CN108700549B - 样品分离器具及样品分析装置 - Google Patents

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Abstract

提供一种可较好地使用于排出转印的新颖的样品分离器具及样品分析装置。一种样品分离器具(100)，用于排出转印，具备分离介质(10)与收容部(21)，收容部(21)在端部侧具有开口(21b)，分离介质(10)具有露出部分(10b)，露出部分(10b)具有延伸到收容部(21)中的开口(21b)的周缘部(21a)上的延伸部分(10a)。

Description

样品分离器具及样品分析装置
技术领域
本发明涉及一种用于利用电泳分析样品的样品分离器具及样品分析装置。
背景技术
作为用于分析包含生物分子等的样品的技术之一，本发明者等人开发了称为排出转印的独特技术(例如专利文献1)。排出转印是在分离介质中对样品进行电泳，使从该分离介质的端部排出的样品转印到以与该端部相接的状态移动的转印膜，使过去需要烦琐工序的样品的电泳及转印的过程简化。
另外，专利文献1中，在排出转印时，通过使用具备分离介质与收容该分离介质的收容部的样品分离器具，实现了简便的转印。
[现有技术文献]
[专利文献]
[专利文献1]日本专利特开2011-80842号公报(2011年4月21日公开)
发明内容
本发明所要解决的技术问题
在样品分析时，要求简便性及转印速度提高。排出转印时，使转印速度提高的情况下，优选使转印膜的移动速度增大。然而，在使转印膜的移动速度增大的情况下，因摩擦对与该转印膜相接的分离介质的端部造成的负担有时会增加。
因此，要求与以往(例如专利文献1)相比耐久性更高的样品分离器具。
本发明是鉴于所述问题而完成的，主要目的在于提供一种分离介质的端部的耐久性较高的样品分离器具及具备该样品分离器具的样品分析装置。
解决问题的手段
为了解决所述问题，本发明的一形态的样品分离器具用于排出转印，所述排出转印是在分离介质中对样品进行电泳，使从该分离介质的端部排出的该样品转印到以与该端部相接的状态移动的转印膜，具备该分离介质、及收容该分离介质的收容部，该收容部在该端部侧具有开口，该分离介质具有通过该开口露出于该收容部的外部的露出部分，该露出部分具有延伸到该收容部中的该开口的周缘部上的延伸部分。
另外，本发明的另一形态的样品分离器具用于排出转印，所述排出转印是在分离介质中对样品进行电泳，使从该分离介质的端部排出的该样品转印到以与该端部相接的状态移动的转印膜，具备该分离介质、及收容该分离介质的收容部，该收容部在该端部侧具有开口，该分离介质具有通过该开口露出于该收容部的外部的露出部分。
发明效果
根据本发明的一形态，可提供一种分离介质的端部的耐久性较高的样品分离器具及具备该样品分离器具的样品分析装置。
附图说明
图1是示意性地表示本发明的实施方式1的样品分析装置的概略构成的侧方剖面图。
图2是示意性地表示本发明的实施方式1的样品分析装置的概略构成的立体图。
图3是说明用于在本发明的实施方式1的样品分析装置中移动部使转印膜以朝分离介质侧施加张力的状态移动的构成的侧方剖面图。
图4A是示意性地表示本发明的实施方式1的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图4B是示意性地表示本发明的实施方式1的样品分离器具的另一概略构成的侧方剖面图。
图4C是示意性地表示本发明的实施方式1的样品分离器具的又一概略构成的侧方剖面图。
图5是表示本发明的实施方式1的样品分离器具中的缺口的变化的侧方剖面图。
图6是表示本发明的实施方式1的样品分离器具中的分离介质的形状的变化的侧方剖面图。
图7是示意性地表示本发明的实施方式2的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图8是示意性地表示本发明的实施方式3的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图9是示意性地表示本发明的实施方式4的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图10是示意性地表示本发明的实施方式5的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图11是示意性地表示本发明的实施方式6的样品分离器具的概略构成的侧方剖面图。
图12是示意性地表示本发明的实施方式7的样品分析装置的概略构成的侧方剖面图。
图13是表示实施例中的排出转印结果的照片的图。
具体实施方式
本发明提供一种样品分离器具，用于排出转印，具备分离介质、及收容该分离介质的收容部，该收容部在该端部侧具有开口，该分离介质具有通过该开口露出于该收容部的外部的露出部分，该露出部分具有延伸到该收容部中的该开口的周缘部上的延伸部分。此外，在本说明书中，所谓排出转印，是指以下技术：在分离介质中对样品进行电泳，使从该分离介质的端部排出的该样品转印到以与该端部相接的状态移动的转印膜。
另外，本发明提供一种样品分析装置，具备：本发明的样品分离器具；电极，用于对所述分离介质流通电流；所述转印膜；及移动部，使所述转印膜或所述分离介质以所述转印膜与所述分离介质的所述端部相接的状态移动。
