CN108578476A - 一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物，其特征在于，包括200‑400重量份的大风子，100‑300重量份的黄芩，100‑300重量份的X，以及200‑700重量份的辅料，其中，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种。根据本发明提供的组合物的处方配伍中既有中医的清热解毒、驱邪扶正之功，又有现代医学的抗菌抗病毒、杀虫、调节免疫功能之效，具有保肝护肝、维持肠道健康，消除应激、提高存活率的功效，是防治鱼类诺卡氏菌等细菌感染性疾病的良方。

Description

一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，尤其是涉及一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物及其制备方法和应用。
背景技术
诺卡氏菌病，又称奴卡氏菌、结节病，在广东地区称为“白点病”。鱼类诺卡氏菌病于1963年在全球首次报告确认于阿根廷热带养殖鱼类，而自1967年开始严重危害日本海水养殖鱼类，并于近年对鱼类养殖生产危害愈演愈烈。诺卡氏菌病侵染的宿主越来越广，2005-2006年只在金鲳上分离到，现在对海鲈、篮子鱼、鮸鱼、红鱼、大黄鱼、加州鲈鱼(淡水)、乌鳢(淡水)都可造成不小危害，由于为慢性死亡，并没有引起足够重视。现已能分离20多种不同菌株，已经对多重药物耐受，令人担忧。患诺卡氏菌病的病鱼死前大多有离群独游、吃食差、反应迟钝、体表有红色出血点等症状，最显而易见的是肝脏表面有白色或淡黄色结节，有时结节也会出现在脾脏、肾脏、甚至是肠道脂肪上，严重时内脏上的结节转变成脓灶；肝脏变白变脆，脾脏、肾脏充血，在胸鳍、尾鳍等运动较多的部位易形成脓灶，有时在鳃盖的内外侧也会出现脓灶。诺卡氏菌病死亡率很高，在高温季节易发，每年4-11月流行，6-9月为高发期，15℃-32℃水温时均可发生，以25℃-28℃水温时发病最为严重，死亡率也较高；病程表现为慢性病，发病前期无症状或症状不明显，潜伏期长，从鱼类感染到发病死亡需要15-20天，往往死亡时已感染多时。
诺卡氏菌病发生有愈演愈烈的趋势，发病鱼规格越来越孝病情越来越严重，死亡率也越来越高。以生鱼为例，往年150克以上的规格才有发此病，今年为25克的小鱼。
目前诺卡氏菌病治疗还比较困难，除了因为致病菌是革兰氏阳性细菌、常用的水产内服药对该病治疗效果不佳外，还因为养殖户和一些鱼病防治人员对该病认识度不够，导致用药不当、加重病情。
诺卡氏菌在海水中含量其实并不高，是一种机会致病菌，当养殖鱼类体质虚弱、免疫力低下时，通过口腔、鳃或创伤而感染。该病自然发病率可达到15％～30％，严重的达到60％，死亡率可达100％。人工感染的死亡率可高达90％～100％。不少养殖业者，养病鱼和死鱼，经济损失严重，甚至不少养殖场破产倒闭，给整个养殖业的健康发展造成严重的威胁，已引起全社会关注。
研究发现中草药在水产行业有相应的作用与前景，农业部提倡大量发掘能对抗水产病害的中草药。因此，为了使水产养殖业健康、可持续地发展，研究开发出一种毒副作用小、无残留、病原体不易产生耐药性的中草药成为当前抗诺卡氏菌感染性疾病药物研究刻不容缓的任务。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种防治鱼类诺卡氏菌的组合物及其制备方法和应用，该组合物具有抗诺卡氏菌鱼感染性疾病、抗原虫、增强机体免疫力的作用。
为实现上述目的，本发明提供了一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物，其包括200-400重量份的大风子，100-300重量份的黄芩，100-300重量份的X，以及200-700重量份的辅料，其中，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种。
优选的，所述辅料为选自鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉、糊精、葡萄糖以及矿物质中的一种或多种。
优选的，还包括0.05wt％-0.1wt％的防腐剂。
本发明还提供一种上述防治鱼类诺卡氏菌的组合物的制备方法，其包括以下步骤：
S1)以乙醇溶液提取大风子和黄芩的混合物2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏A，其中，每次提取所用的乙醇溶液的浓度为85％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为所述大风子和黄芩的混合物的总重量的10-20倍；
S2)以乙醇溶液提取X 2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏B，其中，第一次提取所用的乙醇溶液的浓度为60％，第二次提取所用的乙醇溶液的浓度为30％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为X的重量的8-12倍，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种；
S3)将稠膏A与稠膏B合并，得到稠膏C；
S4)将所述稠膏C与辅料配制成所述防治鱼类诺卡氏菌的组合物。
优选的，步骤S4)中所述稠膏C与所述辅料采用如下之一的方法配制成所述防治鱼类诺卡氏菌的组合物：
方法A：取水加热至80-90℃，加入葡萄糖及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物A；
方法B：取鱼粉、粗蛋白、豆粕以及面粉混合均匀，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物B；
方法C：取水加热至80-90℃，加入糊精、葡萄糖以及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物C。
优选的，所述方法A还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物A放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物液体剂；所述方法B还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物B制成颗粒，在65-85℃下烘干，然后分装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物颗粒剂；所述方法C还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物C放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物膏剂。
优选的，方法A和方法C中水的用量为所述稠膏C的重量的30％-55％，方法A和方法C中在60℃下保温。
优选的，所述方法A、方法B和方法C中还分别包括在所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物A、防治鱼类诺卡氏菌病组合物B和防治鱼类诺卡氏菌病组合物C中加入0.05wt％-0.1wt％的防腐剂并搅拌均匀。
优选的，所述步骤S1)中所述稠膏A的重量为所述大风子和所述黄芩的总重量的35％-55％，所述步骤S3)中所述稠膏C的重量为所述大风子、所述黄芩以及所述X的总重量的25％-45％。
同时，本发明还提供一种上述防治鱼类诺卡氏菌的组合物在制备防治鱼类诺卡氏菌药物中的应用。
根据本发明提供的防治鱼类诺卡氏菌病的组合物，其配方中的大风子味辛、性温，解毒、利湿、止痛，具有抗产肮假丝酵母、根瘤农杆菌和变形杆菌的功效；而黄芩味苦、性寒，泻火祛湿、除湿热，对痢疾杆菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性琏球菌(a，B)等有抑制作用；同时，佐以救必应、连翘、丁香的抗菌、提高机体免疫力功能；进而，本发明提供的防治鱼类诺卡氏菌病的组合物的处方配伍中既有中医的清热解毒、驱邪扶正之功，又有现代医学的抗菌抗病毒、杀虫、调节免疫功能之效，具有保肝护肝、维持肠道健康，消除应激、提高存活率的功效，是防治鱼类诺卡氏菌等细菌感染性疾病的良方。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
为了更好的说明本发明，下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。可以理解的是，这些具体实施例均为示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
本发明的实施例提供一种防治鱼类诺卡氏菌的组合物，其包括200-400重量份的大风子，100-300重量份的黄芩，100-300重量份的X，以及200-700重量份的辅料，其中，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种。
本发明提供的防治鱼类诺卡氏菌病的组合物中的各成分的药效简要介绍如下：
大风子
【性味归经】辛，热，有毒。
【功能主治】祛风，功毒，杀虫。用于麻风；外用治疥、癣。
【药理作用】具有抗产肮假丝酵母、根瘤农杆菌和变形杆菌的功效。大风子油及所含脂肪酸钠盐有很强的抗菌作用。
黄芩
【性味与归经】味苦、性寒，归心、肺、胆、大肠经。
【功效】泻实火，除湿热。
【药理作用】
1、抗菌作用：
对痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性琏球菌(a，B)、肺炎双球菌、白喉杆菌等有抑制作用。
2、抗病毒作用：
黄芩煎剂25-100％浓度，体外试验对乙型肝炎病毒DNA复制有抑制作用。
3、保肝、利胆、抗氧化作用。
救必应
【性味与归经】性寒，味苦。归肺；肝；大肠经。
【功效】清热解毒；利湿；止痛。
抗菌作用：煎剂试管内能抑制金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌及痢疾(弗氏)、伤寒、绿脓杆菌。
连翘
【性味与归经】味苦，性平，归心、肝、胆经。
【功效】清热，解毒，散结，消肿。
【药理作用】
1、抗菌作用
连翘浓缩煎剂在体外有抗菌作用，可抑制伤寒杆菌、副伤寒杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、白喉杆菌及霍乱弧菌、葡萄球菌、链球菌等。
2、其他作用
连翘能抑制洋地黄对鸽静脉注射的催吐作用，减少呕吐次数，但不改变呕吐的潜伏期，其镇吐效果与注射氯丙嚓两小时后的作用相仿。它又能抑制犬皮下注射阿朴吗啡所引起的呕吐，故推测其镇吐作用原理可能是抑制延脑的催吐化学感受区。连翘的果皮中含齐墩果酸(又名洋橄榄叶酸)，故有强心、利尿作用。
丁香
【性味与归经】性辛，味温，归肺、脾、胃、肾四经。
【功效】温中、暖肾、降逆。
【药理作用】
1、抗菌、抗病毒：丁香油和丁香酚有广谱的抗菌作用。丁香中的鞣花单宁有抗单纯疱疹病毒作用。
2、抗真菌：其水煎剂或乙醇浸出液有广谱的抗真菌作用，或杀死作用。丁香酚对白色念珠菌和新型隐球菌有显著的杀灭作用。
3、杀灭寄生虫：其水提物能杀死犬和猪蛔虫。丁香油的作用较水煎剂的作用强。
4、杀灭滴虫：丁香油、丁香酚和乙酰丁香酚对毛滴虫具有很强的杀死作用。
根据本发明提供的上述防治鱼类诺卡氏菌的组合物，其处方配伍既有中医的清热解毒、驱邪扶正之功，又有现代医学的抗菌抗病毒、杀虫、调节免疫功能之效，具有保肝护肝、维持肠道健康，消除应激、提高存活率的功效，是防治鱼类诺卡氏菌等细菌感染性疾病的良方。
可以理解的是，辅料的主要作用为赋形、稀释和防腐等，本发明对于辅料的种类没有特殊限制，其可以为各种常用的辅料，例如，在本发明的一些实施例中，辅料为选自鱼粉，粗蛋白，豆粕，面粉，糊精，葡萄糖以及矿物质。
进一步的，为防止本发明提供的组合物在存放的过程中腐败变质、延迟保存期，在本发明的一些实施例中，组合物中还包括0.05wt％-0.1wt％的防腐剂。可以理解的是，可以采用本领域各种常用的防腐剂，本发明对此没有特殊限制。
同时，本发明还提供了一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物的制备方法，其包括以下步骤：
S1)以乙醇溶液提取大风子和黄芩的混合物2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏A，其中，每次提取所用的乙醇溶液的浓度为85％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为所述大风子和黄芩的混合物的总重量的10-20倍；
S2)以乙醇溶液提取X 2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏B，其中，第一次提取所用的乙醇溶液的浓度为60％，第二次提取所用的乙醇溶液的浓度为30％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为X的重量的8-12倍，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种；
S3)将稠膏A与稠膏B合并，得到稠膏C；
S4)将所述稠膏C与辅料配制成所述防治鱼类诺卡氏菌病的组合物。
可以理解的是，用乙醇溶液进行提取的操作方法及原理为本领域技术人员所公知，本发明对此不再赘述。
在本发明提供的防治鱼类诺卡氏菌的组合物的制备方法中，X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种。可以理解的是，在步骤S2)中，X可以有多种选择，其可以为救必应、连翘和丁香中的一种，也可以为救必应、连翘和丁香中的两种或三种。同样的，当X为救必应、连翘和丁香中的两种或三种时，可以分别将X进行提取，过滤并浓缩后合并稠膏，得到稠膏B，也可以是将X一起进行乙醇提取，过滤并浓缩至稠膏B。
可以理解的是，减压浓缩的具体操作方法及原理为本领域技术人员所公知，本发明对此不再进行赘述，本发明可以采用本领域常用的减压浓缩方法。
进一步的，在本发明的一些实施例中，步骤S4)中所述稠膏C与所述辅料采用如下之一的方法配制成所述防治鱼类诺卡氏菌的组合物：
方法A：取水加热至80-90℃，加入葡萄糖及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物A；
方法B：取鱼粉、粗蛋白、豆粕以及面粉混合均匀，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物B；
方法C：取水加热至80-90℃，加入糊精、葡萄糖以及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物C。
进一步的，在本发明的一些实施例中，还可以在防治鱼类诺卡氏菌病组合物中加入防腐剂，以防止组合物在存放的过程中腐败变质、延迟保存期。即在本发明的一些实施例中，所述方法A、方法B和方法C中还分别包括在防治鱼类诺卡氏菌病组合物A、防治鱼类诺卡氏菌病组合物B和防治鱼类诺卡氏菌病组合物C中加入0.05wt％-0.1wt％的防腐剂并搅拌均匀。
进一步的，为方便本发明提供的组合物的使用，扩大应用范围，在本发明的一些实施例中，所述方法A还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物A放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物液体剂；所述方法B还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物B制成颗粒，在65-85℃，例如70℃下烘干，然后分装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物颗粒剂；所述方法C还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物C放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物膏剂。
进一步的，在本发明的一些实施例中，在方法A和方法C中，水的用量为所述稠膏C的重量的30％-55％，在方法A和方法C中，得到的防治鱼类诺卡氏菌病组合物A和C分别在60℃下保温。
在本发明的一些实施例中，为获得更好的药效，所述步骤S1)中所述稠膏A的重量为所述大风子和所述黄芩的总重量的35％-55％，即，进行浓缩后得到的稠膏A的重量与药材的总重量比为1:2。同样的，所述步骤S3)中所述稠膏C的重量为所述大风子、所述黄芩以及所述X的总重量的25％-45％。
另外，本发明还提供一种上述防治鱼类诺卡氏菌的组合物在制备防治鱼类诺卡氏菌药物中的应用。
下面通过实施例进一步描述本发明，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。
实施例1
此实施例采用防治鱼类诺卡氏菌病组合物配制成药剂，该组合物由大风子、黄芩、救必应、连翘、丁香、葡萄糖、矿物质按下述重量份配比制备而成：
该组合物的制备方法为：
(1)将大风子、黄芩一起，以10倍量的85％乙醇提取2次，每次1小时，滤过后合并滤液，回收乙醇，并在75℃下减压浓缩成稠膏A(其中，药材与稠膏A之间的重量比为2：1)；
(2)将连翘、丁香分别以8倍量的60％乙醇、30％乙醇各提取1次，每次1.5小时，滤过后合并滤液，在70℃下减压浓缩成稠膏B；
(3)合并稠膏A和稠膏B，得到稠膏C(其中，药材的总重量与稠膏C的重量比为3：1)，备用。
(4)溶解：取水加热至85℃，加入葡萄糖、矿物质，快速搅拌至完全溶解，加入步骤(3)所得稠膏C，然后搅匀均匀，50℃下保温，加入0.08％重量份防腐剂，搅匀得到混合药液。
(5)药剂配制：将混合药液放冷，灌装，封口，即得药剂A。
实施例2
此实施例采用防治鱼类诺卡氏菌病组合物配制成颗粒，该组合物由大风子、黄芩、救必应、丁香、鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉按下述重量份配比制备而成：
其制备工艺为：
(1)将大风子、黄芩一起，以10倍量85％乙醇提取2次，每次1小时，滤过后合并滤液，回收乙醇，并在75℃下减压浓缩成稠膏A(其中，药材与稠膏A之间的重量比为2：1)；
(2)将救必应、丁香分别以10倍量60％乙醇、30％乙醇各提取1次，每次1.5小时，滤过后合并滤液，在75℃下减压浓缩成稠膏B；
(3)合并稠膏A和稠膏B，得到稠膏C(其中，药材的总重量与稠膏C的重量比为3：1)，备用。
(4)制软材：取鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉混匀，加入步骤(3)所得的稠膏C，搅匀后加入0.08％重量份防腐剂，搅匀得到混合药液。
(5)配制：将步骤(4)得到的混合药液制成颗粒，在70℃下烘干，分装，封口，即得颗粒B。
实施例3
此实施例采用防治鱼类诺卡氏菌病组合物配制成膏剂，该组合物由大风子、黄芩、救必应、糊精、葡萄糖、矿物质按下述重量份配比制备而成(1000)：
其制备工艺为：
(1)将大风子、黄芩一起，以10倍量85％乙醇提取2次，每次1小时，滤过后合并滤液，回收乙醇，并在75℃下减压浓缩成稠膏A(其中，药材与稠膏A之间的重量比为2：1)；
(2)将X分别以10倍量60％乙醇、30％乙醇各提取1次，每次1.5小时，滤过后合并滤液，在75℃下减压浓缩成稠膏B；
(3)合并稠膏A和稠膏B，得到稠膏C(其中，药材与稠膏C之间的重量比为3：1)，备用。
(4)取适量份水加热至85℃，加入糊精、葡萄糖，快速搅拌至完全溶解，加入步骤(3)所得稠膏C，然后搅匀均匀，在50℃保温，加入0.08％重量份的防腐剂，搅匀得到混合药液。
(5)药剂配制：将混合药液放冷，灌装，封口，即得膏剂C。
体外抑菌比较实验
1)样品制备
各市场产品和本发明配合物都按标示量比取样，用5倍的水溶解或混悬。
2)最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)实验
把样品液二倍梯度稀释，分别加入等量1.16*106CFU诺卡氏菌菌液中，密封，28℃培养4d，肉眼观察培养物最低无细菌生长者，即为该提取物的MIC值。实验结果记入表1中。
3)最低杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration，MBC)实验
把样品液二倍梯度稀释，分别加入等量1.16*106CFU诺卡氏菌菌液中，密封，28℃培养4天，吸取未见诺卡氏菌生长的各培养物0.1ml，移种至无菌琼脂培养基上，涂匀，密封，28℃培养4d，菌落数少于5个即提取物的MBC值。实验结果记入表1中。
表1
药物 MBC mg/ml MIC mg/ml
三黄散 62.5 62.5
大黄液 31.25 31.25
六黄液 62.5 62.5
复方丹参 7.82 7.82
大黄解毒散 62.5 62.5
本发明提供的组合物 0.66 0.66
治疗诺卡氏菌病应用例
1)动物造模
随机选取乌鳢600尾分成两组，每组300尾：一组，先用丁香油和无水乙醇(丁香油：无水乙醇＝1:9)加入水中(80mg/L)对乌鳢进行麻醉，后腹腔注射2*108CFU诺卡氏菌菌液0.2ml/尾。一组为对照组不作腹腔注射。观察乌鳢染病情况。
对照组成活率为100％。腹腔注射诺卡氏菌菌液组4d反应迟钝,食欲下降,上浮水面离群独游,解剖发现内脏(肾、脾、肝)出现白色结节，6d体表溃烂出血，肛门红肿，解剖发现内脏(肾、脾、肝)白色结节增多。内脏白色结节镜检可见大量短杆状、分枝状细菌,进一步分离鉴定为诺卡氏菌。
2)体内药效评价
将以上染病乌鳢，随机分成3组，每组50尾：一组为对照，另外两组分别按2.7mg/g、1.8mg/g剂量给本发明提供的组合物，正常投喂饲料，解剖观察记录乌鳢病理、死亡状况。
实验结果：对照组动物7天后全部死亡；1.8mg/g剂量给药组乌鳢第1、2、3、4天死亡数量分别为1尾、2尾、1尾、0尾；2.7mg/g剂量给药组乌鳢吃料正常，无死亡。停药后观察15天，给药组乌鳢吃料正常，无死亡。
从杀虫效果测试以及以上应用例可以看出，本发明提供的所述防治鱼类诺卡氏菌组合物在防治诺卡氏菌时，效果显著，具有广阔的应用前景。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，本领域的普通技术人员可以理解：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1.一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物，其特征在于，包括200-400重量份的大风子，100-300重量份的黄芩，100-300重量份的X，以及200-700重量份的辅料，其中，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述辅料为选自鱼粉、粗蛋白、豆粕、面粉、糊精、葡萄糖以及矿物质中的一种或多种。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，还包括0.05wt％-0.1wt％的防腐剂。
4.一种防治鱼类诺卡氏菌病的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1)以乙醇溶液提取大风子和黄芩的混合物2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏A，其中，每次提取所用的乙醇溶液的浓度为85％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为所述大风子和黄芩的混合物的总重量的10-20倍；
S2)以乙醇溶液提取X 2次，每次1-2小时，过滤后合并滤液，并在60-80℃下减压浓缩成稠膏B，其中，第一次提取所用的乙醇溶液的浓度为60％，第二次提取所用的乙醇溶液的浓度为30％，每次提取所用的乙醇溶液的重量为X的重量的8-12倍，所述X为选自救必应、连翘和丁香中的一种或多种；
S3)将稠膏A与稠膏B合并，得到稠膏C；
S4)将所述稠膏C与辅料配制成所述防治鱼类诺卡氏菌病的组合物。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤S4)中所述稠膏C与所述辅料采用如下之一的方法配制成所述防治鱼类诺卡氏菌的组合物：
方法A：取水加热至80-90℃，加入葡萄糖及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物A；
方法B：取鱼粉、粗蛋白、豆粕以及面粉混合均匀，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物B；
方法C：取水加热至80-90℃，加入糊精、葡萄糖以及矿物质，快速搅拌至完全溶解，然后加入所述稠膏C，搅拌均匀并在50-60℃下保温，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物C。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述方法A还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物A放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物液体剂；所述方法B还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物B制成颗粒，在65-85℃下烘干，然后分装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物颗粒剂；所述方法C还包括将所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物C放冷后，灌装、封口，得到防治鱼类诺卡氏菌病组合物膏剂。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，方法A和方法C中水的用量为所述稠膏C的重量的30％-55％，方法A和方法C中在60℃下保温。
8.如权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，所述方法A、方法B和方法C中还分别包括在所述防治鱼类诺卡氏菌病组合物A、防治鱼类诺卡氏菌病组合物B和防治鱼类诺卡氏菌病组合物C中加入0.05wt％-0.1wt％的防腐剂并搅拌均匀。
9.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1)中所述稠膏A的重量为所述大风子和所述黄芩的总重量的35％-55％，所述步骤S3)中所述稠膏C的重量为所述大风子、所述黄芩以及所述X的总重量的25％-45％。
10.权利要求1所述的防治鱼类诺卡氏菌的组合物在制备防治鱼类诺卡氏菌药物中的应用。
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