CN108752519B - 一种提取高纯度白藜芦醇的方法 - Google Patents
一种提取高纯度白藜芦醇的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108752519B CN108752519B CN201810456862.3A CN201810456862A CN108752519B CN 108752519 B CN108752519 B CN 108752519B CN 201810456862 A CN201810456862 A CN 201810456862A CN 108752519 B CN108752519 B CN 108752519B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- resveratrol
- hydrophilic
- mmol
- reaction
- adsorption material
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/10—Esters
- C08F220/20—Esters of polyhydric alcohols or phenols, e.g. 2-hydroxyethyl (meth)acrylate or glycerol mono-(meth)acrylate
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
- B01J20/261—Synthetic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon to carbon unsaturated bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
- C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C37/685—Processes comprising at least two steps in series
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
- C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C37/70—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C37/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
- C07C37/68—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C37/70—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
- C07C37/82—Purification; separation; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment by solid-liquid treatment; by chemisorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2201/00—Foams characterised by the foaming process
- C08J2201/04—Foams characterised by the foaming process characterised by the elimination of a liquid or solid component, e.g. precipitation, leaching out, evaporation
- C08J2201/05—Elimination by evaporation or heat degradation of a liquid phase
- C08J2201/0502—Elimination by evaporation or heat degradation of a liquid phase the liquid phase being organic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2333/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers
- C08J2333/04—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters
- C08J2333/14—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters of esters containing halogen, nitrogen, sulfur, or oxygen atoms in addition to the carboxy oxygen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种提取高纯度白藜芦醇的方法,包括步骤:1)将含有白藜芦醇的原料与特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料混合均匀,填入吸附柱;2)用去离子水对所述吸附柱进行洗涤,弃洗涤液;3)用含1~10%有机酸的乙腈溶液对所述吸附柱进行洗脱,收集洗脱液;或者,进一步地还包括如下步骤:4)将所得洗脱液浓缩,再复溶成过饱和溶液,加入白藜芦醇纯品作为晶种,静置结晶,该方法简单且得到的白藜芦醇的纯度高,最高的纯度为98.38%。
Description
技术领域
本发明涉及食品深加工技术领域,具体地说,涉及一种提取高纯度白藜芦醇的方法。
背景技术
由于白藜芦醇在植物中的含量很低,从植物中提取和用生物合成的方法获得白藜芦醇成本过高,工艺复杂;而利用化学方法合成白藜芦醇已成为其开发的主要手段。但化学合成法普遍存在路线复杂、安全风险大;产率不高;副产物复杂、纯度不高;化学品残留、食用风险等诸多缺点。此外,由于反式白藜芦醇不稳定,在光照自然环境下会转换为顺式白藜芦醇,活性大大降低,采用化学合成的方法很难获得单一结构的高纯度反式白藜芦醇。
发明内容
基于此,有必要针对白藜芦醇的提取工艺复杂且纯度不高的技术问题,提供一种提取高纯度白藜芦醇的方法。
一种特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料,是由惰性致孔剂、替代模板分子和功能单体的反应生成物,与亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和CuBr2在交联剂和引发剂存在条件下反应得到的聚合物。
优选地,所述惰性致孔剂选自乙腈、甲苯、氯仿和甲醇中的一种或多种;和/或,
所述替代模板分子选自4’-氯代白藜芦醇或偶氮-白藜芦醇;和/或,
所述功能单体选自甲基丙烯酸、丙烯酸、亚甲基丁二酸、对乙烯基苯甲酸、甲基丙烯酰胺和N-异丙基丙烯酰胺中的一种或多种;和/或,
所述交联剂选自三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N,N-亚甲基双丙烯酰胺、二乙烯基苯和乙二醇二甲基丙烯酸酯中的一种或多种;和/或,
所述引发剂选自偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、异丙苯过氧化氢和叔丁基过氧化氢中的一种或多种。
优选地,所述引发剂的用量为所述功能单体的用量的1.0~10.0%。
本发明还提出一种上述特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料的制备方法,包括:
将惰性致孔剂、替代模板分子和功能单体进行反应;
将反应生成物与亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和CuBr2在交联剂和引发剂存在条件下反应得到的聚合物。
优选地,所述4’-氯代白藜芦醇或偶氮-白藜芦醇和功能单体的摩尔比为1∶4。
进一步地,包括以下步骤:
T1、于250~500mL惰性致孔剂中加入20~50mmol的4’-氯代白藜芦醇或偶氮-白藜芦醇和80~200mmol的功能单体搅拌反应,其中,搅拌反应的时间优选为10~30分钟。
T2、加入80~200mmol的亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、4~10mmol的N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和4~10mmol的CuBr2,再加入400~1000mmol的交联剂及4~10mmol的引发剂于0~4℃下通氮气反应,密封,进行水浴反应得到聚合物沉淀。其中,通氮气的时间优选为10~50分钟。
T3、将所述聚合物沉淀粉碎,研磨过筛,用含酸的醇溶剂去除模板分子得到所述亲水性吸附材料。
此外,本发明还包括上述亲水性吸附材料或上述所述方法制备的亲水性吸附材料在提取白藜芦醇中的应用。
进一步地,利用上述特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料或上述方法制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料提取高纯度白藜芦醇的方法,包括以下步骤:
1)将含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料混合均匀,填入吸附柱;
2)用去离子水对所述吸附柱进行洗涤,弃洗涤液;
3)用含1~10%有机酸的乙腈溶液对所述吸附柱进行洗脱,收集洗脱液;
或者,进一步地,还包括如下步骤:
4)将所得洗脱液浓缩,再复溶成过饱和溶液,加入白藜芦醇纯品作为晶种,静置结晶。
优选地,在步骤1)中将混合均匀后的含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料进行研磨或者搅拌或者超声提取或者微波萃取处理。更优选地,所述研磨的时间为5~20min;所述搅拌的时间为20~100min;所述超声提取的时间为5~40min;所述微波萃取的时间为5~100min。经过简单的研磨、搅拌、超声提取或者微波萃取处理之后白藜芦醇分子将更充分的进入到亲水性吸附材料的空穴。