此处，专利文献1中记载着以下构成，即，分离介质被收容在样品分离部，在该分离介质的前端介隔多孔质膜或不介隔多孔质膜地安装着与分离介质分开的转印辅助体。另外，专利文献1中也记载着收容在样品分离部的分离介质的前端从样品分离部露出的构成。
与此相对，本发明的样品分离器具与前者的构成的不同点在于，分离介质具有通过收容部的开口露出于收容部的外部的露出部分，与后者的构成的不同点在于，该露出部分具有延伸到收容部中的开口的周缘部上的延伸部分。
以下，参照附图对本发明的实施方式的详细构成及效果进行说明。
参照图1～6，对本发明的一实施方式(实施方式1)的样品分析装置100的概略构成进行说明。
(样品分析装置)
图1是概略性地表示本实施方式的样品分析装置100的概略构成的侧方剖面图。另外，图2是概略性地表示本实施方式的样品分析装置100的构成的立体图。
如图1及图2所示，样品分析装置100包括具备分离介质10及收容部21的样品分离器具50、转印膜11、阴极缓冲槽20、阳极缓冲槽22、移动部23、电源30、阴极(电极)31、以及阳极(电极)32。
收容部21收容分离介质10。另外，收容部21具有在阳极缓冲槽22内开口的开口21b、及在阴极缓冲槽20内开口的开口21c。
向阴极缓冲槽20及阳极缓冲槽22内注入缓冲液。另外，在阴极缓冲槽20内配置阴极31。另外，在阳极缓冲槽22内配置阳极32。电源30连接于阴极31及阳极32。
在阳极缓冲槽22内，以与分离介质10的开口21b侧的端部接触的方式配置转印膜11。在本实施方式中，移动部23使转印膜11以与分离介质10的开口21b侧的端部相接的状态移动。
根据样品分析装置100，从开口21c将样品1导入到分离介质10，通过电源30向阴极31与阳极32之间施加电压，可在分离介质10中在从开口21c朝向开口21b的方向(图1中A方向)上对样品1进行电泳。并且，该电泳的结果，可使从分离介质10的开口21b侧的端部排出的经分离的样品1转印(吸附)到由移动部23以与该端部相接的状态朝与分离方向不平行的方向(图1中B方向)移动的转印膜11。由此，可较好地实现排出转印。
此外，移动部23优选使转印膜11以朝分离介质10侧施加张力的状态移动。由此，可使分离介质10更密接于转印膜11而将从分离介质10排出的样品较好地转印到转印膜11。
作为用于移动部23使转印膜11以朝分离介质10侧施加张力的状态移动的构成的一例，列举如图3(a)所示，设置对于转印膜11，从与分离介质10相反的一侧，在隔着收容部21的开口21b的位置抵接的导向件24的构成。在该构成中，转印膜11在导向件24间从直线地绷紧的状态变为被分离介质10下压的状态，因此变为在朝向分离介质10的方向上施加张力的状态。由此，可使分离介质10更密接于转印膜11。
此外，导向件24优选抵接于转印膜11的部位平滑，使得转印膜11能够以抵接于导向件24的状态移动。导向件24例如可由树脂等绝缘体形成。
另外，作为用于移动部23使转印膜11以朝分离介质10侧施加张力的状态移动的构成的另一例，列举如图3(b)所示，将移动部23配置在比分离介质10的开口21b侧的端部高的位置(开口21c侧的位置)的构成。利用该构成，也能够使转印膜11为在朝向分离介质10的方向上施加张力的状态。
(样品分离器具)
图4A是示意性地表示本实施方式的样品分离器具50的概略构成的侧方剖面图。如图4A所示，分离介质10具有通过开口21b露出于收容部21的外部的露出部分10b。露出部分10b具有延伸到收容部21中的开口21b的周缘部21a上的延伸部分10a。并且，露出部分10b与转印膜11相接。
像这样，分离介质10的露出部分10b与转印膜11接触，因此可将分离介质10中经分离的样品1较好地转印到转印膜11。另外，通过将收容部21内的分离介质10与露出部分10b由一体的部件构成，可简单地制作样品分离器具。
另外，经收容部21内的分离介质10分离的样品1通过开口21b，并通过露出部分10b中的与开口21b对应的部位，而转印到转印膜11。此处，通过在露出部分10b中的与开口21b对应的部位的周围设置延伸部分10a，而该延伸部分10a针对露出部分10b中的与开口21b对应的部位，作为保护部发挥作用。由此，可较好地抑制因露出部分10b与转印膜11的摩擦导致露出部分10b中的与开口21b对应的部位产生磨耗而损坏，从而不能转印，或露出部分10b中的与开口21b对应的部位被转印膜11拉拽而变形，从而电泳图案产生变形。因此，可使分离介质10中的与转印膜11相接的端部的耐久性提高。此外，在本说明书中，所谓分离介质10的端部的耐久性，是表示能够多久地维持可实现良好转印的状态。
此外，延伸部分10a优选从开口21b沿着转印膜11的移动方向(图4A中B)及其相反方向延伸到周缘部21a上。由此，可较好地保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位免受露出部分10b与转印膜11的摩擦影响。
另外，从一个观点来看，延伸部分10a的从开口21b起的延伸宽度优选延伸部分10a的延伸方向上的开口21b的宽度以上。由此，可通过足够宽度的延伸部分10a来保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位。
