CN108522800A - 一种基于秸秆和真菌的绿色饲料及制备方法 - Google Patents

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宋英今
杨晓沛
王彩玉
陈冠益
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Abstract

本发明公开了一种基于秸秆和真菌的绿色饲料及制备方法，制备方法为：(1)羊肚菌培养；(2)羊肚菌接种液制备；(3)发酵，取玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水发酵基质；在无菌条件下，将羊肚菌接种液接种在发酵基质中，在相对湿度为65％‑75％，避光培养30‑35天，得到绿色饲料。本发明的方法利用食用菌发酵玉米秸秆等废弃物生产绿色饲料与市场中销售的饲料相比，其原料来源安全可靠，普遍易得，且该绿色饲料中除了包含普通饲料含有的营养物质外，还有较高含量的抗氧化物质即多糖类物质，因其含有较多的多糖类物质，相较于其他饲料具有明显的抗氧化、抗肿瘤、调节免疫力等作用。

Description

一种基于秸秆和真菌的绿色饲料及制备方法
技术领域
本发明涉及一种基于秸秆和真菌的绿色饲料及制备方法，属于微生物和发酵工程技术领域。
背景技术
农作物秸秆是农业生产的副产物，是一种可再生的生物质资源，具有来源广、污染小、热值含量高等特点。我国是农业大国，拥有丰富的生物质资源同时也具有较大的新型能源化开发潜力，但是，据调查，目前我国秸秆利用率约为33％，严重制约了农业的可持续发展。作为我国产量较高的秸秆作物，玉米秸秆的发酵研究主要集中在玉米秸秆生物发酵技术领域，包括饲料生产、乙醇生产、沼气生产，其重点研究了秸秆发酵饲料生产方法及其对动物生长性能的影响，而对于秸秆发酵生产多糖等抗氧化物质的研究甚少。
科学研究表明多糖、生物类黄酮、多酚类等物质能够有效清除人体和动物体内的自由基及毒素，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节和活血化瘀等药理功效和保健功能。随着科学的不断发展，人们发现食用菌中含有丰富的多糖物质。该多糖主要是从担子菌与子囊菌子实体、菌丝体和发酵液中分离出的代谢产物，能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老，并且能够增强机体免疫功能，在国际上被称为生物反应调节剂(BiologicalResponse Modifier,BRM)。
目前，尚未有通过发酵工程等技术手段，利用玉米秸秆等固体废弃物制备多糖，实现秸秆等固体废弃物的资源化高值利用的报道。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种成本低廉，安全有效且具有高含量多糖等营养物质的基于秸秆和真菌的绿色饲料。
本发明的第二个目的是提供基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法。
本发明的技术方案概述如下：
一种基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法，包括如下步骤：
(1)羊肚菌培养；
(2)羊肚菌接种液制备；
(3)发酵：按C/N比为12:1-18:1的比例，取玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水率为65％-75％发酵基质；按8-12ml：100g的比例，在无菌条件下，将所述羊肚菌接种液接种在所述发酵基质中，在22-24℃，相对湿度为65％-75％，避光培养30-35天，得到绿色饲料。
步骤(1)羊肚菌培养优选为：将羊肚菌接种在PDA培养基中，在23-26℃培养8-12天，4℃的条件下保存。
步骤(2)羊肚菌接种液制备优选为；将羊肚菌菌丝接种到PDA培养基中，23-26℃进行培养，直到羊肚菌菌丝弥漫在PDA培养基中；按比例，将10个单位的5mm×5mm的羊肚菌菌丝接种到100ml的PDA液体培养液中，在转速100-140rpm，23-26℃培养6-8天，得到羊肚菌接种液。
玉米秸秆的预处理步骤优选为：
(1)将玉米秸秆水洗、风干、粉碎、过40目筛，干燥；
(2)按质量比为1:10，将步骤(1)获得的物料与去离子水混合，加入水热反应釜中，在设定170℃-190℃，将水热反应釜放入烘箱中进行升温，达到设定温度后保持20-40min，固液分离，收集滤液及固体，固体烘干得秸秆粉末。
上述方法制备的基于秸秆和真菌的绿色饲料。
本发明的优点：
1.本发明的方法利用食用菌发酵玉米秸秆等废弃物生产绿色饲料与市场中销售的饲料相比，其原料来源安全可靠，普遍易得，且该绿色饲料中除了包含普通饲料含有的营养物质外，还有较高含量的抗氧化物质即多糖类物质。
2本发明的基于秸秆和真菌的绿色饲料，因其含有较多的多糖类物质，相较于其他饲料具有明显的抗氧化、抗肿瘤、调节免疫力等优良作用。
3.本发明的基于秸秆和真菌的绿色饲料，符合当前重视资源再利用和环境保护的社会经济发展主流，开发农作物秸秆等废弃物，实现资源的回收利用，同时也保护了生态环境。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。下面的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发明作任何限制。
羊肚菌(Morehella esculenta(L.)Pers)购自四川成都普润生农业科技有限公司。
实施例1
羊肚菌培养，包括如下步骤：
将羊肚菌接种在PDA培养基中，在25℃培养10天，4℃的条件下保存。每隔三个月进行再次培养。
实施例2
羊肚菌培养，包括如下步骤：
将羊肚菌接种在PDA培养基中，在23℃培养12天，4℃的条件下保存。每隔三个月进行再次培养。
实施例3
羊肚菌培养，包括如下步骤：
将羊肚菌接种在PDA培养基中，在26℃培养8天，4℃的条件下保存。每隔三个月进行再次培养。
PDA培养基：3.0g/L KH2PO4，20.0g/L葡萄糖，1.5g/L MaSO4·7H2O，20.0g/L琼脂，4.0g/L土豆提取液，蒸馏水。
实施例4
羊肚菌接种液制备为：将实施例1获得的羊肚菌菌丝接种到PDA培养基中，25℃进行培养，直到羊肚菌菌丝弥漫在PDA培养基中；按比例，将10个单位的5mm×5mm的羊肚菌菌丝接种到100ml的PDA液体培养液中，在转速120rpm，25℃培养7天，得到羊肚菌接种液。
实施例5
羊肚菌接种液制备为；将实施例2获得的羊肚菌菌丝接种到PDA培养基中，23℃进行培养，直到羊肚菌菌丝弥漫在PDA培养基中；按比例，将10个单位的5mm×5mm的羊肚菌菌丝接种到100ml的PDA液体培养液中，在转速100rpm，23℃培养8天，得到羊肚菌接种液。
实施例6
羊肚菌接种液制备为；将实施例3获得的羊肚菌菌丝接种到PDA培养基中，26℃进行培养，直到羊肚菌菌丝弥漫在PDA培养基中；按比例，将10个单位的5mm×5mm的羊肚菌菌丝接种到100ml的PDA液体培养液中，在转速140rpm，26℃培养6天，得到羊肚菌接种液。
PDA液体培养液：3.0g/L KH2PO4，20.0g/L葡萄糖，1.5g/L MaSO4·7H2O，4.0g/L土豆提取液，蒸馏水。
实施例7
玉米秸秆的预处理步骤为：
(1)将玉米秸秆水洗、风干、粉碎、过40目筛，干燥；
(2)按质量比为1:10，将步骤(1)获得的物料与去离子水混合，加入水热反应釜中，在设定180℃，将水热反应釜放入烘箱中进行升温，达到设定温度后保持30min，固液分离，收集滤液及固体，固体烘干得秸秆粉末。
实施例8
玉米秸秆的预处理步骤为：
(1)将玉米秸秆水洗、风干、粉碎、过40目筛，干燥；
(2)按质量比为1:10，将步骤(1)获得的物料与去离子水混合，加入水热反应釜中，在设定170℃，将水热反应釜放入烘箱中进行升温，达到设定温度后保持40min，固液分离，收集滤液及固体，固体烘干得秸秆粉末。
实施例9
玉米秸秆的预处理步骤为：
(1)将玉米秸秆水洗、风干、粉碎、过40目筛，干燥；
(2)按质量比为1:10，将步骤(1)获得的物料与去离子水混合，加入水热反应釜中，在设定190℃，将水热反应釜放入烘箱中进行升温，达到设定温度后保持20min，固液分离，收集滤液及固体，固体烘干得秸秆粉末。
实施例10
一种基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法，包括如下步骤：
(1)实施例1的方法进行羊肚菌培养；
(2)实施例4的方法进行羊肚菌接种液制备；
(3)发酵：按C/N比为14:1的比例，取实施例7玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水率为70％发酵基质；按10ml：100g的比例，在无菌条件下，将所述羊肚菌接种液接种在所述发酵基质中，在23℃，相对湿度为70％，避光培养33天，得到绿色饲料。
粗多糖的测定：将绿色饲料，在对流恒温烤箱60℃进行干燥处理，取出后进行研磨粉碎，得到的样品进行粗多糖的测定。通过苯酚-硫酸法进行粗多糖的测定。通过实验结果得出多糖含量为0.81mg/g。
实施例11
一种基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法，包括如下步骤：
(1)实施例2的方法进行羊肚菌培养；
(2)实施例5的方法进行羊肚菌接种液制备；
(3)发酵：按C/N比为12:1的比例，取实施例8玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水率为65％发酵基质；按8ml：100g的比例，在无菌条件下，将所述羊肚菌接种液接种在所述发酵基质中，在22℃，相对湿度为65％，避光培养35天，得到绿色饲料。多糖含量为0.64mg/g。
实施例12
一种基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法，包括如下步骤：
(1)实施例3的方法进行羊肚菌培养；
(2)实施例6的方法进行羊肚菌接种液制备；
(3)发酵：按C/N比为18:1的比例，取实施例9玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水率为75％发酵基质；按12ml：100g的比例，在无菌条件下，将所述羊肚菌接种液接种在所述发酵基质中，在24℃，相对湿度为75％，避光培养30天，得到绿色饲料。多糖含量为0.63mg/g。

Claims (5)

1.一种基于秸秆和真菌的绿色饲料的制备方法，其特征是包括如下步骤：
(1)羊肚菌培养；
(2)羊肚菌接种液制备；
(3)发酵：按C/N比为12:1-18:1的比例，取玉米秸秆预处理得到的秸秆粉末和烘干的豆腐渣，加上蒸馏水，混合均匀，灭菌，得到含水率为65％-75％发酵基质；按8-12ml：100g的比例，在无菌条件下，将所述羊肚菌接种液接种在所述发酵基质中，在22-24℃，相对湿度为65％-75％，避光培养30-35天，得到绿色饲料。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述步骤(1)羊肚菌培养为：将羊肚菌接种在PDA培养基中，在23-26℃培养8-12天，4℃条件下保存。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是所述步骤(2)羊肚菌接种液制备为：将羊肚菌菌丝接种到PDA培养基中，23-26℃进行培养，直到羊肚菌菌丝弥漫在PDA培养基中；按比例，将10个单位的5mm×5mm的羊肚菌菌丝接种到100ml的PDA液体培养液中，在转速100-140rpm，23-26℃培养6-8天，得到羊肚菌接种液。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述玉米秸秆的预处理步骤为：
(1)将玉米秸秆水洗、风干、粉碎、过40目筛，干燥；
(2)按质量比为1:10，将步骤(1)获得的物料与去离子水混合，加入水热反应釜中，在设定170℃-190℃，将水热反应釜放入烘箱中进行升温，达到设定温度后保持20-40min，固液分离，收集滤液及固体，固体烘干得秸秆粉末。
5.权利要求1-4之一的方法制备的基于秸秆和真菌的绿色饲料。
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