J＝14.0,7.1Hz,4H),2.97(d,J＝9.5Hz,1H),2.30(s,6H),1.83–1.75 (m,3H),1.67(d,J＝10.1Hz,2H),1.54(d,J＝13.0Hz,2H),1.29(s,7H),1.21(t, J＝7.0Hz,3H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H),0.99–0.86(m,18H).13C NMR(100 MHz,MeOD)δ173.7,172.8,172.2,167.5,147.1,120.7,73.5,73.4,52.9,47.4, 43.6,42.4,42.2,42.0,41.6,34.7,30.7,26.2,25.8,25.6,23.5,21.9,21.7,20.0, 16.0,15.1,14.4,13.2,10.9.
实施例5：化合物21c的合成
首先进行化合物20的合成：取50mL反应瓶，将化合物19(1.00g,2.01 mmol)溶解在20mL四氢呋喃的水溶液中(THF:H2O＝1:1)，再向体系加入LiOH(253mg,6.03mmol)，TLC检测反应完成后，用1N的盐酸调pH 到4左右，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，直接用于下一步反应。
取20mL反应瓶，将化合物20(200mg,0.41mmol)溶解在5mL二氯甲烷中，降温至0℃，向体系中依次加入吗啉(43.6mg,0.50mmol)，HOBT (67.6mg,0.50mmol)，DIPEA(265mg,2.05mmol)，EDCI(95.9mg,0.50 mmol)。慢慢升至室温反映过夜，TLC检测反应完毕后，用1N的盐酸洗一次，饱和碳酸氢钠溶液洗一次，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到99.6 mg白色固体目标产物化合物21c，产率44％。
1H NMR(400MHz,MeOD)δ6.67(dd,J＝15.2,5.6Hz,1H),6.47–6.41 (d,1H),5.06(dd,J＝9.8,4.0Hz,1H),4.61–4.53(m,1H),4.39(dd,J＝10.1, 5.2Hz,1H),3.65(m,J＝11.0,5.1Hz,8H),2.97(d,J＝9.7Hz,1H),2.30(s,6H), 1.80(m,J＝17.4,7.5Hz,3H),1.66(m,J＝15.0,10.3,5.1Hz,2H),1.55(m,J＝8.5,4.5Hz,2H),1.31–1.26(m,5H),1.20–1.14(m,1H),0.99–0.86(m,19H). 13C NMR(100MHz,MeOD)δ173.7,172.9,172.3,172.3,147.5,120.3,73.5, 73.4,67.8,67.7,53.1,47.5,43.6,42.1,42.0,41.6,34.7,26.1,25.8,25.6,23.6, 23.4,21.9,21.7,19.9,16.0,10.9。
化合物24a-c的合成路下如下：
具体地，化合物21a-c的结构和产率如下表：
实施例6：化合物24a的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物5(150mg,0.49mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.50mL,0.49 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物22(180mg,0.33mmol)的四氢呋喃溶液(2mL)搅拌3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取(10 mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到127mg油状目标产物化合物24a，产率 55％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40–7.29(m,8H),6.97(dd,J＝15.5,5.4 Hz,2H),6.38(d,J＝8.1Hz,1H),5.26(d,J＝6.2Hz,1H),5.14–5.11(m,2H), 5.01(s,1H),4.70(q,J＝7.0Hz,1H),4.60(q,J＝6.5Hz,1H),4.52–4.43(m, 1H),4.20(dd,J＝6.5,4.4Hz,1H),3.84(s,3H),3.74(s,1H),3.19(s,1H),1.98 (q,J＝8.3,6.9Hz,1H),1.89(s,1H),1.70(d,J＝5.9Hz,2H),1.63–1.57(m, 2H),1.47(d,J＝6.6Hz,3H),1.30(t,J＝6.4Hz,3H),0.99(dd,J＝7.0,2.8Hz, 3H),0.94–0.87(m,15H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ179.5,170.3,169.9,169.1,168.6,163.3,156.1,147.5,134.8,127.6,127.4,126.8,121.4,92.0,73.4, 72.9,66.2,58.2,57.8,57.6,54.6,50.4,45.1,44.4,39.8,39.2,35.9,24.1,23.8, 22.2,20.3,18.8,17.0,16.0,14.8,10.5。
实施例7：化合物24b的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物23(178mg,0.46mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.46mL,0.46 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物22(170mg,0.31mmol)的四氢呋喃溶液(2mL)搅拌3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取(10 mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到168mg油状目标产物化合物24b，产率 70％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38–7.29(m,6H),7.27–7.14(m,4H), 7.02(dd,J＝15.8,6.5Hz,1H),6.94(d,J＝6.1Hz,2H),6.37(d,J＝7.3Hz,1H), 5.23(d,J＝5.0Hz,1H),5.10(m,J＝8.6Hz,2H),4.88(s,1H),4.79(s,1H),4.74 (s,1H),4.46(s,1H),4.21(s,1H),3.92(s,1H),3.79(s,3H),3.53(dd,J＝13.8, 4.5Hz,1H),3.10(d,J＝13.4Hz,1H),1.97(s,1H),1.75–1.56(m,5H),1.43(m, J＝6.0Hz,1H),1.30(d,J＝6.5Hz,3H),0.98(d,J＝6.3Hz,3H),0.92–0.89(m, J＝12.4Hz,17H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ177.9,171.4,170.9,170.3,169.8,164.7,157.2,149.0,135.9,134.4,129.7,128.7,128.5,128.3,128.0,127.1,122.4,95.0,74.5,67.3,59.8,59.3,58.4,51.6,46.2,40.4,40.2,37.1,34.7,25.2, 24.9,24.7,23.3,23.3,21.5,20.0,15.9,11.7。