另外，从另一观点来看，延伸部分10a的从开口21b起的延伸宽度更优选1μm以上且10000μm以下，进而优选100μm以上且2000μm以下。通过延伸部分10a的从开口21b起的延伸宽度为100μm以上，可通过足够宽度的延伸部分10a来保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位。另外，通过延伸部分10a的从开口21b起的延伸宽度为1000μm以下，可减小露出部分10b与转印膜11的接触面积及摩擦而使转印膜11较好地移动。
另外，露出部分10b的厚度(周缘部21a上的延伸部分10a的厚度)优选1μm以上且2mm以下，更优选50μm以上且200μm以下。通过露出部分10b的厚度为所述范围，可确保露出部分10b的强度。
另外，露出部分10b例如可从最初起便包含延伸部分10a，但也可如图4B所示，例如最初并不包含延伸部分10a。在露出部分10b例如最初并不包含延伸部分10a的情况下，例如，如果通过使收容部21接近转印膜11而使露出部分10b压接于转印膜11，则可如图4C所示使露出部分10b包含延伸部分10a，进而也可如图4A所示使露出部分10b包含延伸部分10a。这在之后说明的其它实施方式中也一样。
另外，在一实施方式中，也可在收容部21的开口21b侧的端部设置缺口21d。图5是表示样品分离器具50中的缺口21d的变化的侧方剖面图。图5的(a)表示在收容部21的开口21b侧的端部，缺口21d设置在转印膜11的移动方向的前方及后方的双方的构成。如图5的(b)所示，表示在收容部21的开口21b侧的端部，缺口21d设置在转印膜11的移动方向的前方及后方的一方的构成。图5的(c)表示在收容部21的开口21b侧的端部未设置缺口21d的构成。
在本实施方式中，可采用所述任一种构成，但通过像图5的(a)及(b)、尤其图5的(a)所示的那样，在收容部21的开口21b侧的端部设置缺口21d，与如图5的(c)所示的未设置缺口21d的情况相比，可减少收容部21与转印膜11接触的面积。由此，可减小转印膜11与收容部21的摩擦，而抑制转印膜11产生磨损。
尤其是，通过像图5的(d)所示的那样使缺口21d变圆，可抑制转印膜11被收容部21的角卡住，而使转印膜11更密接于露出部分10b。由此，可将样品1更好地转印到转印膜11。
此外，收容部21例如可由两张绝缘板构成，所述两张绝缘板由玻璃或丙烯酸等绝缘体形成。在一实施方式中，收容部21在开口21c缺失绝缘板的一部分，使分离介质10露出于阴极缓冲槽20内。由此，可将样品1容易地导入到分离介质10。
另外，分离介质10是用于将从开口21c导入的样品1中包含的各成分通过电泳并基于分子量等特性分离的介质。作为分离介质10的例子，列举丙烯酰胺凝胶及琼脂糖凝胶等凝胶，但并不限定于此。分离介质10的横宽例如可设为能够将10～12道的样品分离的长度。
另外，在一实施方式中，收容部21内的分离介质10也可朝向开口21b而前端变细。图6是表示样品分离器具50中的分离介质10的形状的变化的侧方剖面图。图6的(a)及(b)表示收容部21内的分离介质10朝向开口21b而前端变细的构成。在图6的(a)中，表示收容部21内的分离介质10的两侧具有倾斜的构成。在图6的(b)中，表示收容部21内的分离介质10的一侧具有倾斜的构成。图6的(c)表示收容部21内的分离介质10并未前端变细的构成。
在本实施方式中，可采用所述任一种构成，但通过像图6的(a)及(b)、尤其图6的(a)所示的那样，使收容部21内的分离介质10朝向开口21b而前端变细，与如图6的(c)所示的收容部21内的分离介质10并未前端变细的情况相比，可通过使开口21b的宽度变窄，而使形成在开口21b与阳极32之间的电力线F集中。由此，可使样品的转印图案清晰。
此处，收容部21内的分离介质10的宽度(与分离方向正交的方向的宽度、图6中的横向宽度)例如可设为1mm以上且2mm以下的范围。通过将收容部21内的分离介质10的宽度设为这种程度，可避免电泳时流动的电流量增大而避免过度发热，并且可确保宽度方向的均匀性。
并且，能够以开口21b的位置上的分离介质10的短边方向的宽度例如成为100μm以上且1mm以下的方式，使收容部21内的分离介质10朝向开口21b前端变细。尤其是，通过将开口21b的位置上的分离介质10的短边方向的宽度设为500μm以下，可使电力线F较好地集中，而使样品的转印图案更清晰。
另外，收容部21的宽度(与分离方向正交的方向的宽度、图6中的横向宽度)例如可设为2mm以上且3mm以下的范围，但并不限定于此。另外，收容部21的宽度也可在开口21b附近缩小。
样品分离器具50的制造方法例如可在亲水性的玻璃上分开与露出部分10b的厚度对应的距离而配置收容部21，在收容部21内填充用于形成分离介质10的前驱体(例如，形成凝胶的单体及反应剂)，使它固化之后，将前端切割成所期望的形状，但并无特别限定。
另外，在本实施方式中，如图1及图2所示，样品分离器具50在大致垂直方向上竖起，它的下部配置在阳极缓冲槽22内，它的上部以与阴极缓冲槽20相接的方式配置。由此，分离介质10经阳极缓冲槽22内的缓冲液及阴极缓冲槽20内的缓冲液中的至少一方水冷，而可充分地冷却。但是，本发明并不限定于此，也可将样品分离器具50水平地配置。
(转印膜)