优选地,在步骤1)中向混合均匀后的所述含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料中加入浓度为50~100mg/L的抗坏血酸溶液。所述抗坏血酸溶液的用量优选为5~20mL。
进一步地,所述含有白藜芦醇的原料包括含有固体原料的溶液或液体原料,所述固体原料包括花生、虎杖、葡萄皮和葡萄籽中的一种或多种;所述液体原料包括红葡萄酒。当所述原料为含有固体原料的溶液时,所述晶种加入量为所述固体原料的重量的0.004%~0.02%;和/或,在-20到4℃下结晶12-48小时。
优选地,所述固体原料与所述亲水性材料的质量比为10~50∶1。
优选地,在步骤3)中所述有机酸包括三氟乙酸和/或冰醋酸。
本发明与现有技术对比的有益效果包括:本发明提出的亲水性吸附材料是由惰性致孔剂、替代模板分子和功能单体的反应生成物,与亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和CuBr2在交联剂和引发剂存在条件下反应得到的聚合物,在替代模板分子(印迹分子)存在的情况下,功能单体和交联剂在合适的溶剂中发生聚合反应,形成一种高度交联的三维网状聚合物,之后将模板分子脱去,形成了与模板大小、形状及化学功能相匹配的孔穴,所得亲水性吸附材料对白藜芦醇具有高选择性,能够有效排除杂质的干扰,且可循环使用。将本发明制备的亲水性吸附材料用于提取白藜芦醇结晶单体,亲水性吸附材料可吸附白藜芦醇分子,将其保留在亲水性吸附材料的空穴中,用去离子水洗涤去除其他的水溶性物质,再用含1~10%有机酸的酸性乙腈洗脱出吸附材料空穴中滞留的白藜芦醇分子,之后浓缩复溶结晶即可,该方法简单且得到的白藜芦醇的纯度高,最高的纯度为98.38%。
附图说明
图1为本发明实施例1中亲水性吸附材料的红外光谱图。
图2为本发明实施例2中亲水性吸附材料的红外光谱图。
图3为本发明实施例1中亲水性吸附材料的热重曲线图。
图4为本发明实施例2中亲水性吸附材料的热重曲线图。
图5为本发明实施例1中亲水性吸附材料的X-射线衍射图。
图6为本发明实施例2中亲水性吸附材料的X-射线衍射图。
图7为本发明实施例3提取的白藜芦醇测定的高效液相色谱图。
图8为本发明实施例4提取的白藜芦醇测定的高效液相色谱图。
图9为本发明实施例5提取的白藜芦醇测定的高效液相色谱图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
实施例1
本实施例提出一种特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料的制备方法,包括以下步骤:
T1、量取250mL氯仿(一种惰性致孔剂),加入4.56g(20mmol)的4′-氯代白藜芦醇(一种替代模板分子)和6.40g(80mmol)的甲基丙烯酸(一种功能单体),完全溶解,反应10min。
在其他实施例中,惰性致孔剂也可以是乙腈、甲苯、氯仿和甲醇中的一种或多种;功能单体也可以是甲基丙烯酸、丙烯酸、亚甲基丁二酸、对乙烯基苯甲酸、甲基丙烯酰胺和N-异丙基丙烯酰胺中的一种或多种。
T2、加入10.40g(80mmol)的亲水性甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)、0.70g(4mmol)的N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺(PMDETA)和0.90g(4mmol)的CuBr2,再加入79.28g(400mmol)的乙二醇二甲基丙烯酸酯(一种交联剂,英文缩写为EGDMA)和0.66g(4mmol)的偶氮二异丁腈(一种引发剂),于0-4℃下通氮气反应30分钟后,密封,50℃下水浴反应48小时,反应得到的聚合物沉淀。
在其他实施例中,交联剂也可以是三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)、N,N-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)、二乙烯基苯(DVB)、乙二醇二甲基丙烯酸酯中的一种或多种;引发剂还可以是偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、异丙苯过氧化氢、叔丁基过氧化氢中的一种或多种。
T3、用500mL的冰醋酸-乙醇溶液(体积含量5%)进行索氏提取,重复提取4次,每次8小时。收集的沉淀物粉碎,过100目筛,用200mL的去离子水超声洗涤3~6次,每次10分钟,直至溶液为中性;再用200mL的乙醇超声洗涤2次,每次10分钟,最后30℃恒温真空干燥,即得亲水性吸附材料颗粒。
本实施例制备的亲水性材料的红外光谱图,如图1所示,在2989cm-1处存在-C-H的伸缩振动峰;在1732cm-1处存在羰基(-C=O-)的伸缩振动峰;在1259cm-1处存在-C-O-的伸缩振动峰;在1540cm-1和1409cm-1处存在-CH2-振动峰。
本实施例制备的亲水性材料的热重分析结果,如图3所示,开始的12min以内温度在200℃以下,由于样品中的残留水分或溶剂挥发,造成的质量损失极少,为1.39%。随后的12~41min时间段质量损失较大,为88.07%,可能由于该亲水性材料受热分解所致。
本实施例制备的亲水性材料的XRD图,如图5所示,在20~90°的2θ角范围内,在2θ=30.19°、35.58°、43.35°、53.37°、56.95°和62.7°的衍射蜂处分别对应JCPDSno.19-629中的(220)、(311)、(400)、(422)、(511)和(440)晶面的衍射峰,属于立方尖晶石结构。
本实施例还包括采用上述方法制备的亲水性材料。
实施例2
本实施例提出一种特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料的制备方法,包括以下步骤:
T1、量取250mL乙腈,加入4.56g(20mmol)的偶氮-白藜芦醇和11.77g(80mmol)的对乙烯基苯甲酸,完全溶解,反应10分钟。
T2、加入10.40g(80mmol)的亲水性甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)、0.70g(4mmol)的N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺(PMDETA)和0.90g(4mmol)的CuBr2,再加入52.08g(400mmol)的DVB和0.36g(4mmol)的叔丁基过氧化氢,于0-4℃下通氮气反应30分钟后,密封,50℃下水浴反应48小时,反应得到的聚合物沉淀。
T3、用250mL的冰醋酸-乙醇溶液(冰醋酸体积含量10%)进行索氏提取,重复提取6次,每次6小时。收集的沉淀物粉碎,过100目筛,用200mL的去离子水超声洗涤3~6次,每次10分钟,直至溶液为中性;再用200mL的乙醇超声洗涤2次,每次10分钟,最后30℃恒温真空干燥,即得亲水性吸附材料颗粒。
本实施例制备的亲水性材料的红外光谱图,如图2所示,在2989em-1处存在-C-H的伸缩振动峰;在1732em-1处存在羰基(-C=O-)的伸缩振动峰;在1259em-1处存在-C-O-的伸缩振动峰;在1540cm-1和1409cm-1处存在-CH2-振动峰。本实施例制备的亲水性材料的热重分析结果,如图4所示,开始的12min以内温度在200℃以下,由于样品中的残留水分或溶剂挥发,造成的质量损失极少,为1.25%。随后的12~41min时间段质量损失较大,为91.17%,可能是由于该亲水性材料受热分解所致。
本实施例制备的亲水性材料的XRD图,如图6所示,在20~90°的2θ角范围内,在2θ=30.19°、35.58°、43.35°、53.37°、56.95°和62.7°的衍射蜂处分别对应JCPDSno.19-629中的(220)、(311)、(400)、(422)、(511)和(440)晶面的衍射峰,属于立方尖晶石结构。
本实施例还包括采用上述方法制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性材料。
本发明还包括上述制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料在提取白藜芦醇中的应用,具体如下:
实施例3
从刺葡萄籽中提取反式白藜芦醇结晶单体:
本实施例提出采用实施例1制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料提取白藜芦醇结晶单体的方法,包括以下步骤:
S1、准确称取粉碎过筛后的葡萄籽50g,具体为刺葡萄籽,于250mL具塞锥形瓶中,加入50mL温度在90~100℃的去离子水和10g亲水性吸附材料,搅拌均匀,再加入100mg/L的抗坏血酸溶液10mL,超声10分钟,将混合物彻底转移至内径2cm的玻璃柱(带活塞、筛板和磨口塞)。刺葡萄籽直接粉碎,通过温度较高的去离子水浸出白藜芦醇,亲水性吸附材料在混合溶液中,即可吸附白藜芦醇分子,将其保留在亲水性吸附材料的空穴中。辅以研磨、搅拌、超声提取或者微波萃取,白藜芦醇分子将更好的进入亲水性吸附材料的空穴。
S2、打开活塞将溶液放至混合物上界面的高度,加入200mL温度为80~100℃去离子水洗涤,待去离子水流出约100mL后,关闭活塞静置30分钟,打开活塞,废弃流出液至液面在混合物的上界面。
S3、再以200mL含1%的三氟乙酸的乙腈溶液洗脱,收集全部流出液,30℃下真空旋转蒸发浓缩至膏状,用少量乙腈溶解为刚好过饱和溶液。
S4、加入1mg纯度为98%的白藜芦醇纯品作为晶种,在-20℃条件下避光静置24小时结晶,过滤,收集结晶体以50mL去离子水洗涤2次,10mL乙醇喷洒冲洗表面,真空冷冻干燥,即得白藜芦醇结晶单体12.24mg,经高效液相色谱测定,色谱图如图7所示,其纯度为98.38%,通过与对照品的保留时间比对,对照品为检测用的反式白藜芦醇纯品,确定其结构为反式白藜芦醇。在其他实施例中,固体原料也可以是花生、虎杖、葡萄皮和葡萄籽中的一种或多种。
实施例4
本实施例提出采用实施例2制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料提取白藜芦醇结晶单体的方法,包括以下步骤:
S1、称准确称取粉碎过筛后的葡萄籽100g,具体为刺葡萄籽,于500mL具塞锥形瓶中,加入100mL温度在90~100℃的去离子水和20g上述自制亲水性吸附材料,搅拌均匀,再加入100mg/L的抗坏血酸溶液20mL,超声20分钟,将混合物彻底转移至内径2cm的玻璃柱(带活塞、筛板和磨口塞).