实施例8：化合物24c的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物23(150mg,0.45mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.32mL,0.45 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物22(246mg,0.45mmol)的四氢呋喃溶液(2mL)搅拌3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取(10 mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到212mg油状目标产物化合物24c，产率 65％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40–7.31(m,5H),7.03–6.90(m,2H), 6.37(d,J＝8.2Hz,1H),5.21(d,J＝6.4Hz,1H),5.15–5.08(m,3H),5.05(d,J ＝2.3Hz,1H),4.71(q,J＝7.2Hz,1H),4.59(d,J＝3.1Hz,1H),4.46(s,1H), 4.21(d,J＝5.8Hz,1H),3.82(s,3H),2.63–2.51(m,1H),1.98(s,1H),1.82(s, 1H),1.70(s,6H),1.61(d,J＝10.7Hz,1H),1.49–1.40(m,1H),1.34–1.23(m, 6H),1.10(dd,J＝7.1,2.2Hz,3H),0.99(d,J＝6.9Hz,3H),0.95–0.88(m, 12H),0.74(dd,J＝6.8,2.2Hz,3H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ179.6,171.4, 171.0,170.5,170.3,164.6,157.2,148.6,135.9,128.8,128.6,128.0,122.8,94.8, 74.6,67.4,64.0,59.4,58.6,51.7,46.3,40.5,40.2,37.1,29.8,28.8,25.3,25.0, 24.8,23.4,23.3,21.6,21.5,20.0,19.0,15.9,15.5,11.7。
化合物33a-b的合成路线如下：
具体地，化合物33a-b的具体结构和产率如下：
化合物29的合成：化合物29采用氨基酸固相合成法得到，具体步骤如下：称取二氯树脂(1.70g,2.00mmol)放入反应容器中，加入适量的二氯甲烷溶胀10分钟。称取Fmoc-L-丙氨酸(934mg,3.00mmol)溶解在适量的二氯甲烷中，再加入DIPEA(775mg,6.00mmol)，混匀5分钟，加入反应容器反应1小时。用适量的二氯甲烷洗5次，每次1分钟，然后像体系中加入封闭液(DCM:MeOH:DIPEA＝17：2：1)反应20分钟。用二氯甲烷洗5 次，DMF洗5次。加入20％哌啶DMF溶液脱去Fmoc保护基，反应30分钟，用DMF洗5次。称取Fmoc-L-亮氨酸(1.06mg,3.00mmol)溶解在DMF 中，加入HBTU(1.14g,3.00mmol)和DIPEA(775mg,6.00mmol)，混匀5分钟加入到体系中反应2小时。用DMF洗5次，加入20％哌啶DMF 溶液反应30分钟脱去Fmoc保护基，用DMF洗5次。再次称取Fmoc-L-亮氨酸(1.40g,4.00mmol)溶解在DMF中，加入HBTU(1.52g,4.00mmol) 和DIPEA(1.03g,8.00mmol)，混匀5分钟加入到体系中反应2小时，用DMF洗5次。称取Cbz-L-异亮氨酸(1.60g,6.00mmol)溶解在DMF中，加入HBTU(2.28g,6.00mmol)和DIPEA(1.55g,12.0mmol)，混匀5分钟加入到体系中反应2小时，用DMF洗5次，二氯甲烷洗5次，然后用1％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液切割，收集切割液，旋转蒸发仪旋干即得化合物 29，不做进一步纯化直接投下一步。
化合物30的合成：取25mL反应瓶，0℃下，将化合物29(300mg,0.53 mmol)溶解在6mL二氯甲烷中，向体系中分别加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐 (208mg,2.10mmol)，HBTU(796mg,2.10mmol)，DIPEA(0.44mL,2.65 mmol)，慢慢升至室温搅拌过夜，TLC检测反应完毕后，1N的盐酸溶液(15 mL×3)洗3次，饱和的碳酸氢钠溶液(20mL)洗一次，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1-1：1至二氯甲烷：甲醇＝30：1)，得到254mg白色固体目标产物化合物30，产率79％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(d,J＝29.5Hz,3H),7.29(dd,J＝12.8, 5.2Hz,5H),6.53(s,1H),5.19–5.00(m,3H),5.02-4.82(m,2H),4.27(t,J＝ 8.0Hz,1H),3.70(s,3H),3.17(s,3H),1.81(d,J＝6.3Hz,1H),1.67–1.51(m, 7H),1.27(d,J＝6.9Hz,3H),1.09(dt,J＝14.3,7.8Hz,1H),0.89–0.80(m, 18H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ173.0,172.3,172.0,156.7,136.8,128.4, 127.9,127.8,66.7,61.6,59.8,51.7,45.1,41.8,41.6,37.9,32.2,29.8,25.1,24.9, 24.8,22.9,22.7,22.5,17.9,15.4,11.4.