转印膜11优选能够长期稳定地保存经分离介质10分离的样品，进而使之后的分析容易的样品的吸附保持体。作为转印膜11的材质，优选具有高强度且样品结合能力(每单位面积能够吸附的重量)高的材质。作为转印膜11，在样品为蛋白质的情况下，宜为PVDF(polyvinyli dene fluoride，聚偏氟乙烯)膜等。此外，PVDF膜优选预先使用甲醇等进行亲水化处理。除此以外，也可使用硝化纤维素膜或尼龙膜等以往用于吸附蛋白质、DNA及核酸的膜。
转印膜11以在阳极缓冲槽22内浸渍于缓冲液的状态使用。在一实施方式中，转印膜11只要具有使用于一次电泳、转印的长度、换句话说、在一次电泳、转印时在阳极缓冲槽22内移动的距离的长度即可。通过像这样构成转印膜11，无须当每一次电泳、转印时均进行将转印膜11切断的操作，可使样品分析装置100的使用性提高。另外，转印膜11的横宽设为与分离介质10的横宽对应的长度即可。
(阴极及阳极)
阴极31及阳极32由金属等具有导电性的材料形成。作为形成阴极31及阳极32的材料，例如从抑制电极的离子化的观点来看，优选铂。
阴极31及阳极32的配置并无特别限定，但优选以与开口21b对向的方式配置阳极32。由此，通过开口21b的电力线相对于转印膜11大致垂直，因此，可提高样品的吸附的精度。
另外，阳极32优选远离转印膜11配置。由此，可抑制从阳极32产生的气泡对分离成分相对于转印膜11的吸附造成不良影响。
在本实施方式中，阳极32及阴极31连接于电源30，但例如，也可连接于控制部而使用，还可连接于外部的电源供应器(直流电源装置)而使用。在连接于外部的电源供应器而使用的情况下，对该电源供应器设置时间、电流及电压之后，与电源供应器的动作开始同时地，操作控制部使样品分析装置100开始动作即可。
(阳极缓冲槽及阴极缓冲槽)
阳极缓冲槽22及阴极缓冲槽20是使缓冲液(buffer)滞留的绝缘性容器。在本实施方式中，阴极缓冲槽20相对于阳极缓冲槽22设置在上方。
加入到阳极缓冲槽22及阴极缓冲槽20的缓冲液可以是具有导电性的所有缓冲液，尤其是可较好地使用在弱酸性～弱碱性具有缓冲范围的缓冲液。作为这种缓冲液，例如，可使用Tris/甘氨酸系缓冲液、醋酸缓冲溶液、碳酸钠系缓冲液、CAPS缓冲液、Tris/硼酸/EDTA缓冲液、Tris/醋酸/EDTA缓冲液、MOPS、磷酸缓冲液及Tris/Tricine系缓冲液等缓冲液。
(移动部)
移动部23的构成只要是使转印膜11以与分离介质10的露出部分10b相接的状态移动，则并无特别限定，例如，也可由固定转印膜11的移动方向的前端部及后端部的框架与使该框架移动的驱动部构成。驱动部的构成并无特别限定，例如，可使用滚珠丝杠机构、齿轮齿条机构等构成。另外，移动部23例如也可为通过辊将卷筒状的转印膜11陆续送出的构成。
像这样，通过移动部23使转印膜11相对于分离介质10的露出部分10b相对地移动，可将样品1的各成分从分离介质10根据排出时间转印到转印膜11上的不同位置，从而可较好地实现排出转印。
(样品的电泳及转印)
接下来，对样品分析装置100中的样品1的电泳及转印详细地进行说明。此外，作为提供给样品分析装置100的样品1，并不限定于这些，列举来自生物材料(例如，生物个体、体液、细胞株、组织培养物、或组织片段)的调制物、或市售的试剂等。例如，列举多肽或多核苷酸。
首先，从样品分离器具50的开口21c将样品1导入到分离介质10。在样品1中，除了分析对象以外，也可添加用于确认电泳的进行状态的可视分子量标记。
然后，电源30对阳极32与阴极31之间流通电流，开始电泳。
作为阳极32与阴极31之间流通的电流值，并无特别限定，优选50mA以下，更优选20mA以上且30mA以下。此外，也可通过控制部等以电流值变得固定的方式进行控制，也可以电压变得固定的方式进行控制，也可以其它形态控制电流、电压。
转印膜11随着样品分离器具50中的电泳的进行，通过移动部23，以与分离介质10相接的状态逐渐移动。转印膜11的移动速度并无特别限定，例如，可设为以60～120分钟移动5～10cm的速度。
然后，通过电泳排出的样品1(在分离介质10内分离出的物质)从开口21b吸附到转印膜11中的与排出时刻相应的位置(在排出时刻与开口21b对向的位置)。由此，分离出的样品被转印到转印膜11。
转印后，可回收转印膜11而供于染色或免疫反应(蛋白质印迹法中的封闭及抗原抗体反应)等。然后，通过荧光检测器等，检测转印到转印膜11的成分的分离图案。这种荧光检测器可组入到样品分析装置100中，由此，可使电泳、转印、及检测的整个工序自动化。
[实施方式2]
以下，对本发明的实施方式2进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
图7是示意性地表示本发明的实施方式2的样品分离器具50的概略构成的侧方剖面图。如图7所示，本实施方式的样品分离器具50中设置着用于将分离介质10固定在收容部21的固定层(固定部)41。图7的(a)表示固定层41设置在周缘部21a与延伸部分10a之间的构成。图7的(b)表示固定层41在设置在周缘部21a与延伸部分10a之间基础上，还局部设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的构成。图7的(c)表示固定层41在设置在周缘部21a与延伸部分10a之间基础上，还设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的整体的构成。图7的(d)表示固定层41设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的整体的构成。
尤其，如图7的(a)～(c)所示，通过在周缘部21a与延伸部分10a之间设置用于将分离介质10固定在收容部21的固定层41，可较好地避免延伸部分10a因与转印膜11的摩擦而从周缘部21a剥落。由此，可通过延伸部分10a保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位，而使分离介质10中的与转印膜11相接的端部的耐久性进一步提高。
另外，如图7的(b)～(d)所示，通过在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间设置用于将分离介质10固定在收容部21的固定层41，可将分离介质10更牢固地固定在收容部21。由此，可防止缓冲液或气泡等进入分离介质10与收容部21之间而使电泳紊乱。
此外，本实施方式的样品分离器具50以用于排出转印为前提。如果是一般的电泳凝胶，则必须在实验的后工序中将凝胶与凝胶的收容部剥离，因此凝胶与凝胶的收容部的粘接受到限制。与此相对，本实施方式的样品分离器具50中，无须在后工序中将分离介质10从收容部21剥离，反而优选将分离介质10更牢固地固定在收容部21。
固定层41例如可以包含粘接层、多孔质层、薄膜层等。作为固定层41中包含的粘接层，可使用将分离介质10与收容部21粘接的粘接层。作为构成该粘接层的粘接剂，例如列举公知的紫外线固化型粘接剂、厌氧性粘接剂、丙烯酸系粘接剂等。作为形成该粘接层的方法，例如，列举如下等方法：在收容部21涂布粘接剂，将分离介质10填充到收容部21内之后，使粘接剂固化，但并不限定于此。像这样，通过作为固定层41使用粘接层，可将分离介质10牢固地固定在收容部21。
作为固定层41中包含的多孔质层，可使用形成在收容部21的表面的多孔质层。通过将该多孔质层形成在收容部21的表面，分离介质10以一部分包含在该多孔质层内的状态形成。此时，由于该多孔质层内包含的分离介质10与该多孔质层上的分离介质10成为一体，所以分离介质10固定在收容部21的表面。作为在收容部21的表面形成多孔质层的方法，例如，列举氧等离子体处理、UV臭氧处理、喷砂处理、对固定部进行蚀刻的药液处理、或它们的复合处理等。像这样，通过使用多孔质层作为固定层41，可将分离介质10牢固地固定在收容部21。
作为固定层41中包含的薄膜，可使用一个面粘接在收容部21的表面，且另一个面粘接在分离介质10的薄膜。在该薄膜中的收容部21侧的面，例如涂布有粘接剂，由此，也可粘接在收容部21的表面。在该薄膜中的分离介质10侧的面，例如形成着凹凸，也可通过增大与分离介质10的接触表面积而密接于分离介质10。作为这种薄膜，例如，列举所谓的蛾眼薄膜、使用模具等形成有微细构造的薄膜等。另外，在该薄膜中的分离介质10侧的面，例如也可涂布与分离介质10形成共价键的试剂。作为该薄膜的基材，可使用树脂、例如TAC或PET等塑料薄膜。该薄膜可通过贴附在收容部21的表面而使用。像这样，通过使用薄膜作为固定层41，可简便地将分离介质10固定在收容部21。
[实施方式3]
以下，对本发明的实施方式3进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
图8是示意性地表示本发明的实施方式3的样品分离器具50的概略构成的侧方剖面图。如图8所示，在本实施方式的样品分离器具50中，为了将分离介质10固定在收容部21，而在收容部21的表面形成有凹凸形状部(固定部)42。图8的(a)表示凹凸形状部42设置在周缘部21a与延伸部分10a之间的构成。图8的(b)表示凹凸形状部42在设置在周缘部21a与延伸部分10a之间基础上，还局部设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的构成。图8的(c)表示凹凸形状部42在设置在周缘部21a与延伸部分10a之间基础上，还设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的整体的构成。图8的(d)表示凹凸形状部42设置在收容部21的内面与收容部21内的分离介质10之间的整体的构成。
凹凸形状部42通过增大与分离介质10的接触表面积而密接于分离介质10。由此，可将分离介质10牢固地固定在收容部21。
尤其是，如图8的(a)～(c)所示，通过在延伸部分10a上设置用于将分离介质10固定在收容部21的凹凸形状部42，可较好地避免延伸部分10a因与转印膜11摩擦而从周缘部21a剥落。由此，可通过延伸部分10a保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位，而使分离介质10中的与转印膜11相接的端部的耐久性进一步提高。
