CN108552056A - 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 - Google Patents
一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108552056A CN108552056A CN201810008078.6A CN201810008078A CN108552056A CN 108552056 A CN108552056 A CN 108552056A CN 201810008078 A CN201810008078 A CN 201810008078A CN 108552056 A CN108552056 A CN 108552056A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- seedling
- embryo
- abies
- beshanzuensis
- abies beshanzuensis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 title claims abstract description 41
- 241000544345 Abies beshanzuensis Species 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 13
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 8
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 8
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 claims description 8
- 230000035784 germination Effects 0.000 claims description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 5
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000012549 training Methods 0.000 claims description 4
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 abstract 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 abstract 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 241000218642 Abies Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000218641 Pinaceae Species 0.000 description 2
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 2
- 210000002718 aborted fetus Anatomy 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 241000692178 Atriplex serenana Species 0.000 description 1
- 240000007582 Corylus avellana Species 0.000 description 1
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 description 1
- 244000050510 Cunninghamia lanceolata Species 0.000 description 1
- 241001529246 Platymiscium Species 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/002—Culture media for tissue culture
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，旨在解决百山祖冷杉极度濒危的问题。本发明以百山祖自然保护区中百山祖冷杉野生植株的未成熟球果为起始材料，表面消毒后剥取其未成熟胚及胚乳，通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉野生植株后代，短时间内获得数量较多的百山祖冷杉幼苗。本发明的优点是：利用百山祖冷杉未成熟胚，培养30天后，获得较多的百山祖冷杉幼苗，加快百山祖冷杉幼苗培育速度，改善百山祖冷杉在自然条件下极度濒危现状。该方法可操作性强，简单高效，污染率低，对世界濒危植物幼苗的快速培育具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，从而达到扩大濒危物种数量的目的。
背景技术
百山祖冷杉(Abiesbeshanzuensis)是松科(Pinaceae)冷杉属(Abies)植物，常绿乔木，高17米，胸径达80厘米。秋果圆柱形，有短梗，长7～12厘米，直径3.5～4厘米，成熟时淡褐色或淡褐黄色。5月开花，11月球果成熟。是浙江省特有的古老孑遗植物。在苏、浙、皖、闽等省第三纪时广泛分布，第四纪冰期后在局部地段唯一生存至今的珍稀物种。百山祖冷杉为国家一级重点保护植物，1987年被世界自然保护联盟物种生存委员会(SSC)公布列为世界最濒危的12种植物之一。百山祖冷杉自然分布于百山祖自然保护区海拔1740米左右的狭小避风谷地，是我国大陆东南部唯一的一种冷杉属植物，是第四纪冰川期保存下来的活化石，对于地理学和气候学等学科研究具有十分重要的意义。
自然条件下，百山祖冷杉球果发育时间长、结实率低。球果成熟时大量的胚存在败育的现象，导致正常发育的种子数量极少。同时，百山祖冷杉受到生态环境影响，造成天然更新困难、持续繁衍能力极弱等问题。因此，迫切需要建立一种简单的、快速的培育百山祖冷杉幼苗的方法。胚拯救技术是育种研究中克服胚败育或者发育不良，提高萌发率以及提早萌发，缩短植物发育时间的有效手段。运用胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗，可有效的防止濒危植物百山祖冷杉因在自然条件下繁殖困难而灭绝。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，包括如下步骤：
(1)采集百山祖冷杉植株上的未成熟球果；
(2)剥取未成熟种子并进行表面灭菌；
(3)用解剖刀切开未成熟种子，剥取未成熟胚并接种到培养基上，将其水平放置。20±2℃黑暗条件下培养3d；
(4)暗培养后，在弱光条件下(光照强度为20μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d)培养，直到胚萌发；
(5)胚萌发后，在正常光照条件下(光照强度为80μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d)培养10d后，将幼苗从胚乳中分离并接种到培养基上进行保存，培养条件为温度20±2℃、光照强度为80μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d。
进一步地，在所述步骤(1)中，所述未成熟球果形态特征为球果呈现绿色。
进一步地，在所述步骤(2)中，所述表面灭菌程序为：将未成熟种子置于流水下冲洗3h，冲洗后在超净工作台上用体积分数为70％乙醇水溶液浸泡并振荡30s，无菌水冲洗3次，每次1min。再用质量分数为0.1％的氯化汞的水溶液浸泡并振荡10min后，用无菌水冲洗5次，每次1min。最后用无菌滤纸吸干种子表面多余的水分。
进一步地，在所述步骤(3)中，所述剥取未成熟胚的方法为左手用无菌镊子固定未成熟种子，右手用无菌解剖刀在距种皮边缘0.5mm，分别进行纵切和横切，用镊子将种皮从未成熟胚及其胚乳上分离。
进一步地，在所述步骤(3)和步骤(5)中，培养基以DCR(Gupta and Durzanmedium)为基本培养基，另外添加蔗糖、琼脂、水解酪蛋白等，蔗糖、琼脂、水解酪蛋白的浓度分别为20g/L、8g/L、500mg/L，培养基的pH为5.8。
进一步地，在所述步骤(4)中，所述胚萌发形态特征为胚根或者子叶从胚乳中伸出。
进一步地，在所述步骤(5)中，所述分离幼苗的方法为用灭菌的解剖刀将胚乳纵向切开后，将幼苗从胚乳中分离。
本发明的优点是：本发明采用的外植体为未成熟胚，利用胚拯救技术对其进行培养，克服自然条件下种子胚败育的缺陷，可在短期内快速获得较多的百山祖冷杉幼苗。该方法可操作性强，简单高效，污染率低，对世界濒危植物幼苗的快速培育具有重要意义。
附图说明
图1是百山祖冷杉野生植株上的未成熟球果
图2是用于培养的百山祖冷杉外植体—未成熟胚及胚乳图；
图3是百山祖冷杉未成熟胚培养后萌发图；
图4是萌发幼苗生长图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步说明。
实施例1：
材料：本实例以百山祖冷杉未成熟胚及胚乳为培养外植体。
步骤(1)：取材
7月下旬至8月上旬于百山祖自然保护区收集百山祖冷杉未成熟球果，颜色绿色，这种绿色的未成熟果子表面种鳞、苞鳞排列紧密。可放于密封袋中，4℃低温中贮藏备用。
步骤(2)：种子表面灭菌
用镊子分离种鳞和种子，将种子置于流水下冲洗3h，在超净工作台上用70％乙醇处理30s，无菌水冲洗3～5次。再用0.1wt％氯化汞处理10min后，用无菌水冲洗3～5次并用无菌滤纸吸干表面水分。
步骤(3)：未成熟胚分离与接种
将冲洗后的种子置于铺有灭菌滤纸的培养皿中，左手用无菌镊子固定未成熟种子，右手用无菌解剖刀在距种皮边缘0.5mm，分别进行纵切和横切，用镊子将种皮从未成熟胚及其胚乳上分离(图1)。剥取未成熟胚及其胚乳并接种到培养基上，将其水平放置。培养基以DCR(Gupta and Durzan medium)为基本培养基，另外添加蔗糖、琼脂、水解酪蛋白等，蔗糖、琼脂、水解酪蛋白的浓度分别为20g/L、8g/L、500mg/L，培养基的pH为5.8。
步骤(4)：暗培养与异养期培养
接种后的未成熟胚及其胚乳先于20±2℃黑暗条件下培养3d，再弱光光照条件下培养10天可见种子萌发，所述弱光光照条件为：光照强度为20μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d。
步骤(5)：自养期培养
未成熟胚培养后，萌发率可达95％以上(图2)。然后幼苗从胚乳中分离并接种到培养基上进行自养期培养与保存，培养基以DCR(Gupta and Durzanmedium)为基本培养基，另外添加蔗糖、琼脂、水解酪蛋白等，蔗糖、琼脂、水解酪蛋白的浓度分别为20g/L、8g/L、500mg/L，培养基的pH为5.8。培养条件为温度20±2℃、光照强度为80μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d。培养15天后的幼苗如图3所示，由此可见，通过本方法可在短期内获得数量比较多的百山祖冷杉无菌幼苗用于濒危植物百山祖冷杉的快速培育。
Claims (7)
1.一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)采集百山祖冷杉植株上的未成熟球果；
(2)剥取未成熟种子并进行表面灭菌；
(3)用解剖刀切开未成熟种子，剥取未成熟胚并接种到培养基上，将其水平放置。20±2℃黑暗条件下培养3d；
(4)暗培养后，在弱光条件下(光照强度为20μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d)培养，直到胚萌发；
(5)胚萌发后，在正常光照条件下(光照强度为80μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d)培养10d后，将幼苗从胚乳中分离并接种到培养基上进行保存，培养条件为温度20±2℃、光照强度为80μmol·m-2·s-1、光照时间为12h/d。
2.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(1)中，所述未成熟球果形态特征为球果呈现绿色。
3.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(2)中，所述表面灭菌程序为：将未成熟种子置于流水下冲洗3h，冲洗后在超净工作台上用体积分数为70％乙醇水溶液浸泡并振荡30s，无菌水冲洗3次，每次1min。再用质量分数为0.1％的氯化汞的水溶液浸泡并振荡10min后，用无菌水冲洗5次，每次1min。最后用无菌滤纸吸干种子表面多余的水分。
4.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(3)中，所述剥取未成熟胚的方法为左手用无菌镊子固定未成熟种子，右手用无菌解剖刀在距种皮边缘0.5mm，分别进行纵切和横切，用镊子将种皮从未成熟胚及其胚乳上分离。
5.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(3)和步骤(5)中，培养基以DCR(Gupta and Durzan medium)为基本培养基，另外添加蔗糖、琼脂、水解酪蛋白等，蔗糖、琼脂、水解酪蛋白的浓度分别为20g/L、8g/L、500mg/L，培养基的pH为5.8。
6.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(4)中，所述胚萌发形态特征为胚根或者子叶从胚乳中伸出。
7.根据权利要求1所述的一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法，其特征在于：在所述步骤(5)中，所述分离幼苗的方法为用灭菌的解剖刀将胚乳纵向切开后，将幼苗从胚乳中分离。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810008078.6A CN108552056B (zh) | 2018-01-04 | 2018-01-04 | 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 |
| JP2020501141A JP6876193B2 (ja) | 2018-01-04 | 2018-05-28 | 胚救助技術による百山祖冷杉の苗を短い時間で得ることが出来る方法 |
| PCT/CN2018/088620 WO2019134331A1 (zh) | 2018-01-04 | 2018-05-28 | 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810008078.6A CN108552056B (zh) | 2018-01-04 | 2018-01-04 | 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN108552056A true CN108552056A (zh) | 2018-09-21 |
| CN108552056B CN108552056B (zh) | 2020-08-14 |
Family
ID=63530664
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810008078.6A Active CN108552056B (zh) | 2018-01-04 | 2018-01-04 | 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP6876193B2 (zh) |
| CN (1) | CN108552056B (zh) |
| WO (1) | WO2019134331A1 (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109601377A (zh) * | 2018-11-29 | 2019-04-12 | 浙江大学 | 一种通过未成熟胚快速培育水松幼苗的方法 |
| CN111670703A (zh) * | 2020-06-23 | 2020-09-18 | 浙江大学 | 一种百山祖冷杉高效嫁接的方法 |
| CN112021139A (zh) * | 2019-05-14 | 2020-12-04 | 浙江大学 | 一种快速人工栽培冷杉属植物幼苗的方法 |
| CN114467750A (zh) * | 2022-02-16 | 2022-05-13 | 浙江大学 | 一种大盘山榧未成熟种子看护培养方法 |
| CN115125261A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-09-30 | 浙江大学 | 百山祖冷杉蔗糖合成酶基因和产品及用途 |
| CN115136889A (zh) * | 2022-04-14 | 2022-10-04 | 广西壮族自治区亚热带作物研究所（广西亚热带农产品加工研究所） | 一种番木瓜未成熟种子萌发方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5034326A (en) * | 1989-10-23 | 1991-07-23 | Weyerhaeuser Company | Method for reproducing coniferous plants by somatic embryogenesis using adsorbent materials in the development stage media |
| CN101849505A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-10-06 | 南京林业大学 | 诱导马尾松未成熟种子胚性胚柄细胞团再生植株的方法 |
| CN104620982A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-20 | 浙江大学 | 一种通过未成熟种子的培养繁育蛛网萼后代的方法 |
-
2018
- 2018-01-04 CN CN201810008078.6A patent/CN108552056B/zh active Active
- 2018-05-28 JP JP2020501141A patent/JP6876193B2/ja active Active
- 2018-05-28 WO PCT/CN2018/088620 patent/WO2019134331A1/zh active Application Filing
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5034326A (en) * | 1989-10-23 | 1991-07-23 | Weyerhaeuser Company | Method for reproducing coniferous plants by somatic embryogenesis using adsorbent materials in the development stage media |
| CN101849505A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-10-06 | 南京林业大学 | 诱导马尾松未成熟种子胚性胚柄细胞团再生植株的方法 |
| CN104620982A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-20 | 浙江大学 | 一种通过未成熟种子的培养繁育蛛网萼后代的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| INGER HAKMAN等: "THE DEVELOPMENT OF SOMATIC EMBRYOS IN TISSUE CULTURES INITIATED FROM IMMATURE EMBRYOS OF PICEA ABIES(NORWAY SPRUCE)", 《PLANT SCIENCE》 * |
| 季孔庶等: "松科树种的离体培养研究进展", 《南京林业大学学报（自然科学版）》 * |
| 张倩云等: "植物胚拯救技术的影响因素及其应用", 《南京林业大学学报(自然科学版)》 * |
| 朱建华等: "《植物组织培养实用技术》", 31 January 2002, 中国计量出版社 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109601377A (zh) * | 2018-11-29 | 2019-04-12 | 浙江大学 | 一种通过未成熟胚快速培育水松幼苗的方法 |
| CN112021139A (zh) * | 2019-05-14 | 2020-12-04 | 浙江大学 | 一种快速人工栽培冷杉属植物幼苗的方法 |
| CN111670703A (zh) * | 2020-06-23 | 2020-09-18 | 浙江大学 | 一种百山祖冷杉高效嫁接的方法 |
| CN111670703B (zh) * | 2020-06-23 | 2022-04-26 | 浙江大学 | 一种百山祖冷杉高效嫁接的方法 |
| CN114467750A (zh) * | 2022-02-16 | 2022-05-13 | 浙江大学 | 一种大盘山榧未成熟种子看护培养方法 |
| CN115136889A (zh) * | 2022-04-14 | 2022-10-04 | 广西壮族自治区亚热带作物研究所（广西亚热带农产品加工研究所） | 一种番木瓜未成熟种子萌发方法 |
| CN115136889B (zh) * | 2022-04-14 | 2023-01-13 | 广西壮族自治区亚热带作物研究所（广西亚热带农产品加工研究所） | 一种番木瓜未成熟种子萌发方法 |
| CN115125261A (zh) * | 2022-06-21 | 2022-09-30 | 浙江大学 | 百山祖冷杉蔗糖合成酶基因和产品及用途 |
| CN115125261B (zh) * | 2022-06-21 | 2024-04-30 | 浙江大学 | 百山祖冷杉蔗糖合成酶基因和产品及用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2019134331A1 (zh) | 2019-07-11 |
| JP6876193B2 (ja) | 2021-05-26 |
| CN108552056B (zh) | 2020-08-14 |
| JP2021502052A (ja) | 2021-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108552056A (zh) | 一种通过胚拯救技术快速培育百山祖冷杉幼苗的方法 | |
| CN103609223B (zh) | 赤霉素与湿沙层积使七叶一枝花种子快速萌发繁育的方法 | |
| CN103609224B (zh) | 一种路易斯安娜鸢尾杂交种子萌发的方法 | |
| CN104521751B (zh) | 一种杂交兰“黄金小神童”的组织培养高效繁殖育苗方法 | |
| CN101822220A (zh) | 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104855292B (zh) | 一种牛樟茎段组培快繁的方法 | |
| CN107047310A (zh) | 一种白芨种子培养成苗的培养方法 | |
| CN110301355A (zh) | 一种墨兰组织培养方法 | |
| CN104145814B (zh) | 一种高盆樱桃（原变种）茎段组织培养获得再生植株的方法 | |
| CN108739370A (zh) | 一种利用成熟莲胚进行快繁的方法 | |
| CN107278891A (zh) | 一种杏梅组织培养快速繁殖方法 | |
| Karuppusamy et al. | Micropropagation of Vanasushava pedata-An endangered medicinal plant of South India | |
| CN102239801A (zh) | 一种兰科植物试管内授粉及结实的方法 | |
| CN103444309A (zh) | 赤霉素与滤纸组合使七叶一枝花种子快速萌发的方法 | |
| CN108770692A (zh) | 椰子胚诱导培养基和基于椰子合子胚细胞薄层培养获得离体再生植株的方法 | |
| CN101238794A (zh) | 野百合试管鳞茎的诱导方法 | |
| CN109601377A (zh) | 一种通过未成熟胚快速培育水松幼苗的方法 | |
| Nishitha et al. | Micropropagation and encapsulation of medicinally important Chonemorpha grandiflora | |
| CN104488709B (zh) | 一种花叶紫娇花鳞茎组织培养的方法 | |
| Jahan et al. | Clonal propagation of Chrysanthemum morifolium ramat using various explants obtained from field grown plants | |
| CN105794650B (zh) | 一种通过未成熟种子保存极小种群广西越桔后代的方法 | |
| Chen et al. | In vitro propagation of Lychnis senno Siebold et Zucc., a rare plant with potential ornamental value | |
| CN114424749A (zh) | 一种山麦冬离体快繁方法 | |
| CN107821169A (zh) | 一种滇黄精种苗的组培方法 | |
| CN107439211A (zh) | 一种缩短茄子出芽成苗时间的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20211008 Address after: 310058 Yuhang Tang Road, Xihu District, Hangzhou, Zhejiang 866 Patentee after: ZHEJIANG University Address before: 310058 Yuhang Tang Road, Xihu District, Hangzhou, Zhejiang 866 Patentee before: ZHEJIANG University Patentee before: ZHEJIANG FENGYANGSHAN BAISHANZU NATIONALLY DESIGNATED NATURAL RESERVE BAISHANZU MANAGEMENT OFFICE |
|
| TR01 | Transfer of patent right |