化合物31的合成：取100mL反应瓶，将化合物30(1.00g,1.65mmol) 溶解在50mL甲醇中，加入钯碳500mg，置换氢气，室温搅拌约2h，TLC 检测CBZ已全部被脱掉，注射37％的甲醛溶液4mL，室温搅拌48h，TLC 检测反应完毕后，用硅藻土抽滤，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)得到700.7mg白色固体目标产物化合物31，产率85％。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.13(d,J＝6.6Hz,1H),7.00(d,J＝8.2Hz, 1H),6.81(d,J＝7.8Hz,1H),4.98–4.86(m,1H),4.54(p,J＝8.0Hz,2H),3.74 (s,3H),3.18(s,3H),2.58(d,J＝5.8Hz,1H),2.22(s,6H),1.85–1.75(m,1H), 1.56–1.47(m,7H),1.28(d,J＝6.8Hz,3H),1.14(dt,J＝14.4,7.5Hz,1H),0.91 –0.86(m,19H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ172.9,172.1,171.8,171.4, 74.3,61.7,51.6,51.0,45.5,43.0,41.4,41.1,34.3,26.7,24.8,24.6,23.1,22.0, 21.9,18.2,14.8,11.9。
化合物32的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物31(200mg, 0.40mmol)溶解在4mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下20℃，向体系中加入LiAlH4(18.2mg,0.48mmol)，搅拌约半小时，TLC检测反应完毕后，加4mL乙酸乙酯淬灭，用0.1N的氯化氢溶液洗1次，分泌液漏斗分液，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，不进行纯化直接投下一步。
实施例9：化合物33a的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物5(312mg,1.02mmol)溶解在4mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(1.00mL,1.02 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物32(300mg,0.68mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (20mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝60：1至15：1)得到181mg油状目标产物化合物33a，产率 45％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.4 Hz,1H),7.82(d,J＝8.3Hz,1H),7.27(dd,J＝15.5,1.7Hz,1H),6.87(dd,J＝ 15.5,4.9Hz,1H),5.34(s,1H),4.62(q,J＝6.6Hz,1H),4.51(dq,J＝10.9,5.3, 3.7Hz,1H),4.42–4.34(m,1H),3.99(dtd,J＝14.7,7.4,3.2Hz,1H),3.86(s, 3H),2.67(d,J＝10.1Hz,1H),2.15(d,J＝2.8Hz,6H),1.78–1.69(m,1H),1.65 –1.54(m,2H),1.48(dd,J＝9.3,5.5Hz,2H),1.37(d,J＝6.7Hz,3H),1.18(d,J ＝7.0Hz,3H),1.10–1.01(m,1H),0.91–0.79(m,18H),0.72(d,J＝6.7Hz, 3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ180.7,171.8,171.1,169.5,169.3,163.3,149.5,121.1,93.0,71.1,59.2,54.8,50.8,50.4,45.2,41.4,41.3,40.4,32.4,24.7,24.1,23.1,23.0,21.5,21.1,19.5,16.7,15.2,10.4。
实施例10：化合物33b的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物39(227mg,0.68mmol)溶解在3mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.68mL,0.68 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物32(200mg,0.45mmol)的四氢呋喃溶液(3mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝60：1至15：1)得到153.40mg油状目标产物化合物33b，产率55％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.4 Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.27(dd,J＝15.5,1.7Hz,1H),6.85(dd,J＝ 15.5,4.9Hz,1H),5.38(s,1H),4.59(d,J＝2.6Hz,1H),4.51(q,J＝6.6Hz,1H), 4.41–4.35(m,1H),4.31(q,J＝7.8Hz,1H),3.85(s,3H),2.67(d,J＝10.0Hz, 1H),2.43(pd,J＝7.1,2.4Hz,1H),2.16(s,6H),1.72(dd,J＝11.9,5.7Hz,1H), 1.66–1.53(m,2H),1.47(q,J＝7.0Hz,2H),1.38(td,J＝8.7,8.2,4.3Hz,1H), 1.18(d,J＝7.0Hz,3H),1.05(d,J＝7.1Hz,3H),0.92–0.78(m,18H),0.72(d,J ＝6.6Hz,3H),0.66(d,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ 179.6,171.9,171.2,169.9,169.6,163.4,149.6,121.1,94.8,71.0,63.1,59.1,50.8, 50.4,45.2,41.4,40.3,32.4,28.1,24.7,24.1,23.2,23.1,21.5,21.1,19.5,18.6, 15.3,15.1,10.4。
化合物35a-e的合成：
具体地，化合物35a-e的具体结构和产率如下：
化合物34的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物30(200mg, 0.33mmol)溶解在5mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下20℃，向体系中加入LiAlH4(62.6mg,1.65mmol)，搅拌约半小时，TLC检测反应完毕后，加4mL乙酸乙酯淬灭，用0.1N的氯化氢溶液洗1次，分泌液漏斗分液，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，不做进一步纯化直接投下一步。
实施例11：化合物35a的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物5(168mg,0.55mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.55mL,0.55 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物34(200mg,0.37mmol)的四氢呋喃溶液(3mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (10mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝40：1至15：1)得到186mg白色固体目标产物化合物35a，产率72％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝7.8Hz,1H),7.96(d,J＝8.4 Hz,1H),7.80(d,J＝8.6Hz,1H),7.38–7.28(m,7H),6.86(d,J＝15.3Hz,1H), 5.34(s,1H),5.02(s,2H),4.62(dd,J＝6.9,2.6Hz,1H),4.50(s,1H),4.32(t,J＝ 8.2Hz,2H),3.87(s,3H),1.70(s,1H),1.59(q,J＝6.7Hz,2H),1.50(d,J＝7.0 Hz,2H),1.43(d,J＝7.5Hz,2H),1.37(d,J＝5.8Hz,3H),1.25–1.22(m,1H), 1.21–1.16(m,4H),1.10(q,J＝11.7,9.8Hz,1H),0.90–0.79(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ181.2,171.9,171.6,171.4,169.8,163.7,156.4,149.9,137.5,128.7,128.2,128.0,121.6,93.5,65.7,59.7,55.3,51.2,45.7,41.6, 36.8,24.8,24.6,24.5,23.5,23.4,22.1,21.9,19.9,17.2,15.7,11.3。
