CN108578330B - 一种复方口腔喷雾及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种复方口腔喷雾及其制备方法，它属于口腔喷雾的制备领域。本发明主要是由芹菜提取物、黄芩提取物、半枝莲提取物、姜黄提取物、助溶剂、矫味剂、纯净水制成，其重量份数分别为1～5份的芹菜提取物、1～3份的黄芩提取物、0.5～3份的半枝莲提取物、0.5～2份的姜黄提取物、20～40份的助溶剂、0.2～5份的矫味剂、50～70份的纯净水。本发明将芹菜，黄芩，半枝莲和姜黄的提取物，按照一定质量分数比例混合在一起，利用活性成分的抑菌消炎，解毒止痛的作用，防止和抑制口腔细菌的滋生，缓解口腔异味及疼痛，在不同程度上口腔癌细胞有抑制作用，并在一定程度上促进癌细胞凋亡，可以用于口腔癌患者的日常保健及预防。

Description

一种复方口腔喷雾及其制备方法
技术领域
本发明属于口腔喷雾的制备领域；具体涉及一种复方口腔喷雾及其制备方法。
背景技术
随生活水平的日益提高，人们越来越重视自身形象管理，其中，口腔问题尤为突出，牙齿健康和口腔异味，不仅影响个人形象，也影响人与人之间的印象与好感度。口腔问题一旦产生，影响个人形象，而且疼痛时间长，影响日常饮食，造成精神和身体的双重打击。同时刺激性食品和饮料的日益增多，也导致口腔疾病日益严重，甚至引发口腔癌和舌癌。所以口腔问题的预防和防治尤为重要。
发明内容
本发明目的是提供了一种复方口腔喷雾及其制备方法。
本发明通过以下技术方案实现：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾主要是由芹菜提取物、黄芩提取物、半枝莲提取物、姜黄提取物、助溶剂、矫味剂、纯净水制成，其重量份数分别为1～5份的芹菜提取物、1～3份的黄芩提取物、0.5～3份的半枝莲提取物、0.5～2份的姜黄提取物、20～40份的助溶剂、0.2～5份的矫味剂、50～70份的纯净水。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为2～4份，黄芩提取物的重量份数为1.5～2份，半枝莲提取物的重量份数为1～2份，姜黄提取物的重量份数为1～1.5份，助溶剂的重量份数为20～30份，矫味剂的重量份数为1～4份，纯净水的重量份数为50～70份。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为3份，黄芩提取物的重量份数为1.8份，半枝莲提取物的重量份数为1.5份，姜黄提取物的重量份数为1.2份，助溶剂的重量份数为25份，矫味剂的重量份数为3份，纯净水的重量份数为60份。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
本发明所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～30g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为65％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：30～35g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为65％～75％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～32g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为70％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：15～20g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
本发明所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，步骤1中料液比为1：28g/mL。
本发明所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，步骤2中料液比为1：32g/mL。
本发明所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，步骤3中料液比为1：28g/mL。
本发明所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，步骤4中料液比为1：15g/mL。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，芹菜，属于伞形科植物，性凉，具有凉血止血，解毒消肿，润肺止咳、降低血压和健脑镇静的功效；现代药理学证明芹菜中的活性成分具有镇静止痛，抗氧化，抗菌的作用，同时还发现芹菜中的黄酮类成分可以抑制舌鳞癌细胞株(Tca8113)的增殖，加速癌细胞的凋亡。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，黄芩，唇形科多年生草本植物，性寒，具有清热燥湿、泻火解毒和凉血解毒的功效，现代药理学也证明黄芩中的化学成分具有抑菌，解热，降压，抗肿瘤的作用。同时还发现黄芩中的活性成分通过调控相关基因的表达，来抑制口腔癌鳞状细胞株SCC15的繁殖，并促进癌细胞凋亡。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，半枝莲，唇形科多年生草本植物，性寒味酸，有凉血解毒，散瘀止痛，消肿和清热利湿的功效。现代医学也证明半枝莲中的活性成分具有抑菌，抗氧化，抗肿瘤的作用。同时半枝莲中的活性成分通过调控相关基因表达，影响舌鳞癌SAS细胞的超微结构，降低细胞的增殖力从而抑制癌细胞过度生长，诱导癌细胞凋亡。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，姜黄，姜黄属多年草本植物，性温，有行气，止痛的作用。药理学实验证明，姜黄提取物具有抗菌消炎，抗氧化，抗肿瘤，降脂降压和抗凝等作用。同时姜黄提取物可以通过调控相关基因的表达，影响人口腔表皮样癌细胞株KB和HN4以及舌鳞癌细胞株(Tca8113)的增殖，并加速癌细胞凋亡。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，将芹菜，黄芩，半枝莲和姜黄的提取物，按照一定质量分数比例混合在一起，利用活性成分的抑菌消炎，解毒止痛的作用，防止和抑制口腔细菌的滋生，缓解口腔异味及疼痛，用于日常清新口气和口腔防护。
本发明所述的一种复方口腔喷雾，芹菜，黄芩，半枝莲和姜黄中的活性成分都在不同程度上口腔癌细胞有抑制作用，并在一定程度上促进癌细胞凋亡，可以用于口腔癌患者的日常保健及预防。
本发明所述的复方口腔喷雾，保存6个月后测试，溶液外观澄清、无异味，无沉淀，溶液pH一直稳定在6.9，细菌总数从100CFU/g略有增加，6个月后细菌总数为120CFU/g，霉菌与酵母菌总数10CFU/g，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌均未检出，重金属未检出，砷未检出，产品中不含有甲醇，所述的复方口腔喷雾质量合格。
具体实施方式
具体实施方式一：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为2份，黄芩提取物的重量份数为2份，半枝莲提取物的重量份数为1份，姜黄提取物的重量份数为1.5份，助溶剂的重量份数为30份，矫味剂的重量份数为1份，纯净水的重量份数为62.5份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式二：
根据具体实施方式一所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％的乙醇溶液提取，料液比为1：25g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在30℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为65％的乙醇溶液提取，料液比为1：30g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在30℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为65％的乙醇溶液提取，料液比为1：25g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在30℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：15g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在30℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
具体实施方式三：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为3份，黄芩提取物的重量份数为2份，半枝莲提取物的重量份数为2份，姜黄提取物的重量份数为1.5份，助溶剂的重量份数为25份，矫味剂的重量份数为4份，纯净水的重量份数为62.5份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式四：
根据具体实施方式三所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：30g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在40℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：35g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：32g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：20g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在40℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
具体实施方式五：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为4份，黄芩提取物的重量份数为1.5份，半枝莲提取物的重量份数为1.5份，姜黄提取物的重量份数为1.5份，助溶剂的重量份数为20份，矫味剂的重量份数为4份，纯净水的重量份数为67.5份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式六：
根据具体实施方式五所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：28g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：32g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：28g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：15g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
具体实施方式七：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为3份，黄芩提取物的重量份数为1.9份，半枝莲提取物的重量份数为1.5份，姜黄提取物的重量份数为1份，助溶剂的重量份数为25份，矫味剂的重量份数为1份，纯净水的重量份数为66.6份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式八：
根据具体实施方式七所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：25g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在30℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：35g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：27g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：18g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在35℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
具体实施方式九：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为4份，黄芩提取物的重量份数为2份，半枝莲提取物的重量份数为2份，姜黄提取物的重量份数为1.5份，助溶剂的重量份数为20份，矫味剂的重量份数为4份，纯净水的重量份数为66.5份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式十：
根据具体实施方式九所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：29g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：32g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：28g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：18g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
具体实施方式十一：
一种复方口腔喷雾，所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为3份，黄芩提取物的重量份数为1.8份，半枝莲提取物的重量份数为1.5份，姜黄提取物的重量份数为1.2份，助溶剂的重量份数为30份，矫味剂的重量份数为4份，纯净水的重量份数为58.5份。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合。
本实施方式所述的一种复方口腔喷雾，所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
具体实施方式十二：
根据具体实施方式十一所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％的乙醇溶液提取，料液比为1：25g/mL，提取次数2次，将多次提取液混合，在35℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为75％的乙醇溶液提取，料液比为1：30g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为70％的乙醇溶液提取，料液比为1：28g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为80％的乙醇溶液提取，料液比为1：15g/mL，提取次数3次，将多次提取液混合，在42℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
以上具体实施方式一、具体实施方式三、具体实施方式五、具体实施方式七、具体实施方式九、具体实施方式十一所述的复方口腔喷雾进行抑菌实验，实验方法为(化合物的抗菌测试运用滤纸片琼脂扩散法，所测试的微生物有白色念珠菌(C.albicans),金黄色葡萄球菌(S.aureus),和乙型溶血性链球菌S.hemolytic-β。其中S.aureus和S.hemolytic-β采用牛肉膏蛋白胨培养基(NA)培养，C.albicans采用酵母粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)培养，分别将三种细胞株制成一定浓度(105～107cfu mL-1)的菌悬液，用玻璃棒将其均匀涂布在供试无菌平板上，制成含菌平板。
S.aureus抑制活性测试：首先，取10μL浓度为1mg 20μL-1的化合物溶液滴加在灭菌滤纸片(Φ＝6mm)上，待溶剂挥干后，再将滤纸片置于含菌平板上。阳性对照为10μL(0.64mgmL-1)的硫酸卡那霉素，阴性对照为DMSO，37℃恒温无光培养，12h后测量抑菌圈直径。整个实验重复3次，取平均值。
S.hemolytic-β抑制活性测试：方法同S.aureus，阳性对照为1.6μL 0.5mg mL-1的链霉素，阴性对照为DMSO。
C.albicans抑制活性测试：方法和浓度同S.aureus，阳性对照为Chlorhexidine(氯已定)。
测试结果如表1所示：
表1抑菌实验对比表
Figure BDA0001737986120000081
从表1中能够看出，对照生理盐水组的抑菌圈直径(4.0)，实施例中所制口腔喷雾对三种口腔致病菌均存在不同程度上的抑菌作用，所述的复方口腔喷雾对金黄色葡萄球菌、白色念球菌、乙型溶血性链球菌均有一定的抑制作用。
以上具体实施方式一、具体实施方式三、具体实施方式五、具体实施方式七、具体实施方式九、具体实施方式十一所述的复方口腔喷雾进行产品指标测试，测试结果如表2所示：
表2所述的复方口腔喷雾产品指标测试
Figure BDA0001737986120000091
从表2中能够看出，所述的复方口腔喷雾6个月后，溶液外观澄清、无异味，无沉淀，溶液pH一直稳定在6.9，细菌总数从100CFU/g略有增加，6个月后细菌总数为120CFU/g，霉菌与酵母菌总数10CFU/g，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌均未检出，重金属未检出，砷未检出，产品中不含有甲醇，所述的复方口腔喷雾质量合格。
以上具体实施方式一、具体实施方式三、具体实施方式五、具体实施方式七、具体实施方式九、具体实施方式十一所述的复方口腔喷雾进行通过MTT法(肿瘤细胞培养的条件：温度(37℃)，CO2浓度(5.0％)，湿度(90％以上)，用含有10％的小牛血清的四甲基偶氮唑蓝充分培养。
采用MTT法：
(1)总共设为三组进行实验：阴性对照组(DMSO溶剂)、阳性对照组(盐酸阿霉素)和待测样品组，每个待测样品浓度：0.3μg mL-1。
(2)选取的细胞处于对数生长期，单细胞悬浮液在RPMI1640完全培养中获得，运用血球计数板计数，取90μL浓度为50000个每mL的单细胞悬浮液接种于96孔平底细胞培养板。
(3)在待测细胞株中加入10μL样品，ATCC CCL-17和Tca8113培养24h后，再加入样品10μL，培养条件为CO2浓度为5％，湿度为90％以上，温度37℃，之后再培养72h，培养后取出，在显微镜下观察每孔的细胞形态。然后加入5mg mL-1的MTT溶液15μL，37℃反应4h后，吸弃上清液，再把100μL DMSO加入每一孔中，等到充分溶解后，用ELX-800酶标仪测量各孔的OD值(测量波长为490nm)，计算抑制率。
(4)在直角坐标系中，横坐标为样品浓度，纵坐标为样品的抑制率，作出样品抑制率随浓度的变化图，最后求出抑制率为50％时样品的浓度(IC50)，样品活性结果即以半数抑制浓度(IC50)表示。下表为癌细胞株KB(ATCC CCL-17)，舌鳞癌细胞株(Tca8113)细胞毒性检测，检测结果如表3所示：
表3细胞毒性检测对比表
Figure BDA0001737986120000101
从表3中能够看出，实施方式一、三、五、七所述的复方口腔喷雾均在不同程度上对口腔癌细胞和舌鳞癌细胞存在凋亡作用。

Claims (9)

1.一种复方口腔喷雾，其特征在于：所述的复方口腔喷雾主要是由芹菜提取物、黄芩提取物、半枝莲提取物、姜黄提取物、助溶剂、矫味剂、纯净水制成，其重量份数分别为1～5份的芹菜提取物、1～3份的黄芩提取物、0.5～3份的半枝莲提取物、0.5～2份的姜黄提取物、20～40份的助溶剂、0.2～5份的矫味剂、50～70份的纯净水；
所述的助溶剂为丙二醇、烷基糖苷、脂肪酸甲酯乙氧基化物、L-精氨酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、吐温80、十二烷基硫酸钠中的一种或几种以上的组合；
取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～30g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
取黄芩，粉碎，用体积分数为65％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：30～35g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
取半枝莲，粉碎，用体积分数为65％～75％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～32g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
取姜黄，粉碎，用体积分数为70％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：15～20g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物。
2.根据权利要求1所述的一种复方口腔喷雾，其特征在于：所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为2～4份，黄芩提取物的重量份数为1.5～2份，半枝莲提取物的重量份数为1～2份，姜黄提取物的重量份数为1～1.5份，助溶剂的重量份数为20～30份，矫味剂的重量份数为1～4份，纯净水的重量份数为50～70份。
3.根据权利要求1所述的一种复方口腔喷雾，其特征在于：所述的复方口腔喷雾中芹菜提取物的重量份数为3份，黄芩提取物的重量份数为1.8份，半枝莲提取物的重量份数为1.5份，姜黄提取物的重量份数为1.2份，助溶剂的重量份数为25份，矫味剂的重量份数为3份，纯净水的重量份数为60份。
4.根据权利要求1或2所述的一种复方口腔喷雾，其特征在于：所述的矫味剂为安赛蜜、三氯蔗糖，山梨醇、薄荷脑、冰片、阿斯巴甜、糖精钠、甜菊苷中的一种或几种以上的组合。
5.一种权利要求1-4之一所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1、取芹菜整株，粉碎，用体积分数为60％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～30g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得芹菜提取物；
步骤2、取黄芩，粉碎，用体积分数为65％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：30～35g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得黄芩提取物；
步骤3、取半枝莲，粉碎，用体积分数为65％～75％的乙醇溶液提取，料液比为1：25～32g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得半枝莲提取物；
步骤4、取姜黄，粉碎，用体积分数为70％～80％的乙醇溶液提取，料液比为1：15～20g/mL，提取次数2～3次，将多次提取液混合，在30～45℃下减压浓缩，干燥后制得姜黄提取物；
步骤5、按照重量份数分别称取步骤1制得的芹菜提取物、步骤2制得的黄芩提取物、步骤3制得的半枝莲提取物、步骤4制得的姜黄提取物，依次加入按照重量份数称量的助溶剂、矫味剂、纯净水，搅拌均匀，过滤，分装制得所述的复方口腔喷雾。
6.根据权利要求5所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤1中料液比为1：28g/mL。
7.根据权利要求5所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤2中料液比为1：32g/mL。
8.根据权利要求5所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤3中料液比为1：28g/mL。
9.根据权利要求5所述的一种复方口腔喷雾的制备方法，其特征在于：步骤4中料液比为1：15g/mL。
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