CN108570089B - 双氢青蒿素-甾体结合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有下述通式(I)的双氢青蒿素‑甾体结合物或其可药用盐，其中，双氢青蒿素分子在其10位通过连接体X与甾体母核相连接。本发明还公开了该双氢青蒿素‑甾体结合物的制备方法及其在制备治疗癌症的药物中的应用。本发明的双氢青蒿素‑甾体结合物，对多株肿瘤细胞显示出很强的抑制活性，且毒性小，可透过血脑屏障，应用前景非常广阔。

Description

双氢青蒿素-甾体结合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及药物化学技术领域，具体涉及一种双氢青蒿素-甾体结合物及其制备方法和应用。
背景技术
自从上世纪70年代发现青蒿素具有强大的抗疟作用以来，青蒿素，青蒿琥酯，蒿甲醚，双氢青蒿素及其复方制剂分别先后在中国被批准为抗疟药物，并在全球得到广泛应用。同时，该类化合物也被广泛报道具有抗癌作用。其中11，13-位双氢青蒿素显示较明显的抗癌活性。近年来各类青蒿素的衍生物，包括双氢青蒿素及其二聚物，青蒿琥酯，蒿甲醚等化合物的抗癌活性得到广泛和深入的研究。这类化合物在体外实验中不仅对白血病、结肠癌有效，对其他癌症如黑色素瘤、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肾癌等均具有良好的活性。
脑胶质瘤是由于大脑和脊髓胶质细胞癌变所产生的、最常见的原发性颅脑肿瘤。脑胶质瘤在儿童及青少年高发，特别是5～9岁儿童发病率最高。儿童病人常以分化较差的极性成胶质细胞瘤、髓母细胞瘤和室管膜瘤为多，成年病人则以星形细胞瘤为多。儿童患者病程短、进展快；常在较短时间内即引起严重的脑干症状；成年患者病程长、进展慢，可数月甚至1年以上始出现严重的脑干症状。近30年来，原发性恶性脑肿瘤发生率逐年递增，年增长率约为1.2％,中老年人群尤为明显。据文献报道，中国脑胶质瘤年发病率为3-8人/10万人，年死亡人数达3万人。胶质瘤系浸润性生长物，它和正常脑组织没有明显界限，难以完全切除，对放疗化疗不甚敏感，非常容易复发，生长在大脑等重要部位的良、恶性肿瘤，手术难以切除或根本不能手术。化学药物和一般抗肿瘤的中药，因血脑屏障等因素的影响，疗效也不理想，因此脑胶质瘤至今仍是全身肿瘤中预后最差的肿瘤之一。
目前，替莫唑胺是治疗胶质瘤唯一有明确疗效的化疗药物。对于高度恶性的脑胶质瘤，替莫唑胺的应用，可以显著延长患者的生存预后。而其他抗肿瘤药物对脑瘤没有明显治疗作用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种双氢青蒿素-甾体结合物，该结合物比双氢青蒿素具有更强的抗癌活性，可应用于脑癌及其他恶性肿瘤的治疗。
为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:
在本发明的一个方面，提供了一种具有通式(I)的双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐，
其中，双氢青蒿素分子在其10位通过连接体X与甾体母核相连接；
连接体X为具有连接两端分子功能的原子或基团，包括CH2，O，S，N，-CO2-，SO2-，2-10个碳原子的二醇或三醇，苯二酚或苯三酚衍生物，氨基酚衍生物，氨基苯甲酸衍生物，羟基苯甲酸衍生物，多取代的含有2个以上烷基酸取代的苯环或杂环，2-10个碳原子的二酸或多元酸，2-10个碳原子的二巯基化合物，2-10个碳原子的二胺，2-10个碳原子的羟基酸，3-10个碳原子的氨基酸或氨基醇；
R1为H，OH，NH2，卤素，巯基，1-10个碳原子的烷氧基，2-10个碳原子的卤代烷氧基，1-10个碳原子的烷氧基醇或烷氧基多元醇，1-10个碳原子的烷氧基醇或烷氧基多元醇的磺酸酯及其盐，1-10个碳原子的烷氧基醚，1-10个碳原子的烷氧基羧酸或烷氧基多元羧酸及其盐，1-10个碳原子的烷氧基磺酸及其盐，1-10个碳原子的烷氧基胺，1-10个碳原子的烷氧基酰胺，含2-10个碳原子的氧基烯烃，含2-10个碳原子的氧基炔烃，3-8个碳的环烷基氧基，酮基，亚胺，1-10个碳原子的烷基亚胺，1-10个碳原子的烷氧基亚胺，羟胺，羟胺磺酸酯及其盐，亚磺酸酯，酰胺基，带有或不带有取代基的苯氧基，带有或不带有取代基的苄氧基，带有或不带有取代基的萘氧基，二甲基胺基、二乙基胺基等1-10个碳原子的二烷基胺基，如哌嗪，哌啶，吡咯，四氢吡咯等含有1-4个杂原子的五元-八元的杂环，或3-6个碳的单糖如果糖，半乳糖，核糖和脱氧核糖等，这些糖通过糖苷键与甾体母核相连；
R2为H，OH，NH2，卤素，卤素，巯基，磺酸酯及其盐，亚磺酸酯及其盐，酰胺基，1-10个碳原子的烷氧基，2-10个碳原子的卤代烷氧基，1-10个碳原子的烷氧基醇或烷氧基多元醇，1-10个碳原子的烷氧基醇或烷氧基多元醇的磺酸酯及其盐，1-10个碳原子的烷氧基醚，1-10个碳原子的烷氧基羧酸或烷氧基多元羧酸及其盐，1-10个碳原子的烷氧基磺酸及其盐，1-10个碳原子的烷氧基胺，1-10个碳原子的烷氧基酰胺，含2-10个碳原子的氧基烯烃，含2-10个碳原子的氧基炔烃，3-8个碳的环烷基氧基，酮基，亚胺，1-10个碳原子的烷基亚胺，1-10个碳原子的烷氧基亚胺，羟胺，羟胺磺酸酯及其盐，带有或不带有取代基的苯氧基，带有或不带有取代基的苄氧基，带有或不带有取代基的萘氧基，二甲基胺基、二乙基胺基等1-10个碳原子的二烷基胺基，如哌嗪，哌啶，吡咯，四氢吡咯等含有1-4个杂原子的五元-八元的杂环，或3-6个碳的单糖，这些糖通过糖苷键与甾体母核相连；
R3为H，OH，NH2，卤素，巯基，磺酸酯及其盐，亚磺酸酯及其盐，酰胺基，1-10个碳原子的烷基，2-10个碳原子的卤代烷基，1-10个碳原子的醇或多元醇，1-10个碳原子的醇或多元醇的磺酸酯及其盐，1-10个碳原子的醚或多元醇的单醚，1-10个碳原子的羧酸或多元羧酸及其盐，1-10个碳原子的烷基磺酸及其盐，1-10个碳原子的胺，1-10个碳原子的酰胺，含2-10个碳原子的烯烃，含2-10个碳原子的炔烃，3-8个碳的环烷，1-10个碳原子的酮，1-10个碳原子的烷基亚胺，1-10个碳原子的烷氧基亚胺，羟胺，羟胺磺酸酯及其盐，1-10个碳原子的烷基磺酸酯及其盐，1-10个碳原子的烷基亚磺酸酯，1-10个碳原子的烷基酰胺，带有或不带有取代基的苯基或苯氧基，带有或不带有取代基的苄基，带有或不带有取代基的萘基，二甲基胺基、二乙基胺基等1-10个碳原子的二烷基胺基，如哌嗪，哌啶，吡咯，四氢吡咯等含有1-4个杂原子的五元-八元的杂环，或3-6个碳的单糖(这些糖通过糖苷键与甾体母核相连)，胆酸的C-17侧链及其衍生基团；植物甾醇如麦角甾醇和大豆甾醇的C-17侧链或其衍生基团；激素类甾体的C-17侧链，如雌酮，雌二醇，雌三醇，氢化可的松，可的松，地塞米松，强的松，泼尼松，醛固酮等的C-17侧链；与16位羟基成为螺环的侧链，如薯蓣皂甙元，海柯皂甙元，剑麻皂甙元，替告皂甙元，叉蕊皂甙元等的侧链；甾体生物碱的C-17侧链，如茄碱，β-苦茄碱，辣茄碱，棋盘花碱，藜芦胺碱，介藜芦胺，贝母生物碱，环巴胺等的侧链；R3的立体构型可以是α构型，也可以是β构型；
式(I)中，代表α-取代，代表β-取代。
优选的，所述连接体X包括O，S，N，-CH2-，-NR-，-BH-，-BR-，-P(O)-，-NH-NH-，-OSO2-，-O-CO-O-，-OCO-(CH2)n-COO-，-O(CH2)nO-，-O(CH2OCH2)nO-，-O-SO2-O-，-O-PO2-O-，-O-BO-O-，-(CH2)n-O-，-O-Ph-O-，-O(CH2)nNR(CH2)mO-，-OOC(CH2)nNR(CH2)m-COO-，-O(CH2)2N(CH2)2N(CH2)2O-，-OPh(Y)-O-，-O-Ph(Y)-COO-，-OOC-(CH2)nPh(Y)(CH2)mCOO-，-OOCPh(Y)COO-，-OCH2CH2NHPh(Y)NHCH2CH2O-，含有1-4个杂原子的五元或六元杂环及其衍生物如呋喃，嘧啶，噻唑，噻吩，噁唑，嘌呤等；
其中R＝H或1-10个碳原子的饱和或不饱和烃；Y为OR’，NHR’，NR’2，卤素，-CF3，-COOH，-COOR’，-CONH2，-CONR’2，-CN，-NO2，-SO3-，或-SO2R’，Y可在苯环不同的位置上取代；R’＝H或1-10个碳原子的饱和或不饱和的烃基；n和m分别为0-10。
更优选的，所述连接体X为O，-CH2O-或-O-CH2CH2-O-。
所述连接体X一端连接在双氢青蒿素的10位，另一端连接在甾体母核的2位，3位，5位，6位，7位，11位，12位，15位，16位，或者17位，或者连接在甾体的侧链上。X优选为连接在甾体3位，6位或者7位。其立体构型可以是α构型，也可以是β构型。
本发明式(I)中，R1可以位于甾体母核的2位，或者3位，或者4位，或者6位，或者7位。R1还可以是位于4位，5位或者6位的双键。R1优选为OH，NH2，OSO3H，二烷基胺基如二甲基胺基等。R1优选的连接位置为5位，6位或者7位。其立体构型可以是α构型，也可以是β构型。
R2可以位于甾体母核的11位，或者12位，或者15位，或者16位。R2优选为OH，NH2，OSO3H，二烷基胺基如二甲基胺基等。R2优选的连接位置为12位或者16位。其立体构型可以是α构型，也可以是β构型。
在本发明中，甾体母核是指所有具有环戊烷骈多氢菲的结构单元，其包括天然和非天然的甾体及其衍生物，其包含甾烷，雄甾烷，雌甾烷，孕甾烷，胆烷，麦角甾烷，豆甾烷及异甾体的结构类型。具体来说，包含胆酸(包括牛磺胆酸，甘氨胆酸等天然或非天然氨基酸衍生物)，去氧胆酸(包括牛磺去氧胆酸，甘氨去氧胆酸等天然或非天然氨基酸衍生物)，猪去氧胆酸(包括牛磺猪去氧胆酸，甘氨猪去氧胆酸等天然或非天然氨基酸衍生物)，熊去氧胆酸(包括牛磺熊去氧胆酸，甘氨熊去氧胆酸等天然或非天然氨基酸衍生物)，鹅去氧胆酸(包括牛磺鹅去氧胆酸，甘氨鹅去氧胆酸等天然或非天然氨基酸衍生物)，胆甾醇，麦角甾醇，大豆甾醇，5α或5β谷甾醇等植物甾醇，甾体激素及其衍生物如雌酮，雌二醇，雌三醇等及其衍生物，糖皮质激素及其衍生物如氢化可的松，可的松，地塞米松，强的松，泼尼松等及其衍生物；盐皮质激素及其衍生物如醛固酮，甾体皂甙如薯蓣皂甙，海柯皂甙，剑麻皂甙，替告皂甙，叉蕊皂甙等植物皂甙或这些植物甾体皂甙元如薯蓣皂甙元，海柯皂甙元，剑麻皂甙元，替告皂甙元，叉蕊皂甙元，甾体生物碱如茄碱，β-苦茄碱，辣茄碱，棋盘花碱，藜芦胺碱，介藜芦胺，贝母生物碱，环巴胺等及其上述甾体的衍生物。
本发明通式(I)的结合物包括其所有的异构体，如位置异构体，立体异构体和光学异构体。
优选的，所述通式(I)结合物包括下述具体结构的化合物：
更优选的，本发明实施例提供了下述化合物：
在本发明中，双氢青蒿素-甾体结合物的可药用盐，包括钾盐，钠盐，钙盐，镁盐，或者与天然的和非天然的有机含氮化合物形成的有机盐。
在本发明的另一方面，还提供了一种药物组合物，包含一种或几种上述双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐及药学上可接受的载体。
上述可接受的载体是无毒的、能辅助施用并且对结合物的治疗效果没有不利影响。此类载体可以是本领域的技术人员通常能得到的任何固体赋形剂、液体赋形剂、半固体赋形剂或者在气雾剂组合物中的气体赋形剂。固体药物赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油硬脂酰酯、氯化钠、无水脱脂乳等。液体和半固体赋形剂可以选自甘油、丙二醇、水、乙醇和各种油，包括那些源于石油、动物、植物或人工合成的油，例如，花生油、豆油、矿物油、芝麻油等、优选的液体载体，特别是用于可注射溶液的，包括水、盐水、葡萄糖水溶液和甘醇。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。
本发明的药物组合物可以通过口服或其他给药方式给药，如注射，透皮给药，喷雾给药，直肠给药，阴道给药等。优选的给药方式是口服，它可根据疾病程度调节。
本发明的药物组合物可以和其他抗癌药物包括中药抗癌药物联合用药，如阿霉素类，博莱霉素，长春碱类，紫杉烷类，依托泊苷，5-氟尿嘧啶，环磷酰胺，甲氨蝶呤，顺铂，维甲酸，替莫唑胺，放线菌素以及靶向药物如伊马替尼、吉非替尼、索拉非尼、厄洛替尼、舒尼替尼、利妥昔单抗、西妥昔单抗、曲妥珠单抗等。
本发明的药物组合物也可以和其他癌症治疗方法联合使用，如手术治疗，放射治疗，骨髓移植等。
本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规方法制备。例如使该化合物与一种或者多种载体混合，然后将其制成所需的剂型，如片剂、药丸、胶囊、半固体、粉末、缓释剂型、溶液、混悬液、配剂、气雾剂等。
在本发明的另一方面，还提供了上述双氢青蒿素-甾体结合物的制备方法，包括以下步骤：
双氢青蒿素在其10位以醚键和甾体上的2位，3位，5位，6位，7位，11位，12位，15位，16位，或者17位羟基连接，得双氢青蒿素-甾体结合物。
具体的制备方法如下：
路线一：双氢青蒿素在路易斯酸的存在下，直接和甾体的2位，3位，5位，6位，7位，11位，12位，15位，16位，或者17位羟基连接成醚，得双氢青蒿素-甾体结合物。
路线二：在甾体化合物具有多个羟基的情况下，特别是具有立体位阻相对比较小的羟基，如3-位羟基和其他位置的羟基共同存在下，为了使双氢青蒿素连接于甾体的特定位置，就需要先将甾体上位阻较小的羟基如3-位羟基用保护基如乙酰基，苯甲酰基，Piv，氯乙酰基，苄基，MOM，TMS，TES，TMBS，TIPS，TBDPS等进行保护，然后这些有保护基的甾体在路易斯酸存在下与双氢青蒿素进行反应，使得双氢青蒿素以醚键与甾体的特定位置的羟基连接，最后，在酸性、碱性或中性的条件下脱掉保护基，得到甾体和双氢青蒿素相连接的化合物。
在本发明的另一方面，还提供了上述双氢青蒿素-甾体结合物的第二种制备方法，包括以下步骤：
双氢青蒿素或其衍生物先和连接体X通过酯键，醚键，酰胺键，碳-碳单键或者碳-氮、碳-硫单键连接成为中间体，该中间体再通过共价键与甾体的2位，3位，5位，6位，7位，11位，12位，15位，16位，或17位连接，形成双氢青蒿素-甾体结合物。
其中的连接体X一般含有两到三个可以成键的活性基团，如卤代醇，卤代酸，氨基酸，羟基酸，氨基醇，多元醇如丙二醇、甘油等，多元酸如乙二酸、丙二酸、EDTA等，糖如果糖、核糖、赤藓糖、赤藓糖醇等，多元胺类如乙二胺、丙二胺、丁二胺、苯二胺、哌嗪等，多元酚如间苯酚、间苯三酚及其衍生物，杂环类如哌嗪、氨基噻唑乙酸类衍生物等。优选的连接体X为多元醇或卤代醇如溴代乙醇、乙二醇、丙三醇等。多元酚类衍生物如间苯酚、间苯三酚、二羟基苯甲酸等。
具体的制备方法如下：
路线一：采用双氢青蒿素和连接体如多元醇或卤代醇(如溴代乙醇，乙二醇，丙三醇，间苯酚，间苯三酚等)在路易斯酸的存在下，形成带有羟基、酚羟基或溴的中间体Z，然后该中间体Z在路易斯酸或碱的存在下和甾体的2位，3位，5位，6位，7位，11位，12位，15位，16位，或17位羟基连接成醚。
路线二：在甾体化合物具有多个羟基的情况下，特别是具有立体位阻相对比较小的羟基如3-位羟基和其他位置的羟基共同存在下，为了使双氢青蒿素通过连接体连接于甾体的特定位置，就需要先将甾体上位阻较小的羟基如3-位羟基用保护基团如乙酰基，苯甲酰基，Piv，氯乙酰基，苄基，MOM，TMS，TES，TMBS，TIPS，TBDPS等进行保护，然后加上了保护基的甾体在路易斯酸的存在下与中间体Z进行反应，使得双氢青蒿素以醚键与甾体的特定位置连接，最后，在酸性、碱性或中性的条件下脱掉保护基，得到甾体和一个双氢青蒿素相连接的化合物。
上述反应中，所述酸性条件使用的酸可以是质子酸或路易斯酸，优选为三氟化硼乙醚、对甲苯磺酸、三氟乙酸、硫酸或盐酸。所述碱性条件使用的碱可以是有机碱或无机碱，优选为三乙胺、砒咯烷、碳酸钠或碳酸氢钠。各反应所使用的溶剂可以是质子溶剂或非质子溶剂。优选为：乙醚，四氢呋喃，乙腈，DMF，DMSO，醇，水。反应温度一般在摄氏温度10-80度。
上述反应的粗产物可以用色谱法进一步纯化，一般用柱层析法，填料用硅胶或氧化铝，洗脱剂可以用石油醚-丙酮或石油醚-乙酸乙酯的不同比例的混合。
在本发明的另一方面，还提供了上述双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐在制备治疗癌症的药物中的应用。
所述癌症包括脑癌、脑胶质瘤、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、肝癌、白血病、淋巴癌、皮肤癌、基底细胞瘤、骨癌。其中肺癌包括非小细胞肺癌、EGFR-TKI耐药的非小细胞肺癌等。
本发明的双氢青蒿素-甾体结合物，合成简单，化学稳定性好，毒性小，在体外试验中对多株肿瘤细胞株都显示出非常强的抑制活性，尤其是对恶性程度非常高的髓母细胞瘤株和EGFR-TKI耐药的非小细胞肺癌细胞显示出了高度的抑制活性。本发明双氢青蒿素-甾体结合物对肿瘤细胞的抑制率明显高于双氢青蒿素，而毒性却远小于紫杉醇，在癌症的治疗方面具有广阔的应用前景。
具体实施方式
实施例1化合物JZ-01的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和胆酸(817mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1-1:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-01)726mg(产率：53.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.47(s,1H),4.93(d,J＝3.3Hz,1H),4.00(s,1H),3.88(s,1H),3.51(t,J＝11.0Hz,1H),2.64–2.56(m,1H),2.47–2.21(m,4H),2.10–2.02(m,2H),1.99–1.85(m,5H),1.72(m,8H),1.53(m,5H),1.45(m,6H),1.40–1.30(m,5H),1.31–1.23(m,4H),1.16(m,2H),0.99(m,7H),0.89(m,8H),0.71(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ104.03(s),100.14(s),88.08(s),81.29(s),77.24(s),68.67(s),52.65(s),46.86(s),46.51(s),44.56(s),42.21(s),41.33(s),39.32(s),37.47(s),36.51(s),35.58(s),35.29(s),35.22(s),34.80(d),30.94–30.35(m),30.25(d),29.72(s),28.71(d),27.58(s),26.70(s),26.30(s),24.70(s),23.22(s),22.60(s),20.41(s),17.24(s),13.08(s),12.46(s)。
实施例2化合物JZ-02的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和熊去氧胆酸(785mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1-2:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-02)748mg(产率：56.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.46(s,1H),4.92(d,J＝3.3Hz,1H),3.61(m,2H),2.67–2.55(m,1H),2.47–2.34(m,2H),2.28(ddd,J＝15.8,9.6,6.5Hz,1H),2.04(m,2H),1.94–1.71(m,9H),1.71–1.55(m,4H),1.54–1.41(m,11H),1.40–1.21(m,9H),1.19–1.01(m,3H),0.98–0.89(m,12H),0.70(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ178.71(s),104.07(s),100.21(s),88.08(s),81.22(s),77.24(s),71.41(s),55.61(s),54.92(s),52.61(s),44.51(s),43.79(s),42.37(s),40.07(s),39.19(s),37.49(s),36.99(s),36.48(s),35.21(s),35.01(s),34.71(s),34.25(s),33.60(s),30.78(d),28.74(d),26.90(s),26.27(s),24.63(d),23.53(s),21.24(s),20.41(s),18.42(s),13.16(s),12.15(s)。
实施例3化合物JZ-03的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和猪去氧胆酸(785mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8:1-1:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-03)653mg(产率：49.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)；δ5.41(s,1H),4.96(d,J＝3.5Hz,1H),4.14–4.02(m,1H),3.64(dt,J＝15.5,5.5Hz,1H),2.68–2.58(m,1H),2.35(m,3H),2.12–1.95(m,2H),1.95–1.56(m,12H),1.56–1.21(m,16H),1.12(m,6H),1.02–0.89(m,10H),0.86(d,J＝7.3Hz,3H),0.65(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)；δ179.13(s),104.09(s),98.78(s),88.20(s),81.19(s),77.24(s),72.49(s),71.73(s),56.21(s),55.93(s),52.64(s),47.88(s),44.45(s),42.88(s),39.99(d),37.55(s),36.51(s),36.00(s),35.39(d),34.60(d),31.64(s),30.24(s),30.36(s),30.44(s),30.75(s),30.77(s),30.87(s),29.67(s),28.11(s),26.26(s),24.64(d),24.22(s),23.77(s),20.75(s),20.41(s),18.25(s),13.16(s),12.02(s)。
实施例4化合物JZ-04的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和鹅去氧胆酸(785mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10:1-1:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-04)723mg(产率：54.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)；δ5.46(s,1H),4.93(d,J＝3.1Hz,1H),3.88(s,1H),3.48(t,J＝10.8Hz,1H),2.65–2.55(m,1H),2.46–2.33(m,2H),2.27(m,1H),1.87(m,16H),1.52–1.13(m,21H),0.95(m,14H),0.66(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)；δ179.74(s),104.02(s),100.40(s),88.09(s),81.30(s),77.49(s),77.25(s),68.70(s),55.79(s),52.63(s),50.53(s),44.59(s),42.73(s),41.33(s),39.56(s),39.33(s),37.47(s),36.51(s),35.86(s),35.30(d),34.80(d),32.88(s),30.86(d),29.12(s),28.18(s),26.29(s),24.63(d),23.70(s),22.90(s),20.64(s),20.41(s),18.27(s),13.20(s),11.78(s)。
实施例5化合物JZ-05的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和薯蓣皂苷元(829mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝40:1-15:1)得白色固体化合物(编号化合物JZ-05)975mg(产率：71.6％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)；δ5.48(s,1H),5.36(d,J＝4.9Hz,1H),4.94(d,J＝3.4Hz,1H),4.43(dd,J＝15.0,7.5Hz,1H),3.60(dt,J＝9.6,4.7Hz,1H),3.50(dd,J＝10.3,3.5Hz,1H),3.40(t,J＝10.9Hz,1H),2.67–2.57(m,1H),2.44–2.26(m,3H),2.02(m,3H),1.93–1.80(m,5H),1.78–1.72(m,2H),1.71–1.57(m,7H),1.56–1.44(m,8H),1.40–1.09(m,7H),1.06–0.93(m,11H),0.90(d,J＝7.3Hz,3H),0.81(m,6H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)；δ140.74(s),121.39(s),109.32(s),104.05(s),99.45(s),88.09(s),81.27(s),80.87(s),77.25(s),76.13(s),66.87(s),62.05(s),56.46(s),52.62(s),50.01(s),44.52(s),41.61(s),40.27(s),39.78(s),37.47(s),36.90(d),36.49(s),34.71(s),31.97(d),31.40(d),30.76(s),30.32(s),28.81(s),27.59(s),26.28(s),24.61(d),20.87(s),20.42(s),19.52(s),17.18(s),16.32(s),14.57(s),13.12(s)。
实施例6化合物JZ-06的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和麦角甾醇(793mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝30:1-15:1)得白色固体(编号化合物JZ-06)895mg(产率：67.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)；δ5.56(dd,J＝5.6,2.2Hz,1H),5.49(s,1H),5.39(dt,J＝5.3,2.5Hz,1H),5.33–5.14(m,2H),4.97(d,J＝3.4Hz,1H),3.70(ddd,J＝11.2,7.8,4.4Hz,1H),2.69–2.58(m,1H),2.56–2.46(m,1H),2.38(m,2H),2.11–2.01(m,3H),2.00–1.82(m,7H),1.79–1.65(m,4H),1.65–1.56(m,2H),1.53–1.45(m,5H),1.42–1.21(m,10H),1.04(d,J＝6.7Hz,3H),0.89-0.98(m,12H),0.85(t,J＝6.4Hz,6H),0.64(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ140.99(s),139.97(s),135.63(s),131.93(s),119.47(s),116.47(s),104.05(s),99.60(s),88.10(s),81.24(s),77.24(s),75.07(s),55.69(s),54.50(s),52.63(s),46.05(s),44.52(s),42.81(d),40.50(s),39.07(s),38.81(s),37.97(s),37.48(s),37.26(s),36.49(s),34.72(s),33.10(s),30.77(s),29.72(s),28.35(s),27.98(s),26.25(s),24.52(s),24.70(s)23.03(s),21.09(d),20.40(s),19.98(s),19.67(s),17.62(s),16.21(s),13.11(s),12.07(s)。
实施例7化合物JZ-07的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和石胆酸(753mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝12:1-2:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-07)843mg(产率：65.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.47(s,1H),4.92(d,J＝3.3Hz,1H),3.73–3.53(m,1H),2.66–2.56(m,1H),2.39(m,2H),2.27(ddd,J＝15.8,9.7,6.4Hz,1H),2.05(dt,J＝14.5,3.7Hz,1H),1.99–1.94(m,1H),1.93–1.70(m,8H),1.68–1.55(m,3H),1.51–1.21(m,21H),1.08(m,4H),1.00–0.89(m,13H),0.66(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ180.33(s),104.04(s),100.16(s),88.07(s),81.26(s),76.26(s),56.42(s),55.98(s),52.63(s),44.57(s),42.77(s),41.97(s),40.42(s),40.12(s),37.48(s),36.50(s),35.85(s),35.32(s),35.42(s),34.74(s),32.59(s),31.00(s),30.85(s),30.78(s),29.72(s),29.01(s),28.20(s),27.33(s),26.40(s),26.27(s),24.63(d),24.21(s),23.51(s),20.89(s),20.42(s),18.30(s),13.18(s),12.07(s)。
实施例8化合物JZ-08的制备
-78℃下，三氟化硼乙醚(1mL)缓慢滴加至双氢青蒿素(569mg，2.0mmol)和脱氧胆酸(785mg，2.0mmol)的乙醚溶液(50mL)中，反应体系自然升至室温后搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相合并后用水(50mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝12:1-3:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-08)723mg(产率：54.8％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.47(s,1H),4.91(d,J＝3.4Hz,1H),4.02(s,1H),3.67–3.55(m,1H),2.65–2.56(m,1H),2.48–2.25(m,3H),2.07–2.01(m,1H),1.92–1.81(m,5H),1.77–1.70(m,3H),1.68–1.58(m,4H),1.54(m,2H),1.50–1.34(m,12H),1.27(m,8H),1.18–1.06(m,2H),1.01(d,J＝6.2Hz,3H),0.96(d,J＝6.3Hz,3H),0.93–0.85(m,7H),0.71(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ179.27(s),104.03(s),100.49(s),88.10(s),81.30(s),77.24(s),73.32(s),52.62(s),48.36(s),47.33(s),46.46(s),44.55(s),42.00(s),37.43(s),36.51(s),36.06(s),35.26(s),35.04(s),34.66(s),34.30(s),33.79(s),32.64(s),31.05–30.54(m),29.86–29.32(m),28.98(s),27.35(d),26.29(s),26.06(s),24.64(d),23.62(s),23.34(s),20.38(s),17.33(s),13.20(s),12.77(s)。
实施例9溴乙烷双氢青蒿素醚的制备
0℃下，三氟化硼乙醚(50μL)缓慢滴加至双氢青蒿素(284mg，1.0mmol)和2-溴乙醇(125mg，1.0mmol)的乙醚溶液(20mL)中，反应体系在0℃下搅拌过夜。TLC监测至反应结束后，用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相合并后用水(20mL)洗涤1次，饱和食盐水(20mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝30:1～8:1)得白色固体目标产物203mg(产率：51.9％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.48(s,1H),4.84(d,J＝3.3Hz,1H),4.18–4.07(m,1H),3.81–3.74(m,1H),3.51(t,J＝5.2Hz,2H),2.69–2.59(m,1H),2.40–2.33(m,1H),2.06–1.99(m,1H),1.92–1.84(m,2H),1.76(m,1H),1.68–1.61(m,1H),1.55–1.43(m,5H),1.37–1.21(m,3H),0.95–0.90(m,6H).
13C NMR(101MHz,CDCl3)δ104.10(s),102.02(s),88.13(s),81.08(s),77.42(s),77.11(s),76.79(s),68.16(s),52.56(s),44.35(s),37.38(s),36.39(s),34.66(s),31.47(s),30.89(s),26.16(s),24.65(s),24.36(s),20.39(s),13.00(s).
实施例10化合物JZ-09的制备
室温下，碳酸钾(276mg，2.0mmol)和催化量的碘化钾分别加入至溴乙烷双氢青蒿素醚(391mg，1.0mmol)和熊去氧胆酸(392mg，1.0mmol)的DMF(20mL)溶液中，该反应液升至70℃反应2小时。TLC监测至反应结束后，用水(20mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，有机相合并后用水(30mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1-1:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-09)536mg(产率：76.2％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.45(s,1H),4.84(d,J＝3.4Hz,1H),4.28–4.21(m,2H),4.08–3.98(m,1H),3.68–3.57(m,3H),2.72–2.58(m,1H),2.43–2.34(m,2H),2.28–2.19(m,1H),2.04(m,2H),1.91(m,2H),1.85–1.77(m,5H),1.71–1.60(m,5H),1.53–1.44(m,11H),1.39–1.25(m,12H),1.19–1.03(m,3H),0.94(m,12H),0.69(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ174.08(s),104.13(s),102.08(s),87.91(s),81.09(s),77.25(s),71.44(d),66.00(s),63.38(s),55.72(s),54.85(s),52.55(s),44.40(s),43.78(d),42.43(s),40.14(s),39.17(s),37.58(s),37.30(s),36.85(s),36.43(s),35.28(s),34.93(s),34.67(s),34.09(s),31.20(s),30.91(d),30.35(s),29.72(s),28.63(s),26.91(s),26.21(s),24.75(s),24.41(s),23.40(s),21.18(s),20.43(s),18.40(s),12.96(s),12.15(s)。
实施例11化合物JZ-10的制备
室温下，碳酸钾(276mg，2.0mmol)和催化量的碘化钾分别加入至溴乙烷双氢青蒿素醚(391mg，1.0mmol)和猪去氧胆酸(392mg，1.0mmol)的DMF(20mL)溶液中，该反应液升至70℃反应2小时。TLC监测至反应结束后，用水(20mL)缓慢淬灭反应，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，有机相合并后用水(30mL)洗涤1次，饱和食盐水(50mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过硅胶柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1-1:1)得无色油状化合物(编号化合物JZ-10)589mg(产率：83.7％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ5.45(s,1H),4.84(d,J＝3.4Hz,1H),4.28–4.22(m,2H),4.10–4.00(m,2H),3.67–3.62m,2H),2.71–2.58(m,1H),2.43–2.35(m,2H),2.22(s,1H),2.07(m,1H),1.98–1.87(m,4H),1.82–1.74(m,4H),1.67–1.59(m,8H),1.46–1.28(m,15H),1.17–1.08(m,6H),0.98–0.89(m,12H),0.65(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CDCl3)：δ174.10(s),104.12(s),102.06(s),87.90(s),81.09(s),77.26(s),71.60(s),68.07(s),66.00(s),63.38(s),56.14(s),55.86(s),52.55(s),48.39(s),44.40(s),42.85(s),39.95(s),39.80(s),37.58(s),36.43(s),35.96(s),35.35(s),35.55(s),35.03(s),34.83(s),34.66(s),31.19(s),30.92(s),30.83(s),30.24(s),29.20(s),28.13(s),26.20(s),24.74(s),24.41(s),24.21(s),23.50(s),20.75(s),20.42(s),18.27(s),12.95(s),12.05(s)。
实施例12化合物JZ-11的制备
0℃下，三氟化硼乙醚复合物(180mg)加入至熊去氧胆酸双氢青蒿素醚(化合物JZ-02，130mg，0.18mmol)的吡啶(2mL)溶液中，反应体系在室温下反应6小时，TLC监测至反应结束后，用1N稀盐酸(5mL)缓慢淬灭反应，二氯甲烷萃取(10mL×3)，有机相合并后用1N稀盐酸(20mL)洗涤2次，饱和食盐水(30mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1～10:1)得白色固体目标产物(编号化合物JZ-11)103mg(产率：70.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.97(s,1H),5.34(s,1H),4.80(d,J＝3.3Hz,1H),3.94(s,1H),3.39(s,1H),2.42–2.30(m,1H),2.29–2.04(m,5H),2.01–1.89(m,2H),1.84–1.54(m,10H),1.38(m,8H),1.27(m,7H),1.21–1.10(m,6H),1.00(m,2H),0.92–0.81(m,12H),0.61(s,3H).
13C NMR(100MHz,DMSO)δ175.89(s),103.71(s),100.13(s),87.51(s),80.98(s),77.27(s),76.33(s),55.29(s),55.08(s),43.66(s),41.43(s),35.28(s),35.01(s),34.75(s),34.60(s),34.15(s),31.76(s),31.62(s),31.44(s),31.27(s),30.94(s),30.28(s),29.49(s),28.97(s),26.13(s),25.87(s),24.67(d,J＝13.2Hz),23.74(s),20.65(s),18.78(s),13.40(s),12.42(s).
实施例13化合物JZ-12的制备
0℃下，三氟化硼乙醚复合物(180mg)加入至脱氧胆酸双氢青蒿素醚(化合物JZ-08，130mg，0.18mmol)的吡啶(2mL)溶液中，反应体系在室温下反应6小时，TLC监测至反应结束后，用1N稀盐酸(5mL)缓慢淬灭反应，二氯甲烷萃取(10mL×3)，有机相合并后用1N稀盐酸(20mL)洗涤2次，饱和食盐水(30mL)洗涤1次，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压旋干即得粗产物，粗产物过柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1～12:1)得白色固体目标产物(编号化合物JZ-12)112mg(产率：76.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.75(s,1H),5.33(s,1H),4.79(d,J＝3.3Hz,1H),4.34(s,1H),3.46(d,J＝10.7Hz,1H),2.37(m,1H),2.27–2.11(m,3H),2.08–1.92(m,2H),1.83–1.57(m,10H),1.53–1.43(m,5H),1.40–0.97(m,18H),0.96–0.78(m,14H),0.64(s,3H).
13C NMR(100MHz,DMSO)δ177.08(s),103.70(s),98.99(s),87.45(s),81.01(s),78.29(s),76.61(s),52.56(s),48.62(s),46.45(s),46.07(s),44.41(s),42.18(s),37.21(s),36.54(s),36.03(s),35.70(s),34.68(s),34.50(s),33.89(s),32.51(s),31.61(s),30.89(s),28.68(s),27.70(s),26.46(s),26.12(s),25.12(s),24.73(s),24.02(s),23.79(s),20.63(s),17.77(s),13.41(s),12.73(s).
实施例14双氢青蒿素-甾体结合物对体外培养的各种肿瘤细胞的抑制作用
1.实验原理
采用的肿瘤细胞为：人前列腺癌细胞-PC-3细胞(CRL-1435)、人宫颈癌细胞系-HeLa细胞(CCL-2)、人急性T细胞白血病细胞-Jurkat细胞(TIB-152)、人肾透明细胞腺癌-786-O细胞(CRL-1932)和人乳腺癌细胞-MCF7细胞(HTB-22)，检测本发明上述化合物样品对这些肿瘤细胞株生长的影响作用；以非洲绿猴肾细胞-Vero细胞为正常细胞(CCL-81)，检测化合物样品的细胞毒性作用。在化合物样品干预下，活细胞可利用细胞增殖-毒性检测试剂盒Cell Counting Kit-8(CCK-8溶液)进行染色，通过测定其OD值来反映细胞的存活和生长状态，即细胞存活率(％)和细胞生长抑制(％)。并计算出半数细胞存活时的化合物浓度CC50，以及抑制细胞生长为半数时的化合物浓度IC50。
2.实验材料
Vero细胞(CCL-81)、PC-3细胞(CRL-1435)、HeLa细胞(CCL-2)、Jurkat细胞(TIB-152)、786-O细胞(CRL-1932)、MCF7细胞(HTB-22)均购自ATCC；DMEM培养液、F12培养液、MEM培养液、RPMI 1640培养液均购自Gibco公司(Life Technologies)；胎牛血清(FBS)购自Hyclone公司(Thermo Scientific)；胰酶购自Gibco公司(Life Technologies)；CCK-8溶液购自上海东仁化学科技公司；96孔细胞培养板(透明平底)购自Corning公司；SpectraMax190microplate reader酶标仪购自Molecular Devices Corporation。
3.实验方法
含10％FBS的培养液为完全培养液。Vero细胞用DMEM完全培养液进行培养；PC-3细胞用F12完全培养液进行培养；Hela细胞用MEM完全培养液进行培养；Jurkat细胞用RPMI1640完全培养液进行培养；786-O细胞用RPMI 1640完全培养液进行培养；MCF-7细胞用MEM完全培养液进行培养。所有细胞培养成对数生长后，进行以下试验。
贴壁细胞以胰酶消化收集细胞；悬浮细胞直接收集。细胞离心，计数后，用各自完全培养液将细胞调制至5*103个/100μl/孔，接种于透明96孔培养板中；同时每块培养液板中都设置不加细胞、不加样品的空白孔；以及加细胞、不加样品的对照孔。接种后的96孔培养板在37℃，5％CO2培养箱中培养过夜。次日将加入测试化合物样品50μl/孔，并加入完全培养液50μl/孔。化合物样品最终试验浓度为100μM、25μM、6.25μM、1.56μM、0.39μM、0.1μM、0.02μM、0.006μM，各个试验浓度为双复孔；对照孔和空白孔用完全培养液替代化合物样品，即加入完全培养液100μl/孔。37℃，5％CO2培养箱中继续培养48小时。在结束培养前2小时，去培养液，加入含10％CCK-8溶液的完全培养液100μl/孔，至培养结束，酶标仪于450nM(参比650nM)处测定OD值。
根据检测Vero细胞存活率(％)，计算出半数细胞死亡浓度CC50，反应出化合物样品的毒性作用；检测肿瘤细胞株的细胞生长抑制(％)，计算出细胞生长数抑制在半数时的浓度IC50，反应出化合物样品的抗肿瘤活性。
计算公式如下：
细胞存活率(％)＝(化合物样品孔的OD值-空白孔的OD值)/(对照孔的OD值-空白孔的OD值)×100％
细胞生长抑制(％)＝[1-(化合物样品孔的OD值-空白孔的OD值)/(对照孔的OD值-空白孔的OD值)]×100％
4.实验结果
IC50结果见表1，结果显示，双氢青蒿素-甾体结合物对各类肿瘤细胞生长均具有不同程度的抑制，这一系列化合物对受试肿瘤细胞的抑制率均远远强于双氢青蒿素。个别化合物对受试肿瘤细胞的抑制率与紫杉醇相近，而毒性却远远小于紫杉醇。
表1双氢青蒿素-甾体结合物对各类肿瘤细胞的抑制作用
以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (8)

1.一种双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐，所述双氢青蒿素-甾体结合物的化学式选自下组：
2.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1所述双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐及药学上可接受的载体。
3.权利要求1所述双氢青蒿素-甾体结合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
双氢青蒿素在其10位以醚键和甾体上的3位连接，得双氢青蒿素-甾体结合物。
4.权利要求1所述双氢青蒿素-甾体结合物或其可药用盐在制备治疗癌症的药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述癌症包括脑癌、脑胶质瘤、子宫内膜癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、肝癌、白血病、淋巴癌、皮肤癌、基底细胞瘤、骨癌。
6.权利要求2所述的药物组合物在制备治疗癌症的药物中的应用。
7.权利要求2所述的药物组合物，与至少一种另外的抗癌剂联用在制备治疗癌症的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述另外的抗癌剂包括阿霉素类、博莱霉素、长春碱类、紫杉烷类、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺、甲氨蝶呤、顺铂、维甲酸、替莫唑胺、放线菌素、伊马替尼、吉非替尼、索拉非尼、厄洛替尼、舒尼替尼、利妥昔单抗、西妥昔单抗、曲妥珠单抗。
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