CN108686158B - 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108686158B
CN108686158B CN201710225207.2A CN201710225207A CN108686158B CN 108686158 B CN108686158 B CN 108686158B CN 201710225207 A CN201710225207 A CN 201710225207A CN 108686158 B CN108686158 B CN 108686158B
Authority
CN
China
Prior art keywords
liver cancer
preventing
radix
treating
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710225207.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108686158A (zh
Inventor
王允亮
奇日迈励图
刘洪远
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Yunhui Medicine Technology Co ltd
Original Assignee
Beijing Yunhui Medicine Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Yunhui Medicine Technology Co ltd filed Critical Beijing Yunhui Medicine Technology Co ltd
Priority to CN201710225207.2A priority Critical patent/CN108686158B/zh
Publication of CN108686158A publication Critical patent/CN108686158A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108686158B publication Critical patent/CN108686158B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/37—Digestive system
    • A61K35/413—Gall bladder; Bile
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/489—Sophora, e.g. necklacepod or mamani
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/537—Salvia (sage)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/85—Verbenaceae (Verbena family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
    • A61K36/9066—Curcuma, e.g. common turmeric, East Indian arrowroot or mango ginger
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，并进一步公开其制备方法。本发明所述防治肝癌前病变及肝癌的药物组合物，以桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉为原料药，利用各原料药之间君臣佐使的严格配比，充分发挥了对肝癌前病变的防治作用，以及对肝癌的治疗作用，对肝癌细胞具有明显的抑制效果。

Description

一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，并进一步公开其制备方法。
背景技术
癌症即恶性肿瘤，是目前世界上难于治愈的疾病之一，它是100多种相关疾病的统称。人们身体内所有器官都是由细胞组成，细胞增长和分化可满足身体需要，这种有序的过程可保持人们身体健康。当身体内细胞发生突变后，它会不断地分裂，不受身体控制，这些额外的大量细胞就形成肿瘤，形成癌症。恶性肿瘤的细胞能侵犯、破坏邻近的组织和器官；而且，癌细胞可从肿瘤中穿出，进入血液或淋巴系统，这就是癌症如何从原发的部位到其它器官形成新的肿瘤，这个过程就叫癌症转移，多数癌症是根据他们起始的器官或细胞类型来命名的。
原发性肝癌(primary carcinoma of liver，肝癌)是我国常见的恶性肿瘤之一。据20世纪90年代统计，我国肝癌的年死亡率为20.37/10万，在恶性肿瘤死亡顺位中占第2位，在城市中仅次于肺癌，农村中仅次于胃癌。
对于肝癌的治疗，就目前的治疗水平而言，其诊断已不是问题，由于血清甲胎蛋白(AFP)的临床应用和各种影像学技术的进步，特别是AFP和超声显像用于肝癌高危人群的监测，使肝癌能够在无症状和体征的亚临床期做出诊断。但是肝癌的治疗却非常困难，由于现今还没有研制出如广谱抗菌素那样能普遍杀死癌细胞的药物，所以对肝癌患者的治疗，仍是先进行手术切除，然后再通过放射疗法或者化学疗法杀灭癌细胞。但这两种方法在杀灭癌细胞的同时也会杀灭正常的健康细胞，致使癌症患者的抵抗力和免疫力下降，根治性切除后易导致癌症的复发，而且治疗的价格昂贵、费用高，一般家庭难以承担。