实施例12：化合物35b的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物52(183mg,0.55mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.55mL,0.55 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物34(200mg,0.37mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (10mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝40：1至15：1)得到115mg白色固体目标产物化合物35b，产率43％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(d,J＝7.7Hz,1H),7.98(d,J＝8.2 Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.40–7.22(m,7H),6.85(dd,J＝15.5,4.9Hz, 1H),5.38(s,1H),5.02(s,2H),4.59(d,J＝2.4Hz,1H),4.51(q,J＝6.5Hz,1H), 4.32(p,J＝7.9Hz,2H),3.89(t,J＝8.2Hz,1H),3.85(s,3H),2.43(dtd,J＝13.5, 6.8,2.2Hz,1H),1.70(d,J＝6.0Hz,1H),1.59(dq,J＝13.2,6.6Hz,2H),1.52– 1.46(m,2H),1.46–1.40(m,2H),1.23(s,1H),1.18(d,J＝6.9Hz,3H),1.04(d, J＝7.1Hz,3H),0.91–0.76(m,19H),0.66(d,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ179.6,171.5,171.1,171.0,170.0,163.4,156.0,149.6,137.1,128.3,127.7,127.6,121.2,94.8,65.3,63.0,59.1,50.8,45.2,41.2,40.7,36.3, 28.1,24.3,24.1,24.0,23.1,23.0,21.6,21.5,19.5,18.6,15.3,15.1,10.9。
实施例13：化合物35c的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物42(300mg,0.57mmol)溶解在3mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.60mL,0.57 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物34(250mg,0.46mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝40：1至15：1)得到331mg白色固体目标产物化合物35c，产率79％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(d,J＝7.7Hz,1H),7.97(t,J＝9.2 Hz,2H),7.79(d,J＝8.3Hz,1H),7.33(q,J＝6.6Hz,7H),7.23–7.15(m,3H), 7.00(dd,J＝15.4,4.7Hz,1H),5.18(s,1H),5.01(d,J＝7.3Hz,2H),4.51(q,J＝ 6.7Hz,1H),4.33(p,J＝7.6Hz,2H),3.89(t,J＝8.3Hz,1H),3.79(s,3H),3.55 (dd,J＝14.8,5.1Hz,1H),3.20(d,J＝14.7Hz,1H),1.69(s,1H),1.60(s,11H), 1.45(dt,J＝14.7,7.7Hz,5H),1.20(q,J＝8.0Hz,3H),1.14–1.05(m,1H),0.87 –0.77(m,20H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ178.4,171.4,171.1,170.9, 169.5,163.9,155.9,149.9,148.8,137.0,134.2,130.5,128.2,127.7,127.5,124.3, 124.1,122.5,120.8,118.8,114.6,113.3,94.8,83.7,65.3,59.1,58.9,58.6,50.8, 50.7,45.2,41.2,40.7,36.3,27.6,24.3,24.1,24.0,23.6,23.0,22.9,21.6,21.4,19.4,15.2,10.8。
实施例14：化合物35d的合成
取25mL反应瓶，将化合物35c(300mg,0.33mmol)溶解在3mL二氯甲烷中，降温至0℃，向体系中加入1.5mL三氟乙酸，搅拌2h，TLC 检测反应完毕后，用饱和碳酸氢钠溶液洗一次，饱和食盐水洗一次，乙酸乙酯次取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)得到219mg白色固体目标产物化合物35d，产率82％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),8.13(d,J＝6.9Hz,1H), 7.95(d,J＝7.7Hz,1H),7.77(d,J＝7.8Hz,1H),7.35(s,4H),7.29(d,J＝7.7Hz, 4H),7.20(d,J＝15.5Hz,1H),7.05–6.89(m,3H),6.80(s,1H),5.05(s,1H), 5.02(s,2H),4.93(s,1H),4.51(s,1H),4.38–4.28(m,2H),3.90(t,J＝7.7Hz, 1H),3.77(s,3H),3.60(d,J＝11.2Hz,1H),3.20(d,J＝14.7Hz,1H),1.70(s, 1H),1.59(d,J＝5.5Hz,2H),1.45(d,J＝6.4Hz,4H),1.26–1.18(m,4H),1.10 (d,J＝7.1Hz,1H),0.88–0.76(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ 178.7,171.4,171.0,170.9,169.6,163.7,155.9,149.4,137.0,135.6,128.2,127.8,127.6,127.5,123.8,121.1,120.7,118.4,117.8,111.3,106.3,94.6,65.2,59.2, 59.1,58.8,50.8,45.2,41.1,40.7,36.3,24.1,24.0,23.0,21.6,21.4,19.4,15.2, 10.8。
实施例15：化合物35e的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物23(209mg,0.55mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.55mL,0.55 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物34(200mg,0.37mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝50：1至18：1)得到240mg白色固体目标产物化合物35b，产率84％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.2 Hz,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,1H),7.33–7.27(m,6H),7.2–7.15(m,4H),6.95 (dd,J＝15.5,5.0Hz,1H),6.87(d,J＝6.3Hz,2H),5.14(s,1H),5.02(s,2H), 4.94(s,1H),4.52(q,J＝6.1Hz,1H),4.31(q,J＝8.1Hz,2H),3.89(t,J＝8.1Hz, 1H),3.84(s,3H),3.42(dd,J＝13.7,5.0Hz,1H),3.03(d,J＝11.8Hz,1H),1.70 (s,1H),1.58(dd,J＝12.7,6.3Hz,2H),1.46(dt,J＝14.1,7.2Hz,5H),1.21(d,J ＝7.0Hz,3H),1.09(dt,J＝15.0,8.0Hz,1H),0.89–0.76(m,18H).13C NMR (100MHz,DMSO-d6)δ177.9,171.4,171.0,170.9,169.4,163.7,155.9,149.6, 137.0,134.2,129.3,128.2,128.0,127.6,127.5,126.7,121.0,94.9,65.2,59.1,58.9,50.8,45.2,41.1,40.6,36.3,33.9,24.3,24.1,24.0,23.0,21.6,21.4,19.4, 15.2,10.8。
化合物40a-c的合成路线如下：
具体地，化合物40a-c的具体结构和产率如下：
化合物36的合成：取50mL反应瓶，将化合物30(1.30g,2.15mmol) 溶解在20mL甲醇中，再向体系中加入650mg钯/碳，将体系置换成氢气，室温搅拌2h后TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液用旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝20：1-10：1)，得到864mg白色固体目标产物化合物36，产率85％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15–7.86(m, 3H),4.78–4.57(m,1H),4.34(dt,J＝15.8,7.8Hz,2H),3.72(s,3H),3.13(d,J ＝5.1Hz,1H),3.09(s,3H),1.89(s,1H),1.59(dt,J＝12.0,6.6Hz,3H),1.42(q, J＝6.5Hz,5H),1.23(s,1H),1.18(d,J＝7.1Hz,3H),1.06(dt,J＝14.6,7.7Hz, 1H),0.90–0.78(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ173.1,172.1, 171.6,171.5,61.1,58.6,50.6,50.4,44.6,41.1,40.7,38.0,24.1,24.0,23.7,23.1, 23.0,21.7,21.4,21.2,16.9,15.4,11.5。
化合物37a的合成：取25mL反应瓶，将化合物36(300mg,0.64mmol) 溶解在7mL四氢呋喃中，然后向体系中加入三乙胺调至偏碱性，最后向体系中加入对甲氧基苯异氰酸酯(79.1mg,0.53mmol)，室温反应过夜，TLC 检测反应完毕后用1N的盐酸溶液洗乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝60：1)，得到292mg 白色固体目标产物化合物37a，产率89％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.46(s,1H),8.11(d,J＝8.1Hz,1H),7.99(d,J＝7.0Hz,1H),7.85(d,J＝8.3Hz, 1H),7.26(d,J＝8.2Hz,2H),6.80(d,J＝8.2Hz,2H),6.21(d,J＝8.4Hz,1H), 4.66(s,1H),4.33(s,2H),4.16(t,J＝6.8Hz,1H),3.72(s,3H),3.68(s,3H),3.09 (s,3H),1.68(s,1H),1.63–1.55(m,2H),1.49–1.37(m,4H),1.23(s,1H),1.18 (d,J＝7.0Hz,3H),1.03(dt,J＝13.9,7.9Hz,1H),0.90–0.79(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ171.5,171.4,155.0,153.8,133.5,119.0,113.9, 61.1,56.7,55.1,50.9,50.4,44.5,40.8,40.5,37.8,31.2,24.1,23.9,23.1,22.9,21.6,21.4,16.9,15.3,11.4。
化合物37b的合成：取25mL反应瓶，将化合物36(200mg,0.42mmol) 溶解在5mL DMF中，降温至0℃，依次向体系中加入间三氟甲基苯乙酸 (260mg,1.27mmol)，DIPEA(326mg,2.52mmol)，HATU(483mg,1.27 mmol)，慢慢升至室温反应过夜，TLC检测反应完毕后用饱和碳酸氢钠洗，1N的盐酸溶液洗，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)，得到229mg白色固体目标产物化合物37b，产率83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(d,J＝8.8 Hz,1H),8.05(dd,J＝18.8,7.8Hz,2H),7.79(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(s,1H), 7.59–7.49(m,3H),4.71–4.60(m,1H),4.31(p,J＝7.8Hz,2H),4.19(t,J＝8.2 Hz,1H),3.72(s,3H),3.67–3.53(m,2H),3.09(s,3H),1.71(q,J＝6.6Hz,1H), 1.55(ddq,J＝32.8,12.8,6.4Hz,2H),1.40(t,J＝7.0Hz,4H),1.23(s,1H),1.17 (d,J＝7.1Hz,3H),1.04(dt,J＝13.8,8.0Hz,1H),0.88–0.73(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ171.4,170.7,169.3,138.1,133.1,129.1,125.4, 123.0,99.5,61.1,56.6,50.9,50.4,44.5,41.5,40.9,40.5,36.7,24.2,24.0,23.9, 23.2,22.9,21.5,21.4,16.9,15.1,10.8。
化合物37c的合成：取25mL反应瓶，将化合物36(300mg,0.64mmol) 溶解在20mLDMF中，降温至0℃，依次向体系中加入4-戊炔-1-酸(186mg, 1.90mmol)，DIPEA(0.63mL,3.80mmol)，HATU(722mg,1.90mmol)，慢慢升至室温反应过夜，TLC检测反应完毕后用饱和碳酸氢钠洗，1N的盐酸溶液洗，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)，得到303.50mg白色固体目标产物化合物37b，产率86％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(dt,J＝14.5,7.8 Hz,3H),7.79(d,J＝8.4Hz,1H),4.69–4.61(m,1H),4.31(p,J＝8.3Hz,2H), 4.19(t,J＝8.0Hz,1H),3.72(s,3H),3.09(s,3H),2.72(s,1H),2.41–2.28(m, 4H),1.68(dt,J＝10.3,5.1Hz,1H),1.58(dq,J＝13.2,6.7Hz,2H),1.46–1.38 (m,4H),1.23(s,1H),1.17(d,J＝7.1Hz,3H),1.07(dt,J＝13.6,8.0Hz,1H), 0.88–0.77(m,18H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ171.5,170.8,170.3, 83.7,71.2,61.1,56.7,50.9,50.4,44.6,40.8,40.6,36.6,34.0,24.3,24.1,23.9, 23.2,23.0,21.6,21.4,16.9,15.2,14.3,11.0。
化合物38a的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物37a(290 mg,0.47mmol)溶解在5mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下20℃，向体系中加入LiAlH4(88.7mg,2.30mmol)，搅拌约半小时，TLC检测反应完毕后，加5mL乙酸乙酯淬灭，用0.1N的氯化氢溶液洗1次，分泌液漏斗分液，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，不做进一步纯化直接投下一步。
化合物38b的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物37b(320 mg,0.50mmol)溶解在5mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下20℃，向体系中加入LiAlH4(94.4mg,2.50mmol)，搅拌约半小时，TLC检测反应完毕后，加4mL乙酸乙酯淬灭，用0.1N的氯化氢溶液洗1次，分泌液漏斗分液，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，得到白色固体粉末，不做进一步纯化直接投下一步。
化合物38c的合成：取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物37c(260 mg,0.47mmol)溶解在5mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下20℃，向体系中加入LiAlH4(89.5mg,2.36mmol)，搅拌约半小时，TLC检测反应完毕后，加4mL乙酸乙酯淬灭，用0.1N的氯化氢溶液洗1次，分泌液漏斗分液，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，不做进一步纯化直接投下一步。
实施例16：化合物40a的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物39(142mg,0.43mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.43mL,0.43 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物38a(160mg,0.28mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝50：1至15：1)得到108mg白色固体目标产物化合物40a，产率52％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(dd,J＝ 14.0,8.0Hz,2H),7.81(d,J＝8.3Hz,1H),7.32–7.22(m,3H),6.88–6.77(m, 3H),6.29–6.17(m,1H),5.38(s,1H),4.59(d,J＝2.5Hz,1H),4.55–4.46(m, 1H),4.32(p,J＝7.4Hz,2H),4.13(dd,J＝8.5,5.9Hz,1H),3.85(s,3H),3.68(s, 3H),1.69(d,J＝6.2Hz,1H),1.58(dt,J＝13.6,6.7Hz,2H),1.51–1.40(m,5H), 1.23(s,2H),1.19(d,J＝7.0Hz,3H),1.04(d,J＝7.2Hz,3H),0.88–0.79(m, 18H),0.66(dd,J＝6.9,3.6Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ179.5,171.6,171.5,171.2,170.0,163.4,155.1,153.8,149.5,133.5,121.2,119.0,113.9,94.7,63.0,59.1,56.9,55.1,51.0,50.8,45.2,41.1,40.5,37.7,31.3,29.0,28.1, 24.1,23.1,22.9,21.6,21.4,19.5,18.6,15.4,15.1,11.4。
实施例17：化合物40b的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物39(128mg,0.39mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.39mL,0.39 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物38b(150mg,0.26mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝50：1至15：1)得到95.0mg白色固体目标产物化合物40b，产率47％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(d,J＝8.8Hz,1H),8.09(dd,J＝ 21.4,8.0Hz,2H),7.76(dd,J＝18.0,8.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.60–7.50(m, 3H),7.27(d,J＝15.5Hz,1H),6.84(dd,J＝15.5,4.9Hz,1H),5.38(s,1H),4.59 (d,J＝2.5Hz,1H),4.50(q,J＝6.7Hz,1H),4.30(t,J＝7.6Hz,2H),4.18(t,J＝ 8.3Hz,1H),3.85(s,3H),3.68–3.53(m,2H),2.47–2.39(m,1H),1.77–1.67 (m,1H),1.63–1.55(m,1H),1.49(dt,J＝14.8,7.0Hz,3H),1.41(t,J＝7.4Hz, 3H),1.23(s,1H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H),1.04(d,J＝7.1Hz,3H),0.89–0.75 (m,18H),0.67(d,J＝6.9Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ179.5, 171.3,171.1,170.7,169.9,169.4,163.4,149.5,138.1,133.1,129.1,128.7,125.4, 123.0,121.2,94.7,63.0,59.1,56.7,50.9,50.7,45.2,41.5,41.2,40.5,36.6,28.1, 24.3,24.1,23.1,22.9,21.6,21.5,19.5,18.5,15.2,15.1,10.8。
实施例18：化合物40c的合成
取25mL反应瓶，氩气保护下，将化合物39(152mg,0.46mmol)溶解在2mL重蒸的四氢呋喃中，降温至零下78℃，滴加LiHMDS(0.46mL,0.46 mmol)，搅拌10min后，滴加化合物38c(150mg,0.30mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)搅拌约3h，TLC检测反应完毕后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取 (15mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发仪浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝80：1至20：1)得到84.6mg黄色固体目标产物化合物40c，产率42％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89(dd,J＝8.0,4.3Hz,1H),7.81(dd,J ＝8.5,4.7Hz,2H),7.56(dd,J＝8.7,4.6Hz,1H),7.04(dd,J＝15.3,3.9Hz,1H), 6.61(dt,J＝15.5,4.6Hz,1H),5.15(d,J＝4.1Hz,1H),4.36(d,J＝3.1Hz,1H), 4.27(p,J＝6.0,5.4Hz,1H),4.12–4.02(m,2H),3.94(td,J＝8.1,3.9Hz,1H), 3.62(d,J＝3.7Hz,3H),2.50(dd,J＝4.9,2.6Hz,1H),2.30–2.25(m,1H),2.23 –2.06(m,5H),1.47(d,J＝9.4Hz,1H),1.33(dd,J＝12.2,6.0Hz,2H),1.29– 1.16(m,4H),0.97(dq,J＝12.2,4.9,4.5Hz,4H),0.82(dd,J＝7.3,3.9Hz,3H), 0.67–0.53(m,18H),0.44(dd,J＝7.2,3.8Hz,3H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ179.5,171.4,171.1,170.9,170.4,170.0,163.4,149.5,121.2,94.7, 83.7,71.2,63.0,59.1,56.9,51.0,50.8,45.2,41.1,40.5,36.5,34.0,28.1,24.3, 24.1,23.1,22.9,21.6,21.4,19.5,18.6,15.3,15.1,14.3,11.0。
