CN108605949B

CN108605949B - 一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用

Info

Publication number: CN108605949B
Application number: CN201810628852.3A
Authority: CN
Inventors: 翁建全; 徐雯秀; 周智勇; 周亮; 刘幸海
Original assignee: Hangzhou Hangyang Chemical & Medical Engineering Co ltd; Zhejiang University of Technology ZJUT
Current assignee: Hangzhou Hangyang Chemical & Medical Engineering Co ltd; Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date: 2018-06-19
Filing date: 2018-06-19
Publication date: 2020-12-15
Anticipated expiration: 2038-06-19
Also published as: CN108605949A

Abstract

本发明公开了一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用。在实施例中对合成的化合物进行了作为小麦赤霉病菌、黄瓜蔓枯病菌、番茄灰霉病菌及水稻纹枯病菌的抗真菌活性测定，从实施例的测定结构可以得到，在100 mg/L浓度下，本发明的(E)‑4‑(2,6‑二氟苯基)‑2‑取代苯乙烯基噻唑类化合物，对供试靶标均表现出一定的抑制活性，其中化合物Ic、If、Ii对小麦赤霉病菌抑制率均在50%以上，化合物Id和Ii对黄瓜蔓枯病菌的抑制率在55%以上，其中Id对其抑制率为61.6%，表现出中等抑制活性。

Description

一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用

技术领域

本发明涉及含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用。

背景技术

二苯乙烯类化合物作为植物抗毒素在自然界中广泛存在，如蓼科植物毛藜芦、何首乌、虎杖，百合科菝葜属植物穿鞘菝葜、决明、桑树根等。天然源的二苯乙烯类化合物具有多种生物活性而引起人们的广泛关注，在新药研发领域具有十分重要的作用。比如，在医药领域具有抗肿瘤(Bioorgan Med Chem, 2008, 16(7): 3800-3808)、抗氧化(JBiol Chem,2001, 276(25): 22586-22594)、抗炎(J Agr Food Chem, 2017, 65(51): 11179-11191)、抗HIV(J Pharm Sci, 2004, 93(10): 2448-2457)等活性；在农药领域具有杀虫(ChemPharmBull, 1992, 40(5): 1130-1136)、抗真菌(Med Chem Res, 2013, 22(5): 2196-2206)、溶藻(J Agr Food Chem, 2015, 63(5): 1370-1377)等活性。此外，噻唑杂环化合物也具有广谱的生物活性，广泛应用于医药和农药领域，如在医药领域具有抗炎(BioorganMed Chem,2011, 19(10): 3135-3140)、抗真菌(Eur J Med Chem, 2011, 46(9): 3681-3689)、抗癌(Bioorg Med Chem Lett, 2011, 21(7): 1965-1968)等生物活性；在农药领域具有除草(Bioorg Med Chem Lett, 2010, 20(11): 3348-3351)、杀虫(有机化学, 2009,29(12): 2000-2004)、杀菌(J Agr Food Chem, 2009, 57(10): 4279-4286)等生物活性，且有多种商品化杀菌剂(农药,2004, 43(11): 515-517)。

本申请在前期工作中，设计合成了一类具有良好生物活性的含氟苯基噻唑丙烯腈类化合物(有机化学, 2009, 29(12): 2000-2004；农药学学报, 2010, 12(4): 463-467)。鉴于二苯乙烯类化合物和噻唑杂环类化合物均具有良好的生物活性，本发明利用活性亚结构拼接和生物等排体取代的方法将二苯乙烯骨架中的一个苯环用含氟苯基噻唑取代，设计合成了一类新型含噻唑环的类二苯乙烯化合物，有望具有较好的生物活性。

本发明设计并合成的系列含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其结构以及生物活性研究均未见有文献报道。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用，含噻唑环的类二苯乙烯化合物即(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-取代苯乙烯基噻唑类化合物。

所述的一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀菌剂的应用，其特征在于含噻唑环的类二苯乙烯化合物的结构如式(I)所示：

其中，苯环上的H被取代基R单取代、多取代或不被取代；

n为0~5的整数，优选为1~2的整数，n表示苯环上取代基R的个数；n=0时，表示苯环上的H不被取代；n=1时，表示苯环上的H被取代基R单取代；n=2~5时，表示苯环上的H被取代基R多取代，不同取代位置上的取代基R相同或者不同；

所述取代基R为氢、C1~C8的烷基或C1~C8的卤代烷基、C1~C3的烷氧基、卤素、硝基或氰基。

所述的一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为小麦赤霉病菌、黄瓜蔓枯病菌的杀菌剂的应用，其特征在于R(n)为氢、邻甲基、间甲基、对甲基、邻甲氧基、对甲氧基、间甲氧基、对叔丁基、对三氟甲基、对氟、邻氯、对氯、邻溴、间溴或2,4-二氯。

所述的一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为番茄灰霉病菌的杀菌剂的应用，R(n)为氢、邻甲基、对甲基、邻甲氧基、间甲氧基、对叔丁基、对三氟甲基、对氟、邻氯、对氯、邻溴、间溴或2,4-二氯。

所述的一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为水稻纹枯病菌的杀菌剂的应用，R(n)为氢、邻甲基、间甲基、对甲基、邻甲氧基、对甲氧基、间甲氧基、对三氟甲基、对氟、邻氯、对氯、邻溴、间溴或2,4-二氯。

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

1）如式（Ⅱ）所示的2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑与如式（Ⅲ）所示的亚磷酸三乙酯于回流状态下进行反应，TLC监测至反应结束后，浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；

2）在步骤1）所得浓缩液中加入溶剂DMF、氢氧化钠和如式(IV)所示的取代苯甲醛，在室温下反应，TLC监测至反应结束，最后经后处理制得如式(I)所示的含噻唑环的类二苯乙烯化合物；

式(IV) 中，苯环上的H被取代基R单取代、多取代或不被取代；

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其特征在于如式(Ⅱ)所示的2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑、如式( III )所示的亚磷酸三乙酯、如式(IV)所示的取代苯甲醛以及氢氧化钠的投料物质的量之比为1 : 1.0～30.0 : 1.0～8.0 : 1.0～20.0，优选为1 :5.0～20.0 : 1.0～3.0 : 1.0～5.0。

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其特征在于如式(Ⅱ)所示的2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑与溶剂DMF的质量比为1 : 2.0～20，优选为1 : 4.0～10。

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其特征在于步骤1）的反应时间为1~3小时，步骤2）的反应时间为1.5~4小时。

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其特征在于步骤2）后处理过程如下：反应结束后，反应液中加入大量冰水，搅拌，若有固体析出，过滤，重结晶提纯得到如式（I）所示的含噻唑环的类二苯乙烯化合物；若无固体析出，则用乙酸乙酯萃取，脱溶，残余液体用柱层析分离得到如式（I）所示的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，冰水的加入体积与2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑的质量比为33-50:1，体积单位为mL，质量单位为g，由于DMF量比较少，加入大量水能保证产品的析出。

所述的含噻唑环的类二苯乙烯化合物，其特征在于重结晶所用溶剂为乙醇、乙酸乙酯、正己烷、石油醚中的一种或两种以上的混合液；柱层析所用洗脱剂为乙酸乙酯与正己烷的混合液，或者为乙酸乙酯与石油醚的混合液。

与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：

本发明提供了一类新型的含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为杀剂的应用，特别适用于小麦赤霉病菌、黄瓜蔓枯病菌、番茄灰霉病菌及水稻纹枯病菌等真菌，从实施例的抗菌活性测试结果表明，在100 mg/L浓度下，本发明的含噻唑环的类二苯乙烯化合物对供试靶标均表现出一定的抑制活性，其中化合物Ic、If、Ii对小麦赤霉病菌抑制率均在50%以上，化合物Id和Ii对黄瓜蔓枯病菌的抑制率在55%以上，其中Id对其抑制率为61.6%，表现出中等抑制活性。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围并不限于此。

实施例1 衍生物Ia (R(n)=H)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入15 mL (86.8mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、苯甲醛(1.3g, 12 mmol)和氢氧化钠(0.9 g, 22 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙酸乙酯重结晶得黄色固体1.6 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-苯乙烯基噻唑，计算其收率为54.7%。m.p.: 79～80℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.56 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.50 –7.37 (m, 5H), 7.37 – 7.26 (m, 2H), 7.02 (t, J = 8.0 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₁F₂NS [M+H]⁺300.0688, found 300.0662。

实施例2 衍生物Ib (R(n)=邻氯)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入9.0 mL (50.0mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入25mL DMF、邻氯苯甲醛(1.4g, 10 mmol)和氢氧化钠(1.3 g, 32 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3.5个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙醇重结晶得黄色固体1.4 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-邻氯苯乙烯基噻唑，计算其收率为40.6%。 m.p.: 87～89℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.83 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.74 –7.67 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.48 – 7.38 (m, 2H), 7.38 –7.20 (m, 3H), 7.02 (t, J = 8.5 Hz, 1H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₀ClF₂NS [M+H]⁺334.0263, found 334.0250。

实施例3 衍生物Ic (R(n)=对氯)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入12 mL (69.5mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约3 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入22 mL DMF、对氯苯甲醛(2.8 g, 20 mmol)和氢氧化钠(2.0 g, 50 mmol)反应。TLC检测反应过程，约2.5个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用正己烷重结晶得黄色固体1.9 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对氯苯乙烯基噻唑，计算其收率为56.1%。 m.p.: 91～93℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.50 – 7.45 (m, 3H), 7.40 (d, J =16.0 Hz, 1H), 7.38 – 7.29 (m, 4H), 7.02 (t, J = 8.0 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₀ClF₂NS [M+H]⁺334.0263, found 334.0254。

实施例4 衍生物Id (R(n)=对三氟甲基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入16 mL (92.6mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约2 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入30 mL DMF、对三氟甲基苯甲醛(5.3 g, 30mmol)和氢氧化钠(1.2 g, 30 mmol)反应。TLC检测反应过程，约2个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙酸乙酯和石油醚混合液（V乙酸乙酯: V石油醚=1 : 1）重结晶得黄色固体2.3 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对三氟甲基苯乙烯基噻唑，计算其收率为62.4%。m.p.: 117～119℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.65 (s, 4H), 7.52 (s, 1H), 7.47 (s,2H), 7.39 – 7.30 (m, 1H), 7.03 (t, J = 8.0 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₀F₅NS [M+H]⁺368.0527, found 368.0511。

实施例5 衍生物Ie (R(n)=对甲氧基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入35 mL (200 mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入15 mL DMF、对甲氧基苯甲醛(3.4 g, 25 mmol)和氢氧化钠(1.6 g, 40 mmol)反应。TLC检测反应过程，约1.5个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙醇重结晶得黄色固体2.2 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对甲氧基苯乙烯基噻唑，计算其收率为68.0%。m.p.: 132～133℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.51 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.43 (s,1H), 7.41 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.37 – 7.31 (m, 1H), 7.28 (d, J = 16.0 Hz,1H), 7.02 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NOS [M+H]⁺330.0759, found 330.0747。

实施例6 衍生物If (R(n)=2,4-二氯)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入11 mL (63.7mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约3 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入18 mL DMF、2,4-二氯苯甲醛(3.4 g, 25 mmol)和氢氧化钠(0.8 g, 20 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用环己烷重结晶得黄色固体1.8 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-(2,4-二氯苯乙烯基)噻唑，计算其收率为48.2%。m.p.: 107～108℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.72 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.60 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 16.0Hz, 1H), 7.34 – 7.28 (m, 1H), 7.25 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.01 (t, J =8.0 Hz, 1H)；HRMS (ESI) calcd C₁₇H₉Cl₂F₂NS [M+H]⁺367.9874, found 367.9873。

实施例7 衍生物Ig (R(n)=对甲基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入10 mL (57.9mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、对甲基苯甲醛(1.5 g, 12 mmol)和氢氧化钠(0.4 g, 10 mmol)反应。TLC检测反应过程，约4个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用石油醚重结晶得黄色固体2.1 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对甲基苯乙烯基噻唑，收率66.3%。m.p.: 149～150℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.50 – 7.41 (m, 4H), 7.37 (d, J =16.0 Hz, 1H), 7.35 – 7.28 (m, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.02 (t, J = 8.0Hz, 2H), 2.38 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NS [M+H]⁺314.0810, found 314.0804。

实施例8 衍生物Ih (R(n)=对叔丁基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入26 mL (150 mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约3 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、对叔丁基苯甲醛(2.5 g, 15 mmol)和氢氧化钠(0.8 g, 20 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3.5个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用石油醚重结晶得黄色固体1.5 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对叔丁基苯乙烯基噻唑，收率43.5%。m.p.: 55～60℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.47 –7.41 (m, 4H), 7.39 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.36 – 7.29 (m, 1H), 7.02 (t, J =8.0 Hz, 2H), 1.36 (s, 9H)；

HRMS (ESI) calcd C₂₁H₁₉F₂NS [M+H]⁺356.1206, found 356.1119。

实施例9 衍生物Ii (R(n)=对氟)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入17 mL (98.43mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入28 mL DMF、对氟苯甲醛(2.3 g, 18 mmol)和氢氧化钠(1.2 g, 30 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙醇重结晶得黄色固体1.7 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-对氟苯乙烯基噻唑，收率555.3%。m.p.: 95～99℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.52 (dd, J = 8.5, 5.0 Hz, 2H), 7.46(s, 1H), 7.41 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.36 – 7.27 (m, 2H), 7.08 (t, J = 8.5 Hz,2H), 7.01 (t, J = 8.5 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₀F₃NS [M+H]⁺318.0559, found 318.0552。

实施例10 衍生物Ij (R(n)=邻甲基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入10 mL (57.9mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约2.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、邻甲基苯甲醛(2.6 g, 22 mmol)和氢氧化钠(0.8 g, 20 mmol)反应。TLC检测反应过程，约2.5个小时反应结束，将反应液倒入100 mL冰水，搅拌，乙酸乙酯萃取，然后柱层析（所用洗脱剂为乙酸乙酯与正己烷的混合液，V乙酸乙酯: V正己烷=1 : 4）分离得黄色液体2.1 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-邻甲基苯乙烯基噻唑，收率67.6%。

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.72 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.68 –7.60 (m, 1H), 7.47 (s, , 1H), 7.37 – 7.30 (m,2H), 7.28 – 7.20 (m, 3H), 7.07 –6.99 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.49 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NS [M+H]⁺314.0810, found 314.0802。

实施例11 衍生物Ik (R(n)=间甲基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入18 mL (104.2mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约3 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、间甲基苯甲醛(1.8 g, 15 mmol)和氢氧化钠(1.6 g, 40 mmol)反应。TLC检测反应过程，约2.5个小时反应结束，将反应液倒入100 mL冰水，搅拌，乙酸乙酯萃取，然后用柱层析（所用洗脱剂为乙酸乙酯与正己烷的混合液，V乙酸乙酯: V正己烷=1 : 5）分离得黄色液体1.8 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-间甲基苯乙烯基噻唑，收率57.3%。 ¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.46 (s, 1H),7.43 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 7.31 (m, 2H), 7.16 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.02 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 2.39 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NS [M+H]⁺314.0810, found 314.0788。

实施例12 衍生物Il (R(n)=间溴)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入10 mL (57.9mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约2 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入24 mL DMF、间溴苯甲醛(3.7 g, 20 mmol)和氢氧化钠(1.6 g, 40 mmol)反应。TLC检测反应过程，约4个小时反应结束，将反应液倒入100mL冰水，搅拌，乙酸乙酯萃取，然后用柱层析（所用洗脱剂为乙酸乙酯与正己烷的混合液，V乙酸乙酯: V石油醚=1 : 3）分离得黄色液体1.7 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-间溴苯乙烯基噻唑，收率45.2%。

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.68 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.45 (t,J = 8.0 Hz, 2H), 7.36 (s, 2H), 7.35 – 7.29 (m, 1H), 7.24 (t, J = 8.0 Hz, 1H),7.02 (t, J = 8.0 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₀BrF₂NS [M+H]⁺377.9758, found 377.9753。

实施例13 衍生物Im (R(n)=邻溴)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入13 mL (75.2mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约2.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、邻溴苯甲醛(2.8 g, 15 mmol)和氢氧化钠(1.2 g, 30 mmol)反应。TLC检测反应过程，约3个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用乙酸乙酯和正己烷混合液（V乙酸乙酯 : V正己烷=2 : 1）重结晶得黄色固体1.8 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-邻溴苯乙烯基噻唑，收率48.4%。m.p.: 75～77℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.77 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.68 (dd,J = 7.5, 1.0 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.41 –7.27 (m, 3H), 7.17 (td, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 8.0 Hz, 2H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₇H₁₀BrF₂NS [M+H]⁺377.9758, found 377.9755。

实施例14 衍生物In (R(n)=间甲氧基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入15 mL (86.8mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约1.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、间甲氧基苯甲醛(2.5 g, 18mmol)和氢氧化钠(1.0 g, 25 mmol)反应。TLC检测反应过程，约1.5个小时反应结束，将反应液倒入150 mL冰水，搅拌，有固体析出，过滤，然后用石油醚重结晶得黄色固体2.2 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-间甲氧基苯乙烯基噻唑，收率67.4%。m.p.: 60～62℃；

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.48 (s, 1H), 7.42 (s, 2H), 7.37 –7.27 (m, 2H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 7.02 (t, J= 8.5 Hz, 2H), 6.90 (dd, J = 8.0, 2.5 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NOS [M+H]⁺330.0759, found 330.0749。

实施例15 衍生物Io (R(n)=邻甲氧基)的合成：

将2-(溴甲基)-4-(2,6-二氟苯基)噻唑(2.9 g, 10 mmol)加入10 mL (57.9mmol)亚磷酸三乙酯中，加热至回流，TLC检测反应，约2.5 h后反应完毕。浓缩脱去多余的亚磷酸三乙酯，得浓缩液；在所得浓缩液中加入20 mL DMF、邻甲氧基苯甲醛(2.1 g, 15mmol)和氢氧化钠(1.2 g, 30 mmol)反应。TLC检测反应过程，约2个小时反应结束，将反应液倒入100 mL冰水，搅拌，乙酸乙酯萃取，然后用柱层析（所用洗脱剂为乙酸乙酯与石油醚的混合液，V乙酸乙酯: V石油醚=1 : 5）分离得黄色液体1.6 g，即为(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-邻甲氧基苯乙烯基噻唑，收率50.1%。

¹H NMR (500 MHz, Chloroform-d) δ 7.76 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.58 (dd,J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.34 – 7.25(m, 2H), 7.05 – 6.97 (m, 3H), 6.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H)；

HRMS (ESI) calcd C₁₈H₁₃F₂NOS [M+H]⁺330.0759, found 330.0745。

实施例16 抗真菌活性测试：

试验靶标：小麦赤霉病菌FusaHum graminearum ，黄瓜蔓枯病菌Mycosphaerella melonis，番茄灰霉病菌Botrytis cinerea ，水稻纹枯病菌Thanatephorus cucumeris。

采用含药马铃薯琼脂培养基(PDA)法对实施例1～15合成的(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-取代苯乙烯基噻唑类化合物及空白药剂进行了上述靶标病菌的杀菌活性测定，普筛浓度为100 mg/L。

具体的，测试方法参照《农药生物活性评价SOP》。采用含药培养基法：取各500 mg/L化合物药液2 mL，加入冷却至45 ℃的8 mL的PDA中，制成终浓度为100 mg/L的含药培养基平板。然后从培养好的试验病菌菌落边缘取6.5 mm直径菌丝块，移至含药培养基上，每处理4次重复（每个样品同样程序测试4次，最后计算平均抑制率）。处理完毕，置于28℃的恒温生化培养箱中培养，4天后测量菌落直径，计算生长抑制率。

生长抑制率( % ) = [(空白对照菌落直径 – 处理菌落直径) / 空白对照菌落直径] × 100 %

测试结果见表1。

表1 100 mg/L下化合物Ia-Io的杀菌活性

注：嘧菌酯为对照药物，CK为空白对照。

表1杀菌活性测试结果表明，在100 mg/L浓度下，本发明的(E)-4-(2,6-二氟苯基)-2-取代苯乙烯基噻唑类化合物，对供试靶标均表现出一定的抑制活性，其中化合物Ic、If、Ii对小麦赤霉病菌抑制率均在50%以上，化合物Id和Ii对黄瓜蔓枯病菌的抑制率在55%以上，其中Id对其抑制率为61.6%，表现出中等抑制活性。

本说明书所述的内容仅仅是对发明构思实现形式的列举，本发明的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式，本发明的保护范围也仅仅于本领域技术人员根据本发明构思所能够想到的等同技术手段。

Claims

1.一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为防治小麦赤霉病菌的杀菌剂的应用，其特征在于含噻唑环的类二苯乙烯化合物的结构如式(I)所示：

其中，R(n)为对氯、对三氟甲基、2,4-二氯、对氟。

2.一种含噻唑环的类二苯乙烯化合物作为防治黄瓜蔓枯病菌的杀菌剂的应用，其特征在于含噻唑环的类二苯乙烯化合物的结构如式(I)所示：

其中，R(n)为对三氟甲基、对氟。