S2、打开活塞将溶液放至混合物上界面的高度,加入200mL温度为80~100℃的去离子水洗涤,待液体流出约100mL后,关闭活塞静置30分钟,打开活塞,废弃流出液至液面在混合物的上界面。
S3、再以200mL含5%冰醋酸的乙腈溶液洗脱,收集全部流出液,30℃下真空旋转蒸发浓缩至膏状,用少量乙腈溶解为刚好过饱和溶液。
S4、加入2mg纯度为98%的白藜芦醇纯品作为晶种,在-20℃条件下静置30小时结晶,过滤,收集结晶体以50mL去离子水洗涤2次,10mL乙醇喷洒冲洗表面,真空冷冻干燥,即得白藜芦醇结晶单体20.09mg,经高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC法)测定,色谱图如图8所示,其纯度为90.18%,通过与对照品的保留时间比对,对照品为检测用的反式白藜芦醇纯品,确定其结构为反式白藜芦醇。
实施例5
从红葡萄酒中提取反式白藜芦醇结晶单体:
本实施例提出采用实施例1制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料提取白藜芦醇结晶单体的方法,包括以下步骤:
S1、称取10.0g亲水性吸附材料与刺葡萄红酒500mL(经高效液相色谱检测该刺葡萄酒中白藜芦醇含量为6.89mg/L)混合均匀,超声辅助提取10分钟,湿法装填入内径2cm的玻璃柱(带活塞、筛板和磨口塞)。
S2、打开活塞弃去流出液,加入200mL去离子水洗涤,待流出约100mL液体后,关闭活塞,静置30分钟。
S3、再以200mL含5%冰醋酸的乙腈溶液洗脱,收集全部流出液,30℃下真空旋转蒸发浓缩至膏状,用少量乙腈溶解为刚好过饱和溶液。
S4、加入0.5mg纯度为98%的白藜芦醇纯品作为晶种,在-20℃条件下静置48小时结晶,过滤,收集结晶体以50mL去离子水洗涤2次,10mL乙醇喷洒冲洗表面,真空冷冻干燥,即得白藜芦醇结晶单体3.02mg,经高效液相色谱测定,色谱图如图9所示,其纯度为86.33%,提取率为87.66%。通过与对照品的保留时间比对,对照品为检测用的反式白藜芦醇纯品,确定其结构为反式白藜芦醇。
需要说明的是,上述提取方法中,用到的吸附柱为玻璃柱,该玻璃柱中间粗两头细,装填和洗脱都简单,不必加压,操作简便且成本低,用温度为80~100℃的去离子水洗涤除去其他的水溶性物质,再用酸性乙腈洗脱下吸附材料空穴中滞留的反式白藜芦醇分子。
本发明在提取白藜芦醇的过程中,将固态原料(如葡萄籽、虎杖等)直接粉碎,通过高温水浸出白藜芦醇,亲水性吸附材料在混合溶液中,即可吸附反式白藜芦醇分子,将其保留在亲水性吸附材料的空穴中。辅以研磨、搅拌、超声提取或者微波萃取,反式白藜芦醇分子将更好的进入亲水性吸附材料的空穴;需要说明的是,在替代模板分子存在的情况下,功能单体和交联剂在合适的溶剂中发生聚合反应,形成一种高度交联的三维网状聚合物,接着将模板分子脱去,就形成了与模板大小、形状及化学功能相匹配的孔穴。
通过科学可行的方法,从葡萄籽、葡萄皮、红葡萄酒中经提取、分离、纯化、结晶等简单步骤,制备高纯度的天然反式白藜芦醇结晶单体,方法稳定性好、提取率及产品纯度高;简化了现有的制备工艺,制备周期短,制备量大,成本低;自制的高选择性材料对反式白藜芦醇分子具有特异的选择性识别能力,且可循环使用;大大减少了有毒有害有机溶剂的用量,符合环保、安全的生产要求,具有较好的经济效益和社会价值。此外,该方法获得的反式白藜芦醇单体为纯天然植物体来源,避免了生物合成或化学合成方法提取白藜芦醇的各类弊端。
本发明以水作为溶剂提取白藜芦醇,而不是采用有机溶剂,在确保提取纯度的同时,绿色环保,不会在后续食品的加工应用中带来溶剂残留的问题。在本发明中,反式白藜芦醇不稳定,在自然光照环境下会转换为顺式白藜芦醇,活性大大降低,加入的抗坏血酸溶液能够起到稳定剂的作用,防止白藜芦醇被氧化或转化。
本发明提供的提取白藜芦醇的方法不需要较为昂贵的专用设备,成本低廉;不需要大量的有机溶剂,对环境友好;且易于实现工业化大量生产。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
综上所述,本发明提取白藜芦醇的方法采用新型的自制亲水性吸附材料,从天然植物中特异性识别白藜芦醇分子,通过分离条件的优化制备高纯度的白藜芦醇结晶单体,主要有一下几个方面的应用:1.为植物提取物、医药品研发等生产企业与研究机构,提供白藜芦醇单体作为标准品/对照品进行产品的分析检测;2.为功能性食品、保健品、药品的剂量和效果研究,提供高纯度白藜芦醇产品;3.为葡萄、花生、虎杖等植物的高附加值深加工产品开发提供支撑。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (11)
1.一种特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料,其特征在于,是由惰性致孔剂、替代模板分子和功能单体的反应生成物,与亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和CuBr2在交联剂和引发剂存在条件下反应得到的聚合物;所述功能单体选自甲基丙烯酸或者对乙烯基苯甲酸。
2.根据权利要求1所述的亲水性吸附材料,其特征在于,所述惰性致孔剂选自乙腈、甲苯、氯仿和甲醇中的一种或多种;
和/或,所述替代模板分子选自4’-氯代白藜芦醇或偶氮-白藜芦醇;
和/或,所述交联剂选自三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N,N-亚甲基双丙烯酰胺、二乙烯基苯和乙二醇二甲基丙烯酸酯中的一种或多种;
和/或,所述引发剂选自偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、异丙苯过氧化氢和叔丁基过氧化氢中的一种或多种。
3.根据权利要求1或2所述的亲水性吸附材料,其特征在于,所述引发剂的用量为所述功能单体的用量的1.0~10.0%。
4.一种权利要求1~3任一项所述特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料的制备方法,其特征在于,包括:
将惰性致孔剂、替代模板分子和功能单体进行反应;
将反应生成物与亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和CuBr2在交联剂和引发剂存在条件下反应得到的聚合物。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
T1、于250~500mL惰性致孔剂中加入20~50mmol的4’-氯代白藜芦醇或偶氮-白藜芦醇和80~200mmol的功能单体搅拌反应;
T2、加入80~200mmol的亲水性甲基丙烯酸羟乙酯、4~10mmol的N,N,N′,N″,N″-五甲基二亚乙基三胺和4~10mmol的CuBr2,再加入400~1000mmol的交联剂及4~10mmol的引发剂通氮气反应,密封,进行水浴反应得到聚合物沉淀;
T3、将所述聚合物沉淀粉碎,研磨过筛,用含酸的醇溶剂去除模板分子得到所述亲水性吸附材料。
6.一种权利要求1-3任一项所述的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料或权利要求4-5任一项所述方法制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料在提取白藜芦醇中的应用。
7.一种利用权利要求1-3任一项所述的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料或权利要求4-5任一项所述方法制备的特异性识别白藜芦醇的亲水性吸附材料提取高纯度白藜芦醇的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料混合均匀,填入吸附柱;
2)用去离子水对所述吸附柱进行洗涤,弃洗涤液;
3)用含1~10%有机酸的乙腈溶液对所述吸附柱进行洗脱,收集洗脱液。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在步骤3)之后还包括如下步骤:
4)将所得洗脱液浓缩,再复溶成过饱和溶液,加入白藜芦醇纯品作为晶种,静置结晶。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在步骤1)中将混合均匀后的含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料进行研磨或者搅拌或者超声提取或者微波萃取处理。
10.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于,在步骤1)中向混合均匀后的所述含有白藜芦醇的原料与所述亲水性吸附材料中加入浓度为50~100mg/L的抗坏血酸溶液。
11.根据权利要求8所述的方法,所述原料包括含有固体原料的溶液或液体原料;当所述原料为含有固体原料的溶液时,所述晶种加入量为所述固体原料的重量的0.004%~0.02%;和/或,在-20到4℃下结晶12-48小时。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810456862.3A CN108752519B (zh) | 2018-05-14 | 2018-05-14 | 一种提取高纯度白藜芦醇的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810456862.3A CN108752519B (zh) | 2018-05-14 | 2018-05-14 | 一种提取高纯度白藜芦醇的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108752519A CN108752519A (zh) | 2018-11-06 |
CN108752519B true CN108752519B (zh) | 2020-11-10 |
Family
ID=64006822
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810456862.3A Active CN108752519B (zh) | 2018-05-14 | 2018-05-14 | 一种提取高纯度白藜芦醇的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108752519B (zh) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101419186A (zh) * | 2008-08-01 | 2009-04-29 | 南方医科大学 | 一种具有白藜芦醇分子印迹的自组装电极及其制备方法 |
CN102369223A (zh) * | 2009-01-29 | 2012-03-07 | 国家科学和工业研究组织 | 分子印记聚合物 |
CN102924239A (zh) * | 2012-10-23 | 2013-02-13 | 南方医科大学 | 一种从虎杖中分离反式白藜芦醇的方法 |
CN103263899A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-08-28 | 重庆大学 | 分离纯化白藜芦醇用的大孔吸附树脂的修饰方法 |
CN104513338A (zh) * | 2013-09-26 | 2015-04-15 | 南京工业大学 | 功能性聚苯乙烯共聚微球的合成方法 |
CN107936176A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-04-20 | 仲恺农业工程学院 | 白藜芦醇分子印迹聚合物的制备方法及应用 |
-
2018
- 2018-05-14 CN CN201810456862.3A patent/CN108752519B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101419186A (zh) * | 2008-08-01 | 2009-04-29 | 南方医科大学 | 一种具有白藜芦醇分子印迹的自组装电极及其制备方法 |
CN102369223A (zh) * | 2009-01-29 | 2012-03-07 | 国家科学和工业研究组织 | 分子印记聚合物 |
CN102924239A (zh) * | 2012-10-23 | 2013-02-13 | 南方医科大学 | 一种从虎杖中分离反式白藜芦醇的方法 |
CN103263899A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-08-28 | 重庆大学 | 分离纯化白藜芦醇用的大孔吸附树脂的修饰方法 |
CN104513338A (zh) * | 2013-09-26 | 2015-04-15 | 南京工业大学 | 功能性聚苯乙烯共聚微球的合成方法 |
CN107936176A (zh) * | 2017-10-10 | 2018-04-20 | 仲恺农业工程学院 | 白藜芦醇分子印迹聚合物的制备方法及应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108752519A (zh) | 2018-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Ji et al. | Molecularly imprinted polymers with novel functional monomer for selective solid-phase extraction of gastrodin from the aqueous extract of Gastrodia elata | |
Xia et al. | Selective separation of quercetin by molecular imprinting using chitosan beads as functional matrix | |
Wan et al. | Novel dual functional monomers based molecularly imprinted polymers for selective extraction of myricetin from herbal medicines | |
CN110183574B (zh) | 一种苯硼酸基聚合物载体及其选择性吸附糖类物质的应用 | |
CN102344527A (zh) | 利用分子印迹聚合物净化磺胺类药物的方法 | |
CN108864217B (zh) | 一种石榴皮安石榴苷的纯化方法 | |
Tsermentseli et al. | Molecularly imprinted polymers for the isolation of bioactive naphthoquinones from plant extracts | |
JP6193004B2 (ja) | 吸着材及びそれを用いた分析システム | |
Chen et al. | One-pot preparation of an acryloyled β-cyclodextrin-silica hybrid monolithic column and its application for determination of carbendazim and carbaryl | |
EP2432588B1 (en) | Porous polymeric separation material | |
CN101712669A (zh) | 一种分离纯化木犀草素的方法 | |
CN105032376A (zh) | 混合三模板分子印迹固相萃取柱的制备方法及其应用 | |
CN101434679A (zh) | 分子印迹聚合物的制备及用其分离盐酸克伦特罗的方法 | |
CN110951105A (zh) | 烟酰胺虚拟模板表面分子印迹材料及其制备方法和应用 | |
CN106632529B (zh) | 一种基于分子印迹技术的壳四糖单体分离提取方法 | |
CN105954404B (zh) | 采用uio‑66‑nh2材料测定血清中唾液酸含量的方法 | |
CN103342774B (zh) | 联苯三唑醇分子印迹固相萃取柱的制备方法和应用 | |
CN106046254B (zh) | 富集京尼平苷的亲水性分子印迹聚合物及制备方法和应用 | |
CN103396512B (zh) | 混合模板分子印迹聚合物及其固相萃取柱的制备方法和应用 | |
CN108752519B (zh) | 一种提取高纯度白藜芦醇的方法 | |
CN111505143B (zh) | 一种快速检测百菌清及其氧化还原产物的方法 | |
CN101914066B (zh) | 利用分子印迹聚合物净化和检测抗蚜威的方法 | |
Pan et al. | Purification and the effects on structure and bioactivity for polysaccharide from Actinidia valvata Dunn. using macroporous adsorption resin | |
CN102172516A (zh) | 一种树脂包覆硅胶吸附新材料 | |
CN111239314A (zh) | 一种几丁寡糖的分离分析方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |