CN103635088B - 米格拉他汀类(Migrastatins)和其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供化合物、其医药上可接受的组合物和其使用方法。

Description

米格拉他汀类(Migrastatins)和其用途

相关申请案的交叉参考

本申请案主张对2011年4月7日提出申请的美国临时专利申请案第61／473,131号和2011年7月15日提出申请的美国临时专利申请案第61／508,275号的优先权，每一申请案的整体内容均以引用的方式并入本文中。

技术领域

背景技术

已熟知许多癌症死亡是由于转移性疾病而非原发性肿瘤而产生。鉴于此事实，业内对预防或阻止转移作为治疗癌症的手段存在强烈的临床兴趣。

政府支持

本发明是根据由美国国家卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)授予的许可CA103823在美国联邦政府支持下作出的。本发明还受到特妮布罗迪乳腺癌基金会(TerriBrodeurBreastCancerFoundation)的奖学金的支持。美国政府对本发明拥有某些权利。

发明内容

附图说明

图1描绘cME对癌细胞迁移穿过血脑屏障的影响的试验方案和结果(右下方，DMSO左手侧条，cME右手侧条)。数据是4只小鼠的平均值±sem。

图2描绘cME对癌细胞(GFP)迁移到脑切片中并越过毛细管网络(Col.IV)的影响。试验方案(顶部)和结果(底部)。荧光显微镜图像是在培育3天后从脑切片的顶部表面获得。

图3描绘在活体外伤口愈合分析中米格拉他汀醚(ME)和羧甲基-米格拉他汀醚(cME)对A549肺癌细胞系迁移的抑制。

图4描绘米格拉他汀醚(ME)和羧甲基-米格拉他汀醚(CME)对转移孔(trans-well)肺癌细胞系迁移的抑制。

图5a-c描绘在人类原发性SCLC异种移植物模型中的转移的ME抑制作用。

图6描绘在转移孔细胞迁移分析中ME和cME对转移性乳癌细胞的影响。

图7a-b描绘在人类原发性异种移植物模型中CME和ME用于转移抑制的比较。

图8描绘在CAG多发性骨髓瘤细胞中各种式I的化合物的迁移抑制和细胞毒性数据。

图9描绘在CAG多发性骨髓瘤细胞中各种式I的化合物的迁移抑制数据。

图10描绘各种式I的化合物在H929多发性骨髓瘤细胞中的迁移抑制数据。

图11描绘cME的药代动力学数据。

具体实施方式

定义

本发明的某些化合物和特定官能团的定义更详细阐述于下文中。出于本发明的目的，化学元素是根据元素周期表(thePeriodicTableoftheElements，化学文摘社(CAS)版，化学物理手册(HandbookofChemistryandPhysics)，第75版，内封面)识别，且特定官能团通常如本文所述来定义。此外，有机化学的一般原则以及特定官能部分和反应性阐述于“有机化学(OrganicChemistry)”，托马斯索雷尔(ThomasSorrell)，大学科学书籍(UniversityScienceBooks)，索萨利托(Sausalito)：1999中，其全部内容均以引用方式并入本文中。

除非另有说明，否则本文所用的以下定义应适用。

如本文所用，术语“脂肪族基”或“脂肪族基团”是指完全饱和或含有一个或一个以上不饱和单元的直链(即，不饱和)或具支链、经取代或未经取代的烃链，或完全饱和或含有一个或一个以上不饱和单元但不为芳香族的单环烃或双环烃(在本文中也称为“碳环”、“环脂族基”或“环烷基”)，其具有到分子的剩余部分的单一附接点。除非另有说明，否则脂肪族基团含有1到12个脂肪族碳原子。在一些实施例中，脂肪族基团含有1到6个脂肪族碳原子。在一些实施例中，脂肪族基团含有1到5个脂肪族碳原子。在其它实施例中，脂肪族基团含有1到4个脂肪族碳原子。在再一些其它实施例中，脂肪族基团含有1到3个脂肪族碳原子，且在又一些其它实施例中，脂肪族基团含有1到2个脂肪族碳原子。适当的脂肪族基团包括(但不限于)直链或具支链、经取代或未经取代的烷基、烯基、炔基和其杂合体，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。

术语“杂原子”意指氧、硫、氮、磷或硅中的一者或一者以上(包括氮、硫、磷或硅的任一氧化形式；任一碱性氮的季铵化形式或；杂环的可取代氮，例如N(如在3，4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR⁺(如在N-取代的吡咯烷基中))。

本文所用的术语“不饱和”意指具有一个或一个以上不饱和单元的部分。

本文所用的术语“环脂族基”、“碳环”或“碳环的”单独或作为较大部分的一部分使用时是指具有3到12个成员的饱和或部分不饱和的环脂族单环或多环系统，其中所述脂肪族环系统任选如上文所定义和本文所阐述经取代。环脂族基团包括(但不限于)环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环庚烯基、环辛基、环辛烯基、降莰烷基、金刚烷基和环辛二烯基。在一些实施例中，环烷基具有3到6个碳。术语“环脂族基”、“碳环”或“碳环的”还包括稠合到一个或一个以上芳香族或非芳香族环(例如十氢萘基或四氢萘基)的脂肪族环，其中附接基团或点在脂肪族环上。在某些实施例中，术语“3到14元碳环”和“C_3-14碳环”是指3到8元饱和或部分不饱和的单环碳环或7到14元饱和或部分不饱和的多环碳环。

本文所用的术语“二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链”是指如本文所定义为直链或具支链的二价亚烷基、亚烯基和亚炔基链。

术语“亚烷基”是指二价烷基。“亚烷基链”是聚亚甲基，即-(CH₂)_n-，其中n为正整数，优选为1到6、1到4、1到3、1到2或2到3。经取代亚烷基链是一个或一个以上亚甲基氢原子经取代基代替的聚亚甲基。适当的取代基包括下文针对经取代脂肪族基团阐述的那些。

术语“亚烯基”是指二价烯基。经取代亚烯基链是含有至少一个双键且其中一个或一个以上氢原子经取代基代替的聚亚甲基。

术语“亚炔基”是指二价炔基。经取代亚炔基链是含有至少一个三键且其中一个或一个以上氢原子经取代基代替的聚亚甲基。

本文所用的术语“烷基”是指通过移除一个氢原子从含有1与6个碳原子之间的脂肪族部分衍生的饱和直链或具支链烃基团。除非另有说明，否则烷基含有1到12个碳原子。在某些实施例中，烷基含有1到8个碳原子。在某些实施例中，烷基含有1到6个碳原子。在一些实施例中，烷基含有1到5个碳原子，在一些实施例中，烷基含有1到4个碳原子，在一些实施例中烷基含有1到3个碳原子，且在一些实施例中烷基含有1到2个碳原子。烷基的实例包括(但不限于)甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、仲戊基、异戊基、叔丁基、正戊基、新戊基、正己基、仲己基、正庚基、正辛基、正癸基、正十一烷基、十二烷基等。

本文所用的术语“烯基”意指通过移除一个氢原子从具有至少一个碳-碳双键的直链或具支链脂肪族部分衍生的单价基团。除非另有说明，否则烯基含有2到12个碳原子。在某些实施例中，烯基含有2到8个碳原子。在某些实施例中，烯基含有2到6个碳原子。在一些实施例中，烯基含有2到5个碳原子，在一些实施例中，烯基含有2到4个碳原子，在一些实施例中烯基含有2到3个碳原子，且在一些实施例中烯基含有2个碳原子。烯基包括(例如)乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。

本文所用的术语“炔基”是指通过移除一个氢原子从具有至少一个碳-碳三键的直链或具支链脂肪族部分衍生的单价基团。除非另有说明，否则炔基含有2到12个碳原子。在某些实施例中，炔基含有2到8个碳原子。在某些实施例中，炔基含有2到6个碳原子。在一些实施例中，炔基含有2到5个碳原子，在一些实施例中，炔基含有2到4个碳原子，在一些实施例中炔基含有2到3个碳原子，且在一些实施例中炔基含有2个碳原子。代表性炔基包括(但不限于)乙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丙炔基等。

术语“酰基”单独或作为较大部分的一部分使用时是指通过从羧酸移除羟基所形成的基团。非限制实例性酰基包括羧酸、酯、酰胺和氨基甲酸酯。

术语“卤素”意指F、Cl、Br或I。

术语“芳基”单独或作为较大部分的一部分使用时(如在“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中)是指具有总计5到20个环成员的单环和多环系统，其中系统中的至少一个环是芳香族且其中系统中的每一环含有3到12个环成员。术语“芳基”可与术语“芳基环”互换使用。在本发明的某些实施例中，“芳基”是指芳香族环系统，其包括(但不限于)苯基、联苯基、萘基、蒽基等等，其可具有一个或一个以上取代基。如本文所用，在术语“芳基”范围内还包括芳香族环稠合到一个或一个以上其它环的基团，例如苯并呋喃基、二氢茚基、邻苯二甲酰亚胺基、萘二甲酰亚胺基、菲啶基或四氢萘基等等。在某些实施例中，术语“6到10元芳基”是指苯基或8到10元多环芳基环。

术语“杂芳基”和“杂芳-”在单独或作为较大部分的一部分使用时(例如，“杂芳烷基”或“杂芳烷氧基”)是指具有5到14个环原子、优选5、6或9个环原子；具有6、10或14个以环状阵列共享的π电子；且除碳原子外具有1到5个杂原子的基团。术语“杂原子”是指氮、氧或硫，且包括氮或硫的任何氧化形式以及碱性氮的任何季铵化形式。杂芳基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲嗪基、嘌呤基、萘啶基、苯并呋喃基和蝶啶基。本文所用的术语“杂芳基”和“杂芳-”也包括杂芳香族环稠合到一个或一个以上芳基、环脂族基或杂环基环的基团，其中附接的基团或点在杂芳香族环上。非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喏啉基、4H-喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡啶并[2，3-b]-1，4-噁嗪-3(4H)-酮。杂芳基可为单环或双环。术语“杂芳基”可与术语“杂芳基环”、“杂芳基”或“杂芳香族”互换使用，所述术语中的任一者包括任选经取代的环。术语“杂芳烷基”是指经杂芳基取代的烷基，其中烷基和杂芳基部分独立地任选经取代。在某些实施例中，术语“5到12元杂芳基”是指具有1到3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5到6元杂芳基环或具有1到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的8到12元双环杂芳基环。

本文所用的术语“杂脂肪族基”脂肪族基团，其中一个或两个碳原子独立地由氧、硫、氮或磷中的一个或一个以上代替。杂脂肪族基团可经取代或未经取代、直链或具支链、环状或非环状，且包括“杂环”、“杂环基”、“杂环脂族基”或“杂环”基团。

本文所用的术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基团”和“杂环”可互换使用且是指稳定的5到7元单环或7到14元多环杂环部分，其饱和或部分不饱和且除碳原子外具有一个或一个以上、优选1到4个如上文所定义的杂原子。在关于杂环的环原子使用时，术语“氮”包括经取代的氮。作为实例，在具有0到3个选自氧、硫或氮的杂原子的饱和或部分不饱和环中，氮可为N(如在3，4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或⁺NR(如在N-取代吡咯烷基中)。在一些实施例中，术语“3到7元杂环基”是指具有1到2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3到7元饱和或部分不饱和单环杂环。在一些实施例中，术语“3到12元杂环基”是指具有1到2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3到8元饱和或部分不饱和单环杂环或具有1到3个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的7到12元饱和或部分不饱和多环杂环。

杂环可在产生稳定结构的任一杂原子或碳原子处附接到其侧基，且任一环原子可任选经取代。所述饱和或部分不饱和杂环基团的实例包括(但不限于)四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮呯基、氧氮呯基、硫氮呯基、吗啉基和奎宁环基。术语“杂环”、“杂环基”、“杂环基环”、“杂环基团”、“杂环部分”和“杂环基团”在本文中可互换使用，且还包括杂环基环稠合到一个或一个以上芳基、杂芳基或环脂族环的基团，例如吲哚啉基、3H-吲哚基、色满基、菲啶基或四氢喹啉基，其中附接的基团或点在杂环基环上。杂环基可为单环或双环。术语“杂环基烷基”是指经杂环基取代的烷基，其中烷基和杂环基部分独立地任选经取代。

本文所用的术语“部分不饱和”是指包括至少一个双键或三键的环部分。术语“部分不饱和”打算涵盖具有多个不饱和位点的环，但不打算包括如本文所定义的芳基或杂芳基部分。

在另一方面，本发明提供“医药上可接受的”组合物，其包含与一种或一种以上医药上可接受的载剂(添加剂)和／或稀释剂一起调配的治疗有效量的一种或一种以上本文所述化合物。如详细阐述，本发明的医药组合物可特别地经调配以供以固体或液体形式投与，包括那些适于以下投与方式者：经口投与，例如兽用顿服药(drench)(水性或非水性溶液或悬浮液)、片剂，例如那些靶向颊、舌下和全身吸收者、大丸剂、粉末、颗粒、施加到舌的糊剂；不经肠投与，例如皮下、肌内、静脉内或硬膜外注射(例如)无菌溶液或悬浮液、或持续释放调配物；局部施加，例如以乳膏、软膏或受控释放贴片或喷雾形式施加到皮肤；阴道内或直肠内，例如阴道药栓、乳膏或发泡剂；舌下；经眼；经皮；或经鼻投与到肺和其它粘膜表面。

短语“医药上可接受”在本文中用以指在合理药学判断范围内适于与人类和动物组织接触使用且无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症且与合理效益／风险比相称的化合物、材料、组合物和／或剂型。

本文所用的短语“医药上可接受的载剂”意指医药上可接受的材料、组合物或媒剂，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂或溶剂囊封材料，其涉及将标的化合物从身体的一个器官或一部分运载或转运到身体的另一器官或另一部分。在可与调配物的其它成份相容且不损害患者的意义上，每一载剂必须是“可接受的”。可用作医药上可接受的载剂的材料的一些实例包括：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，例如可可油和栓剂蜡；油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无致热源的水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer'ssolution)；乙醇；pH缓冲溶液；聚酯、聚碳酸酯和／或聚酸酐；和医药调配物中使用的其它无毒相容物质。

除非另有说明，否则本文所描绘的结构还打算包括结构的所有异构(例如，对映异构、非对映异构和几何异构(或构象异构))形式；例如，每一不对称中心的R和S构型、Z和E双键异构体和Z和E构象异构体。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体、非对映异构体和几何异构体(或构象异构体)混合物都在本发明范围内。除非另有说明，否则本发明化合物的所有互变异构体形式都在本发明范围内。

所提供化合物可包含一个或一个以上糖部分。除非另有说明，否则其D-和L-构型二者和其混合物都在本发明范围内。除非另有说明，否则其α和β链接实施例和混合物涵盖于本发明中。

例如，如果想要本发明化合物的特定对映异构体，那么可通过不对称合成、手性色谱或通过利用手性助剂衍生来制备，其中分离所得非对映异构混合物并解离辅助基团以提供纯的所要对映异构体。或者，如果分子含有碱性官能团(例如氨基)或酸性官能团(例如羧基)，那么与适当光学活性酸或碱形成非对映异构盐，随后通过分段结晶或业内熟知的色谱方法拆分由此形成的非对映异构体，且随后回收纯的对映异构体。

另外，除非另有说明，否则本文所描绘的结构还打算包括仅在一个或一个以上同位素富集原子存在时不同的化合物。举例来说，具有包括用氘或氚代替氢或用¹³C或¹⁴C富集碳代替碳的本发明结构的化合物在本发明范围内。根据本发明，所述化合物可用作(例如)分析工具、作为生物分析中的探针或作为治疗剂。