另外，如图8的(b)～(d)所示，通过在收容部21的内面设置用于将分离介质10固定在收容部21的凹凸形状部42，可将分离介质10更牢固地固定在收容部21。由此，可防止缓冲液或气泡等进入分离介质10与收容部21之间而使电泳紊乱。凹凸形状部42例如可通过使用模具等在收容部21的表面形成微细构造而形成。另外，凹凸形状部42也可通过利用喷砂法、O2等离子体法等使收容部21的表面粗糙而形成。
[实施方式4]
以下，对本发明的实施方式4进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
图9是示意性地表示本实施方式的样品分离器具50的概略构成的侧方剖面图。如图9所示，在本实施方式的样品分离器具50中，在收容部21以覆盖开口21b的方式粘接着多孔质膜(固定部)43。另外，多孔质膜43包含分离介质10，收容部21内的分离介质10、多孔质膜43中包含的分离介质10、及露出部分10b成为一体。换句话说，露出部分10b是收容部21内的分离介质10从多孔质膜43的孔渗出而形成的构成。
由此，可通过延伸部分10a保护露出部分10b中的与开口21b对应的部位，而使分离介质10中的与转印膜11相接的端部的耐久性进一步提高。另外，通过多孔质膜43，可抑制收容部21内的分离介质10的溶胀对露出部分10b造成影响。
作为多孔质膜43，例如，可使用公知的多孔质膜(例如PVDF膜)。本实施方式的样品分离器具50例如可通过如下方式制造，即，以覆盖开口21b的方式在收容部21粘接多孔质膜43之后，在亲水性的玻璃上分开与露出部分10b的厚度对应的距离而配置收容部21，在收容部21内填充用于形成分离介质10的前驱体(例如，形成凝胶的单体及反应剂)，使它固化之后，将前端切割成所期望的形状，但制造方法并不限定于此。
[实施方式5]
以下，对本发明的实施方式5进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
图10是示意性地表示本实施方式的样品分离器具50的概略构成的侧方剖面图。如图10所示，在本实施方式的样品分离器具50中，在周缘部21a形成有凹部21e，延伸部分10a的收容部21侧的部分埋没在凹部21e。由此，可限制延伸部分10a的移动。另外，由于露出部分10b的从收容部21的突出高度变低，所以可抑制转印膜11被露出部分10b卡住。另外，通过以落在凹部21e内的方式形成露出部分10b，可缩小露出部分10b的宽度而抑制转印膜11被露出部分10b卡住。通过以上，可较好地抑制因转印膜11移动导致露出部分10b变形而电泳图案变形。
[实施方式6]
以下，对本发明的实施方式6进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
如图11所示，在本实施方式的样品分离器具50中，收容部21的缺口21d变圆，并且延伸部分10a中的缺口21d侧的端部变圆。由此，可较好地抑制在缺口21d及延伸部分10a的缺口21d侧的端部转印膜11卡住，从而可较好地抑制转印膜11产生磨损、及露出部分10b变形。
[实施方式7]
以下，对本发明的实施方式7进行说明。此外，为了便于说明，对具有与所述实施方式中说明的部件相同的功能的部件标注相同附图标记，并省略其说明。
在实施方式1中，对将分离介质10固定而使转印膜11移动的构成进行了说明，但本发明并不限定于此，只要是在转印膜11与分离介质10的露出部分10b相接的状态下，转印膜11相对于分离介质10相对地移动的构成即可。
在本实施方式中，如图12所示，转印膜11固定，移动部23使分离介质10以分离介质10的露出部分10b与转印膜11相接的状态移动。移动部23例如也可由保持样品分离器具50的框架、及使该框架移动的驱动部构成。驱动部的构成并无特别限定，例如可使用滚珠丝杠机构、齿轮齿条机构等构成。
即使是这种构成，也可将样品1的各成分从分离介质10根据排出时间转印到转印膜11上的不同位置，可较好地实现排出转印。
[总结]
本发明的形态1所涉及的样品分离器具(50)是用于排出转印的样品分离器具，所述排出转印是在分离介质(10)中对样品进行电泳，使从该分离介质的端部排出的该样品转印到以与该端部相接的状态移动的转印膜(11)，所述样品分离器具(50)是具备该分离介质、及收容该分离介质的收容部(21)，该收容部在该端部侧具有开口(21b)，该分离介质具有通过该开口露出于该收容部的外部的露出部分(10b)，该露出部分具有延伸到该收容部中的该开口的周缘部(21a)上的延伸部分(10a)。
根据所述构成，能够提供一种可适合用于排出转印的新颖的样品分离器具。也就是说，根据所述构成，通过将收容部内的分离介质与露出部分由一体的部件构成，可简单地制作样品分离器具。另外，通过延伸部分对于露出部分中的与开口对应的部位作为保护部发挥作用，可较好地抑制露出部分中的与开口对应的部位产生磨耗或变形。由此，可从分离介质将样品较好地转印到转印膜。
本发明的形态2所涉及的样品分离器具对于所述形态1，也可在所述周缘部与所述延伸部分之间设置用于将所述分离介质固定在所述收容部的固定部(41、42)。
根据所述构成，可较好地避免延伸部分因与转印膜摩擦而从周缘部剥落。由此，可通过延伸部分保护露出部分中的与开口对应的部位而较好地进行转印。
本发明的形态3所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可包含粘接层(41)。