近十年来国内外的资料表明，单纯依靠外科手段来提高肝癌的治愈率、降低手术后复发率，已处于较为困难的阶段，探讨非手术治疗是当前提高癌症疗效的一个重要途径。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，以解决现有技术中手术治疗肝癌治愈率较低、复发率较高的问题。
为解决上述技术问题，本发明所述的防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，所述中药组合物的原料药组成为：桑寄生10-15重量份、生黄芪10-15重量份、丹参5-15重量份、郁金10-15重量份、苦参5-15重量份、莪术10-15重量份、马鞭草3-8重量份、熊胆粉0.5-2重量份。
优选的，所述中药组合物的原料药组成为：桑寄生12重量份、生黄芪12重量份、丹参9重量份、郁金9重量份、苦参9重量份、莪术9重量份、马鞭草6重量份、熊胆粉1重量份。
所述中药组合物添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
本发明还公开了由所述的防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，添加常规辅料，按照常规工艺制成的临床上可接受的制剂。
所述制剂包括颗粒剂、片剂、合剂、滴丸剂、丸剂、胶囊剂。
本发明还公开了一种制备所述的防治肝癌前病变及肝癌制剂的方法，包括取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀的步骤，并添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
优选的，所述的制备防治肝癌前病变及肝癌制剂的方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
更优的，所述的制备防治肝癌前病变及肝癌制剂的方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量2-4重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
更优的，所述步骤(1)中，所述煎煮步骤具体为每次加入药物总量1-2重量倍量的水进行煎煮2次。
本发明还公开了所述中药组合物用于制备防治肝癌前病变及肝癌药物的用途。
本发明所述防治肝癌前病变及肝癌的药物组合物，以桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉为原料药，其中，
桑寄生，味苦、甘，性平，入肝、肾经；具有补肝肾、强筋骨、祛风湿之功效；主治腰膝酸痛、筋骨痿弱、肢体偏枯、风湿痹痛等症；
生黄芪，味甘、微温，归肺、脾、肝、肾经；具有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效；用于治疗气虚乏力、内热消渴等症；
丹参，味苦、微寒，入心、肝经；具有活血散淤、消肿止血、消炎止痛、调经止痛、扩张冠状动脉、改善心肌缺血状况、降低血压、安神静心、降血糖和抗菌等功效；对症瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛等病症有一定的疗效；
郁金，味辛、苦，性凉，入心、肺、肝经；具有行气解郁、凉血破瘀之功效；主治失心癫狂、热病神昏等症；
苦参，味苦、性寒，入肝、肾、大肠、小肠经、心经、膀胱经；具有清热燥湿之功效；主治湿热泻痢、肠风便血、黄疸、小便不利等症；
莪术，主治气血凝滞、心腹胀痛、症瘕、宿食不消、跌打损伤作痛等症；
马鞭草，味苦、性凉，归肝、脾经；具有活血散瘀、截疟、解毒、利水消肿之功效；主治症瘕积聚、经闭痛经、疟疾、喉痹、痈肿、水肿、热淋等症；
熊胆粉，具有清热、平肝、明目之功效；用于惊风抽搐，外治目赤肿痛，咽喉肿痛等症。
中医理论认为虚证是肿瘤发生发展的重要原因和病机，因正气不足、气血虚弱、导致脏腑功能失调，因而出现气滞、血瘀、湿聚、痰结等一系列病理变化，并最终形成肿瘤。临床实践也充分证明扶正培本可以缓解症状、提高生存质量、延长生存期、降低放化疗的毒副作用等，对于某些肿瘤可有效降低复发率、提高治愈率的作用。
本发明所述防治肝癌前病变及肝癌的药物组合物，利用各原料药之间君臣佐使的严格配比，具有扶正培本、益气补肾、利湿解毒和活血散结之功效。药理实验显示，本发明所述药物组合物可有效抑制肿瘤增长及促进肿瘤细胞凋亡，充分发挥了对肝癌前病变的防治作用，对肝癌细胞具有明显的抑制效果，可有效用于肝癌的治疗作用。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，
图1为HepG2细胞用药前后的细胞形态对比图；
图2为97H细胞用药前后的细胞形态对比图；
图3为SMMC-7721细胞用药前后的细胞形态对比图；
图4为Huh7细胞用药前后的细胞形态对比图；
图5为MHCC97L细胞用药前后的细胞形态对比图；
图6为HepG2细胞的成瘤检测结果；
图7为97H细胞的成瘤检测结果。
具体实施方式
实施例1颗粒剂
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的颗粒剂的原料药组成为：桑寄生10g、生黄芪15g；丹参5g；郁金15g；苦参5g；莪术15g；马鞭草3g；熊胆粉2g。
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的颗粒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量2重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的颗粒剂。
实施例2片剂