所属领域的技术人员应了解，本文所述的合成方法利用各种保护基团。本文所用的术语“保护基团”是指掩蔽或阻断特定官能部分(例如，O、S或N)，以便视需要反应可选择性地在多官能化合物的另一反应位点处进行。在优选实施例中，保护基团以良好产率选择性反应以获得对所设计反应稳定的经保护底物；保护基团优选可通过易于获得、优选不攻击其它官能团的无毒试剂选择性去除；保护基团形成可分离衍生物(更优选不产生新的立体中心)；且保护基团优选将具有最小额外官能度以避免形成其它反应位点。如本文中所详述，可利用氧、硫、氮和碳保护基团。以非限制性实例的方式，羟基保护基团包括甲基、甲氧基甲基(MOM)、甲硫基甲基(MTM)、叔丁基硫基甲基、(苯基二甲基硅烷基)甲氧基甲基(SMOM)、苄氧基甲基(BOM)、对-甲氧基苄氧基甲基(PMBM)、(4-甲氧基苯氧基)甲基(对AOM)、愈创木酚甲基(GUM)、叔丁氧基甲基、4-戊烯基氧基甲基(POM)、硅烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2，2，2-三氯乙氧基甲基、双(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基(SEMOR)、四氢吡喃基(THP)、3-溴四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、1-甲氧基环己基、4-甲氧基四氢吡喃基(MTHP)、4-甲氧基四氢硫代吡喃基、4-甲氧基四氢硫代吡喃基S，S-二氧化物、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基(CTMP)、1，4-二噁烷-2-基、四氢呋喃基、四氢硫代呋喃基、2，3，3a，4，5，6，7，7a-八氢-7，8，8-三甲基-4，7-甲桥苯并呋喃-2-基、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基-2-氟乙基、2，2，2-三氯乙基、2-三甲基硅烷基乙基、2-(苯基硒烷基)乙基，叔丁基、烯丙基、对氯苯基、对-甲氧基苯基、2，4-二硝基苯基、苄基、对-甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、对卤基苄基、2，6-二氯苄基、对氰基苄基、对苯基苄基、2-皮考基(picolyl)、4-皮考基、3-甲基-2-皮考基N-氧离子基、二苯基甲基、对，对’-二硝基二苯甲基、5-二苯并环庚基、三苯基甲基、α-萘基二苯基甲基、对-甲氧基苯基二苯基甲基、二(对-甲氧基苯基)苯基甲基、三(对-甲氧基苯基)甲基、4-(4’-溴苯甲酰甲基氧基苯基)二苯基甲基、4，4’，4”-三(4，5-二氯邻苯二甲酰亚胺基苯基)甲基、4，4’，4”-三(乙酰丙酰基氧基苯基)甲基、4，4’，4”-三(苯甲酰基氧基苯基)甲基、3-(咪唑-1-基)双(4’，4”-二甲氧基苯基)甲基、1，1-双(4-甲氧基苯基)-1’-芘基甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)呫吨基、9-(9-苯基-10-氧代)蒽基、1，3-苯并二硫戊环-2-基、苯并异噻唑基S，S-二氧离子基、三甲基硅烷基(TMS)、三乙基硅烷基(TES)、三异丙基硅烷基(TIPS)、二甲基异丙基硅烷基(IPDMS)、二乙基异丙基硅烷基(DEIPS)、二甲基叔己基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)、叔丁基二苯基硅烷基(TBDPS)、三苄基硅烷基、三-对-二甲苯基硅烷基、三苯基硅烷基、二苯基甲基硅烷基(DPMS)、叔丁基甲氧基苯基硅烷基(TBMPS)、甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯(乙酰丙酸酯)、4，4-(亚乙基二硫基)戊酸酯(乙酰丙酰基二硫缩醛)、新戊酸酯、金刚酸酯、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2，4，6-三甲基苯甲酸酯(菜酸酯(mesitoate))、碳酸烷基酯甲基酯、碳酸9-芴基甲基酯(Fmoc)、碳酸烷基酯乙基酯、碳酸烷基酯2，2，2-三氯乙基酯(Troc)、碳酸2-(三甲基硅烷基)乙基酯(TMSEC)、碳酸2-(苯基磺酰基)乙基酯(Psec)、碳酸2-(三苯基磷鎓基)乙基酯(Peoc)、碳酸烷基酯异丁基酯、碳酸烷基酯乙烯基酯、碳酸烷基酯烯丙基酯、碳酸烷基酯对硝基苯基酯、碳酸烷基酯苄基酯、碳酸烷基酯对甲氧基苄基酯、碳酸烷基酯3，4-二甲氧基苄基酯、碳酸烷基酯邻硝基苄基酯、碳酸烷基酯对硝基苄基酯、S-苄基硫代碳酸烷基酯、碳酸4-乙氧基-1-萘基酯、二硫代碳酸甲基酯、2-碘苯甲酸酯、4-叠氮基丁酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、邻(二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰基苯磺酸酯、2-(甲硫基甲氧基)乙基、4-(甲硫基甲氧基)丁酸酯、2-(甲硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、2，6-二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2，6-二氯-4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2，4-双(1，1-二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)-2-甲基-2-丁烯酸酯、邻(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α-萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N，N，N’，N’-四甲基磷酰二胺、烷基N-苯基氨基甲酸酯、硼酸酯、二甲基硫膦基、2，4-二硝基苯基次磺酸烷基酯、硫酸酯、甲烷磺酸酯(甲磺酸酯)、苄基磺酸酯和甲苯磺酸酯(Ts)。

对于保护1，2-二醇或1，3-二醇，保护基团包括亚甲基缩醛、亚乙基乙缩醛、1-叔丁基亚乙基缩酮、1-苯基亚乙基缩酮、(4-甲氧基苯基)亚乙基乙缩醛、2，2，2-三氯亚乙基乙缩醛、缩丙酮、亚环戊基缩酮、亚环己基缩酮、亚环庚基缩酮、亚苄基乙缩醛、对-甲氧基亚苄基乙缩醛、2，4-二甲氧基亚苄基缩酮、3，4-二甲氧基亚苄基乙缩醛、2-硝基亚苄基乙缩醛、甲氧基亚甲基缩醛、乙氧基亚甲基缩醛、二甲氧基亚甲基原酸酯、1-甲氧基亚乙基原酸酯、1-乙氧基亚乙基原酸酯、1，2-二甲氧基亚乙基原酸酯、α-甲氧基亚苄基原酸酯、1-(N，N-二甲基氨基)亚乙基衍生物、α-(N，N’-二甲基氨基)亚苄基衍生物、2-氧杂亚环戊基原酸酯、二-叔丁基亚硅烷基(DTBS)、1，3-(1，1，3，3-四异丙基二亚硅氧烷基)衍生物(TIPDS)、四-叔丁氧基二硅氧烷-1，3-二亚基衍生物(TBDS)、环状碳酸酯、环状硼酸酯、硼酸乙基酯和硼酸苯基酯。

氨基保护基团包括氨基甲酸甲基酯、氨基甲酸乙基酯、氨基甲酸9-芴基甲基酯(Fmoc)、氨基甲酸9-(2-磺基)芴基甲基酯、氨基甲酸9-(2，7-二溴)芴基甲基酯、氨基甲酸2，7-二-叔丁基-[9-(10，10-二氧代-10，10，10，10-四氢硫代呫吨基)]甲基酯(DBD-Tmoc)、氨基甲酸4-甲氧基苯甲酰甲基酯(Phenoc)、氨基甲酸2，2，2-三氯乙基酯(Troc)、氨基甲酸2-三甲基硅烷基乙基酯(Teoc)、氨基甲酸2-苯基乙基酯(hZ)、氨基甲酸1-(1-金刚烷基)-1-甲基乙基酯(Adpoc)、氨基甲酸1，1-二甲基-2-卤基乙基酯、氨基甲酸1，1-二甲基-2，2-二溴乙基酯(DB-t-BOC)、氨基甲酸1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙基酯(TCBOC)、氨基甲酸1-甲基-1-(4-联苯基)乙基酯(Bpoc)、氨基甲酸1-(3，5-二-叔丁基苯基)-1-甲基乙基酯(t-Bumeoc)、氨基甲酸2-(2’-和4’-吡啶基)乙基酯(Pyoc)、氨基甲酸2-(N，N-二环己基甲酰胺基)乙基酯、氨基甲酸叔丁基酯(BOC)、氨基甲酸1-金刚烷基酯(Adoc)、氨基甲酸乙烯基酯(Voc)、氨基甲酸烯丙基酯(Alloc)、氨基甲酸1-异丙基烯丙基酯(Ipaoc)、氨基甲酸肉桂基酯(Coc)、氨基甲酸4-硝基肉桂基酯(Noc)、氨基甲酸8-喹啉基酯、N-羟基哌啶基氨基甲酸酯，二硫代氨基甲酸烷基酯、氨基甲酸苄基酯(Cbz)、氨基甲酸对-甲氧基苄基酯(Moz)、氨基甲酸对硝基苄基酯、氨基甲酸对溴苄基酯、氨基甲酸对氯苄基酯、氨基甲酸2，4-二氯苄基酯、氨基甲酸4-甲基亚磺酰基苄基酯(Msz)、氨基甲酸9-蒽基甲基酯、氨基甲酸二苯基甲基酯、氨基甲酸2-甲硫基乙基酯、氨基甲酸2-甲基磺酰基乙基酯、氨基甲酸2-(对甲苯磺酰基)乙基酯、氨基甲酸[2-(1，3-二噻烷基)]甲基酯(Dmoc)、氨基甲酸4-甲硫基苯基酯(Mtpc)、氨基甲酸2，4-二甲硫基苯基酯(Bmpc)、氨基甲酸2-磷鎓基乙基酯(Peoc)、氨基甲酸2-三苯基磷鎓基异丙基酯(Ppoc)、氨基甲酸1，1-二甲基-2-氰基乙基酯、氨基甲酸间-氯-对-酰氧基苄基酯、氨基甲酸对(二羟基硼基)苄基酯、氨基甲酸5-苯并异噁唑基甲基酯、氨基甲酸2-(三氟甲基)-6-色酮基甲基酯(Tcroc)、氨基甲酸间-硝基苯基酯、氨基甲酸3，5-二甲氧基苄基酯、氨基甲酸邻硝基苄基酯、氨基甲酸3，4-二甲氧基-6-硝基苄基酯、氨基甲酸苯基(邻硝基苯基)甲基酯、吩噻嗪基-(10)-羰基衍生物、N’-对甲苯磺酰基氨基羰基衍生物、N’-苯基氨基硫代羰基衍生物、氨基甲酸叔戊基酯、S-苄基硫代氨基甲酸酯、氨基甲酸对氰基苄基酯、氨基甲酸环丁基酯、氨基甲酸环己基酯、氨基甲酸环戊基酯、氨基甲酸环丙基甲基酯、氨基甲酸对癸基氧基苄基酯、氨基甲酸2，2-二甲氧基羰基乙烯基酯、氨基甲酸邻(N，N-二甲基甲酰胺基)苄基酯、氨基甲酸1，1-二甲基-3-(N，N-二甲基甲酰胺基)丙基酯、氨基甲酸1，1-二甲基丙炔基酯、氨基甲酸二(2-吡啶基)甲基酯、氨基甲酸2-呋喃基甲基酯、氨基甲酸2-碘乙基酯、氨基甲酸异莰基酯、氨基甲酸异丁基酯、氨基甲酸异烟酰基酯、氨基甲酸对(对’-甲氧基苯基偶氮)苄基酯、氨基甲酸1-甲基环丁基酯、氨基甲酸1-甲基环己基酯、氨基甲酸1-甲基-1-环丙基甲基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(3，5-二甲氧基苯基)乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(对-苯基偶氮苯基)乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-苯基乙基酯、氨基甲酸1-甲基-1-(4-吡啶基)乙基酯、氨基甲酸苯基酯、氨基甲酸对(苯基偶氮)苄基酯、氨基甲酸2，4，6-三-叔丁基苯基酯、氨基甲酸4-(三甲基铵)苄基酯、氨基甲酸2，4，6-三甲基苄基酯、甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰胺、3-苯基丙酰胺、吡啶酰胺3-吡啶基甲酰胺、N-苯甲酰基苯基丙氨酰基衍生物、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯基乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、乙酰基乙酰胺、(N’-二硫代苄氧基羰基氨基)乙酰胺、3-(对羟基苯基)丙酰胺、3-(邻硝基苯基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻-苯基偶氮苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、3-甲基-3-硝基丁酰胺、邻硝基肉桂酰胺、N-乙酰蛋氨酸衍生物、邻硝基苯甲酰胺、邻(苯甲酰基氧基甲基)苯甲酰胺、4，5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮、N-邻苯二甲酰亚胺、N-二硫代琥珀酰亚胺(Dts)、N-2，3-二苯基马来酰亚胺、N-2，5-二甲基吡咯、N-1，1，4，4-四甲基二硅烷基氮杂环戊烷加成物(STABASE)、5-经取代的1，3-二甲基-1，3，5-三氮杂环己-2-酮、5-经取代的1，3-二苄基-1，3，5-三氮杂环己-2-酮、1-经取代的3，5-二硝基-4-吡啶酮、N-甲基胺、N-烯丙基胺、N-[2-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基胺(SEM)、N-3-乙酰氧基丙基胺、N-(1-异丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)胺、季铵盐、N-苄基胺、N-二(4-甲氧基苯基)甲基胺、N-5-二苯并环庚基胺、N-三苯基甲基胺(Tr)、N-[(4-甲氧基苯基)二苯基甲基]胺(MMTr)、N-9-苯基芴基胺(PhF)、N-2，7-二氯-9-芴基亚甲基胺、N-二茂铁基甲基氨基(Fcm)、N-2-皮考基氨基N’-氧化物、N-1，1-二甲硫基亚甲基胺、N-亚苄基胺、N-对-甲氧基亚苄基胺、N-二苯基亚甲基胺、N-[(2-吡啶基)均三甲苯基]亚甲基胺、N-(N’，N’-二甲基氨基亚甲基)胺、N，N’-亚异丙基二胺、N-对-硝基亚苄基胺、N-亚水杨基胺、N-5-氯亚水杨基胺、N-(5-氯-2-羟基苯基)苯基亚甲基胺、N-亚环己基胺、N-(5，5-二甲基-3-氧代-1-环己烯基)胺、N-硼烷衍生物、N-二苯基硼酸衍生物、N-[苯基(五羰基铬或钨)羰基]胺、N-铜螯合物、N-锌螯合物、N-硝基胺、N-亚硝胺、胺N-氧化物、二苯基膦酰胺(Dpp)、二甲硫基膦酰胺(Mpt)、二苯基硫代膦酰胺(Ppt)、氨基磷酸二烷基酯、氨基磷酸二苄基酯、氨基磷酸二苯基酯、苯亚磺酰胺、邻硝基苯亚磺酰胺(Nps)、2，4-二硝基苯亚磺酰胺、五氯苯亚磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯亚磺酰胺、三苯基甲基亚磺酰胺、3-硝基吡啶亚磺酰胺(Npys)、对甲苯磺酰胺(Ts)、苯磺酰胺、2，3，6，-三甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mtr)、2，4，6-三甲氧基苯磺酰胺(Mtb)、2，6-二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Pme)、2，3，5，6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺(Mte)、4-甲氧基苯磺酰胺(Mbs)、2，4，6-三甲基苯磺酰胺(Mts)、2，6-二甲氧基-4-甲基苯磺酰胺(iMds)、2，2，5，7，8-五甲基色满-6-磺酰胺(Pmc)、甲烷磺酰胺(Ms)、β-三甲基硅烷基乙烷磺酰胺(SES)、9-蒽磺酰胺、4-(4’，8’-二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺(DNMBS)、苄基磺酰胺、三氟甲基磺酰胺和苯甲酰甲基磺酰胺。实例性保护基团详细论述于本文中，然而，应了解本发明并不打算限于这些保护基团；相反，使用以上标准可容易地识别各种其它等效保护基团并用于本发明方法中。另外，各种保护基团已为此项技术熟知且包括在有机合成中的保护基团(ProtectingGroupsinOrganicSynthesis)，T.W.格林(T.W.Greene)和P.G.M.伍慈(P.G.M.Wuts)，第3版，约翰威立出版公司(JohnWiley＆Sons)，1999(其整体以引用的方式并入本文中)中所详细阐述者。

如本文所述，本发明化合物可含有“任选经取代”部分。一般来说，无论术语“任选”是否在前面，术语“经取代”都意指指定部分的一个或一个以上氢经合适的取代基代替。除非另有说明，否则“任选经取代”基团可在所述基团的每一可取代位置处具有适当取代基，且在任一给定结构中的一个以上位置可经一个以上选自特定基团的取代基取代时，在每一位置处的取代基可相同或不同。本发明设想的取代基的组合优选是那些使得形成稳定或化学上可行化合物者。本文所用术语“稳定”是指如下化合物：在出于本文所揭示的一个或一个以上目的而经受各种条件以允许其制备、检测且在某些实施例中其回收、纯化和使用时，其实质上不发生变化。

“任选经取代”基团的可取代碳原子上的合适的单价取代基独立地为卤素；-(CH₂)_0-4R^o；-(CH₂)_0-4OR^o；-O(CH₂)_0-4R^o、-O-(CH₂)_0-4C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4CH(OR^o)₂；-(CH₂)_{0- 4}SR^o；-(CH₂)_0-4Ph，其可经R^o取代；-(CH₂)_0-4O(CH₂)_0-1Ph，其可经R^o取代；-CH=CHPh，其可经R^o取代；-(CH₂)_0-4O(CH₂)_0-1-吡啶基，其可经R^o取代；-NO₂；-CN；-N₃；-(CH₂)_0-4N(R^o)₂；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)R^o；-N(R^o)C(S)R^o；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)NR^o ₂；-N(R^o)C(S)NR^o ₂；-(CH₂)_0-4N(R^o)C(O)OR^o；-N(R^o)N(R^o)C(O)R^o；-N(R^o)N(R^o)C(O)NR^o ₂；-N(R^o)N(R^o)C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4C(O)R^o；-C(S)R^o；-(CH₂)_0-4C(O)OR^o；-(CH₂)_0-4C(O)SR^o；-(CH₂)_0-4C(O)OSiR^o ₃；-(CH₂)_0-4OC(O)R^o；-OC(O)(CH₂)_0-4SR-、SC(S)SR^o；-(CH₂)_0-4SC(O)R^o；-(CH₂)_0-4C(O)NR^o ₂；-C(S)NR^o ₂；-C(S)SR^o；-SC(S)SR^o、-(CH₂)_0-4OC(O)NR^o ₂；-C(O)N(OR^o)R^o；-C(O)C(O)R^o；-C(O)CH₂C(O)R^o；-C(NOR^o)R^o；-(CH₂)_0-4SSR^o；-(CH₂)_0-4S(O)₂R^o；-(CH₂)_0-4S(O)₂OR^o；-(CH₂)_0-4OS(O)₂R^o；-S(O)₂NR^o ₂；-(CH₂)_0-4S(O)R^o；-N(R^o)S(O)₂NR^o ₂；-N(R^o)S(O)₂R^o；-N(OR^o)R^o；-C(NH)NR^o ₂；-P(O)₂R^o；-P(O)R^o ₂；-OP(O)R^o ₂；-OP(O)(OR^o)₂；SiR^o ₃；-(C_1-4直链或具支链亚烷基)O-N(R^o)₂；或-(C_1-4直链或具支链亚烷基)C(O)O-N(R^o)₂，其中每一R^o可如下文所定义经取代且独立地为氢、C_1-6脂肪族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph、-CH₂-(5-6元杂芳基环)或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环，或尽管上文定义，但两个独立出现的R^o连同其夹杂原子一起形成具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的3到12元饱和、部分不饱和或芳基单环或双环，其可如下文所定义经取代。

R^o(或通过两个独立出现的R^o连同其夹杂原子所形成的环)上的合适的单价取代基独立地为卤素、-(CH₂)_0-2R^●、-(卤素R^●)、-(CH₂)_0-2OH、-(CH₂)_0-2OR^●、-(CH₂)_0-2CH(OR^●)₂；-O(卤素R^●)、-CN、-N₃、-(CH₂)_0-2C(O)R^●、-(CH₂)_0-2C(O)OH、-(CH₂)_0-2C(O)OR^●、-(CH₂)_0-2SR^●、-(CH₂)_0-2SH、-(CH₂)_0-2NH₂、-(CH₂)_0-2NHR^●、-(CH₂)_0-2NR^● ₂、-NO₂、-SiR^● ₃、-OSiR^● ₃、-C(O)SR^●、-(C_1-4直链或具支链亚烷基)C(O)OR^●或-SSR^●，其中每一R^●未经取代或在前面有“卤基”的情况下仅经一个或一个以上卤素取代，且独立地选自C_1-4脂肪族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0到4个独立选自氮、氧或硫的杂原子的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环。R^o的饱和碳原子上的适当的二价取代基包括=O和=S。

“任选经取代”基团的饱和碳原子上的适当的二价取代基包括以下：=O、=S、=NNR^* ₂、=NNHC(O)R^*、=NNHC(O)OR^*、=NNHS(O)₂R^*、=NR^*、=NOR^*、-O(C(R^* ₂))_2-3O-或-S(C(R^* ₂))_2-3S-，其中每一独立出现的R^*选自氢、可如下文所定义经取代的C_1-6脂肪族基或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环。键结到“任选经取代”基团的邻近可取代碳的适当的二价取代基包括：-O(CR^* ₂)_2-3O-，其中每一独立出现的R^*选自氢、可如下文所定义经取代的C_1-6脂肪族基或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环。

R^*的脂肪族基团上的适当的取代基包括卤素、-R^●、-(卤素R^●)、-OH、-OR^●、-O(卤素R^●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR^●、-NH₂、-NHR^●、-NR^● ₂或-NO₂，其中每一R^●未经取代在前面有“卤基”的情况下仅经一个或一个以上卤素取代，且独立地为C_1-4脂肪族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环。

“任选经取代”基团的可取代氮上的适当的取代基包括 或其中每一独立地为氢、可如下文所定义经取代的C_1-6脂肪族基、未经取代的-Oph或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环，或尽管上文定义，但两个独立出现的连同其夹杂原子一起形成具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的未经取代的3到12元饱和、部分不饱和或芳基单环或双环。

的脂肪族基团上的适当的取代基独立地为卤素、-R^●、-(卤素R^●)、-OH、-OR^●、-O(卤素R^●)、-CN、-C(O)OH、-C(O)OR^●、-NH₂、-NHR^●、-NR^● ₂或-NO₂，其中每一R^●未经取代在前面有“卤基”的情况下仅经一个或一个以上卤素取代，且独立地为C_1-4脂肪族基、-CH₂Ph、-O(CH₂)_0-1Ph或具有0到4个独立地选自氮、氧或硫的杂原子的5到6元饱和、部分不饱和或芳基环。

本文所用术语“医药上可接受的盐”是指那些在合理的医学判断范围内适用于接触人类和低等动物的组织而无过度毒性、刺激、过敏反应等等且与合理效益／风险比相称的盐。医药上可接受的盐已为业内所熟知。举例来说，S.M.贝尔赫(S.M.Berge)等人在医药科学杂志(J.PharmaceuticalSciences)，1977，66：1-19中详细阐述医药上可接受的盐，其以引用方式并入本文中。本发明化合物的医药上可接受的盐包括那些衍生自适当无机酸和有机酸以及碱者。医药上可接受的无毒酸加成盐的实例是氨基与无机酸(例如，盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸)或与有机酸(例如，乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)或通过使用业内所用的其它方法(例如，离子交换)形成的盐。其它医药上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等等。

衍生自合适碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和N⁺(C_1-4烷基)₄盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等等。在合适时，其它医药上可接受的盐包含无毒铵、季铵和胺阳离子，其是使用诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳数烷基磺酸根和芳基磺酸根等抗衡离子来形成。

当用作化学键时，应理解为描绘在碳中心处具有未经定义的立体化学的碳-碳单键。因此，附接到具有键的碳原子的取代基是指取代基从纸平面出来的实施例、取代基到纸平面背后的取代基和其组合(即，立体化学混合物)。附接到双键的涉及Z和E异构体二者。

除非上下文另外明确指明，否则本文和权利要求书中所使用的单数形式“一(a、an)”和“所述(the)”均包括复数个指示物。因此，例如，提到“化合物”包括多种上述化合物。

本文所用的短语“不经肠投与”和“以不经肠方式投与”意指以经肠和局部投与以外的投与方式，通常通过注射，且其包括(但不限于)经静脉内、经肌内、经动脉内、经鞘内、经囊内、经眼窝内、经心脏内、经真皮内、经腹膜腔内、经气管、经皮下、经表皮下、经关节内、经囊下、经蛛网膜下、经脊柱内和经胸骨内注射和输注。

本文所用的短语“全身投与”、“以全身方式投与”、“周边投与”和“以周边方式投与”意指化合物、药物或其它物质的投与并非直接投与到中枢神经系统，以使其进入患者全身且因此经历代谢和其它类似过程，例如，皮下投与。

术语“姑息剂”是指着重于减轻疾病症状和／或治疗方案的副作用、但非治愈性的治疗。

本文所用的术语“治疗有效量”是指当作为治疗方案的一部分投与时引发所要的生物反应的物质(例如，治疗剂、组合物和／或调配物)的量。在一些实施例中，物质的治疗有效量是当投与遭受或易患疾病、病症和／或病状的个体时足以治疗所述疾病、病症和／或病状的量。如所属领域的技术人员应了解，物质的有效量可视诸如所要的生物终点、所递送的物质、靶标细胞或组织等因素而变。例如，用以治疗疾病、病症和／或病状的调配物中的化合物的有效量是缓和、改善、减轻、抑制、预防疾病、病症和／或病状，延迟所述疾病、病症和／或病状的发作，降低所述疾病、病症和／或病状的一种或一种以上症状或特征的严重性和／或降低所述疾病、病症和／或病状的发病率的量。在一些实施例中，治疗有效量是以单一剂量投与；在一些实施例中，需要多个单位剂量来递送治疗有效量。

本文所用的术语术语“治疗(treat，treatment，treating)”是指用于部分或完全缓和、改善、减轻、抑制、预防疾病、病症和／或病状，延迟所述疾病、病症和／或病状的发作，降低所述疾病、病症和／或病状的一种或一种以上症状或特征的严重性和／或降低所述疾病、病症和／或病状的发病率的任一方法。治疗可投与未展现疾病、病症和／或病状的征兆的个体。在一些实施例中，治疗可投与仅展现疾病、病症和／或病状的早期征兆的个体用于降低发展与所述疾病、病症和／或病状相关联的病理的风险的目的。

本文所用的表达“单位剂量”是指适用于待治疗个体的调配物的物理离散单位。然而，应了解本发明调配物的总日用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。用于任一特定个体或有机体的特定有效剂量水平可取决于各种因素，包括所治疗的病症和所述病症的严重性；所用特定活性化合物的活性；所用特定组合物；个体的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；投与时间和所用特定活性化合物的排泄速率；治疗的持续时间；与所用特定化合物组合或同时使用的药物和／或其它疗法，和医学领域中熟知的类似因素。特定单位剂量可含有或可不含有治疗有效量的治疗剂。

“患有”疾病、病症和／或病状的个体已经诊断出和／或展现所述疾病、病症和／或病状的一种或一种以上症状。

“易患”疾病、病症和／或病状的个体还未诊断出所述疾病、病症和／或病状。在一些实施例中，易患疾病、病症和／或病状的个体可展现所述疾病、病症和／或病状的症状。在一些实施例中，易患疾病、病症和／或病状的个体可未展现所述疾病、病症和／或病状的症状。在一些实施例中，易患疾病、病症和／或病状的个体将发展所述疾病、病症和／或病状。在一些实施例中，易患疾病、病症和／或病状的个体将不发展疾病、病症和／或病状。

某些实施例的详细阐述

本发明涵盖仍存在对可用于治疗癌症和／或有效抑制癌症转移的化学治疗化合物的需求的认识。

本发明尤其提供用于治疗癌症的新颖化合物。在某些实施例中，此些化合物的特征在于具有特别有利的药理学曲线。在一些实施例中，此些化合物具有增加超过已知米格拉他汀类似物的效能。在一些实施例中，此些化合物具有增加超过已知米格拉他汀类似物的溶解性。在一些实施例中，此些化合物具有增加超过已知米格拉他汀类似物的癌症选择性。

本发明尤其提供用于抑制癌症转移的新颖化合物。在某些实施例中，此些化合物可用于抑制肺癌或乳癌转移。在某些实施例中，此些化合物可用于抑制多发性骨髓瘤的转移。本发明进一步提供治疗癌症的新和／或经改善方法。在某些实施例中，此些方法可用于治疗肺癌或乳癌的转移扩散。在某些实施例中，此些方法可用于治疗多发性骨髓瘤的转移扩散。在某些实施例中，此些方法可用于治疗肺癌或乳癌到大脑的转移扩散。本发明进一步提供抑制癌症转移的新的和／或经改善方法。在某些实施例中，此些方法可用于治疗肺癌或乳癌。在某些实施例中，此些方法可用于治疗多发性骨髓瘤。

大环内酯米格拉他汀是天然产物，其最初是从链霉菌属(Streptomycessp)MK929-43F1的培养肉汤作为筛选抑制癌细胞迁移的细菌产物的一部分而分离(中江K.(Nakae，K.)、今川义元Y.(Yoshimoto，Y.)、大泽树生T.(Sawa，T.)、豪马Y.(Homma，Y.)、滨田M.(Hamada，M.)、竹内弘高T.(Takeuchi，T.)和井本M.(Imoto，M.)(2000)，抗生素杂志(JAntibiot)(东京(Tokyo))53，1130-1136)。米格拉他汀和相关合成类似物随后经证实在其它肿瘤细胞(包括乳癌、前列腺癌和结肠癌的细胞)中作为迁移抑制剂，以及在活体内阻止人类乳房癌瘤细胞到肺的转移，在小鼠中抑制91-99％(珊D.(Shan，D.)、陈L.(Chen，L.)、纳杰达森J.T.(Njardarson，J.T.)、高卢C.(Gaul，C.)、马X.(Ma，X.)、达尼谢夫斯基S.J.(Danishefsky，S.J.)和黄X.Y.(Huang，X.Y.)(2005)，美国国家科学院院刊(ProcNatlAcadSciUSA)102，3772-3776)。米格拉他汀的突出性质是特定阻止肿瘤细胞的迁移、而不阻止正常细胞(例如上皮细胞、成纤维细胞或白细胞)的迁移的能力。另外，在高uM浓度下，米格拉他汀在典型伤口愈合及小室细胞迁移分析中抑制肿瘤细胞的迁移，且仍展示最小细胞毒性且极少不不干扰DNA、RNA和蛋白质生物合成(高卢C.、纳杰达森J.T.、珊D.、多恩D.C.(Dorn，D.C.)、吴K.D.(Wu，K.D.)、唐W.P.(Tong，W.P.)、黄X.Y.、穆尔M.A.(Moore，M.A.)和达尼谢夫斯基S.J.(2004)，美国化学会志(JAmChemSoc)，26，11326-11337；纳杰达森J.T.、高卢C.、珊D.、黄X.Y.和达尼谢夫斯基S.J.(2004)，美国化学会志126，1038-1040)。

由于天然米格拉他汀化合物的开始发现，申请者已开发用于米格拉他汀的总体合成的方法以及简化的合成途径以产生米格拉他汀类似物，其中的若干种与天然大环内酯相比以高达三个数量级抑制肿瘤细胞迁移。尽管如上文和本文所述的其它参考文献中所阐述，在最近几年已开发若干种合成米格拉他汀类似物，仍需要进一步研究以开发能够具有改善药理学曲线的新颖化学治疗剂。

在一些实施例中，所提供的化合物和／或方法可用于医学中。在一些实施例中，所提供的化合物和／或方法可用于治疗癌症。在一些实施例中，所提供的化合物和／或方法可用于治疗实体肿瘤。在一些实施例中，所提供的化合物和／或方法可用于治疗上皮来源的肿瘤。在一些实施例中，所提供的物质和／或方法可用于治疗乳癌或肺癌。

癌症转移通常认为是多步骤过程，其中不受控细胞增殖之后是或伴随局部侵袭和血管发生，进入并在循环系统中存活，且最终在次级免疫器官中建立远程肿瘤(阮D.X.(Nguyen，D.X.)、博思P.D.(Bos，P.D.)和曼斯艾格J.(Massague，J.)(2009)，自然评论：癌症(NatRevCancer)9，274-284；钱伯斯A.F.(Chambers，A.F.)、格卢姆A.C.(Groom，A.C.)和麦克唐纳I.C.(MacDonald，I.C.)(2002)，自然评论：癌症2，563-572；克莱因C.A.(Klein，C.A.)(2009)，自然评论：癌症9，302-312)。在这些点中的一者或多者处进行干扰将潜在地阻断转移，无论是通过协助管理原发性肿瘤结合其它疗法还是通过防止在手术和其它全身治疗之后形成新的肿瘤或扩散。在转移期间细胞迁移的调控与其它事件相比(例如血管发生)相对原因不明，但从免疫系统的细胞或在胚胎发育期间所用的迁移机制可得出相似之处(曼德森C.D.(Madsen，C.D.)和萨海E.(Sahai，E.)(2010)，发育细胞(DevCell)19，13-26；马兹M.(Yilmaz，M.)和克里斯多弗里G.(Christofori，G.)(2010)，分子癌症研究(MolCancerRes)8，629-642)。在迁移过程的各个点处，癌细胞穿透细胞屏障，无论所述屏障是在基膜、血管、淋巴系统还是目标器官处。为此，上皮间质转化(EMT)、细胞粘附改变、蛋白水解活性和趋化因子感受性保证整个迁移过程。显著地，转移性癌细胞可作为孤立细胞(例如在结肠直肠癌中)或整体(如被鳞状细胞癌侵袭的主要形式)迁移。

基于在高度转移性4T1乳癌细胞中的研究，大环酮和大环内酰胺细胞迁移干扰的细胞基础似乎是以RacGTPase依赖性方式针对片状伪足形成的细胞基础。片状伪足是在移动细胞的前缘上的肌动蛋白驱动突出，且在迁移期间可能负责牵拉细胞向前。Rac是片状伪足突起所需的三种RhoGTPase中的一者，且刺激下游效应蛋白质Arp2／3以诱导树枝状肌动蛋白聚合(雷德利A.J.(Ridley，A.J.)、施瓦兹M.A.(Schwartz，M.A.)、伯里奇K.(Burridge，K.)、费泰尔R.A.(Firtel，R.A.)、金斯伯格M.H.(Ginsberg，M.H.)、博里西G.(Borisy，G.)、帕森斯J.T.(Parsons，J.T.)和霍维茨A.R.(Horwitz，A.R.)(2003)，科学(Science)302，1704-1709)。通过各种分子反馈途径，Rac还通过界定迁移细胞的前缘起到加强细胞极性的作用。显著地，Rac在4T1乳癌细胞中升高，此表明至少在这些转化细胞中(不希望受限于任何特定理论)，此可为米格拉他汀靶向转移特异性迁移同时保护正常细胞的可能机制。最近研究展示，米格拉他汀醚(下文所描绘)(最简单的类似物)在活体外和在小鼠模型中产生对抗经转化乳癌细胞的类似效应，此表明可能与肌动蛋白集束有关。

申请者自己对合成新米格拉他汀用于癌症疗法的研究已获得有前景的结果。特别地，已选择被称为核心大环酮、核心大环内酰胺和米格拉他汀醚的米格拉他汀类似物用于临床前研究且作为癌细胞迁移抑制剂展示显著潜力(奥斯卡森T.(Oskarsson，T.)、纳哥诺P.(Nagorny，P.)、克劳斯I.J.(Krauss，I.J.)、佩雷斯L.(Perez，L.)、曼达尔M.(Mandal，M.)、杨G.(Yang，G.)、欧菲类O.(Ouerfelli，O.)、萧D.(Xiao，D.)、穆尔M.A.、曼斯艾格J.和达尼谢夫斯基S.J.(2010)，美国化学会志132，3224-3228)。

在本发明之前，转移化学合成已实现其活性增加同时确保低到不存在的毒性的希望。然而，水溶性一直是一个需要解决以有助于倾向于回避DMSO使用的药理学评价的持久问题。申请者在本文中阐述了一些途径以解决在活体外和活体内环境中的溶解度障碍，提供更具水溶性但仍保存活性的化合物。在某些实施例中，CMe在5％甲醇存在下的水溶解度介于0.2mg／mL到0.3mg／mL之间。在某些实施例中，所提供化合物具有增强的生物利用度和／或药学稳定性。

申请者意外地发现本发明化合物是癌细胞迁移的强抑制剂。所述化合物就此而言与先前揭示的化合物相比展示提高的活性。在某些实施例中，本发明的化合物抑制癌细胞从原发性肿瘤位点迁移到整个身体的其它位置。在某些实施例中，本发明的化合物抑制使人类转移性乳癌细胞穿过血脑屏障从循环中移出且随后在大脑中朝向且沿着毛细血管的近腔表面迁移的迁移过程。在一些实施例中，本发明的化合物抑制乳癌细胞的迁移。在一些实施例中，本发明的化合物抑制肺癌细胞的迁移。

在一些实施例中，本发明提供式I化合物：

或其医药上可接受的盐；

其中：

为单键或双键；

R¹为氢或任选经取代的C_1-6脂肪族基；

R²为氧保护基团、氢或任选经取代的C_1-6脂肪族基；

R³和R⁵各自独立地为任选经取代的C_1-6脂肪族基；且

R⁴为氢或-T-Y；

-T-是任选经取代的C_1-8二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链，其中一个或一个以上亚甲基单元任选且独立地由以下代替：-NR-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-N(R)SO₂-、-SO₂N(R)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)O-、-OC(O)N(R)-、-S-、-SO-或-SO₂-；

每一R独立地为-H或选自由以下组成的群组的任选经取代的基团：C_1-20脂肪族基、C_1-20杂脂肪族基、6到10元芳基、5到12元杂芳基、3到14元碳环、3到12元杂环基；且

-Y为氢或酰基。

在一些实施例中，R¹为氢。在一些实施例中，R¹为任选经取代的C_1-6脂肪族基。在一些实施例中，R¹为经一个或一个以上卤素取代的C_1-6脂肪族基。在一些实施例中，R¹为任选经取代的C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，R¹为经一个或一个以上卤素取代的C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，R¹为甲基。在其它实施例中，R¹为-CF₃。

在一些实施例中，R²为氧保护基团。在其它实施例中，R²为氢。在一些实施例中，R²为任选经取代的C_1-6脂肪族基。在一些实施例中，R²为任选经取代的C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，R²为甲基。

在某些实施例中，R³为任选经取代的C_1-6脂肪族基。在某些实施例中，R³为任选经取代的C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，R³为甲基。

在一些实施例中，R⁴为氢。在一些实施例中，R⁴不为氢。在其它实施例中，R⁴为-T-Y。

在一些实施例中，R⁵为任选经取代的C_1-6脂肪族基。在某些实施例中，R⁵为任选经取代的C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，R⁵为甲基。

在某些实施例中，-T-是任选经取代的C_1-8二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链，其中一个或一个以上亚甲基单元任选且独立地由以下代替：-NR-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)O-或-OC(O)N(R)-。在某些实施例中，-T-是任选经取代的C_1-6二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链，其中一个或一个以上亚甲基单元任选且独立地由以下代替：-NR-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)O-或-OC(O)N(R)-。在某些实施例中，-T-是任选经取代的C_1-3二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链，其中一个或两个亚甲基单元任选且独立地由以下代替：-NR-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-OC(O)O-、-C(O)O-或-OC(O)N(R)-。在某些实施例中，-T-为-CH₂-。

在一些实施例中，Y为氢。在一些实施例中，Y不为氢。在一些实施例中，Y为酰基。在一些实施例中，Y为-CO₂H。在一些实施例中，Y为-CO₂R。在一些实施例中，Y为-CO₂Me。在一些实施例中，Y为-C(O)N(R)₂。在一些实施例中，Y为-C(O)NHEt。在一些实施例中，Y为-C(O)NHMe。在一些实施例中，Y为-OH。

在一些实施例中，R¹为经一个或一个以上卤素取代的C_1-3脂肪族基，或R⁴为-T-Y，其中-T-为CH₂且-Y为酰基。在一些实施例中，R¹为-CF₃或R⁴为-T-Y，其中-T-为CH₂且-Y为-CO₂H。

在一些实施例中，-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为甲基或乙基。

在一些实施例中，-T-为-C(O)-且Y为-OR或N(R)₂。在一些实施例中，-T-为-C(O)-且Y为-OR或N(R)₂，其中R为氢或C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，-T-为-C(O)-且Y为-OR或N(R)₂，其中R为氢、甲基或乙基。在一些实施例中，T为共价键且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基。在一些实施例中，T为-CH₂CH₂O-且Y为氢。

在某些实施例中，R¹为氢或经一个或一个以上卤素取代的C_1-3脂肪族基，R²为C_1-3脂肪族基，R³为C_1-3脂肪族基，R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为共价键或-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基，R⁵为C_1-3脂肪族基，且为单键。

在某些实施例中，R¹为氢或经一个或一个以上卤素取代的C_1-3脂肪族基，R²为C_1-3脂肪族基，R³为C_1-3脂肪族基，R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为共价键或-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基，R⁵为C_1-3脂肪族基，且为(Z)-双键。

在某些实施例中，R¹为氢或经一个或一个以上卤素取代的C_1-3脂肪族基，R²为C_1-3脂肪族基，R³为C_1-3脂肪族基，R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为共价键或-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基，R⁵为C_1-3脂肪族基，且为(E)-双键。

在某些实施例中，R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为甲基，R⁵为甲基，且为单键。

在某些实施例中，R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂CH₂O-且Y为氢，其中R为甲基，R⁵为甲基，且为单键。

在某些实施例中，R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为共价键且Y为-C(O)NHR，其中R为乙基，R⁵为甲基，且为单键。

在一些实施例中，为双键，R¹为-CF₃，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

在一些实施例中，为单键或双键，R¹为氢或甲基，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。在一些实施例中，为双键，R¹为氢或甲基，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为氢或-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。在一些实施例中，在为(E)-双键的情况下，R¹为氢或甲基，且R²、R³和R⁵为甲基，R⁴为氢。在一些实施例中，在为单键的情况下，R¹为氢，且R²、R³和R⁵为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

在一些实施例中，为(E)-双键，R¹为氢或-CF₃，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为氢。在一些实施例中，为(Z)-双键，R¹为甲基，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

在一些实施例中，当为双键时，R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，且R⁵为甲基，R⁴不为氢。

在一些实施例中，本发明提供具有式II、III或IV的化合物：

或其医药上可接受的盐；其中R¹、R²、R³、R⁴和R⁵中的每一者如上文所定义且如在本文的类型和子类型中所阐述，二者单独和组合。

在一些实施例中，本发明提供具有式II-a、III-a或IV-a的化合物：

或其医药上可接受的盐，其中R¹、R²、R³和R⁵中的每一者如上文所定义且如本文的类型和子类型中所阐述，二者单独和组合。

式I的实例性化合物描绘于下表A中。

表A.

或其医药上可接受的盐。

在整个说明书中，表A中标记为“羧甲基米格拉醚(carboxymethylmigraether)”的化合物是使用大量缩写来提及。应了解，“cME”、“CME”、“CM-ME”、“CMME”和“羧甲基-ME”所有都是指此化合物。另外，“米格拉他汀醚”或“ME”是指下式的化合物：

或其医药上可接受的盐。在某些实施例中，本文所阐述的调配物和用途涵盖ME。在某些实施例中，式I化合物不为ME。

在一些实施例中，本发明化合物包括式I化合物的开链非环状形式。

调配物

如上文所述，本发明提供化合物和可用于开发特别地用于癌症治疗的新颖治疗剂的合成方法。一般来说，如本文所揭示制备的化合物可用于治疗和／或预防(优选地预防转移)遭受癌症的个体的癌症。

因此，本发明提供用于治疗癌症和／或预防癌症复发的医药组合物，其包含本文所揭示的本发明的任一化合物作为活性成份，任选地结合医药上可接受的载剂。本发明的医药组合物可进一步包含其它治疗活性成份(例如，化学治疗剂和／或姑息剂)。举例来说，姑息治疗涵盖止痛剂、止吐药物和抗恶心药物。此外，化学疗法、放射疗法和外科手术都可以姑息方式使用(也就是说，用于减轻症状而非治愈；例如用于使肿瘤缩小和降低血压、转移、出血、疼痛和其它癌症症状)。

在某些实施例中，本发明的医药组合物或方法包含免疫佐剂或免疫佐剂的组合。

本发明的化合物可与医药上可接受的载剂组合以形成医药组合物。雷明顿的制药科学(Remington′sPharmaceuticalSciences)，第16版，E.W.马丁(E.W.Martin)(麦克出版公司(MackPublishingCo.)，宾夕法尼亚州伊斯顿(Easton，Pa)，1980)揭示用于调配医药组合物的各种载剂和制备其的已知技术。在某些实施例中，医药组合物包括医药上可接受量的本发明化合物。在某些实施例中，医药组合物包括治疗有效量的本发明化合物。可与载剂材料组合产生单一剂型的活性成份的量将视所治疗的主体和投与的特定方式而变。可与载剂材料组合以产生单一剂型的活性成份的量通常应为产生治疗效应的化合物的量。通常，此量将在约1％到约99％活性成份、约5％到约70％或约10％到约30％的范围内。

润湿剂、乳化剂和润滑剂(例如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)以及着色剂、释放剂、包覆剂、甜味剂、矫味剂和加香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。

医药上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸钠等等；油溶性抗氧化剂，例如棕榈酸抗坏血酯、丁基化羟基苯甲醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等等；和金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等等。

本发明调配物包括适于经口、经鼻、局部(包括经颊和经舌下)、经直肠、经阴道和／或不经肠投与者。调配物可方便地以单位剂型存在且可通过制药技术中熟知的任何方法制备。在某些实施例中，本发明调配物包含选自由下列组成的群组的赋形剂：环糊精、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载剂(例如聚酯和聚酸酐)；以及本发明化合物。在某些实施例中，上述调配物使得本发明化合物具口服生物利用度。

制备这些调配物的方法包括使本发明化合物与载剂和任选地一种或一种以上辅助成份结合的步骤。一般来说，调配物是通过以下方式来制备：使本发明化合物与液体载剂或微细固体载剂或二者均匀且充分地混合，且随后如果需要使产物成型。

适于经口投与的本发明调配物可呈下列形式：胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、菱形片剂(使用矫味基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉末、颗粒；或作为存于水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；或作为水包油型或油包水型液体乳液；或作为酏剂或糖浆；或作为软片剂(使用惰性基质，例如明胶和甘油、或蔗糖和阿拉伯胶)和／或作为漱口剂等等，每一者均含有预定量的本发明化合物作为活性成份。本发明化合物也可以大丸剂、冲剂或糊剂投与。

在用于经口投与的本发明固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣药丸、粉末、颗粒等等)中，可将活性成份与一种或一种以上医药上可接受的载剂(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和／或任一以下成份混合：填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和／或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和／或阿拉伯胶；保湿剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；溶液阻滞剂，例如石蜡；吸收加速剂，例如四级铵化合物；润湿剂，例如鲸蜡醇、甘油单硬脂酸酯和非离子表面活性剂；吸附剂，例如高岭土和膨润土；润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和其混合物；和着色剂。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，医药组合物也可包含缓冲剂。在使用诸如乳糖(lactose或milksugar)以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软壳和硬壳明胶胶囊中，也可使用相似类型的固体组合物作为填充剂。

可通过压制或模制来制备片剂，其任选地含有一种或一种以上辅助成份。压制片剂可使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，羟乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备。模制片剂可在适当机器中用惰性液体稀释剂润湿粉末化合物的混合物来制备。

本发明医药组合物的片剂和其它固体剂型(例如糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒)可任选地经刻痕或经制备具有诸如肠溶包膜和医药调配技术中熟知的其它包膜等包膜和外壳。也可使用(例如)提供所要释放曲线的不同比例的羟丙基甲基纤维素、其它聚合物基质、脂质体和／或微球体对其进行调配以便在其中提供活性成份的缓慢或控制释放。其可经调配用于快速释放，例如冷冻干燥。其可通过(例如)过滤穿过细菌截留过滤器或通过纳入灭菌剂来进行灭菌，所述灭菌剂呈可在即将使用前溶于无菌水或一些其它无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式。所述组合物也可任选地含有遮光剂且可为任选地以延迟方式仅(或优先)在胃肠道的某一部分中释放活性成份的组合物。可使用的包埋用组合物的实例包括聚合物质和蜡。如果合适，那么活性成份也可呈含有一种或一种以上上述赋形剂的微囊封形式。

用于经口投与本发明化合物的液体剂型包括医药上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性成份以外，液体剂型可含有业内常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(特别地，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨醇酐脂肪酸酯和其混合物。

除惰性稀释剂以外，口服组合物也可包括佐剂，例如，润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂、着色剂、加香剂和防腐剂。

除活性化合物以外，悬浮液也可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚乙二醇山梨醇和山梨醇酐酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶和其混合物。

用于直肠或阴道投与的本发明医药组合物的调配物可以栓剂形式存在，其可通过使一种或一种以上本发明化合物与一种或一种以上适当的非刺激性赋形剂或载剂混合来制备，所述赋形剂或载剂包含(例如)可可油、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸酯，且其在室温下为固体但在体温下为液体，且因此将在直肠或阴道腔内熔融并释放活性化合物。

适于阴道投与的本发明调配物还包括含有业内已知合适的载剂的阴道栓剂、阴道塞、乳膏、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂调配物。

用于局部或经皮投与本发明化合物的剂型包括粉末、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗液、凝胶、溶液、贴片和吸入剂。活性化合物可在无菌条件下与医药上可接受的载剂和可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。

除本发明的活性化合物以外，软膏、糊剂、乳膏和凝胶可含有赋形剂，例如动物和植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石粉和氧化锌或其混合物。

除本发明化合物以外，粉末和喷雾剂可含有赋形剂，例如乳糖、滑石粉、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂可另外含有常用推进剂，例如氯氟烃类和挥发性的未经取代烃类，例如丁烷和丙烷。

经皮贴片具有提供本发明化合物到身体的受控递送的额外优点。将化合物溶解或分散于适当介质中可制得此些剂型。也可使用吸收促进剂来增加化合物穿过皮肤的通量。提供速率控制膜或将化合物分散于聚合物基质或凝胶中都可控制此通量的速率。

眼用调配物、眼用软膏、粉末、溶液等等也涵盖在本发明的范围内。

适于不经肠投与的本发明医药组合物包含一种或一种以上本发明化合物与一种或一种以上医药上可接受的无菌等渗水性或非水性溶液、分散液、悬浮液或乳液或无菌粉末的组合，所述无菌粉末可在即将使用之前重构成无菌可注射溶液或分散液，所述医药组合物可含有糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、可使调配物与预期接受者的血液等渗的溶质、或悬浮剂或增稠剂。

可用于本发明医药组合物的适当的水性和非水性载剂的实例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等等)和其适当混合物、植物油(例如橄榄油)和可注射有机酯(例如油酸乙酯)。举例来说，通过使用诸如卵磷脂等包覆材料、保持所需粒径(在分散剂的情况下)和使用表面活性剂可保持适当流动性。

这些组合物也可含有佐剂，例如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可通过纳入各种抗细菌和抗真菌剂(例如，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等等)来确保防止微生物对标的化合物的作用。也可希望将等渗剂(例如糖、氯化钠等等)纳入组合物中。另外，通过纳入延迟吸收的试剂(例如单硬脂酸铝和明胶)可使可注射医药形式长期吸收。

在一些情形下，为延长药物效应，希望减缓来自皮下或肌内注射的药物的吸收。此可通过使用具有差的水溶解度的结晶或非晶型材料的液体悬浮液来实现。那么药物吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率又可取决于晶体大小和结晶形式。或者，通过将不经肠投与的药物溶解或悬浮于油媒剂中来实现所述药物形式的延迟吸收。

可注射储积形式是通过在生物可降解聚合物(例如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成标的化合物的微胶囊基质来制备。视药物与聚合物的比率和所用特定聚合物的属性，可控制药物释放速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储积可注射调配物也可通过使药物陷获于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。

药物洗脱形式包括经涂覆或含药支架和可植入装置。药物洗脱支架和其它装置可经化合物或医药制剂涂覆且可进一步包含经设计用于定时释放的聚合物。

在某些实施例中，化合物或医药制剂是经口投与。在其它实施例中，化合物或医药制剂是经静脉内投与。在某些实施例中，化合物经由可裂解连接体附接到利用导管投与的固体载体。投与的代替途径包括经舌下、经肌内和经皮投与。

当本发明化合物作为医药投与人类和动物时，其可以自身或作为含有(例如)0.1％到99.5％或0.5％到90％的活性成份与医药上可接受的载剂的组合的医药组合物给与。

本发明制剂可经口、不经肠、局部或直肠给予。当然，其以适于每一投与途径的形式给与。例如，其以片剂或胶囊形式投与，通过注射、吸入投与，以眼用洗剂、软膏、栓剂等形式通过注射、输注或吸入投与；通过洗剂或软膏局部投与；和通过栓剂经直肠投与。

这些化合物可通过任一适当投与途径投与人类和其它动物用于治疗，所述投与途径包括经口、经鼻(如以例如、气溶胶、喷雾剂)、经直肠、经阴道内、不经肠、经脑池内和局部(如以粉末、软膏或滴剂)(包括经颊和舌下)投与。

不管所选投与途径如何，通过所属领域的技术人员所知的常规方法将可以适当水合形式使用的本发明化合物和／或本发明的医药组合物调配成医药上可接受的剂型。

本发明医药组合物中活性成份的实际剂量水平可有所变化，以获得对于特定患者、组合物和投与模式有效实现所要治疗反应而对患者无毒的活性成份的量。

所选剂量水平将视各种因素而定，所述因素包括所用本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性、投与途径、投与时间、所用特定化合物的排泄或代谢速率、治疗的持续时间、与所用特定化合物组合使用的其它药物、化合物和／或物质、所治疗患者的年龄、性别、体重、身体状况、一般健康状况和先前病史以及为医学技术中所熟知的类似因素。

具有一般技术的医师或兽医可容易地确定并开具所需医药组合物的有效量。举例来说，医师或兽医可以低于实现所要治疗效果所需的水平开始投与医药组合物中所用的本发明化合物，且然后逐渐增加剂量直到实现所要效果为止。

在一些实施例中，本发明的化合物或医药组合物长期提供给个体。慢性治疗包括任一形式的重复投与达延长时期，例如重复投与达一个月或一个月以上、一个月与一年之间、一年或一年以上或更长。在一些实施例中，慢性治疗涉及在个体的整个生命中重复投与本发明的化合物或医药组合物。优选的慢性治疗涉及定期投与，例如一天一次或一次以上、一周一次或一次以上或一个月一次或一次以上。一般来说，适当剂量(例如本发明化合物的日剂量)应为有效产生治疗效应的最低剂量的化合物量。此一有效剂量通常应视上述因素而定。

通常，本发明化合物在用于指定效应时用于患者的剂量将在约0.0001mg／kg体重／天到约100mg／kg体重／天范围内。在一些实施例中，日剂量将在0.001化合物／kg体重到50mg化合物／kg体重的范围内。在一些实施例中，日剂量将在0.01mg化合物／kg体重到10mg化合物／kg体重的范围内。在一些实施例中，日剂量将在0.01mg化合物／kg到1mg化合物／kg体重的范围内。在一些实施例中，在0.01mg／kg体重到200mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在0.1mg／kg体重到200mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在1mg／kg体重到200mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在10mg／kg体重到200mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在10mg／kg体重到40mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在40mg／kg体重到200mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在10mg／kg体重到20mg／kg体重的范围内投与化合物。在一些实施例中，在10mg／kg体重到40mg／kg体重的范围内投与化合物。然而，可使用更低或更高的剂量。在一些实施例中，随着个体的生理机能由于年龄、疾病进展、体重或其它因素变化，可改变投与给个体的剂量。这些剂量可对应于在合适动物模型(例如，在转基因啮齿动物模型中)所发现可用且合适的剂量。在一些实施例中，可用于试验模型中的此些剂量可在约10mg／kg体重到约200mg／kg的范围内。在某些实施例中，试验动物中的剂量在约10mg／kg体重到约40mg／kg体重的范围内。在某些实施例中，试验动物中的剂量在约40mg／kg体重到约200mg／kg体重的范围内。在某些实施例中，合适动物模型中所用的剂量为约10mg／kg、约12mg／kg、约20mg／kg、约40mg／kg、约49mg／kg、约100mg／kg或约200mg／kg。

如果需要，活性化合物的有效日剂量可以2、3、4、5、6或6个以上亚剂量来投与，所述亚剂量以适当的间隔在全天内任选地以单位剂型分开投与。

尽管可单独投与本发明化合物，但优选以医药调配物(组合物)形式投与化合物。

通过从其它医药类推，本发明化合物可经调配以可用于人类或兽类医学的任一常规方式投与。

本发明提供试剂盒，其包含本发明化合物的医药组合物。在某些实施例中，此些试剂盒包括本发明化合物和另一化学治疗剂的组合。药剂可单独或一起包装。试剂盒任选地包括用于处方药物的说明书。在某些实施例中，试剂盒包括每一药剂的多个剂量。试剂盒可包括足够量的每一组份以治疗个体达一周、两周、三周、四周或多个月。试剂盒可包括化学疗法的完整循环。在某些实施例中，试剂盒包括化学疗法的多个循环。

在某些实施例中，本发明的化合物和医药组合物可用于组合疗法中，也就是说，化合物和医药组合物可与一种或一种以上其它所要治疗剂或医疗程序同时、在其之前或在其之后投与。在组合方案中采用的疗法(治疗剂或程序)的特定组合应考虑所要治疗剂和／或程序的相容性和待达到的所要治疗效果。还应了解，所用疗法可对相同病症实现所要效应(例如，本发明化合物可与另一抗癌剂同时投与)，或其可实现不同效应(例如，控制任何不良效应)。

举例来说，可与本发明的创新抗癌剂组合使用的其它治疗剂或抗癌剂包括外科手术、放射疗法(γ-放射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近距放射疗法和全身放射性同位素，仅举几个例子)、内分泌疗法、生物反应修饰剂(干扰素、白介素和肿瘤坏死因子(TNF)，仅举几个例子)、高温疗法和冷冻疗法、消弱任何副效应的药剂(例如，止吐药)和其它经批准的化学治疗药物，其包括(但不限于)烷基化药物(氮芥(mechlorethamine)、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、美法仑(Melphalan)、异环磷酰胺(Ifosfamide))、抗代谢药物(甲氨蝶呤(Methotrexate))、嘌呤拮抗剂和嘧啶拮抗剂(6-巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil)、阿糖胞苷(Cytarabine)、吉西他滨(Gemcitabine))、纺锤体毒剂(spindlepoisons)(长春花碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春瑞宾(Vinorelbine)、紫杉醇(Paclitaxel))、鬼臼毒素(podophyllotoxin)(依托泊苷(Etoposide)、伊立替康(Irinotecan)、拓扑替康(Topotecan))、抗生素(多柔比星(Doxorubicin)、博莱霉素(Bleomycin))、丝裂霉素(Mitomycin))、亚硝基脲(卡莫司汀(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine))、无机离子(顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin))、酶(天冬酰胺酶)和激素(它莫西芬(Tamoxifen)、亮丙瑞林(Leuprolide)、氟他米特(Flutamide)和甲地孕酮(Megestrol))，仅举几个例子。在某些实施例中，抗癌剂是埃坡霉素(epothilone)、紫杉酚(taxol)、根赤壳霉素(radicicol)或TMC-95A／B。在某些实施例中，埃坡霉素是12，13-脱氧埃坡霉素B、(E)-9，10-脱氢-12，13-脱氧EpoB和26-CF3-(E)-9，10-脱氢-12，13-脱氧EpoB。另外，本发明还涵盖目前在临床试验中且最终可由FDA批准的某些细胞毒性剂或抗癌剂(包括但不限于埃坡霉素和其类似物，和格尔德霉素(geldanamycins)和其类似物)。

实例

实验细节：

分析设备：旋光度是在JASCOP-2000数字偏振计于室温下测量。浓度(c)(以g／100ml表示)和溶剂在圆括号中给出。¹H-NMR和¹³C-NMR光谱是在布鲁克(Bruker)AMX-400或布鲁克DRX-500光谱仪上在CDCl₃中记录。化学位移(δ-值)是以ppm报告，其中以残余未氘化CDCl₃作为内标物(对于¹H-NMR参考7.26ppm且对于¹³C-NMR参考77.0ppm)。偶合常数(J)(H，H)以Hz给出，光谱分裂图案命名为单重峰(s)、双重峰(d)、三重峰(t)、四重峰(q)、多重峰或较多重叠信号(m)、表观(app)、宽信号(br)。低分辨率质谱(离子喷雾，电喷雾的变化形式)是在珀金-埃尔默(Perkin-Elmer)SciexAPI100光谱仪上获取。通过直接注入引入试样。高分辨率质谱(快速原子轰击，FAB)是在光谱仪上获取。快速色谱(FC)是利用E.默克(E.Merck)硅胶(60，粒径0.040-0.063mm)实施。

技术、溶剂和试剂：涉及空气或水分敏感试剂或中间体的反应是在氩或氮气氛下在经热风机或火焰干燥的玻璃器皿中在高真空下实施。所指示反应温度是指反应浴的温度，而室温(rt)指定为22℃。制备型反应是以磁力方式进行搅拌。四氢呋喃(THF)、二氯甲烷(CH₂Cl₂)和甲苯是从干燥溶剂系统(活性氧化铝管柱，正压力的氩)获得。所有其它溶剂均以在Sure／Seal瓶(奥德里奇(Aldrich))中的接收状态使用。所有其它试剂均以最高商用质量购自奥德里奇且不经进一步纯化即使用。

在70℃下向NaIO₄(14.95g，69.9mmol)于H₂O(32mL)中的热溶性溶液添加硅胶(40g，40-60μm)。将悬浮液冷却到室温并添加CH₂Cl₂(300mL)并声波处理10min。添加于CH₂Cl₂(50mL)中的二醇3(10.15g，50mmol)。将悬浮液于室温下搅拌45min后，将混合物过滤并用无水CH₂Cl₂(100mL)洗涤。将溶液再次在无水Na₂SO₄上干燥并过滤，并用无水CH₂Cl₂(50mL)洗涤，获得于CH₂Cl₂(500mL)中的所要醛4。醛溶液可直接用于下一步骤以制备二氢吡喃酮。

(3S，4S，5R，Z)-8-溴-3-甲氧基-5，7-二甲基辛-1，6-二烯-4-醇(12)

方法1：将烯丙醇11(6.2g，30.97mmol)和2，6-二甲基吡啶(4.3mL，37.08mmol)在无水CH₃CN(350mL)中组合。添加四溴化碳(16.2g，49.44mmol)并将溶液冷却到0℃。将Ph₃P(10.53g，40.17mmol)分成多份添加并使混合物升温到室温。搅拌30min之后，通过倾倒于饱和NH₄Cl溶液(200mL)中使反应骤冷。水相用Et₂O(2×200mL)萃取并将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。残余物通过硅胶塞(EtOAc-己烷，1：19)过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：9)纯化，以获得呈无色油状物的烯丙基溴12(6.9g，85％)。[α]²⁰D-7.01(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ5.75(m，1H)，5.36-5.27(m，3H)，4.04(d，1H，J=9.6Hz)，3.96(d，1H，J=9.7Hz)，3.48(dd，1H，J=5.1，8.0Hz)，3.29(m+s，4H)，2.67(m，1H)，2.59(d，1H，J=5.2Hz)，1.85(s，3H)，1.04(d，3H，J=6.8Hz)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ135.7，134.7，131.5，119.9，83.9，77.3，56.7，35.6，32.6，22.4，15.8；HRMS(ESI)的[C₁₁H₁₉O₂Br+Na]⁺计算值：285.0466，实验值：285.0475。

方法2：在室温下向烯丙醇11(3.9g，19.5mmol)于CH₂Cl₂(100ml)中的溶液中添加固体支撑的PPh₃(3mmol／g，9.5g)和CBr₄(8.4g，25.4mmol)。搅拌20min后，将反应混合物通过棉花塞过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱纯化，获得4.24g烯丙基溴12(83％)。

((3S，4S，5R，Z)-8-溴-3-甲氧基-5，7-二甲基辛-1，6-二烯-4-基氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(13)：在-15℃下向仲醇12(5.04g，19.23mmol)在CH₂Cl₂(150mL)中的溶液中添加2，6-二甲基吡啶(3.4mL，28.85mmol)和TBSOTf(6.2mL，26.92mmol)。在-15℃下搅拌1h之后，将反应混合物在-15℃下用MeOH(20mL)骤冷。将混合物用饱和NH₄Cl水溶液处理。分离有机层且用CH₂Cl₂(3×)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：9)纯化粗产物，获得呈黄色油状物的溴化物13(6.6g，91％)。[α]²⁰D2.76(c1.5，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ5.61(m，1H)，5.35(d，1H，J=9.8Hz)，5.23(m，2H)，3.88(s，2H)，3.48(dd，1H，J=3.0，7.1Hz)，3.30(t，1H，J=7.5Hz)，3.15(s，3H)，2.53(m，1H)，1.75(s，3H)，0.88(m+s，12H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ136.8，135.6，130.1，119.2，86.5，78.0，56.6，35.1，32.8，26.5，22.3，18.9，13.9，-3.4，-4.4；HRMS(ESI)的[C₁₇H₃₃BrO₂Si+Na]⁺计算值：399.1331，实验值：399.1321。

将NaH(1.44g，36.16mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(120mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(20mL)中的6-庚烯-醇14(3.95mL，28.93mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(6.8g，18.08mmol)于THF(30mL)中的溶液，随后添加TBAI(67mg，0.18mmol)，且15min后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚15(6.79g，90％)。[α]²⁰D+1.55(c1.2，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.80(m，1H)，5.62(m，1H)，5.38-5.23(m，3H)，5.01-4.92(m，2H)，3.95(d，1H，J=11.5Hz)，3.85(d，1H，J=11.5Hz)，3.44(dd，1H，J=3.0，7.1Hz)，3.38-3.30(m，3H)，3.20(s，3H)，2.62(m，1H)，2.04(m，2H)，1.72(s，3H)，1.60-1.55(m，2H)，1.41-1.33(m，4H)，0.91(s+m，12H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ139.2，135.6，134.1，130.9，118.7，114.5，86.4，78.8，69.9，69.4，56.3，34.1，33.9，29.8，29.0，26.4，26.0，21.7，18.8，14.5，-3.6，-4.6；HRMS(ESI)的[C₂₄H₄₆O₃Si+Na]⁺计算值：433.3114，实验值：433.3098。

向回流甲苯(1L)中添加醚15(210mg，0.51mmol)在甲苯(10mL)中的溶液和于甲苯(10mL)中的格拉布-II(Grubbs-II)催化剂(87mg，20mol％)。搅拌15min之后，添加DMSO(0.3ml)并将反应冷却到室温并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：20)纯化粗产物，获得呈无色油状物的大环醚16(140mg，75％)。[α]²⁰D+49.45(c1.7，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.59(m，1H)，5.51(d，1H，J=9.8Hz)，5.24(dd，1H，J=8.4，15.5Hz)，3.87(d，1H，J=9.8Hz)，3.65(d，1H，J=9.8Hz)，3.53-3.49(m，2H)，3.43(d，1H，J=8.7Hz)，3.36(m，1H)，3.20(s，3H)，2.91(m，1H)，2.18-2.14(m，2H)，1.74(s，3H)，1.68(m，1H)，1.55(s，3H)，1.50-1.36(m，5H)，0.91(s，9H)，0.88(d，3H，J=6.7Hz)，0.05(s，3H)，0.03(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ135.4，134.2，129.8，129.7，85.6，78.7，69.9，69.2，56.2，34.0，30.4，27.0，26.4，23.4，23.3，18.9，13.0，-3.5，-4.8；HRMS(ESI)的[C₂₂H₄₂O₃Si+Na]⁺计算值：405.2801，实验值：405.2800。

于室温下向TBS-大环醚16(845mg，2.21mmol)于THF(80mL)中的溶液添加HF·吡啶(18mL)。搅拌24h之后，将反应混合物小心地用饱和NaHCO₃(450mL)水溶液处理并用Et₂O稀释。分离有机层并用Et₂O(3×)萃取水层。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(己烷／EtOAc10：1到4：1)纯化，获得呈白色非晶形固体的大环醚17(544mg，92％)。[α]²³D+104.42(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.67-5.60(m，2H)，5.22(dd，1H，J=7.6，15.5Hz)，3.76(s，2H)，3.56-3.52(m，1H)，3.49-3.40(m，3H)，3.30(s，3H)，2.93(m，1H)，2.73(brs，1H)，2.24(m，1H)，2.09(m，1H)，1.76(d，1H，J=1.2Hz)，1.66(m，1H)，1.54-1.47(m，1H)，1.45-1.36(m，4H)，0.94(d，3H，J=6.9Hz)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ135.9，134.0，130.2，129.1，84.5，76.7，69.7，69.1，56.2，32.1，30.5，27.0，26.8，23.1，12.7；HRMS(ESI)的[C₁₆H₂₈O₃+Na]⁺计算值：291.1936，实验值：291.1937。

将氢化钠(60mg，1.5mmol，60％于矿物油中)用正己烷(4×1mL)洗涤并在真空中干燥。将所得残余物悬浮于THF(2.0mL)中。将溶解于THF(4.0mL)中的醇17(80mg，0.3mmol)添加到NaH悬浮液并在室温下搅拌1hr。添加溴乙酸(80mg，0.6mmol)于THF(2.0mL)中的溶液。将反应在85℃下回流14hr且随后冷却到室温。将反应用2MHCl逐滴骤冷且然后酸化到pH1。水层用乙酸乙酯(4×20mL)萃取。合并的有机层用Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩溶剂以获得酸，将其通过快速色谱(己烷／EtOAc10：3到10：4)纯化，获得成无色薄膜状的酸18(CME)(67mg，70％)并回收25mg起始材料醇17(ME)。[α]²⁰D+184.44(c，1.4，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ12.09(brs，1H)，5.73(m，1H)，5.34(d，1H，J=10.1Hz)，5.24(dd，1H，J=8.5，15.5Hz)，4.43(d，1H，J=17.3Hz)，4.03(d，1H，J=17.3Hz)，3.91(d，1H，J=10.7Hz)，3.71(t，1H，J=9.0Hz)，3.64(d，1H，J=10.7Hz)，3.49(m，2H)，3.39(s，3H)，3.24(d，1H，J=9.4Hz)，3.16(m，1H)，2.22(m，2H)，1.75(s，3H)，1.68(m，1H)，1.43(m，2H)，1.40-1.32(m，3H)，0.93(d，3H，J=6.7Hz)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ172.7，137.3，132.1，132.0，127.3，89.5，83.5，71.7，70.2，70.0，56.0，33.2，30.2，26.6，26.5，23.3，23.2，12.9；HRMS(ESI)的[C₁₈H₃₀O₅+Na]⁺计算值：349.1991，实验值：349.1992。

酯42.将于无水MeOH(0.30mL)中的酸18(10.5mg)和无水PhMe(0.30mL)的混合物冷却到0℃，用TMSCHN₂(0.080mL，2.0M于Et₂O中)处理并在此温度下搅拌1h，45min。在真空中去除挥发物且产物通过色谱在SiO₂(己烷：EtOAc，4：1)上纯化，获得呈透明油状物的42(9.8mg，90％)：[α]_D ²⁴+45.0(c1，CHCl₃)；¹HNMR(C₆D₆，500MHz)δ6.05(d，J=9.9Hz，1H)，5.41(td，J=15.6，6.6Hz，1H)，5.19(dd，J=15.6，8.2Hz，1H)，4.57，4.41(AB，J=16.2Hz，2H)，3.77(t，J=8.3Hz，1H)，3.69，3.66(AB，J=10.9Hz，2H)，3.37-3.35(m，4H)，3.32-3.28(m，1H)，3.25-3.22(m，2H)，3.12(s，3H)，2.00-1.96(m，2H)，1.77(d，J=0.9Hz，3H)，1.46-1.26(m，4H)，1.23(d，J=6.9Hz，3H)，1.17-1.12(m，2H)；¹³CNMR(C₆D₆，125MHz)δ171.0，133.9，133.7，129.9，129.6，87.2，86.5，71.0，70.7，69.7，55.8，50.7，33.6，30.4，27.6，27.1，23.5，23.1，14.0；MS-ESI的C₁₉H₃₂O₅Na(M+Na)计算值363.2，实验值363.1。

化合物43.将酯42(13.0mg，0.0383mmol)在无水PhMe(1.0mL)中的混合物冷却到-78℃，添加DIBAL溶液(0.096mL，0.096mmol，c=1.0，于己烷中)并使反应混合物升温到高达0℃并搅拌2h。纳入额外部分的DIBAL(0.040mL)，将混合物搅拌3h，用罗谢尔盐(Rochelle’ssalt)骤冷，萃取(3×EtOAc)，且合并的有机层用水、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。通过色谱在SiO₂(己烷：EtOAc，3：1)上纯化，获得呈无色油状物的43(0.0071g，59％)：[α]_D ²⁴+59.7(c1.0CHCl₃)；¹HNMR(C₆D₆，600MHz)δ5.71(d，J=10.2Hz，1H)，5.46(td，J=15.5，7.1Hz，1H)，5.25(dd，J=15.5，8.3Hz，1H)，4.07(brs，1H)，3.97-3.94(m，2H)，3.81(d，J=4.0Hz，2H)，3.79-3.76(m，1H)，3.73(t，J=8.7Hz，1H)，3.66(d，J=10.8Hz，1H)，3.48(dd，J=9.1，1.4Hz，1H)，3.40-3.38(m，2H)，3.32-3.27(m，1H)，3.23(s，3H)，2.08-2.05(m，2H)，1.85(d，J=1.2Hz，3H)，1.60-1.51(m，2H)，1.41-1.39(m，4H)，1.23(d，J=6.8Hz，3H)，1.23-1.22(m，1H)；¹³CNMR(C₆D₆，150MHz)δ134.5，133.5，130.6，129.6，87.4，85.4，76.5，70.4，69.8，63.1，56.0，34.1，30.3，27.2，27.0，23.5，23.3，13.6；MS-ESI的C₁₈H₃₂O₄Na(M+Na)计算值335.2，实验值335.3。

化合物44.将酸18(7.8mg，0.0239mmol)、MeNH₂·HCl(3.2mg，0.0378mmol)和席夫碱(Hünig’sbase)(0.00416mL，0.239mmol)于无水CH₂Cl₂(0.50mL)中的混合物用WSC·HCl(9.2mg，0.0478mmol)处理并在N₂下搅拌24h。将反应混合物倾倒于水中，用EtOAc(3×5mL)萃取，且合并的有机层用水、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。通过色谱在SiO₂(己烷：EtOAc，1：3)上纯化，获得呈无色油状物的44(7.2mg，89％)：[α]_D+41(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(C₆D₆，600MHz)δ主要旋转异构体：7.45(brs，1H)，5.41(d，J=10.1Hz，1H)，5.34(td，J=15.6，7.1Hz，1H)，5.09(dd，J=15.5，8.5Hz，1H)，4.38，4.33(AB，J=15.7Hz，2H)，3.66(dd，J=10.9，0.7Hz，1H)，3.53(t，J=8.8Hz，1H)，3.40(d，J=10.8Hz，1H)，3.27-3.13(m，4H)，3.03(s，3H)，1.99-1.96(m，2H)，1.63(d，J=1.4Hz，3H)，1.48-1.21(m，8H)，1.08-1.04(m，1H)，1.02(d，J=6.8Hz，3H)；次要旋转异构体(代表性信号)，5.89(dd，J=10.8，1.5Hz，1H)，5.25-5.20(m，1H)，4.91(dd，J=15.5，8.9Hz，1H)，3.44(t，J=8.7Hz，1H)，2.98(s，3H)，1.92(d，J=1.4，3H)，0.94(d，J=6.8Hz，3H)；¹³CNMR(C₆D₆，150MHz)δ170.7，135.0，132.8，131.3，129.1，87.8，85.0，73.7，70.3，69.8，55.8，33.6，30.2，27.0，26.8，25.3，23.4，23.1，13.5；ESI-MS的C₁₉H₃₃NO₄Na计算值362.2，实验值362.2。

化合物45.将化合物17(ME)(10.7mg，0.0399mmol)、EtNCO(9.5μL，0.120mmol)和Et₃N(16.8μL，0.120mmol)于无水PhMe(1.0mL)中的混合物在回流下加热24h，冷却到室温并在真空中去除挥发物。通过色谱在SiO₂(己烷：EtOAc，2：1)上纯化，获得呈浅黄色油状物的45(0.0071g，53％)：[α]_D ²⁴+34.1(c1，CHCl₃)；¹HNMR(C₆D₆，600MHz)δ主要旋转异构体：5.63(d，J=9.9Hz，1H)，5.50-5.45(m，1H)，5.31(dd，J=15.7，8.6Hz，1H)，4.24(s，1H)，4.11(app.t，J=5.5Hz，1H)，3.69-3.8(m，1H)，3.60-3.59(m，1H)，3.45-3.39(m，1H)，3.31-3.23(m，2H)，3.21(s，3H)，3.18(s，1H)，2.98(app.t，J=6.2Hz，2H)，2.03-1.92(m，3H)，1.67(d，J=1.3Hz，3H)，1.52-1.40(m，2H)，1.38-1.30(m，4H)，1.19(d，J=6.6.Hz，3H)，1.12-1.08(m，2H)；次要旋转异构体(代表性信号)6.17(dd，J=10.6，1.4Hz，1H)，5.05(dd，J=15.6，8.7Hz，1H)；¹³CNMR(C₆D₆，150MHz)δ主要旋转异构体：156.6，135.2(2)，131.9，130.9，84.0，77.9，71.0，69.7，56.1，53.3，34.6，32.7，30.1，26.9，26.6，23.5，23.1，14.6；次要旋转异构体(代表性信号)64.3，36.0，30.4，21.44；MS-ESI的C₁₉H₃₃NO₄Na(M+Na)计算值362.2，实验值362.3。

将TBS-酯22：NaH(32mg，0.8mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(3mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(2mL)中的(E)-庚-2，6-二烯-1-醇21(72mg，0.64mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(150mg，0.4mmol)于THF(3mL)中的溶液，随后添加TBAI(2mg)，且15min之后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚22(90mg，53％)。¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.80(m，1H)，5.67-5.58(m，3H)，5.37(d，J=9.5Hz，1H)，5.28(m，3H)，4.98(m，2H)，3.95(d，J=11.3Hz，1H)，3.83(m，2H)，3.40(m，2H)，3.19(s+m，4H)，2.58(m，1H)，2.13(复杂，4H)，1.72(s，3H)，0.90(s+d，12H)，0.05，(s，3H)，0.02(s，3)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ138.3，135.5，134.4，137.7，130.7，127.2，118.8，115.0，86.5，78.8，70.5，68.6，56.33，34.2，33.5，31.9，26.4，21.7，18.8，14.3，-3.6，-4.6；HRMS(ESI)的[C₂₄H₄₄O₃Si+Na]⁺计算值：431.2957，实验值：431.2957。

TBS-大环醚：向回流甲苯(450mL)中添加醚22(90mg，0.22mmol)于甲苯(10mL)中的溶液和于甲苯(10mL)中的格拉布-II催化剂(38mg，20mol％)。搅拌15min之后，添加DMSO(0.1ml)并将反应冷却到室温并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：20)纯化粗产物，获得呈无色油状物的大环醚(30mg，35％)。MS(ESI)的[C₂₂H₄₀O₃Si+Na]⁺计算值：403.26，实验值：403.2。

大环醚23于室温下向TBS-大环醚(44mg，0.16mmol)于THF(5mL)中的溶液添加HF·吡啶(1.5mL)。搅拌24h之后，将反应混合物小心地用饱和NaHCO₃(50mL)水溶液处理并用Et₂O稀释。分离有机层并用Et₂O(3×)萃取水层。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将所得残余物通过急骤色谱(己烷／EtOAc，10：1到4：1)纯化，以获得大环醚23(22mg，71％)。[α]²⁰D+346.31(c0.5，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.63(m，1H)，5.53)m，2H)，5.42(m，1H)，5.18(dd，J=8.5，15.6Hz，1H)，3.95(m，2H)，3.80(dd，J=6.7，14.3Hz，1H)，3.63(d，J=10.2Hz，1H)，3.41(t，J=9.1Hz，1H)，3.29(s+m，4H)，2.75(br，1H)，2.68(m，1H)，2.42-2.34(m，2H)，2.21-2.14(m，2H)，1.78(s，3H)，0.93(d，J=6.8Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ136.1，135.1，134.3，131.1，129.3，127.8，84.3，77.8，69.3，65.9，56.5，32.0，31.9，30.7，22.3，12.8；HRMS(ESI)的[C₁₆H₂₆O₃+Na]⁺计算值：289.1780，实验值：289.1769。

酸24(8mg，55％)，[α]²⁰D+108.79(c0.35，1：4MeOH／CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δHRMS(ESI)的[C₁₈H₂₈O₅+Na]⁺计算值：347.1834，实验值：347.1826。

E和Z3-(三氟甲基)庚-2，6-二烯-1-醇28是通过参考1和2合成。将TBS-醚29：NaH(47mg，1.2mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(3mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(2mL)中的醇28E(180mg，0.94mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(210mg，0.56mmol)于THF(3mL)中的溶液，随后添加TBAI(2mg)，且15min之后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚29(136mg，49％)。[α]²⁰D-4.19(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ6.26(t，J=5.8Hz，1H)，5.77(m，1H)，5.60(m，1H)，5.42(d，J=9.6Hz，1H)，5.27(m，2H)，5.02(m，1H)，4.01(m，2H)，3.99(d，J=11.3Hz，1H)，3.89(d，J=11.3Hz，1H)，3.40(m，2H)，3.2(s+m，4H)，2.58(m，1H)，2.29-2.19(m，4H)，1.73(s，3H)，0.90(s+d，12H)，0.06，0.02；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ137.1，135.5，135.1，132.1(q，³J_C-F=6.1Hz)，130.8(q，²J_C-F=28.6Hz)，129.9，125.3(q，¹J_C-F=273.5Hz)，118.8，115.9，86.3，78.8，69.5，65.3，56.3，34.3，33.0，26.2，，25.9，21.7，18.8，14.4，-3.59，-4.6；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-67.4。HRMS(ESI)的[C₂₅H₄₃F₃O₃Si+Na]⁺计算值：499.2831，实验值：499.2838。

TBS-大环醚30：向回流甲苯(570mL)中添加添醚29(136mg，0.28mmol)于甲苯(10mL)中的溶液和于甲苯(10mL)中的格拉布-II催化剂(50mg，20mol％)。搅拌15min之后，添加DMSO(0.1ml)并将反应冷却到室温并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：20)纯化粗产物，获得呈无色油状物的大环醚(46mg，36％)。[α]²⁰D-2.20(c0.9，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ6.31(bt，1H)，5.67(m，1H)，5.51-5.45(m，2H)，4.02(m，3H)，3.75(d，J=11.8Hz，1H)，3.50(m，2H)，3.26(s，3H)，2.52(m，1H)，2.38-2.32(m，4H)，1.71(s，3H)，0.09(s，9H)，0.88(d，J=6.9Hz，3H)，0.07(s，3H)，0.06(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ135.2，133.4(q，³J_C-F=5.9Hz)，131.0，130.5(q，²J_C-F=27.8Hz)，129.6，128.9，124.3(q，¹J_C-F=272.6Hz)，84.4，77.6，68.8，64.8，57.1，34.9，30.1，26.3，26.0，22.1，18.6，17.1，-3.79，-4.59；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-65.9；MS(ESI)的[C₂₃H₃₉F₃O₃Si+Na]⁺计算值：471.25，实验值：471.1。

大环醚31于室温下向TBS-大环醚(48mg，0.11mmo1)于THF(5mL)中的溶液中添加HF·吡啶(1.5mL)。搅拌24h之后，将反应混合物小心地用饱和NaHCO₃(50mL)水溶液处理并用Et₂O稀释。分离有机层并用Et₂O(3×)萃取水层。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将所得残余物通过急骤色谱(己烷／EtOAc，10：1到4：1)纯化，获得大环醚23(27mg，74％)。[α]²⁰D142.6(c1.1，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ6.31(btr，J=5.5Hz，1H)，5.74(m，1H)，5.61(d，J=9.4Hz，1H)，5.39(dd，J=6.9，15.7Hz，1H)，4.03-3.96(m，3H)，3.73(d，J=11.8Hz，1H)，3.39(m，2H)，3.26(s，3H)，2.87(br，1H)，2.53(m，1H)，2.41-2.30(m，4H)，1.74(s.3H)m0.93(d，J=6.9Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ134.7，134.2，133.2(q，3J_C-F=5.9Hz)，130.7(q，²J_C-F=30.1Hz)，130.2，130.1，125.2(q，¹J_C-F=270.1Hz)，82.9，76.4，69.2，65.1，56.5，33.1，29.5，26.4，22.5，15.6；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-65.78。HRMS(ESI)的[C₁₇H₂₅O₃F₃+Na]⁺计算值：357.1653，实验值：357.1650。

酸32(14mg，45％)，[α]²⁰D75.38(c0.6，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ11.98(br，OH)，¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δHRMS(ESI)的[C₁₉H₂₇O₅F₃+Na]⁺计算值：415.1708，实验值：415.1691。

TBS-醚33：将NaH(50mg，1.3mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(3mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(2mL)中的醇28Z(150mg，0.83mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(210mg，0.56mmol)于THF(3mL)中的溶液，随后添加TBAI(2mg)，且15min之后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚33(170mg，64％)。[α]²⁰D1.83(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.83-5.75(m，2H)，5.60(m，1H)，5.26(m，2H)，5.02(m，2H)，4.13(brs，2H)，3.96(d，J=11.0Hz，1H)，3.88(d，J=11.2Hz，1H)，3.43(m，1H)，3.38(m，1H)，3.20(s，3H)，2.59(m，1H)，2.25(m，4H)，1.73(s，3H)，0.89(s+d，12H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ137.0，135.5，135.4(q，³J_C-F=3.1Hz)，135.0，130.0，129.6(q，²J_C-F=26.3Hz)，129.9，124.3(q，¹J_C-F=272.5Hz)，118.8，115.9，86.3，78.7，68.8，65.8，56.7，34.4，31.1，28.7，26.4，22.6，18.7，15.4，-3.7，-4.7；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-61.2.；HRMS(ESI)的[C₂₅H₄₃F₃O₃Si+Na]⁺计算值：499.2831，实验值：499.2832。

TBS-大环醚34：向回流甲苯(700mL)中添加醚33(166mg，0.35mmol)于甲苯(10mL)中的的溶液和于甲苯(10mL)中的格拉布-II催化剂(60mg，20mol％)。搅拌15min之后，添加DMSO(0.1ml)并将反应冷却到室温并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：20)纯化粗产物，获得呈无色油状物的大环醚(67mg，48％)。[α]²⁰D122.52(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.73(m，1H)，5.58(m，1H)，5.45(d，J=9.2Hz，1H)，5.26(m，1H)，4.19(m，2H)，3.90(d，J=10.1Hz，1H)，3.65(d，J=10.1Hz，1H)，3.45(s，2H)，3.20(s，3H)，2.59(m，1H)，2.49-2.31(m，4H)，1.75(s，3H)，0.89(s+d，12H)，0.03(s，3H)，0.01(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ137.0，136.2(q，³J_C-F=3.0Hz)，132.2，130.8，130.4(q，²J_C-F=28.6Hz)，129.8，124.3(q，¹J_C-F=274.6Hz)，85.3，79.6，67.7，64.9，56.5，33.9，29.7，29.4，26.3，22.4，18.8，12.9，-3.7，-4.9；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-60.2；MS(ESI)的[C₂₃H₃₉F₃O₃5i+Na]⁺计算值：471.25，实验值：471.3。

大环醚35于室温下向TBS-大环醚(74mg，0.16mmol)于THF(5mL)中的溶液中添加HF·吡啶(2.5mL)。搅拌24h之后，将反应混合物小心地用饱和NaHCO₃(50mL)水溶液处理并用Et₂O稀释。分离有机层并用Et₂O(3×)萃取水层。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将所得残余物通过急骤色谱(己烷／EtOAc，10：1到4：1)纯化，获得大环醚35(27mg，74％)。[α]²⁰D254.34(c0.75，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.72(btr，J=5.7Hz，1H)，5.64-5.58(m，2H)，5.21(dd，J=8.1，15.5Hz，1H)，4.13(m，2H)，3.85(d，J=10.2Hz，1H)，3.74(d，J=10.1Hz，1H)，3.41(m，1H)，3.47(m，1H)，3.27(s，3H)，2.75(s，1H)，2.56(m，2H)，2.52-2.23(m，3H)，1.78(s，3H)，0.95(d，J=6.7Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ136.24(q，³J_C-F=3.0Hz)，135.50，134.42，130.43，130.42，130.3(q，²J_C-F=22.8Hz)，124.17(q，¹J_C-F=274.8Hz)，84.14，77.28，67.60，64.80，56.61，32.20，30.24，29.83，22.39，12.81；¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δ-59.9；HRMS(ESI)的[C₁₇H₂₅O₃F₃+Na]⁺计算值：357.1653，实验值：357.1658。

酸36(10mg，25％)，[α]²⁰D99.67(c0.4，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ¹⁹FNMR(CDCl₃，MHz)：δHRMS(ESI)的[C₁₉H₂₇O₅F₃+Na]⁺计算值：415.1708，实验值：415.1691。

实例10

TBS-醚37：将NaH(46mg，1.2mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(3mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(2mL)中的顺-2，3-二甲基-2，6-辛二烯-1-醇(154mg，0.73mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(170mg，0.45mmol)于THF(3mL)中的溶液，随后添加TBAI(2mg)，且15min之后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚37(150mg，74％)。[α]²⁰D-1.78(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.61(m，1H)，5.38-5.23(m，4H)，5.09(m，1H)，3.96(d，J=11.3Hz，1H)，3.87-3.81(m，3H)，3.44-3.35(m，2H)，3.20(s，3H)，2.61(m，1H)，2.06(m，4H)，1.74(s，3H)，1.73(s，3H)，1.68(s，3H)，1.60(s，3H)，0.90(s+d，12H)，0.05，0.02；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ140.4，135.6，134.3，132.1，130.9，124.1，123.3，118.7，86.4，78.8，68.8，66.2，56.3，34.2，32.5，26.9，26.4，25.9，23.7，21.7，18.8，17.9，14.3，-3.6，-4.6。

TBS-大环醚38：向回流甲苯(660mL)中添加醚37(150mg，0.32mmol)于甲苯(10mL)中的溶液和于甲苯(10mL)中的格拉布-II催化剂(70mg，20mol％)。搅拌15min之后，添加DMSO(0.1ml)并将反应冷却到室温并浓缩。通过快速色谱(EtOAc-己烷，1：20)纯化粗产物，获得呈无色油状物的大环醚(36mg，28％)。¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.70(m，1H)，5.69-5.52(m，2H)，5.37(d，J=9.2Hz，1H)，3.95-3.90(m，3H)，3.72(d，J=11.0Hz，1H)，3.44(m，1H)，3.38(t，J=6.7Hz，1H)，3.19(s，3H)，2.64(m，1H)，2.32-2.26(m，3H)，2.19(m，1H)，1.75(s，3H)，1.72(s，3H)，0.90(s，9H)，0.87(d，J=6.8Hz，3H)，0.05(s，3H)，0.02(s，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ139.7，134.7，132.6，130.4，129.1，123.6，84.4，78.6，68.8，65.8，56.7，34.4，31.1，28.7，26.3，22.6，22.5，18.7，15.4，-3.7，-4.7；MS(ESI)的[C₂₃H₄₂O₃Si+Na]⁺计算值：417.28，实验值：417.2。