实验例1：化合物1-40c在体外对癌细胞的抑制作用
采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测化合物1-40c对癌细胞的抑制作用：将处于对数生长期的癌细胞按照每毫升5×104细胞数的密度接种至96 孔细胞培养板中，调零孔为不含细胞的正常培养基，24小时后更换含化合物 1-21的不同浓度的培养基，调零孔更换正常培养基，每个浓度梯度设置5个复孔，置于37℃，5％CO2培养箱中培养，24小时后显微镜下观察细胞状态及生长变化，48小时后每孔加入四甲基偶氮唑蓝(凯基生物，5mg/mL)溶液，继续在37℃，5％CO2培养箱中培养，4小时后吸走培养基，每孔加入DMSO (二甲基亚砜)100μL，使用酶标仪在570纳米波长下测量吸光度值，使用 Graphpad软件进行数据统计分析，计算半数有效浓度(IC50，单位：μM)，抑制效果见下表：
从上表可以看出，化合物1-40c在体外均能不同程度的抑制癌细胞的增殖。以下实验例以35b为例进一步验证天然产物Symplostatin 4衍生物的抗癌效果。
实验例2：化合物35b克隆形成实验
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，将细胞悬液作梯度稀释，按每孔400个(A375细胞)和每孔300个(B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基，每个样品2个重复。将细胞放入CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.125、0.25μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养7天左右，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，停止培养(视细胞增殖情况而定)，期间每两天更换含有化合物35b的新鲜培养基。停止培养后，除去培养液，用PBS小心洗涤2次，加入纯甲醇2ml 固定15分钟，吸去固定液，加入0.005％结晶紫(Sigma公司)染色，染色 30-60分钟，然后用PBS或水缓慢洗去染色液，室温干燥。将6孔板倒置拍照，保存图像，并在ImageJ软件中计数大于50个细胞的克隆数。实验重复三次，统计并取三次平均值作为最终结果，克隆形成率(％)＝(克隆数/接种细胞数)×100％。
如图1和图2所示，低剂量的化合物35b就可以有效的抑制恶性黑色素瘤的克隆形成。并且实验结果与抗增殖实验效果一致。
实验例3：化合物35b诱导A375和B16F10细胞凋亡
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、1.0、2.0 μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞。细胞凋亡检测使用的是碧云天的Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(Beyotime,C1063)，具体操作过程按试剂盒说明书进行。
如图3和图4所示，A375和B16F10的凋亡程度与化合物35b的浓度具有明显的剂量依赖关系，表明该化合物介导的恶性黑色素瘤细胞凋亡是其抗增殖作用的主要原因。
实验例4：化合物35b调节细胞凋亡相关蛋白
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.5、1.0、 2.0、4.0μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞。收集的细胞用RIPA裂解液(含Cooktail、PMSF、NaF)裂解，碧云天BCA试剂盒测定蛋白浓度(Beyotime Biotechnology,P0012)。然后用免疫印迹的方法检测化合物35b处理后细胞中凋亡相关蛋白的变化，实验中使用的抗体购买情况如下：PARP(#9541),anti-cleaved caspase-3(#9661), anti-Bax(#2772),anti-β-actin(#3700),anti-p53(10442-1-AP)。
如图5和图6所示，化合物35b能够上调与凋亡相关的Bax和P53蛋白，这表明Bax和P53在化合物35b引起的细胞凋亡中起到了重要作用。与此同时，化合物35b也引起了PARP和Caspase 3的裂解。从实验结果来看，激活PARP和Caspase 3蛋白是对化合物35b具有剂量依赖关系的，同时这两个蛋白的激活是细胞凋亡的重要标志。
实验例5：化合物35b抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭
5.1细胞划痕实验
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔1.5×105个(A375细胞)和每孔1.0×105 个(B16F10细胞)细胞的密度接种于48孔板中，每孔0.2ml培养基。当细胞密度达到100％后，用小枪头和直尺垂直于板背面的直线进行划痕，然后吸掉旧培养基，加入PBS洗三遍，将划痕所产生的细胞碎片洗掉，再加入含化合物35b(0.25μM)的培养基(含0.1％的FBS)继续培养，分别在划痕后0h、24h、48h在倒置显微镜下给细胞拍照。用Image J软件量取细胞划痕的宽度，计算划痕愈合率。
5.2 transwell迁移实验
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔2.5×105个细胞的密度接种于transwell小室中，每个小室加入0.2ml含不同浓度化合物35b(0、0.25μM)的无血清培养基，24孔板下室中加入0.6ml含10％FBS培养基，然后将细胞放置 CO2培养箱中培养24小时。用棉签轻轻去除上层小室的细胞，小室下层细胞用甲醇固定60分钟，然后用0.1％的结晶紫染色30min，用PBS轻轻洗涤，随机取5个视野拍照，并计数细胞个数。
5.3 transwell侵袭实验
用无血清培养基将基质胶按3:1的比例稀释，取50ul混合物加入 transwell小室中，放置培养箱中静置2-4h，待基质胶完全凝固后进行后续操作。
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔1.0×105个细胞的密度接种于具有基质胶的 transwell小室中，每个小室加入0.2ml含不同浓度化合物35b(0、0.25μ M)的无血清培养基，24孔板下室中加入0.6ml含10％FBS培养基，然后将细胞放置CO2培养箱中培养24小时。用棉签轻轻去除上层小室的细胞，小室下层细胞用甲醇固定60分钟，然后用0.1％的结晶紫染色30min，用PBS 轻轻洗涤，随机取5个视野拍照，并计数细胞个数。
如图7-14所示，与对照组相比，化合物35b明显减少了通过基质涂层过滤器细胞入侵和侵袭数量。这些结果说明化合物35b可以显著抑制黑色素瘤A375和B16F10细胞的迁移和入侵能力。
实验例6：化合物35b抑制黑色素瘤微球形成能力
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.25、0.5 μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞，按每孔500个细胞的密度接种于低粘附的24孔板中，每孔1ml成球培养基(20ng/EGF,10ng/ml FGF,5μg/ml insulin,0.4％Bovine Serum Albumin and Dulbecco’s ModifiedEagle Medium/F12)。将细胞放置CO2培养箱中培养7天左右，拍照保存，并在显微镜下计数含有大于50个细胞的微球数目。
实验结果如图15-17所示，表明化合物35b可以显著减少肿瘤细胞成球效率。这表明先导化合物35b在一定程度上能抗癌症干细胞。
实验例7：化合物35b降低ALDH+细胞百分比
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.25、0.5 μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞。ALDH+的细胞用ALDEFLUOR试剂盒(Stem cell Technologies, 01700)检测，具体操作按试剂盒说明书进行。
结果如图18-21所示，先导化合物35b可以显著减少ALDH+细胞比率，这从另一个方面说明先导化合物35b具有抗黑色素瘤干细胞的能力。
实验例8：化合物35b抑制黑色素瘤Wnt蛋白信号通路
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.25、0.5、 1.0、2.0μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞。收集的细胞用RIPA裂解液(含Cooktail、PMSF、NaF)裂解，碧云天的BCA试剂盒测定蛋白浓度(Beyotime Biotechnology,P0012)。然后用免疫印迹的方法检测化合物35b处理后细胞中Wnt信号通路相关蛋白的变化，实验中使用的抗体购买情况如下：anti-β-actin(#3700),anti-p-STAT3(#9145) (CST,Beverly,MA,USA),anti-STAT3(10253-2-AP),anti-c-myc(10828-1-AP), anti-β-catenin(51067-2-AP)(Proteintech,North America,HQ,USA)。
结果如图22-24所示先导化合物35b剂量依赖性的降低了Stat3的磷酸化作用，下调β-catenin蛋白以及它的下游靶蛋白c-myc。总的来说，这些数据说明先导化合物35b阻断了Wnt蛋白信号通路，从而抑制了黑色素肿瘤干细胞。
实验例9：化合物35b降低CD133+细胞比例
收集处于对数生长期的A375和B16F10细胞，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每孔5×105个(A375细胞)和每孔3×105个 (B16F10细胞)细胞的密度接种于6孔板中，每孔2ml培养基。细胞在 CO2细胞培养箱中培养24h后，更换含有不同浓度化合物35b(0、0.25、0.5 μM)的新鲜培养基，然后将细胞放入CO2细胞培养箱中培养48h，随后收集细胞。取少量细胞进行细胞计数，每个处理组收集1×106个细胞，用预冷的PBS洗涤2次，100ul PBS重悬，然后加入5ul CD133-APC抗体 (eBioscience Company,USA)，避光4度孵育1h，然后用预冷的PBS洗涤两次，500ul PBS重悬细胞，流式细胞仪检测CD133阳性细胞比例。
如图25-28所示35b可以显着减少CD133+细胞的数量，这进一步证实了35b在消除黑素瘤干细胞中的重要作用。
实验例10：化合物35b抑制体内B16F10肿瘤生长
收集处于对数生长期的小鼠黑色素瘤细胞B16F10，取少量进行细胞计数。获得准确的细胞数目后，按每只老鼠5×105个细胞/0.1ml PBS的密度将细胞接种于6周龄大小的C57BL/6雄性小鼠的皮下，然后老鼠放置SPF级环境中培养。待肿瘤体积达到50mm3时，按小鼠体重和瘤子体积将小鼠随机分为对照和实验两组，每组6只。按15mg/Kg的剂量每天腹腔注射给药，对照组给予相同体积的溶剂，每天记录肿瘤体积和小鼠的体重，给药24天后，安乐死处死老鼠，获取小鼠身上的肿瘤，称重，拍照。
数据结果如图29-32所示，与对照组相比，肿瘤大小明显受到抑制。另外，小鼠的体重并没有发生明显的改变。结果表明先导化合物35b显著抑制体内B16F10肿瘤生长。
综上，本发明提供了一种天然产物Symplostatin 4衍生物及其在制备抗癌症干细胞药物中的应用，并且具有较好的清楚恶性黑色素瘤干细胞的能力，有望应用于抗癌药物。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种天然产物Symplostatin 4的衍生物或其药学上可接受的盐，其特征在于：该衍生物的结构通式如式(I)所示：
式中：
X独立地选自O或N；
R1和R2独立地选自氢、甲基、取代芳基羰基、烷基羰基；
R3选自脂基、二级胺、三级胺、含N杂环。
2.根据权利要求1所述的天然产物Symplostatin 4的衍生物，其特征在于：所述的R1和R2独立地选自Cbz、4-炔基-1-羰基。
3.根据权利要求1所述的天然产物Symplostatin 4衍生物，其特征在于：所述的R3为甲脂、叔丁氨基、二乙氨基、吗啉基或取代的氨基戊烯酰基。
4.根据权利要求1所述的天然产物Symplostatin 4的衍生物，其特征在于：所述的R3为
5.根据权利要求1所述的天然产物Symplostatin 4的衍生物，其特征在于：所述的天然产物Symplostatin 4衍生物为化合物1、化合物19、化合物21a、化合物21b、化合物21c、化合物24a、化合物24b、化合物24c、化合物33a、化合物33b、化合物35a、化合物35b、化合物35c、化合物35d、化合物35e、化合物40a、化合物40b、化合物40c，其结构式如下：
6.权利要求1-5中任一所述的天然产物Symplostatin 4的衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗癌症干细胞药物中的应用。
7.一种抗癌症干细胞的药物组合物，其特征在于：该药物组合物中的活性成分为权利要求1-5任一所述的天然产物Symplostatin 4的衍生物或其药学上可接受的盐。
8.根据权利要求7所述的抗癌症干细胞的药物组合物，其特征在于：所述的癌症为实体瘤。
9.根据权利要求7所述的抗癌症干细胞的药物组合物，其特征在于：所述的癌症为妇科癌类、内分泌癌类、骨癌类、肺癌类、脑肿瘤、CNS肿瘤、胃肠癌类、泌尿生殖器癌类、头部肿瘤类、颈部肿瘤类、淋巴癌类、眼癌类、皮肤癌类、软组织肉瘤类或泌尿系统类癌症。
10.根据权利要求7所述的抗癌症干细胞的药物组合物，其特征在于：所述的癌症为卵巢癌、子宫颈癌、阴道癌、阴部癌、子宫/子宫内膜癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输卵管癌、子宫肉瘤、肾上腺皮质癌、脑垂体癌、胰癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、胸腺癌、多发性内分泌肿瘤、骨肉瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、神经母细胞瘤、听神经瘤、神经胶瘤、脊髓肿瘤、结肠直肠癌、晚期结肠直肠腺癌、肝癌、肝外胆管癌、胃肠类癌性肿瘤、胆囊癌、胃癌、食道癌、小肠癌、阴茎癌、翠丸癌、前列腺癌、鼻癌、鼻窦癌、鼻咽癌、口腔癌、唇癌、唾腺癌、喉头癌、下咽癌、正咽癌、霍奇金病、非霍奇金氏淋巴瘤、周围T-细胞林巴瘤、皮肤型T-细胞淋巴瘤、AIDS相关性淋巴瘤、视网膜母细胞瘤、葡萄膜黑色素瘤、非黑色素瘤皮肤癌、梅克尔细胞癌、卡波希肉瘤、儿童软组织肉瘤、成人软组织肉瘤、肾癌维尔姆斯肿瘤、膀肤癌、尿道癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌、肺癌或转移性细胞癌。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005042030A1 (en) * 2003-10-30 2005-05-12 Aegera Therapeutics, Inc. Treatment of proliferative diseases using an antisense iap oligomer and chemotherapeutic agent
CN105143263A (zh) * 2012-12-07 2015-12-09 安姆根有限公司 Bcma抗原结合蛋白

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005042030A1 (en) * 2003-10-30 2005-05-12 Aegera Therapeutics, Inc. Treatment of proliferative diseases using an antisense iap oligomer and chemotherapeutic agent
CN105143263A (zh) * 2012-12-07 2015-12-09 安姆根有限公司 Bcma抗原结合蛋白

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHUANGWEI LIU等: "A novel Anti-Cancer Stem Cells compound optimized from the natural symplostatin 4 scaffold inhibits Wnt/b-catenin signaling pathway", 《EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 *
TRENT CONROY等: "Total Synthesis and Antimalarial Activity of Symplostatin 4", 《ORGANIC LETTERS》 *

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