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的片剂的原料药组成为：桑寄生15g、生黄芪10g；丹参15g；郁金10g；苦参15g；莪术10g；马鞭草8g；熊胆粉0.5g。
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的片剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量4重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的片剂。
实施例3颗粒剂
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的颗粒剂的原料药组成为：桑寄生12g、生黄芪12g、丹参9g、郁金9g、苦参9g、莪术9g、马鞭草6g、熊胆粉1g。
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的颗粒剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量3重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的颗粒剂。
实施例4胶囊剂
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的胶囊剂的原料药组成为：桑寄生11g、生黄芪13g、丹参7g、郁金12g、苦参7g、莪术12g、马鞭草5g、熊胆粉1.5g。
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的胶囊剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量3重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂。
实施例5丸剂
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的丸剂的原料药组成为：桑寄生13g、生黄芪11g、丹参12g、郁金9.5g、苦参12g、莪术9.5g、马鞭草7g、熊胆粉0.8g。
本实施例所述防治肝癌前病变及肝癌的丸剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量3重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的丸剂。
实验例
一、实验试剂与仪器
1.实验主要试剂
Figure BDA0001265013340000071
Figure BDA0001265013340000081
2.实验主要仪器
仪器名称 仪器型号 厂家
二氧化碳培养箱 MCO-15AC型 SANYO
倒置显微镜 XDS-2B型 重庆光电
超净台 SW-CJ-1D型 江苏通净
离心机 Centrifuge 5415D Eppendorf
酶标仪 MultiSkan3 Thermo
层流柜 苏杭
二、实验方法
1、供试药物
取桑寄生12g、生黄芪12g、丹参9g、郁金9g、苦参9g、莪术9g、马鞭草6g、熊胆粉1g，混匀并加入占药物总量3重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液。
2、细胞培养及收集
2.1细胞复苏
42℃水浴在1min内快速溶解冻存细胞，放置于T-25培养瓶培养。
2.2细胞日常维护
(1)将细胞原生长培养基弃掉，用无血清培养基清洗2次；
(2)加入0.25％胰酶，1ml/T-25，以盖住细胞容器底部为准，37℃孵育1-3min；
(3)加入5ml生长培养基，重悬细胞，对细胞进行计数，1000rpm离心5min；
(4)弃上清，细胞沉淀可进行冻存、用于药物筛选或收集细胞。
各种肝癌细胞系对应生长培养基如下表1。
表1各种肝癌细胞系对应生长培养基
英文名称 中文名称 生长特点 培养条件
L-02 人正常肝细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
HepG2 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
MHCC97-H 高转移人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的DMEM
Hcclm3 人高转移肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
SMMC-7721 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
HCCC-9810 人胆管细胞型肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
Hep B1.2 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的MEM-EBSS
Hep3b 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的MEM-EBSS
HuH-6 人肝母细胞瘤细胞； 贴壁生长 含10％FBS的1640
HuH-7 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
SK-HEP-1 人肝腹水腺癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
HB611 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的DMEM