大环醚39于室温下向TBS-大环醚(36mg，0.09mmol)于THF(5mL)中的溶液中添加HF·吡啶(1.5mL)。搅拌24h之后，将反应混合物小心地用饱和NaHCO₃(50mL)水溶液处理并用Et₂O稀释。分离有机层并用Et₂O(3×)萃取水层。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。将所得残余物通过急骤色谱(己烷／EtOAc，10：1到4：1)纯化，获得大环醚39(17mg，67％)。[α]²⁰D(c，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.73(m，1H)，5.76(d，J=9.3Hz，1H)，5.46(t，J=6.7Hz，1H)，5.38(dd，J=6.7，15.8Hz，1H)，3.99(d，J=11.1Hz，1H)，3.86(m，2H)，3.67(d，J=11.1Hz，1H)，3.40(m，2H)，3.29(s，3H)，2.80(br，1H)，2.66(m，1H)，2.31-2.19(m，4H)，1.76(s，3H)，1.75(s，3H)，0.91(d，J=13.6Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ139.3，135.0，134.2，130.9，129.1，123.7，83.1，76.7，69.1，66.0，56.4，32.6，31.7，28.6，22.8，22.6，14.0；HRMS(ESI)的[C₁₇H₂₈O₃+Na]⁺计算值：303.1936，实验值：303.1940。

化合物39a是根据实例9中制备化合物36的程序来制备。¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δHRMS(ESI)5.83(m，1H)，5.52-5.43(m，2H)，5.29(d，J=10.0Hz，1H)，4.37(d，J=17.3Hz，1H)，4.02(d，J=17.3Hz，1H)，3.95(d，J=11.0Hz，1H)，3.87(t，J=10.7Hz，1H)，3.79(dd，J＝7.4-，7.7Hz，1H)，3.64(m，2H)，3.37(s，3H)，3.28(d，J=9.2Hz，1H)，2.80(m，1H)，2.39-2.17(m，4H)，1.75(s，3H)，1.65(s，3H)，0.89(d，J=9.5Hz，3H)；[C₁₉H₃₀O₅+Na]⁺计算值：361.1991，实验值：361.2002。

TBS-醚40：将NaH(42mg，1.0mmol，于矿物油中的60％悬浮液)悬浮于无水THF(3mL)中，并将混合物冷却到0℃。添加于THF(2mL)中的香叶醇(131mg，0.85mmol)，并将溶液于0℃下搅拌10min。移除冰浴并在室温下持续搅拌1hr，然后冷却到0℃。逐滴添加烯丙基溴13(200mg，0.53mmol)于THF(3mL)中的溶液，随后添加TBAI(2mg)，且15min之后移除冰浴。于室温下持续搅拌过夜。将反应用饱和NH₄Cl水溶液骤冷。分离有机层且水层用Et₂O(3×)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。所得残余物通过快速色谱(CH₂Cl₂-己烷，3：1到1：1)纯化，获得呈无色油状物的醚40(138mg，58％)。[α]²⁰D3.54(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.61(m，1H)，5.39-5.23(m，4H)，5.09(m，1H)，3.97(d，J=11.3Hz，1H)，3.89-3.82(m，3H)，3.45-3.35(m，2H)，3.20(s，3H)，2.61(m，1H)，2.10(m，2H)，2.02(m，2H)，1.74(s，3H)，1.68(s，3H)，1.65(s，3H)，1.60(s，3H)，0.90(s+d，12H)，0.05，0.02；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ140.4，135.6，134.3，131.9，130.9，124.3，121.2，118.8，86.4，78.8，68.8，66.4，56.3，39.8，34.2，26.6，26.4，25.9，21.7，18.8，17.9，16.7，14.3，-3.6，-4.6。

化合物41是根据实例10中制备化合物39的程序来制备，其中闭环易位产物以类似于化合物38的方式进一步脱硅烷基化。[α]²⁰D161.9(c1.9，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.64(m，1H)，5.54(d，J=9.5Hz，1H)，5.26(t，J=6.8Hz，1H)，5.16(dd，J=8.2，8.3Hz，1H)，3.99(m，2H)，3.86(d，J=9.5Hz，1H)，3.62(d，J=9.5Hz，1H)，3.39(t，J=8.9Hz，1H)，3.29(s+m，4H)，2.74(s，1H)，2.63(m，1H)，2.34-2.28(m，3H)，2.15(m，1H)，1.76(s，3H)，1.66(s，3H)，0.92(d，J=6.8Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ139.3，135.9，134.9，131.2，128.8，122.6，84.3，77.4，66.3，65.2，56.5，37.8，31.9，29.4，22.6，16.5，12.8；HRMS(ESI)的[C₁₇H₂₈O₃+Na]⁺计算值：303.1936，实验值：303.1935。

化合物41a是根据实例9中制备化合物36的程序来制备。[α]²⁰D138.16(c0.8，CHCl₃)；¹HNMR(CDCl₃，500MHz)：δ5.75(m，1H)，5.32(d，J=9.6Hz，1H)，5.22(t，J=7.2Hz，1H)，5.18(dd，J=8.5，8.1Hz，1H)，4.38(d，J=17.3Hz，1H)，3.97(m，2H)，3.85(d，J=9.5Hz，1H)，3.64(t，J=8.9Hz，1H)，3.53(d，J=9.5Hz，1H)，3.37(s，3H)，3.13(d，J=9.5Hz，1H)，2.73(m，1H)，2.36-2.29(m，3H)，2.18(m，1H)，1.78(s，3H)，1.67(s，3H)，0.92(d，J=6.8Hz，3H)；¹³CNMR(CDCl₃，125MHz)：δ172.7，139.8，136.8，133.3，133.1，126.9，122.3，89.9，83.4，71.4，66.5，65.5，56.2，37.2，33.0，29.1，22.8，16.6，12.9；HRMS(ESI)的[C₁₉H₃₀O₅+Na]⁺计算值：361.1991，实验值：361.2000。

参考文献

1.奥伯特C.(Aubert，C.)；拜格J.P.(Begue，J.P.)；卡彭特-莫里兹M.(Charpentier-Morize，M.)；莱帕莉G.(Nee，G.)；郎格罗斯B.(Langlois，B.).制备三氟甲基酮的一般方法.第I部分：三氟乙酰基乙酸乙酯的直接烷基化(Generalmethodofpreparationoftrifluoromethylketones.PartI.Directalkylationofethyltrifluoroacetylacetate).氟化学杂志(JournalofFluorineChemistry)(1989)，44(3)，361-76。

2.奥伯特C.；拜格J.P.；卡彭特-莫里兹M.；莱帕莉G.；郎格罗斯B.制备三氟甲基酮的一般方法.第II部分：三氟乙酰基乙酸乙酯的间接烷基化(Generalmethodofpreparationoftrifluoromethylketones.PartII.Indirectalkylationofethyltrifluoroacetylacetate).氟化学杂志(1989)，44(3)，377-94。

实例12

MDA231BrM2a是转移到大脑的人类乳癌细胞系(博斯(Bos)等人2009)。这些细胞稳定表达三重融合蛋白(胸苷激酶-GFP-荧光素酶)，其允许通过生物发光和与抗-GFP抗体的免疫荧光来检测。将细胞(5×10⁵个细胞)通过心内注射接种到免疫缺陷小鼠的血流中。在注射后第0天、第3天和第5天投与羧甲基-米格拉醚(cME)(20mg／kg，经腹腔内)。接种后7天将小鼠杀死。将来自这些小鼠的大脑进行连续切片(80μm切片)。实施抗-GFP免疫荧光并定量每一大脑的GFP(+)细胞(事件)的数量(图1)。结果证明这些癌细胞穿过血脑屏障(BBB)的外渗发生在接种后前7天期间。因此，在图1的试验中，在外渗步骤期间cME靶向细胞。在cME治疗的动物中观察到每一大脑事件数量减少了1／2(图1)。结果指示cME的细胞靶标调介癌细胞迁移穿过BBB。

在穿过BBB外渗之后，癌细胞粘附并迁移到大脑毛细血管的表面。在本发明之前，还未知BBB对cME的渗透性。为研究癌细胞浸润大脑之后cME抑制癌细胞迁移穿过毛细血管的能力，使用离体大脑内迁移分析。将来自未经治疗小鼠的脑切片放置于器官培养中。将每一切片放置于在细胞培养基之上的惰性多孔膜上。将MDA231BrM2a细胞(3×10⁴个细胞)置于脑切片的顶部上(图2，顶部)。3天之后，癌细胞已浸润大脑组织块，迁移朝向毛细血管(图2中Col.IV)并在组织切片的毛细管网络上迁移(图2，底部)。添加1μM或10μMcME强烈抑制这些迁移过程。在cME的存在下，癌细胞保持在脑切片的表面周围和其上，而为迁移朝向并穿过血管网络(图2，右下方)。

此惊人的发现表明，cME是迁移过程的强效抑制剂，所述迁移过程使人类转移性乳癌细胞穿过BBB从循环中移出且随后在大脑中朝向且沿着毛细血管的近腔表面迁移。

实例13

此实例通过在伤口愈合分析中评价其抑制活体外癌细胞迁移的能力和在转移孔移行分析中评价其化学趋向性来评估新的米格拉他汀类似物的抗转移性质。如图3中所示，米格拉他汀醚(ME)和羧甲基米格拉他汀醚(CME)在100μM下响应刮伤几乎完全阻断人类非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞的迁移。在亚微摩尔浓度下，CME化合物仍相当有效(32％迁移抑制)。利用一组人类肺癌细胞系(H1975、H647、H522、H1703，数据未展示)获得类似结果。

迁移分析：在改进的博伊登小室(Boydenchamber)中针对血清梯度实施癌细胞化学趋向性，所述博伊登小室由位于24-孔伴侣盘(碧迪公司(BectonDickinson))的每一孔中的细胞培养池(cellcultureinsert)(6.4mm直径，8-μm孔隙聚对苯二甲酸乙二酯膜，[碧迪公司])组成。简单地说，使癌细胞生长为亚融合单层培养物，然后在无血清M5培养基中饥饿36小时。在用5mMEDTA分离并解离之后，通过过滤穿过35μm网状细胞过滤网(碧迪公司)制备单细胞悬浮液。对细胞进行计数并将总共10⁵个悬浮于无血清培养基中的细胞接种到池的上部小室，然后定位于含有具有或没有10％血清的培养基的24-孔板中。当使用时，将药物或DMSO(媒剂)以0.2％添加到在两个小室中的培养基中。迁移分析在37℃下具有5％CO₂的保湿培养器中实施12小时。然后，将细胞用3.7％甲醛固定，用冰冷的甲醇进行可渗透化并0.2％结晶紫溶液染色。利用棉签移除池的上侧的未迁移细胞。为进行量化，将池的下侧上的三个随机选择区域以4X和20X放大倍率使用计算机辅助的显微镜进行拍照，并利用CellProfiler2.0细胞图像分析软件进行分析。相对于DMSO媒剂对照计算响应测试条件的迁移。

对于图3中所描绘的结果，使A549癌细胞生长为近融合单层培养物且然后在含有0.5％FCS的培养基中饥饿过夜。然后使用移液管尖端将细胞单层进行划痕，拍照，并与有或没有2％FCS的从10^-3M到10^-8M的6对数缩放范围的ME和CME一起培育。12H之后，将区域固定，染色并使用计算机辅助的显微镜拍照。呈现显微图(4X放大倍率)，其显示A549癌细胞在缺乏血清的情况下(无迁移)、存在血清的情况下(迁移)和在存在血清加100μM或100nM的CME或ME的情况下是否迁移跨越划痕。

伤口愈合分析：癌细胞迁移是使用在12-孔板(碧迪公司)中实施的“活体外伤口愈合分析”(或划痕分析)来测量。简单地说，将癌细胞以5-10×10⁴个细胞／孔的密度接种，在10％血清补充的M5培养基中生长到近融合单层且然后在低血清培养基(0.5％FCS)中饥饿过夜。使用无菌200μL移液管尖端透过细胞单层划出垂直伤口。然后使用PBS极轻柔地将细胞洗涤两次并以4X和20X放大倍率使用计算机辅助的显微镜对划痕区域进行拍照。移除PBS并用2mL有或没有2％FCS且含有0.2％(v／v)的药物或DMSO(媒剂对照)的培养基代替。在37℃具有5％CO₂的保湿培养器中12-24小时之后，将细胞用3.7％甲醛固定，用冰冷的甲醇进行可渗透化并0.2％结晶紫溶液染色。以4X和20X放大倍率对每一孔进行拍照并如先前所述使用CellProfiler2.0细胞图像分析软件分析图片(卡彭特AE(CarpenterAE)、琼斯TR(JonesTR)、兰普雷希特MR(LamprechtMR)、克拉克C(ClarkeC)、康IH(KangIH)等人(2006)，基因生物学(GenomeBiology)7(10)：R100)。将响应测试条件的迁移计算为原始无细胞区的细胞覆盖率并与DMSO媒剂对照相关联。

实例14

此实例显示在经改进的博伊登小室系统中响应血清梯度的化学趋向性以评估一组NSCLC细胞系。此分析提供可重现的充足数据，此允许实施剂量响应研究以测定半最大抑制浓度(IC₅₀)。如图4和表1中所示，米格拉他汀核心醚类似物有效阻断人类肺癌细胞响应血清梯度迁移穿过8μm孔池。与此相比，CME化合物分别对A549、H1975和H299癌细胞展示比ME化合物(1.5μM到8.2μM)低的IC₅₀值(0.5μM到5μM)。由于我们注意到在毫摩尔浓度范围内的温和毒性和对细胞增殖的影响，因此利用1mM或更高的CME和ME进行的试验并未包括IC₅₀计算。共同地，这些结果证明在活体外迁移抑制方面极为敏感的响应，其比产生细胞毒性的浓度小2个数量级以上。

对于图4中所描绘的结果，在经改进的博伊登小室中利用10⁵个H1975细胞针对血清梯度或在缺少血清梯的情况下实施癌细胞化学趋向性。在10对数缩放的浓度范围内添加ME、CME或DMSO(媒剂)。实施迁移分析达12小时且然后将细胞固定并用结晶紫染色。利用棉签移除池的上侧的未迁移细胞。为进行量化，将池的下侧上的三个随机选择区域以4X和20X放大倍率使用计算机辅助的显微镜进行拍照。图4显示100uM和100nM的ME或CME的结果。

表1：通过米格拉他汀醚(ME)和羧甲基-米格拉他汀醚(CME)抑制转移孔肺癌细胞 系迁移

在血清饥饿并与增量对数比例的药物浓度(ME和CME从10^-3到10^-10M)一起过夜预培育之后在细胞培养池中实施肺癌细胞系化学趋向性。培育在存在不同浓度的ME或CME的情况下在上部和下部小室中(每一剂量三个孔)经12小时长时间培育之后测量响应血清梯度的癌细胞迁移。然后将细胞固定并用结晶紫染色，并进行拍照。数据展示ME和CME对于A549、H1975和H299肺癌细胞的半最大抑制浓度(IC50，以μM表示)。数据表示为三个独立试验的平均值+／-SEM。每一试验均一式三份实施。

细胞和原发性肿瘤：人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系是从美国典型培养物保藏中心(theAmericanTypeCultureCollection)(弗吉尼亚州马纳萨斯(Manassas，VA))或国家癌症研究所(theNationalCancerInstitute)：NCI-A549、NCI-H1975、NCI-H299、NCI-H1993和NCI-H1373(腺癌)、NCI-H647和NCI-H1703(肺鳞状细胞癌[SCC])获得。经胸苷激酶／绿色荧光蛋白／荧光素酶三重融合基因转导且称为AC3-TGL的人类原发性小细胞肺癌(SCLC)细胞如先前所阐述(罗迪纳A(RodinaA)、维连奇克M(VilenchikM)、穆利克K(MoulickK)、阿吉雷J(AguirreJ)、吉姆J(KimJ)等人，(2007)，自然：化学生物学(NatChemBiol)8月；3(8)：498-507)。所有肺癌细胞系均在由补充有6g／LHepes、2.2g／L碳酸氢钠的DME：F12组成的M5-培养基中生长。原发性SCLC细胞在补充有25mMHepes、1.5g／L碳酸氢钠和4.5g／L葡萄糖的RPMI(培养基制备核心设备(MediaPreparationCoreFacility)，MSKCC)中生长。两种培养基均补充有10％(v／v)胎牛血清、2mML-谷氨酰胺和500U／mL青霉素和链霉素。

增殖分析：将细胞以5×10³个细胞／孔的密度在150μL完全培养基中平铺于扁平底部96-孔板中。当使用时，药物或DMSO(媒剂)以0.2％添加到媒剂中。处理3天和6天之后，根据制造商说明书通过将CellTiter96Aqueous分析试剂(普洛麦格(Promega))添加到每一孔中分析细胞增殖。在37℃下培育2小时后，通过使用96-孔板读数器测量在490nm下的吸光度来测定细胞增殖。

实例15

此实例研究在人类小细胞肺癌(SCLC)原发性异种移植物模型中ME类似物是否影响肿瘤转移。初代和随后在NOD-SCID小鼠中活体内传代的这些细胞形成肝转移。肿瘤细胞经三重融合蛋白报道基因构建体(AC3-TGL)稳定转导，且通过与基质胶一起皮下注射移植到NOD／SCIDIL2Rγ敲除(NSG)小鼠中进行移植。在开始接种肿瘤细胞的前1天，通过以40mg／kg(ME40)或200mg／kg(ME200)一周三次腹膜腔内注射开始ME治疗，一个群组5只小鼠。对照小鼠用DMSO媒剂治疗。通过连续非侵入性生物发光成像每5天监测肿瘤负荷和转移扩散。如图5a中所示，药物治疗并未明显干扰初始注射点处的肿瘤生长动力学。与对照和ME40治疗的群组相比，利用最高剂量(ME200群组)观察到毒性且3只小鼠在终点之前死亡。然而，在ME治疗45天后，未注意到2只存活小鼠存在体重损失、昏睡或其它明显副作用。在终点处，手术切除可能的转移位点(肝、肺、脾脏、心脏和肾、胃肠道)并通过离体生物发光成像(图5b)量化荧光素酶活性。与对照相比，利用低剂量ME(40mg／kg)的治疗群组在总体转移方面展现显著降低(93％，p值=0.008)(图5c)。在利用高剂量ME(200mg／kg)的2只存活小鼠中看到甚至更高转移抑制程度(99％)。小鼠移除各器官之后的生物成像显示无其它转移位点。这些结果表明，ME是小细胞肺癌的强效活体内转移抑制剂，且预计相似类似物(例如，式I的化合物)将具有相似的活性。

对于图5a-c中所描绘的结果，AC3-TGL细胞是通过皮下腹侧注射到NSG小鼠来移植。异种移植小鼠从肿瘤接种后第-1天开始每3天用指示剂量的ME：40mg／kg(ME40，n=5)、200mg／kg(ME200，n=5)和DMSO媒剂(对照，n=5)进行治疗。在第45天，将小鼠杀死。ME200群组中的三只小鼠在治疗结束之前的第23天、第30天和第34天死亡。(A)治疗生长.每5天，通过活体内生物发光成像(BI)监测肿瘤负荷且数据表示为光子通量(以光子／sec表示的通量)+／-SEM，以对数尺度表示。(B，C)终点时的肿瘤转移.在第45天，通过离体BI量化切除的肺(Lu)、肝(Li)、心脏(H)、肾(K)和脾脏(S)中的荧光素酶活性来分析小鼠中的转移。每一小鼠的测量值呈现于面板B(圆点)上，其中具有每一群组的平均值(短线)和以对数尺度表示的光子通量(以光子／sec表示的通量)。P值是使用双尾曼-惠特尼U检验(two-tailedMann-WhitneyU-test)获得。对来自每一群组的1只小鼠的器官测量的生物发光信号的图片呈现于面板C上。每一图片以相同设置呈现(4min曝光；光子信号；色度从5.E6(min)到1.E8(max))。

实例15的异种移植模型：人类原发性SCLC异种移植物模型是在10-14周龄雄性非肥胖糖尿病严重联合免疫缺陷(NOD／SCID)白介素-2γ链受体敲除小鼠(NSG)中形成。原发性肿瘤试样是在患者知情同意之后获得。将生长为团簇的AC3-TGL初代细胞通过胰蛋白酶／胶原酶IV(英杰公司(Invitrogen))相继处理加工成单一细胞悬浮液并如上所述过滤。异种移植是通过皮下腹侧注射于混有基质胶的无血清培养基(碧迪公司)中的10³个AC3-TGL细胞来实施。在肿瘤细胞注射的前1天，将小鼠用米格拉他汀醚(ME)化合物以每一小鼠40mg／kg或200mg／kg的剂量或利用DMSO媒剂对照预处理(n≥5只小鼠／群组)。从细胞注射之后的第-1天开始到第45天每3天通过腹膜腔内注射递送药物治疗。在此期间，通过生物发光成像(BLI)每5天监测肿瘤负荷和转移扩散。在第45天(终点)，将小鼠杀死并通过对移除器官的离体BLI评价肿瘤细胞到肺、肝、心脏、肾、脾脏和GI道的转移扩散。

实例16

转移孔细胞迁移分析

将MDA231-LM2肺转移性乳癌细胞以指示浓度的ME或羧甲基-ME预处理24小时。预处理之后，使用具有3μm孔径过滤器的博伊登小室测定迁移。使细胞迁移穿过小室达5小时(在存在ME或羧甲基-ME的情况下)。分析穿过多孔膜的细胞并在荧光显微镜下进行划痕。CM-ME在抑制乳癌细胞的限制性迁移方面比ME强约20倍。结果表示为每一视野的移行细胞个数。数据为一式三份的平均值±S.D。(参见图6)

实例17

在人类SCLC异种移植物模型中评估ME(19)和CME(25)的抗转移活性。初代和随后在NOD／SCID小鼠中活体内传代的这些细胞倾向于形成肝转移。肿瘤细胞经三重融合蛋白报道基因构建体(AC3-TGL)稳定转导，且然后通过与基质胶一起皮下注射移植到NOD／SCIDIL2Rγ敲除(NSG)小鼠中进行移植。

在开始接种肿瘤细胞的前1天，各群组的小鼠用ME以10mg／kg、40mg／kg或200mg／kg的剂量或利用CME以12mg／kg或49mg／kg的剂量进行治疗(注意：剂量水平经调整以考虑到分子量的差异：1mgME=1.2mgCME)。对照小鼠用DMSO媒剂治疗。化合物是在细胞注射之后从第-1天到第55天每三天通过i.p.注射来投与(n≥5只小鼠／群组)。在此期间，在第14天、第23天、第30天、第40天和第50天通过连续非侵入性生物发光成像(BLI)监测肿瘤负荷和转移扩散。在第55天，将小鼠杀死并通过对移除器官的离体BLI评价肿瘤细胞到肺、肝、心脏、肾和脾脏的转移扩散。

利用ME和CME治疗并未显著影响初始注射点处的肿瘤生长动力学。在ME治疗的组群中，观察到一些毒性，此使得在研究终点之前200mg／kg群组中有3只小鼠死亡且在10mg／kg和40mg／kg群组中的每一者中有2只小鼠死亡。与此相比，在CME治疗小鼠的任一组群中均未观察到毒性。

表2：通过ME／CME治疗的总体转移的抑制因子

^a抑制因子(IF)代表终点时总体转移的降低的百分数，其是在通过离体生物发光成像量化切除器官(肝、肺、脾脏、心脏和肾)中的荧光素酶活性之后计算并相对于对照报告。

在研究终点，将可能的转移位点(肝、肺、脾脏、心脏和肾)手术切除并通过离体BLI量化荧光素酶活性。与对照群组相比，用10mg／kg或40mg／kgME治疗的小鼠展现显著降低水平的总体转移，其中经计算抑制因子分别为96.2％(p值=0.0095)和99.1％(p值=0.0043)(图7a和表2)。在利用高剂量ME(200mg／kg)治疗的2只存活小鼠中看到甚至更高程度的转移抑制(99.8％)。小鼠移除各器官之后的生物成像显示无其它转移位点。

已发现CME类似物显著在抑制活体内肿瘤转移方面比母体化合物ME更有效。因此，如图7a中所示，利用低剂量CME(12mg／kg)进行治疗使得转移抑制达99.3％，此致使CME比最低剂量水平的ME强约4倍。而且，在49mg／kg下，肿瘤转移受到99.8％抑制。与活体外结果一致的这些发现支持申请者的假设：羧甲基官能团在ME骨架上的附加提供增强的迁移抑制活性。所述活性是可用于治疗肿瘤转移的化学治疗剂的特性。

申请者已将本文化合物识别为转移抑制剂。尽管不希望受限于任何特定理论，但目前数据表明化合物似乎并未攻击原发性肿瘤，但可容易地想象出阻断转移的试剂的相当大的临床益处。抗转移剂的申请可特别地有助于原发性肿瘤经由外科手术切除、化学疗法或放射之后。

对于图7a-b中所描绘的结果：AC3-TGL细胞是通过皮下腹侧注射到NSG小鼠中来移植。异种移植小鼠从接种肿瘤细胞前1天开始每3天用指示剂量的CME或ME：ME10mg／kg(ME10，n=5)、40mg／kg(ME40，n=5)、200mg／kg(ME200，n=5)、CME12mg／kg(CME12，n=5)、49mg／kg(CME49，n=5)和DMSO媒剂(对照，n=6)进行治疗。在第55天，将小鼠杀死。ME200群组中的三只小鼠在治疗结束之前死亡。终点时的肿瘤转移：在第55天，通过离体BLI量化切离的肺(Lu)、肝(Li)、心脏(H)、肾(K)和脾脏(S)中的荧光素酶活性分析小鼠中的转移。每一小鼠的测量值呈现于图7a中(圆点)，其中具有每一群组的平均值(短线)和以对数尺度表示的光子通量(以光子／sec表示的通量)。P值是使用双尾曼-惠特尼U检验获得。对来自每一群组的1只小鼠的器官测量的生物发光信号的图片呈现于图7b中。每一图片以相同设置呈现(4min曝光，光子信号，色度从3.10⁴(min)到5.10⁶(max))。

实例17的异种移植模型：人类原发性SCLC异种移植物模型是在10-14周龄雄性NSG小鼠中形成。原发性肿瘤试样是根据MSKCCIRB批准的方案在患者知情同意之后获得。将生长为团簇的AC3-TGL肿瘤细胞通过胰蛋白酶／胶原酶IV(英杰公司)相继处理离解成单一细胞悬浮液。异种移植是通过皮下腹侧注射于混有基质胶的无血清培养基(碧迪公司)中的500个AC3-TGL细胞来实施。

在肿瘤细胞注射的前1天，将小鼠用以下任一者进行预处理：(1)米格拉他汀醚(ME)，以每一小鼠10mg／kg、40mg／kg或200mg／kg的剂量；(2)羧甲基-ME(CME)，以12mg／kg或49mg／kg的剂量；或(3)DMSO媒剂对照(n≥5只小鼠／群组)。从细胞注射之后的第-1天开始到第55天每3天通过腹膜腔内注射递送药物治疗。在此期间，在第14天、第23天、第30天、第40天和第50天通过生物发光成像(BLI)监测肿瘤负荷和转移扩散。在第55天(终点)，将小鼠杀死并通过对手术切除器官的离体BLI评价肿瘤细胞到肺、肝、心脏、肾和脾脏的转移扩散。

实例18

迁移分析.

在改进的博伊登小室中针对SDF-1α实施多发性骨髓瘤细胞化学趋向性，所述博伊登小室由位于96-孔板(HTS转移孔-96系统，康宁(Corning))的每一孔中的细胞培养池(4.26mm直径，8-μm孔聚酯膜)组成。简单地说，使多发性骨髓瘤细胞生长为亚融合培养物，然后在无血清IMDM培养基中饥饿24小时。通过机械分离制备单细胞悬浮液，然后对细胞进行计数并将总共5.10⁴个悬浮于无血清IMDM培养基中的细胞接种到上部小室，然后定位于含有具有或没有SDF-1α(以200ng／mL)的培养基的96-孔板中。为评价米格拉他汀类似物的迁移抑制，将24小时饥饿的MM细胞用药物(5μM和250μM)或DMSO(媒剂)预处理8小时，且然后接种于池中。将米格拉他汀类似物或DMSO(媒剂)以0.5％添加到在两个小室中的培养基中。迁移分析是在37℃下具有5％CO₂的保湿培养器中实施6小时。在分析终点时，将池移除并对每一孔中的迁移细胞进行计数。相对于DMSO媒剂对照计算响应测试条件的迁移。

表3和图8-10显示式I的某些化合物对所选细胞系的迁移的影响。除非另有说明，否则所用方案对应于以上段落中的方案。

表3.化合物42-45在两个浓度下对H929和CAG多发性骨髓瘤细胞的迁移的影响。使用8mm孔径利用SDF-1化学引诱剂(200ng／mL)和50000个细胞／孔实施分析转移孔。细胞的饥饿时间：24h，预处理时间：8h，和移行时间6h。值报告为相对于DMSO对照的迁移％。

图8是表3的图示。

实例19

化合物42-45对多发性骨髓瘤和肺癌细胞系的毒性的测定.

化合物42-45的毒性和其IC₅₀是针对多发性骨髓瘤(RPMI8226、MM1S、MM1R、ARP-GL、CAG-GL、OPM2-GL、SKO-007-GL、U266-GL)和肺癌(H299-GL、H522-GL、H647-GL、A549-GL、A549-GL、HI993、H1075-GL、HI373、H17030)来源的一系列人类肿瘤细胞系进行测试。将肿瘤细胞通过胰蛋白酶／胶原酶IV处理离解成单一细胞悬浮液，并将于50μl的含有10％FCS的RPMI培养基中的500个细胞／孔等分到384微孔板的每一孔中。将化合物42-45溶解于DMSO中并于RPMI培养基加10％FCS中连续稀释并添加(1mM到1nM)到含有肿瘤细胞的复孔。使用没有化合物的DMSO稀释液作为对照。在18小时或2天之后，对培养物施加6μl的()(英杰有限公司，纽约格兰德岛(GrandIsland，NY))的脉冲并培养过夜。基于检测代谢活性提供细胞生长指示剂。分析系统纳入氧化-还原指示剂，其响应使细胞生长的生长培养基的化学还原发荧光且变色。使用SynergyH1微孔读数器(伯腾公司(BiotekInc)，佛蒙特州威努斯基(Winooski，VT))和针对IC₅₀测定所建立剂量反应曲线测量荧光强度。数据展示于表4中且证明表明化合物42-45具有最小地毒性且仅在极高浓度下具有毒性(IC₅₀300-795μM)。

表4.18h和48h的化合物42-45暴露之后所测量的多发性骨髓瘤(RPMI8226、MM1S、ARP-GL、CAG-GL、OPM2-GL、SKO-007-GL、U266-GL、MM1R细胞的平均值)和肺癌(H299-GL、H522-GL、H647-GL、A549-GL、H1993、H1075-GL、H1373-GLH1703细胞的平均值)估计致死剂量(LD50)(以μM表示)。

实例20

药代动力学研究

使用混合性别的小鼠(B6D2F1)群组。药代动力学(PK)是针对通常在0hr、快速静脉注射或腹膜腔内注射CME之后0.17hr、0.5hr、0.75hr、1hr、2hr、4hr、8hr、16hr和24hr获得的肝素化小鼠血浆试样来实施。使用HPLC-MS／MS方法分析试样。为测定CME的水平，首先利用试样预处理从血浆中分离出药物。使用乙腈移除试样中的蛋白质。然后使用等梯度HPLC-MS／MS方法来将药物与任何潜在干扰分离。通过MS检测利用多重反应监测(MRM)模式测量化合物水平。PK数据是使用分析的WinNonlin程序(版本5.3，Pharsight)房室模型进行分析。

图11显示具有2％的1，2-二肉豆蔻酰基-rac-甘油-3-十二甘醇(GDM-12)于盐水中的CME调配物的小鼠PK曲线。短划线为(A：ip)且实线为(B：iv)。药物是经静脉内或经腹腔内投与且剂量强度为20mg／kg。

上文已经描述本发明的某些非限制性实施例。因此，应了解，本文阐述的本发明的实施例仅说明本发明的原理的应用。本文对说明性实施例的细节的提及并不打算限制权利要求书的范围，权利要求书自身的叙述视为本发明必不可少的那些特征。

Claims (26)

1.一种式I化合物，

或其医药上可接受的盐；其中：

i.R¹是氢且是单键；或

ii.R¹是任选经一个或多个卤素取代的C_1-3脂肪族基且是(Z)-双键；且

R²为C_1-3脂肪族基；

R³和R⁵各自独立地为C_1-3脂肪族基；且

R⁴为-T-Y；

-T-是C_1-3二价饱和或不饱和、直链或具支链烃链；且

-Y为-CO₂R或-C(O)N(R)₂；其中各R独立地为-H或C_1-20脂肪族基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中是(Z)-双键，R¹为经一个或多个卤素取代的C_1-3脂肪族基或R⁴为-T-Y，其中-T-为CH₂且-Y为-CO₂R或-C(O)N(R)₂。

3.根据权利要求2所述的化合物，其中是(Z)-双键，R¹为-CF₃或R⁴为-T-Y，其中-T-为CH₂且-Y为-CO₂H。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式II：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是氢。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式III：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是经一个或多个卤素取代的C_1-3脂肪族基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式IV：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是C_1-3脂肪族基。

7.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式II-a：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是氢。

8.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式III-a：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是经一个或多个卤素取代的C_1-3脂肪族基。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有式IV-a：

或其医药上可接受的盐，其中R¹是C_1-3脂肪族基。

10.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为氢，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基，且为单键。

11.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为经一个或多个卤素取代的C_1-3脂肪族基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或C_1-3脂肪族基，且为(Z)-双键。

12.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂组成的群组，其中R为氢或甲基，R⁵为甲基，且为单键。

13.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂R，其中R为甲基，R⁵为甲基，且为单键。

14.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为氢，R²为甲基，R³为甲基，R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-C(O)NHR，其中R为甲基，R⁵为甲基，且为单键。

15.根据权利要求1所述的化合物，其中为(Z)-双键，R¹为-CF₃，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

16.根据权利要求1所述的化合物，其中为单键，R¹为氢，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

17.根据权利要求1所述的化合物，其中为(Z)-双键，R¹为甲基，R²、R³和R⁵为甲基，且R⁴为-T-Y，其中-T-为-CH₂-且Y为-CO₂H。

18.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：

19.一种化合物，其选自：

或其医药上可接受的盐。

20.一种式I化合物：

或其医药上可接受的盐；其中：

R¹是氢；

R²为C_1-3脂肪族基；

R³为C_1-3脂肪族基；

R⁴为-T-Y，其中-T-为共价键且Y选自由-CO₂R和-C(O)N(R)₂所组成的群组，其中各R为-H或C_1-20脂肪族基；

R⁵为C_1-3脂肪族基；且

是单键。

21.一种医药组合物，其包含根据权利要求1到9或19到20中任一权利要求所述的化合物和医药上可接受的载剂。

22.一种治疗有效量的根据权利要求1到9或19到20中任一权利要求所述的化合物或其医药组合物的用途，其用于制造用于治疗乳癌、肺癌或多发性骨髓瘤的医药。

23.一种治疗有效量的根据权利要求1到9或19到20中任一权利要求所述的化合物或其医药组合物的用途，其用于制造用于抑制或降低乳癌、肺癌或多发性骨髓瘤的转移扩散的医药。

24.根据权利要求22所述的用途，其中所述治疗有效量包含有效抑制或降低乳癌、肺癌或多发性骨髓瘤的转移扩散的量。

25.根据权利要求23或24所述的用途，其中所述癌症是乳癌或肺癌。

26.根据权利要求23或24所述的用途，其中所述癌症是多发性骨髓瘤。