根据所述构成，通过使用粘接层作为固定部，可将分离介质牢固地固定在收容部。由此，可更好地避免延伸部分因与转印膜摩擦而从周缘部剥落。
本发明的形态4所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可包含形成在所述收容部的表面的凹凸形状部(42)。
根据所述构成，通过使用凹凸形状部作为固定部，可使分离介质与收容部的接触表面积增加而强化密接力。由此，可更好地避免延伸部分因与转印膜摩擦而从周缘部剥落。
本发明的形态5所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可包含形成在所述收容部的表面的多孔质层(41)。根据所述构成，通过使用形成在收容部的表面的多孔质层作为固定部，能够以分离介质的一部分包含在该多孔质层的状态形成分离介质。由此，可将分离介质牢固地固定在收容部。由此，可更好地避免延伸部分因与转印膜摩擦而从周缘部剥落。
本发明的形态6所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可以是一个面粘接在所述收容部的表面且另一个面粘接在所述分离介质的薄膜(41)。
根据所述构成，通过使用一个面粘接在收容部的表面且另一个面粘接在分离介质的薄膜作为固定部，可简便地将分离介质固定在收容部。由此，可更好地避免延伸部分因与转印膜摩擦而从周缘部剥落。
本发明的形态7所涉及的样品分离器具对于所述形态2～6，所述固定部(41、42)也可还设置在所述收容部的内面与所述收容部内的所述分离介质之间。
根据所述构成，可将分离介质更牢固地固定在收容部。由此，可防止缓冲液或气泡等进入分离介质与收容部之间而使电泳紊乱。
本发明的形态8所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可具备以覆盖所述开口的方式粘接在所述收容部的多孔质膜(43)，该多孔质膜包含所述分离介质，且所述收容部内的所述分离介质、该多孔质膜中包含的所述分离介质、及所述露出部分成为一体。
根据所述构成，可通过延伸部分较好地保护露出部分中的与开口对应的部位而较好地进行转印。另外，也可通过多孔质膜抑制收容部内的分离介质的溶胀对露出部分造成影响。
本发明的形态9所涉及的样品分离器具对于所述形态2，所述固定部也可包含形成在所述周缘部的凹部(21e)，且所述延伸部分的所述收容部侧的部分埋没在该凹部。
根据所述构成，可限制延伸部分的移动。另外，由于露出部分的从收容部的突出高度变低，所以可抑制转印膜被露出部分卡住。另外，通过以落在凹部内的方式形成露出部分，可缩小露出部分的宽度而抑制转印膜被露出部分卡住。通过以上，可较好地抑制因转印膜移动导致露出部分变形而电泳图案变形。
本发明的形态10所涉及的样品分离器具对于所述形态1～9，所述收容部内的所述分离介质也可朝向所述开口而前端变细。根据所述构成，可使电泳时的电力线较好地集中而使样品的转印图案清晰。
本发明的形态11所涉及的样品分离器具对于所述形态10，所述开口的位置上的所述分离介质的短边方向的宽度也可为500μm以下。
根据所述构成，可使电泳时的电力线更好地集中而使样品的转印图案更清晰。
本发明的形态12所涉及的样品分离器具对于所述形态1～11，也可在所述收容部的所述开口侧的端部设置缺口(21d)。根据所述构成，可减少收容部与转印膜接触的面积。由此，可减少收容部与转印膜的摩擦而抑制转印膜产生磨损。
本发明的形态13所涉及的样品分离器具对于所述形态12，也可使所述缺口变圆。
根据所述构成，可抑制转印膜被收容部的角卡住而使转印膜更密接于露出部分。由此，可将样品更好地转印到转印膜。
本发明的形态14所涉及的样品分离器具对于所述形态12或13，也可使所述延伸部分中的所述缺口侧的端部变圆。
根据所述构成，可较好地抑制在延伸部分的缺口侧的端部转印膜被卡住，而可较好地抑制露出部分变形。
本发明的形态15所涉及的样品分离器具对于所述形态1～14，所述延伸部分也可从所述开口沿着所述转印膜的移动方向(B)或其相反方向延伸到所述周缘部上，且所述延伸部分的从所述开口的延伸宽度为所述延伸部分的延伸方向上的所述开口的宽度以上。
根据所述构成，可通过足够宽度的延伸部分保护露出部分中的与开口对应的部位。由此，可更好地抑制露出部分中的与开口对应的部位产生磨耗或变形。因此，可从分离介质将样品更好地转印到转印膜。
本发明的形态16所涉及的样品分析装置(100)具备：所述形态1～15的样品分离器具；电极(阴极31及阳极32)，用于对所述分离介质流通电流；所述转印膜；及移动部(23)，使所述转印膜以与所述分离介质的所述端部相接的状态移动。
本发明的形态17所涉及的样品分析装置(100)具备：所述形态1～15的样品分离器具；电极(阴极31及阳极32)，用于对所述分离介质流通电流；所述转印膜；及移动部(23)，使所述分离介质以所述分离介质的所述端部与所述转印膜相接的状态移动。
根据所述构成，可较好地实现排出转印。
本发明并不限定于所述各实施方式，可在权利要求书所示的范围内进行各种变更，将不同实施方式中分别公开的技术手段适当组合而获得的实施方式也包含在本发明的技术范围内。进而，通过将各实施方式中分别公开的技术手段组合，可形成新的技术特征。
[实施例]
作为实施例，制作如图7的(c)所示的样品分离器具。作为分离介质，使用利用pH7.0的Bis-Tris缓冲液的10％聚丙烯酰胺凝胶。作为固定层，使用涂布紫外线固化型粘接剂(产品名：“LOCTITE3301”、Henkel公司制)而成的粘接层。
将该样品分离器具组入到如图2所示的样品分析装置，进行电泳及转印。作为样品，使用预染标准参照物。作为缓冲液，使用Sharp Manufacturing Systems股份有限公司制造的DIRECT BLOT用缓冲液。电泳以50mA定电流条件实施。将所获得的转印膜的照片示于图13的(a)。
作为参考例，制作专利文献1记载的样品分离器具。也就是说，以覆盖开口的方式将多孔质膜粘接在收容部，并在多孔质膜安装与收容部内的凝胶分开的凝胶。作为凝胶，使用利用pH7.0的Bis-Tris缓冲液的10％聚丙烯酰胺凝胶。
然后，与实施例同样地进行电泳及转印。将所获得的转印膜的照片示于图13的(b)。
如图13所示，根据实施例，可获得不逊色于参考例的结果。也就是说，根据本发明的一形态的样品分离器具及样品分析装置，可较好地执行排出转印。
本申请基于日本专利特愿2016-042841(2016年3月4日申请)，且主张基于日本专利特愿2016-042841的巴黎公约的优先权。日本专利特愿2016-042841的公开内容通过参照日本专利特愿2016-042841而引用在本说明书中。
[附图标记说明]
1 样品
10 分离介质
10a 延伸部分
10b 露出部分
11 转印膜
21 收容部
21a 周缘部
21b 开口
21c 开口
21d 缺口
21e 凹部(固定部)
23 移动部
24 导向件
31 阴极(电极)
32 阳极(电极)
41 固定层(固定部)
42 凹凸形状部(固定部)
43 多孔质膜(固定部)
50 样品分离器具
100 样品分析装置

Claims (16)

1.一种样品分离器具，用于排出转印，该样品分离器具具备分离介质和收容部，在该分离介质中对样品进行电泳，该分离介质具有端部，该样品从该分离介质的端部排出并被转印到转印膜，该转印膜以与该分离介质的端部相接、并且转印膜承受朝向分离介质施加张力的状态移动；
该收容部收容该分离介质，并且在该端部侧具有开口，
该分离介质具有通过该开口露出于该收容部的外部的露出部分，且该露出部分具有延伸到该收容部中的该开口的周缘部上的延伸部分；
在所述周缘部与所述延伸部分之间，设置着用于将所述分离介质固定在所述收容部的固定部。
2.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部包含粘接层。
3.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部包含形成在所述收容部的表面的凹凸形状部。
4.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部包含形成在所述收容部的表面的多孔质层。
5.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部包含一个面粘接在所述收容部的表面且另一个面粘接在所述分离介质的薄膜。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部还设置在所述收容部的内面与所述收容部内的所述分离介质之间。
7.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部具备以覆盖所述开口的方式粘接在所述收容部的多孔质膜，
该多孔质膜包含所述分离介质，且所述收容部内的所述分离介质、该多孔质膜中包含的所述分离介质、及所述露出部分成为一体。
8.根据权利要求1所述的样品分离器具，其特征在于：所述固定部包含形成在所述周缘部的凹部，且所述延伸部分的所述收容部侧的部分埋没在该凹部。
9.根据权利要求1至5中任一项所述的样品分离器具，其特征在于：所述收容部内的所述分离介质朝向所述开口而前端变细。
10.根据权利要求9所述的样品分离器具，其特征在于：所述开口位置上的所述分离介质的短边方向的宽度为500μm以下。
11.根据权利要求1至5中任一项所述的样品分离器具，其特征在于：在所述收容部的所述开口侧的端部设置着缺口。
12.根据权利要求11所述的样品分离器具，其特征在于：所述缺口变圆。
13.根据权利要求11所述的样品分离器具，其特征在于：所述延伸部分的所述缺口侧的端部变圆。
14.根据权利要求1至5中任一项所述的样品分离器具，其特征在于：所述延伸部分的从所述开口沿着所述转印膜的移动方向或其相反方向延伸到所述周缘部上，且所述延伸部分的从所述开口起的延伸宽度为所述延伸部分的延伸方向上的所述开口的宽度以上。
15.一种样品分析装置，其特征在于具备：
根据权利要求1至14中任一项所述的样品分离器具；
电极，用于对所述分离介质流通电流；
所述转印膜；及
移动部，使所述转印膜以与所述分离介质的所述端部相接的状态移动。
16.一种样品分析装置，其特征在于具备：
根据权利要求1至14中任一项所述的样品分离器具；
电极，用于对所述分离介质流通电流；
所述转印膜；及
移动部，使所述分离介质以所述分离介质的所述端部与所述转印膜相接的状态移动。
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