BEL-7402 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
BEL-7404 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
BEL-7405 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的1640
PLC/PRF/5 人肝癌细胞 贴壁生长 含10％FBS的MEM-EBSS
3、药物对正常肝细胞的无毒浓度筛选
(1)将L02细胞原培养液弃掉，用0.25％胰酶37℃消化细胞2min后，加入生长培养基重悬细胞，调整细胞密度为5×104个/ml；
(2)加入96孔细胞培养板内，100ul/孔，继续培养24h；
(3)更换无血清培养，同步化24h；
(4)用不同浓度供试药物(浓度为20％、10％、5％、2.5％和1.25％)作用细胞48h；
(5)48h后弃原有培养基，加入100ul培养基和10ul MTT，37℃反应4h；
(6)弃培养基，加入100ul 10％SDS溶解细胞，570nm下读取吸光值，并计算细胞抑制率，筛选出A对正常肝细胞的无毒浓度；
细胞抑制率＝(对照OD值-实验组OD值)/对照OD值×100％。
4、药物对正常细胞无毒浓度下对肝癌细胞的生长抑制效果检测
(1)将所有肝癌细胞原培养液弃掉，用0.25％胰酶37℃消化细胞2min后，加入生长培养基重悬细胞，调整细胞密度为5×106个/ml；
(2)加入96孔细胞培养板内，100ul/孔，继续培养24h；
(3)更换无血清培养，同步化24h；
(4)用方法上述3项中方法筛选获得的无毒浓度作用肝癌细胞48h；
(5)弃原有培养基，加入100ul培养基和10ul MTT，37℃反应4h；
(6)弃培养基，加入100ul 10％SDS溶解细胞，570nm下读取吸光值，并计算细胞抑制率，观察对各种肝癌细胞的生长抑制率，每次3孔重复，至少重复3次；
细胞抑制率＝(对照OD值-实验组OD值)/对照OD值×100％。
5、细胞收集、接种
(1)将HepG2细胞原生长培养基弃掉，用无血清培养基清洗2次；
(2)加入0.25％胰酶，1ml/T-25，以盖住细胞容器底部为准，37℃孵育1-3min；
(3)加入5ml生长培养基，重悬细胞，对细胞进行计数，1000rpm离心5min；
(4)弃上清，用10mM PBS洗涤细胞两次，每次1000rpm离心5min；
(5)用10mM PBS调整细胞密度为5×107个/ml；
(6)按5×106个/0.1ml/只的量接种于B/C裸鼠腋下；
(7)接种7-10天后，肉眼可见的肿瘤时，随机分为两组：中药组，按1.0ml/只/天灌胃A药；对照组，按1.0ml/只/天灌胃10mM无菌PBS；
(8)经18天的持续灌胃后，对比观察两组腋下肿瘤组织肿瘤、大小，确认A药对肝癌细胞的抑制作用。
三、实验结果
1、正常肝细胞无毒浓度摸索结果
按照上述方法检测正常肝细胞无毒浓度结果，见下表2。
表2正常肝细胞无毒浓度摸索结果
Figure BDA0001265013340000111
2、肝癌细胞抑制效果检测结果
按照上述方法检测肝癌细胞抑制效果，检测结果见下表3。
表3肝癌细胞抑制效果检测结果
Figure BDA0001265013340000112
同时对HepG2细胞、97H细胞、SMMC-7721细胞、Huh7细胞和MHCC97L细胞，在中药作用前后的细胞形态进行拍照，观察中药对细胞生长的抑制情况，细胞形态结果见图1-5。
3、裸鼠成瘤及抑瘤结果
分别选择HepG2细胞、97H细胞、SMMC-7721细胞、Huh7细胞和MHCC97L细胞进行成瘤、抑瘤效果检测，其中SMMC-7721细胞、Huh7细胞和MHCC97L细胞成瘤不成功；HepG2细胞和97H细胞的成瘤情况及用药情况检测结果分别见图6、7。可见，中药用药组肿瘤明显被抑制。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (8)

1.一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的原料药组成为：桑寄生10-15重量份、生黄芪10-15重量份、丹参5-15重量份、郁金10-15重量份、苦参5-15重量份、莪术10-15重量份、马鞭草3-8重量份、熊胆粉0.5-2重量份。
2.根据权利要求1所述的防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
3.一种防治肝癌前病变及肝癌的制剂，其特征在于，由权利要求1或2所述的防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物，添加常规辅料，按照常规工艺制成的临床上可接受的制剂。
4.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于，所述制剂包括颗粒剂、片剂、合剂、丸剂、胶囊剂。
5.一种制备权利要求3或4所述的防治肝癌前病变及肝癌的制剂的方法，其特征在于，包括取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀的步骤，并添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
6.根据权利要求5所述的制备防治肝癌前病变及肝癌的制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
7.根据权利要求5或6所述的制备防治肝癌前病变及肝癌的制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取选定量的桑寄生、生黄芪、丹参、郁金、苦参、莪术、马鞭草、熊胆粉混匀，加入占药物总量2-4重量倍量的水进行煎煮提取，收集煎煮液，并浓缩至清膏，备用；
(2)取所得清膏添加常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的制剂。
8.权利要求1或2所述中药组合物用于制备防治肝癌前病变及肝癌药物的用途。
CN201710225207.2A 2017-04-07 2017-04-07 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法 Active CN108686158B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710225207.2A CN108686158B (zh) 2017-04-07 2017-04-07 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710225207.2A CN108686158B (zh) 2017-04-07 2017-04-07 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108686158A CN108686158A (zh) 2018-10-23
CN108686158B true CN108686158B (zh) 2021-03-16

Family

ID=63842230

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710225207.2A Active CN108686158B (zh) 2017-04-07 2017-04-07 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108686158B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103212002A (zh) * 2013-04-23 2013-07-24 石家庄中晶生物科技有限公司 一种治疗肝癌的药物及其制备方法
CN104707097A (zh) * 2013-12-17 2015-06-17 首都医科大学 药物组合物槲芪散及其在制备用于阻断肝癌前病变、治疗肝癌或病毒性肝炎的药物中的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103212002A (zh) * 2013-04-23 2013-07-24 石家庄中晶生物科技有限公司 一种治疗肝癌的药物及其制备方法
CN104707097A (zh) * 2013-12-17 2015-06-17 首都医科大学 药物组合物槲芪散及其在制备用于阻断肝癌前病变、治疗肝癌或病毒性肝炎的药物中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"熊胆粉的药理学研究进展";寇冠军等;《中国药物评价》;20141231;第31卷(第3期);第143页右栏第2段第12-15行 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108686158A (zh) 2018-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101711848B (zh) 一种辅助治疗肿瘤的中药组合物
CN104189494A (zh) 一种治疗肝郁气滞型急性乳腺炎的中药药物及护理方法
CN103463554B (zh) 一种治疗恶性肿瘤的药物组合物及制备方法和用途
CN105535859A (zh) 一种用于治疗胃癌的中药制剂及其制备方法
CN104189597B (zh) 一种治疗胃热壅盛型急性乳腺炎的中药及其制备方法
CN108686158B (zh) 一种防治肝癌前病变及肝癌的中药组合物及其制备方法
CN111375035A (zh) 一种治疗颈椎病的肠溶制剂的制备及应用
CN110101820B (zh) 一种用于治疗肥胖症的中药组合物
CN103977370A (zh) 一种具有利水消肿作用的药物组合物
CN106109917A (zh) 一种治疗甲状腺瘤的外用理疗液
CN106668409A (zh) 回族中药舌草食管抗癌口服液及其制备方法
CN105902897A (zh) 一种治疗胰腺癌的药物制剂及其用途
CN102389465B (zh) 一种治疗胃病的中药组合物及制备方法
CN104825817A (zh) 一种具有抗肿瘤作用的中药制剂
CN105435134A (zh) 联合化疗药治疗胃癌的中药制剂
CN104013815A (zh) 一种治疗阴虚火旺型复发性口腔溃疡的中药及制备方法
CN104825922A (zh) 具有抗结直肠癌活性的中药组合物及其制备方法和应用
CN104547715A (zh) 一种治疗胃热壅盛型急性乳腺炎的中药及制备方法
CN104225016A (zh) 一种治疗脾胃虚弱型慢性萎缩性胃炎的药物组合物
CN113952435B (zh) 一种辅助治疗肝癌的中药组合物及其制备方法
CN107661392A (zh) 一种治疗食道癌的中药复方及其制备方法
CN106177347A (zh) 一种治疗便秘的药物组合物
CN106727752A (zh) 治疗滑膜炎的药物组合物及其制备方法
CN105920436A (zh) 一种用于治疗肺癌的药物制剂及其制备方法
CN105833228A (zh) 一种逆转胃癌耐药性的药物制剂及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant