CN108473498A - 作为IRAK4调节剂的吡唑并[1,5a]嘧啶衍生物 - Google Patents

作为IRAK4调节剂的吡唑并[1,5a]嘧啶衍生物 Download PDF

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Abstract

本文描述了式(0)、式(I)和式(II)化合物以及作为白介素‑1受体相关激酶(IRAK4)抑制剂使用的方法。

Description

作为IRAK4调节剂的吡唑并[1,5a]嘧啶衍生物
相关申请的交叉引用
本申请要求2015年12月22日提交的美国临时申请No.62/271,171、2016年1月15日提交的美国临时申请No.62/279,459和2016年9月22日提交的美国临时申请No.62/398,341的权益。
发明领域
本发明涉及可用于抑制白介素-1受体相关激酶4(IRAK4)的化合物。
发明背景
含有TIR-结构域(Toll-白介素1受体-结构域)的细胞表面受体(例如Toll-样受体(TLR)和IL-1以及IL-18受体)在先天免疫中起关键作用，并且与自身免疫的发病机理相关。例如，TLR识别致病的或内源的配体并且为树突细胞成熟以及向T细胞的抗原呈递提供必要的信号。类似地，由这些受体介导信号传导的蛋白质也已经显示在自身免疫障碍的发病机理中发挥重要的作用。例如，MyD88(一种直接与TIR结构域互相作用的衔接蛋白)缺失的小鼠更易受到细菌、真菌和寄生虫的感染。此外，MyD88缺失小鼠对于试验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)以及链球菌细胞壁诱导的关节炎具有抵抗力。
白介素-1受体相关激酶(IRAK)家族包含四个家族成员IRAK1、IRAK2、IRAK3(也称为IRAK-M)和IRAK4。这些蛋白质的特征在于具有典型的N-末端死亡结构域，该结构域介导与MyD88-家族衔接蛋白和位于中心的激酶结构域之间的相互作用。尽管IRAK1和IRAK4具有激酶活性，但是IRAK2和IRAK3却是催化无活性的。人们认为，IRAK4在其上游同源受体活化后磷酸化IRAK1，从而导致IRAK1的活化和自磷酸化，随后磷酸化下游底物。IRAK1的过磷酸化导致其由受体复合体中解离以及其最终泛素化和蛋白酶体降解。下游底物例如Pellino-2的磷酸化最终引起MAPK(例如p38和c-Jun N-末端激酶(JNK)和NF-kB)的活化，随后产生促炎细胞因子、趋化因子和破坏性酶。
IRAK4在先天免疫和自身免疫疾病的发病机理中的作用逐渐显露。参见例如Li等人,“IRAK-4:A novel member of the IRAK family with the properties of an IRAK-kinase,”PNAS 2002,99(8),5567-5572；Flannery等人,“The interleukin-1receptor-associated kinases:Critical regulators of innate immune signaling,”BiochemPharm 2010,80(12),1981-1991。IRAK4不稳定突变或无效突变的患者在TLR信号传导和促炎细胞因子(例如IL-1和TNF以及抗病毒细胞因子(例如IFNα和IFNβ)的产生方面存在缺陷。这些患者显示对于革兰氏阳性细菌感染具有增加的易感性，但是他们通常对于革兰氏阴性细菌、病毒和真菌感染具有抵抗力。类似地，IRAK4缺失小鼠在TLR-和IL-1-介导的细胞因子的产生方面有缺陷并且显示出增加的对感染的易感性。IRAK1缺失小鼠显示出丧失对脂多糖(LPS)、IL-1和IL-18的响应，以及受损的Th1发育。这些小鼠对于试验性自身免疫脑脊髓炎具有抵抗力，显示极少的或没有CNS炎症。
因此，调节IRAK4功能的化合物代表着开发用于治疗疾病例如与IRAK-介导的信号转导有关的炎性、细胞增殖性和免疫相关的病症和疾病例如类风湿性关节炎、炎性肠病、多发性硬化、狼疮、糖尿病、肥胖、变态反应性疾病、银屑病、哮喘、移植排斥、癌症和脓毒症的治疗剂的有吸引力的途径。
发明概述
本发明的一个方面包括式0化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、-O-C1-3烷基、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
其中任何环烷基、杂环基、杂芳基环或芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、-C(O)NR8R9或-NR8R9，
其中任何烷基、链烯基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被氧代取代的3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基；
R5是氢、-CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C0-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：(i)任选被卤素取代的-C(O)(C1-3烷基)或(ii)任选被卤素取代的C1-3烷基，并且
其中任何环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1-2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-3-11元杂环基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-(C0-3烷基)-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OR13；C1-3卤代烷氧基；-C(O)(C1-3烷基)；-S-C1-3烷基；或任选被以下取代的C1-3烷基：OH、卤素、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基，并且
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成5-8元杂环基，
其中任何烷基、环烷基、苯基、杂环基或杂芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13、-NR6R7或5-6元单环杂芳基环；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是氢、卤素、CN或任选被-NH2、卤素或CN取代的C1-3烷基。
本发明的另一个方面包括式I化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C1-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷氧基、-C(O)(C1-3烷基)、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR8R9、-OP(O)(OC1-3烷基)2、任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环或者任选被卤素、氧代、CN、OH、苯基、3-8元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基、任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的-(C0-3烷基)-3-11元杂环基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成任选被以下取代的5-8元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
本发明的另一个方面包括式II化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或者任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
还提供了包含本发明化合物和可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
另一个方面包括本发明化合物，其用于治疗，例如治疗炎性疾病、自身免疫疾病或癌症。
另一个方面包括在患者中预防、治疗对抑制IRAK4有响应的疾病或病症或者减轻对抑制IRAK4有响应的疾病或病症的严重程度的方法。该方法可以包括给患者施用治疗有效量的本发明化合物。
另一个方面包括本发明化合物在制备用于治疗对抑制IRAK4有响应的疾病的药物中的用途。
另一个方面包括药盒，其用于治疗对抑制IRAK4有响应的疾病或障碍。该药盒可以包含含有本发明化合物的第一药物组合物和使用说明书。
发明详述
定义
“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br或I。另外，术语例如“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。
术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基，其中所述烷基可以任选被取代。在一个实例中，烷基是1至18个碳原子(C1-C18)。在其它实例中，烷基是C0-C6、C0-C5、C0-C3、C1-C12、C1-C10、C1-C8、C1-C6、C1-C5、C1-C4或C1-C3。C0烷基是指键。烷基的实例包括甲基(Me，-CH3)、乙基(Et，-CH2CH3)、1-丙基(n-Pr，正丙基，-CH2CH2CH3)、2-丙基(i-Pr，异丙基，-CH(CH3)2)、1-丁基(n-Bu，正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(i-Bu，异丁基，-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(s-Bu，仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(t-Bu，叔丁基，-C(CH3)3)、1-戊基(正戊基，-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基和1-辛基。在一些实施方案中，“任选取代的烷基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被取代，例如被选自该同一列表的1至4个取代基取代。
“芳基”是指具有指定碳原子数(或如果没有指定数目，至多14个碳原子)的碳环芳基，无论是否与一个或多个基团稠合。一个实例包括具有6-14个碳原子的芳基。另一个实例包括具有6-10个碳原子的芳基。芳基的实例包括苯基、萘基、联苯基、菲基、并四苯基、1,2,3,4-四氢萘基、1H-茚基、2,3-二氢-1H-茚基等(参见例如Lang’s Handbook of Chemistry(Dean,J.A.编辑)第13版，表7-2[1985])。特别的芳基是苯基。取代的苯基或取代的芳基是指被1、2、3、4或5个取代基，例如1-2个、1-3个或1-4个取代基取代的苯基或芳基，所述取代基例如选自本文所列的基团(参见“任选取代的”定义)，例如F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被取代，例如被选自该同一列表的1至4个取代基取代。术语“取代的苯基”的实例包括单-或二(卤代)苯基，例如2-氯苯基、2-溴苯基、4-氯苯基、2,6-二氯苯基、2,5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2-氟苯基、2,4-二氟苯基等；单-或二(羟基)苯基，例如4-羟基苯基、3-羟基苯基、2,4-二羟基苯基、其保护的-羟基衍生物等；硝基苯基，例如3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如4-氰基苯基；单-或二(烷基)苯基，例如4-甲基苯基、2,4-二甲基苯基、2-甲基苯基、4-(异丙基)苯基、4-乙基苯基、3-(正丙基)苯基等；单或二(烷氧基)苯基，例如3,4-二甲氧基苯基、3-甲氧基-4-苄基氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-(异丙氧基)苯基、4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；单-或二羧基苯基或(保护的羧基)苯基，例如4-羧基苯基、单-或二(羟基甲基)苯基或(保护的羟基甲基)苯基，例如3-(保护的羟基甲基)苯基或3,4-二(羟基甲基)苯基；单-或二(氨基甲基)苯基或(保护的氨基甲基)苯基，例如2-(氨基甲基)苯基或2,4-(保护的氨基甲基)苯基；或者单-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基，例如3-(N-甲基磺酰基氨基))苯基。而且，术语“取代的苯基”表示其中取代基不同的二取代的苯基，例如3-甲基-4-羟基苯基、3-氯-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟基苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-氯-5-二氟甲氧基等，以及其中取代基不同的三取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-6-甲基磺酰基氨基、3-甲氧基-4-苄基氧基-6-苯基磺酰基氨基，和其中取代基不同的四取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄基氧基-5-甲基-6-苯基磺酰基氨基。
除非另外说明，否则术语“本发明化合物”等包括本文的式0、式I、式II以及表1、2和3的化合物，包括其立体异构体(包括阻转异构体)、几何异构体、互变异构体、溶剂化物、代谢物、同位素、盐(例如可药用盐)和前药。在一些实施方案中，溶剂化物、代谢物、同位素或前药被排除，或其任何组合。
“环烷基”是指非芳族、饱和或部分不饱和的烃环基团，其中环烷基可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。在一个实例中，环烷基是3至12个碳原子(C3-C12)。在其它实例中，环烷基是C3-C8、C3-C10或C5-C10。在其它实例中，作为单环的环烷基是C3-C8、C3-C6或C5-C6。在另一个实例中，作为二环的环烷基是C7-C12。在另一个实例中，作为螺环系统的环烷基是C5-C12。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、全氘环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的二环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环系。示例性桥连二环环烷基包括但不限于二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。在一些实施方案中，“任选取代的环烷基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、芳基和杂环部分可以任选被取代，例如被选自该同一列表的1至4个取代基取代。
“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”或“杂环基”可互换使用，是指任何单环、二环、三环或螺环、饱和的、部分饱和的或不饱和的、芳族的(杂芳基)或非芳族的(例如杂环烷基)环系，其具有3至20个环原子，其中所述环原子是碳，并且环或环系中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。如果环系的任何环原子是杂原子，则该系统是杂环，而不管环系与分子其余部分的连接点。在一个实例中，杂环基包括3-11个环原子(“成员”)并且包括单环、二环、三环和螺环系统，其中环原子是碳，其中环或环系中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。在一个实例中，杂环基包含1至4个杂原子。在一个实例中，杂环基包含1至3个杂原子。在另一个实例中，杂环基包括具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的3-至7-元单环。在另一个实例中，杂环基包括具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的4-至6-元单环。在另一个实例中，杂环基包括3元单环。在另一个实例中，杂环基包括4元单环。在另一个实例中，杂环基包括5-6元单环，例如5-6元杂芳基。在另一个实例中，杂环基包括3-11元杂环烷基，例如4-11元杂环烷基。在一些实施方案中，杂环烷基包含至少一个氮。在一个实例中，杂环基包含0至3个双键。任何氮或硫杂原子可以任选被氧化(例如，NO、SO、SO2)，并且任何氮杂原子可以任选被季铵化(例如，[NR4]+Cl-、[NR4]+OH-)。实例杂环是环氧乙烷基、氮杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢噻喃基、六氢嘧啶基、嗪烷基、噻嗪烷基、噻烷基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧杂氮杂基、氧杂氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂基、硫杂氮杂基、硫杂氮杂环庚烷基、四氢噻喃基、唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、1,1-二氧代异噻唑烷酮基、唑烷酮基、咪唑烷酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶基、噻嗪基、嗪基、噻二嗪基、二嗪基、二噻嗪基、二嗪基、噻嗪基、噻三嗪基、三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二烷基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫戊环基、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酮基、哌嗪酮基、哌嗪二酮基、吡唑烷基咪唑啉基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚基、6-氮杂二环[3.1.1]庚基、3-氮杂二环[3.1.1]庚基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、氮杂二环[2.2.2]己基、2-氮杂二环[3.2.1]辛基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、2-氮杂二环[2.2.2]辛基、8-氮杂二环[2.2.2]辛基、7-氧杂二环[2.2.1]庚烷、氮杂螺[3.5]壬基、氮杂螺[2.5]辛基、氮杂螺[4.5]癸基、1-氮杂螺[4.5]癸-2-酮基、氮杂螺[5.5]十一烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲唑基、1,1-二氧代六氢噻喃基。含有硫或氧原子和一至三个氮原子的5元杂环的实例是噻唑基包括噻唑-2-基和噻唑-2-基N-氧化物，噻二唑基包括1,3,4-噻二唑-5-基和1,2,4-噻二唑-5-基，唑基例如唑-2-基，和二唑基例如1,3,4-二唑-5-基和1,2,4-二唑-5-基。含有2至4个氮原子的实例5-元环杂环包括咪唑基例如咪唑-2-基；三唑基例如1,3,4-三唑-5-基、1,2,3-三唑-5-基、1,2,4-三唑-5-基，和四唑基例如1H-四唑-5-基。苯并稠合的5元杂环的实例是苯并唑-2-基、苯并噻唑-2-基和苯并咪唑-2-基。实例6-元杂环含有一至三个氮原子和任选的硫或氧原子，例如吡啶基例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基例如嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；三嗪基例如1,3,4-三嗪-2-基和1,3,5-三嗪-4-基；哒嗪基特别是哒嗪-3-基，和吡嗪基。吡啶N-氧化物和哒嗪N-氧化物和吡啶基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、哒嗪基和1,3,4-三嗪-2-基是其它实例杂环基。杂环可以任选被取代。例如，“任选取代的杂环”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、芳基和杂环部分可以任选被取代，例如被选自该同一列表的1至4个取代基取代。
“杂芳基”是指任何单环、二环或三环环系，其中至少一个环是含有1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元芳环，并且在一个实例实施方案中，至少一个杂原子是氮。参见例如Lang’s Handbook of Chemistry(Dean,J.A.编辑)第13版表7-2[1985]。包括在定义中的是任何二环基团，其中任何上述杂芳基环与芳基环稠合，其中芳基环或杂芳基环与分子的其余部分连接。在一个实施方案中，杂芳基包括5-6元单环芳族基团，其中一个或多个环原子是氮、硫或氧。实例杂芳基包括噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、唑基、异唑基、三唑基、噻二唑基、二唑基、四唑基、噻三唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑并[1,5-b]哒嗪基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基和嘌呤基以及苯并稠合衍生物，例如苯并唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基和吲哚基。杂芳基可以任选被取代。在一些实施方案中，“任选取代的杂芳基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH2、NHCH3、N(CH3)2、NO2、N3、C(O)CH3、COOH、CO2CH3、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO2、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被取代，例如被选自该同一列表的1至4个取代基取代。
在特别的实施方案中，杂环基在该杂环基的碳原子处连接。举例来说，碳键合的杂环基包括在下述位置的键合排布：吡啶环的2、3、4、5或6位，哒嗪环的3、4、5或6位，嘧啶环的2、4、5或6位，吡嗪环的2、3、5或6位，呋喃、四氢呋喃、噻吩(thiofuran)、噻吩(thiophene)、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位，唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位，异唑、吡唑或异噻唑环的3、4或5位，氮丙啶环的2或3位，氮杂环丁烷环的2、3或4位，喹啉环的2、3、4、5、6、7或8位或异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。
在某些实施方案中，杂环基是N-连接的。例如，氮键合的杂环基或杂芳基包括在下述位置的键合排布：氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、吲哚啉、1H-吲唑的1位，异吲哚或异吲哚啉的2位，吗啉的4位以及咔唑或β-咔啉的9位。
术语“烷氧基”是指由式-OR表示的直链或支链一价基团，其中R是如本文所定义的烷基。烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、单-、二-和三-氟甲氧基和环丙氧基。“卤代烷氧基”是指卤代烷基，如同在本文中对R的定义。
术语“烷酰基”是指基团(烷基)-C(＝O)-，其中烷基如本文所定义。例如C1-C6烷酰基是指式(C1-C5烷基)-C(＝O)-基团。烷酰基包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、3-甲基戊酰基和己酰基。
除非另有说明，否则“任选取代的”意指基团可以是未取代的或者被一个或多个(例如，0、1、2、3、4或5或更多个，或其中可衍生的任何范围)为该基团所列的取代基取代，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施方案中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有3个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有4个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有5个取代基。
如本文所用，与化学结构中的贯穿键的波浪线“”表示波浪键在化学结构中连接至分子的其余部分或连接至分子的片段的其余部分的原子的连接点。在一些实施方案中，箭头连同星号以波浪线的方式使用以指示连接点。
在某些实施方案中，一般地描述二价基团而没有具体的键合构型。应当理解，除非另有说明，否则一般描述意在包括两种键合构型。例如，在基团R1-R2-R3中，如果基团R2描述为-CH2C(O)-时，则应当理解，该基团可以作为R1-CH2C(O)-R3和R1-C(O)CH2-R3键合，除非另有说明。
短语“可药用”是指当适当地施用于动物例如人时不产生不利的、过敏的或其它不良反应的分子实体和组合物。
本发明化合物可以是盐例如可药用盐的形式。“可药用盐”包括酸和碱加成盐。“可药用酸加成盐”是指与无机酸和有机酸形成的、保留游离碱的生物学有效性和性质并且不是生物学上或其它方面不期望的那些盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等，所述有机酸可以选自脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸(maloneicacid)、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。
“可药用碱加成盐”包括衍生自无机碱的那些，例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。特别的碱加成盐是铵、钾、钠、钙和镁盐。衍生自可药用有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等的盐。特别的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二环己胺、胆碱和咖啡因。
在一些实施方案中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、硫酸氢盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精盐、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸盐)、萘二磺酸盐(萘-1,5-二磺酸盐或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐)、乙二磺酸盐(乙-1,2-二磺酸盐或乙-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、羟乙基磺酸盐(2-羟乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L-扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、均三甲苯磺酸盐(2-均三甲苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐，例如(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰基氨基)乙酸盐)、乳清酸盐(orotate)、二甲苯磺酸盐(对二甲苯-2-磺酸盐)和双羟萘酸(2,2’-二羟基-1,1’-二萘基甲烷-3,3’-二甲酸盐)。
“无菌”制剂是无菌的或不含所有活微生物及其孢子。
“立体异构体”是指具有相同化学组成但在空间中原子或基团的排列方面不同的化合物。立体异构体包括非对映异构体、对映异构体、构象异构体等。
“手性”是指具有镜像配偶体(partner)的不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指可重叠在其镜像配偶体上的分子。
“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且其分子彼此不是镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析方法例如电泳和色谱例如HPLC下分离。
“对映异构体”是指化合物的两种立体异构体，它们是彼此不重叠的镜像。
本文使用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker编辑,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,NewYork,1994。许多有机化合物以旋光活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述旋光活性化合物时，前缀D和L或者R和S用于表示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或者(+)和(-)用于表示化合物旋转平面偏振光的符号，其中(-)或l表示该化合物是左旋的。带有(+)或d的前缀的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，除了它们是彼此的镜像。特别的立体异构体也可以称为对映异构体，并且这些异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体的50:50混合物被称为外消旋混合物或外消旋物，其可以在没有立体选择性或立体特异性的化学反应或过程中存在。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指没有旋光活性的两种对映异构体的等摩尔混合物。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指不同能量的结构异构体，其可以通过低能垒互相转化。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括通过质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些键合电子的重组的互变。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式包括水合形式存在。“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子和本发明化合物的缔合物或复合物。形成溶剂化物的溶剂的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。某些本发明化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式都在本发明的范围内。术语“水合物”是指溶剂分子是水的复合物。
“代谢物”是指指明化合物或其盐通过在体内代谢产生的产物。这样的产物可以例如由所施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等导致。
代谢产物通常通过下述鉴定：制备本发明化合物的放射性标记(例如14C或3H)同位素，以可检测的剂量(例如，大于约0.5mg/kg)施用于动物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人，允许足够的时间发生代谢(通常约30秒至30小时)，并且从尿、血液或其它生物样品中分离其转化产物。这些产物容易分离，因为它们被标记(其它的通过使用能够结合在代谢物中存活的表位的抗体来分离)。以常规方式例如通过MS、LC/MS或NMR分析测定代谢物结构。通常，代谢物的分析以与本领域技术人员公知的常规药物代谢研究相同的方式进行。代谢产物，只要它们不以其它方式见于体内，可用于本发明化合物的治疗剂量的诊断测定。
本文所用的“氨基-保护基”是指通常用于封闭或保护氨基同时反应在化合物的其它官能团上进行的基团的衍生物。这种保护基的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基以及亚胺，还有许多N-杂原子衍生物，其可以被除去以再生所需的胺基团。特别的氨基保护基是Pmb(对甲氧基苄基)、Boc(叔丁氧基羰基)、Fmoc(9-芴基甲氧基羰基)和Cbz(羰基苄基氧基)。这些基团的其它实例见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protecting Groups inOrganic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons,Inc.,1999中。术语“保护的氨基”是指被上述氨基保护基之一取代的氨基。
如本文所用的“羧基-保护基”是指对分子其它位置的后续反应条件稳定的那些基团，其可以在适当的点除去而不破坏分子的其余部分，得到未保护的羧基。羧基保护基的实例包括酯基和杂环基。羧酸基团的酯衍生物可用于封闭或保护羧酸基团，同时反应在化合物的其它官能团上进行。此类酯基的实例包括取代的芳基烷基，包括取代的苄基，例如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲基二氧基苄基、二苯甲基、4,4’-二甲氧基二苯甲基、2,2’,4,4’-四甲氧基二苯甲基，烷基或取代的烷基酯例如甲基、乙基、叔丁基、烯丙基或叔戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-二甲氧基三苯甲基、4,4’,4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基，硫酯例如叔丁基硫酯，甲硅烷基酯例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基酯、苯甲酰甲基(phenacyl)、2,2,2-三氯乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基和类似基团。羧基保护基的另一个实例是杂环基，例如1,3-唑啉基。这些基团的其它实例可见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons，Inc.，1999中。术语“保护的羧基”是指被上述羧基保护基之一取代的羧基。
本文所用的“羟基-保护基”是指通常用于封闭或保护羟基而反应在化合物的其它官能团上进行的羟基衍生物。这种保护基团的实例包括四氢吡喃基氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨基甲酰基氧基、苄基和甲硅烷基醚(例如TBS、TBDPS)基团。这些基团的其它实例在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，JohnWiley&Sons，Inc.，1999中找到。术语“保护的羟基”是指被上述羟基保护基之一取代的羟基。
本发明化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以作为非对映异构体、对映异构体或其混合物存在。化合物的合成可以使用外消旋物、非对映异构体或对映异构体作为起始原料或作为中间体。特别的非对映异构化合物的混合物可以通过色谱法或结晶方法分离或富集为一种或多种特别的非对映异构体。类似地，可以使用相同技术或本领域已知的其它方法分离或对映异构地富集对映异构体混合物。每个不对称碳原子或氮原子可以是R或S构型，并且这两种构型都在本发明的范围内。
在本文所示的结构中，当没有指定任何特别的手性原子的立体化学时，则所有立体异构体都被考虑并且作为本发明化合物包括在内。当立体化学由代表特别构型的实心楔形或虚线指定时，则该立体异构体是如此指定和定义的。除非另有说明，如果使用实心楔形或虚线，则意指相对立体化学。
另一个方面包括本发明化合物的前药，包括已知的氨基保护基和羧基保护基，其在生理条件下被释放例如水解以产生本发明化合物。
术语“前药”是指药物活性物质的前体或衍生物形式，其与母体药物相比对患者有效性低，并且能够被酶促或水解活化或转化成更活性的母体形式。参见例如Wilman,“Prodrugs in Cancer Chemotherapy”Biochemical Society Transactions,14,第375-382页,615th Meeting Belfast(1986)和Stella等人,“Prodrugs:A Chemical Approachto Targeted Drug Delivery,”Directed Drug Delivery,Borchardt等人(编辑),第247-267页,Humana Press(1985)。前药包括但不限于含磷酸酯的前药、含硫代磷酸酯的前药、含硫酸酯的前药、含肽的前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化的前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯基乙酰胺的前药以及5-氟胞嘧啶和5-氟尿苷前药。
特别类型的前药是其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被以下基团取代的化合物：羟基、烷基羰基(-CO-R)基团、烷氧基羰基(-CO-OR)或酰基氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-R-O-CO-R)基团，其中R是一价或二价基团，例如烷基、亚烷基或芳基，或具有式-C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2相同或不同，并且为氢、烷基、烷氧基、氰基、卤素、烷基或芳基。在一个特别的实施方案中，所述氮原子是本发明化合物的脒基的氮原子之一。前药可以通过使本发明化合物与活化基团例如酰基反应以使例如所述化合物中的氮原子与活化的酰基的示例性羰基键合来制备。活化的羰基化合物的实例是含有与羰基键合的离去基团的那些，并且包括例如酰卤、酰胺、酰基吡啶盐、酰基烷氧化物、酰基酚氧化物例如对硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。反应通常在惰性溶剂中在降低的温度例如-78至约50℃进行。反应也可以在无机碱例如碳酸钾或碳酸氢钠或有机碱例如胺包括吡啶、三甲胺、三乙胺、三乙醇胺等存在下进行。
还包括其它类型的前药。例如，本发明化合物的游离羧基可以被衍生为酰胺或烷基酯。作为另一个实例，包含游离羟基的本发明化合物可以通过将羟基转化为例如但不限于如下基团衍生化为前药：磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰基氧基甲氧基羰基，如Fleisher,D.等人,(1996)Improved oral drug delivery:solubility limitationsovercome by the use of prodrugs Advanced Drug Delivery Reviews,19:115中所述。还包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药，以及羟基的碳酸酯、磺酸酯和硫酸酯前药。也考虑羟基衍生为(酰基氧基)甲基和(酰基氧基)乙基醚，其中酰基可以是烷基酯，其任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代，或者其中酰基是如上所述的氨基酸酯。这种类型的前药描述于J.Med.Chem.,(1996),39:10中。更特别的实例包括用以下基团替换醇基团的氢原子：例如(C1-C6)烷酰基氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、α-氨基(C1-C4)烷酰基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立地选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(由去除半缩醛形式的碳水化合物的羟基得到的基团)。
“离去基团”是指化学反应中的第一反应物的一部分，其在化学反应中被从第一反应物中置换。离去基团的实例包括但不限于卤素原子、烷氧基和磺酰基氧基。实例磺酰基氧基包括但不限于烷基磺酰基氧基(例如甲基磺酰基氧基(甲磺酸酯基团)和三氟甲基磺酰基氧基(三氟甲磺酸酯基团))和芳基磺酰基氧基(例如对甲苯磺酰基氧基(甲苯磺酸酯基团)和对硝基磺酰基氧基(硝基磺酸酯(nosylate)基团))。
“个体”、“受试者”或“患者”是脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于农场动物(例如牛)、运动动物、宠物(例如豚鼠、猫、狗、兔和马)、灵长类动物、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物是人。在包括给患者施用化合物的实施方案中，患者通常是有其需要的。
术语“抑制”和“减少”或这些术语的任何变形包括实现期望结果的任何可测量的减少或完全抑制。例如，与正常相比，可以减少约，至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或可从其中衍生的任何范围的活性(例如，IRAK4活性)减少。
在一些实施方案中，式0、式I或式II化合物例如表1、2或3的化合物相对于IRAK1选择性抑制IRAK4。“选择性抑制”是指，与IRAK1活性相比，该化合物是至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或可从其中衍生的任何范围的更好的IRAK4活性的抑制剂，或与另IRAK1活性相比，是至少2-、3-、4-、5-、10-、25-、50-、100-、250-或500-倍更好的IRAK4活性抑制剂。
“治疗有效量”是指本发明化合物例如式0、式I或式II化合物(例如表1、2或3的化合物)的如下的量：(i)治疗或预防特别疾病、病症或障碍，或(ii)减轻、改善或消除特别疾病、病症或障碍的一种或多种症状，和任选地(iii)预防或延迟本文所述的特别疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。在一些实施方案中，治疗有效量是足以减少或减轻自身免疫性或炎性疾病(例如狼疮)的症状的量。在一些实施方案中，治疗有效量是本文描述的化学实体的足以显著降低B-细胞活性或数量的量。在癌症的情况下，治疗有效量的药物可以减少癌细胞的数量；减少肿瘤大小；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选停止)癌细胞浸润到外周器官中；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。在药物可以预防生长或杀死现有癌细胞的程度上，其可以是细胞抑制性或细胞毒性的。对于癌症治疗，功效可以例如通过评估疾病进展时间(TTP)或确定响应速率(RR)来测量。
“治疗(treatment)”(和变体形式例如“治疗”(“treat”或“treating”))是指试图改变所治疗的个体或细胞的自然进程的临床干预，并且可以用于预防或在临床病理过程期间进行。治疗的期望效果包括预防疾病的发生或复发，减轻症状，减轻疾病的任何直接或间接病理学后果，稳定(即不恶化)疾病状态，降低疾病进展速率，改善或缓解疾病状态，与如果不接受治疗的预期存活相比延长存活和缓解或改善的预后。在一些实施方案中，本发明化合物用于延迟疾病或障碍的发展或延缓疾病或障碍的进展。需要治疗的那些包括已经患有病症或障碍的那些以及倾向于具有病症或障碍(例如通过遗传突变)的那些或其中要预防所述病症或障碍的那些。
“炎性障碍”是指其中过度或不受调节的炎性响应导致过度炎性症状、宿主组织损伤或组织功能丧失的任何疾病、障碍或综合征。“炎性障碍”还指由白细胞流入或嗜中性粒细胞趋化性介导的病理状态。
“炎症”是指由组织的损伤或破坏引起的局部的保护性响应，其用于破坏、稀释或隔离(隔绝)损伤剂和损伤的组织。炎症与白细胞流入或嗜中性粒细胞趋化性特别相关。炎症可以由病原生物体和病毒的感染和非感染性方式(例如创伤或心肌梗塞或中风后的再灌注、对外源抗原的免疫应答和自身免疫应答)引起。因此，适合用本发明化合物例如式0、式I或式II化合物(例如表1、2或3的化合物)治疗的炎性障碍包括与特异性防御系统的反应以及非特异性防御系统的反应相关的障碍。
“特异性防御系统”是指与特异性抗原的存在反应的免疫系统的组件。由特异性防御系统的应答引起的炎症的实例包括对外来抗原的经典应答、自身免疫疾病和由T细胞介导的迟发型超敏反应。慢性炎性疾病、实体移植组织和器官(例如肾和骨髓移植物)的排斥和移植物抗宿主病(GVHD)是特异性防御系统的炎性反应的另外的实例。
术语“非特异性防御系统”是指由不能进行免疫记忆的白细胞(例如粒细胞和巨噬细胞)介导的炎性障碍。至少部分地由非特异性防御系统的反应导致的炎症的实例包括与例如以下病症相关的炎症：成人(急性)呼吸窘迫综合征(ARDS)或多器官损伤综合征；再灌注损伤；急性肾小球肾炎；反应性关节炎；具有急性炎性组分的皮肤病；急性化脓性脑膜炎或其它中枢神经系统炎性障碍例如中风；热损伤；炎性肠病；粒细胞输注相关综合征；和细胞因子诱导的毒性。
“自身免疫疾病”是指其中组织损伤与体液或细胞介导的对身体自身成分的响应相关的任何一组障碍。自身免疫疾病的非限制性实例包括类风湿性关节炎、狼疮和多发性硬化。
本文使用的“变态反应疾病”是指由变态反应引起的任何症状、组织损伤或组织功能的丧失。如本文所用的“关节炎疾病”是指以可归因于多种病因的关节的炎性损伤为特征的任何疾病。本文所用的“皮炎”是指特征在于归因于多种病因的皮肤炎症的皮肤疾病的大家族中的任何一种。本文所用的“移植排斥”是指针对移植的组织例如器官或细胞(例如骨髓)的任何免疫反应，其特征在于移植的和周围的组织的功能丧失、疼痛、肿胀、白细胞增多和血小板减少。本发明的治疗方法包括治疗与炎性细胞活化相关的障碍的方法。
“炎性细胞活化”是指被在炎性细胞(包括但不限于单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、粒细胞(即多形核白细胞例如嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、肥大细胞、树突细胞、朗格汉斯细胞和内皮细胞)中的增殖性细胞响应的刺激物(包括但不限于细胞因子、抗原或自身抗体)、可溶性介体(包括但不限于细胞因子、氧自由基、酶、前列腺素类或血管活性胺)的产生或者新或增加数目介体(包括但不限于主要组织相容性抗原或细胞粘附分子)的细胞表面表达诱导。本领域技术人员应当理解，在这些细胞中这些表型中的一种或组合的活化可能有助于炎性障碍的引发、持续或加重。
在一些实施方案中，可以根据本发明的方法治疗的炎性障碍包括但不限于哮喘、鼻炎(例如，变态反应性鼻炎)、变态反应性气道综合征、特应性皮炎、支气管炎、类风湿性关节炎、银屑病、狼疮、慢性阻塞性肺病(COPD)、接触性皮炎、慢性阻塞性肺病和迟发性超敏反应。
术语“癌症”和“癌性的”、“瘤”和“肿瘤”和相关术语是指或描述哺乳动物中的典型特征在于不受调节的细胞生长的生理状况。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括癌、胚细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、成胶质细胞瘤、黑素瘤、白血病和骨髓或淋巴样恶性肿瘤。此类癌症的更特别的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)和肺癌包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌。其它癌症包括皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、颊腔癌、咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、食道癌、喉癌、肝细胞癌、胃癌(gastric)、胃部癌(stomach)、胃肠癌、小肠癌、大肠癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肝癌(liver)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、泌尿生殖系统癌、胆道癌、甲状腺癌、乳头状癌、肝癌(hepatic)、子宫内膜癌、子宫癌、唾液腺癌、肾脏癌或肾癌、前列腺癌、睾丸癌、外阴癌、腹膜癌、肛门癌、阴茎癌、骨癌、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、弥散性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、中枢神经系统癌、脑癌、头颈部癌、霍奇金癌和相关的转移。肿瘤性障碍的实例包括骨髓增殖性障碍，例如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化例如原发性骨髓纤维化和慢性髓性白血病(CML)。
“化疗剂”是可用于治疗给定障碍(例如癌症或炎性障碍)的活性剂。化疗剂的实例是本领域公知的，并且包括实例，例如在U.S.Publ.Appl.No.2010/0048557中公开的那些，通过引用并入本文。另外，化疗剂包括任何化疗剂的可药用盐、酸或衍生物，以及它们中的两种或更多种的组合。
除非另有说明，本文所述的结构也意味着包括仅在存在一个或多个同位素富集原子方面不同的化合物。可以引入到本发明化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别例如2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、32P、33P、35S、18F、36Cl、123I和125I。同位素标记的化合物(例如，用3H和14C标记的那些)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素因其易于制备和可检测性而是有用的。此外，用较重的同位素例如氘(即2H)取代可以提供由更大的代谢稳定性产生的某些治疗优点(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)。在一些实施方案中，在本发明化合物中，一个或多个碳原子被13C-或14C-富集的碳替换。正电子发射同位素例如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层摄影(PET)研究，以检查底物受体占据。同位素标记的化合物通常可以通过按照与本文方案或实施例中公开的那些类似的方法，通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来制备。
特别考虑的是，关于本发明的一个实施方案所讨论的任何限制可以应用于本发明的任何其它实施方案。此外，本发明的任何化合物或组合物可以用于本发明的任何方法中，并且本发明的任何方法可以用于产生或利用本发明的任何化合物或组合物。
如果结构与其名称之间存在任何差异，则以结构为准。
术语“或”的使用用于表示“和/或”，除非明确指示仅涉及替代物或替代物是相互排斥的，尽管本公开支持仅指示替代物和“和/或”的定义。
在本申请中，术语“约”用于指示包括用于确定该值的装置或方法的误差的标准偏差的值。
如本文所使用的，“一个(a/an)”是指一个或多个，除非另有明确说明。如本文所用，“另一个”是指至少另一个或更多。
本文使用的标题仅用于组织目的。
IRAK4抑制剂
如注意的，本发明的一个方面包括式0化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、-O-C1-3烷基、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
其中任何环烷基、杂环基、杂芳基环或芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、-C(O)NR8R9或-NR8R9，
其中任何烷基、链烯基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被氧代取代的3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基；
R5是氢、-CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C0-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：(i)任选被卤素取代的-C(O)(C1-3烷基)或(ii)任选被卤素取代的C1-3烷基，并且
其中任何环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1-2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或者任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-3-11元杂环基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-(C0-3烷基)-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OR13；C1-3卤代烷氧基；-C(O)(C1-3烷基)；-S-C1-3烷基；或任选被以下取代的C1-3烷基：OH、卤素、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基，并且
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成5-8元杂环基，
其中任何烷基、环烷基、苯基、杂环基或杂芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13、-NR6R7或5-6元单环杂芳基环；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是氢、卤素、CN或者任选被-NH2、卤素或CN取代的C1-3烷基。
本发明的另一个方面包括式I化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C1-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷氧基、-C(O)(C1-3烷基)、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR8R9、-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环或者任选被卤素、氧代、CN、OH、苯基、3-8元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基、任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的-(C0-3烷基)-3-11元杂环基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成任选被以下取代的5-8元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
本发明的另一个方面包括式II化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
在一些实施方案中，R1和R4各自是氢，并且R3是氢、OH、卤素、CH3、CH2OH、CH2F、OCHF2、CHF2、CF3、环丙基、氮杂环丁烷基、CN、-C(O)CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-NHCH3、-SO2-NH2或-SO2-NHCH3。
在一些实施方案中，R1和R4各自是氢，并且R3是氢、卤素、CH3、CH2F、CHF2、CF3、环丙基或-C(O)CH3。
在一些实施方案中，R1和R4各自是氢，并且R3是氢、OH、CH3或CH2OH。
在一些实施方案中，R1和R4各自是氢，并且R3是Br、Cl、F、OCHF2、CHF2或CF3。
在一些实施方案中，R1和R4各自是氢，并且R3是环丙基、氮杂环丁烷基、CN、-C(O)CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-NHCH3、-SO2-NH2或-SO2-NHCH3。
在一些实施方案中，R1和R3各自是氢，并且R4是Cl、CHF2、 或其立体异构体。
在一些实施方案中，R1和R3各自是氢，并且R4是氢或CH3。
在一些实施方案中，R1、R4和R3各自是氢。
在一些实施方案中，R16是H。
在一些实施方案中，R16是-Cl、-CN或-CH3。
在一些实施方案中，R5是任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1- 2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环。
在一些实施方案中，R5是任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基。在一些实施方案中，R5是任选被以下取代的N-连接的3-11元饱和的杂环基：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基。
在一些实施方案中，R5的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基的环杂原子选自氮和氧。
在一些实施方案中，R5是哌啶基、哌嗪基或吗啉基，其中任何R5任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1- 2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环。
在一些实施方案中，R5是N-连接的哌啶基、N-连接的哌嗪基或N-连接的吗啉基，其中任何R5任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH或任选被卤素、氧代、CN或OH取代的C1-3烷基。
在一些实施方案中，R5是：
-CH2CH3、-C(CH3)2、Cl、CN、环丙基、-C(O)NH2、-OCH3、-OCH2CF3、-OCH2CHF2、-CF3、-CHF2、-OCF3、-OCHF2、-NHCH3、-N(CH3)2、
或其立体异构体。
在一些实施方案中，R5是：
或其立体异构体。
在一些实施方案中，R5是
如前所述，当A是5元含氮杂环时，氮原子被取代。在其中A包含一个或多个氮原子，例如2、3或更多个氮原子的实施方案中，每个氮原子被取代。更特别的是，在一些实施方案中，化合物不是
在一些实施方案中，A是3-11元非芳族杂环基。
在一些实施方案中，A是3-11元杂环基，其包含至少一个氧作为环原子并且任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
在一些实施方案中，式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-A、I-A或II-A：
0-A、I-A或II-A
其中A是5或6元环，其任选包含另外的环杂原子，并且
其中A任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
在一些实施方案中，0-A、I-A或II-A进一步被定义为0-B、I-B或II-B：
0-B、I-B或II-B
其中R14和R15各自选自卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13和-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
或者R14和R15一起形成C3-6环烷基或者饱和的或部分饱和的3-6元杂环基，
其中任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
在一些实施方案中，A不包含氧作为环原子并且任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
在一些实施方案中，式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-C、I-C或II-C：
0-C、I-C或II-C
其中氮包含本文定义的取代基。
在一些实施方案中，式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-C、I-C或II-C：
0-C、I-C或II-C
其中A的氮被C1-6烷基或C3-6环烷基取代，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
在一些实施方案中，式0、式I或式II的以下部分
选自
及其立体异构体。
在一些实施方案中，式0、式I或式II的以下部分
选自
及其立体异构体。
在一些实施方案中，化合物选自如下所示的表1、2和3的化合物或其立体异构体或可药用盐。
表1.本发明的示例性化合物。也包括此类化合物的盐。对于此类化合物的制备参见实施例。
表2.本发明另外的示例性化合物。也包括此类化合物的盐。对于此类化合物的制备参见实施例部分。
表3.本发明另外的示例性化合物。也包括此类化合物的盐。对于此类化合物的制备参见实施例部分。
IRAK4抑制剂的合成
本发明化合物可以通过以下所示和所述的说明性合成反应方案中描述的多种方法制备。用于制备这些化合物的原料和试剂通常可以从商业供应商例如Aldrich ChemicalCo.获得，或者通过本领域技术人员已知的方法按照参考文献中所列的方法制备，例如Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons:New York,第1-21卷；R.C.LaRock,Comprehensive Organic Transformations,第2版，Wiley-VCH,New York1999；Comprehensive Organic Synthesis,B.Trost和I.Fleming(编辑)第1-9卷，Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heterocyclic Chemistry,A.R.Katritzky和C.W.Rees(编辑)Pergamon,Oxford 1984,第1-9卷；Comprehensive HeterocyclicChemistry II,A.R.Katritzky和C.W.Rees(编辑)Pergamon,Oxford 1996,第1-11卷；和Organic Reactions,Wiley&Sons:New York,1991,第1-40卷。下面的合成反应方案仅仅是说明可以合成本发明化合物的一些方法的实例，并且可以对这些合成反应方案进行多种修饰，并且将给本领域技术人员关于本申请公开内容的建议。
为了说明的目的，以下反应方案提供了用于合成本发明化合物以及关键中间体的路线。对于各个反应步骤的更详细描述，参见下面的实施例部分。本领域技术人员将理解，可以使用其它合成路线。尽管一些具体的原料和试剂在方案中描述并在下面讨论，但是其它原料和试剂可以被代替以提供多种衍生物或反应条件。此外，根据本公开，可以使用本领域技术人员公知的常规化学，进一步修饰通过下述方法制备的许多化合物。
如果需要，可以使用常规技术(包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等)分离和纯化合成反应方案的原料和中间体。可以使用常规手段来表征这些材料，包括物理常数和光谱数据。
除非有相反的规定，否则本文所述的反应优选在惰性气氛和大气压下在约-78℃至约150℃，更优选约0℃至约125℃的反应温度进行并且最优选且方便地在约室温(或环境温度)或约20℃进行。
以下方案中的一些化合物用通用取代基描述；然而，本领域技术人员将立即认识到R基团的性质可以变化，以提供本发明所考虑的多种化合物。此外，反应条件是示例性的，并且可选择的条件是众所周知的。以下实例中的反应顺序并不意味着限制权利要求书中提出的本发明的范围。
以下方案中的一些化合物用通用取代基描述；然而，本领域技术人员将立即认识到R基团的性质可以变化，以提供本发明所考虑的多种化合物。此外，反应条件是示例性的，并且可选择的条件是众所周知的。以下实例中的反应顺序并不意味着限制权利要求书中提出的本发明的范围。
方案I
关于方案I，必要的3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基衍生物可以通过硝化7-卤代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基衍生物I-1a，得到I-1b，接着用胺置换卤素得到I-2a。典型的胺包括吗啉和3-羟基甲基哌啶。硝基的还原和用吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(I-3)或其活化的衍生物缩合得到所需的酰胺。必需的前体可商购获得或如本文所述制备。
芳族硝化是众所周知的并且可以在本领域已知的多种条件下进行。硝化可以例如通过将芳族化合物暴露于浓硝酸和硫酸来进行。活性底物可以用HNO3单独或在H2O、HOAc和乙酸酐中硝化，并且活性化合物可以用HNO3和H2SO4的混合物氧化。其它硝化剂包括NaNO3/TFA、Cu(NO3)2/HOAc/Ac2O、N2O4、NO2 +BF4 -、NO2 +PF6-和NO2 +CF3SO4-。参见例如J.March,AdvancedOrganic Chemistry,John Wiley&Sons:New York,NY,1992,第522-23页。
硝基的还原可以用多种众所周知的还原剂进行。例如，硝基可以在惰性溶剂存在下，并且在有效催化氢化反应的金属例如铂或钯的存在下，在氢气氛下还原。还原还可以用活化的金属例如活化的铁、锌或锡(例如通过用稀酸溶液例如稀盐酸洗涤铁粉产生)进行。
用通常使用的偶联试剂进行胺2b中间体与3的偶联，或者可以将3转化为相应的酰氯并且与2b缩合。
伯胺与酰氯的酰化通常在惰性溶剂例如DMF、DCM、THF、吡啶中，在有或没有水作为共溶剂的情况下，在0℃和60℃之间的温度，通常在碱例如Na2CO3、NaHCO3、K2CO3、DIPEA、TEA或吡啶等的存在下进行，得到相应的酰胺。可以使用本领域技术人员众所周知的标准试剂将羧酸转化为它们的酰氯，例如亚硫酰氯、草酰氯、磷酰氯等。那些试剂可以在碱例如DIPEA、TEA或吡啶存在下使用。
可选择的是，通过利用为本领域技术人员众所周知的用于肽合成而开发的试剂，可以将羧酸原位转化为活化的衍生物。这些活化的酸与所述的胺直接反应，得到相应的酰胺。常见偶联剂包括EDC、DCC、苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基氨基)-磷六氟磷酸盐(BOP)、溴-三-吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(PyBrOP)、2-氟-1-甲基吡啶对甲苯磺酸盐(Mukaiyama试剂)，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)或(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(PyAOP)，任选在改性剂例如HOBt存在下，在有或没有碱例如NMM、TEA或DIPEA存在下，在惰性溶剂例如DMF或DCM中，在0℃至60℃的温度进行。查看胺的酰化(参见例如J.March,上述第417-425页；H.G.Benz,Synthesis ofAmides and Related Compounds in Comprehensive Organic Synthesis,E.Winterfeldt编辑,第6卷,Pergamon Press,Oxford 1991第381-411页；R.C.Larock,ComprehensiveOrganic Transformations-A Guide to Functional Group Preparations,1989,VCHPublishers Inc.,New York；第972-976页)。
方案II
可以使用2,2-二甲基-5-硝基-6-卤代-3H-苯并呋喃II-3b作为方案II中描述的关键中间体制备本文示例的5,6-二氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃衍生物。向5-氯-2-氟-苯基乙酸甲酯中加入甲基格氏试剂，得到叔醇II-2，将其经过分子内环化得到II-3a。氯化物用胺硝化和置换，接着还原硝基并且用I-3酰化类似于方案I进行。本领域技术人员将会理解，相应的5-氟和5-溴衍生物易于分别从2,5-二氟苯基乙酸甲酯和5-溴-2-氟苯基乙酸甲酯得到。
方案III
关于方案III，通过向1-(4-氯-2-氟苯基)丙-2-酮或其衍生物中加入有机金属化合物可以容易地进行2-位除胺以外的取代基的引入，并且如本文所述继续进行进一步的转换。其中5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基部分通过碳-碳键与取代基连接的化合物通过II-3b与硼酸衍生物或硼酸酯进行钯催化的偶联制备。类似地，醚取代基可以容易地通过使5-氨基-2,2-二甲基-6-氟-3H-苯并呋喃(III-2b)与醇在叔丁醇钾或其它适合的强碱的存在下反应而制备。随后使用标准方法进行硝基的还原，所得胺的酰化以及可能需要的任何随后的脱保护。
方案IV
具有与二氢呋喃环连接的羟基甲基取代基的化合物可以通过5-氯-2-氟苄基溴化镁与丙酮酸甲酯缩合得到，得到IV-2。(方案IV)分子内环化和侧基羧酸还原得到IV-b，使用与前述那些类似的方案将IV-b转化为最终化合物。
方案V
就方案V而言，3H-苯并噻吩-1,1-二氧化物衍生物可以通过以下方法制备：分子内环化2-甲基磺酰基-4-吗啉代-5-硝基苯甲酸甲酯(V-3b)，得到吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮(V-4)，随后使用两步顺序将其还原为V-6b，所述的两步顺序包括硼氢化钠还原，随后是如前所述进行的三乙基硅烷/TFA还原。如前所述进行硝基的还原和所得胺的酰化。
用IRAK 4抑制剂的治疗方法及其用途
本发明化合物可用作IRAK4抑制剂。因此，在一个实施方案中提供了使细胞例如离体细胞与本发明化合物接触以抑制细胞中的IRAK4活性的方法。
还提供了药物组合物，其包含式0、式I或式II化合物，或其立体异构体或可药用盐，以及可药用赋形剂、载体或稀释剂。本发明化合物，包括包含这些化合物的药物组合物，可以用于本文所述的方法中。
进一步提供了在患者中预防、治疗对抑制IRAK4有响应的疾病或病症或者减轻对抑制IRAK4有响应的疾病或病症的严重性的方法，所述方法包括给患者施用治疗有效量的本发明化合物或其立体异构体或可药用盐。
还提供了在患者中治疗癌症的方法，包括给患者施用治疗有效量的本发明化合物或其立体异构体或可药用盐。
还提供了用于在患者中治疗炎性或自身免疫疾病的方法，该方法包括给患者施用治疗有效量的本发明化合物或其立体异构体或可药用盐。在一些实施方案中，所述疾病选自克罗恩病、溃疡性结肠炎、肠易激惹障碍(IBD)、哮喘、移植物抗宿主病、同种异体移植排斥、慢性阻塞性肺病(COPD)、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、狼疮肾炎、皮肤狼疮、银屑病、全身性发作的幼年特发性关节炎、多发性硬化、神经性疼痛、痛风和痛风性关节炎。
在一些实施方案中，可以使用本发明化合物治疗的对抑制IRAK4有响应的其它疾病和病症包括代谢综合征、动脉粥样硬化和神经变性。
还提供了本发明化合物或其立体异构体或可药用盐在治疗中的用途。在一些实施方案中，提供了本发明化合物或其立体异构体或可药用盐在治疗炎性疾病中的用途。在一些实施方案中，提供了本发明化合物或其立体异构体或可药用盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。此外，在一些实施方案中，提供了本发明化合物或其立体异构体或可药用盐用于治疗炎性疾病。
还提供了在需要治疗的患者中抑制IRAK4的方法，该方法包括给患者施用本发明化合物。
剂量和施用
本发明提供了包含本发明化合物和至少一种治疗惰性载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明化合物制备此类组合物和药物的方法。在一个实例中，具有所需纯度的式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐可以通过与生理学上可接受的载体，即对于在环境温度和适当pH下用于剂型的剂量和浓度的接受者是毒性的载体。制剂的pH主要取决于具体用途和化合物的浓度，但通常在约3至约8的范围内。在一个实例中，将式0、式I或式II化合物配制在乙酸盐缓冲液pH 5中。在另一个实施方案中，式0、式I或式II化合物是无菌的。化合物可以以例如固体或无定形组合物、冻干制剂或水溶液的形式储存。
组合物以符合良好医疗实践的方式配制、给药和施用。在这方面考虑的因素包括所治疗的特别障碍、障碍的严重程度、所治疗的特别患者、个体患者的临床病症、障碍的原因、活性剂的递送部位、施用方法、施用的时间安排以及医师已知的其它因素。施用化合物的“有效量”将受这些考虑因素支配，并且是抑制IRAK4活性所需的最小量。通常这样的量可能低于对正常细胞或患者整体有毒的量。
取决于用于施用药物的方法，用于施用的药物组合物(或制剂)可以以多种方式包装。通常，用于分配的物品包括具有以适当形式在其中储备药物制剂的容器。合适的容器对于本领域技术人员来说是众所周知的，并且包括材料例如瓶子(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等。该容器还可以包括防篡改装置以防止不恰当地接近包装内容物。另外，容器上已经放置了描述容器内容物的标签。标签还可能包含适当的警告。
可以制备持续释放制剂。持续释放制剂的合适实例包括包含式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐的固体疏水性聚合物的半透性基质，所述基质呈成型制品例如薄膜或微胶囊的形式。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物例如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球体)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。
治疗人患者的剂量范围可以为约0.1mg至约1000mg的式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐。典型的剂量可以是约1mg至约300mg的化合物。取决于药代动力学和药效学性质，包括特定化合物的吸收、分布、代谢和排泄，剂量可以每天一次(QD)、每天两次(BID)或更频繁地施用。另外，毒性因素可能影响剂量和施用方案。当口服施用时，丸剂、胶囊剂或片剂可以每天摄入或不太频繁地摄入特定的时间段。该方案可以重复多个治疗周期。
本发明化合物可以通过任何合适的方式施用，包括口服、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道、透皮、非肠道、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内、硬膜外和鼻内，并且如果需要用于局部治疗，可以是病灶内施用。非肠道输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。
本发明化合物可以以任何方便的施用形式施用，例如片剂、散剂、胶囊剂、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。此类组合物可以包含药物制剂中常用的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其它活性剂。
典型的制剂是通过混合本发明化合物和载体或赋形剂制备的。合适的载体和赋形剂是本领域技术人员众所周知的并且在例如Ansel,H.C.等人,Ansel’s PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.等人Remington:The Science and Practice ofPharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,R.C.,Handbookof Pharmaceutical Excipients,Chicago,Pharmaceutical Press,2005中详细描述。该制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮蔽剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和其它已知的添加剂以提供药物(即本发明化合物或药物组合物)的美观呈现或有助于制备药物产品(即药物)。
对于口服施用，包含多种赋形剂例如柠檬酸的片剂可以与多种崩解剂例如淀粉、海藻酸和某些复合硅酸盐以及与粘合剂例如蔗糖、明胶和阿拉伯胶一起使用。此外，润滑剂例如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石常常用于压片目的。类似类型的固体组合物也可以用于软和硬填充的明胶胶囊剂中。因此，优选的材料包括乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇。当需要水混悬液或酏剂用于口服施用时，其中的活性化合物可以组合多种甜味剂或矫味剂、着色剂或染料以及如果需要可以组合乳化剂或助悬剂以及稀释剂例如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合。
合适的口服剂型的实例是包含约25mg、50mg、100mg、250mg或500mg本发明化合物与约90-30mg无水乳糖、约5-40mg交联羧甲基纤维素钠、约5-30mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约1-10mg硬脂酸镁组合的片剂。首先将粉末成分混合在一起，然后与PVP溶液混合。得到的组合物可以干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并且使用常规设备压制成片剂形式。气溶胶制剂的实例可以通过将本发明化合物例如5-400mg溶于合适的缓冲溶液例如磷酸盐缓冲液中来制备，如果需要，可以添加张度剂，例如盐例如氯化钠。该溶液可以例如使用0.2微米的过滤器过滤以除去杂质和污染物。
在一个实施方案中，药物组合物还包含至少一种另外的抗增殖剂。
因此，一个实施方案包括包含式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐的药物组合物。进一步的实施方案包括药物组合物，其包含式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐，以及可药用载体或赋形剂。
本发明进一步提供了兽用组合物，其包含至少一种如上定义的活性成分以及兽用载体。兽用载体是用于施用组合物目的的材料，并且可以是固体、液体或气体材料，其是惰性的或在兽医领域是可接受的并且与活性成分相容。这些兽用组合物可以是非肠道、口服或通过任何其它期望的途径施用。
组合治疗
式0、式I或式II化合物可以单独使用或与其它治疗剂组合使用，用于治疗本文所述的疾病或障碍。药物组合制剂或给药方案的第二化合物优选具有与式0、式I或式II化合物互补的活性，使得它们不会相互不利地影响。组合治疗可以提供“协同作用”并且证明是“协同的”，即当一起使用的活性成分得到的效果大于分别使用化合物产生的效果的总和时所达到的效果。
组合治疗可以作为同时或顺序方案施用。当顺序施用时，组合可以以两次或更多次施用施用。组合施用包括共施用，使用分开的制剂或单一药物制剂并且以任何顺序连续施用，其中优选存在一段时间，而两种(或所有)活性剂同时发挥其生物学活性。
因此，根据本发明的组合治疗包括施用至少一种式0、式I或式II化合物，或其立体异构体或可药用盐，以及使用至少一种其它治疗方法。选择式0、式I或式II化合物和其它药物活性剂的量以及施用的相对时间以达到所需的组合治疗效果。
制品
在本发明的另一个实施方案中，提供了包含可用于治疗上述疾病和障碍的材料的制品或“药盒”。在一个实施方案中，药盒包含含有式0、式I或式II化合物或其立体异构体或可药用盐的容器。该药盒可以进一步包含在容器上或与容器相关联的标签或包装插页。术语“包装插页”用于指通常包含在治疗产品的商业包装中的说明书，其包含关于使用此类治疗产品的适应证、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可以由多种材料形成，例如玻璃或塑料。容器可容纳有效治疗病症的式0、式I或式II化合物，并且可以具有无菌入口(例如，容器可以是可被皮下注射针刺穿的静脉内溶液袋或具有塞子的小瓶)。组合物中的至少一种活性剂是式0、式I或式II化合物。或者或另外，制品还可以包含第二容器，其包含药物稀释剂，例如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和右旋糖溶液。其可以进一步包含从商业和用户观点来看所需的其它材料，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
在另一个实施方案中，药盒适合于递送式0、式I或式II化合物的固体口服形式，例如片剂或胶囊剂。此类药盒可以包含多个单位剂量。此类药盒的一个实例是“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是众所周知的，并且广泛用于包装药物单位剂型。
实施例
以下实施例说明了在本发明范围内的化合物的制备和生物学评价。提供下面的这些实施例和制备以使本领域技术人员能够更清楚地理解和实践本发明。它们不应被认为是限制本发明的范围，而仅仅是作为其说明和代表。
中间体1：6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃
步骤A：2-(4-氯-2-氟-苯基)乙酸甲酯
将2-(4-氯-2-氟-苯基)乙酸(8.4g，44.5mmol)和浓硫酸(3.0mL)在甲醇(50mL)中的混合物在回流下搅拌18小时。减压浓缩后，将残留物溶于DCM(200mL)。将有机相用碳酸氢钠饱和溶液、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，得到粗2-(4-氯-2-氟-苯基)乙酸甲酯(7.6g)，为黄色油状物，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝203.1[M+1]+。
步骤B：1-(4-氯-2-氟-苯基)-2-甲基-丙-2-醇
在-78℃，在2-(4-氯-2-氟-苯基)乙酸甲酯(7.6g，37.51mmol)在无水THF(70mL)中的溶液中滴加入甲基溴化镁(3m，在乙醚中，37.5mL，112.5mmol)。将反应温至室温并且搅拌30分钟。加入饱和的氯化铵溶液。将水相用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。将粗品减压浓缩，得到1-(4-氯-2-氟-苯基)-2-甲基-丙-2-醇(6.9g)，为黄色油状物，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：/z＝185.1[M-OH]+。
步骤C：6-氯-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃
将1-(4-氯-2-氟-苯基)-2-甲基-丙-2-醇(6.9g，34.05mmol)和叔丁醇钾(9.55g，85.12mmol)在THF(170mL)中的混合物在65℃搅拌18小时。加入1N盐酸溶液直至pH＝3.0。加入乙酸乙酯(200mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:20至1:10)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃(4.3g，69％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.99(d,J＝8.0Hz,1H),6.75(d,J＝8.0Hz,1H),6.88(s,1H),2.93(s,2H),1.44(s,3H)。
步骤D：6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃
在25℃，在6-氯-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃(4.3g，23.54mmol)在DCM(45mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(4.5mL)直至原料消失。加入水和乙酸乙酯(100mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，得到6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(5.0g)，为橙色固体，将其应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.84(s,1H),6.83(s,1H),3.04(s,2H),1.52(s,3H)。
中间体2：(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
步骤A：3-(4-氯-2-氟-苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯
在回流下，在镁(1350.0mg，56.25mmol)和碘(100.0mg，0.39mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中滴加入1-(溴甲基)-4-氯-2-氟-苯(5.0g，22.4mmol)。将反应搅拌30分钟。然后在-78℃将溶液加入至丙酮酸甲酯(2.3g，22.5mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中并且搅拌30分钟，然后温至室温达2小时。加入饱和的氯化铵溶液和乙酸乙酯(200mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:20至1:10)作为洗脱溶剂，得到3-(4-氯-2-氟-苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(2.8g，51％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33-7.25(m,1H),7.18-7.09(m,2H),3.73(s,3H),3.03(s,2H),1.39(s,3H)。
步骤B：6-氯-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸
将3-(4-氯-2-氟-苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(493.0mg，2mmol)和叔丁醇钾(561.0mg，5mmol)在THF(10mL)中的混合物在60℃搅拌18小时。冷却至室温后，加入水和1N盐酸溶液直至pH＝3.0。加入乙酸乙酯(20mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:1至2:1)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(271mg，64％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.95-10.24(m,1H),7.04(d,J＝8.0Hz,1H),6.87(dd,J＝1.6,9.2Hz,1H),6.85(s,1H),3.59(d,J＝16Hz,1H),3.13(d,J＝16Hz,1H),1.73,(s,3H)。
步骤C：6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸
在25℃，在6-氯-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(230.0mg，1.08mmol)在DCM(10mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(0.5mL)并且搅拌5分钟。加入水和乙酸乙酯(20mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:4至1:3)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(150mg，54％)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(s,1H),6.99(s,1H),3.68(d,J＝16.8Hz,1H),3.23(d,J＝16.8Hz,1H),1.80(s,3H)。
步骤D：(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇
将6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(1.93g，7.5mmol)和硼烷(1M，在THF中，14.0mL，14mmol)在THF(75mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。缓慢加入甲醇(10mL)然后浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(580mg，32％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.84(s,1H),6.99(s,1H),6.60-5.80(m,1H),3.68(d,J＝16.8Hz,1H),3.23(d,J＝16.8Hz,1H),1.80(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝244.1[M+1]+。
中间体3：(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
步骤A：3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯
在回流下，在镁(3290.81mg，137.12mmol)和碘(243.76mg，0.96mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中滴加入2,4-二氟苄基溴(11291.0mg，54.54mmol)并且搅拌30分钟。然后在-78℃将溶液加入至丙酮酸甲酯(5606.57mg，54.92mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中并且搅拌30分钟，然后在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵溶液和乙酸乙酯(200mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚从1:20至1:10作为洗脱溶剂，得到3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(8.9g，71％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝231.1[M+1]+。
步骤B：6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
将3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(8.0g，34.75mmol)和叔丁醇钾(9.73g，86.9mmol)在THF(200mL)中的混合物在室温搅拌18小时。加入另一批叔丁醇钾(9.73g，86.9mmol)。将混合物在50℃搅拌10小时。冷却至室温后，用2N HCl将混合物调至pH3。分离有机相并且减压浓缩，得到6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(8.0g)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝197.1[M+1]+。
步骤C：6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(8g，40.81mmol)和碳酸铯(19.8g，60.7mmol)在DMF(150mL)中的混合物中加入碘甲烷(6.92g，48.7mmol)。将混合物在室温搅拌18小时。将混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用石油醚，得到6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(5g)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝211.1[M+1]+。
步骤D：6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
在室温在6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(5g，23.7mmol)在DCM(70mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(5mL)。将混合物在室温搅拌30分钟，倾倒入冰水中并且用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机相浓缩，得到6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯，为棕色油状物(5g)，为橙色油状物。将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝256.1[M+1]+。
步骤E：(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在0℃在6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(5g，19.53mmol)在THF(100mL)和乙醇(25mL)中的混合物中加入硼氢化钠(2.22g，58.6mmol)，然后加入氯化锂(2.5g，58.6mmol)。将混合物在室温搅拌3小时，用饱和氯化铵猝灭并且用DCM萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(3.0g，98％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.94(d,J＝8.0Hz,1H),6.60(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝5.6,12.0Hz,1H),3.66(dd,J＝7.2,12.0Hz,1H),3.34(d,J＝15.6Hz,1H),2.93(d,J＝15.6Hz,1H),1.84(t,J＝6.4Hz,1H),1.49(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝228.1[M+1]+。
中间体4：6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
步骤A：2-(4-溴-2-氟苯基)乙酸甲酯
将2-(4-溴-2-氟苯基)乙酸(20.2g，86.6mmol)和浓硫酸(7mL)在甲醇(200mL)中的混合物加热至回流达18小时。除去溶剂后，将残留物用DCM(200mL)稀释并且用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。浓缩后，得到2-(4-溴-2-氟苯基)乙酸甲酯(21.1g，99％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝280.1[M+1]+。
步骤B：1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇
在-78℃、氮气气氛下，在2-(4-溴-2-氟苯基)乙酸甲酯(16.0g，64.8mmol)在THF(160mL)中的溶液中滴加入甲基溴化镁(3M，在乙醚中，225mmol，75mL)。将反应在-78℃搅拌30分钟，然后在室温搅拌2小时。将反应用饱和氯化铵溶液猝灭。将水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥。过滤并且除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:己烷(从0至1:20)作为洗脱溶剂，得到1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇，为无色油状物(15.5g)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝263.1[M+1]+。
步骤C：1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇
在1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇(15.5g，52.7mmol)在无水THF(300mL)中的溶液中加入叔丁醇钾(17.6g，156.8mmol)。将混合物在65℃加热18小时。用2N HCl将反应调至pH 3。将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥。过滤并且除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:己烷(从0至1:20)作为洗脱溶剂，得到1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇(8.9g，63％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.98(d,J＝8.0Hz,1H),6.93(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H),6.87(d,J＝1.6Hz,1H),2.94(s,2H),1.46(s,6H)。
步骤D：6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
在1-(4-溴-2-氟苯基)-2-甲基丙-2-醇(2.88g，12.7mmol)在DCM(60mL)中的溶液中缓慢加入浓硝酸(60mL)。将混合物在室温搅拌30分钟。将反应用水(100mL)猝灭并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机溶液经硫酸钠干燥。过滤并且除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:己烷(3:50)作为洗脱溶剂，得到6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(2.83g，78％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.83(s,1H),7.03(s,1H),3.03(d,J＝1.6,1.2Hz,2H),1.53(s,6H).MS(ESI)：m/z＝274.0[M+1]+。
实施例1：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇
将商购可获得的7-氟-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(300mg，1.51mmol)、哌啶-4-基甲醇(183mg，1.59mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(391mg，3.03mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)中的混合物在120℃搅拌18小时。冷却至室温后，将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并并且用水和盐水洗涤。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(300mg，67％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝294.1[M+1]+。
步骤B：(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇
在50℃、氢气气氛下，将(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(300mg，1.02mmol)和10％钯炭(30mg)在2-甲基丙-2-醇(10mL)中的混合物搅拌18小时。将混合物冷却至室温并且过滤后，将滤液减压浓缩，得到(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇，为白色固体(260mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝264.1[M+1]+。
步骤C：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(322mg，1.97mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(1.03g，1.97mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(510mg，3.95mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(260mg，0.99mmol)。将产生的混合物在室温搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化((Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈10-20％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体(165mg，41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.58(s,1H),9.36(d,J＝7.2Hz,1H),8.89(d,J＝4.0Hz,1H),8.66(s,1H),7.89(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.62(s,1H),5.71(s,1H),4.58(t,J＝5.2Hz,1H),4.21-3.95(m,2H),3.41(t,J＝4.5Hz,2H),3.29-3.15(m,2H),2.95-2.74(m,2H),2.71-2.54(m,2H),1.85-1.29(m,5H)。MS(ESI)：m/z＝409.1[M+1]+。
实施例2：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
在密封管中，将7-氟-6-硝基-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(300mg，1.41mmol)、4-哌啶基甲醇(162mg，1.41mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(342mg，2.82mmol)在4-甲基-2-戊酮(5mL)中的混合物在30℃搅拌16小时。加入水和乙酸乙酯(2×30mL)。将有机相合并并且用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(400mg，92％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝308.2[M+1]+。
步骤B：6-氨基-7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
在室温、氢气气氛下，将7-(4-(羟基基)哌啶-1-基)-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(350mg，1.14mmol)和10％钯炭(35mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到6-氨基-7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(300mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝278.2[M+1]+。
步骤C：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温将6-氨基-7-[4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(250mg，0.90mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(100mg，0.19mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(145mg，0.89mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(23mg，0.19mmol)在DMF(5mL)中的混合物搅拌18小时。将粗反应产物通过制备HPLC纯化((Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈15-30％；B：在水中的10mM碳酸氢铵))，得到N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(68mg，18％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.72(s,1H),10.62(s,1H),9.38(d,J＝6.0Hz,1H),8.91(d,J＝4.0Hz,1H),8.70(s,1H),),8.25(s,1H),7.53(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.93(s,1H),4.59(t,J＝5.6Hz,1H),4.53(s,2H),3.41(d,J＝5.2Hz,2H),2.92-2.89(m,2H),2.67-2.61(m,2H),1.73-1.51(m,5H)。MS(ESI)：m/z＝423.2[M+1]+。
实施例3：反式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-(2,2-二甲氧基乙基)氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙基酯
在0℃，在2,2-二甲氧基乙胺(608.0mg，5.78mmol)和三乙胺(1.07mL，7.71mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基氧基]吡咯烷-2,5-二酮(1.0g，3.86mmol)并且将混合物在室温搅拌1小时。将反应减压浓缩至干燥。将残留物溶于DCM(150mL)中并且将有机相用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到N-(2,2-二甲氧基乙基)氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙基酯(945mg)，为无色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.76(brs,1H),4.33(t,J＝5.6Hz,1H),4.12(t,J＝8.4Hz,2H),3.36(s,6H),3.27(t,J＝5.6Hz,2H),0.94(t,J＝8.4Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤B：吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯
在0℃，在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(500.0mg，3.07mmol)在DCM(12mL)中的混合物中加入草酰氯(0.65mL，7.64mmol)和DMF(100.0mg，1.37mmol)，然后在室温2小时。将混合物浓缩至干燥，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(550mg)，为棕色固体，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝178.1[M-Cl+MeO]+。
步骤C：2-(2,4-二氟苯基)乙酸甲酯
在70℃，将2-(2,4-二氟苯基)乙酸(2.0g，11.62mmol)和浓硫酸(2mL)在甲醇(40mL)中的混合物搅拌16小时。浓缩后，将残留物溶于乙酸乙酯(300mL)。将有机相用饱和的碳酸氢钠、水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-(2,4-二氟苯基)乙酸甲酯(2.1g)，为无色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝187.1[M+1]+。
步骤D：1-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-丙-2-醇
在-78℃、氮气气氛下，在2-(2,4-二氟苯基)乙酸甲酯(1.8g，9.67mmol)在THF(20mL)中的混合物中滴加甲基溴化镁(3.0m，在乙醚中，9.67mL，29.01mmol)。将混合物温热并且在室温搅拌1小时。将反应用饱和的氯化铵溶液猝灭。将水相用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机相用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到1-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-丙-2-醇(1.8g)，为黄色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝169.1[M-OH]+。
步骤E：6-氟-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃
将1-(2,4-二氟苯基)-2-甲基-丙-2-醇(1.8g，9.67mmol)和叔丁醇钾(2720.0mg，24.24mmol)在THF(50mL)中的混合物在65℃搅拌90分钟。浓缩后，将残留物溶于乙酸乙酯(150mL)。将有机相用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:100)作为洗脱溶剂，得到6-氟-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃(1.14g，71％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝167.1[M+1]+。
步骤F：6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃
历经10分钟，在25℃在6-氟-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃(1.1g，6.9mmol)在DCM(20mL)中的溶液中滴加入硝酸(1.0mL)并且搅拌20分钟。将混合物倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机相用饱和的碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂洗脱，得到6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(1.04g，72％)，为灰色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝7.6Hz,1.2Hz,1H),6.55(d,J＝11.6Hz,1H),3.03(s,2H),1.56(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝212.1[M+1]+。
步骤G：2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙二酸二甲酯
在6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(420.0mg，1.99mmol)和丙二酸二甲酯(0.68mL，5.96mmol)在DMF(8mL)中的混合物中加入碳酸铯(1296.0mg，3.98mmol)并且在20℃搅拌16小时。将混合物倾倒至水(30mL)中并且用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙二酸二甲酯(280mg，44％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝324.1[M+1]+。
步骤H：2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙-1,3-二醇
在0℃、氮气气氛下，在二异丁基氢化铝(1M，在甲苯中，5.2mL，5.2mmol)在THF(2.5mL)中的溶液中滴加2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙二酸二甲酯(280.0mg，0.87mmol)在THF(10mL)中的溶液并且维持1小时，然后在室温1小时。在混合物中加入十水合硫酸钠并且将混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙-1,3-二醇(75mg，32％)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(s,1H),6.81(s,1H),4.02(d,J＝1.2Hz,2H),4.00(s,2H),3.83-3.75(m,1H),3.04(s,2H),1.51(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝290.0[M+Na]+。
步骤I：N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在密封管中，将2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙-1,3-二醇(80.0mg，0.30mmol)、N-(2,2-二甲氧基乙基)氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙酯(223.99mg，0.90mmol)和4-甲苯磺酸(3.0mg，0.02mmol)在甲苯(5mL)中的混合物在110℃搅拌72小时。将混合物用三乙胺中和，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(61mg，45％)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(s,1H),6.53(s,1H),4.92(brs,1H),4.65(t,J＝4.0Hz,1H),4.26-4.17(m,2H),4.18-4.07(m,2H),3.84-3.68(m,3H),3.35(t,J＝4.8Hz,2H),3.00(s,2H),1.47(s,6H),0.95(t,J＝8.4Hz,2H),0.00(s,9H)。
步骤J：N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在冰水浴中，在N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(61.0mg，0.13mmol)在DMF(2.5mL)中的混合物中加入氢化钠(35.0mg，0.88mmol)并且搅拌10分钟。在混合物中加入碘甲烷(0.02mL，0.35mmol)并且在20℃搅拌1小时。将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机物用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(47mg，75％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝489.2[M+Na]+。
步骤K：N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在20℃、氢气气氛下，将N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(47.0mg，0.10mmol)和10％钯炭(20.0mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，得到N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(42mg)，为无色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝437.2[M+1]+。
步骤L：N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(42.0mg，0.10mmol)、三乙胺(0.04mL，0.30mmol)和4-二甲基氨基吡啶(3.0mg，0.02mmol)在THF(5mL)中的混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(25.0mg，0.14mmol)并且搅拌1小时。在混合物中加入甲醇(2mL)。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(31mg，55％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝604.2[M+Na]+。
步骤M：反式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃在N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸反式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(31.0mg，0.05mmol)在DCM(0.50mL)中的混合物中加入三氟乙酸(250μL)并且搅拌1小时。将混合物用三乙胺中和。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10μm；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到反式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(17.8mg，76％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.73(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.75(s,1H),8.74(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.06(dd,J＝3.6,7.2Hz,1H),6.55(s,1H),4.75(t,J＝4.8Hz,1H),4.28(dd,J＝4.4,11.2Hz,2H),3.84(t,J＝7.2Hz,2H),3.65-3.55(m,1H),3.03(s,2H),2.76(d,J＝4.8Hz,2H),2.46(s,3H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝438.2[M+1]+。
实施例4：N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体1)(1.14g，5.01mmol)和4-哌啶基甲醇(5.77g，50.08mmol)的混合物在110℃搅拌18小时。将反应浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:4至2:3)，得到[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(1.53g，97％)，为橙色油状物。MS(ESI)：m/z＝307.2[M+1]+。
步骤B：(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(1.16g，3.75mmol)和10％钯炭(116mg)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(1.29g)，为橙色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝277.2[M+1]+。
步骤C：N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(990.0mg，3.58mmol)和三乙胺(1087.4mg，10.75mmol)在DCM(10mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(975.67mg，5.37mmol)在DCM(10mL)中的溶液并且将反应在25℃搅拌1小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge21.2*250mm c18，10um；A：乙腈45-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-[4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(916mg，61％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.50(s,1H),8.82-8.72(m,3H),8.43(s,1H),7.01(dd,J＝4,6.8Hz,1H),6.65(s,1H),3.67-3.57(m,2H),3.14-3.06(m,2H),3.03(s,2H),2.72-2.61(m,2H),1.82-1.61(m,5H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝422.1[M+1]+。
实施例5：N-(2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-氟-2,2-二甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
将2-氨基-5-氟苯酚(150mg，1.18mmol)、2-溴-2-甲基丙酸乙酯(345mg，1.77mmol)、碳酸铯(1.1g，3.54mmol)在1,4-二烷(8mL)中的混合物在110℃搅拌4小时。将反应过滤，减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)，得到7-氟-2,2-二甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(95mg，39％)，为灰色固体。MS(ESI)：m/z＝196.1[M+1]+。
步骤B：7-氟-2,2-二甲基-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
在0℃在7-氟-2,2-二甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(95mg，0.49mmol)在硫酸(4mL)中的溶液中滴加入硝基胍(59mg，0.49mmol)并且搅拌30分钟。将混合物倾倒入冰水中并且将水性物用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到7-氟-2,2-二甲基-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮，为灰色固体(108mg)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝241.1[M+1]+。
步骤C：2,2-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
将7-氟-2,2-二甲基-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(100mg，0.41mmol)、吗啉(43mg，0.50mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(86mg，0.67mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在室温搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到2,2-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(122mg，97％)，为灰色油状物。MS(ESI)：m/z＝308.1[M+1]+。
步骤D：2,2-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在室温在2,2-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(122mg，0.40mmol)在THF(4mL)中的溶液中加入硼烷(1M，在THF中，1.59mL，1.59mmol)。然后将混合物在65℃搅拌2小时。将混合物冷却至0℃。滴加入甲醇(10mL)。将混合物在回流下搅拌1小时。浓缩后，得到2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(120mg)，为红色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝294.2[M+1]+。
步骤E：2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺
在40℃、氢气气氛下，将2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(120mg，0.41mmol)和10％钯炭(30.0mg)在乙酸乙酯(30mL)中的混合物搅拌2小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺(110mg)，为黑色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝264.1[M+1]+。
步骤F：N-(2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将黑色油状物2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺(110mg，0.42mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(82mg，0.50mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(327mg，0.63mmol)和二异丙基乙基胺(152mg，1.25mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃搅拌4小时。将混合物通过制备HPLC纯化(phenomenex,Gemini C18，21.2×100mm.5um，110A，A：乙腈30-40％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到N-(2,2-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，41％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.51(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.92(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.66(s,1H),7.89(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.61(s,1H),5.82(s,1H),3.89-3.73(m,4H),2.95(s,2H),2.82-2.69(m,4.0Hz,4H),1.24(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝409.1[M+1]+。
实施例6：N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(900mg，3.70mmol)在吗啉(5mL)中的混合物在120℃搅拌18小时。将混合物减压浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(780mg，72％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝295.1[M+1]+。
步骤B：(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(780mg，2.65mmol)和10％钯炭(200mg)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌1小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(550mg)，为淡绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝265.1[M+1]+。
步骤C：N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(550mg，2.08mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(407mg，2.5mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(1.63g，3.12mmol)和二异丙基乙基胺(756mg，6.24mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用甲醇:DCM(3:100)作为洗脱溶剂，得到N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(490mg，58％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.47(s,1H),8.83(dd,J＝1.5,7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.77(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),7.07(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.94-3.96(m,4H),3.67(d,J＝5.6Hz,2H),3.25(d,J＝15.6Hz,1H),2.95(d,J＝15.6Hz,1H),2.91-2.93(m,4H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410.1[M+1]+。
实施例7：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸(2000mg，15.74mmol)和(E)-3-(二甲基氨基)-2-甲基丙烯醛(1780mg，15.74mmol)在乙酸(3mL)和乙醇(1mL)中的溶液在70℃加热1小时。将产生的混合物冷却至室温并且将固体通过过滤收集，用水洗涤并且真空干燥，得到6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(1610mg，58％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝178.1[M+1]+。
步骤B：(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇
将7-氟-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(300mg，1.51mmol)、哌啶-4-基甲醇(183mg，1.59mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(391mg，3.03mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)中的混合物在120℃搅拌18小时。冷却至室温后，将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并并且用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(300mg，67％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝294.1[M+1]+。
步骤C：(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇
在50℃、氢气气氛下，将(1-(6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(300mg，1.02mmol)和10％钯炭(30mg)在2-甲基丙-2-醇(10mL)中的混合物搅拌18小时。将混合物冷却至室温后，将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(260mg)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝264.1[M+1]+。
步骤D：N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(58mg，0.33mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(215mg，0.41mmol)、(1-(6-氨基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-7-基)哌啶-4-基)甲醇(85mg，0.27mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(71mg，0.55mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(7-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，30％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.55(s,1H),9.21(s,1H),8.83(d,J＝2.8Hz,1H),8.57(s,1H),7.88(s,1H),6.61(s,1H),5.68(s,1H),4.6(t,J＝2.8Hz,2H),4.08(t,J＝4.4Hz,2H),3.43(t,J＝5.2Hz,2H),3.25-3.22(m,2H),2.86-2.83(m,2H),2.62-2.56(m,2H),2.42(s,3H),1.73-1.63(m,4H),1.51-1.47(m,1H)。
MS(ESI)：m/z＝423.1[M+1]+。
实施例8：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(80.0mg，0.38mmol)、1-(2,2-二氟乙基)哌嗪盐酸盐(212.0mg，1.14mmol)和碳酸铯(556.0mg，1.71mmol)在DMF(4mL)中的混合物在20℃搅拌5小时。将混合物倾倒至水(20mL)中并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:6)作为洗脱溶剂，得到1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪(88mg，68％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝342.1[M+1]+。
步骤B：6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪(84.0mg，0.25mmol)和10％钯炭(50.0mg)在甲醇(12mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(75mg)，为黄色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝312.2[M+1]+。
步骤C：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(63.0mg，0.35mmol)、三乙胺(0.1mL，0.69mmol)和4-二甲基氨基吡啶(7.0mg，0.06mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(70.0mg，0.22mmol)并且将混合物在25℃搅拌1小时。在混合物中加入甲醇(4mL)并且搅拌30分钟。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚:DCM(2:1:1)作为洗脱溶剂，得到N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(84.1mg，82％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(brs,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.95(dd,J＝1.2,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.71(s,1H),6.20(tt,J＝4.4,55.6Hz,1H),3.00(s,2H),2.94-2.73(m,10H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝457.2[M+1]+。
实施例9：N-(7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
将吗啉(176mg，2.02mmol)、7-氟-6-硝基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并嗪(200mg，1.01mmol)、碳酸钾(488mg，3.53mmol)和碘化钠(530mg，3.53mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在85℃搅拌16小时。过滤并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪，为红棕色油状物(250mg，93％)。MS(ESI)：m/z＝266.2[M+1]+。
步骤B：7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺
在45℃、氢气气氛下，将7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并嗪(125mg，0.47mmol)和10％钯炭(50.0mg)在乙酸乙酯(20mL)中的混合物搅拌3小时。过滤并且浓缩后，得到7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺，为棕色固体(100mg)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝236.2[M+1]+。
步骤C：N-(7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将7-吗啉代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并嗪-6-胺(95.0mg，0.40mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(79.0mg，0.48mmol)和2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(307mg，0.810mmol)在DMF(5mL)和二异丙基乙基胺(260mg，2.02mmol)中的混合物在25℃搅拌16小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Boston ODS 40gflash，A：MeCN 25-35％；B：在H2O中的0.5％碳酸氢铵)，得到N-(7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(22.9mg，15％)，为淡黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.52(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.93(dd,J＝1.2,4.0Hz,1H),8.66(s,1H),7.87(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.64(s,1H),5.76(s,1H),4.10-4.08(m,2H),3.89-3.74(m,4H),3.28-3.22(m,2H),2.79-2.69(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝381.2[M+1]+。
实施例10：N-(3-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-苄基-7-氟-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
将7-氟-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(200mg，1.2mmol)、(氯甲基)苯(159mg，1.26mmol)和碳酸铯(1.95g，5.98mmol)在1,4-二烷(10mL)中的混合物在110℃搅拌4小时。过滤后，将滤液浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到4-苄基-7-氟-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(250mg，75％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝258.1[M+1]+。
步骤B：4-苄基-7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在0℃，在4-苄基-7-氟-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(250mg，0.97mmol)在THF(10mL)中的混合物中滴加入甲基溴化镁(3M，在乙醚中，1.3mL，3.89mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物冷却至0℃，并且加入乙酸(2mL)，然后加入硼氢化钠(92mg，2.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌12小时，然后倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到4-苄基-7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(220mg，67％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝258.2[M+1]+。
步骤C：7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在40℃、氢气气氛下，将4-苄基-7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(220mg，0.86mmol)和10％钯炭(40mg)在乙醇(20mL)中的混合物搅拌4小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(100mg)，为轻油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝168.2[M+1]+。
步骤D：7-氟-3-甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在0℃，在7-氟-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(100mg，0.60mmol)在浓硫酸(4mL)中的溶液中加入硝基胍(73mg，0.60mmol)。然后将混合物在0℃搅拌30分钟并且倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯萃取(30mL)。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到7-氟-3-甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(80mg)，为红色固体，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝213.2[M+1]+。
步骤E：3-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
将7-氟-3-甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(80mg，0.38mmol)、吗啉(49mg，0.57mmol)和碳酸铯(246mg，0.75mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在85℃搅拌18小时。将混合物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到3-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(80mg，61％)，为红色油状物。MS(ESI)：m/z＝280.1[M+1]+。
步骤F：N-(3-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将3-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并嗪-6-胺(43mg，0.17mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(33mg，0.21mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(107mg，0.21mmol)和二异丙基乙基胺(44mg，0.34mmol)在DMF(5mL)中的混合物在20℃搅拌16小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(3-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(15mg，22％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.52(s,1H),9.36(dd,J＝1.2,6.8Hz,1H),8.93(dd,J＝1.6,4Hz,1H),8.67(s,1H),),7.78(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.66(s,1H),5.81(s,1H),4.13-4.08(m,1H),3.87-3.80(m,4H),3.61(dd,J＝8,10Hz,1H),3.41-3.33(m,1H),2.78-2.71(m,4H),1.08(d,J＝6.4Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝395.2[M+1]+。
实施例11：N-(2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-氯-2-甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
将2-氨基-5-氯苯酚(2.26g，15.73mmol)、2-溴丙酸乙酯(4.27g，23.6mmol)和碳酸铯(15.39g，47.2mmol)在1,4-二烷(20mL)中的混合物在20℃搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到7-氯-2-甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮，为灰色固体(1.4g，42％)。MS(ESI)：m/z＝198.1[M+1]+。
步骤B：7-氯-2-甲基-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
在0℃，在7-氯-2-甲基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(664mg，3.36mmol)在浓硫酸(10mL)中的溶液中加入硝基胍(410mg，3.36mmol)。将混合物搅拌30分钟，然后倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到7-氯-2-甲基-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮(660mg)，为灰色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝243.1[M+1]+。
步骤C：2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]嗪-3(4H)-酮
将7-氯-2-甲基-6-硝基-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(151mg，0.62mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在密封管中在120℃搅拌16小时。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(180mg，78％)，为红色油状物。MS(ESI)：m/z＝294.2[M+1]+。
步骤D：2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-4H-1,4-苯并嗪-3-酮(183.0mg，0.62mmol)在THF(4mL)中的溶液中加入硼烷(1M，在THF中，2.5mL，2.5mmol)。将混合物在65℃搅拌2小时。将混合物冷却至0℃并且滴加入甲醇(10mL)。将混合物在回流下搅拌1小时。浓缩后，得到2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(180mg)，为红色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝280.2[M+1]+。
步骤E：2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺
在40℃、氢气气氛下，将2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪(180mg，0.64mmol)和10％钯炭(40.0mg)在乙酸乙酯(30mL)中的混合物搅拌2小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺，为深灰色油状物(162mg)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝250.2[M+1]+。
步骤F：N-(2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺(162mg，0.65mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(127mg，0.78mmol)、二异丙基乙基胺(236mg，1.95mmol)和(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(508mg，0.97mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃搅拌4小时。将残留物通过制备HPLC纯化(phenomenex,Gemini C18,21.2×100mm.5um,110A；A：乙腈25-35％；B：在水中的0.05％TFA)，得到N-(2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，39％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.51(s,1H),9.35(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.92(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.66(s,1H),7.87(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.65(s,1H),5.76(s,1H),4.05-4.08(m,1H),3.82-3.84(m,4H),3.26-3.29(m,1H),2.87-2.92(m,1H),2.74-2.76(m,4H),1.26(d,J＝5.6Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝395.1[M+1]+。
实施例12：N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在装有搅拌棒的烧瓶中加入6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(实施例7，步骤A)(127.53mg，0.72mmol)并且在氮气气氛下。加入DMF(10mL)并且将混合物冷却至0℃。加入(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(359.01mg，0.69mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(83.44mg，0.69mmol)。加入[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(实施例4，步骤B)(173.0mg，0.63mmol)并且除去冰浴，使反应在室温搅拌3小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD，19*250mm,A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(173.0mg，63％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.45(s,1H),8.69(s,1H),8.63(d,J＝2Hz,1H),8.59-8.56(m,1H),8.42(s,1H),6.64(s,1H),3.64(s,2H),3.14-3.06(m,2H),3.03(s,2H),2.72-2.63(m,2H),2.46(s,2H),1.83-1.62(m,5H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝436.3[M+1]+。
实施例13：(S)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(S)-(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基)甲醇
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(实施例3，步骤F)(133.0mg，0.62mmol)、(S)-吡咯烷-3-基甲醇(94.83mg，0.94mmol)和碳酸钾(215.5mg，3.15mmol)在乙腈(30mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。过滤并且减压浓缩后，得到[(3S)-1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(254mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤B：(S)-(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[(3S)-1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(254.0mg，0.87mmol)和10％钯炭(25mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(2:1)作为洗脱溶剂，得到[(3S)-1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(102mg，44％)，为红色油状物。MS(ESI)：m/z＝263.2[M+1]+。
步骤C：(S)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[(3S)-1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(78.0mg，0.30mmol)和三甲胺(90.26mg，0.89mmol)在DCM(15mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(80.98mg，0.45mmol)在DCM(10mL)中的溶液。将反应在25℃搅拌1小时。将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge PrepC18 10um OBD,19*250mm，A：乙腈45-75％和0.01％氨；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到(S)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(78.5mg，68％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.97(s,1H),8.04(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.75(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.02(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.58(s,1H),3.74(d,J＝6.4Hz,2H),3.56-3.22(m,2H),3.02(s,2H),2.97-2.82(m,2H),2.61-2.48(m,1H),2.16-2.05(m,1H),1.84-1.68(m,2H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝408.3[M+1]+。
实施例14：N-(2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺
将2-(4-氯-2-氟-苯基)乙酸(5.00g，26.51mmol)、N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(7.76g，79.54mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(7.62g，39.77mmol)和4-二甲基氨基吡啶(4.85g，39.77mmol)在DCM(100mL)中的混合物在20℃搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到2-(4-氯-2-氟-苯基)-N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺(4.65g，73％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝232.1[M+1]+。
步骤B：1-(4-氯-2-氟苯基)丙-2-酮
在-78℃、氮气下，在2-(4-氯-2-氟-苯基)-N-甲氧基-N-甲基-乙酰胺(4.65g，20.07mmol)在DCM(50mL)中的混合物中滴加入甲基溴化镁(3.0m，在乙醚中，8.03mL，24.09mmol)。将反应混合物在25℃搅拌30分钟。通过加入50mL水将反应猝灭。将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到1-(4-氯-2-氟-苯基)丙-2-酮(2.65g，67.2％)，为淡黄色泡沫状物。MS(ESI)：m/z＝187.1[M+1]+。
步骤C：1-(4-氯-2-氟-5-硝基苯基)丙-2-酮
在0℃，在1-(4-氯-2-氟-苯基)丙-2-酮(373.22mg，2mmol)在硫酸(1mL)中的溶液中加入2-氧代肼脒2-氧化物(229.0mg，2.20mmol)。将产生的混合物在0℃搅拌2小时。将混合物倾倒入冰水中并且加入乙酸乙酯(50mL)。将有机相分离，经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到1-(4-氯-2-氟-5-硝基-苯基)丙-2-酮(400mg，78％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝232.1[M+1]+。
步骤D：1-(4-氯-2-氟-5-硝基苯基)丙-2-醇
在0℃，在1-(4-氯-2-氟-5-硝基-苯基)丙-2-酮(200mg，0.86mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中加入硼氢化钠(65mg，1.72mmol)。将产生的混合物在0℃搅拌1小时。通过加入饱和氯化铵溶液将反应猝灭。将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到1-(4-氯-2-氟-5-硝基苯基)丙-2-醇(160mg)，为淡黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝234.2[M+1]+。
步骤E：6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
将1-(4-氯-2-氟-5-硝基-苯基)丙-2-醇(105mg，0.45mmol)和叔丁醇钾(100mg，0.90mmol)在THF(5mL)中的混合物在60℃搅拌16小时。冷却至室温后，将反应真空浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(50mg，52.1％)，为淡黄色泡沫状物。MS(ESI)：m/z＝214.2[M+1]+。
步骤F：4-(2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在密封管中，将6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(100.0mg，0.47mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在110℃搅拌16小时。冷却至室温后，将反应真空浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(5:1)作为洗脱溶剂，得到4-(2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(85mg，65％)，为淡黄色固体。MS(ESI)：m/z＝265.2[M+1]+。
步骤G：2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在室温、氢气气氛下，将4-(2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(85mg，0.32mmol)和10％钯炭(8.5mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(55mg)，为无色泡沫状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝235.2[M+1]+。
步骤H：N-(2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(55mg，0.23mmol)和三乙胺(23mg，0.23mmol)在DCM(4mL)中的溶液在0℃搅拌。加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(42mg，0.23mmol)在DCM(2mL)中的溶液。将产生的混合物在20℃搅拌1小时。加入甲醇(2mL)。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化((Xbridge Prep C18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，51％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.47(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.78(s,1H),8.77(dd,J＝2,4.4Hz,1H),8.45(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.67(s,1H),4.97-4.92(m,1H),3.96-3.94(m,4H),3.34(dd,J＝8.8,15.6Hz,1H),2.93-2.91(m,4H),2.84(dd,J＝7.6,15.6Hz,1H),1.47(d,J＝6.4Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝380.2[M+1]+。
实施例15：(R)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(R)-(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基)甲醇
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(141.0mg，0.67mmol)、(R)-吡咯烷-3-基甲醇(101.3mg，1mmol)和碳酸钾(230.19mg，1.67mmol)在乙腈(30mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。过滤并且减压浓缩后，得到[(3R)-1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(272mg)为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤B：(R)-(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[(3R)-1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(272.0mg，0.93mmol)和10％钯炭(27mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，将残留物在硅胶柱上纯化，用乙酸乙酯/石油醚(2:1)洗脱，得到[(3R)-1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(108mg，43％)，为红色油状物。MS(ESI)：m/z＝263.2[M+1]+。
步骤C：(R)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[(3R)-1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)吡咯烷-3-基]甲醇(108.0mg，0.41mmol)和三甲胺(124.97mg，1.23mmol)在DCM(15mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(112.12mg，0.62mmol)在DCM(10mL)中的溶液。将反应在25℃搅拌1小时。将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge PrepC18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到(R)-N-(6-(3-(羟基甲基)吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(101.3mg，60％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.90(s,1H),8.73(dd,J＝1.2,6.7Hz,1H),8.70(s,1H),8.68(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.12(s,1H),6.95(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.51(s,1H),3.67(d,J＝6.4Hz,2H),3.28-3.16(m,2H),2.95(s,2H),2.91-2.75(m,2H),2.53-2.42(m,1H),2.08-1.98(m,1H),1.78-1.63(m,2H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝408.2[M+1]+。
实施例16：N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇、哌啶-4-基甲醇(中间体2)(150mg，0.62mmol)在哌啶-4-基甲醇(1.42g，12.31mmol)中的混合物在110℃搅拌18小时。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(100mg，50％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝323.1[M+1]+。
步骤B：(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(100mg，0.31mmol)和10％钯炭(25mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤。将滤液减压浓缩，得到(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(80mg)。为淡绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤C：N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(80mg，0.27mmol)、6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(69mg，0.39mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(255mg，0.49mmol)和二异丙基乙基胺(118mg，0.98mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(65mg，53％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),8.69(s,1H),8.63(d,J＝2.0Hz,1H),8.57-8.58(m,1H),8.43(s,1H),6.65(s,1H),3.64-3.66(m,4H),3.23(d,J＝16.0Hz,1H),3.07-3.10(m,2H),2.93(d,J＝15.6Hz,1H),2.63-2.69(m,2H),2.45(s,3H),2.00-2.02(m,1H),1.64-1.80(m,5H),1.54(s,1H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝452.2[M+1]+。
实施例17：N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在密封管中，将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(130mg，0.53mmol)在2,2-二甲基吗啉(1mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。冷却至室温并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(2:1)作为洗脱溶剂，得到(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(95mg，55％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝323.2[M+1]+。
步骤B：(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(95mg，0.29mmol)和10％钯炭(9.5mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(55mg)，为无色泡沫状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤C：N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(34mg，0.21mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(109mg，0.21mmol)和2,3,4-三甲基吡啶(46mg，0.38mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(55mg，0.19mmol)并且搅拌18小时。在反应中加入水。将水相用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的相用盐水洗涤，经硫酸盐干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(20:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物。将产物进一步通过制备HPLC纯化((Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈15-30％；B：在水中的10mM碳酸氢铵))，得到N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(48mg，58％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.97(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.84(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.20(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.61(s,1H),5.05(t,J＝6.0Hz,1H),3.82-3.74(m,2H),3.48-3.40(m,2H),3.20(d,J＝16Hz,1H),2.83(d,J＝15.6Hz,1H),2.73-2.69(m,2H),2.67-2.62(m,2H),1.35(s,6H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝438.3[M+1]+。
实施例18：N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(100mg，0.47mmol)、(3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇盐酸盐(144mg，0.95mmol)和碳酸铯(308mg，0.94mmol)在DMF(6mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)，得到(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇(149mg，95％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝307.1[M+1]+。
步骤B：(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇(100mg，0.33mmol)和10％钯炭(40mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇(90mg，49％)，为淡绿色油状物。MS(ESI)：m/z＝277.1[M+1]+。
步骤C：N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-3-甲基吡咯烷-3-基)甲醇(90mg，0.32mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(64mg，0.39mmol)和(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(118mg，0.98mmol)在DMF(10mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。减压浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um，19*250mm，A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，36％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),8.76-8.80(m,3H),8.12(s,1H),7.01(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.55(s,1H),3.63-3.66(m,2H),3.34-3.39(m,1H),3.10(d,J＝9.2Hz,1H),3.00(s,2H),2.86-2.93(m,2H),2.39(s,1H),1.94-2.01(m,1H),1.60-1.66(m,1H),1.47(s,6H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
实施例19：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(120.0mg，0.49mmol)、1-(2,2-二氟乙基)哌嗪盐酸盐(720.0mg，3.86mmol)和碳酸铯(820.0mg，2.52mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在90℃搅拌5天。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)和水稀释。将有机相分离并且经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(65mg，37％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝358.2[M+1]+。
步骤B：[5-氨基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(65.0mg，0.18mmol)和10％钯炭(25.0mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，得到[5-氨基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55mg，92％)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝328.1[M+1]+。
步骤C：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(44.0mg，0.27mmol)和二异丙基乙基胺(0.08mL，0.51mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(130.0mg，0.34mmol)。将混合物在25℃搅拌30分钟。在混合物中加入[5-氨基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55.0mg，0.17mmol)在DMF(2mL)中的溶液中并且将混合物在25℃搅拌3小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(36.4mg，46％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.37(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.35(dd,J＝4,6.8Hz,1H),6.70(s,1H),6.20(tt,J＝4.4,14Hz,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.49-3.37(m,2H),3.19(d,J＝16Hz,1H),2.94-2.72(m,11H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝473.2[M+1]+。
实施例20：顺式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在密封管中，将2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)丙-1,3-二醇(80.0mg，0.30mmol)、N-(2,2-二甲氧基乙基)氨基甲酸2-三甲基甲硅烷基乙酯(223.99mg，0.90mmol)和4-甲苯磺酸(3.0mg，0.02mmol)在甲苯(5mL)中的混合物在110℃搅拌72小时。将混合物用三乙胺中和。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(40mg，30％)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.83(s,1H),7.57(s,1H),4.90(brs,1H),4.70(t,J＝4.4Hz,1H),4.24-4.06(m,6H),3.40-3.37(m,1H),3.33-3.29(m,2H),3.01(s,2H),1.49(s,6H),0.94(t,J＝8.4Hz,2H),0.00(s,9H)。MS(ESI)：m/z＝475.1[M+Na]+。
步骤B：顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基-N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸酯
在0℃，将N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基酯(45.0mg，0.10mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入氢化钠(30.0mg，0.75mmol)并且搅拌10分钟。在混合物中加入碘甲烷(0.02mL，0.28mmol)并且将反应在20℃搅拌1小时。将混合物倾倒至水中。将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机物用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(37mg，80％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝489.1[M+Na]+。
步骤C：N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯
在20℃、氢气气氛下，将N-[[5-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(37.0mg，0.08mmol)和10％钯炭(15.0mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，得到顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基-N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸酯(33mg，95％)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝437.2[M+1]+。
步骤D：顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基-N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸酯
在顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基-N-[[5-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸酯(32.0mg，0.07mmol)、三乙胺(25.0mg，0.25mmol)和4-二甲基氨基吡啶(2.0mg，0.02mmol)在THF(5mL)中的混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(20.0mg，0.11mmol)并且在20℃搅拌1小时。在混合物中加入甲醇(2mL)，然后将混合物浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用甲醇:DCM(1:20)作为洗脱溶剂，得到顺式-2-三甲基甲硅烷基乙基-N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸酯(17mg，40％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝604.2[M+Na]+。
步骤E：顺式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，在N-[[5-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-1,3-二烷-2-基]甲基]-N-甲基-氨基甲酸顺式-2-三甲基甲硅烷基乙酯(17.0mg，0.03mmol)在DCM(0.40mL)中的混合物中加入三氟乙酸(200.0uL)并且搅拌1小时。将混合物用三乙胺中和。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到顺式-N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(7.9mg，62％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.31(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.74(s,1H),8.65(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),7.53(s,1H),7.50(s,1H),7.05(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),4.81(t,J＝5.2Hz,1H),4.31(d,J＝11.6Hz,2H),4.18(dd,J＝3.2,11.6Hz,2H),3.04(s,2H),2.98-2.93(m,1H),2.81(d,J＝4.8Hz,2H),2.46(s,3H),1.50(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝438.3[M+1]+。
实施例21：N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基丁-2-醇
在-78℃、氮气气氛下，在1-(4-氯-2-氟-苯基)丙-2-酮(300mg，1.61mmol)在THF(10mL)中的溶液中滴加入乙基溴化镁(1m，在THF中，1.93mL，1.93mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将反应用饱和氯化铵溶液猝灭。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到1-(4-氯-2-氟-苯基)-2-甲基-丁-2-醇(300mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝199.1[M-OH]+。
步骤B：6-氯-2-乙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃
将1-(4-氯-2-氟-苯基)-2-甲基-丁-2-醇(300mg，1.38mmol)和叔丁醇钾(387mg，3.46mmol)在THF(20mL)中的混合物在65℃搅拌3小时。加入水并且将水性物用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:100)，得到6-氯-2-乙基-2-甲基-3H-苯并呋喃(132mg，49％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.01(d,J＝8.0Hz,1H),6.77(dd,J＝1.6,7.6Hz,1H),6.71(d,J＝1.6Hz,1H),3.02(d,J＝15.6Hz,1H),2.86(d,J＝15.6Hz,1H),1.74(t,J＝7.2Hz,2H),1.41(s,3H),0.95(q,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：4-(2-乙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在6-氯-2-乙基-2-甲基-3H-苯并呋喃(132mg，0.67mmol)在DCM(10mL)中的混合物中滴加入硝酸(0.5mL)并且将混合物搅拌30分钟。将混合物倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到6-氯-2-乙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(126mg，67％)，为黑色固体。MS(ESI)：m/z＝242.1[M+1]+。
步骤D：4-(2-乙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
将6-氯-2-乙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(132mg，0.55mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在120℃搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(15:100)，得到4-(2-乙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(106mg，42％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤E：2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将4-(2-乙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(106mg，0.35mmol)和10％钯炭(40mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(77mg，68％)，为淡绿色油状物。MS(ESI)：m/z＝263.3[M+1]+。
步骤F：N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(80mg，0.30mmol)和三乙胺(92mg，0.91mmol)在DCM(15mL)中的混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(83mg，0.46mmol)。将混合物在室温搅拌3小时，浓缩并且通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈45-75％和0.01％氨；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体(70mg，56％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ10.46(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.78(s,1H),8.75(dd,J＝2.0,4.0Hz,1H),8.42(s,1H),7.06(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),3.94-3.96(m,4H),3.09(d,J＝15.2Hz,1H),2.94(d,J＝15.2Hz,1H)2.91-2.93(m,4H),1.78(q,J＝7.6Hz,2H),0.98(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝408.2[M+1]+。
实施例22：N-(2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(4-氯-2-氟苯基)-2-环丙基丙-2-醇
在-78℃、氮气气氛下，在1-(4-氯-2-氟-苯基)丙-2-酮(300mg，1.61mmol)在THF(10mL)中的混合物中滴加入环丙基溴化镁(0.5M，在THF中，3.86mL，1.93mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将混合物用饱和的氯化铵溶液(20mL)猝灭并且用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到1-(4-氯-2-氟苯基)-2-环丙基丙-2-醇，为轻油状物(350mg)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝211.1[M-OH]+
步骤B：6-氯-2-环丙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃
将1-(4-氯-2-氟苯基)-2-环丙基丙-2-醇(317mg，1.38mmol)和叔丁醇钾(387mg，3.46mmol)在THF(20mL)中的混合物在65℃搅拌3小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:100)，得到6-氯-2-环丙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃(82mg，28％)，为轻油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.00(d,J＝7.6Hz,1H),6.77(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H),6.69(d,J＝1.6Hz,1H),3.02(d,J＝15.6Hz,1H),2.90(d,J＝15.6Hz,1H),1.42(s,3H),1.11-1.16(m,1H),0.44-0.49(m,3H),0.33-0.37(m,1H)。
步骤C：6-氯-2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
在25℃，在6-氯-2-环丙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃(82mg，0.38mmol)在DCM(10mL)中的溶液中滴加入硝酸(0.5mL)并且将混合物搅拌30分钟。将混合物倾倒入冰水中并且用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到6-氯-2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃，为黑色固体(100mg，粗品)。MS(ESI)：m/z＝254.1[M+1]+。
步骤D：4-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
将6-氯-2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(100mg，0.39mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在120℃搅拌18小时。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(15:100)作为洗脱溶剂，得到4-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(130mg，49％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝305.1[M+1]+。
步骤E：2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将4-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(130mg，0.35mmol)和10％钯炭(40mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(63mg)，为淡绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝275.2[M+1]+。
步骤F：N-(2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(63mg，0.23mmol)和三乙胺(70mg，0.69mmol)在DCM(15mL)中的混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(63mg，0.34mmol)。将混合物在25℃搅拌3小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(2-环丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体(30mg，31％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ10.45(s,1H),8.82(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.76(dd,J＝2.0,4.0Hz,1H),8.40(s,1H),7.06(d,J＝4.0,6.8Hz),6.63(s,1H),3.93-3.95(m,4H),3.12(d,J＝16.4Hz,1H),2.96(d,J＝16.4Hz,1H),2.89-2.92(m,4H),1.43(s,3H),1.15-1.19(m,1H),0.40-0.49(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝420.2[M+1]+。
实施例23：N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸酯
在回流下，在镁(1206.62mg，50.28mmol)和碘(89.38mg，0.35mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中滴加入2,4-二氟苄基溴(4140.0mg，20mmol)并且将产生的混合物搅拌30分钟。然后在-78℃将溶液加入至丙酮酸甲酯(2055.73mg，20.14mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中，然后在室温2小时。加入饱和的氯化铵和乙酸乙酯(200mL)。分离有机相并且经乙酸乙酯干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:20至1:10)作为洗脱剂，得到3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(4000mg，87％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.25-7.10(m,1H)6.84-6.70(m,2H),3.75(s,3H),3.09(d,J＝14Hz,1H),2.92(d,d,J＝13.6Hz,1H),1.47(s,3H)。
步骤B：6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
将3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(4000.0mg，17.38mmol)和叔丁醇钾(4874.2mg，43.44mmol)在THF(180mL)中的混合物在65℃搅拌18小时。冷却至室温后，用1N HCl将反应酸化至pH 3。加入乙酸乙酯(200mL)并且将有机相分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(3:2)，得到6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(650mg，18％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.11-6.98(m,1H),6.66-6.50(m,2H),3.60(d,J＝16Hz,1H),3.14(d,J＝16Hz),1.77(s,3H)。
步骤C：6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
在20℃，在6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(500.0mg，2.55mmol)在DCM(20mL)中的溶液中滴加入发烟硝酸(845.23mg，12.74mmol)。将混合物搅拌30分钟。将混合物倾倒至冰水。将水相用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(580mg)，为淡黄色泡沫状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝242.0[M+1]+。
步骤D：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
将6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(280.00mg，1.16mmol)、吗啉(202.29mg，2.32mmol)和碳酸铯(1513.12mg，4.64mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在20℃搅拌16小时。将混合物过滤并且将滤液真空浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(300mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝309.1[M+1]+。
步骤E：N,N,2-三甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺
将2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸(120.0mg，0.39mmol)、N,N-二甲基胺盐酸盐(63.48mg，0.78mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(296.0mg，0.78mmol)和二异丙基乙基胺(201.10mg，1.56mmol)在DMF(5mL)中的混合物在20℃搅拌2小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)，得到N,N,2-三甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酰胺(100mg，69％)，为淡黄色固体。MS(ESI)：m/z＝336.2[M+1]+。
步骤F：5-氨基-N,N,2-三甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺
在室温、氢气气氛下，将N,N,2-三甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酰胺(100.00mg，0.30mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，得到5-氨基-N,N,2-三甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-甲酰胺(100mg，粗品)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝306.2[M+1]+。
步骤G：N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-氨基-N,N,2-三甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-甲酰胺(100.00mg，0.33mmol)和三乙胺(66.27mg，0.65mmol)在DCM(5mL)中的混合物在0℃搅拌。滴加吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(71.36mg，0.39mmol)在DCM(5mL)中的溶液。将混合物在20℃搅拌1小时。加入甲醇(3mL)。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化((XbridgePrep C18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈50-70％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg，41％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.46(s,1H),9.38(d,J＝6.8Hz,1H),8.95(d,J＝1.6,4Hz,1H),8.69(s,1H),8.35(s,1H),7.35(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.85(s,1H),3.90(d,J＝16Hz,1H),3.86-3.83(m,4H),3.16(s,3H),3.05(d,J＝16.4Hz,1H),2.88(s,3H),2.84-2.81(m,4H),1.58(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝451.2[M+1]+。
实施例24：N-[6-[4-(1-氨基-2,2,2-三氟-乙基)-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-((4-甲氧基苄基亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将4-甲酰基-1-哌啶甲酸叔丁酯(1.07g，5mmol)、4-甲氧基苄基胺(685.9mg，5mmol)、分子筛(1.00g，5mmol)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌18小时。过滤并且浓缩后，得到4-((4-甲氧基苄基亚氨基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g)，为无色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝333.3[M+1]+。
步骤B：4-(2,2,2-三氟-1-(4-甲氧基苄基氨基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温，在4-[(Z)-(4-甲氧基苯基)甲基亚氨基甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，5mmol)、(三氟甲基)三甲基硅烷(1.07g，7.5mmol)和氟化氢钾(585.0mg，7.5mmol)在乙腈(10mL)中的混合物中滴加入三氟乙酸(427.5mg，3.75mmol)。将混合物在室温搅拌18小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:10至1:6)作为洗脱溶剂，得到4-[2,2,2-三氟-1-[(4-甲氧基苯基)甲基氨基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.08g，50％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝303.2[M-100]+
步骤C：2,2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1-(4-哌啶基)乙胺三氟乙酸盐
在4-[2,2,2-三氟-1-[(4-甲氧基苯基)甲基氨基]乙基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.37mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(0.3mL)并且将产生的混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1-(4-哌啶基)乙胺(100mg)，为三氟乙酸盐，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝303.1[M+1]+。
步骤D：1-[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]-2,2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]乙胺
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(100mg，0.47mmol)、2,2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1-(4-哌啶基)乙胺三氟乙酸盐(170mg，0.56mmol)和碳酸铯(490mg，1.5mmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。然后加入水并且将水相用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(0-25％)作为洗脱溶剂，得到1-[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]-2,2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]乙胺(190mg，74％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝494.3[M+1]+。
步骤E：4-[(4-氨基-3-吡啶基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
将1-[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]-2,2,2-三氟-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]乙胺(180mg，0.36mmol)、铁粉(420mg，7.52mmol)和氯化铵(396mg，7.4mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的混合物在80℃搅拌2小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶柱色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(20％-50％)，得到4-[(4-氨基-3-吡啶基)氧基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色固体(110mg，97％)。MS(ESI)：m/z＝464.3[M+1]+。
步骤F：N-(2,2-二甲基-6-(4-(2,2,2-三氟-1-((4-甲氧基苄基)氨基)乙基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2,2-二甲基-6-[4-[2,2,2-三氟-1-[(4-甲氧基苯基)甲基氨基]乙基]-1-哌啶基]-3H-苯并呋喃-5-胺(105mg，0.23mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(60mg，0.37mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(140mg，0.37mmol)和二异丙基乙基胺(165mg，1.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。将混合物通过制备HPLC纯化，得到N-[2,2-二甲基-6-[4-[2,2,2-三氟-1-[(4-甲氧基苯基)甲基氨基]乙基]-1-哌啶基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(95mg，66％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝609.3[M+1]+。
步骤G：N-[6-[4-(1-氨基-2,2,2-三氟-乙基)-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2,2-二甲基-6-[4-[2,2,2-三氟-1-[(4-甲氧基苯基)甲基氨基]乙基]-1-哌啶基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(90mg，0.15mmol)和2,2,2-三氟乙酸(1.5mL)的混合物在85℃搅拌1小时。将反应用在甲醇中的2N氨碱化至pH 8。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-[4-(1-氨基-2,2,2-三氟-乙基)-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(29.4mg，41％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.47(s,1H),9.35(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),9.13(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.67(s,1H),8.33(s,1H),7.30(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.69(s,1H),3.24-3.12(m,1H),3.03-2.90(m,4H),2.74-2.56(m,2H),2.10-1.87(m,3H),1.84-1.55(m,4H),1.408(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝489.3[M+1]+。
实施例25：N-(2-(甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(310.0mg，1.27mmol)和吗啉(10mL)的混合物在120℃搅拌18小时。将反应浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4至2:3)，得到(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(239mg，64％)，为橙色油状物。MS(ESI)：m/z＝295.1[M+1]+。
步骤B：4-(2-(甲氧基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在0℃，在(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(81.0mg，0.28mmol)在THF(3mL)的溶液中加入氢化钠(9.91mg，0.41mmol)。将混合物搅拌20分钟。加入碘甲烷(87.9mg，0.62mmol)并且将混合物温至室温，同时搅拌18小时。加入乙酸乙酯(10mL)和饱和的氯化铵。分离有机相并且经硫酸钠干燥，然后浓缩，得到4-[2-(甲氧基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(121mg)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝309.1[M+1]+。
步骤C：2-(甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(121.0mg，0.39mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌2小时。将反应过滤并且将滤液真空浓缩，得到[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(106mg)，为红色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝279.3[M+1]+。
步骤D：N-(2-(甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃、氮气气氛下，在2-(甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(106.0mg，0.38mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(218.4mg，0.42mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(50.76mg，0.42mmol)。然后加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(71.44mg，0.44mmol)并且除去冰浴，使反应在室温搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD，19*250mm，A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(34.9mg，22％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.47(s,1H),8.61(dd,J＝1.6,5.6Hz,1H),8.78(s,1H),8.75(dd,J＝1.6,3.6Hz,1H),8.42(s,1H),7.07(dd,J＝3.6,5.6Hz,1H),6.69(s,1H),3.98-3.90(m,4H),3.47(s,2H),3.43(s,3H),3.22(d,J＝12.8Hz,1H),2.95-2.88(m,5H),1.48(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.1[M+1]+。
实施例26：N-[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(104.0mg，0.43mmol)、4,4-二氟哌啶盐酸盐(670.0mg，4.25mmol)和碳酸铯(920.0mg，2.82mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在90℃搅拌16小时。将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(100mg，71％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝329.1[M+1]+。
步骤B：[5-氨基-6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在20℃、氢气气氛下，将[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(63.0mg，0.19mmol)和10％钯炭(28.0mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，得到[5-氨基-6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55mg)，为棕色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝299.1[M+1]+。
步骤C：N-[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(45.0mg，0.28mmol)和二异丙基乙基胺(0.09mL，0.56mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(141.0mg，0.37mmol)并且将混合物在20℃搅拌30分钟。在混合物中加入[5-氨基-6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55.0mg，0.18mmol)在DMF(2mL)中的溶液并且将混合物在20℃搅拌16小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈5-75％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-(4,4-二氟-1-哌啶基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，43％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.39(dd,J＝2.0,6.8Hz,1H),8.75(dd,J＝2.0,4.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.32(s,1H),7.37(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.73(s,1H),5.05(t,J＝6.0Hz,1H),3.49-3.37(m,2H),3.20(d,J＝16.0Hz,1H),2.98-2.90(m,4H),2.83(d,J＝16.0Hz,1H),2.34-2.14(m,4H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.1[M+1]+。
实施例27和28：(R)-N-(3-羟基-3-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(3-羟基-3-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-氯-4-((2-甲基烯丙基)氧基)-1-硝基苯
在3-氯-4-硝基苯酚(25.2g，145mmol)在乙腈(184mL)中的溶液中加入3-溴-2-甲基丙烯(16.1mL，159mmol)和碳酸钾(28.0g，203mmol)。将反应混合物在55℃搅拌18小时。将混合物用乙酸异丙酯稀释，过滤并且将沉淀用乙酸异丙酯和二氯甲烷洗涤。将合并的滤液减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的(3:1)乙酸异丙酯/MeOH(0-40％)作为洗脱溶剂洗脱，得到标题化合物，为淡黄色油状物(32.712g，99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝9.1Hz,1H),7.34(d,J＝2.7Hz,1H),7.14(dd,J＝9.2,2.7Hz,1H),5.13-5.03(m,1H),5.05-4.97(m,1H),4.66(s,2H),1.83-1.68(m,3H)。
步骤B：4-(5-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯基)吗啉
在密封管中，在2-氯-4-((2-甲基烯丙基)氧基)-1-硝基苯(3.01g，13.2mmol)和碳酸钾(6.03g，43.7mmol)在二甲亚砜(20.1mL，280mmol)中的混合物中加入吗啉(1.15g，13.2mmol)并且将混合物加热至100℃达1小时。将混合物冷却至室温并且用水和乙酸乙酯稀释。将有机相用饱和的碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将粗残留物通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的0-50％乙酸异丙酯作为洗脱溶剂，得到标题化合物，为亮黄色固体(3.22g，11.6mmol，88％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(d,J＝9.0Hz,1H),6.71(d,J＝2.6Hz,1H),6.68(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),5.08(d,J＝0.8Hz,1H),4.99(s,1H),4.59(s,2H),3.76-3.63(m,4H),3.06-2.95(m,4H),1.82-1.72(m,3H)。
步骤C：2-(2-甲基烯丙基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚
将4-(5-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯基)吗啉(5.0g，18mmol)溶于DMF(15mL，190mmol)并且在微波中在220℃加热60分钟，五次。将反应混合物合并，减压浓缩并且置于乙酸异丙酯中并且用水和盐水洗涤。将水层用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将粗残留物通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的0-50％乙酸异丙酯，得到标题化合物，为深橙色油状物(3.53g，12.7mmol，12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(s,1H),7.74(s,1H),6.59(s,1H),4.80-4.74(m,1H),4.67-4.60(m,1H),3.71(q,J＝4.0,3.6Hz,4H),3.20(s,2H),2.95-2.90(m,4H),1.66(s,3H).1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.82(s,1H),6.54(s,1H),6.02(s,1H),5.03-4.96(m,1H),4.94-4.92(m,1H),3.92-3.83(m,4H),3.36(s,2H),3.04(dd,J＝5.5,3.7Hz,4H),1.75(s,3H)。
步骤D：1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮
在2-(2-甲基烯丙基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚(3.77g，13.5mmol)在水(169mL，9.40mol)和二烷(521mL，6.1mol)中的溶液中首先加入在叔丁醇(700mg，0.677mml)中的四氧化锇(0.08mol/L，催化剂)，然后加入过碘酸钠(5.79g，27.1mmol)。将形成的混悬液在室温搅拌过夜并且倾倒在水上。用1M HCl将水层酸化至中性pH并且萃取至DCM。将有机相经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将粗残留物通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯，得到标题化合物(1.95g，6.94mmol，51％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.26(s,1H),7.78(s,1H),6.61(s,1H),3.89-3.79(m,4H),3.73(s,2H),3.08-2.99(m,4H),2.36(s,3H)。
步骤E：1-(2-甲氧基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮
将氢化钠(60％，在油中，319mg，7.98mmol)在无水四氢呋喃(19.8mL，243mmol)中的悬浮液加热至回流。缓慢加入二甲亚砜(19.8mL，280mmol)并且将反应在回流下继续15分钟。然后将混合物冷却至环境温度并且加入三甲基氧化锍碘化物(1.70g，243mmol)。在室温继续搅拌30分钟。加入溶于四氢呋喃(5.48mL)中的1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮(1.44g，5.15mmol)溶液并且将反应混合物在室温搅拌30分钟，然后在50℃加热18小时。然后加入水并且将混合物用DCM(6x)萃取。将合并的有机相用水(3x)洗涤，并且经硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将粗残留物通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯，得到粗产物，为黄色泡沫状/油状残留物。
步骤F：1-(5-氨基-2-甲氧基-4-吗啉代苯基)丙-2-酮
将1-(2-甲氧基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮(1.03g，3.51mmol)溶于乙醇(17.2mL，295mmol)并且用10％钯炭(373mg，0.3509mmol)处理并且将烧瓶置于氢气气氛中。4小时后，将反应混合物通过硅藻土过滤并且减压浓缩。应用粗材料而无需进一步纯化。
步骤G：(R)-N-(3-羟基-3-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(3-羟基-3-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在装有搅拌棒的100mL RBF中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(745mg，4.335mmol)并且用氮气吹扫。加入DMF(12.4mL，161mmol)并且将混合物冷却至0℃。然后加入(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(2.28g，4.146mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(0.55mL，4.146mmol)。然后加入粗1-(5-氨基-2-甲氧基-4-吗啉代苯基)丙-2-酮(1.000g，3.77mmol)并且将混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物通过二氧化硅垫过滤并且减压浓缩。将粗材料纯化并且通过手性SFC拆分，得到标题化合物，为黄色固体。基于峰洗脱任意标记立体化学。
实施例27，峰1(37mg，2.5％)：通过手性SFC纯化(Thar 350 SFC(Lux Cellulose-1，30x 250mm，5um)，40％MeOH等度(0.1％NH4OH)，在CO2中)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.16(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.83(s,1H),3.90-3.80(m,4H),3.76(s,2H),2.87-2.79(m,4H),2.76-2.60(m,2H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410.2[M+1]+。
实施例28，峰2(41mg，2.7％)：通过手性SFC纯化(Thar 350 SFC(ChiralTechnologies AD-H，50x 250mm，5um)，40％MeOH等度(0.1％NH4OH)，在CO2中)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.16(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.83(s,1H),3.88-3.79(m,4H),3.76(s,2H),2.89-2.76(m,4H),2.76-2.58(m,2H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410.2[M+1]+。
实施例29和30：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(58mg，0.33mmol)在DMF(1.0mL)中的溶液中用氮气吹扫并且冷却至0℃。然后加入(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(170mg，0.31mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(0.04mL，0.31mmol)。然后加入(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(75mg，0.28mmol)并且将反应温至环境温度并且搅拌18小时。将反应混合物通过二氧化硅垫过滤，用在DCM中的20％甲醇溶液洗涤。然后将滤液浓缩并且纯化并且通过手性SFC拆分(PIC 100 SFC(Lux Cellulose-3，21.1*150mm，5um)，25％MeOH等度(0.1％NH4OH)，在CO2中)，得到标题化合物，为固体。基于峰洗脱任意指定立体化学。
实施例29，峰1：(23mg，20％)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),9.23(dd,J＝2.0,1.1Hz,1H),8.86(d,J＝2.0Hz,1H),8.59(s,1H),8.29(s,1H),6.69(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.89-3.80(m,4H),3.42(q,J＝5.5Hz,2H),3.20(d,J＝16.5Hz,1H),2.88-2.77(m,5H),2.47-2.41(m,3H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例30，峰2：(23mg，20％)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),9.23(dd,J＝2.0,1.1Hz,1H),8.86(d,J＝2.0Hz,1H),8.59(s,1H),8.29(s,1H),6.69(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.89-3.80(m,4H),3.42(q,J＝5.5Hz,2H),3.20(d,J＝16.5Hz,1H),2.88-2.77(m,5H),2.47-2.41(m,3H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例31和32：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例6)通过手性SFC拆分(PIC 100 SFC(Lux Cellulose-3，21.1*150mm，5um)，25％MeOH等度(0.1％NH4OH)，在CO2中)，得到标题化合物，为固体。基于峰洗脱任意指定立体化学。
实施例31，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.29(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),5.10-4.98(m,1H),3.91-3.74(m,4H),3.43(t,J＝5.7Hz,2H),3.20(dd,J＝15.9,0.7Hz,1H),2.90-2.73(m,5H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410.2[M+1]+。
实施例32，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.29(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),5.10-4.98(m,1H),3.91-3.74(m,4H),3.43(t,J＝5.7Hz,2H),3.20(dd,J＝15.9,0.7Hz,1H),2.90-2.73(m,5H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410.2[M+1]+。
实施例33：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
将2-(2-甲基烯丙基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚(1.0g，3.6mmol)溶于MeOH(12mL)并且冷却至0℃。加入35％HCl水溶液(12mL)并且将反应混合物温至环境温度，然后在回流下加热60小时。将反应冷却至室温，用饱和的碳酸氢钠中和并且用乙酸异丙酯萃取。将有机相经硫酸钠干燥，过滤并且减压吸附在硅藻土上。将粗残留物通过硅胶色谱纯化，应用在庚烷中的(0-30％)乙酸异丙酯，得到标题化合物，为黄色泡沫状/油状残留物(520mg，1.87mmol，52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(t,J＝1.2Hz,1H),6.60(s,1H),3.76-3.61(m,4H),3.01(d,J＝1.1Hz,2H),2.98-2.90(m,4H),1.44(s,6H).1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.85(t,J＝1.2Hz,1H),6.44(s,1H),3.90-3.79(m,4H),3.05-3.01(m,4H),3.00(d,J＝1.1Hz,2H),1.51(s,6H)。
步骤B：2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)吗啉(60mg，0.22mmol)和10％钯炭(30mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。通过硅藻土垫过滤并且浓缩后，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(50mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝249.2[M+1]+。
步骤C：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(370mg，2.1mmol)在DMF(6.2mL)中的溶液用氮气吹扫并且冷却至0℃。然后加入(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(1.1g，2.1mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(0.27mL，2.1mmol)。然后加入2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(460mg，1.9mmol)并且将反应温至环境温度并且搅拌18小时。将反应混合物通过二氧化硅垫过滤，用在DCM中的20％甲醇洗涤，然后将滤液浓缩并且通过Prep-HPLC纯化((Gemini-NX 50*30mm c18，5um，110A)，乙腈20-60％(0.1％NH4OH)，在水中)，得到330mg标题化合物，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.41-9.32(m,1H),8.98-8.91(m,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.71(s,1H),3.89-3.77(m,4H),3.04-2.96(m,2H),2.86-2.78(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝394.2[M+1]+。
实施例34：N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-甲氧基-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
在密封管中，将碳酸铯(300.0mg，0.92mmol)、二乙酸钯(12.8mg，0.06mmol)、6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体1)(156.0mg，0.57mmol)和外消旋-2-(二叔丁基膦基)-1,1’-联萘(228.2mg，0.57mmol)在甲醇(0.50mL)和甲苯(5.0mL)中的混合物在80℃微波条件下加热3小时。将反应减压浓缩至干燥，然后通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)，得到6-甲氧基-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(155mg，97％)，为红色固体。MS(ESI)：m/z＝224.2[M+1]+。
步骤B：6-甲氧基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将10％钯炭(31.0mg)和6-甲氧基-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(155.0mg，0.69mmol)在甲醇(15mL)中的混合物搅拌2小时。经硅藻土垫过滤并且减压浓缩后，得到6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(111mg，62％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝194.2[M+1]+。
步骤C：N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(107.76mg，0.66mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(329.44mg，0.63mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(222.72mg，1.72mmol)和6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(111.0mg，0.57mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过制备HPLC反相色谱纯化(phenomenex，Gemini C18，21.2×100mm，5um，110A，A：乙腈25-45％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(110mg，57％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.04(s,1H),8.80(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.75(s,1H),8.71(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.02(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.43(s,2H),3.91(s,3H),3.02(s,2H),1.49(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝339.2[M+1]+。
实施例35：N-(8-吗啉代-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂-7-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-(4-氯-2-羟基苯基)苯甲酰胺
在2-氨基-5-氯苯酚(1.45g，10.1mmol)在乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)中的溶液中加入碳酸氢钠(1.27g，15.15mmol)和苯甲酰氯(1.42g，10.1mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物用石油醚洗涤，得到N-(4-氯-2-羟基-苯基)苯甲酰胺(2.34g，94％)，为棕色固体。MS(ESI)：m/z＝248.1[M+1]+。
步骤B：(8-氯-3,4-二氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂-5(2H)-基)(苯基)甲酮
在N-(4-氯-2-羟基-苯基)苯甲酰胺(2.08g，8.4mmol)在乙腈(16mL)和DCM(24mL)中的溶液中加入1,3-二溴丙烷(6781.83mg，33.59mmol)和等份336(三正辛基甲基氯化铵)(339.41mg，0.84mmol)。然后加入氢化钠(1343.67mg，33.59mmol，60％wt矿物油)。将混合物在60℃加热3小时。加入饱和的氯化铵溶液。将水相用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶柱纯化，用乙酸乙酯:石油醚(1:1)洗脱，得到(8-氯-3,4-二氢-2H-1,5-苯并氧杂氮杂-5-基)-苯基-甲酮(1.3g，54％)，为类白色固体。MS(ESI)：m/z＝288.1[M+1]+。
步骤C：8-氯-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂
将(8-氯-3,4-二氢-2H-1,5-苯并氧杂氮杂-5-基)-苯基-甲酮(1.0g，3.48mmol)溶于1,4-二烷(20mL)并且加入6m盐酸溶液(87.11mL，522.66mmol)。将混合物在回流下加热20小时。加入饱和的氯化铵溶液并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机萃取物用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。过滤并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到(8-氯-3,4-二氢-2H-1,5-苯并氧杂氮杂-5-基)-苯基-甲酮(808mg，100％)，为棕色固体。MS(ESI)：m/z＝184.1[M+1]+。
步骤D：8-氯-7-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂
在0℃，在8-氯-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂(183.0mg，1mmol)在浓硫酸(4mL)中的溶液中缓慢加入硝基胍(121.58mg，1mmol)。将反应搅拌30分钟。将混合物倾倒至冰水。通过饱和的碳酸钠水溶液将溶液调节至pH＝7.0。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相洗涤，减压浓缩，得到8-氯-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂(185mg)，为红色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝229.0[M+1]+。
步骤E：8-吗啉代-7-硝基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂
将8-氯-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂(185.0mg，0.81mmol)和吗啉(10mL)的混合物搅拌在120℃搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5至1:3)，得到8-吗啉代-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂(193mg，64.1％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝280.1[M+1]+。
步骤F：8-吗啉代-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂-7-胺
在25℃、氢气气氛下，将10％钯炭(40.0mg)和8-吗啉代-7-硝基-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂(193.0mg，0.69mmol)在甲醇(15mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且真空浓缩后，得到8-吗啉代-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂-7-胺(154mg，89％)，为红色油状物。MS(ESI)：m/z＝20.1[M+1]+。
步骤G：N-(8-吗啉代-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧杂氮杂-7-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将8-吗啉代-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂-7-胺(193.0mg，0.77mmol)和三乙胺(235.0mg，2.32mmol)在DCM(10mL)中的混合物在0℃搅拌。在该混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(210.85mg，1.16mmol)，然后将反应在25℃搅拌1小时。减压浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Phenomenex，Gemini C18，21.2×100mm，5um，110A，A：乙腈25-45％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到N-(8-吗啉代-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧杂氮杂-7-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，12％)，为深黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ10.60(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.79-8.76(m,1H),8.20(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.88(s,1H),4.07(t,J＝5.6Hz,2H),3.98-3.93(m,4H),3.22(t,J＝5.6Hz,2H),2.92-2.85(m,4H),2.04-1.96(m,2H)。m/z＝395.1[M+1]+。
实施例36和37：(R)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在密封管中，将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(130mg，0.53mmol)在2,2-二甲基吗啉(0.5mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(95mg，55％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝323.3[M+1]+。
步骤B：(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(95mg，0.29mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。然后将反应经硅藻土垫过滤并且将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(55mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝293.1[M+1]+。
步骤C：(R)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(31mg，0.19mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(98mg，0.19mmol)和可力丁(68mg，0.57mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入(5-氨基-6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(55mg，0.19mmol)。将产生的混合物在室温搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD，19*250mm，10um；A：乙腈45-75％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体(50mg，0.11mmol，61％)。然后将对映异构体通过手性SFC拆分，得到(R)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例36，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.84(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.19(d,J＝0.9Hz,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.60(s,1H),5.07-4.99(m,1H),3.79(d,J＝4.6Hz,2H),3.43(t,J＝5.8Hz,2H),3.23-3.16(m,1H),2.82(dd,J＝15.6,1.1Hz,1H),2.71(s,2H),2.65(s,2H),1.38-1.32(m,9H)。MS(ESI)：m/z＝438.2[M+1]+。
实施例37，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.84(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.19(d,J＝0.9Hz,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.60(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.79(d,J＝5.8Hz,2H),3.48-3.38(m,2H),3.20(ddt,J＝15.6,0.9,0.5Hz,1H),2.86-2.77(m,1H),2.71(s,2H),2.65(d,J＝5.3Hz,2H),1.35(d,J＝4.4Hz,9H)。MS(ESI)：m/z＝438.2[M+1]+。
实施例38：2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
步骤A：6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(中间体2，步骤C)(1.60g，6.21mol)、碘甲烷(1.76g，12.42mmol)和碳酸钾(1.72g，12.42mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌。原料消耗后，加入水和乙酸乙酯(50mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:6至1:4)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(550mg，33％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝272.1[M+1]+。
步骤B：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
在密封管中，将6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(550mg，2.02mmol)在吗啉(3mL)中的混合物在110℃搅拌18小时。将混合物减压浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(260mg)，为黄色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝309.1[M+1]+。
步骤C：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(260mg，0.84mol)、碘甲烷(239mg，1.69mmol)和碳酸钾(233mg，1.69mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌。原料消耗后，加入水和乙酸乙酯(50mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:4至1:2)作为洗脱溶剂，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(200mg，74％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝323.2[M+1]+。
步骤D：5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
在室温、氢气气氛下，将2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(200mg，0.62mmol)和10％钯炭(20mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。然后将反应经硅藻土垫过滤并且将滤液减压浓缩，得到5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯，为白色固体(150mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝292.3[M+1]+。
步骤E：2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(150mg，0.51mmol)和三乙胺(103mg，1.02mmol)在DCM(10mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(93mg，0.51mmol)在DCM(10mL)中的溶液，然后将反应在25℃搅拌1小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:1至10:1)作为洗脱溶剂，得到2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯，为白色固体(160mg，71％)。MS(ESI)：m/z＝438.1[M+1]+。
步骤F：2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
将2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(70mg，0.16mmol)和氢氧化钠(13mg，0.32mmol)在THF(5mL)和水(1mL)中的混合物在25℃搅拌1小时。然后将反应通过制备HPLC纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD，19*250mm，10um；A：乙腈35-65％和0.01％NH3；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(10mg，15％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.45(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.80(s,1H),3.89-3.78(m,4H),3.54-3.48(m,1H),3.13-3.07(m,1H),2.88-2.75(m,4H),1.57(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例39：N-(6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,4-二氟苄基)四氢-2H-吡喃-4-醇
在40℃，在镁(1.20g，45.59mmol)和碘(90.0mg，0.35mmol)在乙醚(20mL)中的溶液中缓慢加入1-(溴甲基)-2,4-二氟苯(4.10g，19.8mmol)。然后将溶液冷却至室温并且在-78℃加入至在乙醚(50mL)中的二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(3.00g，29.96mmol)并且将反应在室温搅拌18小时。用饱和的氯化铵溶液猝灭后，加入乙酸乙酯(100mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到4-(2,4-二氟苄基)四氢-2H-吡喃-4-醇(1.80g，40％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝229.1[M+1]+。
步骤B：6-氟-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]
将甲基4-(2,4-二氟苄基)四氢-2H-吡喃-4-醇(1.81g，7.93mmol)和叔丁醇钾(2.67g，23.79mmol)在THF(50mL)中的混合物在60℃搅拌18小时。冷却至室温后，加入1N盐酸溶液达到pH＝3.0。加入乙酸乙酯(100mL)并且分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:3至1:2)作为洗脱溶剂，得到6-氟-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃](1.53g，93％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝209.1[M+1]+。
步骤C：6-氟-5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]
在25℃，在6-氟-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃](1.53g，7.35mmol)在DCM(50mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(2mL)并且将反应搅拌15分钟。加入水和乙酸乙酯(100mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:6至1:4)作为洗脱溶剂，得到6-氟-5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃](1.29g，69％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝254.3[M+1]+。
步骤D：4-(5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-6-基)吗啉
将6-氟-5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃](150mg，0.59mmol)、吗啉(103mg，1.18mmol)和碳酸铯(579mg，1.78mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。原料消耗后，将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并并且用水和盐水洗涤。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到(4-(5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-6-基)吗啉(180mg，95％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝321.1[M+1]+。
步骤E：6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-胺
在室温、氢气气氛下，将4-(5-硝基-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-6-基)吗啉(180mg，0.56mmol)和10％钯炭(18mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。通过硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-胺，为白色固体(150mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝291.1[M+1]+。
步骤F：N-(6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-胺(150mg，0.52mmol)和三乙胺(157mg，1.55mmol)在DCM(5mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(113mg，0.62mmol)在DCM(5mL)中的溶液并且将反应在25℃搅拌1小时。过滤后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mmc18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg，27％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.45(s,1H),9.37(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),8.94(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),),8.33(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.79(s,1H),3.83-3.85(m,4H),3.74-3.80(m,2H),3.61-3.66(m,2H),3.06(s,2H),2.81-2.82(m,4H),1.79-1.81(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝436.2[M+1]+。
实施例40：N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸盐
将4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.29mmol)在三氟乙酸(1mL)和DCM(2mL)中的混合物在20℃搅拌1小时。将混合物减压浓缩，得到(4-氟哌啶-4-基)甲醇三氟乙酸盐(300mg)，为无色油状物，将其直接应用而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝134.1[M+1]+。
步骤B：(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇
在密封管中，将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(中间体2)(107mg，0.47mmol)、(4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸盐(232mg，0.94mmol)和碳酸铯(459mg，1.41mmol)在乙腈(1mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并，用水和盐水洗涤，减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(95mg，62％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝325.3[M+1]+。
步骤C：(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(95mg，0.29mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(60mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝295.1[M+1]+。
步骤D：N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(60mg，0.20mmol)和三乙胺(61mg，0.60mmol)在DCM(10mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(54mg，0.30mmol)在DCM(10mL)中的溶液并且将反应在25℃搅拌1小时。将粗反应物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mmc18，10um；A：乙腈35-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(55mg，65％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.43(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.89(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),),8.34(s,1H),7.53(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.71(s,1H),5.18(br,1H),3.53(d,J＝17.6Hz,2H),3.37(s,2H),2.81-2.91(m,4H),1.98-2.10(m,2H).1.83-1.88(m,2H)。1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝440.2[M+1]+。
实施例41：N-[6-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(中间体1)(100mg，0.44mmol)、硫代吗啉-1,1-二酮(119mg，0.88mmol)和碳酸铯(429mg，1.32mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。原料消耗后，将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机相合并并且用水和盐水洗涤。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮(70mg，49％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝327.1[M+1]+。
步骤B：4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮
在室温、氢气气氛下，将4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮(70mg，0.21mmol)和15％钯炭(10mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮(50mg，81％)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝297.1[M+1]+。
步骤C：N-[6-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(28mg，0.17mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(88mg，0.17mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(65mg，0.51mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-6-基)-硫代吗啉-1,1-二酮(50mg，0.17mmol)并且将产生的混合物在室温搅拌18小时。将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-(1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体(25mg，34％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.43(s,1H),9.39(dd,J＝1.2,6.8Hz,1H),8.84(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.69(s,1H),),8.36(s,1H),7.42(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.83(s,1H),3.46-3.47(m,4H),3.34-3.35(m,4H),3.01(s,2H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝442.2[M+1]+。
实施例42和43：N-((R)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((S)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在密封管中，将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(85mg，0.35mmol)、(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷盐酸盐(95mg，0.70mmol)和碳酸铯(455mg，1.40mmol)在乙腈(1mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到(6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(60mg，56％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝307.3[M+1]+。
步骤B：(5-氨基-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下将(6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(60mg，0.20mmol)和10％钯炭(12mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(50mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝277.1[M+1]+。
步骤C：N-((R)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((S)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(5-氨基-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(50mg，0.18mmol)和三乙胺(55mg，0.54mmol)在DCM(5mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(49mg，0.27mmol)在DCM(5mL)中的溶液，然后将反应在25℃搅拌1小时。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(15:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物，然后将其通过制备HPLC分离(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B:在水中的10mM碳酸氢铵)，得到
N-((R)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((S)-6-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自10mg，各自12％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例42，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.10(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.77(s,1H),8.71(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.04(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.57(s,1H),4.57(s,1H),4.13(d,J＝7.2Hz,1H),4.04(s,1H),3.78(dd,J＝1.6 7.2Hz,1H),3.67(d,J＝4.0Hz,2H),3.60(d,J＝9.6Hz,1H),3.22(d,J＝15.2Hz,1H),3.08(dd,J＝1.6,9.6Hz,1H),2.93(d,J＝15.6Hz,1H),2.10(dd,J＝1.6,9.6Hz,1H),1.96-1.89(m,2H),1.47(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
实施例43，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.09(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.77(s,1H),8.72(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.04(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.57(s,1H),4.57(s,1H),4.13(d,J＝7.6Hz,1H),4.05(s,1H),3.78(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),3.67(d,J＝5.6Hz,2H),3.59(d,J＝9.6Hz,1H),3.22(d,J＝16.0Hz,1H),3.10(dd,J＝1.6,9.6Hz,1H),2.92(d,J＝16.0Hz,1H),2.10(dd,J＝1.6,9.6Hz,1H),1.96-1.89(m,2H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.1[M+1]+。
实施例44和45：(R)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸盐
将4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.29mmol)在三氟乙酸(1mL)和DCM(2mL)中的混合物在20℃搅拌1小时。原料消耗后，将混合物减压浓缩，得到(4-氟哌啶-4-基)甲醇三氟乙酸盐(300mg)，为无色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝134.1[M+1]+。
步骤B：(4-氟-1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇
在密封管中，将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(80mg，0.33mmol)、(4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸酯(162mg，0.66mmol)和碳酸铯(428mg，1.32mmol)在乙腈(1mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到(4-氟-1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(100mg，90％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝341.1[M+1]+。
步骤C：(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(4-氟-1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)甲醇(100mg，0.29mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(90mg)，为黄色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝311.1[M+1]+。
步骤D：(R)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇(90mg，0.29mmol)和三乙胺(88mg，0.87mmol)在DCM(5mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(105mg，0.58mmol)在DCM(5mL)中的溶液并且将反应在25℃搅拌1小时。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(15:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物，然后将其通过手性HPLC分离(OJ 20*250mm,5u，CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝80/20，80g/分钟，100bar，35℃)，得到
(R)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(15mg，11％)(10mg，8％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例44，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.42(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.89(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),),8.32(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.69(s,1H),5.16(t,J＝6.0Hz,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.57-3.49(m,2H),3.43(t,J＝6.0Hz,2H),3.23-3.16(m,1H),2.93-2.77(m,5H),2.15-1.95(m,2H),1.90-1.79(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝456.2[M+1]+。
实施例45，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.43(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.89(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),),8.32(s,1H),7.32(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.69(s,1H),5.16(t,J＝6.0Hz,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.57-3.49(m,2H),3.43(t,J＝6.0Hz,2H),3.23-3.16(m,1H),2.93-2.77(m,5H),2.15-1.94(m,2H),1.91-1.79(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝456.2[M+1]+。
实施例46和47：N-((S)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在密封管中，将(6-氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(126mg，0.52mmol)、(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷盐酸盐(140mg，1.03mmol)和碳酸铯(674mg，2.07mmol)在乙腈(2mL)中的混合物在100℃搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到(6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(120mg，76％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝307.3[M+1]+。
步骤B：(5-氨基-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(120mg，0.39mmol)和10％钯炭(12mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(100mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝277.1[M+1]+。
步骤C：N-((S)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(5-氨基-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(100mg，0.36mmol)和三乙胺(109mg，1.08mmol)在DCM(5mL)中的混合物在0℃搅拌。在混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(98mg，0.54mmol)在DCM(5mL)中的溶液并且将反应在25℃搅拌1小时。过滤后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，乙腈25-55％(10mM碳酸氢铵)，在水中)，得到N-(6-吗啉代-2’,3’,5’,6’-四氢-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-吡喃]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，0.24mmol，79％)，为黄色固体并且将其通过手性pre-SFC分离(柱：AD 20*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝60/40)，得到N-((S)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-6-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(42mg，28％)(45mg，31％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例46，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.89(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.67(s,1H),),7.88(s,1H),7.32(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.52(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),4.49(s,1H),4.10(s,1H),3.90(d,J＝7.6Hz,1H),3.66(d,J＝6.0Hz,1H),3.48-3.38(m,2H),3.30(d,J＝8.8Hz,1H),3.20-3.07(m,2H),2.79(d,J＝15.6Hz,1H),2.00(d,J＝9.6Hz,1H),1.80(d,J＝8.8Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.1[M+1]+。
实施例47，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.87(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.67(s,1H),),7.86(s,1H),7.32(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.51(s,1H),5.05(t,J＝6.0Hz,1H),4.49(s,1H),4.10(s,1H),3.93(d,J＝7.6Hz,1H),3.67(d,J＝7.2Hz,1H),3.48-3.38(m,2H),3.25(d,J＝9.2Hz,1H),3.20-3.10(m,2H),2.79(d,J＝16.0Hz,1H),2.00(d,J＝8.0Hz,1H),1.80(d,J＝9.2Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.1[M+1]+。
实施例48和49：(S)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺
将2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(100mg，0.32mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(338mg，0.65mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(168mg，1.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。然后加入甲基胺盐酸盐(44mg，0.65mmol)。将产生的混合物在室温搅拌18小时。加入水和乙酸乙酯(50mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:3至1:1)作为洗脱溶剂，得到N,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺(80mg，77％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝322.1[M+1]+。
步骤B：5-氨基-N,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺
在室温、氢气气氛下，将N,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺(80mg，0.25mmol)和10％钯炭(8mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到5-氨基-N,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺，为白色固体(60mg)，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝292.1[M+1]+。
步骤C：(S)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(34mg，0.21mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(107mg，0.21mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(53mg，0.42mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。然后加入5-氨基-N,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酰胺(任意指定绝对立体化学)(60mg，0.21mmol)并且将产生的混合物在室温搅拌18小时。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(15:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物，通过手性SFC分离(AS 20*250mm，5um(Dacel)，CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝70/30)，得到(S)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-甲基-2-(甲基氨基甲酰基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(12mg，13％)(10mg，11％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学.
实施例48，峰1：1H NMR(400MHz,MeOD-d4):δ9.14(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.94(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.67(s,1H),),8.27(s,1H),7.30(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.90(s,1H),3.95-3.97(m,4H),3.55(d,J＝16.0Hz,1H),3.19(d,J＝16.0Hz,1H),2.92-2.94(m,4H),2.78(s,3H),1.65(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝437.2[M+1]+。
实施例49，峰2：1H NMR(400MHz,MeOD-d4):δ9.03(dd,J＝1.5,7.2Hz,1H),8.81(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.56(s,1H),),8.15(s,1H),7.18(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.78(s,1H),3.83-3.86(m,4H),3.43(d,J＝16.4Hz,1H),3.06(d,J＝16.4Hz,1H),2.80-2.82(m,4H),2.62(s,3H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝437.1[M+1]+。
实施例50和51：(R)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将吗啉(270mg，3.1mmol)、6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(中间体3，步骤D)(500mg，1.55mmol)和碳酸钾(427mg，3.1mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。加入水。将水相用乙酸乙酯萃取(50mL)。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(382mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。
MS(ESI)：m/z＝323.1[M+1]+。
步骤B：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲醛
在-78℃，历经5分钟在2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(382mg，1.08mmol)在DCM(10mL)中的混合物中滴加入二异丁基氢化铝(1.62mL，1m，在己烷中，1.62mmol)并且将反应在-78℃搅拌下维持2小时。将混合物用十水合硫酸钠猝灭并且过滤。将滤液减压浓缩，并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂洗脱，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲醛(230mg，73％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝325.1[M+甲醇]+。
步骤C：4-(2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在-78℃，在2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲醛(180mg，0.62mmol)在DCM(30mL)中的混合物中滴加入二乙基氨基三氟化硫(620mg，80％，3.08mmol)。将混合物在25℃搅拌18小时。将混合物浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:3至2:3)作为洗脱溶剂，得到4-[2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(110mg，53％产率)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝323.1[M+1]+。
步骤D：2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将4-[2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(110mg，0.35mmol)和10％钯炭(40mg)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌1小时。经硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(140mg)，为淡绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝285.1[M+1]+。
步骤E：N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(90mg，0.32mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(62mg，0.38mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(247mg，0.47mmol)和二异丙基乙基胺(115mg，0.95mmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。加入水。将水性物用乙酸乙酯(70mL)洗脱。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)作为洗脱溶剂，得到N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，73％)，为黄色固体。
MS(ESI)：m/z＝430.1[M+1]+。
步骤F：(R)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.23mmol)通过手性分离纯化(OJ 20*250mm，5u，CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝80/20，80g/分钟，100bar，35℃)，得到(R)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg，30％)(40mg，40％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例50，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.47(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.78(s,1H),8.77(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.46(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),5.75(t,J＝56.0Hz,1H),3.94-3.96(m,4H),3.43(d,J＝16.0Hz,1H),3.03(d,J＝16.0Hz,1H),2.90-2.93(m,4H),1.54(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝430.1[M+1]+。
实施例51，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.48(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.78(s,1H),8.77(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.46(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),5.75(t,J＝56.0Hz,1H),3.94-3.96(m,4H),3.43(d,J＝16.0Hz,1H),3.03(d,J＝16.0Hz,1H),2.90-2.93(m,4H),1.54(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝430.1[M+1]+。
实施例52和53：(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(2-(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)丙-2-醇
将2-(4-哌啶基)-2-丙醇(76mg，0.53mmol)(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(100mg，0.44mmol)和钾(91mg，0.66mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-[1-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]丙-2-醇(150mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝351.1[M+1]+。
步骤B：2-(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)丙-2-醇
在25℃、氢气气氛下，将2-[1-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]丙-2-醇(150mg，0.43mmol)和10％钯炭(40mg，0.43mmol)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌1小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-[1-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]丙-2-醇(160mg，82％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝321.1[M+1]+。
步骤C：N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-[1-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]丙-2-醇(160mg，0.50mmol)、6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(106mg，0.60mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(390mg，0.75mmol)和二异丙基乙基胺(181mg，1.50mmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(70mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)作为洗脱溶剂，得到N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，42％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝480.1[M+1]+。
步骤D：(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺通过手性分离纯化(OJ20*250mm，5u，CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝80/20，80g/分钟，100bar，35℃)，得到(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(40mg，40％)(50mg，50％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例52，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.42(s,1H),8.69(d,J＝2.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.57-8.58(m,1H),8.39(s,1H),6.64(s,1H),3.65-3.67(m,2H),3.23(d,J＝16.0Hz,1H),3.12-3.15(m,2H),2.94(d,J＝16.0Hz,1H),2.58-2.64(m,2H),2.42(s,3H),2.02-2.06(m,2H),1.71-1.84(m,4H),1.46(s,3H),1.25(s,6H)。
MS(ESI)：m/z＝480.2[M+1]+。
实施例53，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.43(s,1H),8.69(d,J＝2.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.57-8.58(m,1H),8.39(s,1H),6.64(s,1H),3.65-3.67(m,2H),3.23(d,J＝16.0Hz,1H),3.12-3.15(m,2H),2.94(d,J＝16.0Hz,1H),2.58-2.64(m,2H),2.42(s,3H),2.02-2.06(m,2H),1.71-1.84(m,4H),1.46(s,3H),1.25(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝480.2[M+1]+。
实施例54和55：(R)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(Z)-4-甲基苯磺酸2,3,3-三氟丙-1-烯酯
将4-甲基苯磺酸2,2,3,3-四氟丙酯(3.0g，10.49mmol)在THF(30mL)中的混合物冷却至-78℃。滴加正丁基锂(9.23mL，23.08mmol，2.5M，在己烷中)并且将反应在-78℃搅拌10分钟。将反应用水猝灭并且温至室温。水相用DCM(2×50mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到(Z)-2,3,3-三氟丙-1-烯基4-甲基苯磺酸酯(1.96g，70％)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝267.0[M+1]+
步骤B：(Z)-3-(二乙基氨基)-2-氟丙烯基醛
在0℃，在二乙胺(362mg，1.96mmol)、三乙胺(456mg，4.51mmol)和催化量的四丁基氟化铵(0.45mmol，0.45mL，1m，在THF中)在乙腈(3mL)中的溶液中加入(Z)-2,3,3-三氟丙-1-烯基4-甲基苯磺酸酯(1200mg，4.51mmol)在乙腈(6mL)中的溶液。将混合物在室温搅拌3小时并且用盐水猝灭。水相用DCM(2×30mL)萃取，经硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4至1:1)作为洗脱溶剂，得到(Z)-3-(二乙基氨基)-2-氟丙烯基醛(558mg，85％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝146.1[M+1]+
步骤C：6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
将(Z)-3-(二乙基氨基)-2-氟丙烯基醛(400mg，2.76mmol)和5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(428mg，2.76mmol)在乙酸(5mL)中的混合物在80℃搅拌1小时。真空浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(180mg，26％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝210.1[M+1]+。
步骤D：6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(70mg，0.33mmol)和羟基氢化锂(13mg，0.33mmol)在甲醇(1mL)、THF(1mL)和水(1mL)中的混合物在100℃微波下搅拌10分钟。真空浓缩后，得到6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(47mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝204.0[M+1]+。
步骤E：(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在20℃、氢气气氛下，将(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(实施例6，步骤B)(128mg，0.44mmol)和10％钯炭(30mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌2小时。通过硅藻土垫过滤后，将滤液减压浓缩，得到(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(102mg，89％)，为棕色固体。MS(ESI)：m/z＝265.1[M+1]+。
步骤F：6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(47mg，0.26mmol)、(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(82mg，0.31mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(148mg，0.39mmol)和二异丙基乙基胺(101mg，0.78mmol)在DMF(5mL)中的混合物在20℃搅拌2小时。将粗反应通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mmc18，10um，A：乙腈15-40％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(46mg，42％)，为黄色固体。
步骤G：(R)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(46mg，0.11mmol)通过手性分离进行分离(SFC-80(Thar,Waters)，OJ 20*250mm,5um(Dacel)，C流动性：CO2/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝70/30)，得到(R)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-氟-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自8.4mg，各自37％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例54，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.28(s,1H),9.82(dd,J＝2.4,4.4Hz,1H),9.20(d,J＝2.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.26(s,1H),6.70(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.83-3.81(m,4H),3.47-3.38(m,2H),3.22-3.18(m,1H),2.84-2.79(m,5H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝428.2[M+1]+。
实施例55，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.28(s,1H),9.82(dd,J＝2.4,4.4Hz,1H),9.20(d,J＝2.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.26(s,1H),6.70(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.83-3.81(m,4H),3.47-3.38(m,2H),3.22-3.18(m,1H),2.84-2.79(m,5H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝428.2[M+1]+。
实施例56和57：N-[(2S)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(150mg，0.62mmol)、(S)-3-氟吡咯烷盐酸盐(110mg，1.23mmol)和碳酸铯(600mg，1.84mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在90℃搅拌3小时。然后将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将有机相合并并且用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到[6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(102mg，55％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝297.1[M+1]。
步骤B：[5-氨基-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在室温、氢气气氛下，将[6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(102mg，0.34mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将反应通过硅藻土垫过滤并且将滤液减压浓缩，得到[5-氨基-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(96mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝297.1[M+1]。
步骤C：N-[(2S)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(118mg，0.72mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(340mg，0.89mmol)和二异丙基乙基胺(0.24mL，1.45mmol)的溶液在室温在DMF(3mL)中搅拌10分钟。在该混合物中加入在DMF(2mL)中的[5-氨基-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(96mg，0.36mmol)并且搅拌16小时。将终产物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈25-70％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，然后将产物通过手性分离拆分(SFC(AD-H 20*250mm，5um，CO2/甲醇(0.5％氨(7m甲醇))＝50/50，35℃)，得到N-[(2S)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-[(3S)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(16mg，11％)(19mg，13％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例56，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.25(s,1H),8.81(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.77(s,1H),8.69(dd,J＝2.0,4.0,Hz,1H),8.26(s,1H),7.02(dd,J＝4.4,7.2,Hz,1H),6.59(s,1H),5.42-5.25(m,1H),3.67(s,2H),355-3.44(m,1H),3.43-3.40(m,1H),3.36-3.32(m,1H),3.24(d,J＝15.5Hz,1H),2.95-2.86(m,2H),2.34-2.21(m,2H),2.08-1.89(m,1H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝412.1[M+1]
实施例57，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.24(s,1H),8.81(dd,J＝2.0,7.2Hz,1H),8.76(s,1H),8.67(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.02(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.59(s,1H),5.46-5.23(m,1H),3.67(s,2H),3.54-3.46(m,1H),3.44-3.39(m,1H),3.36-3.32(m,1H),3.23(d,J＝16.0Hz,1H),2.94(d,J＝16.0Hz,1H),2.93-2.85(m,1H),2.40-2.13(m,2H),2.08-1.85(m,1H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝412.2[M+1]
实施例58和59：N-[(2R)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体1)(150mg，0.62mmol)、(3R)-3-氟吡咯烷盐酸盐(440mg，3.5mmol)和碳酸铯(780mg，2.4mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在90℃搅拌7小时。将混合物倾倒至水中并且用乙酸乙酯(100mL)萃取并且将有机物用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。然后将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到[6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(135mg，74％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝297.1[M+1]+。
步骤B：[5-氨基-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(135mg，0.46mmol)和10％钯炭(50mg)在甲醇(12mL)中的混合物搅拌1小时。通过硅藻土垫过滤并且浓缩后，得到[5-氨基-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(110mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝267.1[M+1]+。
步骤C：N-[(2R)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在二异丙基乙基胺(0.2mL，1.24mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(102mg，0.63mmol)的溶液中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(314mg，0.83mmol)，然后在25℃搅拌20分钟。在混合物中加入[5-氨基-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(110mg，0.41mmol)在DMF(3mL)中的溶液并且将混合物在25℃搅拌16小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)并且通过手性分离拆分(SFC-80(Thar,Waters)，AD 20*250mm，5um(Dacel)，CO2/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝50/50)，得到N-[(2R)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(24mg，14％)(29mg，17％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例58，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.81(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.05(s,1H),7.31(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.59(s,1H),5.39(td,J＝4.4,55.2Hz,1H),5.04(t,J＝5.6Hz,1H),3.56-3.34(m,4H),3.22-3.07(m,2H),2.93-2.85(m,1H),2.81(d,J＝16.0Hz,1H),2.36-2.05(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝412.1[M+1]+。
实施例59，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.81(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.05(s,1H),7.31(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.60(s,1H),5.39(td,J＝4.4,54.4Hz,1H),5.04(t,J＝5.6Hz,1H),3.56-3.34(m,4H),3.22-3.07(m,2H),2.93-2.85(m,1H),2.81(d,J＝16.0Hz,1H),2.36-2.07(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝412.2[M+1]+。
实施例60：N-[6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体1)(100mg，0.44mmol)和1-哌嗪乙醇(572mg，4.39mmol)在DMSO(1mL)中的混合物在110℃搅拌16小时。将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过制备TLC纯化，应用甲醇:DCM＝1:20作为洗脱溶剂，得到2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇(110mg，78％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝322.1[M+1]+。
步骤B：2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇
在20℃、氢气气氛下，将2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇(59mg，0.18mmol)和10％钯炭(29mg)在甲醇(8mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且浓缩后，得到2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇(50mg)，为棕色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝392.2[M+1]+。
步骤C：N-[6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(42mg，0.26mmol)和二异丙基乙基胺(0.09mL，0.52mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(131mg，0.34mmol)，然后将混合物在25℃搅拌15分钟。在混合物中加入2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙醇(50mg，0.17mmol)在DMF(2mL)中的溶液并且将产生的混合物在25℃搅拌16小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈10-70％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，60％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.92(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.36(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.69(s,1H),4.45(t,J＝5.2Hz,1H),3.54(q,J＝5.6Hz,2H),3.00(s,2H),2.84-2.78(m,4H),2.74-2.61(m,4H),2.50(t,J＝5.6Hz,2H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝437.3[M+1]+。
实施例61：6-环丙基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在3-氨基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(3.0g，19.34mmol)和2-溴丙二醛(3.21g，21.26mmol)在乙醇(10mL)中的混合物中加入乙酸(30mL)。将混合物在70℃搅拌2小时。将反应浓缩至干燥。将残留物溶于乙酸乙酯并且加入饱和的碳酸氢钠溶液。萃取有机相并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。然后将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(3.3g，63％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝270.0[M+1]+。
步骤B：6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在密封管中，在120℃、N2气氛下，将6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(400mg，1.48mmol)、环丙基硼酸(200mg，2.33mmol)、二乙酸钯(56mg，0.25mmol)、三苯膦(168mg，0.60mmol)和磷酸钾(1260mg，5.94mmol)在甲苯(6mL)和水(1mL)中的混合物搅拌2小时。将混合物倾倒至水(30mL)上并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)，得到6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(205mg，60％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝232.1[M+1]+。
步骤C：6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(60mg，0.26mmol)和氢氧化锂(12mg，0.29mmol)在THF(3mL)、甲醇(3mL)和水(3mL)中的混合物在100℃搅拌10分钟。将混合物用1N盐酸溶液中和。将水相用EtOAc(20mL)萃取。将有机相分离，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(52mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝204.1[M+1]+。
步骤E：6-环丙基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-环丙基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(61mg，0.30mmol)和二异丙基乙基胺(0.11mL，0.66mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(154mg，0.41mmol)并且将混合物在25℃搅拌20分钟。在混合物中加入2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(50mg，0.20mmol)在DMF(2mL)中的溶液并且将混合物在25℃搅拌16小时。冲洗产物。过滤后，收集固体并且用洗涤甲醇，得到6-环丙基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(61mg，70％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.41(s,1H),8.70(s,1H),8.65(d,J＝2.0Hz,1H),8.50(dd,J＝0.8Hz,2.0Hz,1H),8.43(s,1H),6.65(s,1H),3.97(t,J＝4.4Hz,4H),3.04(s,2H),2.92(t,J＝4.4Hz,4H),2.09-2.00(m,1H),1.49(s,6H),1.20-1.13(m,2H),0.86-0.79(m,2H)。MS(ESI)：m/z＝434.1[M+1]+。
实施例62：N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在密封管中，将N-Boc-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(1350mg，4.37mmol)、6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体1)(345mg，1.52mmol)、[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(99mg，0.14mmol)和碳酸铯(1120mg，3.44mmol)在1,4-二烷(10mL)和水(1mL)中的混合物在90℃微波条件下搅拌2小时。将混合物倾倒至水(30mL)中并且用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机相用洗涤水和盐水并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。然后将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(550mg，87％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝397.2[M+Na]+。
步骤B：4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在20℃、氢气气氛下，将4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.27mmol)和10％钯炭(50mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌2小时。通过硅藻土垫过滤并且减压浓缩后，得到4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(85mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝291.1[M-tBu]+。
步骤C：4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(60mg，0.37mmol)和二异丙基乙基胺(0.12mL，0.74mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐并且在25℃搅拌20分钟。在混合物中加入4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(85mg，0.25mmol)在DMF(2mL)中的溶液并且在25℃搅拌16小时。将混合物倾倒至水和将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(3:2)作为洗脱溶剂，得到4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(63mg，52％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝492.2[M+1]+。
步骤D：N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(63mg，0.13mmol)在DCM(4mL)中的溶液中加入三氟乙酸(0.29mL，3.95mmol)并且将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物用三乙胺中和。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(33mg，66％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.40(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.87(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.69(s,1H),7.74(s,1H),7.34(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.63(s,1H),3.02(t,J＝12.0Hz,2H),3.00(s,2H),2.97-2.87(m,1H),2.59(t,J＝12.0Hz,2H),1.69(d,J＝11.2Hz,2H),1.59-1.45(m,2H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝392.2[M+1]+。
实施例63：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基-4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基-4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例62)(39mg，0.10mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中加入甲醛(200mg，2.46mmol，30wt％)并且将混合物在25℃搅拌30分钟。在混合物中加入氰基硼氢化钠(30mg，0.5mmol)，将反应在25℃搅拌1小时。加入水并且将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mmc18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基-4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(23mg，57％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),9.40(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.87(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.69(s,1H),7.73(s,1H),7.35(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.65(s,1H),3.00(s,2H),2.88(d,J＝11.6Hz,2H),2.83-2.73(m,1H),2.18(s,3H),1.96(t,J＝9.6Hz,2H),1.77-1.59(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝406.2[M+1]+。
实施例64和65：顺式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和反式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：叔丁基-[4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己氧基]-二苯基-硅烷
在4-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧基环己醇(255mg，0.72mmol)、叔丁醇钾(130mg，1.16mmol)和6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(实施例3，步骤F)(265mg，1.25mmol)在1,4-二烷(7mL)中的混合物在40℃搅拌36小时。将混合物通过反相色谱纯化(C18，80g，40-60um，10um；A：乙腈0.1％至100％；10mM，在水中)，得到叔丁基-[4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己氧基]-二苯基-硅烷(110mg，28％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝568.2[M+Na]+。
步骤B：4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇
将叔丁基-[4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己氧基]-二苯基-硅烷(100.0mg，0.18mmol)在甲醇(10mL)中的混合物中加入12N盐酸溶液(0.3mL，3.6mmol)并且将混合物在25℃搅拌5小时。将混合物用三乙胺中和至pH＝8.0并且减压浓缩。将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)，得到4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇(53mg，94％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝330.1[M+Na]+。
步骤C：4-[(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇
在25℃、氢气气氛下，将4-[(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇(53mg，0.17mmol)和10％钯炭(25mg)在甲醇(6mL)中的混合物搅拌1小时。通过硅藻土垫过滤并且浓缩后，得到4-[(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇(45mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝278.1[M+1]+。
步骤D：顺式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和反式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(40mg，0.25mmol)和二异丙基乙基胺(0.08mL，0.50mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(123mg，0.32mmol)，然后将混合物在25℃搅拌20分钟。在混合物中加入4-[(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)氧基]环己醇(45mg，0.16mmol)在DMF(2mL)中的溶液并且将混合物在25℃搅拌16小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mmc18,10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到顺式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(26mg，38％)和反式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10mg，15％)，为黄色固体。
顺式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.18(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.83(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.66(s,1H),8.28(s,1H),7.31(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.63(s,1H),4.57(d,J＝4.4Hz,1H),4.42-4.34(m,1H),3.62-3.51(m,1H),2.97(s,2H),2.12-2.01(m,2H),1.95-1.85(m,2H),1.65-1.52(m,2H),1.41(s,6H),1.39-1.28(m,2H)。MS(ESI)：m/z＝423.2[M+1]+。
反式-N-[6-(4-羟基环己氧基)-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.98(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.67(s,1H),8.26(s,1H),7.35(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.60(s,1H),4.61(d,J＝3.2Hz,1H),4.54-4.47(m,1H),3.69-3.61(m,1H),2.97(s,2H),2.04-1.94(m,2H),1.82-1.72(m,2H),1.72-1.65(m,2H),1.64-1.55(m,2H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝423.2[M+1]+。
实施例66和67：N-[(2R)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体3)(150.0mg，0.66mmol)和碳酸钾(228.0mg，1.65mmol)在乙腈(5mL)中的溶液中加入3,3-二氟吡咯烷盐酸盐(114.0mg，0.79mmol)并且将混合物搅拌16小时。在混合物中加入水(10mL)。将水相用DCM(3×20mL)萃取。将有机相合并并且用水洗涤，经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到[6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(208mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝315.1[M+1]+。
步骤B：[5-氨基-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在室温、氢气气氛下，将[6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(208.0mg，0.66mmol)和10％钯炭(20.0mg，0.66mmol)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。将反应通过硅藻土垫过滤并且将滤液减压浓缩，得到[5-氨基-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(188mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝285.1[M+1]+。
步骤C：N-[(2R)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在25℃，在[5-氨基-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(181.0mg，0.64mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(104.0mg，0.64mmol)和二异丙基乙基胺(0.22mL，1.33mmol)在DMF(5mL)中的混合物中加入2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(364.0mg，0.90mmol)。将混合物在25℃搅拌16小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，然后通过SFC手性拆分(SFC-80(Thar,Waters),OD20*250mm，5um(Dacel)，CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝65/35)，得到N-[(2R)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(32.3mg，12％)(38.6mg，14％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例66，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ:10.25(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.79(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.21(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.72(s,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.52-3.39(m,4H),3.24-3.15(m,3H),2.83(d,J＝15.6Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝430.2[M+1]+。
实施例67，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ:10.24(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.79(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s 1H),8.21(s,1H),7.34(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.72(s,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.53-3.39(m,4H),3.24-3.15(m,3H),2.83(d,J＝15.6Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝430.1[M+1]+。
实施例68：N-(6-(3,3-二氟-4-羟基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4,4-二氟吡咯烷-3-醇三氟乙酸盐
将3,3-二氟-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.45mmol)和三氟乙酸(1mL)在DCM(5mL)中的混合物在20℃搅拌2小时。减压除去溶剂后，得到4,4-二氟吡咯烷-3-醇三氟乙酸盐(46mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝124.1[M+1]+。
步骤B：1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇
将4,4-二氟吡咯烷-3-醇三氟乙酸盐(46mg，0.35mmol)、6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(实施例3，步骤F)(75mg，0.35mmol)和碳酸钾(145mg，1.05mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在90℃搅拌20小时。减压除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4至1:1)，得到1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇(62mg，53％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝315.1[M+1]+。
步骤C：1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇
在20℃、氢气气氛下，将1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇(62mg，0.20mmol)和10％钯炭(15mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且小心浓缩(产物是挥发性的)后，得到1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇(52mg，80％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝285.0[M+1]+。
步骤D：N-(6-(3,3-二氟-4-羟基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将1-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4,4-二氟吡咯烷-3-醇(52mg，0.15mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(30mg，0.18mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(119mg，0.23mmol)和二异丙基乙基胺(59mg，0.46mmol)在DMF(3mL)中的混合物在20℃搅拌16小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge21.2*250mm c18，10um；A：乙腈15-40％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(3,3-二氟-4-羟基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(51.2mg，78％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.07(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.77(dd,J＝2.0,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.10(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.65(s,1H),5.92(d,J＝5.6Hz,1H),4.37-4.32(m,1H),3.60-3.45(m,3H),2.99(s,2H),2.91-2.87(m,1H),1.42(s,3H),1.41(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝430.1[M+1]+。
实施例69：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在吡咯并[1,2-a]嘧啶-8-甲酸(4.97g，30.7mmol)在甲醇(120mL)中的溶液中加入浓硫酸(5mL)。将反应混合物在回流下搅拌18小时。浓缩后，缓慢加入饱和的碳酸氢钠溶液。将水相用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。过滤并且浓缩后，得到吡咯并[1,2-a]嘧啶-8-甲酸甲酯(4.50g，83％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝200.0[M+Na]。
步骤B：6-碘吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在吡咯并[1,2-a]嘧啶-8-甲酸甲酯(3.43g，19.47mmol)和乙酸钠(15.97g，194.74mmol)在乙酸(80mL)中的混合物中加入一氯化碘(3.79g，23.37mmol)。将反应混合物在25℃搅拌18小时。浓缩后，加入饱和的碳酸氢钠溶液。将水相用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到6-碘吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(2.97g，51％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝325.9[M+Na]。
步骤C：6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
将6-碘吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(400.0mg，1.32mmol)和(1,10-菲咯啉)(三氟甲基)铜(I)(619.2mg，1.98mmol)在DMF(0.5mL)中的混合物加热至50℃并且在手套箱中搅拌18小时。加入水和乙酸乙酯(50mL)并且将有机相用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(100mg，31％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝246.0[M+1]+。
步骤D：6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(50.0mg，0.20mmol)在浓盐酸(2mL)中的混合物在100℃搅拌4小时。将反应浓缩至干燥并且将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-37％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(25mg，53％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝232.0[M+1]+。
步骤E：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(实施例33，步骤B)(34.0mg，0.14mmol)、6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(25mg，0.11mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(78.09mg，0.21mmol)和二异丙基乙基胺(52.99mg，0.41mmol)在DMF(5mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mmol/L碳酸氢铵)，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-(三氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(34mg，67％)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.26(s,1H),10.12(d,J＝0.8Hz,1H),9.23(d,J＝2.0Hz,1H),8.88(s,1H),8.27(s,1H),6.72(s,1H),3.83-8.10(m,4H),3.01(s,2H),2.83-2.79(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝462.1[M+1]+。
实施例70：N-[2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2,2-二甲基-5-硝基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃
在密封管中，将碳酸铯(125.0mg，0.38mmol)、二乙酸钯(5.0mg，0.02mmol)、6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体4)(52.0mg，0.19mmol)和外消旋-2-(二叔丁基膦基)-1,1’-联萘(77.0mg，0.19mmol)在2,2,2-三氟乙醇(0.30mL)和甲苯(3.0mL)中的混合物在80℃在微波条件下加热并且将反应搅拌3小时。将反应减压浓缩至干燥，然后通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到2,2-二甲基-5-硝基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃(37mg，56％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝292.0[M+1]+。
步骤B：2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将10％钯炭(5.0mg)和2,2-二甲基-5-硝基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃(37.0mg，0.13mmol)在甲醇(2mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-胺(33mg)，为无色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝262.1[M+1]+。
步骤C：N-[2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(21.0mg，0.13mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(99.0mg，0.19mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.04mL，0.25mmol)和2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-胺(33.0mg，0.13mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。过滤并且浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2,2-二甲基-6-(2,2,2-三氟乙氧基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(9.1mg，17％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.27(s,1H),8.80(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.74(s,1H),8.68(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.46(s,1H),7.03(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.35(s,1H),4.41(q,J＝8.0Hz,2H),3.03(s,2H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝407.1[M+1]+。
实施例71和72：N-[(2R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-2-(三氟甲基)苯
将4-硝基-3-(三氟甲基)苯酚(1000mg，4.83mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(0.65mL，6.5mmol)、碳酸铯(3080mg，9.45mmol)在DMF(12mL)中的混合物在50℃搅拌2小时。将混合物倾倒至水(50mL)中并且用乙酸乙酯(150mL)萃取并且将有机物用水和盐水洗涤。然后将有机相分离并且经无水硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥，得到4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-2-(三氟甲基)苯(1.2g)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝262.0[M+1]+。
步骤B：2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-5-(三氟甲基)苯酚
在密封管中，将4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-2-(三氟甲基)苯(1200mg，4.59mmol)在DMF(14mL)中的混合物在200℃微波条件下搅拌3小时。将混合物通过反相色谱纯化(C18,120g，乙腈18-22％；B：在水中的0.1％碳酸氢铵)，得到2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-5-(三氟甲基)苯酚(222mg，19％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝262.0[M+1]+
步骤C：[2-甲基-5-硝基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在0℃，在2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-5-(三氟甲基)苯酚(222mg，0.85mmol)在DCM(15mL)中的混合物中加入3-氯过苯甲酸(222mg，1.13mmol)，然后在25℃搅拌18小时。将反应混合物用DCM(30mL)稀释，然后用亚硫酸钠溶液、碳酸氢钠溶液和水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且真空浓缩。将残留物通过反相色谱纯化(C18，60g，乙腈25-27％；B：在水中的0.1％碳酸氢铵)，得到[2-甲基-5-硝基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(66mg，28％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝278.0[M+1]+。
步骤D：[5-氨基-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[2-甲基-5-硝基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(66mg，0.24mmol)和10％钯炭(20mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到[5-氨基-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55mg，93％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝248.1[M+1]+。
步骤E：N-[(2S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(55mg，0.34mmol)和2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(170mg，0.45mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.11mL，0.68mmol)和[5-氨基-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(55mg，0.22mmol)在DMF(4mL)中的混合物在75℃搅拌24小时。冷却至室温后，将混合物通过制备HPLC纯化，(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，然后将产物通过手性-HPLC拆分[SFC-80(Thar,Waters)，AD 20*250mm，5um(Dacel)，二氧化碳/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝65/35]，得到N-[(2R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(5.6mg，6％)(8.1mg，9％)，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例70，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.94(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.76(s,1H),8.70(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.00(s,1H),7.05(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),7.03(s,1H),3.76-3.61(m,2H),3.36(d,J＝16.4Hz,1H),3.00(d,J＝16.4Hz,1H),1.89(t,J＝6.0Hz,1H),1.47(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝393.1[M+1]+。
实施例71，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.94(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.76(s,1H),8.70(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.00(s,1H),7.05(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),7.03(s,1H),3.76-3.61(m,2H),3.36(d,J＝16.4Hz,1H),3.00(d,J＝16.4Hz,1H),1.89(t,J＝6.0Hz,1H),1.47(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝393.1[M+1]+。
实施例73和74：N-[(2S)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯甲醛
将5-羟基-2-硝基苯甲醛(1000mg，5.98mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(0.81mL，8.0mmol)、碳酸铯(4000mg，12.28mmol)在DMF(10mL)中的混合物在50℃搅拌2小时。将混合物倾倒至水(50mL)中。将水相用乙酸乙酯(150mL)萃取并且将有机相用水和盐水洗涤并且经无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩至干燥，得到5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯甲醛(1.25g)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝222.1[M+1]+。
步骤B：2-(二氟甲基)-4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯
在0℃，在5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯甲醛(1250mg，5.65mmol)在DCM(25mL)中的混合物中加入二乙基氨基三氟化硫(1.88mL，14.13mmol)，然后在25℃搅拌8小时。将混合物用DCM(200mL)稀释，然后用水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:20)作为洗脱溶剂，得到2-(二氟甲基)-4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯(1310mg，95％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝244.1[M+1]+。
步骤C：5-(二氟甲基)-2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-苯酚
在密封管中，将2-(二氟甲基)-4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯(1300mg，5.35mmol)在DMF(16mL)中的混合物在200℃微波条件下搅拌3小时。将混合物通过反相色谱纯化(C18，120g，A：乙腈22-25％；B：在水中的0.1％碳酸氢铵)，得到5-(二氟甲基)-2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-苯酚(310mg，24％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝244.1[M+1]+。
步骤D：[6-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在0℃，在5-(二氟甲基)-2-(2-甲基烯丙基)-4-硝基-苯酚(310mg，1.27mmol)在DCM(15mL)中的混合物中加入3-氯过苯甲酸(375mg，1.91mmol)，然后在25℃搅拌18小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释。将有机相用碳酸氢钠溶液、水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过反相色谱纯化(C18,80g，A：乙腈20-27％；B：在水中的0.1％碳酸氢铵)，得到[6-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(156mg，47％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝260.1[M+1]+。
步骤E：[5-氨基-6-(二氟甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[6-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(140mg，0.54mmol)和10％钯炭(50mg)在甲醇(15mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到[5-氨基-6-(二氟甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(115mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝230.1[M+1]+。
步骤F：N-[(2S)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(120mg，0.74mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.26mL，1.56mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(395mg，1.04mmol)和[5-氨基-6-(二氟甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(115mg，0.50mmol)在DMF(6mL)中的混合物在65℃搅拌16小时。冷却至室温后，将混合物通过制备HPLC(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)和Chiral-HPLC[SFC-80(Thar,Waters)，AY 20*250mm，5um(Dacel)，二氧化碳/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝60/40]纯化，得到N-[(2R)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-(二氟甲基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(44.4mg，24％)(32.7mg，17％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例73，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),9.38(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.87(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.70(s,1H),7.67(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),7.042(t,J＝55.2Hz,1H),6.90(s,1H),5.11(t,J＝6.0Hz,1H),3.53-3.40(m,2H),3.29(d,J＝16.0Hz,1H),2.92(d,J＝16.0Hz,1H),1.37(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝375.1[M+1]+。
实施例74，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),9.38(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.87(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.70(s,1H),7.67(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),7.042(t,J＝55.2Hz,1H),6.90(s,1H),5.11(t,J＝6.0Hz,1H),3.53-3.40(m,2H),3.29(d,J＝16.0Hz,1H),2.92(d,J＝16.0Hz,1H),1.37(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝375.1[M+1]+。
实施例75：6-(二氟甲基)-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸(270mg，2.12mmol)和甲烷三甲醛(205mg，2.05mmol)在乙醇(1.5mL)和乙酸(0.50mL)中的混合物在25℃搅拌1小时并且在70℃搅拌1小时。冷却至室温后，将混合物过滤，将固体用乙醇洗涤并且真空干燥，得到6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(135mg，33.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.04(brs,1H),10.06(s,1H),9.93(d,J＝2.0Hz,1H),9.11(d,J＝2.0Hz,1H),8.79(s,1H)。MS(ESI)：m/z＝192.1[M+1]+。
步骤B：6-甲酰基-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(110mg，0.58mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.22mL，1.35mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(330mg，0.87mmol)和(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(实施例6，步骤B)(115mg，0.44mmol)在DMF(6mL)中的混合物在25℃搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯(150mL)。将有机相用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。加入甲醇(1mL)，然后收集固体，过滤后，得到6-甲酰基-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(115mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝438.1[M+1]+。
步骤C：6-(二氟甲基)-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，在6-甲酰基-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，0.16mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入二乙基氨基三氟化硫(0.21mL，1.55mmol)并且将混合物搅拌2小时。将反应混合物用DCM(10mL)和水稀释。将有机相经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-45％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到6-(二氟甲基)-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10.9mg，15％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ9.46(d,J＝1.6Hz,1H),9.07(d,J＝1.6Hz,1H),8.78(s,1H),8.26(s,1H),7.15(t,J＝55.2Hz,1H),6.73(s,1H),4.01-3.90(m,4H),3.65-3.56(m,2H),3.27(d,J＝15.2Hz,1H),2.99-2.90(m,5H),1.44(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝460.1[M+1]+。
实施例76和77：(R)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-氯-2-甲基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃
将3-(4-氯-2-氟苯基)-1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-醇(500mg，1.95mmol)和叔丁醇钾(875mg，7.80mmol)在THF(20mL)中的混合物在65℃搅拌18小时。冷却至室温后，加入水。分离有机相并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:4至1:3)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃(200mg，22％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝237.1[M+1]+。
步骤B：6-氯-2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃
在25℃，在6-氯-2-甲基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃(250mg，1.06mmol)在DCM(20mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(0.5mL)并且搅拌15分钟。加入水和乙酸乙酯(30mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:6至1:4)作为洗脱溶剂，得到6-氯-2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃(250mg，82％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝282.2[M+1]+。
步骤C：4-(2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在密封小瓶中，将6-氯-2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃(250mg，0.89mmol)在吗啉(1mL)中的混合物在65℃搅拌18小时。将混合物减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到4-(2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(150mg，84％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝333.1[M+1]+。
步骤D：2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在室温、氢气气氛下，将4-(2-甲基-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(150mg，0.45mmol)和10％钯炭(15mg)在甲醇(6mL)中的混合物搅拌1小时。过滤催化剂。将滤液减压浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(100mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝303.1[M+1]+。
步骤E：(R)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(54mg，0.33mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(172mg，0.33mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(85mg，0.66mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(100mg，0.33mmol)。将产生的混合物在室温搅拌18小时。加入水和乙酸乙酯(30mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物，然后将其通过手性HPLC拆分(柱：CE-4，流动相：己烷/乙醇/DEA＝70/30/0.1)，得到(R)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-甲基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自48mg，各自33.3％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例76，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.48(s,1H),9.38(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.96(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.69(s,1H),),8.40(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.93(s,1H),3.85-3.83(m,4H),3.52(d,J＝16.8Hz,1H),3.30(d,J＝16.8Hz,1H),2.85-2.83(m,4H),1.62(s,3H)。MS(ESI):m/z＝448.2[M+1]+。
实施例77，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.48(s,1H),9.38(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.69(s,1H),),8.40(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.93(s,1H),3.85-3.83(m,4H),3.52(d,J＝16.8Hz,1H),3.30(d,J＝16.8Hz,1H),2.90-2.80(m,4H),1.62(s,3H)。MS(ESI):m/z＝448.2[M+1]+。
实施例78和79：N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯
将(1S,4S)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(70mg，0.35mmol)、2,2,2-三氟甲磺酸三氟乙酯(81mg，0.35mmol)和碳酸钾(97mg，0.70mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。过滤后，将滤液真空浓缩，得到(1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(95mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝281.1[M+1]+。
步骤B：(1S,4S)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷
将(1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(95mg，0.34mmol)在2,2,2-三氟乙酸(1mL)和DCM(2mL)中的混合物在室温搅拌1小时。将混合物真空浓缩，得到((1S,4S)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷2,2,2-三氟乙酸盐(55mg)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝181.1[M+1]+。
步骤C：(2-甲基-5-硝基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
将(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(70mg，0.31mmol)、(1S,4S)-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷(55mg，0.31mmol)和碳酸铯(303mg，0.93mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。将混合物倾倒至水中并且将水相用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将有机相合并，用水和盐水洗涤。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:3)作为洗脱溶剂，得到(2-甲基-5-硝基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(110mg，92％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝388.1[M+1]+。
步骤D：(5-氨基-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将(2-甲基-5-硝基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(110mg，0.28mmol)和10％钯炭(11mg)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到(5-氨基-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(80mg，79％)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝358.1[M+1]+。
步骤E：N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(36mg，0.22mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(115mg，0.22mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(85mg，0.66mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入(5-氨基-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(80mg，0.22mmol)。将产生的混合物在室温搅拌18小时。加入水和乙酸乙酯(30mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)作为洗脱溶剂，得到希望的产物，然后将其通过手性pre-SFC拆分(柱：OD 4.6*250mm，5um(Decial)，柱温：35℃，流动相：CO2/甲醇(0.2％甲醇氨)＝70/30)，得到N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1S,4S)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自8mg，各自7％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例78，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.74(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.69(s,1H),),7.80(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.48(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.93(s,1H),3.51(s,1H),3.45-3.41(m,2H),3.32-3.25(m,3H),3.16(d,J＝16.0Hz,1H),3.07-3.04(m,1H),2.92-2.88(m,2H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.89-1.76(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝503.3[M+1]+。
实施例79，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.72(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),),7.78(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.47(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.93(s,1H),3.50(s,1H),3.45-3.41(m,2H),3.32-3.25(m,3H),3.16(d,J＝16.0Hz,1H),3.07-3.04(m,1H),2.92-2.88(m,2H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.89-1.76(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝503.3[M+1]+。
实施例80和81：(R)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1,2-二氯-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯
将2,3-二氯苯酚(500mg，3.07mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(497mg，3.68mmol)和碳酸钾(848mg，6.14mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。然后将反应过滤，浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用石油醚，得到1,2-二氯-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯(659mg，99％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝218.1[M+1]+。
步骤B：2,3-二氯-6-(2-甲基烯丙基)苯酚
将1,2-二氯-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯(600mg，2.76mmol)在DMF(3mL)中的混合物在220℃微波下搅拌2小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2,3-二氯-6-(2-甲基烯丙基)苯酚(400mg)，为淡黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。
步骤C：(6,7-二氯-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在冰冷却下，在3-氯-2-甲基-6-(2-甲基烯丙基)苯酚(400mg，1.84mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入3-氯过氧基苯甲酸(558mg，2.76mmol)。将混合物在25℃搅拌18小时。将反应过滤并且将滤液浓缩，得到(6,7-二氯-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(300mg，70％)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝233.1[M+1]+。
步骤D：(6,7-二氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在25℃，在(6,7-二氯-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(300mg，1.29mmol)在DCM(10mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(0.5mL)。将混合物在25℃搅拌30分钟并且倾倒至冰水中。将水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到(6,7-二氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(220mg，61％)，为淡灰色固体。MS(ESI)：m/z＝279.1[M+1]+。
步骤E：(7-氯-2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在密封管中，将(6,7-二氯-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(220mg，0.79mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在110℃搅拌18小时。将混合物浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(7-氯-2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(200mg，77％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝329.1[M+1]+。
步骤F：(5-氨基-7-氯-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将(7-氯-2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(100mg，0.30mmol)和10％钯炭(10mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到(5-氨基-7-氯-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(60mg)，为绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝299.1[M+1]+。
步骤G：(R)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(33mg，0.20mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(104mg，0.69mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(78mg，0.60mmol)和(5-氨基-7-氯-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(60mg，0.20mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌18小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩，并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)作为洗脱溶剂后，得到N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(40mg，45％)，为黄色固体。然后将希望的产物通过手性pre-SFC拆分(柱：AD20*250mm，5um(Dacel)，柱温：35℃，流动相：CO2/乙醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝70/30)，得到(R)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(7-氯-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自15mg，各自17％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例80，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.73(s,1H),9.39(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.91(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.70(s,1H),),8.44(s,1H),7.37(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),5.13(t,J＝5.6Hz,1H),4.02-3.93(m,2H),3.89-3.83(m,2H),3.70(t,J＝10.8Hz,2H),3.54-3.41(m,2H),3.38-3.34(m,1H),2.96(d,J＝16.4Hz,1H),2.69(d,J＝11.6Hz,2H),1.38(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.1[M+1]+。
实施例81，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.73(s,1H),9.39(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.91(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.70(s,1H),),8.44(s,1H),7.37(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),5.13(t,J＝5.6Hz,1H),4.02-3.93(m,2H),3.89-3.82(m,2H),3.70(t,J＝10.0Hz,2H),3.55-3.41(m,2H),3.38-3.34(m,1H),2.96(d,J＝16.4Hz,1H),2.69(d,J＝12.0Hz,2H),1.38(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.1[M+1]+。
实施例82：N-(3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基苯
将5-氟-2-硝基苯酚(2.0g，12.73mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(1.54mL，15.3mmol)和碳酸钾(3.5g，25.46mmol)在乙腈(50mL)中的混合物在50℃搅拌18小时。将反应过滤并且将滤液浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用石油醚，得到4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯(780mg，29％)，为轻油状物。MS(ESI)：m/z＝230.2[M+H2O]+。
步骤B：4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯胺
将4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯(780mg，3.69mmol)、铁粉(1.0g，18.47mmol)和氯化铵(978mg，18.47mmol)在乙醇(30mL)和水(4mL)中的混合物在70℃搅拌2小时。将反应过滤并且将滤液经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:30)，得到4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯胺(560mg，84％)，为轻油状物。MS(ESI)：m/z＝182.1[M+1]+。
步骤C：1-叠氮基-4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯
在4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯胺(100mg，0.55mmol)在乙腈(10mL)中的混合物中加入亚硝酸叔丁酯(85mg，0.83mmol)，然后在0℃加入三甲基甲硅烷基叠氮化物(95mg，0.83mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相分离，经硫酸钠干燥。将滤液减压浓缩，得到1-叠氮基-4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯(99mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝208.0[M+1]+。
步骤D：5-氟-1a-甲基-1a,2-二氢-1H-吖丙因并(azirino)[1,2-d]苯并[b][1,4]嗪
将1-叠氮基-4-氟-2-(2-甲基烯丙基氧基)苯(99mg，0.48mmol)在甲苯(5mL)中的混合物在110℃搅拌18小时。减压除去溶剂。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:15)作为洗脱溶剂，得到5-氟-1a-甲基-1,2-二氢吖丙因并[2,1-c][1,4]苯并嗪(38mg，44％)，为无色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3):7.00-7.03(m,1H),6.75-6.79(m,1H),6.66-6.71(m,1H),4.13(d,J＝11.2Hz,1H),3.95(d,J＝11.2Hz,1H),2.30(s,2H),1.37(s,3H)。
步骤E：7-氟-3,3-二甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在25℃、氢气气氛下，将10％钯炭(60mg)和5-氟-1a-甲基-1,2-二氢吖丙因并[2,1-c][1,4]苯并嗪(300mg，1.67mmol)在乙醇(20mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到7-氟-3,3-二甲基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(200mg)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝182.1[M+1]+。
步骤F：7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
在0℃，在7-氟-3,3-二甲基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(160mg，0.88mmol)在硫酸(4mL)中的混合物中缓慢加入硝基胍(108mg，0.88mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时。将混合物倾倒入冰水中并且用碳酸钠中和。将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(70mg，35％)，为棕色固体。MS(ESI)：m/z＝227.1[M+1]+。
步骤G：3,3-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪
将7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(70mg，0.31mmol)、吗啉(40mg，0.46mmol)和碳酸铯(202mg，0.62mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在85℃搅拌18小时。将反应过滤并且将滤液通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到3,3-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(69mg，56％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝294.1[M+1]+。
步骤H：3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺
在40℃、氢气气氛下，将10％钯炭(15mg)和3-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并嗪(69mg，0.24mmol)在乙酸乙酯(15mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺(50mg，76％)，为深色固体。MS(ESI)：m/z＝264.1[M+1]+。
步骤I：N-(3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(37mg，0.23mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(148mg，0.28mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(69mg，0.57mmol)和3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]嗪-6-胺(50mg，0.19mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌18小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)作为洗脱溶剂，得到N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10mg，13％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3):10.48(s,1H),8.82(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.75(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.18(s,1H),7.05(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.47(s,1H),5.36(brs,1H),3.93-3.95(m,4H),3.83(s,2H),2.88-2.89(m,4H),1.24(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝409.2[M+1]+。
实施例83和84：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-氯-2-甲基-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯
将3-氯-2-甲基苯酚(2.0g，14.03mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(1.7mL，16.86mmol)和碳酸钾(3.87g，28.05mmol)在乙腈(50mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。将反应过滤并且将滤液减压浓缩，并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用石油醚，得到1-氯-2-甲基-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯(2.3g，83％)，为无色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3):7.03-7.07(m,1H),6.96-6.98(m,1H),6.72(d,J＝8.0Hz,1H),5.10(s,1H),4.99(s,1H),4.42(s,1H),2.31(s,3H),1.84(s,3H)。
步骤B：3-氯-2-甲基-6-(2-甲基烯丙基)苯酚
将1-氯-2-甲基-3-(2-甲基烯丙基氧基)苯(300mg，1.53mmol)在DMF(4.5mL)中的混合物在220℃微波条件下搅拌2小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。将反应过滤并且将滤液浓缩，得到3-氯-2-甲基-6-(2-甲基烯丙基)苯酚(322mg，86％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.90(d,J＝8.4Hz,1H),6.85(d,J＝8.0Hz,1H),5.42(s,1H),4.96(s,1H),4.91(s,1H),3.34(s,1H),2.28(s,3H),1.57(s,3H)。
步骤C：(6-氯-2,7-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在0℃，在3-氯-2-甲基-6-(2-甲基烯丙基)苯酚(300mg，1.53mmol)在DCM(10mL)中的混合物中加入3-氯过氧基苯甲酸(306mg，1.83mmol)。将混合物在25℃搅拌18小时。将反应过滤并且将滤液浓缩，得到(6-氯-2,7-二甲基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(500mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝213.1[M+1]+。
步骤D：(6-氯-2,7-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在25℃，在(6-氯-2,7-二甲基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(500mg，2.35mmol)在DCM(10mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(0.3mL)。将混合物在25℃搅拌30分钟。将混合物倾倒入冰水中并且用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到(6-氯-2,7-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(182mg，50％)，为淡灰色固体。MS(ESI)：m/z＝258.1[M+1]+。
步骤E：(2,7-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
将(6-氯-2,7-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(182mg，0.71mmol)在吗啉(4mL)中的混合物在110℃搅拌18小时。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到(2,7-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(200mg，79％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝309.1[M+1]+。
步骤F：(5-氨基-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将10％钯炭(60mg)和(2,7-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(200mg，0.65mmol)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到(5-氨基-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(183mg)，为绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝279.1[M+1]+。
步骤G：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(90mg，0.55mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(360mg，0.69mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(167mg，1.38mmol)和(5-氨基-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(183mg，0.46mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌18小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)作为洗脱溶剂，得到N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(80mg，41％)，为黄色固体。将产物通过手性pre-SFC拆分(柱：AD 20*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/甲醇{0.5％氨(7m甲醇)}＝70/30)，得到(R)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg，37％)(35mg，44％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例83，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.62(s,1H),8.83(dd,J＝1.8,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.77(dd,J＝1.8,4.0Hz,1H),8.36(s,1H),7.07(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),4.08-4.12(m,2H),3.89-3.91(m,2H),3.64-3.67(m,2H),3.52-3.57(m,2H),3.26(d,J＝15.6Hz,1H),2.94(d,J＝15.6Hz,1H),2.84(d,J＝11.6Hz,2H),2.30(s,3H),2.06(br,1H),1.45(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.1[M+1]+。
实施例84，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.62(s,1H),8.83(dd,J＝1.8,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.77(dd,J＝1.8,4.0Hz,1H),8.36(s,1H),7.07(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),4.08-4.12(m,2H),3.89-3.91(m,2H),3.64-3.67(m,2H),3.52-3.57(m,2H),3.26(d,J＝15.6Hz,1H),2.94(d,J＝15.6Hz,1H),2.84(d,J＝11.6Hz,2H),2.30(s,3H),2.06(br,1H),1.45(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.1[M+1]+。
实施例85和86：(R)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将2-溴丙二醛(754.8mg，5mmol)和5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸(635.5mg，5mmol)的混合物在90℃在乙酸(6mL)和乙醇(2mL)中搅拌4小时。冷却至室温并且浓缩后，将残留物过滤并且将固体用水和乙酸乙酯洗涤，得到6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(680mg，52.1％)，为淡棕色固体。MS(ESI)：m/z＝244.0[M+1]+。
步骤B：6-溴-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(88mg，0.36mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(237mg，0.45mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(110mg，0.91mmol)和(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(实施例6，步骤B)(80mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温搅拌18小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)作为洗脱溶剂，得到6-溴-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(66mg，45％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝488.1[M+1]+。
步骤C：(R)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在100℃、氮气气氛下，将三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(98mg，0.27mmol)、6-溴-N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(66mg，0.14mmol)和四(三苯膦)钯(16mg，0.01mmol)在甲苯(15mL)中的混合物搅拌18小时。冷却至室温后，在混合物中加入盐酸盐溶液(6mL，4m，在二烷中)。将混合物在室温搅拌1小时。减压浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(Gilson 281，Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：乙腈，25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到6-乙酰基-N-[(2R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(40mg，65％)，为黄色固体。将产物通过手性pre-SFC拆分(柱：OJ 30*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/甲醇{0.2％氨(7m甲醇)}＝75/25)，得到(R)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-乙酰基-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(5.3mg，0.08％)(2.8mg，0.04％)，为黄色固体。
实施例85，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.41(s,1H),9.35(d,J＝2.0Hz,1H),9.24(d,J＝2.0Hz,1H),8.90(s,1H),8.42(s,1H),6.68(s,1H),3.94-3.97(m,4H),3.66(s,2H),3.25(d,J＝16.4Hz,1H),2.94(d,J＝16.4Hz,1H),2.90-2.92(m,4H),1.98-2.02(m,1H),1.88-1.92(m,1H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝452.1[M+1]+。
实施例86，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.41(s,1H),9.35(d,J＝2.0Hz,1H),9.24(d,J＝2.0Hz,1H),8.90(s,1H),8.42(s,1H),6.68(s,1H),3.94-3.97(m,4H),3.66(s,2H),3.25(d,J＝16.4Hz,1H),2.94(d,J＝16.4Hz,1H),2.90-2.92(m,4H),1.98-2.02(m,1H),1.88-1.92(m,1H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝452.1[M+1]+。
实施例87和88：N-[(2R)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-[4-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(150mg，0.62mmol)和1-哌嗪乙醇(320mg，2.46mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在90℃搅拌3小时。将混合物通过硅胶色谱纯化，应用甲醇:DCM(1:10)作为洗脱溶剂，得到2-[4-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇(110mg，49％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝338.2[M+1]+。
步骤B：2-[4-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇
在室温、氢气气氛下，将2-[4-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇(110.0mg，0.33mmol)和10％钯炭(11mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到2-[4-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇(102mg)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝308.2[M+1]+。
步骤C：N-[(2R)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(110mg，0.67mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(320mg，0.84mmol)和二异丙基乙基胺(0.22mL，1.34mmol)的溶液在DMF(3mL)中在室温搅拌10分钟。在该混合物中加入在DMF(2mL)中的2-[4-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙醇(102mg，0.33mmol)并且将混合物再搅拌16小时。将粗反应产物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um,A：乙腈25-70％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，然后将产物通过手性分离拆分(SFC(OD-H 20*250mm，5um，CO2/甲醇(0.2％氨(7m甲醇))＝75/25，35℃)，得到N-[(2R)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(各自10.1mg，各自7％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例87，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.40(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.72(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.42(s,1H),7.06(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.73-3.62(m,4H),3.25(d,J＝15.8Hz,1H),2.99-2.89(m,5H),2.71-2.83(m,4H),2.68-2.61(m,2H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝453.3[M+1]+。
实施例88，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.40(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.72(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.42(s,1H),7.05(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.71-3.64(m,4H),3.25(d,J＝15.7Hz,1H),2.98-2.90(m,5H),2.71-2.83(m,4H),2.68-2.61(m,2H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝453.3[M+1]+。
实施例89：N-[6-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在密封管中，将4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯、6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体4)(1.0g，3.68mmol)、[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(135mg，0.18mmol)和碳酸铯(2.4g，7.37mmol)在1,4-二烷(10mL)和水(1mL)中的混合物在90℃微波条件下搅拌2小时。将混合物倾倒至水(30mL)中并且用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过制备TLC纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(1.28g，93％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝397.1[M+Na]+。
步骤B：4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温、氢气气氛下，将4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.13mmol)和10％钯炭(8mg)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。将固体过滤并且将滤液减压浓缩，得到4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(960mg)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。
步骤C：4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(860mg，5.27mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(2.0g，5.26mmol)和二异丙基乙基胺(2mL，8.13mmol)的溶液在DMF(10mL)中在室温搅拌10分钟。在该混合物中加入在DMF(4mL)中的[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌啶-1-甲酸5-叔丁酯(910mg，2.63mmol)并且再搅拌16小时。将混合物倾倒至水(50mL)中并且用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机物用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，84％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝492.2[M+1]+。
步骤D：N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，2.20mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(2.9mL，39.5mmol)并且将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物通过三乙胺中和。浓缩后，得到N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(950mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝392.2[M+1]+。
步骤E：N-[6-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(160mg，0.41mmol)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(262mg，1.22mmol)和碳酸铯(400mg，1.23mmol)的混合物在DMF(10mL)中在25℃搅拌15小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 19*250mm c18，10um；A：乙腈30-60％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[6-[1-(2,2-二氟乙基)-4-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(25mg，14％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.39(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.89(dd,J＝1.6,4.0Hz 1H),8.68(s,1H),7.74(s,1H),7.34(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.66(s,1H),6.15(tt,J＝3.6,56.0Hz,1H),3.12-2.90(m,4H),2.75(m,3H),2.36-2.20(m,2H),1.71(m,5H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝457.3[M+1]。
实施例90：N-[2,2-二甲基-6-[1-(2,2,2-三氟乙基)-4-哌啶基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(184mg，0.47mmol)、三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(300mg，2.75mmol)和碳酸钾(260mg，4.0mmol)的混合物在DMF(10mL)中在25℃搅拌15小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um,A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2,2-二甲基-6-[1-(2,2,2-三氟乙基)-4-哌啶基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(42mg，19％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.39(dd,J＝1.6,7.0Hz,1H),8.88(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.69(s,1H),7.74(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,7.0Hz,1H),6.67(s,1H),3.19(q,J＝10.3Hz,2H),3.06-2.99(m,4H),2.86-2.78(m,1H),2.50-2.39(m,2H),1.77-1.65(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝475.3[M+1]。
实施例91：6-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(实施例75，步骤A)(191mg，1.0mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(750mg，1.97mmol)和二异丙基乙基胺(0.5mL，3.0mmol)的溶液在DMF(2mL)中在室温搅拌10分钟。在该混合物中加入在DMF(1mL)中的2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(245mg，0.98mmol)并且将反应再搅拌16小时。将混合物倾倒至水(20mL)中并且用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机相用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(283mg，61％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
步骤B：6-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，在N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，0.28mmol)在DCM(8mL)中的溶液中加入二乙基氨基三氟化硫(0.17mL，1.28mmol)。将混合物在25℃搅拌8小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge21.2*250mm c18，10um乙腈30-70％(10mM碳酸氢铵)，在水中)，得到6-(二氟甲基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10.1mg，7.4％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),9.75(d,J＝1.6Hz,1H),9.12(d,J＝1.6Hz,1H),8.80(s,1H),8.30(s,1H),7.32(t,J＝54.6Hz,2H),6.73(s,1H),3.90-3.78(m,4H),3.01(s,2H),2.87-2.73(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝444.2[M+1]。
实施例92和93：(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用手性SFC手性拆分实施例16，得到(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例92，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.21(dd,J＝2.1,1.2Hz,1H),8.83(d,J＝2.0Hz,1H),8.58(s,1H),8.33-8.27(m,1H),6.66(s,1H),5.02(t,J＝5.8Hz,1H),4.58(t,J＝5.2Hz,1H),3.49-3.33(m,4H),3.18(dd,J＝15.7,1.2Hz,1H),2.92(d,J＝11.2Hz,2H),2.86-2.77(m,1H),2.62(td,J＝11.3,3.1Hz,2H),2.41(d,J＝1.1Hz,3H),1.73-1.57(m,4H),1.50(dq,J＝10.4,5.3Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝452.2[M+1].
实施例93，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.21(dq,J＝1.9,0.9Hz,1H),8.83(d,J＝2.0Hz,1H),8.58(s,1H),8.30(d,J＝0.9Hz,1H),6.66(s,1H),5.02(t,J＝5.8Hz,1H),4.58(t,J＝5.2Hz,1H),3.49-3.32(m,4H),3.32-3.14(m,1H),2.92(d,J＝11.2Hz,2H),2.81(dd,J＝15.5,1.2Hz,1H),2.62(td,J＝11.4,3.2Hz,2H),2.41(d,J＝1.1Hz,3H),1.66(qd,J＝11.8,10.6,4.2Hz,4H),1.50(dq,J＝10.6,5.3Hz,1H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝452.2[M+1]。
实施例94和95：(S)-N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用手性SFC拆分实施例18的对映异构体，得到(S)-N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(3-(羟基甲基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例94，峰1：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.84(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.87(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.69(s,1H),8.03(d,J＝1.0Hz,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.54(s,1H),4.70(t,J＝5.3Hz,1H),3.38(s,6H),3.15-3.05(m,1H),3.04-2.95(m,5H),2.74(d,J＝9.0Hz,1H),1.84(ddd,J＝12.1,8.0,6.3Hz,1H),1.54(ddd,J＝12.1,8.0,5.6Hz,1H),1.42(s,7H),1.14(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]。
实施例95，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.86(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.02(d,J＝1.0Hz,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.53(s,1H),4.69(t,J＝5.4Hz,1H),3.47-3.32(m,2H),3.14-2.94(m,5H),2.73(d,J＝9.0Hz,1H),1.83(ddd,J＝12.2,7.9,6.2Hz,1H),1.53(ddd,J＝12.2,8.0,5.6Hz,1H),1.41(s,6H),1.13(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]。
实施例96和97：(S)-N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用手性SFC拆分实施例21的对映异构体，得到(S)-N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-乙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例96，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(d,J＝1.0Hz,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.72(s,1H),3.88-3.80(m,4H),3.13-3.01(m,1H),2.96-2.86(m,1H),2.86-2.77(m,4H),1.71(q,J＝7.4Hz,2H),1.35(s,3H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝408.2[M+1]。
实施例97，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(d,J＝1.0Hz,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.72(s,1H),3.88-3.79(m,4H),3.04(d,J＝1.2Hz,1H),2.97-2.86(m,1H),2.86-2.76(m,4H),1.70(t,J＝7.4Hz,2H),1.35(s,3H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝408.2[M+1]。
实施例98和99：N-[(2R)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
将(6-氯-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体2)(440mg，1.81mmol)、1-(2,2-二氟乙基)哌嗪盐酸盐(3000mg，16.1mmol)和碳酸钾(1480mg，10.72mmol)在乙腈(15mL)中的混合物在85℃搅拌4天。过滤并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(486mg，75％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝358.2[M+1]+。
步骤B：[5-氨基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(512mg，1.43mmol)和钯炭(150mg)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到[5-氨基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(430mg，92％)，为棕色油状物，将其直接应用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝328.1[M+1]+。
步骤C：N-[(2R)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(344mg，2.11mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.66mL，3.99mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(1016mg，2.67mmol)和[5-氨基-6-(二氟甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(430mg，1.31mmol)在DMF(15mL)中的混合物在25℃搅拌16小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-75％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，然后将产物通过手性HPLC拆分[Gilson-281，IA 20*250mm，5um(Dacel)，己烷(0.1％n,n-二乙基胺)/乙醇(0.1％n,n-二乙基胺)＝70/30]，得到N-[(2R)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(121mg，20％)(118mg，19％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例98，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.35(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.70(s,1H),6.20(tt,J＝4.0,55.6Hz,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.48-3.38(m,2H),3.19(d,J＝16Hz,1H),2.93-2.71(m,11H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝473.2[M+1]+。
实施例99，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.35(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.70(s,1H),6.20(tt,J＝4.0,55.6Hz,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.48-3.38(m,2H),3.19(d,J＝16Hz,1H),2.93-2.71(m,11H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝473.2[M+1]+。
表4.以下实施例以类似于实施例4的方法制备：
实施例118：N-[2,2-二甲基-6-(吗啉-4-基)-1,1-二氧代-2,3-二氢-苯并噻吩-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯
在4-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸(5.06g，23.05mmol)在甲醇(15mL)中的混合物中滴加入二氯化硫(10mL)。将混合物在90℃搅拌16小时。将混合物浓缩，得到4-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯(5.2g，92％)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝234.1[M+1]+。
步骤B：4-氯-2-甲基硫烷基-5-硝基-苯甲酸酯
将4-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲酯(800.0mg，3.43mmol)在四氢呋喃(20mL)中的混合物中加入甲硫醇钠(20％wt，在水中，1.2g，3.43mmol)。将混合物在25℃搅拌4小时。加入水和乙酸乙酯(30mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到4-氯-2-甲基硫烷基-5-硝基-苯甲酸甲酯(800mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝262.0[M+1]+。
步骤C：2-甲基硫烷基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯
将4-氯-2-甲基硫烷基-5-硝基-苯甲酸甲酯(600.0mg，2.29mmol)在吗啉(3995.15mg，45.86mmol)中的混合物在60℃搅拌过夜。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到2-甲基硫烷基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯(506mg，70％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝313.0[M+1]+。
步骤D：2-甲基磺酰基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯
在2-甲基硫烷基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯(506.0mg，1.62mmol)在甲醇(10mL)和水(10mL)中的混合物中加入臭氧(1082.16mg，6.48mmol)。将混合物在50℃搅拌5小时。加入乙酸乙酯(30mL)和水并且将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-甲基磺酰基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯(478mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝345.0[M+1]+。
步骤E：6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮
在0℃，将2-甲基磺酰基-4-吗啉代-5-硝基-苯甲酸甲酯(574.0mg，1.67mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物用氢化钠(60％wt，矿物油，100mg，2.5mmol)处理。将混合物在25℃搅拌4小时。缓慢加入水并且应用1N HCl将pH调节至3。将水层用乙酸乙酯(70mL)萃取。将有机层浓缩，得到6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮(560mg)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝313.0[M+1]+。
步骤F：2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮
在密封管中，将6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮(560.0mg，1.79mmol)、碘甲烷(1272.6mg，8.97mmol)和1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯(1362.79mg，8.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在40℃搅拌16小时。加入水并且将水层用乙酸乙酯(70mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮(250mg，33％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝341.1[M+1]+。
步骤G：2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-3-醇
将2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-苯并噻吩-3-酮(200.0mg，0.47mmol)在甲醇(30mL)中的混合物用硼氢化钠(53.59mg，1.41mmol)处理。将混合物在25℃搅拌3小时。将混合物用水猝灭并且加入乙酸乙酯(30mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-3-醇(150mg)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝343.1[M+1]+。
步骤H：2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并噻吩1,1-二氧化物
将2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-3-醇(150.0mg，0.44mmol)、三乙基硅烷(2.mL，12.52mmol)在三氟乙酸(8mL，107.7mmol)中的混合物在50℃搅拌16小时。将混合物浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5至1:3)作为洗脱溶剂，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并噻吩1,1-二氧化物(88mg，62％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝327.0[M+1]+。
步骤I：2,2-二甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-5-胺
在25℃、氢气气氛下，2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并噻吩1,1-二氧化物(78.0mg，0.24mmol)和10wt％钯炭(20.0mg，0.24mmol)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌1小时。将反应通过硅藻土过滤并且减压浓缩，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-5-胺(60mg)，为粉色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝297.2[M+1]+。
步骤J：N-[2,2-二甲基-6-(吗啉-4-基)-1,1-二氧代-2,3-二氢-苯并噻吩-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2,2-二甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-5-胺(50.0mg，0.17mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(实施例3，步骤B)(153.16mg，0.84mmol)和碳酸钾(879.55mg，1.69mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在110℃搅拌14小时。加入乙酸乙酯(10mL)和水。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化(Gilson 281，Xbridge21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10M碳酸氢铵)，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-苯并噻吩-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg，40％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),9.42(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),9.00(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.76(s,1H),8.63(s,1H),7.70(s,1H),7.39(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),3.88-3.90(m,4H),3.15(s,2H),2.92-2.95(m,4H),1.38(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝442.1[M+1]+。
实施例119和120：N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1R,4R)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1R,4R)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1R,4R)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-((1R,4R)-5-(2,2,2-三氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(3.8mg，3％)(4.9mg，4％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例119，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.74(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.69(s,1H),),7.80(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.48(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.93(s,1H),3.51(s,1H),3.45-3.41(m,2H),3.32-3.25(m,3H),3.16(d,J＝16.0Hz,1H),3.07-3.04(m,1H),2.92-2.88(m,2H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.89-1.76(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝503.3[M+1]+。
实施例120，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.72(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),),7.78(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.47(s,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.93(s,1H),3.50(s,1H),3.45-3.41(m,2H),3.32-3.25(m,3H),3.16(d,J＝16.0Hz,1H),3.07-3.04(m,1H),2.92-2.88(m,2H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.89-1.76(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝503.3[M+1]+。
实施例121和122：(S)-N-(6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离(S)-N-(6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例121，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.38(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.75(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.32(d,J＝1.0Hz,1H),7.37(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.73(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.42(h,J＝5.8Hz,2H),3.20(dd,J＝15.8,1.2Hz,1H),2.93(t,J＝5.5Hz,4H),2.83(dd,J＝15.6,1.2Hz,1H),2.31-2.17(m,5H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.2[M+1]+。
实施例122，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.38(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.75(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.32(d,J＝1.0Hz,1H),7.37(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.73(s,1H),5.07-5.00(m,1H),3.44(h,J＝5.5Hz,7H),3.39(d,J＝1.2Hz,0H),3.24-3.17(m,1H),2.93(t,J＝5.6Hz,4H),2.87-2.78(m,1H),2.32-2.17(m,4H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.2[M+1]+。
实施例123和124：N-((S)-6-((1R,4R)-5-(2,2-二氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-6-((1R,4R)-5-(2,2-二氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离N-((S)-6-((1R,4R)-5-(2,2-二氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((R)-6-((1R,4R)-5-(2,2-二氟乙基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例123，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ:9.72(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.86(dd,J＝2.0，4.4Hz,1H),8.68(s,1H),7.78(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.45(s,1H),5.99(tt,J＝4.4,56.0Hz,1H),5.04(t,J＝6.0Hz,1H),3.90(s,1H),3.49-3.32(m,2H),3.31-3.26(m,1H),3.16(d,J＝15.6Hz,1H),3.10-3.00(m,1H),2.97-2.81(m,4H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.88-1.72(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝485.2[M+1]+。
实施例124，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ:9.74(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.86(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),7.80(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.47(s,1H),6.00(tt,J＝4.0,56.0Hz,1H),5.04(t,J＝5.6Hz,1H),3.90(s,1H),3.48-3.38(m,3H),3.15(d,J＝15.6Hz,1H),3.06-2.99(m,1H),2.97-2.82(m,4H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),1.88-1.72(m,2H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝485.2[M+1]+。
实施例125和126：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例125，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.46(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.0Hz,1H),8.83(dd,J＝1.6,4.2Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝4.2,7.0Hz,1H),6.70(s,1H),5.04(t,J＝5.8Hz,1H),3.77(t,J＝7.1Hz,2H),3.57(s,2H),3.43(t,J＝5.6Hz,2H),3.19(d,J＝15.8Hz,1H),2.84-2.72(m,5H),1.84-1.72(m,6H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝464.2[M+1]+。
实施例126，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.46(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.0Hz,1H),8.83(dd,J＝1.6,4.2Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝4.2,7.0Hz,1H),6.70(s,1H),5.04(t,J＝5.8Hz,1H),3.77(t,J＝7.1Hz,2H),3.57(s,2H),3.43(t,J＝5.6Hz,2H),3.19(d,J＝15.8Hz,1H),2.84-2.72(m,5H),1.84-1.72(m,6H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝464.3[M+1]+。
实施例127和128：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例127，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.41(s,1H),8.83(dd,J＝1.2,6.8Hz,1H),8.80-8.75(m,2H),8.44(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.69(s,1H),3.71-3.61(m,2H),3.25(d,J＝15.6Hz,1H),3.06-2.88(m,5H),2.8.-2.63(m,4H),2.44(s,3H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝439.2[M+1]+。
实施例128，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.44(s,1H),8.83(d,J＝6.8Hz,1H),8.80-8.75(m,2H),8.44(s,1H),7.07(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.70(s,1H),3.71-3.61(m,2H),3.25(d,J＝15.6Hz,1H),3.06-2.88(m,5H),2.8.-2.63(m,4H),2.41(s,3H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝439.2[M+1]+。
实施例129和130：(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例78和79的方法分离(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例129，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.48(s,1H),8.80(d,J＝7.2Hz,1H),8.79-8.76(m,2H),8.45(s,1H),7.02(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.69-3.60(m,4H),3.23(d,J＝15.6Hz,1H),3.10(d,J＝11.6Hz,2H),2.94(d,J＝15.6Hz,1H),2.68(t,J＝10.8Hz,2H),1.91(t,J＝6.4Hz,1H),1.83-1.65(m,5H)1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝438.2[M+1]+。
实施例130，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.50(s,1H),8.80(d,J＝7.2Hz,1H),8.79-8.75(m,2H),8.45(s,1H),7.02(dd,J＝6.8Hz,1H),6.67(s,1H),3.70-3.66(m,4H),3.23(d,J＝15.6Hz,1H),3.10(d,J＝11.6Hz,2H),2.94(d,J＝15.6Hz,1H),2.68(t,J＝10.8Hz,2H),1.90(t,J＝6.4Hz,1H),1.83-1.65(m,5H),1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝438.2[M+1]+。
实施例131：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例54和55的方法制备，得到N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.24(s,1H),9.83(dd,J＝4.8,2.4Hz,1H),9.15(d,J＝2.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.27(s,1H),6.70(s,1H),6.20(tt,J＝56,4.0Hz,1H),5.04(t,J＝5.6Hz,1H),3.44-3.41(m,2H),3.19(d,J＝15.2Hz,1H),2.89-2.78(m,11H),1.34(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝491.1[M+H]+。
实施例132和133：(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
应用类似于实施例163和164的方法拆分(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例132，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),9.83(dd,J＝4.4,2.4Hz,1H),9.16(d,J＝2.4Hz,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),6.70(s,1H),6.35-6.05(m,1H),5.06(br s,1H),3.50-3.40(m,2H),3.19(d,J＝15.6Hz,1H),2.95-2.70(m,11H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝491.2[M+1]+。
实施例133，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),9.83(dd,J＝4.4,2.4Hz,1H),9.16(d,J＝2.8Hz,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),6.70(s,1H),6.34-6.06(m,1H),5.05(t,J＝5.6Hz,1H),3.50-3.40(m,2H),3.25-3.10(m,1H),3.00-2.70(m,11H),1.34(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝491.2[M+1]+。
实施例134和135：(R)-N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例150)，116.3mg，0.276mmol)通过手性制备SFC拆分，得到(R)-N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35.3mg，30％)和(S)-N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(42.0mg，36％)，为淡黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例134，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.72(s,1H),3.87-3.79(m,4H),3.13(dd,J＝15.9,1.3Hz,1H),2.86-2.77(m,5H),1.94(h,J＝6.8Hz,1H),1.28(s,3H),0.93(dd,J＝20.3,6.8Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
实施例135，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.72(s,1H),3.87-3.80(m,4H),3.13(dd,J＝15.7,1.4Hz,1H),2.86-2.77(m,5H),1.94(h,J＝6.8Hz,1H),1.28(s,3H),0.93(dd,J＝20.3,6.8Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
实施例136：N-(6-甲基-2-吗啉代-7-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-[4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙酸乙酯
将在吡啶(10mL)中的2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]乙酸乙酯(实施例134步骤C；200mg，0.60mmol)用吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(120mg，0.66mmol)处理并且在25℃搅拌4小时。将反应浓缩，并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-10％甲醇:二氯甲烷)，得到2-[4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙酸乙酯(280mg，98％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)：m/z＝479.0[M+H]+
步骤B：N-[2,2-二甲基-6-[4-[2-(甲基氨基)-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-[4-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]哌嗪-1-基]乙酸乙酯(280mg，0.59mmol)用在四氢呋喃中的2M甲基胺(10mL，20mmol)处理，在高压釜中在100℃搅拌36小时，浓缩，并且通过制备TLC纯化(洗脱：在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到N-[2,2-二甲基-6-[4-[2-(甲基氨基)-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(93.6mg，33％产率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)10.42(s,1H),9.40-9.35(m,1H),8.97-8.95(m,1H),8.67(s,1H),8.33(s,1H),7.75-7.74(m,1H),7.36(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),6.67(s,1H),3.04(s,2H),3.00(s,2H),2.85-2.84(m,4H),2.72-2.68(m,4H),2.64(d,J＝4.8Hz,3H),1.41(s,6H)。LCMS(ESI)m/z:464.1[M+H]+。
实施例137：N-[6-[4-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2-乙氧基-1,1-二甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在80℃、氮气气氛下，将1-哌嗪甲酸叔丁酯(3.0g，20.08mmol)、2-溴异丁酸乙酯(5.9g，30.12mmol)和碳酸钾(5.6g，40.16mmol)在乙腈(40mL)中的混合物搅拌15小时。将混合物过滤，将滤液浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱15％乙酸乙酯:石油醚)，得到4-(2-乙氧基-1,1-二甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.8g，47％产率)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.20-4.16(m,2H),3.43-3.41(m,4H),2.55-2.53(m,4H),1.46(s,9H),1.45-1.26(m,9H)。
步骤B：2-甲基-2-哌嗪-1-基-丙酸乙酯二盐酸盐
将1,4-二烷(10mL)中的4-(2-乙氧基-1,1-二甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0g，3.33mmol)用盐酸(0.83mL，3.32mmol)处理，在15℃搅拌15小时并且浓缩，得到2-甲基-2-哌嗪-1-基-丙酸乙酯二盐酸盐(700mg，77％产率)，为黄色油状物，将其直接应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(s,2H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),3.50-3.25(m,8H),1.52(s,6H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙酸乙酯
将在乙腈(10mL)中的6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(100mg，0.44mmol)用碳酸钾(182mg，1.32mmol)和2-甲基-2-哌嗪-1-基-丙酸乙酯二盐酸盐(180mg，0.66mmol)处理并且在100℃搅拌16小时。将混合物过滤，浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，(洗脱梯度0-20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙酸乙酯(150mg，87％产率)，为黄色油状物。LCMS(ESI)：m/z＝392.1[M+H]+。
步骤D：2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙-1-醇
在2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙酸乙酯(150mg，0.38mmol)在甲醇(5mL)和四氢呋喃(10mL)中的溶液中加入硼氢化锂(17mg，0.77mmol)。在40℃搅拌16小时后，将反应用水(1mL)稀释并且用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-50％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙-1-醇(80mg，60％产率)，为黄色油状物。LCMS(ESI)：m/z＝350.3[M+H]+。
步骤E：2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙-1-醇
将在甲醇(10mL)中的2-[4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙-1-醇(80mg，0.23mmol)用10％钯炭(24mg，0.02mmol)处理并且在25℃、氢气(15psi)下搅拌2小时。将反应过滤并且将滤液浓缩，得到2-[4-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基]-2-甲基-丙-1-醇(53mg，73％产率)，为黄色油状物，将其直接应用而无需进一步纯化。
步骤F：N-[6-[4-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
类似于实施例136的方法制备N-[6-[4-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg，39％产率)并且分离，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.32(s,1H),8.84-8.80(m,2H),8.69(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.36(s,1H),7.05(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),6.64(s,1H),3.38(s,2H),3.04(s,2H),3.00-2.90(m,4H),2.85-2.75(m,4H),1.49(s,6H),1.10(s,6H)。LCMS(ESI)m/z:465.1[M+H]+。
实施例138：N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-氯-2-异丙基-5-硝基异二氢吲哚-1-酮
在2-(溴甲基)-5-氯-4-硝基苯甲酸甲酯(按照WO 2013/079505的方案制备)(130mg，0.42mmol)在甲醇(4.2mL)中的溶液中加入三甲胺(0.071mL，0.51mmol)和异丙基胺(0.043mL，0.51mmol)。将反应混合物在70℃加热6小时，冷却至环境温度，并且用乙酸异丙酯和1N HCl稀释。分离各层并且将水层用乙酸异丙酯(2x)洗涤。将合并的有机层经硫酸钠干燥并且应用而无需进一步纯化。
步骤B：2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基异二氢吲哚-1-酮
将6-氯-2-异丙基-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(88mg，0.35mmol)、吗啉(0.036mL，0.42mmol)、二异丙基胺(0.12mL，0.69mmol)在DMSO(1mL)中的溶液在90℃加热18小时。将反应混合物冷却至环境温度，用水稀释并且用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机层用洗涤盐水，经硫酸钠干燥，过滤并且吸附在硅藻土上，通过硅胶色谱纯化(在庚烷中的0％至100％乙酸异丙酯)，得到2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(17mg，16％)，为橙色油状物。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.80(s,1H),7.64(s,1H),4.67(p,J＝6.8Hz,1H),4.36(s,2H),3.88-3.79(m,4H),3.12-3.02(m,4H),1.31(d,J＝6.8Hz,6H)。
步骤C：5-氨基-2-异丙基-6-吗啉代异二氢吲哚-1-酮
将2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(17mg，0.056mmol)置于乙醇(0.35mL)和水(0.035mL)中并且用脱水氯化锡(II)(42mg，0.22mmol)处理并且加热至65℃达5小时。加入DCM(0.75mL)和2M NaOH(aq)(0.37mL)并且将混合物通过疏水漏斗。真空除去溶剂，得到希望的产物，为黄色固体。使用粗材料而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝276.1[M+1]+。
步骤D：N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-氨基-2-异丙基-6-吗啉代-异二氢吲哚-1-酮(19mg，0.069mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(19mg，0.10mmol)、4-二甲基氨基吡啶(2mg，0.014mmol)和二异丙基乙基胺(0.036mL，0.21mmol)在DCE(1mL)中的溶液在环境温度搅拌18小时。将反应减压浓缩并且通过反相HPLC纯化，得到N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(6.8mg，24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.41(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),9.00(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.76(d,J＝3.8Hz,2H),7.56(s,1H),7.39(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),4.42(d,J＝5.3Hz,3H),3.94-3.83(m,4H),2.96-2.85(m,4H),1.23(d,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝421.2[M+1]+。
实施例139：(R)-N-(2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
按照实施例138描述的方法制备(R)-N-(2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(44mg，32％)，应用(R)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁-2-醇(WO 2014/074675)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.41(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),9.00(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.76(d,J＝2.4Hz,2H),7.59(s,1H),7.39(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),4.90(s,1H),4.55(s,3H),4.05-3.85(m,5H),3.70(td,J＝15.9,9.3Hz,1H),2.99-2.85(m,4H),1.24-1.12(m,6H)。MS(ESI)：m/z＝483.2[M+1]+。
实施例140：N-(2-甲基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
按照实施例138描述的方法制备N-(2-甲基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(55mg，17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),9.40(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.99(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.74(d,J＝4.6Hz,2H),7.56(s,1H),7.38(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),4.45(s,2H),3.94-3.84(m,4H),3.07(s,3H),2.97-2.86(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝393.1[M+1]+。
实施例141：N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氯-2-甲基色满-4-酮
将1-(4-氯-2-羟基苯基)乙酮(513.0mg，3.01mmol)、吡咯烷(0.5mL，6.01mmol)和1-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)丙-2-酮(849.56mg，4.51mmol)在甲醇(10mL)中的混合物在回流下搅拌16小时。浓缩后，将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(5:95)作为洗脱溶剂，得到2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-7-氯-2-甲基-色满-4-酮(685mg，57％)，为橙色油状物。MS(ESI)：m/z＝341.1[M+1]+。
步骤B：2-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-7-氯-2-甲基色满-4-醇
在2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-7-氯-2-甲基-色满-4-酮(102.0mg，0.30mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中加入硼氢化钠(34.11mg，0.90mmol)。将混合物在25℃搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯(30mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-7-氯-2-甲基-色满-4-醇(101mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝365.2[M+23]+。
步骤C：(7-氯-2-甲基色满-2-基)甲醇
将2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基甲基]-7-氯-2-甲基-色满-4-醇(513mg，1.5mmol)和三乙基硅烷(6.85mL，42.75mmol)在三氟乙酸(25mL)中的混合物在50℃搅拌过夜。加入饱和的碳酸氢钠溶液直至pH＝7.0。将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到(7-氯-2-甲基-色满-2-基)甲醇(115mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.98(d,J＝8.0Hz,1H),8.87-8.80(m,2H),4.43-4.32(m,2H),2.82-2.70(m,2H),2.02-1.92(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.36(s,3H)。
步骤D：苯甲酸(7-氯-2-甲基色满-2-基)甲酯
将(7-氯-2-甲基-色满-2-基)甲醇(115mg，0.54mmol)、苯甲酰氯(91mg，0.65mmol)和三乙胺(164mg，1.62mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌过夜。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:20至1:10)作为洗脱溶剂，得到苯甲酸(7-氯-2-甲基色满-2-基)甲酯(130mg，76％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝317.2[M+1]+。
步骤E：苯甲酸(7-氯-2-甲基-6-硝基色满-2-基)甲酯
在苯甲酸(7-氯-2-甲基色满-2-基)甲酯(130mg，0.41mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中滴加入发烟硝酸(1mL)。加入水和乙酸乙酯(20mL)。将有机层经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到苯甲酸(7-氯-2-甲基-6-硝基色满-2-基)甲酯(110mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝362.1[M+1]+。
步骤F：苯甲酸(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲酯
将吗啉(5.mL，57.16mmol)和苯甲酸(7-氯-2-甲基-6-硝基-色满-2-基)甲酯(110.0mg，0.3mmol)的混合物在100℃搅拌过夜。将反应浓缩至干燥，得到苯甲酸(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲酯(115mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝413.2[M+1]+。
步骤G：(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲醇
在0℃，在苯甲酸(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲酯(94.0mg，0.23mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入甲醇钠(36.92mg，0.68mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。减压除去溶剂。将残留物溶于二氯甲烷(25mL)并且加入饱和的氯化铵溶液。将有机层用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲醇(137mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝309.1[M+1]+。
步骤H：(6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-色满-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将钯炭(20mg)和(2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-2-基)甲醇(131.19mg，0.43mmol)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌30分钟。过滤并且浓缩后，得到(6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-色满-2-基)甲醇(79mg，60％)，为淡黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝279.1[M+1]+。
步骤I：N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(46.3mg，0.28mmol)、二异丙基乙基胺(73.36mg，0.57mmol)和(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(162.77mg，0.31mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在0℃搅拌。然后加入在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的(6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-色满-2-基)甲醇(79.0mg，0.28mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。将粗品通过反相色谱纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-75％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(55mg，46％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.41(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.79-8.76(m,2H),8.37(s,1H),7.06(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.68(s,1H),3.98-3.92(m,4H),3.69-3.60(m,2H),2.96-2.89(m,4H),2.89-2.76(m,2H),2.08-1.98(m,1H),1.89(t,J＝6.4Hz,1H),1.77-1.70(m,1H),1.29(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例142：N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在镁(2400mg，100mmol)和碘(180mg，0.71mmol)在乙醚(25mL)中的溶液中在回流下缓慢加入1-(溴甲基)-2,4-二氟苯(8200.0mg，39.61mmol)并且搅拌30分钟。在-78℃在4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6500.0mg，32.62mmol)在乙醚(200mL)中的溶液中加入Grignard试剂并且将反应在室温搅拌2小时。加入水和EtOAc(200mL)。将有机层分离并且经硫酸钠干燥。减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:4至1:2)，得到4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(9500mg，73％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝350.1[M+23]+。
步骤B：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
将4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(491.0mg，1.5mmol)和叔丁醇钾(420.74mg，3.75mmol)在四氢呋喃(30mL)中的混合物在65℃搅拌3小时。加入水。将水层用乙酸乙酯(60mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(409mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝252.2[M-55]+。
步骤C：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]
在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(270.0mg，0.88mmol)在二氯甲烷(9mL)中的溶液中加入三氟乙酸(1mL)。将反应溶液在室温搅拌2小时。加入饱和的碳酸氢钠溶液直至pH＝7.0。将水层用20mL二氯甲烷萃取两次。将合并的有机层用饱和的盐水洗涤并且经无水硫酸镁干燥。除去溶剂后，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](189mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝208.2[M+1]+。
步骤D：6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]
在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](171.0mg，0.8300mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入浓硝酸(0.5mL，8mmol)。将反应在25℃搅拌1小时。加入水。然后加入饱和的碳酸氢钠直至pH＝7.0。将水性物用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](135mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝253.2[M+1]+。
步骤E：6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
将6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](135.0mg，0.54mmol)、三乙胺(108.31mg，1.07mmol)和二碳酸二叔丁酯(80.28mg，0.80mmol)中的混合物在室温搅拌2小时。然后将反应真空浓缩，得到6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(具有7a杂质)(270mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝297.1[M-55]+。
步骤F：6-吗啉代-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
将6-氟-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(270.0mg，0.38mmol)、吗啉(66.76mg，0.77mmol)和碳酸钾(132.09mg，0.96mmol)在乙腈(6mL)中的混合物在室温搅拌过夜。然后在反应中加入水并且将水层用20mL乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用饱和的盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥。除去溶剂后，将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到6-吗啉代-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(73mg，42％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝420.3[M+1]+。
步骤G：5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
在室温、氢气气氛下，将钯炭(20.0mg，10％wt)和6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(73.0mg，0.17mmol)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(61mg，79％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝390.2[M+1]+。
步骤H：5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(25.55mg，0.16mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基-磷六氟磷酸盐(89.82mg，0.17mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(60.72mg，0.47mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物在0℃搅拌。然后加入在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(61.0mg，0.16mmol)并且将反应在室温搅拌2小时。将粗品通过反相色谱纯化(Gilson 281-G,Phenomenex，Gemini C18，21.2×100mm，5um，110A，A：乙腈55-70％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(73mg，87％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝535.3[M+1]+。
步骤I：N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(73.0mg，0.14mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。将反应溶液在室温搅拌2小时。在反应溶液中加入饱和的碳酸氢钠水溶液直至pH＝7.0。将水层用20mL二氯甲烷萃取两次。将合并的有机层用饱和的盐水洗涤，然后经无水硫酸镁干燥。浓缩后，将残留物通过反相色谱纯化(Gilson 281-G，Phenomenex，Gemini C18，21.2×100mm，5um，110A，A：乙腈，55-70％；B：在水中的0.05％甲酸)，得到N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(29mg，49％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ9.03(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.82(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.56(s,1H),8.41(s,1H),8.20(s,1H),7.19(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.69(s,1H),3.87-3.80(m,4H),3.31-3.20(m,4H),3.04(s,1H),2.82-2.76(m,4H),2.10-2.02(m,2H),1.98-1.88(m,2H)。MS(ESI)：m/z＝435.3[M+1]+。
实施例143：N-(7-氰基-2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-氯-6-(2-甲基烯丙基氧基)苄腈
将2-氯-6-羟基-苄腈(500.0mg，3.26mmol)、3-溴-2-甲基丙烯(0.39mL，3.91mmol)和碳酸钾(898.6mg，6.51mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌过夜。将固体过滤，将滤液浓缩并且通过硅胶色谱纯化，应用石油醚:乙酸乙酯(100:1)，得到2-氯-6-(2-甲基烯丙基氧基)苄腈(699.0mg，98％)，为轻油状物。MS(ESI)：m/z＝208.1[M+1]+。
步骤B：6-氯-2-羟基-3-(2-甲基烯丙基)苄腈
将2-氯-6-(2-甲基烯丙基氧基)苄腈(100.0mg，0.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在220℃微波条件下搅拌2小时。加入水。将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。将有机层浓缩，得到6-氯-2-羟基-3-(2-甲基烯丙基)苄腈(70mg，70％)，为轻油状物。(ESI)：m/z＝208.2[M+1]+。
步骤C：6-氯-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-7-甲腈
在0℃，在6-氯-2-羟基-3-(2-甲基烯丙基)苄腈(200.0mg，0.96mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中加入3-氯过氧基苯甲酸(292.3mg，1.44mmol)。将混合物在25℃搅拌过夜。加入水和二氯甲烷(20mL)。将有机层用饱和的碳酸氢钠、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。浓缩后，得到6-氯-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(200.0mg，粗品)，为无色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝208.1[M+1]+。
步骤D：6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-7-甲腈
在25℃，在6-氯-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(200.0mg，0.96mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(0.5mL)。将混合物在25℃搅拌30分钟。将混合物倾倒至冰水中。将水层用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:9)，得到6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(200.0mg，74％)，为淡灰色固体。MS(ESI)：m/z＝253.1[M+1]+。
步骤E：2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-7-甲腈
在密封管中，将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(100.0mg，0.40mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在110℃搅拌过夜。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(100mg，79％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝304.2[M+1]+。
步骤F：5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-7-甲腈
在25℃、氢气气氛下，将2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-7-甲腈(80.0mg，0.26mmol)和钯炭(8mg，10％wt)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-7-甲腈(70.0mg，粗品)，为绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝274.1[M+1]+。
步骤G：N-(7-氰基-2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(41.8mg，0.26mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(133.4mg，0.26mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(99.1mg，0.77mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。加入5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-7-甲腈(70.0mg，0.26mmol)。将产生的混合物在室温搅拌过夜。加入水和乙酸乙酯(30mL)。将有机层分离，将有机层用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)，然后通过制备HPLC进一步纯化(柱：Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A:乙腈25-75％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(7-氰基-2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(28mg，26％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.65(s,1H),8.85(d,J＝7.2Hz,1H),8.82-8.77(m,2H),8.73(s,1H),7.13-7.08(m,1H),4.05-3.95(m,4H),3.73-2.70(m,6H),1.54(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝419.2[M+1]+。
实施例144：N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
在密封管中，将6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸酯(中间体3，步骤D)(300.0mg，1.18mmol)在吗啉(2mL)中的混合物在80℃搅拌过夜。将混合物浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:6)作为洗脱溶剂，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(329.0mg，83％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝323.1[M+1]+。
步骤B：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲醛
在-78℃，历经5分钟，在2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(315.0mg，0.89mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入二异丁基氢化铝(1.33mL，1.33mmol)。然后将混合物在-78℃搅拌2小时。将混合物用十水合硫酸钠猝灭。将反应过滤并且将滤液浓缩并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:6)作为洗脱溶剂，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲醛(163.0mg，56％)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝293.1[M+1]+。
步骤C：4-(2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在-78℃，在2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-甲醛(163.0mg，0.56mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入二乙基氨基三氟化硫(561.8mg，2.79mmol)。将混合物在-78℃搅拌过夜，浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:9)作为洗脱溶剂，得到4-[2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(77.0mg，42％)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝315.1[M+1]+。
步骤D：2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将4-[2-(二氟甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(77.0mg，0.25mmol)和钯炭(15mg，15％wt)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(55.0mg，粗品)，为无色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。(ESI)：m/z＝285.1[M+1]+。
步骤E：N-(2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(55.0mg，0.19mmol)、6-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(实施例7，步骤A)(34.27mg，0.19mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(100.9mg，0.19mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(75.0mg，0.58mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在室温搅拌过夜。加入水和乙酸乙酯(30mL)并且将有机层分离。将有机层用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)作为洗脱溶剂，得到N-[2-(二氟甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(38.0mg，44％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.40(s,1H),9.24(s,1H),8.87(s,1H)8.60(s,1H),8.36(s,1H),6.85(s,1H),6.18(t,J＝54.8Hz,1H),3.88-3.82(m,4H),3.36(d,J＝17.2Hz,1H),3.06(d,J＝16.4Hz,1H),2.86-2.79(m,4H),2.44(s,3H)1.46(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.1[M+1]+。
实施例145：[1-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯
步骤A：[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯
在[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲醇(实施例4，步骤A)(270mg，0.85mmol)、碘(22mg，0.09mmol)和磷酸二乙酯(141mg，1.02mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入过氧化氢(0.31mL，4.26mmol)，然后将混合物在20℃搅拌20小时。加入水和二氯甲烷(50mL)并且将水相用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1至2:1)作为洗脱溶剂，得到[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯(113mg，23％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝443.1[M+1]+。
步骤B：[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯
将[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯(113mg，0.19mmol)、铁粉(54mg，0.96mmol)和氯化铵(52mg，0.96mmol)在乙醇(5mL)和水(0.5mL)中的混合物在60℃加热2小时。过滤后，加入水和二氯甲烷(50mL)。将水相用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯(79mg，粗品)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝413.3[M+1]+。
步骤C：[1-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯
将[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯(79mg，0.14mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(27mg，0.17mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(78mg，0.21mmol)和二异丙基乙基胺(53mg，0.41mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在20℃搅拌1小时。将混合物通过制备HPLC纯化(Xbridge21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到[1-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲基二乙基磷酸酯(7mg，9％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.51(s,1H),8.85(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.79-8.76(m,2H),8.44(s,1H),7.10(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),6.63(s,1H),4.14(q,J＝7.2Hz,4H),4.01-4.00(m,2H),3.11(d,J＝11.6Hz,2H),3.03(s,2H),2.69-2.64(m,2H),1.87-1.77(m,5H),1.48(s,6H),1.35(t,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝558.3[M+1]+。
实施例146：N-(1-甲基-6’-吗啉代-3’H-螺[氮杂环丁烷-3,2’-苯并呋喃]-5’-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：3-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3-羟基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在40℃，在镁粉(2.0g，81.51mmol)和碘(6.1g，24.15mmol)在乙醚(40mL)中的混合物中滴加入2,4-二氟苄基溴(5.0g，24.15mmol)。将反应搅拌30分钟。在-78℃，在1-Boc-3-氮杂环丁烷(4.1g，24.15mmol)在乙醚(40mL)中的溶液中加入Grignard试剂并且将反应在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵溶液。将水层用乙酸乙酯(40mL)萃取两次。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到3-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3-羟基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(4g，粗品)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝244.1[M-56]+。
步骤B：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-1’-甲酸叔丁酯
将叔丁醇钾(3.7g，33.41mmol)和3-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3-羟基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(4.0g，13.36mmol)在四氢呋喃(75mL)中的混合物在65℃搅拌过夜。冷却至室温后，加入水。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过反相Combiflash纯化(A：乙腈30％-50％；B：在水中的0.1％wt碳酸氢铵)，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-1’-甲酸叔丁酯(350mg，19％)，为橙色油状物。MS(ESI)：m/z＝224.1[M-56]+。
步骤C：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
将6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-1’-甲酸叔丁酯(350mg，1.25mmol)和三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(40mL)中的混合物在室温搅拌过夜。缓慢加入氨(30％wt，在甲醇中，10mL)。减压浓缩后，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](400.0mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝180.1[M+1]+。
步骤D：6-氟-1’-甲基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](100.0mg，0.56mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中加入甲醛(30％wt，在水中，1.1g，13.8mmol)，然后将混合物在25℃搅拌30分钟。在混合物中加入氰基硼氢化钠(70.0mg，1.12mmol)。将反应在25℃搅拌1小时。加入水并且将粗品通过反相combiflash纯化(A：乙腈23％-30％；B：在水中的0.1％wt碳酸氢铵)，得到6-氟-1’-甲基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](108mg，99％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝194.1[M+1]+。
步骤E：6-氟-1’-甲基-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
在25℃，在6-氟-1’-甲基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](90.0mg，0.4700mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(0.3mL，4.66mmol)。将混合物在25℃搅拌30分钟并且倾倒至冰水上。加入5M氢氧化钠直至pH＝10.0。将有机层经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到6-氟-1’-甲基-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](85mg，77％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,MeOD-d4):7.90-7.88(d,J＝8.0Hz,1H),6.70-6.67(d,J＝11.6Hz,1H),3.52-3.46(m,4H),3.39(s,2H),2.35(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝239.1[M+1]+。
步骤F：1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
将6-氟-1’-甲基-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](116.0mg，0.49mmol)在吗啉(426.0mg，4.9mmol)中的溶液在110℃搅拌3小时，然后减压除去溶剂，得到残留物，并且将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝306.1[M+1]+。
步骤G：1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺
在1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](90.0mg，0.29mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入钯炭(20.0mg，10％wt)。在25℃、氢气气氛下，将混合物搅拌2小时。过滤并且浓缩后，得到1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺(65mg，82％)，为棕色油状物。MS(ESI)：m/z＝276.2[M+1]+。
步骤H：N-(1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺(30.0mg，0.11mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(23.0mg，0.14mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(42.0mg，0.33mmol)和o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐(83.0mg，0.22mmol)。将混合物在25℃搅拌3小时。加入水。将水层用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-55％；B：在水中的0.05％wt甲酸)，得到N-(1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(20mg，44％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.46(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.34(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.80(s,1H),3.84(t,J＝8.8Hz,4H),3.46-3.42(m,4H),3.27-3.25(m,2H),2.86-2.76(m,4H),2.31(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝421.3[M+1]+。
实施例147：N-(1-(2,2-二氟乙基)-6’-吗啉代-3’H-螺[氮杂环丁烷-3,2’-苯并呋喃]-5’-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
将6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](实施例146，步骤C)(185.0mg，1.03mmol)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(265.0mg，1.24mmol)和碳酸钾(442.0mg，3.2mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌过夜。过滤并且浓缩后，得到1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](170mg，粗品)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝244.1[M+1]+。
步骤B：1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]
在25℃，在1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](113.0mg，0.47mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(0.3mL，4.66mmol)。将混合物在25℃搅拌30分钟。将混合物倾倒至冰水中。加入5N氢氧化钠直至pH＝10.0。将水层用二氯甲烷(40mL)萃取。将有机层经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](165mg粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝289.1[M+1]+。
步骤C：1-(2,2-二氟乙基)-6’-吗啉代-5’-硝基-3’H-螺[氮杂环丁烷-3,2’-苯并呋喃]
将1’-(2,2-二氟乙基)-6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](120.0mg，0.42mmol)在吗啉(426.0mg，4.9mmol)中的溶液在110℃搅拌3小时。浓缩后，得到1-(2,2-二氟乙基)-6’-吗啉代-5’-硝基-3’H-螺[氮杂环丁烷-3,2’-苯并呋喃](90mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝356.2[M+1]+。
步骤D：1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺
在1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷](90.0mg，0.25mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入钯炭(20.0mg，10％wt)。将混合物在25℃、氢气气氛下搅拌2小时。过滤并且浓缩后，得到1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺(50mg，粗品)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝326.2[M+1]+。
步骤E：N-[1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(26.0mg，0.16mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液中加入1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-胺(40.0mg，0.1200mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(47.0mg，0.37mmol)和o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐(93.0mg，0.25mmol)。将混合物在25℃搅拌3小时。加入水和乙酸乙酯(20mL)并且将有机层用水、盐水洗涤并且浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-55％；B：在水中的0.05％wt甲酸)，得到N-[1’-(2,2-二氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(16.0mg，0.034mmol，28％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.45(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),8.35(s,1H),7.34(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.80(s,1H),6.15-5.87(m,1H),3.85-3.83(m,4H),3.57-3.44(m,6H),2.95-2.86(m,2H),2.82-2.80(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝471.1[M+1]+。
实施例148：N-[6-吗啉代-1’-(2,2,2-三氟乙基)螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例147的方法制备，得到N-[6-吗啉代-1’-(2，2，2-三氟乙基)螺[3H-苯并呋喃-2,3’-氮杂环丁烷]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(72mg，25％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.46(s,1H),9.37(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.95(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.68(s,1H),7.34(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.81(s,1H),3.85-3.83(m,4H),3.64-3.57(m,6H),3.16(s,2H),2.82-2.80(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝489.2[M+1]+。
实施例149：N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯
将6-氟-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(实施例3，步骤F)(210mg，0.99mmol)、1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(219mg，1.09mmol)和碳酸钾(412mg，2.98mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在80℃搅拌2小时。减压除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:9至1:1)作为洗脱溶剂，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，63％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝392.2[M+1]+。
步骤B：1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷
将4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(260mg，0.66mmol)和三氟乙酸(1mL)在二氯甲烷(3mL)中的混合物在25℃搅拌2小时。减压除去溶剂后，得到1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷三氟乙酸盐(180mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝291.2[M+1]+。
步骤C：1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷
将1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷三氟乙酸盐(180mg，0.61mmol)、三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(132mg，0.61mmol)和碳酸钾(257mg，1.85mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在80℃搅拌16小时。过滤并且减压除去溶剂后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:9至1:1)作为洗脱溶剂，得到1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷(150mg，64％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝356.2[M+1]+。
步骤D：6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将1-(2,2-二氟乙基)-4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1,4-二氮杂环庚烷(150mg，0.42mmol)和钯炭(20mg，10％wt)在甲醇(3mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且浓缩后，得到6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(120mg，粗品)，为棕色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝326.3[M+1]+。
步骤E：N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(120mg，0.36mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(60mg，0.36mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(210mg，0.55mmol)和二异丙基乙基胺(95mg，0.73mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在60℃搅拌3小时。将粗品通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈25-55％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)-1,4-二氮杂环庚烷-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(22mg，12％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,MeOD-d4):δ9.17(d,J＝6.0Hz,1H),8.95(d,J＝2.8Hz,1H),8.70(s,1H),8.06(s,1H),7.31(dd,J＝6.0,2.8Hz,1H),6.73(s,1H),6.27-6.54(tt,J＝1.2,53.2Hz 1H),3.77-3.89(m,6H),3.45(s,2H),3.23(t,J＝5.6Hz 2H),3.05(s,2H),2.21-2.27(m,2H),1.48(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝471.3[M+1]+。
实施例150：N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2,4-二氟苯基)-2,3-二甲基丁-2-醇
在40℃、氮气气氛下，将镁(2.2g，92.88mmol)和碘(59mg，0.23mmol)在乙醚(80mL)中的混合物中缓慢加入2,4-二氟苄基溴(4.2g，20.31mmol)并且搅拌2小时。在-78℃、氮气气氛下，在3-甲基-2-丁酮(2g，23.22mmol)在乙醚(100mL)中的溶液中加入Grignard试剂并且将反应在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵溶液和乙酸乙酯(200mL)。将有机层分离，用水、盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到1-(2,4-二氟苯基)-2,3-二甲基-丁-2-醇(3.4g，65％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝197.2[M-17]+。
步骤B：6-氟-2-异丙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃
在0℃，在1-(2,4-二氟苯基)-2,3-二甲基-丁-2-醇(428mg，2mmol)和四氢呋喃(50mL)的混合物中加入叔丁醇钾(1.12g，9.99mmol)。将反应搅拌16小时。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取并且将有机物用饱和的盐水溶液洗涤。然后分离有机物并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:20)作为洗脱溶剂，得到6-氟-2-异丙基-2-甲基-3H-苯并呋喃(350mg，90％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝217.1[M+23]+。
步骤C：6-氟-2-异丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
在0℃，在6-氟-2-异丙基-2-甲基-3H-苯并呋喃(350mg，1.8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入发烟硝酸(2mL)。加入水和二氯甲烷(30mL)，然后分离有机物并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到6-氟-2-异丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(220mg，51％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝240.1[M+1]+。
步骤D：4-(2-异丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
将6-氟-2-异丙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(220mg，0.92mmol)、吗啉(88mg，1.01mmol)和碳酸钾(254mg，1.84mmol)在乙腈(15mL)中的混合物在25℃搅拌16小时。加入水并且将水层用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机层用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1)作为洗脱溶剂，得到4-(2-异丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(250mg，85％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝307.2[M+1]+。
步骤E：2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将钯炭(80.0mg，10％wt)和4-(2-异丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(250mg，0.78mmol)在甲醇(15mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(200mg，89％)，为白色油状物。MS(ESI)：m/z＝277.3[M+1]+。
步骤F：N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(130mg，0.80mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(464mg，0.87mmol)、乙基二异丙基胺(347mg，2.16mmol)、2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(200mg，0.72mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌过夜。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-45％；在水中的0.05％wt甲酸)，得到N-(2-异丙基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(125mg，41％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.46(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.79(s,1H),8.76(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.40(s,1H),7.06(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.65(s,1H),4.00-3.89(m,4H),3.16(d,J＝11.6Hz,1H),2.93-2.87(m,4H),2.83(d,J＝11.6Hz,1H),2.08-1.95(m,2H),1.01(d,J＝6.8,3H),0.96(d,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝422.2[M+1]+。
实施例151：N-(6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-甲基-1-(哌嗪-1-基)丙-2-醇
将哌嗪(6.88g，80mmol)溶于乙醇(40mL)中。加入1-氯-2-甲基-2-丙醇(2.18g，20mmol)。将混合物在110℃搅拌6小时。将混合物冷却至室温后，蒸发溶剂。加入乙酸乙酯(40mL)并且将沉淀的固体通过过滤除去。将滤液减压浓缩，得到2-甲基-1-哌嗪-1-基-丙-2-醇(4.1g，粗品)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI)：m/z＝159.3[M+1]+。
步骤B：1-(4-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇
将(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体3)(300mg，1.32mmol)、2-甲基-1-(哌嗪-1-基)丙-2-醇(1.44g，6.6mmol)和碳酸钾(365mg，2.64mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌16小时。加入水并且将水层用乙酸乙酯(20mL)萃取并且将有机物用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)作为洗脱溶剂，得到1-(4-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(100mg，18％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝366.3[M+1]+。
步骤C：1-(4-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇
在25℃、氢气气氛下，将钯炭(30mg，10％wt)和1-(4-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(100mg，0.27mmol)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到1-(4-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(60mg，粗品)，为白色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝336.1[M+1]+。
步骤D：N-(6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将1-(4-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(60mg，0.18mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(113mg，0.21mmol)、乙基二异丙基胺(68mg，0.54mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(32mg，0.21mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌过夜。浓缩后，将残留物通过制备HPLC纯化(A：乙腈25-45％；B：在水中的0.05％wt甲酸)，得到N-(6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，58％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.39(s,1H),8.86-8.75(m,3H),8.43(s,1H),8.17(s,1H),7.08(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.68(s,1H),5.33(s,1H),3.69-3.61(m,2H),3.25(d,J＝16.0Hz,1H),3.08-2.90(m,8H),2.58-2.50(m,2H),1.46(s,3H),1.26(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝481.2[M+1]+。
实施例152：N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在镁(2400mg，100mmol)和碘(180mg，0.71mmol)在乙醚(25mL)中的溶液中在回流下缓慢加入1-(溴甲基)-2,4-二氟苯(8200.0mg，39.61mmol)并且搅拌30分钟。在4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(6500.0mg，32.62mmol)在乙醚(200mL)中的溶液中加入Grignard试剂并且在-78℃，然后在室温搅拌2小时。加入水和EtOAc(200mL)。将有机层分离并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用石油醚:乙酸乙酯(4:1至2:1)作为洗脱溶剂，得到4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(9500mg，73％)，为白色固体。MS(ESI)：m/z＝350.1[M+23]+。
步骤B：6-氟-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯
4-[(2,4-二氟苯基)甲基]-4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(818.0mg，2.5mmol)和叔丁醇钾(700.95mg，6.25mmol)在四氢呋喃(50mL)中的混合物在65℃搅拌3小时。在反应混合物中加入水并且将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且浓缩至干燥，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(644mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI):m/z＝252.2[M-55]+。
步骤C：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]
在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-甲酸叔丁酯(644.0mg，2.1mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入三氟乙酸(2mL)。将反应溶液在室温搅拌2小时。在反应中加入饱和的碳酸氢钠(20mL)。将水层用20mL二氯甲烷萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤并且经无水硫酸镁干燥。除去溶剂后，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](429mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝208.2[M+1]+。
步骤D：6-氟-1’-甲基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]
在室温，在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](429.0mg，1.51mmol)在甲醇(40mL)中的溶液中加入甲醛(28％wt，在水中，1.5mL)。将反应溶液在室温搅拌30分钟。缓慢加入硼氢化钠(574.22mg，15.11mmol)并且将反应在室温搅拌2小时。在反应溶液中加入饱和的氯化铵(200mL)并且将水层用200mL乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤并且经无水硫酸镁干燥。浓缩后，得到6-氟-1’-甲基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](402mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝222.2[M+1]+。
步骤E：6-氟-1’-甲基-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]
在6-氟-1’-甲基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](402.0mg，1.82mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(1.7mL，27.25mmol)。将混合物在室温搅拌30分钟。加入水(50mL)。加入碳酸氢钠直至达到pH＝7并且将水层用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-氟-1’-甲基-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶](399mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝267.1[M-55]+。
步骤F：1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]
将6-氟-1’-甲基-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶](399.0mg，1.5mmol)、吗啉(195.82mg，2.25mmol)和碳酸钾(516.64mg，3.75mmol)在乙腈(10mL)中的混合物在25℃搅拌过夜。加入水并且将水层用20mL乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用饱和的盐水洗涤并且经无水硫酸镁干燥。浓缩后，得到1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶](467mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝334.2[M+1]+。
步骤G：1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-胺
将10wt％钯炭(70.0mg)和1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶](467.0mg，1.4mmol)在甲醇(40mL)中的混合物在室温、氢气气氛下搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-胺(419mg，粗品)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝304.3[M+1]+。
步骤H：N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(109.69mg，0.6700mmol)、(3-羟基-3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶(pyridinato)-O)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐(385.62mg，0.74mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(260.7mg，2.02mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物中加入在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-胺(204.0mg，0.6700mmol)并且将反应在室温搅拌过夜。将粗品通过反相色谱纯化(Xbridge Prep C18 10um OBD,19*250mm,A：乙腈30-60％；B：在水中的0.01％wt氢氧化铵和10mM碳酸铵)，得到N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(121mg，40％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.46(s,1H),8.83(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.78(s,1H),8.77(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.43(s,1H),7.06(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.69(s,1H),3.99-3.91(m,4H),3.02(s,2H),2.94-2.88(m,4H),2.66-2.44(m,4H),2.35(s,3H),2.05-1.95(m,2H),1.89-1.79(m,2H)。MS(ESI)：m/z＝449.3[M+1]+。
实施例153和154：(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(2,4-二氟苄基)-3,3,3-三氟-2-羟基丙酸甲酯
在镁粉(3290.81mg，137.12mmol)和碘(243.76mg，0.96mmol)在乙醚(50mL)中的溶液中在回流下滴加入2,4-二氟苄基溴(11291.0mg，54.54mmol)并且搅拌30分钟。然后在-78℃将Grignard溶液加入至3,3,3-三氟-2-氧代丙酸甲酯(8567.5mg，54.92mmol)在乙醚(200mL)中的溶液中并且搅拌30分钟，然后在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵溶液和乙酸乙酯(200mL)。分离有机相并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:20至1:10)作为洗脱溶剂，得到3-(2,4-二氟苯基)-2-羟基-2-甲基-丙酸甲酯(9.7g，63％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝307.1[M+23]+。
步骤B：2-(2,4-二氟苄基)-3,3,3-三氟-2-羟基丙酸
将2-(2,4-二氟苄基)-3,3,3-三氟-2-羟基丙酸甲酯(9.7g，34.13mmol)和氢氧化钾(5.73g，102.4mmol)在甲醇(100mL)和水(50mL)中的混合物在50℃搅拌2小时。冷却至室温后，加入1N盐酸直至pH＝3.0。将水相用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-(2,4-二氟苄基)-3,3,3-三氟-2-羟基丙酸(9.2g，粗品)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.29(m,1H),6.85-6.77(m,2H),3.45(d,J＝16.0Hz,1H),3.20(d,J＝16.0Hz,1H)。
步骤C：6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸
在室温，在2-(2,4-二氟苄基)-3,3,3-三氟-2-羟基丙酸(3.6g，13.33mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)和甲苯(20mL)中的混合物中加入氢化钠(1.06g，26.65mmol)。将混合物在110℃搅拌过夜。冷却至室温后，加入1N盐酸直至pH＝3.0。将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(3.3g，粗品)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝273.1[M+23]+。
步骤D：6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
在6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸(500mg，2.0mmol)和碳酸铯(1.3g，4.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物中加入碘甲烷(570mg，4.0mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。加入水并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(500mg，粗品)，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.12-7.09(m,1H),6.70-6.66(m,2H),3.89(s,3H),3.68(d,J＝16.0Hz,1H),3.62(d,J＝16.0Hz,1H)。
步骤E：6-氟-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
在6-氟-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(3.8g，8.77mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物中加入发烟硝酸(4.0mL)。将混合物在室温搅拌1小时。将混合物倾倒入冰水中并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机相分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚从1:20至1:5作为洗脱溶剂，得到6-氟-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(2.6g，96％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00(d,J＝7.2Hz,1H),6.86(d,J＝10.4Hz,1H),3.93(s,3H),3.76(d,J＝15.6Hz,1H),3.70(d,J＝15.6Hz,1H)。MS(ESI)：m/z＝310.0[M+1]+。
步骤F：6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯
将吗啉(108mg，1.25mmol)、6-氟-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸酯(350mg，1.13mmol)和碳酸铯(738mg，2.26mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在室温搅拌3小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(40mL)萃取。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(400mg，84％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝377.1[M+1]+。
步骤G：(6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在0℃，在6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-甲酸甲酯(400mg，1.06mmol)在四氢呋喃(20mL)和乙醇(5mL)中的混合物中加入硼氢化钠(121.19mg，3.19mmol)和氯化锂(134mg，3.19mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵溶液和乙酸乙酯(50mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到(6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(370mg，粗品)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝349.1[M+1]+。
步骤H：(5-氨基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
在室温、氢气气氛下，将钯炭(60mg，10％wt)和(6-吗啉代-5-硝基-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(370mg，1.06mmol)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到(5-氨基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(50mg，粗品)，为深色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝319.1[M+1]+。
步骤I：(R)-N-(2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[5-氨基-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-2-基]甲醇(310mg，0.97mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(167mg，1.02mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(558mg，1.07mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(354mg，2.92mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌2小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(9:1)，得到250mg外消旋产物，为黄色固体。将产物通过手性制备SFC拆分(柱：OJ 4.6*250mm，5um(Decial)，流动相：CO2/MeOH(0.2％甲醇氨)＝65/35)，得到N-[(2R)-2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(羟基甲基)-6-吗啉代-2-(三氟甲基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(105mg，22％)(100mg，21％)，为淡黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例153，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.49(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.76(dd,J＝4.0,6.4Hz,1H),8.49(s,1H),7.08(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),6.77(s,1H),4.07(d,J＝12.4Hz,1H),3.96-3.93(m,4H),3.86(d,J＝12.4Hz,1H),3.53(d,J＝16.4Hz,1H),3.42(d,J＝16.4Hz,1H),2.92-2.89(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝464.2[M+1]+。
实施例154，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.49(s,1H),8.84(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.76(dd,J＝4.0,6.4Hz,1H),8.49(s,1H),7.08(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),6.77(s,1H),4.07(d,J＝12.4Hz,1H),3.96-3.93(m,4H),3.86(d,J＝12.4Hz,1H),3.53(d,J＝16.4Hz,1H),3.42(d,J＝16.4Hz,1H),2.92-2.89(m,4H)。MS(ESI)：m/z＝464.2[M+1]+。
实施例155和156：(R)-N-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇
将吗啉(230mg，2.64mmol)、(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体3)(300mg，1.32mmol)和碳酸钾(364mg，2.64mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在室温搅拌3小时。加入水并且将混合物用乙酸乙酯(40mL)萃取。将有机层浓缩，得到(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(420mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝295.1[M+1]+。
步骤B：4-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉
在50℃，在(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(180mg，0.61mmol)和碘化亚铜(34mg，0.24mmol)在乙腈(20mL)中的混合物中加入二氟(氟磺酰基)乙酸(218mg，1.22mmol)。将混合物在50℃搅拌1小时。将混合物浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(3:20)，得到4-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(70mg，31％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝345.1[M+1]+。
步骤C：2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在室温、氢气气氛下，将钯炭(20mg，10％wt)和4-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吗啉(70mg，0.2mmol)在甲醇(15mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(60mg，粗品)，为绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝315.1[M+1]+。
步骤D：(R)-N-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(80mg，0.5mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(324mg，0.62mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(150mg，1.24mmol)和2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(140mg，0.42mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌2小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(3:1)作为洗脱溶剂，得到N-(2-(羟基甲基)-2,7-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(140mg，73％)，为黄色固体。将产物通过手性制备SFC拆分(柱：AD20*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/MEOH{0.5％氨(7M甲醇)}＝70/30)，得到N-[(2R)-2-(二氟甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(二氟甲氧基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，53％)(45mg，47％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例155，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.36(dd,J＝1.5,6.8Hz,1H),8.94(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.73(t,J＝75.2Hz,1H),6.77(s,1H),3.94(s,2H),3.85-3.83(m,4H),3.18(d,J＝15.6Hz,1H),2.97(d,J＝15.6Hz,1H),2.83-2.81(m,4H),1.42(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝460.2[M+1]+。
实施例156，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.36(dd,J＝1.5,6.8Hz,1H),8.94(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.73(t,J＝75.2Hz,1H),6.77(s,1H),3.94(s,2H),3.85-3.83(m,4H),3.18(d,J＝15.6Hz,1H),2.97(d,J＝15.6Hz,1H),2.83-2.81(m,4H),1.42(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝460.2[M+1]+。
实施例157和158：(R)-N-(2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇
在-78℃、N2气氛下，在6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-甲酸甲酯(877mg，4.17mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的溶液中滴加入甲基溴化镁(3M，在乙醚中，4.17mL，12.52mmol)。将混合物在-78℃搅拌1小时。将混合物用饱和氯化铵溶液猝灭。加入乙酸乙酯(50mL)。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-(6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(800mg，粗品)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝193.1[M-17]+。
步骤B：2-(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇
在2-(6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(400mg，1.9mmol)在二氯甲烷(15mL)中的混合物中加入浓硝酸(60-70％wt，0.5mL)。将混合物在室温搅拌1小时。将混合物倾倒入冰水中并且用二氯甲烷(30mL)萃取。将有机层分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，乙酸乙酯:石油醚(1:4)作为洗脱溶剂，得到2-(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(320mg，59％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝7.8Hz,1H),6.61(d,J＝12.8Hz,1H),3.54(d,J＝15.6Hz,1H),2.82(d,J＝15.6Hz,1H),1.38(s,3H),1.24(s,6H)。
步骤C：2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇
将吗啉(218mg，2.51mmol)、2-(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(320mg，1.25mmol)和碳酸钾(346mg，2.51mmol)在乙腈(20mL)中的混合物在室温搅拌3小时。加入水并且将水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(318mg，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝323.2[M+1]+。
步骤D：2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇
在室温、氢气气氛下，将钯炭(100mg，10％wt)和2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(300mg，0.93mmol)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌1小时。过滤并且减压浓缩后，得到2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(280mg，粗品)，为绿色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤E：(R)-N-(2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(174mg，1.07mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(695mg，1.33mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(323mg，2.67mmol)和2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(260mg，0.89mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌2小时。将粗反应产物通过制备HPLC纯化(Gilson 281,Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A:乙腈，25-55％，B：在水中的10M碳酸氢铵)，得到N-(2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg)，为黄色固体。将产物通过手性制备SFC拆分(柱：AD20*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/MEOH{0.5％氨(7M甲醇)}＝70/30)，得到N-[(2R)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，45％)(50mg，50％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例157，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.68(s.1H),8.29(s,1H),7.34(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),6.71(s,1H),4.53(s,1H),3.85-3.83(m,4H),3.46(d,J＝16.0Hz,1H),2.83-2.81(m,4H),2.73(d,J＝16.0Hz,1H),1.32(s,3H),1.17(d,J＝5.2Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝438.3[M+1]+。
实施例158，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.68(s.1H),8.29(s,1H),7.34(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),6.71(s,1H),4.53(s,1H),3.85-3.83(m,4H),3.46(d,J＝16.0Hz,1H),2.83-2.81(m,4H),2.73(d,J＝16.0Hz,1H),1.32(s,3H),1.17(d,J＝5.2Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝438.3[M+1]+。
实施例159和160：(R)-N-(2-环丙基-6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-环丙基-6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-环丙基-1-(2,4-二氟苯基)丙-2-醇
在-78℃、氮气气氛下，在1-(2,4-二氟苯基)丙-2-酮(通过实施例14步骤B的类似方法制备)(900.0mg，5.29mmol)在四氢呋喃(20mL)中的混合物中滴加入环丙基溴化镁(0.5M，在四氢呋喃中，10.58mL，5.29mmol)。将混合物在室温搅拌1小时。将反应通过加入饱和的氯化铵(20mL)猝灭。将混合物用乙酸乙酯(50mL)萃取两次。将合并的有机层用水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到2-环丙基-1-(2,4-二氟苯基)丙-2-醇(800.0mg，68％)，为淡黄色泡沫状物。MS(ESI)：m/z＝195.1[M-17]+。
步骤B：2-环丙基-6-氟-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃
将2-环丙基-1-(2,4-二氟苯基)丙-2-醇(600.0mg，2.83mmol)和叔丁氧基钾(1268.9mg，11.31mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物在65℃搅拌3小时。冷却至室温后，加入水和乙酸乙酯(20mL)。将有机层分离并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:10)作为洗脱溶剂，得到2-环丙基-6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃(460.0mg，80％)，为无色油状物。MS(ESI)：m/z＝193.1[M+H]+。
步骤C：2-环丙基-6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃
在0℃，在2-环丙基-6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃(460.0mg，2.39mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中缓慢加入发烟硝酸(0.5mL)并且搅拌15分钟。将混合物倾倒入冰水中和将有机层分离并且经无水硫酸钠干燥。浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:15)作为洗脱溶剂，得到2-环丙基-6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(450.0mg，75％)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝238.1[M+1]+。
步骤D：1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-(2,2-二氟乙基)哌嗪
将2-环丙基-6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(220.0mg，0.93mmol)、1-(2,2-二氟乙基)哌嗪二盐酸盐(310.3mg，1.39mmol)和碳酸铯(906.5mg，2.78mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在60℃搅拌过夜。将反应混合物过滤并且将滤液减压浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:2)，得到1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-(2,2-二氟乙基)哌嗪(300.0mg，84％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝368.2[M+1]+。
步骤E：2-环丙基-6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
在25℃、氢气气氛下，将1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-(2,2-二氟乙基)哌嗪(150.0mg，0.41mmol)和钯炭(15.0mg，10％wt)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌2小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到2-环丙基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(100.0mg，粗品)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝338.3[M+1]+。
步骤F：(R)-N-(2-环丙基-6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-环丙基-6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-环丙基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(240.0mg，0.71mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(370.9mg，0.71mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(275.8mg，2.13mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在室温搅拌30分钟。然后加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(116.0mg，0.71mmol)。将产生的混合物在室温搅拌过夜。加入水和乙酸乙酯(30mL)并且将有机层分离并且经硫酸钠干燥。过滤并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)，然后通过手性pre-HPLC拆分(柱：AS-H 20*250mm，5um(Dacel)，流动相：己烷(0.1％DEA)/乙醇(0.1％DEA)＝80/20)，得到N-[(2R)-2-环丙基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-环丙基-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(40mg，12％)(55mg，16％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例159，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.38(s,1H),9.35(d,J＝6.8Hz,1H),8.94(d,J＝2.8Hz,1H),8.67(s,1H),8.29(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.68(s,1H),6.19(tt,J＝4.0,56.0Hz,1H),2.98(q,J＝15.6,32.0Hz,2H),2.91-2.73(m,10H),1.36(s,3H),1.25-1.16(m,1H),0.46-0.40(m,3H)0.31-0.27(m,1H)。MS(ESI)：m/z＝483.3[M+1]+。
实施例160，峰2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.38(s,1H),9.35(d,J＝6.8Hz,1H),8.94(d,J＝2.8Hz,1H),8.67(s,1H),8.29(s,1H),7.35(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.68(s,1H),6.19(tt,J＝4.0,56.0Hz,1H),2.98(q,J＝15.6,32.0Hz,2H),2.91-2.73(m,10H),1.36(s,3H),1.25-1.16(m,1H),0.46-0.40(m,3H)0.31-0.27(m,1H)。MS(ESI)：m/z＝483.3[M+1]+。
实施例161和162：(R)-N-(2-环丙基-6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-环丙基-6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸盐
将4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.29mmol)在三氟乙酸(1mL)和二氯甲烷(2mL)中的混合物在20℃搅拌1小时。将混合物减压浓缩，得到(4-氟哌啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸盐(300mg，1.21mmol，粗品)，为无色油状物，将其直接用于下面的步骤而无需纯化。MS(ESI):m/z＝134.1[M+1]+。
步骤B：(1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇
将2-环丙基-6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(实施例159和160，步骤C)(110.0mg，0.46mmol)、(4-氟-4-哌啶基)甲醇和碳酸钾(192.3mg，1.39mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物过滤并且将滤液真空浓缩并且将残留物在硅胶色谱上纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:5)作为洗脱溶剂，得到[1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲醇(130.0mg，76％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝351.2[M+1]+。
步骤F：(1-(5-氨基-2-环丙基-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-4-氟哌啶-4-基)甲醇
在25℃、氢气气氛下，将[1-(2-环丙基-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲醇(130.0mg，0.37mmol)和钯炭(13mg，10％wt)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌1小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到[1-(5-氨基-2-环丙基-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲醇(100.0mg，粗品)，为无色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝321.2[M+1]+。
步骤G：(R)-N-(2-环丙基-6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-环丙基-6-(4-氟-4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[1-(5-氨基-2-环丙基-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲醇(100.0mg，0.3100mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(56.7mg，0.31mmol)、(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(162.7mg，0.31mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(121.0mg，0.94mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在室温搅拌过夜。加入水和乙酸乙酯(30mL)并且将有机层分离。将有机层用盐水洗涤并且经硫酸钠干燥。过滤后，将混合物浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(10:1)并且通过手性制备HPLC拆分(柱CE-4，流动相：正己烷(0.1％DEA)：EtOH(0.1％DEA)＝70:30，流速：50mL/分钟)，得到N-[(2S)-2-环丙基-6-[4-氟-4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-2-环丙基-6-[4-氟-4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(36.0mg，25％；25.0mg，17％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例161，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.41(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.88(dd,J＝1.2,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.33(dd,J＝4.0,7.2Hz,1H),6.68(s,1H),5.15(t,J＝6.0Hz,1H),3.53(dd,J＝6.0,18.0Hz,2H),2.99(q,J＝16.0,31.6Hz,2H),2.92-2.78(m,4H),2.15-1.95(m,2H),1.91-1.75(m,2H),1.37(s,3H),1.27-1.16(m,1H),0.46-0.36(m,3H)0.33-0.26(m,1H)。MS(ESI)：m/z＝466.2[M+1]+。
实施例162，峰2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.41(s,1H),9.36(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.88(dd,J＝1.2,4.0Hz,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.33(dd,J＝4.4,7.2Hz,1H),6.68(s,1H),5.15(t,J＝6.0Hz,1H),3.52(dd,J＝6.0,18.0Hz,2H),2.99(q,J＝16.0,31.6Hz,2H),2.92-2.78(m,4H),2.14-1.94(m,2H),1.91-1.79(m,2H),1.36(s,3H),1.27-1.17(m,1H),0.46-0.36(m,3H)0.33-0.26(m,1H)。MS(ESI)：m/z＝466.2[M+1]+。
实施例163和164：(R)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸(100.0mg，0.79mmol)和2-氯丙二醛(84.0mg，0.79mmol)在乙酸(1mL)和0.3mL乙醇中的混合物在60℃搅拌2小时。过滤后，将湿滤饼用甲醇洗涤并且真空干燥，得到6-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(80mg，粗品)，为白色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝179.9[M-17]+。
步骤B：[1-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇
将(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体3)(285mg，1.22mmol)和4-哌啶基甲醇(211mg，1.83mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在20℃搅拌2小时。减压除去溶剂并且将残留物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(从1:1至2:1)作为洗脱溶剂，得到[1-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇(360mg，91％)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝323.1[M+1]+。
步骤C：[1-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇
在20℃、氢气气氛下，将[1-[2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇(120mg，0.37mmol)和钯炭(20mg，10％wt)在甲醇(10mL)中的混合物搅拌2小时。过滤并且减压浓缩后，得到[1-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇(87mg)，为棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝293.2[M+1]+。
步骤D：(R)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将[1-[5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-6-基]-4-哌啶基]甲醇(87mg，0.30mmol)、6-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(70mg，0.36mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐(170mg，0.45mmol)和二异丙基乙基胺(115mg，0.89mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在20℃搅拌2小时。将混合物通过硅胶色谱纯化，应用乙酸乙酯:石油醚(1:1至2:1)作为洗脱溶剂，得到6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，81％)，为黄色固体。将产物通过手性SFC拆分(SFC-80(Thar,水s),AD 20*250mm，5um(Dacel)，流动相：CO2/MEOH{0.5％氨(7M甲醇)}＝60/40)，得到(S)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-6-氯-N-(2-(羟基甲基)-6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(43.1mg，72％)(28.9mg，48％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例163，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.39(s,1H),9.81-9.80(m,1H),8.98-8.97(m,1H),8.69(s,1H),8.31(s,1H),6.67(s,1H),5.02(t,J＝5.6Hz,1H),4.64(t,J＝4.8Hz,1H),3.45-3.39(m,4H),3.20-3.17(m,1H),2.91-2.89(m,2H),2.83-2.79(m,1H),2.66-2.60(m,2H),1.67-1.63(m,4H),1.51-1.48(m,1H),1.33(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝472.2[M+1]+。
实施例164，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.39(s,1H),9.81(d,J＝2.0Hz,1H),8.98(d,J＝2.0Hz,1H),8.69(s,1H),8.31(s,1H),6.67(s,1H),5.02(t,J＝5.6Hz,1H),4.64(t,J＝4.8Hz,1H),3.45-3.39(m,4H),3.20-3.17(m,1H),2.91-2.89(m,2H),2.83-2.79(m,1H),2.66-2.60(m,2H),1.67-1.63(m,4H),1.51-1.48(m,1H),1.33(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝472.2[M+1]+。
表5.类似于实施例163和163的方法制备以下实施例。
实施例171和172：(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
类似于实施例70的方法制备标题化合物，得到N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，将其通过手性SFC拆分，得到N-[(2R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲氧基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(73.9mg，38.1％产率)和N-[(2S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(三氟甲氧基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(73.4mg，37.9％产率)，为淡黄色固体。基于峰洗脱任意指定立体化学。
实施例171峰1：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6):δ10.23(s,1H),9.40(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),8.83(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),8.72(s,1H),8.28(s,1H),7.34(dd,J＝4.4,7.2Hz,,1H),6.86(s,1H),5.11(t,J＝5.6Hz,1H),3.53-3.40(m,2H),3.28(d,J＝16.4Hz,1H),2.92(d,J＝16.4Hz,1H),1.37(s,3H).19F NMR(400MHz,DMSO-d6)δ-57.24(s,3F)。MS(ESI)：m/z＝409.1[M+1]+。
实施例172峰2：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6):δ10.23(s,1H),9.40(dd,J＝1.6,6.8Hz,1H),8.83(dd,J＝1.6,4.0Hz,1H),8.72(s,1H),8.28(s,1H),7.34(dd,J＝4.0,6.8Hz,,1H),6.85(s,1H),5.11(t,J＝5.6Hz,1H),3.53-3.40(m,2H),3.28(d,J＝16.4Hz,1H),2.92(d,J＝16.4Hz,1H),1.37(s,3H).19F NMR(400MHz,DMSO-d6)δ-57.24(s,3F)。MS(ESI)：m/z＝409.1[M+1]+。
实施例173：N-[6-吗啉代-1-氧代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-氯-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮
在2-(溴甲基)-5-氯-4-硝基-苯甲酸甲酯(制备5，WO 2013079505(150mg，0.49mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入三乙胺(0.081mL，0.58mmol)和2,2,2-三氟乙基胺(0.047mL，0.58mmol)。将反应加热至70℃达18小时，浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到6-氯-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(90mg，63％)。LCMS(ESI)m/z：295.0[M+H]+。
步骤B：6-吗啉代-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮
将6-氯-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(90mg，0.31mmol)、吗啉(0.032mL，0.37mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.100mL，0.61mmol)在二甲亚砜(1.5mL)中的溶液在80℃加热18小时。将反应冷却至室温，然后用水稀释并且用乙酸异丙酯(3x)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到6-吗啉代-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(87mg，82％)。LCMS(ESI)m/z：346.0[M+H]+。
步骤C：5-氨基-6-吗啉代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮
在6-吗啉代-5-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(60mg，0.17mmol)在乙醇(3.5mL)和水(1.0mL)中的溶液中加入铁(48mg，0.87mmol)和氯化铵(37mg，0.69mmol)。将反应混合物加热至50℃达6小时。将反应混合物冷却至室温，然后通过硅藻土过滤并且浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到5-氨基-6-吗啉代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(40mg，73％)。LCMS(ESI)m/z：316.0[M+H]+。
步骤D：N-[6-吗啉代-1-氧代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-氨基-6-吗啉代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-1-酮(50mg，0.16mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(60mg，0.32mmol)在1,2-二氯乙烷(2.00mL)中的溶液中加入三乙胺(0.090mL，0.63mmol)。将反应混合物在70℃搅拌18小时。将反应用水猝灭并且用乙酸乙酯萃取。将有机相用硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，然后通过反相HPLC纯化，得到N-[6-吗啉代-1-氧代-2-(2,2,2-三氟乙基)异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(14mg，19％)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.94(s,1H),9.43(dd,J＝7.0,1.5Hz,1H),9.01(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.80(s,1H),8.77(s,1H),7.66(s,1H),7.40(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),4.62(s,2H),4.38(q,J＝9.7Hz,2H),3.90(t,J＝4.4Hz,4H),2.93(t,J＝4.5Hz,4H)。LCMS(ESI)m/z:461.1[M+H]+。
表6.类似于实施例173的方法制备以下实施例：
表7.类似于实施例4的方法制备以下实施例：
实施例248：N-(6-(2-(2,2-二氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体4；200mg，0.74mmol)和碳酸铯(790mg，2.43mmol)在乙腈(2.23mL)中的混合物中加入2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯和草酸(256mg，0.809mmol)。将混合物在60℃加热16小时，冷却至室温，并且用水和乙酸异丙酯稀释。将水相分离并且用乙酸异丙酯(3x)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且通过快速柱色谱纯化(洗脱梯度0-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到标题化合物(177mg，0.424mmol，58％产率)，为亮黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.82(s,1H),6.54(s,1H),3.58(s,5H),2.99(s,2H),2.90-2.82(m,4H),1.82-1.73(m,4H),1.43(s,6H),1.38(s,9H)。
步骤B：7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷
将7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(176mg，0.422mmol)溶于二氯甲烷(3.3mL)中并且用三氟乙酸(1.3mL)处理，10分钟后，减压除去溶剂。将产物应用而无需进一步纯化。
步骤C：2-(2,2-二氟乙基)-7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷
将7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷(67mg，0.21mmol)溶于二氯甲烷(8mL)并且缓慢用可力丁(0.61mL，4.6mmol)处理，然后用三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(0.044mL，0.32mmol)处理。18小时后，加入甲醇(5mL)和碳酸钾。将反应混合物在环境温度剧烈搅拌4小时，然后用水和乙酸异丙酯稀释。将水相分离并且用乙酸异丙酯(3x)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度0-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到2-(2,2-二氟乙基)-7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷(61mg，0.16mmol)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.81(s,1H),6.54(s,1H),5.93(tt,J＝55.9,4.3Hz,1H),3.08(s,4H),2.98(s,2H),2.85(m,4H),2.82(d,J＝4.3Hz,2H),1.82-1.72(m,4H),1.43(s,6H)。
步骤D：6-(2-(2,2-二氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
将2-(2,2-二氟乙基)-7-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷(61mg，0.16mmol)、铁(77mg，1.4mmol)和氯化铵(74mg，1.4mmol)在乙醇(6mL)和水(2mL)中的混合物在80℃搅拌30分钟。将混合物通过硅藻土和小二氧化硅垫过滤，得到6-(2-(2,2-二氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(0.16mmol)，将其应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ6.50(s,1H),6.28(s,1H),4.16(s,2H),3.32-3.15(m,254H),3.08(s,4H),2.82(s,5H),2.69-2.65(m,1H),2.61(s,4H),1.78(t,J＝5.3Hz,4H),1.33(s,6H)。
步骤E：N-(6-(2-(2,2-二氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃、氢气气氛下，在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(20.3mg，0.124mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液中加入(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(62mg，0.119mmol)，然后加入2,4,6-三甲基吡啶(0.119mmol)。然后加入6-[2-(2,2-二氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(38mg，0.11mmol)并且将反应混合物温至室温。16小时后，将混合物通过二氧化硅垫过滤并且真空浓缩。将残留物通过反相HPLC纯化，得到标题化合物(23mg，0.047mmol，44％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.46(s,1H),9.35(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.74(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.32(d,J＝1.0Hz,1H),7.32(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),5.95(tt,J＝55.9,4.2Hz,1H),3.15(s,4H),2.99(s,2H),2.84(td,J＝16.1,4.3Hz,2H),2.75-2.63(m,4H),1.92(m,4H),1.40(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝497.2[M+1]+。
实施例249：N-(2,2-二甲基-6-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例248的方法制备，用三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯代替三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(步骤C)，得到N-(2,2-二甲基-6-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(26mg，62％产率)，为橙色结晶固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.46(s,1H),9.35(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.75(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.32(d,J＝0.9Hz,1H),7.32(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),3.26-3.16(m,6H),2.99(s,2H),2.77-2.63(m,4H),1.98-1.88(m,4H),1.40(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝515.2[M+1]+。
实施例250：N-[2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：5-氟-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯
在1-溴-5-氟-2-甲基-4-硝基苯(5.0g，21.36mmol)和三乙胺(50mL，360.71mmol)在乙醇(100mL)中的溶液中加入二(三苯膦)二氯化钯(II)(1.5g，2.14mmol)。将反应在70℃、一氧化碳(50psi)下搅拌16小时。将反应通过硅藻土过滤并且将滤液浓缩至干燥。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱10％乙酸乙酯:石油醚)，得到5-氟-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(2.0g，41％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝7.2Hz,1H),7.82(d,J＝11.6Hz,1H),4.42(q,J＝7.2Hz,2H),2.63(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤2：2-(溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯
在5-氟-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(200mg，0.88mmol)在四氯化碳(5mL)中的溶液中加入苯甲酰基过氧化物(43mg，0.18mmol)和N-溴琥珀酰亚胺(313mg，1.76mmol)。将混合物在100℃、氮气下搅拌16小时。将反应浓缩至干燥并且将粗反应产物通过快速柱色谱纯化(洗脱20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯(110mg，41％产率)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝6.4Hz,1H),7.90(d,J＝10.8Hz,1H),4.92(s,2H),4.50(q,J＝7.2Hz,2H),1.49(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤3：6-氟-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮
在2-(溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯(110mg，0.36mmol)在甲醇(3mL)中的溶液中加入2-氨基-2-甲基-1-丙醇(64mg，0.72mmol)和三乙胺(73mg，0.72mmol)。将混合物在70℃搅拌6小时。将混合物浓缩并且通过制备TLC纯化(在石油醚中的50％乙酸乙酯)，得到6-氟-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(60mg，62％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(d,J＝6.4Hz,1H),7.70(d,J＝9.2Hz,1H),4.58(s,2H),4.17(t,J＝6.8Hz,1H),3.94(d,J＝6.8Hz,2H),1.49(s,6H)。
步骤4：2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮
在6-氟-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(240mg，0.89mmol)在二甲亚砜(4mL)中的溶液中加入吗啉(156mg，1.79mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(231mg，1.79mmol)。将混合物在90℃搅拌3小时。将混合物浓缩并且通过制备TLC纯化(在石油醚中的50％乙酸乙酯)，得到2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(245mg，82％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(s,1H),7.60(s,1H),4.59(t,J＝6.8Hz,1H),4.51(s,2H),3.91(d,J＝6.8Hz,2H),3.87(t,J＝4.4Hz,4H),3.10(t,J＝4.4Hz,4H),1.47(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝336.1[M+H]+。
步骤5：5-氨基-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-异二氢吲哚-1-酮
在2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(245mg，0.73mmol)在乙醇(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入铁(204mg，3.65mmol)和氯化铵(195mg，3.65mmol)。将反应在80℃搅拌2小时。将反应过滤并且将滤液浓缩。将粗材料用水(10mL)稀释并且用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到5-氨基-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-异二氢吲哚-1-酮(210mg，94％产率)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝305.9[M+H]+。
步骤6：N-[2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-氨基-2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-异二氢吲哚-1-酮(210mg，0.69mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(267mg，2.06mmol)和4-二甲基氨基吡啶(17mg，0.14mmol)在1,2-二氯乙烷(8mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(200mg，1.10mmol)。将反应混合物在35℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过反相HPLC纯化(在水中的20-50％乙腈，含0.05％氢氧化氨)，得到N-[2-(2-羟基-1,1-二甲基-乙基)-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60.8mg，19％产率)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.89(s,1H),9.41(d,J＝5.6Hz,1H),9.00(d,J＝2.8Hz,1H),8.76(s,1H),8.70(s,1H),7.50(s,1H),7.40(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),4.95(t,J＝5.6Hz,1H),4.57(s,2H),3.92-3.86(m,4H),3.69(d,J＝6.0Hz,2H),2.92-2.85(m,4H),1.43(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝451.1[M+H]+。
表8.以类似于实施例250的方法制备以下实施例
实施例286：N3-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺
将6-溴-N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例269；80mg，0.14mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(13.5mg，0.014mmol)、1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁(16.0mg，0.029mmol)和氰化锌(37mg，0.31mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液用氮气吹扫并且在120℃搅拌30分钟。将反应用水猝灭并且用乙酸乙酯萃取。将有机相分离，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-20％甲醇:二氯甲烷)，然后通过反相HPLC纯化，得到N3-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺(2.6mg，4％)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ11.00(s,1H),10.09(s1H),8.96(1H),8.76(s,1H),8.71(s,1H),4.90(s,1H),4.61-4.46(m,3H),4.34-4.40(m,1H),4.04-3.86(m,5H),2.96-2.89(m,4H),1.39-1.18(m,6H)。LCMS(ESI)m/z:526.2[M+H]+。
实施例287：N-(2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-氯-2-甲基-4-硝基-苯磺酰氯
在-5℃，在冷的并且充分搅拌的乙酸(1.84mL，32.15mmol)和盐酸(10mL，120mmol)的溶液中分小批加入5-氯-2-甲基-4-硝基苯基胺(6.0g，32.15mmol)，然后将在水(6mL)中的亚硝酸钠(2.9g，41.80mmol)滴加入混合物中并且在-5℃搅拌3小时，得到重氮盐溶液。在另外的烧瓶中，将浓盐酸(10mL)滴加入亚硫酸钠(18.7g，180.06mmol)中，得到二氧化硫，将其鼓入乙酸(10mL)中，得到二氧化硫在乙酸中的溶液。将氯化亚铜(637mg，6.43mmol)加入至产生的溶液中。在-5℃将重氮盐的溶液滴加入二氧化硫在乙酸中的溶液中。加入后，将混合物在-5℃再搅拌3小时。在混合物中加入水(50mL)，将其用二氯甲烷(150mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(150mL x 3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗材料通过快速柱纯化(洗脱0-10％乙酸乙酯:石油醚)，得到5-氯-2-甲基-4-硝基-苯磺酰氯(4.5g，52％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.92(s,1H),7.90(s,1H),2.57(s,3H)。
步骤B：5-氯-N-异丙基-2-甲基-4-硝基-苯磺酰胺
在5-氯-2-甲基-4-硝基-苯磺酰氯(2.0g，7.4mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(1.9g，14.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中加入异丙基胺(525mg，8.88mmol)。将混合物在20℃搅拌30分钟，倾倒入水(50mL)中并且用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(150mL x 3)洗涤，经无水硫酸钠干燥并且浓缩至干燥。将残留物通过快速柱纯化(洗脱梯度0-20％乙酸乙酯:石油醚)，得到5-氯-N-异丙基-2-甲基-4-硝基-苯磺酰胺(1.8g，83％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ8.18-8.15(m,2H),8.06(s,1H),3.34-3.31(m,1H),2.67(s,3H),0.99-0.98(d,J＝6.0Hz,6H)。
步骤C：2-(溴甲基)-5-氯-N-异丙基-4-硝基-苯磺酰胺
在氮气气氛下，在5-氯-N-异丙基-2-甲基-4-硝基-苯磺酰胺(350mg，1.20mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中加入偶氮二异丁腈(20mg，0.12mmol)和N-溴琥珀酰亚胺(234mg，1.32mmol)。将混合物在70℃搅拌16小时，然后浓缩。将粗产物通过快速柱纯化(洗脱梯度0-20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(溴甲基)-5-氯-N-异丙基-4-硝基-苯磺酰胺(80mg，18％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(s,1H),8.05(s,1H),4.97(s,2H),3.63-3.50(m,1H),1.18(d,J＝6.4Hz,6H)。
步骤D：6-氯-2-异丙基-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物
在0℃，在2-(溴甲基)-5-氯-N-异丙基-4-硝基-苯磺酰胺(240mg，0.64mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中加入碳酸铯(420mg，1.30mmol)。将反应混合物在25℃搅拌30分钟。将反应混合物倾倒至冰水(20mL)中并且用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗材料通过快速柱纯化(洗脱梯度0-10％甲醇:二氯甲烷)。得到6-氯-2-异丙基-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物(160mg，85％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(s,1H),7.88(s,1H),4.43(s,2H),4.18-4.09(m,1H),1.41(d,J＝6.4Hz,6H)。
步骤E：2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物
在6-氯-2-异丙基-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物(160mg，0.56mmol)在二甲亚砜(4mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(72mg，0.56mmol)，加入吗啉(72mg，0.82mmol)。将混合物在90℃搅拌1小时。将反应混合物浓缩，并且通过制备TLC纯化(洗脱：20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物(160mg，85％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(s,1H),7.53(s,1H),4.36(s,2H),4.10-4.07(m,1H),3.86(t,J＝4.4Hz,4H),3.10-3.08(t,J＝4.4Hz,4H),1.40(d,J＝6.4Hz,6H)。
步骤F：2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺
在2-异丙基-6-吗啉代-5-硝基-3H-1,2-苯并噻唑1,1-二氧化物(160mg，0.46mmol)在乙醇(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入铁(130mg，2.34mmol)和氯化铵(63mg，1.17mmol)。将混合物在80℃搅拌2小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩。将残留物用水(20mL)稀释并且用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺(140mg)，为黄色固体，将其应用而无需进一步纯化。LCMS(ESI)：m/z＝312.1[M+H]+。
步骤G：N-(2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺(124mg，0.40mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(65mg，0.40mmol)在吡啶(4mL)中的溶液中加入磷酰氯(0.18mL，1.99mmol)。将反应在25℃搅拌5分钟。在10℃将反应混合物用饱和的碳酸氢钠溶液(10mL)猝灭并且用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过反相HPLC纯化(在含0.225％甲酸的水中的23-53％乙腈)，得到N-(2-异丙基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(71.3mg，39％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.91(s,1H),9.42-9.40(m,1H),9.01-9.00(m,1H),8.76-8.74(m,2H),7.78(s,1H),7.41-7.38(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),4.45(s,2H),3.90(t,J＝6.4Hz,4H),3.60-3.30(m,1H),2.94-2.92(m,4H),1.29(d,J＝6.8Hz,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝457.0[M+H]+。
实施例288：N-[2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
以实施例287的类似方法制备标题化合物，得到N-[2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(67mg，19％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.90(s,1H),9.43-9.41(m,1H),9.01-8.99(m,1H),8.77-8.75(m,1H),8.70-8.69(m,1H),7.83(s,1H),7.41-7.38(m,1H),4.65(s,1H),4.58(s,2H),3.95-3.85(m,4H),3.07(s,2H),2.95-2.90(m,4H),1.19(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝487.1[M+H]+。
实施例289：N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
以实施例287的类似方法制备标题化合物，得到N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.88(s,1H),8.89-8.81(m,4H),7.66(s,1H),7.15(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),4.72-4.58(m,2H),4.44-4.40(m,1H),4.03(t,J＝4.4Hz,4H),3.92-3.80(m,1H),3.48-3.42(m,1H),3.01(t,J＝4.4Hz,4H),1.35(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝519.2[M+H]+。
实施例290：((2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲基)磷酸二乙酯
将N-[2-(羟基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(142mg，0.35mmol)溶于四氢呋喃(2.6mL)中并且用三甲胺(0.07mL，0.52mmol)、氯磷酸二乙酯(0.06mL，0.38mmol)和4-二甲基氨基吡啶(47mg，0.38mmol)处理。加入二氯甲烷(2mL)并且将反应混合物在50℃加热。加入另外的氯磷酸二乙酯(0.55mL，3.82mmol)和三甲胺(0.73mL，5.22mmol)并且将反应在50℃搅拌2周。将反应混合物冷却至环境温度并且用二氯甲烷、水和盐水稀释。将水相分离并且萃取入二氯甲烷(3x)。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗残留物通过HPLC纯化，得到标题化合物(29mg，0.053mmol)。1HNMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.44(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.33(d,J＝1.0Hz,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.76(s,1H),4.03(d,J＝5.7Hz,2H),4.01-3.93(m,4H),3.84(m,4H),3.26-3.16(m,1H),3.05-2.92(m,1H),2.86-2.75(m,4H),1.42(s,3H),1.20(tdd,J＝7.1,2.8,0.9Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝546.2[M+1]+。
实施例291：(R)-N-(2,2-二甲基-6-(吡咯烷-2-基甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R)-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(395mg，1.92mmol)、叔丁醇钾(249mg，2.20mmol)和6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(250mg，1.10mmol)在二烷(6.1mL)中的混合物在40℃搅拌36小时。将反应混合物用水和乙酸异丙酯稀释。将水相分离并且用乙酸异丙酯(3x)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且通过快速柱色谱纯化(洗脱梯度0-50％乙酸异丙酯:庚烷)，得到标题化合物(196mg，0.498mmol，45％产率)，为橙黄色粘稠油状物。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.84(s,1H),6.75(s,1H),4.13(d,J＝4.0Hz,2H),4.08-3.94(m,2H),3.27(m,2H),3.00(d,J＝0.9Hz,2H),2.02-1.85(m,2H),1.76(s,1H),1.45(s,6H),1.39(s,9H)。
步骤B：(R)-2-(((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(R)-2-(((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.456mmol)、铁(535mg，9.58mmol)和氯化铵(512mg，9.58mmol)在乙醇(13mL)和水(2.5mL)中的混合物在80℃搅拌30分钟。将混合物通过硅藻土和小二氧化硅垫过滤，得到(R)-2-(((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(139mg，0.385mmol)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤C：2-(((2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(R)-2-(((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(139mg，0.385mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(105mg，0.578mmol)和二甲基氨基吡啶(9.5mg，0.077mmol)溶于二氯乙烷(3mL)中并且用N,N-二异丙基乙基胺(0.20mL，1.16mmol)处理并且在室温搅拌16小时。将反应混合物吸附在硅藻土上并且通过快速柱色谱纯化(洗脱梯度0-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到(R)-2-(((2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.257mmol，67％产率)。
步骤D：(R)-N-(2,2-二甲基-6-(吡咯烷-2-基甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(R)-2-(((2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.256mmol)溶于二氯甲烷(2mL)并且用三氟乙酸(0.25mL)处理。90分钟后，将溶剂除去并且将材料通过反相HPLC纯化，得到(R)-N-(2,2-二甲基-6-(吡咯烷-2-基甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，0.11mmol)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.12(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.81(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.25(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.54(s,1H),3.88(d,J＝6.4Hz,2H),3.65-3.51(m,1H),2.97(s,2H),2.85(t,J＝6.7Hz,2H),2.03-1.86(m,1H),1.79-1.61(m,2H),1.61-1.46(m,1H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝408.2[M+1]+
实施例292：(R)-N-(6-((1-(2,2-二氟乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将(R)-N-(2,2-二甲基-6-(吡咯烷-2-基甲氧基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例291，52mg，0.128mmol)溶于二甲基甲酰胺(2mL)并且用三乙胺(0.45mL，3.20mmol)处理，然后用三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(0.021mL，0.154mmol)处理并且在60℃加热16小时。加入另外的三乙胺(0.45mL，3.20mmol)和三氟甲磺酸2,2-二氟乙酯(0.021mL，0.154mmol)并且在60℃继续搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩并且通过反相HPLC纯化，得到标题化合物(24mg，0.05mmol，60％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.02(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.85(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.23(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.58(s,1H),5.99(tt,J＝56.2,4.4Hz,1H),4.08(dd,J＝9.4,5.1Hz,1H),3.81(dd,J＝9.3,7.2Hz,1H),3.18(m,1H),3.11(m,1H),2.98(s,2H),2.82(qd,J＝14.3,4.8Hz,1H),2.47(m,1H),2.11-2.00(m,1H),1.74(m,3H),1.42(s,6H),1.24(s,1H)。MS(ESI)：m/z＝472.2[M+1]+。
表9.以类似于实施例64的方法制备以下实施例：
表10.以类似于实施例6的方法制备以下实施例：
实施例352：N-(6-(4-(2,2-二氟-1-羟基乙基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二氟-1-羟基乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在4-甲酰基-1-哌啶甲酸叔丁酯(1g，4.69mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入二氟甲基三甲基硅烷(0.82g，6.56mmol)和在四氢呋喃中的1M四丁基氟化铵(0.47mL，0.47mmol)。在17℃、氮气气氛下，将混合物搅拌15小时。将反应减压浓缩，得到4-(2,2-二氟-1-羟基-乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4g，100％产率)，为淡黄色油状物，将其直接应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ5.76(td,J＝50.8,4.4Hz,1H),4.25-4.10(m,2H),3.61-3.52(m,1H),2.75-2.60(m,2H),1.81-1.74(m,2H),1.65-1.62(m,2H),1.46(s,9H),1.41-1.37(m,1H),
步骤B：2,2-二氟-1-(哌啶-4-基)乙醇盐酸盐
在4-(2,2-二氟-1-羟基-乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.19g，4.49mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的溶液中加入在乙酸乙酯中的盐酸(11mL，4M，45.33mmol)。将混合物在17℃搅拌40分钟并且减压浓缩，得到2,2-二氟-1-(4-哌啶基)乙醇盐酸盐(900mg，99％产率)，为无色油状物，将其直接应用而无需进一步纯化。
步骤C：N-(6-(4-(2,2-二氟-1-羟基乙基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例6、步骤A-C的方法制备，得到N-(6-(4-(2,2-二氟-1-羟基乙基)哌啶-1-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.12g，53％产率，历经3步)。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ9.08-9.04(m,2H),8.63(s,1H),8.27(s,1H),7.22-7.20(dd,J＝7.6,4.4Hz,1H),6.68(s,1H),5.95(td,J＝41.6,4.8Hz,1H),3.62-3.58(m,3H),3.23(d,J＝16.0Hz,1H),3.04-3.01(m,2H),2.90(d,J＝16.0Hz,1H),2.71-2.67(m,2H),2.10-1.95(m,2H),1.78-1.63(m,3H),1.42(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝488.1[M+H]+。
实施例353：N-[6-[4-氟-4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(308303452)
标题化合物以类似于实施例157和158的方法制备，得到N-[6-[4-氟-4-(羟基甲基)-1-哌啶基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(63mg，29％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.43(s,1H),8.87-8.74(m,2H),8.68(m,1H),8.44(s,1H),7.03(m,1H),6.71(s,1H),3.73(d,J＝18.8Hz,2H),3.51(d,J＝15.6Hz,1H),3.07-2.90(m,4H),2.80(d,J＝15.2Hz,1H),2.17-1.97(m,4H),1.42(s,3H),1.37(s,3H),1.26(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝484.0[M+H]+。
实施例354和355：(S)-N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例157和158的方法制备，得到(S)-N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(任意指定的绝对立体化学)。
实施例354，峰1：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.47(s,1H),9.36-9.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.90-8.88(m,1H),8.67(s,1H),8.30(s,1H),7.34-7.31(dd J＝4.4,7.2Hz,1H),6.68(s,1H),4.55(t,J＝5.6Hz,1H),4.50(s,1H),3.44(d,J＝16.0Hz,1H),3.40-3.38(m,2H),2.94-2.91(m,2H),2.71(d,J＝16.0Hz,1H),2.66-2.60(m,2H),1.72-1.70(m,2H),1.59-1.56(m,3H),1.31(s,3H),1.16(d,J＝4.0Hz,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝466.1[M+H]+。
实施例355，峰2：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.48(s,1H),9.37-9.35(d,J＝6.8Hz,1H),8.90-8.89(m,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.35-7.32(m,1H),6.69(s,1H),4.56(t,J＝5.6Hz,1H),4.51(s,1H),3.45(d,J＝16.0Hz,1H),3.40-3.38(m,2H),2.94-2.92(m,2H),2.71(d,J＝16.0Hz,1H),2.66-2.61(m,2H),1.73-1.70(m,2H),1.59-1.53(m,3H),1.32(s,3H),1.16(d,J＝3.2Hz,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝466.1[M+H]+。
实施例356：N-(6-甲基-2-吗啉代-7-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例157和158的方法制备，得到N-[6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(64.5mg，27％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):10.37(s,1H),8.85(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),8.79(s,1H),8.73-8.71(m,1H),8.42(s,1H),7.09-7.07(m,2H),6.67(s,1H),5.48(s,1H),3.51(d,J＝15.6Hz,1H),3.13(s,2H),2.97-2.96(m,4H),2.83-2.79(m,5H),1.43(s,3H),1.37(s,3H),1.26(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝494.0[M+H]+。
实施例357：N-(6-(1-(2-羟基乙基)哌啶-4-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2,2-二甲基-6-(4-哌啶基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例62，步骤D，50.8mg，0.13mmol)溶于乙腈(1.3mL，24.7mmol)中并且用三甲胺(0.45mL，3.24mmol)处理，然后用碘乙醇(29mg，0.169mmol)处理并且在60℃加热72小时。然后将反应混合物浓缩，并且通过反相HPLC纯化，得到N-[6-[1-(2-羟基乙基)-4-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(13.8mg，24％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ9.61(s,1H),9.39(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.87(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),7.74(s,1H),6.65(s,1H),4.36(s,1H),3.51(t,J＝6.4Hz,2H),3.00(s,2H),2.98(m,2H),2.88-2.75(m,1H),2.40(t,J＝6.4Hz,2H),2.15-2.00(m,2H),1.82-1.57(m,4H),1.42(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝436.2[M+1]+。
实施例358：N-(3-羟基-2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-氯-4-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯
将碳酸铯(3.58g，11.0mmol)分批加入至4-氯-3-硝基苯酚(1.74g，10.0mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液中，然后加入3-溴-2-甲基-丙-1-烯(1.62g，12.0mmol)。将混合物搅拌3小时并且过滤。将滤液真空浓缩，并且将残留物在水和乙酸乙酯之间分配。将有机相分离，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％乙酸异丙酯:庚烷)，得到1-氯-4-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯(2.00g，88％产率)，为淡黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝226[M-1]-。
步骤B：4-(4-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯基)吗啉
在密封小瓶中，将1-氯-4-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯(2.00g，8.8mmol)和吗啉(23mL，263mmol)的混合物在100℃加热36小时。将混合物真空浓缩，并且将残留物在乙醚和5％柠檬酸水溶液之间分配。将有机相分离，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％乙酸异丙酯:庚烷)，得到4-(4-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-硝基苯基)吗啉(2.11g，78％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝279[M+1]+。
步骤C：5-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-吗啉代苯胺
在65℃，历经1小时，将铁(7.62g，136.5mmol)分批加入至4-[4-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯基]吗啉(2.11g，6.82mmol)和饱和氯化铵水溶液(12mL)在甲醇(40mL)中的混合物中。30分钟后，将反应冷却至室温,通过硅藻土过滤并且将沉淀用甲醇洗涤。将滤液浓缩并且将残留物在水和乙酸乙酯之间分配。将有机相分离，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-4％甲醇:二氯甲烷)，得到5-((2-甲基烯丙基)氧基)-2-吗啉代苯胺(1.06g，62％产率)，为淡红色油状物。MS(ESI)：m/z＝249[M+1]+。
步骤D：5-氨基-2-(2-甲基烯丙基)-4-吗啉代苯酚
将5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-吗啉代-苯胺(500mg，2.01mmol)在二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物在180℃微波中加热12小时。将混合物真空浓缩，并且将残留物在乙醚和水之间分配。将有机相分离，用水(3*20mL)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩，得到5-氨基-2-(2-甲基烯丙基)-4-吗啉代苯酚(498mg，100％产率)。MS(ESI)：m/z＝249[M+1]+。
步骤E：2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-胺
在5℃，将叔丁醇钾(450mg，4.0mmol)分批加入至5-氨基-2-(2-甲基烯丙基)-4-吗啉代-苯酚在四氢呋喃(25mL)中的溶液中。然后将混合物在密封小瓶中在60℃加热2小时。将混合物真空浓缩，并且将残留物在乙酸乙酯和1％柠檬酸水溶液之间分配。将有机相分离，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-4％甲醇:二氯甲烷)，得到2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-胺(234mg，45％)，为无色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.83(t,J＝1.0Hz,1H),6.17(s,1H),4.02(s,2H),3.82(dd,J＝5.7,3.4Hz,4H),2.92-2.88(m,2H),2.86-2.80(m,4H),1.44(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝249[M+1]+。
步骤F：N-(2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2,2-二甲基-5-吗啉代-3H-苯并呋喃-6-胺(234mg，0.90mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯盐酸盐(254mg，1.17mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.47mL，2.68mmol)和4-二甲基氨基吡啶(22mg，0.18mmol)在吡啶(6mL)中的混合物在110℃微波中加热30分钟。将混合物真空浓缩，并且将残留物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机相分离，用饱和的柠檬酸水溶液、饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到N-(2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(309mg，88％)，为淡黄色固体。MS(ESI)：m/z＝394[M+1]+。
步骤G：乙酸2,2-二甲基-5-吗啉代-6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-3-基酯
将2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(196mg，0.86mmol)分批加入至N-(2,2-二甲基-5-吗啉代-3H-苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(309mg，0.786mmol)在乙酸(12mL)中的溶液中。将混合物搅拌3小时，真空浓缩，并且将残留物在乙酸乙酯和1M碳酸钠水溶液之间分配。将有机相分离，用碳酸钠水溶液、水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-60％乙酸异丙酯:庚烷)，得到乙酸2,2-二甲基-5-吗啉代-6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-3-基酯(290mg，82％)。MS(ESI)：m/z＝452[M+1]+。
步骤H：N-(3-羟基-2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将乙酸[2,2-二甲基-5-吗啉代-6-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-3-基]酯(280mg，0.62mmol)和氢氧化锂(1M，在水中，1.55mmol)的混合物在甲醇和四氢呋喃(4:1)的混合物中搅拌4小时。将混合物浓缩并且将残留物在乙酸乙酯和1％柠檬酸水溶液之间分配。将有机相分离并且浓缩，得到N-(3-羟基-2,2-二甲基-5-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(162mg，62％)，为无色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.83(s,1H),9.38(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.96(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.72(s,1H),7.98(s,1H),7.38-7.35(m,1H),7.34(s,1H),5.41(d,J＝6.7Hz,1H),4.66(d,J＝6.7Hz,1H),3.88(t,J＝4.7Hz,4H),2.90-2.77(m,4H),1.35(s,3H),1.28(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝410[M+1]+。
实施例359：N-(2,2-二甲基-5-吗啉代-3-氧代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将Dess-Martin过碘烷(179mg，0.42mmol)分批加入至N-(3-羟基-2,2-二甲基-5-吗啉代-3H-苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(115mg，0.28mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中。将混合物搅拌3小时。将混合物通过硅藻土过滤，将滤液浓缩，并且将残留物在乙酸乙酯和饱和的碳酸氢钠水溶液之间分配。将有机相分离，用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱100％乙酸异丙酯)，然后在乙腈中重结晶，得到N-(2,2-二甲基-5-吗啉代-3-氧代-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(26mg，22％)，为无色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ11.17(s,1H),9.42(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),9.00(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.79(s,1H),8.38(s,1H),7.59(s,1H),7.40(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),3.90(t,J＝4.5Hz,4H),2.95-2.83(m,4H),1.40(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝408[M+1]+。
实施例360和361：(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例157和158的方法制备，得到(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例360，峰1：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.37(s,1H),8.87-8.81(m,1H),8.79(s,1H),8.74-8.69(m,1H),8.40(s,1H),7.08(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.67(s,1H),5.96(tt,J＝55.9,4.3Hz,1H),3.50(d,J＝15.5Hz,1H),3.01-2.78(m,11H),2.01(s,1H),1.41(s,3H),1.37(s,3H),1.25(s,3H)。(ESI)：m/z＝501.2[M+1]+。
实施例361，峰2：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.37(s,1H),8.87-8.81(m,1H),8.79(s,1H),8.75-8.70(m,1H),8.40(s,1H),7.08(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.67(s,1H),5.96(tt,J＝55.9,4.3Hz,1H),3.50(d,J＝15.5Hz,1H),2.99-2.76(m,12H),1.41(s,3H),1.37(s,3H),1.25(s,3H)。(ESI)：m/z＝501.2[M+1]+。
实施例362：N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例155和156的方法制备，得到N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-((二氟甲氧基)甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ9.15(d,J＝7.0Hz,1H),8.95(d,J＝4.1Hz,1H),8.67(s,1H),8.24(s,1H),8.10(s,1H),7.31(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.74(s,1H),3.94(s,2H),3.34-3.19(m,2H),3.18(d,J＝3.5Hz,1H),3.12(s,5H),3.07-2.97(m,5H),1.50(s,3H),1.31(s,1H)。(ESI)：m/z＝523.2[M+1]+。
实施例363：N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例157和158的方法制备，得到N-(6-(4-(羟基甲基)哌啶-1-基)-2-(2-羟基丙-2-基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.50(s,1H),8.84-8.73(m,3H),8.44(s,1H),7.02(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.67(s,1H),3.63(t,J＝4.9Hz,2H),3.50(d,J＝15.4Hz,1H),3.11(d,J＝11.4Hz,2H),2.79(d,J＝15.4Hz,1H),2.68(dt,J＝11.4,8.4Hz,2H),2.06(s,1H),1.79(s,3H),1.51(t,J＝5.4Hz,1H),1.41(s,3H),1.36(s,3H),1.25(s,3H)。(ESI)：m/z＝466.2[M+1]+。
实施例364：N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(二氟甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例50和51的方法制备，得到N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(二氟甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.38(s,1H),8.84(d,J＝7.0Hz,1H),8.79(s,1H),8.73(d,J＝4.1Hz,1H),8.43(s,1H),7.08(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.71(s,1H),5.85(dt,J＝82.7,55.8Hz,2H),3.43(d,J＝16.2Hz,1H),3.08-2.80(m,11H),1.54(s,3H)。(ESI)：m/z＝493.2[M+1]+。
实施例365和366：(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物类似于实施例153和154的方法制备，得到(R)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-2-(羟基甲基)-2-(三氟甲基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，任意指定的绝对立体化学。
实施例365，峰1：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.43(s,1H),9.36(d,J＝7.0Hz,1H),8.94(d,J＝4.1Hz,1H),8.68(s,1H),8.39(s,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.92(s,1H),6.19(tt,J＝55.7,4.4Hz,1H),5.59(t,J＝6.0Hz,1H),3.76(qd,J＝12.1,6.0Hz,2H),3.49(d,J＝16.6Hz,1H),3.32(s,1H),2.89-2.72(m,10H)。(ESI)：m/z＝527.2[M+1]+。
实施例366，峰2：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.43(s,1H),9.35(d,J＝7.0Hz,1H),8.94(d,J＝4.1Hz,1H),8.67(s,1H),8.39(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.91(s,1H),6.19(tt,J＝55.6,4.2Hz,1H),5.59(t,J＝6.1Hz,1H),3.75(qd,J＝12.1,5.8Hz,2H),3.49(d,J＝16.6Hz,1H),3.32(s,1H),2.94-2.72(m,10H)。(ESI)：m/z＝527.2[M+1]+。
实施例367和368：N-[(2R)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-氟-4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯
在3-氟-4-硝基苯酚(20.6g，131.2mmol)在乙腈中的溶液中加入3-溴-2-甲基丙烯(15.6mL，183.7mmol)和碳酸钾(25.4g，183.7mmol)。将反应混合物在55℃搅拌13小时，然后冷却至室温并且保持搅拌过夜。将混合物用乙酸异丙酯稀释并且用水洗涤。将水相分离并且用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度0-25％乙酸异丙酯:庚烷)，得到标题化合物，为白色结晶固体(26.0g，94％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ8.15(t,J＝9.2Hz,1H),7.20(dd,J＝13.7,2.7Hz,1H),7.00(ddd,J＝9.3,2.7,1.1Hz,1H),5.11-5.04(m,1H),5.01(d,J＝1.5Hz,1H),4.66(s,2H),1.81-1.73(m,3H)。
步骤B：4-[5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯基]吗啉
在2-氟-4-(2-甲基烯丙基氧基)-1-硝基-苯(26.0g，123.2mmol)和碳酸钾(56.2g，406.6mmol)在二甲亚砜(186.7mL，2600mmol)中的混合物中加入吗啉(10.7mL，123.20mmol)并且将混合物加热至100℃。40分钟后，将反应冷却至室温并且用水和乙酸乙酯稀释。将有机相分离并且用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤。然后将水相用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度0-50％乙酸异丙酯:庚烷)，得到标题产物，为亮黄橙色结晶固体(32.3g，94％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.92(d,J＝9.0Hz,1H),6.72-6.66(m,2H),5.13-5.04(m,1H),5.00(s,1H),4.60(s,2H),3.77-3.64(m,4H),3.07-2.91(m,4H),1.78(s,3H)。
步骤C：2-(2-甲基烯丙基)-5-吗啉代-4-硝基-苯酚
将4-[5-(2-甲基烯丙基氧基)-2-硝基-苯基]吗啉(375mg，1.35mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中在220℃加热60分钟。将反应冷却至室温并且用乙酸异丙酯和盐水稀释。将水相分离并且用乙酸异丙酯(3x)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度0-50％乙酸异丙酯:庚烷)，得到希望的产物(44.1mg，11.8％产率)以及回收的原料和不希望的区域异构体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.73(s,1H),7.74(s,1H),6.59(s,1H),4.84-4.73(m,1H),4.64(dd,J＝2.2,0.9Hz,1H),3.79-3.64(m,5H),3.20(s,2H),2.97-2.88(m,5H),1.66(s,3H)。
步骤D：1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基-苯基)丙-2-酮
在2-(2-甲基烯丙基)-5-吗啉代-4-硝基-苯酚(283.5mg，1.02mmol)在水(0.08M)和二烷(0.03M)中的溶液中加入四氧化锇(0.08M，在叔丁醇中，0.6mL，0.05mmol)，然后加入过碘化钠(435.8mg，2.04mmol)。将悬浮液在室温搅拌过夜，倾倒至水中并且用二氯甲烷萃取。将有机相分离，经硫酸钠干燥，浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度0-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到希望的产物(135.2mg，47％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.26(s,1H),7.78(s,1H),6.60(s,1H),3.88-3.81(m,4H),3.73(s,2H),3.08-2.97(m,4H),2.35(s,3H)。
步骤E：2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙酸甲酯
将1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基-苯基)丙-2-酮(1.7g，6.07mmol)、(三苯基正膦亚基(phosphoranylidine))乙酸甲酯(2.13g，6.37mmol)在氯仿(100mL)中的混合物在60℃搅拌2小时。加入三乙胺(6mL)并且将混合物在60℃搅拌12小时。然后将反应浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱3％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙酸甲酯(1.6g，78％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝337.1[M+1]+。
步骤F：2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙醛
在-78℃，历经5分钟，在二异丁基氢化铝(2.01mL，2.01mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中滴加入2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙酸甲酯(450.0mg，1.34mmol)并且将反应保持2小时。将混合物用十水合硫酸钠猝灭，过滤，浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱15％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙醛(450mg，99％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝307.1[M+1]+。
步骤G：4-[2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉
在-78℃，将二乙基氨基三氟化硫(1.48g，7.35mmol)在二氯甲烷(30mL)中的混合物滴加入2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙醛(450.0mg，1.47mmol)中并且将反应保持30分钟，然后在室温12小时。将混合物浓缩并且通过柱色谱纯化(洗脱15％乙酸乙酯:石油醚)，得到4-[2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基]吗啉(320mg，63％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝329.1[M+1]+。
步骤H：2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-胺(245mg，84％产率)，为无色油状物。(ESI)：m/z＝299.1[M+1]+。
实施例367和368：N-[(2R)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例29和30的方法制备，得到N-[(2R)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(130mg，36％产率)和N-[(2S)-2-(2,2-二氟乙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，33％产率)，为黄色固体。
实施例367，峰1：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.44(s,1H),9.36(d,J＝7.0Hz,1H),8.93(d,J＝4.1Hz,1H),8.67(s,1H),8.32(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.76(s,1H),3.83(t,J＝4.2Hz,4H),3.20(d,J＝15.8Hz,1H),3.00(d,J＝15.8Hz,1H),2.81(t,J＝4.3Hz,4H),2.50(s,1H),2.35(td,J＝17.4,4.6Hz,2H),1.44(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝444.2[M+1]+。MS(ESI)：m/z＝299.1[M+1]+。
实施例368，峰2：1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.45(s,1H),9.38(dd,J＝7.0,1.4Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.4Hz,1H),8.69(s,1H),8.33(s,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.77(s,1H),3.83(t,J＝4.2Hz,4H),3.34(s,2H),3.21(d,J＝15.8Hz,1H),3.01(d,J＝15.8Hz,1H),2.82(t,J＝4.5Hz,4H),2.36(td,J＝17.4,4.7Hz,1H),1.45(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝299.1[M+1]+。
实施例369：N-[1’-(2-羟基乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇
在6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶(实施例142，步骤C；414.0mg，2mmol)在乙腈(15mL)中的溶液中加入碳酸钾(689.2mg，4.99mmol)和2-溴乙醇(374.5mg，3mmol)。将反应在45℃搅拌12小时，冷却至室温，过滤并且浓缩，得到2-(6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(561mg，定量)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝252.1[M+1]+。
步骤B：2-(6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇
在2-(6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(510.0mg，2mmol)在二氯甲烷(9mL)中的溶液中加入发烟硝酸(1mL，16mmol)并且将反应搅拌2小时。将反应用饱和的碳酸氢钠水溶液猝灭并且用二氯甲烷(2x)萃取。将合并的有机相分离，用洗涤盐水，经硫酸镁干燥并且浓缩，得到2-(6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(374mg，35％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝297.1[M+1]+。
步骤C：2-(6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇
将碳酸钾(435.2mg，3.16mmol)、吗啉(0.33mL，3.79mmol)和2-(6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(374.0mg，1.26mmol)在乙腈(10mL)中的混合物搅拌2小时。将反应用水稀释并且用乙酸乙酯(2x)萃取。将合并的有机相分离，用饱和的盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱1:10甲醇:二氯甲烷)，得到2-(6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(214mg，47％产率)，为橙色固体。MS(ESI)：m/z＝364.2[M+1]+。
步骤D：2-(5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2-(5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇(160mg，64％产率)，为黄色油状物。(ESI)：m/z＝334.2[M+1]+。
步骤E：2-(5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-1’-基)乙醇
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到2N-[1’-(2-羟基乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(91mg，40％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.47(s,1H),8.87-8.74(m,3H),8.43(s,1H),7.07(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.69(s,1H),3.95(t,J＝4.5Hz,4H),3.64(t,J＝5.4Hz,2H),3.02(s,2H),2.92(t,J＝4.6Hz,4H),2.74-2.57(m,4H),2.00(dt,J＝13.3,4.3Hz,2H),1.83(ddd,J＝13.2,8.8,4.7Hz,2H),1.61(s,2H)。(ESI)：m/z＝479.2[M+1]+。
表11.以类似于实施例152的方法制备以下实施例：
实施例379：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
将6-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1.5g，5.55mmol)、N-(4-甲氧基苄基)-N-甲基胺(1.67g，11.04mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(2.75mL，16.63mmol)在乙醇(25mL)中的混合物在85℃搅拌96小时。将混合物浓缩至干燥并且将残留物通过柱色谱纯化(洗脱50％乙酸乙酯:石油醚)，得到6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1120mg，57.5％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝341.2[M+1]+。
步骤B：6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在密封管中，将6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(50mg，0.15mmol)和水合氢氧化锂(7.0mg，0.17mmol)在四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)中的混合物在100℃微波照射下搅拌45分钟。将混合物用2N HCl中和并且浓缩至干燥，得到6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(50mg，98％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝313.1[M+1]+。
步骤C：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(120.0mg，0.39mmol)、6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(150.0mg，0.48mmol)、HATU(300.0mg，0.79mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.3mL，1.72mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物搅拌12小时。然后将反应通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um乙腈50-70％(10mM碳酸氢铵)，在水中)，得到N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(96mg，41％产率)。
步骤D：N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在二氯甲烷(6mL)中的N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-[(4-甲氧基苯基)甲基-甲基-氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，0.2mmol)和三氟乙酸(2mL，0.2000mmol)搅拌3小时。然后将反应通过制备HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um乙腈50-70％(10mM碳酸氢铵)，在水中)，得到N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg，62％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.30(s,1H),8.61(d,J＝2.6Hz,1H),8.38-8.27(m,3H),6.70(s,1H),2.99(s,2H),2.93-2.73(m,14H),1.41(s,6H)。(ESI)：m/z＝502.2[M+1]+。
表12.以类似于实施例64的方法制备以下实施例：
实施例384：N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-环丙基-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃
在110℃、氮气下，将6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(300.0mg，1.1mmol)、环丙基硼酸(142.1mg，1.65mmol)、三环己基膦(61.84mg，0.22mmol)、乙酸钯(24.75mg，0.11mmol)和磷酸钾(819.12mg，3.86mmol)在甲苯(8mL)和水(1mL)中的混合物在微波条件下搅拌2小时。将反应浓缩至干燥并且将残留物溶于乙酸乙酯(20mL)并且将产生的有机相用水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，浓缩至干燥并且通过柱色谱纯化(洗脱25％乙酸乙酯:异己烷)，得到6-环丙基-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(220mg，86％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)：m/z＝234.2[M+1]+。
步骤B：6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(100mg，96％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ＝6.54(s,1H),6.46(s,1H),2.93(s,2H),1.75-1.60(m,1H),1.44(s,6H),0.96-0.82(m,2H),0.65-0.53(m,2H)。
步骤C：N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例378步骤C的方法制备，得到N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg，47％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.04(s,1H),9.38(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.89(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.69(s,1H),8.02(s,1H),7.32(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.49(s,1H),3.00(s,2H),1.92(td,J＝8.4,4.4Hz,1H),1.40(s,6H),1.10-0.99(m,2H),0.73-0.62(m,2H)。MS(ESI)：m/z＝349.2[M+1]+。
实施例385：N-(2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-氯-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮
在4-氯-2-(氯磺酰基)苯甲酸甲酯(500mg，1.86mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物中加入氢氧化铵(2mL，28％)。将混合物在室温搅拌1小时，然后浓缩，得到6-氯-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(400mg)，为白色固体，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝218.1[M+1]+。
步骤B：6-氯-2-甲基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮
在密封管中，将6-氯-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(400mg，1.84mmol)、碘甲烷(391mg，2.76mmol)和碳酸铯(898mg，2.76mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物在80℃搅拌12小时。加入水并且将反应用乙酸乙酯(20mL)萃取。将有机相分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到6-氯-2-甲基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(340mg)，为棕色固体，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝232.1[M+1]+。
步骤C：6-氯-2-甲基-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮
在6-氯-2-甲基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(500mg，2.16mmol)在发烟硫酸(6mL)中的混合物中滴加入发烟硝酸(2mL)。将混合物在70℃搅拌12小时。将反应冷却至室温并且倾倒至冰水中。将反应用乙酸乙酯(2x20mL)萃取。将有机相合并，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱1:5乙酸乙酯:石油醚)，得到6-氯-2-甲基-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(52mg，9％产率，历经3步)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(s,1H),8.14(s,1H),3.32(s,3H)。
步骤D：2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮
将6-氯-2-甲基-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(38mg，0.14mmol)在乙腈(3mL)中的混合物用吗啉(20mg，0.21mmol)处理并且在环境温度搅拌2小时。加入水并且将反应用乙酸乙酯洗涤。将有机相分离，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(43mg，96％)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝328.1[M+1]+。
步骤E：2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺
在2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-1,1-二氧代-1,2-苯并噻唑-3-酮(43mg，0.13mmol)在四氢呋喃(8mL)中的混合物中滴加入硼烷-四氢呋喃复合物(1M，在四氢呋喃中，3mL，3mmol)。将混合物在65℃搅拌12小时。加入甲醇并且将混合物在室温搅拌30分钟。将混合物浓缩，得到2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺(35mg)，为无色油状物，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝284.1[M+1]+。
步骤F：N-(2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在碳酸钾(30mg，0.21mmol)、2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-胺(35mg，0.12mmol)在甲苯(10mL)中的混合物中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(24mg，0.13mmol，实施例3，步骤B)。将混合物在110℃搅拌4小时，浓缩，并且通过制备HPLC纯化(Waters,XBridge C18，4.6×150mm，3.5μm，A：乙腈30％-45％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到N-(2-甲基-6-吗啉代-1,1-二氧代-3H-1,2-苯并噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(15mg，28％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.91(s,1H),9.41(dd,J＝1.2,6.8Hz,1H),9.00(dd,J＝1.2,4.0Hz,1H),8.76(s,1H),8.71(s,1H),7.40(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),4.39(s,2H),3.91-3.88(m,4H),2.95-2.93(m,4H),2.81(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝429.2[M+1]+。
实施例386：N-[2-(氰基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(2,4-二氟-5-硝基苯基)乙酸
在0℃，在(2,4-二氟-苯基)乙酸(200.0g，1.16mol)在硫酸(825mL)中的溶液中滴加入硝酸(69％，82.5mL)。将反应混合物在90℃搅拌45分钟，然后倾倒入冰水中。将产生的沉淀通过过滤收集，用水洗涤并且干燥，得到2-(2,4-二氟-5-硝基苯基)乙酸(216.0g，85％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.13(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(dd,J＝8.8,10.0Hz,1H),3.78(s,2H)。19F NMR(376MHz,CDCl3):δ-100.6(d,J＝15.0Hz,1F),-111.9(d,J＝15.0Hz,1F)。
步骤B：1-(2,4-二氟-5-硝基苯基)丙-2-酮
在0℃，在2-(2,4-二氟-5-硝基苯基)乙酸(216.0g，996mmol)在乙酸酐(562mL)中的溶液中滴加入1-甲基咪唑(79.4mL，996mmol)。将反应混合物在0℃搅拌90分钟。将反应用冰水猝灭，然后用饱和的碳酸氢钠水溶液调节至pH＝7～8。将产生的混合物用乙酸乙酯(500mL×4)萃取并且将合并的有机相分离并且经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩至小体积并且通过柱色谱纯化，得到化合物1-(2,4-二氟-5-硝基苯基)丙-2-酮(34g，64％产率)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ8.00(t,J＝8.0Hz,1H),7.05(dd,J＝8.8,10.4Hz,1H),3.83(s,2H),2.31(s,3H)。
步骤C：1-(2-氟-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮
在室温，在1-(2,4-二氟-5-硝基苯基)丙-2-酮(105.0g，0.49mol)在二甲基甲酰胺(1.0L)中的溶液中加入碳酸钾(135g，0.98mol)和吗啉(51.0g，0.59mol)。将反应混合物在室温搅拌1.5小时并且加入水(5L)。将产生的混合物用乙酸乙酯(1L×3)萃取。将合并的有机相分离，用盐水(1L)洗涤，经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩。将产生的半固体悬浮于乙酸乙酯:石油醚(1:2，300mL)的混合物中并且搅拌30分钟。过滤后得到1-(2-氟-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮(105g，76％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.77(d,J＝8.0Hz,1H),6.80(d,J＝11.2Hz,1H),3.86(t,J＝4.8Hz,4H),3.74(s,2H),3.06(t,J＝4.8Hz,4H),2.27(s,3H)。
步骤D：4-(5-氟-4-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-2-硝基苯基)吗啉
将1-(2-氟-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮(132.0g，0.468mol)、乙-1,2-二醇(86.8g，1.404mol)和对-甲苯磺酸(8.8g，46.8mmol)在甲苯(1L)中的混合物在Dean-Stark装置下回流过夜以除去水。将反应混合物冷却至室温并且加入碳酸氢钠水溶液(500mL)。将产生的混合物用乙酸乙酯(500mL×3)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到4-(5-氟-4-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-2-硝基苯基)吗啉(150g，98％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.90(d,J＝7.6Hz,1H),6.77(d,J＝11.2Hz,1H),3.92-3.97(m,2H),3.80-3.87(m,6H),3.04(t,J＝4.8Hz,4H),2.94(s,2H),1.34(s,3H)。
步骤E：2-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚
在氮气气氛下，在4-(5-氟-4-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-2-硝基苯基)吗啉(15g，46mmol)在二甲亚砜(100mL)中的溶液中加入氢氧化钾(5.1g，92mmol)。将反应混合物在100℃搅拌4小时，然后冷却至室温。将混合物倾倒至冰水(1000mL)中并且用4N HCl水溶液将pH调节至pH＝5～6。将产生的混合物用乙酸乙酯(200mL×4)萃取并且将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到2-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚(15g)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤F：1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮
在2-((2-甲基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基)-5-吗啉代-4-硝基苯酚(15.0g，46mmol)在四氢呋喃(100mL)和水(100mL)的溶液中加入对-甲苯磺酸(8.4g，49mmol)。将反应混合物在50℃搅拌4小时，然后冷却至室温。加入饱和的碳酸氢钠水溶液(200mL)并且将产生的混合物用乙酸乙酯(200mL×3)萃取。将合并的有机层分离，经无水硫酸钠干燥并且减压浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱1:2乙酸乙酯:石油醚)，得到1-(2-羟基-4-吗啉代-5-硝基苯基)丙-2-酮(4.8g，37％产率，历经2步)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.57(br s,1H),7.83(s,1H),6.63(s,1H),3.87(t,J＝4.8Hz,4H),3.75(s,2H),3.05(t,J＝4.8Hz,4H),2.39(s,3H)。
步骤G：2-(2-甲基-5-吗啉代-6-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙腈
将1-(2-羟基-5-吗啉代-4-硝基-苯基)丙-2-酮(300.0mg，1.07mmol)、(三苯基正膦亚基)乙腈(338.7mg，1.12mmol)在氯仿(15mL)中的混合物在60℃搅拌3小时。加入三乙胺(4mL)并且将混合物在60℃搅拌12小时。然后将反应浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱33％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(2-甲基-5-吗啉代-6-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙腈(71mg，18％产率)，为黄色固体。MS(ESI)：m/z＝304.1[M+1]+。
步骤H：2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)乙腈
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)乙腈(70mg，90％产率)，为棕色油状物。(ESI)：m/z＝274.2[M+1]+。
步骤I：N-[2-(氰基甲基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到2N-[1’-(2-羟基乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(91mg，40％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.49(s,1H),8.84(d,J＝6.8Hz,1H),8.77-8.78(m,2H),8.47(s,1H),7.08(dd,J＝4.0,6.8Hz,1H),6.70(s,1H),3.94-3.97(m,4H),3.22(d,J＝16.0Hz,1H),3.16(d,J＝15.6Hz,1H),2.91-2.93(m,4H),2.79(d,J＝16.8Hz,1H),2.73(d,J＝16.4Hz,1H),1.68(s,3H)。(ESI)：m/z＝419.1[M+1]+。
实施例387和388：(S)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙醇
在0℃，在硼氢化钠(113.0mg，2.97mmol)在四氢呋喃(12mL)和乙醇(3mL)中的混合物中加入氯化锂(124.9mg，2.97mmol)，然后加入2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙酸甲酯(实施例367和368，步骤E；200.0mg，0.59mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时并且用氯化铵水溶液(20mL)猝灭。将有机相分离，经硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到2-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)乙醇(180mg，82％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝309.2。
步骤B：2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)乙醇
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)乙醇(130mg，70％产率)，为白色油状物。(ESI)：m/z＝279.3[M+1]+。
步骤C：(R)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到(R)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(91mg，40％产率)，为黄色固体，任意指定的立体化学。
实施例387，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.48(s,1H),8.90-8.70(m,3H),8.45(s,1H),7.07(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.65(s,1H),5.35(s,1H),3.98-3.80(m,6H),3.18(d,J＝15.5Hz,1H),3.02(d,J＝15.6Hz,1H),2.94-2.90(m,4H),1.99(dt,J＝14.6,5.6Hz,1H),1.50(s,3H),1.26(s,2H)。(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例388，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.48(s,1H),8.98-8.70(m,3H),8.45(s,1H),7.07(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.65(s,1H),5.35(s,1H),3.92(dd,J＝26.9,22.3Hz,6H),3.18(d,J＝15.7Hz,1H),3.02(d,J＝15.5Hz,1H),2.94-2.90(m,4H),2.07-1.95(m,1H),1.50(s,3H),1.25(s,2H)。(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例389：N-[6-[4-(氨基甲基)-4-氟-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-[[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例13步骤A的方法制备，得到N-[[1-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(416mg，94％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
步骤B：N-[[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到N-[[1-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(370mg，80％产率)，为黄色油状物。(ESI)：m/z＝394.3[M+1]+。
步骤C：N-[[1-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到N-[[1-[2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)-3H-苯并呋喃-6-基]-4-氟-4-哌啶基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(487mg，96％产率)，为黄色固体。(ESI)：m/z＝539.3[M+1]+。
步骤D：N-[6-[4-(氨基甲基)-4-氟-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例3步骤M的方法制备，得到N-[6-[4-(氨基甲基)-4-氟-1-哌啶基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(300mg，76％产率)，为淡黄色泡沫状物。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.42(s,1H),8.86-8.76(m,2H),8.68(dt,J＝3.4,1.5Hz,1H),8.40(s,1H),7.07-6.99(m,1H),6.67(s,1H),3.07-2.85(m,8H),2.11-1.87(m,4H),1.48(d,J＝1.2Hz,6H)。(ESI)：m/z＝439.3[M+1]+。
实施例390和391：(R)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]
将6-氟-1’-甲基-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷](304.0mg，1.21mmol)、吗啉(0.31mL，3.62mmol)和碳酸钾(415.5mg，3.0mmol)在乙腈(15mL)中的混合物在25℃搅拌过夜。将反应过滤并且减压干燥，得到1’-甲基-6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷](323mg，80％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+320.2。
步骤B：1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到1’-甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-胺(310mg，76％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+290.2。
步骤C：(R)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，通过手性HPLC拆分后得到(R)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(98.8mg，21％产率)和(S)-N-(1’-甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(108.5mg，23％产率)，为黄色固体，任意指定的立体化学。
实施例390，峰1：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.48(s,1H),8.84(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.79-8.72(m,2H),8.45(s,1H),7.07(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.69(s,1H),4.01-3.90(m,4H),3.34-3.20(m,2H),3.09(d,J＝10.6Hz,1H),3.02(q,J＝8.0Hz,1H),2.91(t,J＝4.5Hz,4H),2.77(s,2H),2.51(s,3H),2.41(dt,J＝13.3,6.5Hz,1H),2.13(dt,J＝14.0,7.7Hz,1H)。MS-ESI:[M+H]+435.3。
实施例391，峰2：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ10.48(s,1H),8.83(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.80-8.75(m,2H),8.44(s,1H),7.07(dd,J＝7.0,4.1Hz,1H),6.69(s,1H),3.95(t,J＝4.5Hz,4H),3.33-3.18(m,2H),3.05(d,J＝10.4Hz,1H),2.97(q,J＝8.3Hz,1H),2.91(dd,J＝5.6,3.5Hz,4H),2.60(d,J＝10.5Hz,2H),2.43(s,3H),2.41-2.35(m,1H),2.10(ddd,J＝14.2,8.6,6.0Hz,1H)。MS-ESI:[M+H]+435.3。
实施例392：N-[2-(1-氟-2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2,4-二氟苯基)-3-氟-2,4-二甲基-戊-2,4-二醇
在-78℃，在4-(2,4-二氟苯基)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁酸乙酯(1000mg，3.62mmol)在四氢呋喃(36mL)中的溶液中加入甲基锂(6.03mL，18.1mmol)并且将反应在室温搅拌3小时。加入饱和的氯化铵水溶液和乙酸乙酯。将有机相分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱25％乙酸乙酯:石油醚)，得到1-(2,4-二氟苯基)-3-氟-2,4-二甲基-戊-2,4-二醇(310mg，33％产率)，为无色油状物。
步骤B：1-氟-1-(6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基)-2-甲基-丙-2-醇
在0℃，将在四氢呋喃(20mL)中的1-(2,4-二氟苯基)-3-氟-2,4-二甲基-戊-2,4-二醇(310mg，1.2mmol)用叔丁醇钾(331mg，3.0mmol)处理并且在搅拌下温至60℃达24小时。冷却至室温后，将混合物用水稀释。将有机相分离并且浓缩，得到1-氟-1-(6-氟-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基)-2-甲基-丙-2-醇(210mg，65％产率)，将其直接应用而无需进一步纯化。MS-ESI:[M-H2O+H]+225.2。
步骤C：1-氟-1-(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)-2-甲基-丙-2-醇
标题化合物以类似于中间体1、步骤D的方法制备，得到1-氟-1-(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)-2-甲基-丙-2-醇(200mg，21％产率)，为棕色油状物。MS-ESI：[M+H]+288。
步骤D：1-氟-2-甲基-1-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)丙-2-醇
标题化合物以类似于实施例50步骤A的方法制备，得到1-氟-2-甲基-1-(2-甲基-6-吗啉代-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(59mg，60％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+355.1。
步骤E：1-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)-1-氟-2-甲基-丙-2-醇
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到1-(5-氨基-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-2-基)-1-氟-2-甲基-丙-2-醇(39mg，72％产率)，为棕色油状物。MS-ESI：[M+H]+325.1。
步骤F：N-[2-(1-氟-2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方 法制备，得到N-(2-(1-氟-2-羟基-2-甲基丙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10mg，18％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):10.48(s,1H),8.83(dd,J＝1.2,6.8Hz,1H),8.79(s,1H),8.77(dd,J＝1.2,4.4Hz,1H),8.47(s,1H),7.07(dd,J＝4.4,6.8Hz,1H),6.69(s,1H),4.37(d,J＝44.4Hz,1H),3.96-3.94(m,4H),3.68-3.65(m,2H),2.93-2.83(m,4H),2.64(s,1H),1.57(s,3H),1.35-1.32(m,6H)。MS-ESI：[M+H]+470。
实施例393：N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：3-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在回流下，在镁(2.90g，120.8mmol)和碘(80mg，0.31mmol)在醚(25mL)中的溶液中滴加入2,4-二氟苄基溴(9.94g，48mmol)并且将产生的混合物搅拌30分钟。然后在-78℃将该混合物加入至N-boc-3-吡咯烷酮(7.41g，40mmol)在醚(100mL)中的溶液中并且将反应在室温搅拌2小时。加入饱和的氯化铵水溶液和乙酸乙酯(200mL)并且将有机相分离，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱梯度1:10至1:5乙酸乙酯:石油醚)，得到3-[(2,4-二氟苯基)甲基]-3-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.30g，15％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+258。
步骤B：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例3步骤E的方法制备，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸叔丁酯(552mg，71％产率)，为类白色固体。
步骤C：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]
在于二氯甲烷(11mL)中的6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸叔丁酯(552.0mg，1.9mmol)中加入三氟乙酸(2mL)并且将混合物在25℃搅拌4小时。在反应中加入饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)并且将水层分离并且用二氯甲烷(2x)萃取。将合并的有机相用饱和的盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并且浓缩，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷](303mg，1.5mmol)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+194.1。
步骤D：6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯
在氯甲酸苄酯(469.4mg，2.8mmol)和6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷](409mg，2.1mmol)在二氯甲烷(15mL)中的混合物中加入三甲胺(4.23mmol)，然后将反应在25℃搅拌2小时。将反应浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱1:1乙酸乙酯:石油醚)，得到6-氟螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(739mg，78％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+Na]+328.2。
步骤E：6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯
将6-氟-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(589mg，1.6mmol)、吗啉(0.41mL，4.75mmol)和碳酸钾(545.4mg，3.95mmol)在乙腈(18mL)中的混合物在25℃搅拌过夜。将反应过滤并且减压干燥，得到6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(451mg，56％产率)，为黄色油状物。MS-ESI：[M+H]+440.2。
步骤F：5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯
将6-吗啉代-5-硝基-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(451.0mg，1.0mmol)、氯化铵(549mg，10.3mmol)、铁(574.7mg，10.3mmol)和氯化铵(549mg，10.3mmol)在乙醇(40mL)和水(8mL)中的溶液在78℃搅拌2小时。将反应混合物过滤并且将沉淀用二氯甲烷洗涤。将滤液用二氯甲烷萃取，将有机相分离并且减压干燥，得到5-氨基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(421mg，95％产率)，为棕色固体。
步骤G：6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(464mg)。MS-ESI：[M+H]+555.3。
步骤H：N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)螺[3H-苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-1’-甲酸苄酯(434mg，0.8mmol)和三氟乙酸(3mL)的混合物在50℃搅拌2小时。将反应浓缩，并且通过HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um，A：10mM碳酸氢铵水溶液，B：乙腈)，得到N-(6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,3’-吡咯烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(59.4mg，18％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):10.48(s,1H),8.84(d,J＝3.4Hz,1H),8.79(s,1H),8.78(d,J＝6.6Hz,1H),8.45(s,1H),7.08(s,J＝4.4,6.6Hz,1H),7.35(dd,J＝4.4,6.6Hz,1H),6.65(s,1H),3.94-3.95(m,4H),3.21-3.33(m,4H),3.12-3.13(m,1H),2.90-2.92(m,4H),2.84(d,J＝12Hz,1H),1.26(s,2H)。
实施例394：N-(2,2-二(羟基甲基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-[(4-氯-2-氟-苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二烷-5-醇
将叔丁醇钾(2700.0mg，24.11mmol)和5-[(4-氯-2-氟-苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二烷-5-醇(3000.0mg，10.92mmol)在四氢呋喃(60mL)中的混合物在50℃搅拌12小时。冷却至室温并且浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱：1:1乙酸乙酯:石油醚)，得到6’-氯-2,2-二甲基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃](930mg，3.6512mmol，33.4％产率)，为无色油状物。
步骤B：6’-氯-2,2-二甲基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]
标题化合物以类似于实施例3步骤E的方法制备，得到6’-氯-2,2-二甲基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃](930mg，33％产率)，为无色油状物。MS-ESI：[M+H]+255.1。
步骤C：6’-氯-2,2-二甲基-5’-硝基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]
将6’-氯-2,2-二甲基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃](930mg，3.7mmol)和硝酸铜(II)(2200mg，11.7mmol)在乙酸(5mL)和乙酸酐(5mL)中的混合物在室温搅拌。浓缩后，将残留物通过柱色谱纯化(洗脱50％乙酸乙酯:石油醚)，得到6’-氯-2,2-二甲基-5’-硝基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃](900mg，82％产率)，为黄色油状物。
步骤D：4-(2,2-二甲基-5’-硝基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-6’-基)吗啉
将6’-氯-2,2-二甲基-5’-硝基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃](600mg，2mmol)和吗啉(3mL，35mmol)在90℃搅拌12小时。将反应浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱30％乙酸乙酯:石油醚)，得到4-(2,2-二甲基-5’-硝基-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-6’-基)吗啉(65mg，9％产率)。MS-ESI：[M+H]+351。
步骤E：2,2-二甲基-6’-吗啉代-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-5’-胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2,2-二甲基-6’-吗啉代-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-5’-胺(90mg)，将其直接应用而无需进一步纯化。
步骤F：N-(2’,2’-二甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,5’-[1,3]二烷]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2,2-二甲基-6’-吗啉代-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-5’-胺(90mg，0.28mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(100mg，0.61mmol)、HATU(180mg，0.47mmol)和N,N-二异丙基胺(0.2mL，1.22mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中在25℃搅拌12小时。将混合物浓缩并且通过柱色谱纯化(洗脱40％乙酸乙酯:石油醚)，得到N-(2,2-二甲基-6’-吗啉代-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-5’-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(110mg，84％产率)。
步骤G：N-(2,2-二(羟基甲基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(2,2-二甲基-6’-吗啉代-螺[1,3-二烷-5,2’-3H-苯并呋喃]-5’-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(90mg，0.19mmol)和浓盐酸(2mL)在甲醇(10mL)中的混合物在25℃搅拌3小时，浓缩并且通过HPLC纯化(Xbridge 21.2*250mm c18，10um 20-30％在乙腈中的10mM碳酸氢铵水溶液)，得到N-[2,2-二(羟基甲基)-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(41.5mg，51％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.39(s,1H),9.38(dd,J＝7.1,1.6Hz,1H),8.96(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.19(s,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.85(t,J＝5.8Hz,1H),4.77(s,1H),3.92(d,J＝10.8Hz,1H),3.87-3.77(m,5H),3.35(d,J＝6.5Hz,3H),2.92-2.78(m,5H)。
实施例395：N-(2,2-二甲基-6-(2-(甲基氨基甲酰基)环丙基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2,2-二甲基-5-硝基-6-乙烯基-3H-苯并呋喃
将在1,4-二烷(5mL)和水(2mL)中的6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃(中间体4，200mg，0.74mmol)、乙烯基硼酸频哪醇酯(0.38mL，2.24mmol)、[1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(270mg，0.37mmol)和磷酸钾(314.0mg，1.48mmol)在110℃微波条件下加热2小时。将溶剂除去并且将粗反应通过制备TLC纯化(洗脱1:3乙酸乙酯:石油醚)，得到2,2-二甲基-5-硝基-6-乙烯基-3H-苯并呋喃(81mg，45％产率)，为黄色固体。MS-ESI：[M+H]+220.1。
步骤B：2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸乙酯
在氮气下，在乙酸铑(II)二聚体(163.3mg，0.37mmol)和2,2-二甲基-5-硝基-6-乙烯基-3H-苯并呋喃(1.62g，7.4mmol)在二氯甲烷(60mL)中的混合物中滴加重氮基乙酸乙酯(1.2mL，11.1mmol)。将混合物搅拌12小时，浓缩至干燥并且通过柱色谱纯化(洗脱20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸乙酯(480mg，21％产率)，为白色固体。MS-ESI：[M+H]+306.2。
步骤C：2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸
将2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸乙酯(60mg，0.2mmol)和氢氧化锂(23.5mg，0.98mmol)在甲醇(5mL)中的溶液搅拌16小时，用水稀释，用1M盐酸酸化并且用乙酸乙酯萃取。将有机相分离，用饱和的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且减压浓缩，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸(50mg，92％产率)，为无色油状物。
步骤D：2-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)环丙烷-1-甲酸
标题化合物以类似于实施例394步骤F的方法制备，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-N-甲基-环丙烷甲酰胺(45mg，86％产率)，为黄色固体。MS-ESI：[M+H]+291.1。
步骤E：2-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-N-甲基环丙烷-1-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到2-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)-N-甲基-环丙烷甲酰胺(35mg，87％产率)，为黄色固体。
步骤F：N-(2,2-二甲基-6-(2-(甲基氨基甲酰基)环丙基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例394步骤F的方法制备，得到N-[2,2-二甲基-6-[2-(甲基氨基甲酰基)环丙基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10mg，18％产率)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ9.96(s,1H),9.38(d,J＝6.8Hz,1H),8.86-8.76(m,1H),8.68(s,1H),7.97(d,J＝4.4Hz,2H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.50(s,1H),3.00(s,2H),2.42(d,J＝4.6Hz,3H),2.40-2.31(m,1H),1.79(dt,J＝8.8,4.7Hz,1H),1.40(s,7H),1.17(d,J＝9.5Hz,1H)。MS-ESI：[M+H]+406.3。
实施例396：N-(6-((1R,2R)-2-氨基甲酰基环丙基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸
标题化合物以类似于实施例395步骤C的方法制备，得到(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸，为白色固体。(140mg，定量)，为白色固体。MS-ESI：[M+H]+278.1。
步骤B：(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷羰基氯
将(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸(45mg，0.16mmol)和亚硫酰氯(10mL，0.16mmol)的混合物加热至80℃并且搅拌3小时。然后将反应浓缩，得到(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷羰基氯(50mg，定量)。MS-ESI：[M+H]+292.2。
步骤C：(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)环丙烷-1-甲酰胺
将(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷羰基氯(45mg，0.15mmol)和氢氧化铵(5mL)的溶液搅拌12小时并且浓缩，得到(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酰胺(40mg，95％产率)，为白色固体。MS-ESI：[M+H]+277.2
步骤D：(1R,2R)-2-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)环丙烷-1-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到(1R,2R)-2-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酰胺(10mg，28％产率)，将其直接应用而无需进一步纯化。MS-ESI：[M+H]+247.3。
步骤E：N-(6-((1R,2R)-2-氨基甲酰基环丙基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例395步骤C的方法制备，得到N-[6-[(1R,2R)-2-氨基甲酰基环丙基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(3mg，19％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ9.96(s,1H),9.38(d,J＝6.9Hz,1H),8.86(d,J＝4.2Hz,1H),8.68(s,1H),7.97(s,1H),7.58(s,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.3Hz,1H),6.87(s,1H),6.50(s,1H),3.00(s,2H),2.33(s,1H),1.91-1.75(m,1H),1.41(d,J＝2.9Hz,6H),1.38-1.12(m,2H)。MS-ESI：[M+H]+392.3。
实施例397：N-(6-((1R,2R)-2-(羟基甲基)环丙基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：((1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)环丙基)甲醇
将(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙烷甲酸(实施例396，步骤A；50mg，0.18mmol)在硼烷-四氢呋喃复合物(5mL，10mmol)中的混合物在25℃搅拌2小时。加入甲醇(20mL)并且将反应浓缩，得到[(1R,2R)-2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙基]甲醇(40mg，84％产率)，为黄色固体。MS-ESI：[M+H]+264.1。
步骤B：((1R,2R)-2-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)环丙基)甲醇
标题化合物以类似于实施例2步骤B的方法制备，得到[(1R,2R)-2-(5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-基)环丙基]甲醇(36mg，100％产率)，将其直接应用而无需进一步纯化。MS-ESI：[M+H]+234.2。
步骤C：N-(6-((1R,2R)-2-(羟基甲基)环丙基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例395步骤C的方法制备，得到N-[6-[(1R,2R)-2-(羟基甲基)环丙基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(38.2mg，65％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ9.91(s,1H),9.43-9.32(m,1H),8.86(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.69(s,1H),7.90(s,1H),7.33(dd,J＝7.1,4.2Hz,1H),6.46(s,1H),3.55-3.36(m,2H),2.99(s,2H),1.86(dt,J＝9.7,4.9Hz,1H),1.40(s,6H),1.32(q,J＝6.1Hz,1H),1.00(dt,J＝9.1,4.7Hz,1H),0.78(dt,J＝9.2,4.9Hz,1H)。MS-ESI：[M+H]+379.2。
实施例398：N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)-6-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例381的方法制备，应用5-氨基-2-异丙基-6-吗啉代异二氢吲哚-1-酮(实施例138，步骤C)，得到N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)-6-(甲基氨基)吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺(15mg，26％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.78(s,1H),8.76(s,1H),8.68(s,1H),8.43(s,1H),8.34(s,1H),7.55(s,1H),6.37(s,1H),4.41(s,3H),3.89(m,4H),2.89(m,4H),2.76(m,3H),1.22(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝450.0[M+H]+。
实施例399和400：N-[2-[(3R,4S)-3-氟四氢吡喃-4-基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[2-[(3S,4R)-3-氟四氢吡喃-4-基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(二溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯
在1-溴-2,5-吡咯烷二酮(7.83g，44.02mmol)在四氯化碳(100mL)中的溶液中加入苯甲酰基过氧化物(0.43mg，1.76mmol)和5-氟-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(2.0g，8.8mmol)。将混合物在100℃搅拌16小时，浓缩，并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱5％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-(二溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯(2.80g，82％产率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.84(d,J＝7.2Hz,1H),7.92(s,1H),7.83(d,J＝10.4Hz,1H),4.48(q,J＝7.2Hz,1H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤B：5-氟-2-甲酰基-4-硝基-苯甲酸乙酯
在2-(二溴甲基)-5-氟-4-硝基-苯甲酸乙酯(2.50g，6.49mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中加入在水(30mL)中的硝酸银(4.41g，25.98mmol)，并且将混合物在25℃搅拌16小时。在反应中分批加入碳酸氢钠(1.0g)并且将反应搅拌48小时。将反应过滤并且用乙酸乙酯(200mL)稀释。分离有机相并且将水相用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，并且经硫酸钠干燥。浓缩后，将粗油状物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱10％乙酸乙酯:石油醚)，得到5-氟-2-甲酰基-4-硝基-苯甲酸乙酯(0.85g，54％产率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.59(s,1H),8.63(d,J＝7.2Hz,1H),7.91(d,J＝10.8Hz,1H),4.51(q,J＝7.2Hz,1H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：2-甲酰基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯
在0℃，在5-氟-2-甲酰基-4-硝基-苯甲酸乙酯(850mg，3.52mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(911mg，7.05mmol)和吗啉(399mg，4.58mmol)并且搅拌2小时。反应完成后，将混合物用水(20mL)稀释并且用二氯甲烷(80mL x 2)洗涤。将有机相合并并且用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩。将残留物在硅胶柱上纯化(洗脱30％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-甲酰基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯(540mg，49％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.38(s,1H),8.37(s,1H),7.50(s,1H),4.48(q,J＝7.2Hz,2H),3.86(t,J＝4.4Hz,4H),3.26(t,J＝4.4Hz,4H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝308.9[M+H]+。
步骤D：4-氨基-2-甲酰基-5-吗啉代-苯甲酸乙酯
在2-甲酰基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯(0.5g，1.6mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入铁(0.45g，8.1mmol)和氯化铵(0.43g，8.1mmol)。将反应在80℃搅拌1小时，过滤并且将滤液浓缩。将残留物溶于二氯甲烷(90mL)并且用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩至干燥，得到4-氨基-2-甲酰基-5-吗啉代-苯甲酸乙酯(0.42g，93％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝278.9[M+H]+。
步骤E：反式-4-氨基-2-(((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)甲基)-5-吗啉代苯甲酸乙酯
在反式-3-氟四氢吡喃-4-胺(77mg，0.65mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入4-氨基-2-甲酰基-5-吗啉代-苯甲酸乙酯(150mg，0.54mmol)。将混合物在20℃搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(67mg，1.08mmol)并且将反应在20℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过制备TLC纯化(洗脱：100％乙酸乙酯)，得到反式-4-氨基-2-(((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)甲基)-5-吗啉代苯甲酸乙酯(100mg，48％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝382.0[M+H]+。
步骤F：反式-5-氨基-2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代异二氢吲哚-1-酮
在氮气下，在三乙胺(53mg，0.52mmol)在甲苯(5mL)中的溶液中加入反式-4-氨基-2-(((3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)甲基)-5-吗啉代苯甲酸乙酯(100mg，0.26mmol)。将混合物在110℃搅拌24小时，浓缩，并且通过制备TLC纯化(洗脱：100％乙酸乙酯)，得到反式-5-氨基-2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代异二氢吲哚-1-酮(75mg，85％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝358.0[M+Na]+。
步骤G：反式-N-(2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(48mg，0.27mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中加入反式-5-氨基-2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代异二氢吲哚-1-酮(75mg，0.22mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(86mg，0.67mmol)。将反应在40℃搅拌12小时，浓缩，并且通过制备TLC纯化(洗脱10％甲醇:二氯甲烷)，得到反式-N-(2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，32％产率)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝481.1[M+H]+。
步骤H：N-(2-((3R,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-(2-((3S,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将反式-N-(2-(3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，0.07mmol)通过制备SFC分离(AD(250mm*30mm，10um)，55％，0.1％氢氧化铵，在甲醇中)，得到N-(2-((3R,4S)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(10mg，30％产率)和N-(2-((3S,4R)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(11mg，31％产率)，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例399，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.94(s,1H),8.96-8.69(m,4H),7.76(s,1H),7.13(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),4.88-4.66(m,1H),4.56-4.44(m,2H),4.30-4.22(m,1H),4.02(t,J＝4.4Hz,4H),3.59-3.39(m,2H),3.00(t,J＝4.4Hz,4H),2.04-1.96(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝481.1[M+H]+。
实施例400，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.94(s,1H),8.97-8.73(m,4H),7.76(s,1H),7.13(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),4.86-4.65(m,1H),4.55-4.44(m,2H),4.30-4.22(m,1H),4.03-4.01(m,4H),3.59-3.39(m,2H),3.05-2.90(m,4H),2.04-1.96(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝481.1[M+H]+。
实施例401：N-(2-甲基-7-吗啉代-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-甲基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯
将5-氟-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(1.4g，6.16mmol)和吗啉(2.15g，24.65mmol)的混合物在110℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩至干燥，并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱梯度10-50％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-甲基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯(1.6g，88％产率)，为红色油状物。
步骤B：5-吗啉代-4-硝基-2-(2-氧代乙基)苯甲酸乙酯
在2-甲基-5-吗啉代-4-硝基-苯甲酸乙酯(0.5g，1.70mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入Bredereck试剂(0.3g，1.70mmol)。将混合物在140℃达3小时。冷却至室温，浓缩至干燥并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱梯度10-50％乙酸乙酯:石油醚)，得到5-吗啉代-4-硝基-2-(2-氧代乙基)苯甲酸乙酯(0.2g，36％产率)，为红色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.80(s,1H),7.80(s,1H),7.61(s,1H),4.37(q,J＝6.8Hz,2H),4.08(s,2H),3.85(t,J＝4.4Hz,4H),3.10(t,J＝4.4Hz,4H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-异喹啉-1-酮
在甲基胺(135mg，4.34mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入5-吗啉代-4-硝基-2-(2-氧代乙基)苯甲酸乙酯(200mg，0.62mmol)并且将反应在微波条件照射下在140℃达30分钟。将反应混合物浓缩至干燥，并且通过制备TLC纯化(洗脱50％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-异喹啉-1-酮(60mg，33％产率)，为红色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.83(s,1H),7.09(d,J＝7.6Hz,1H),6.47(d,J＝7.6Hz,1H),3.86(t,J＝4.4Hz,4H),3.63(s,3H),3.12(t,J＝4.4Hz,4H)。
步骤D：6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢异喹啉-1-酮
在2-甲基-7-吗啉代-6-硝基-异喹啉-1-酮(150mg，0.52mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入10％钯炭(55mg，0.05mmol)。在65℃、氢气(15psi)下，将反应混合物搅拌1小时，过滤并且将滤液浓缩，得到6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢异喹啉-1-酮(120mg，88％产率)，为白色固体。将粗品直接应用而无需进一步纯化。LCMS(ESI)：m/z＝262.0[M+H]+。
步骤E：6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢异喹啉-1-酮
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(82mg，0.51mmol)和6-氨基-2-甲基-7-吗啉代-3,4-二氢异喹啉-1-酮(120mg，0.46mmol)在吡啶(6mL)中的溶液中加入磷酰氯(0.21mL，2.3mmol)并且将反应在25℃搅拌2小时。在0℃，将反应混合物用10％碳酸氢钠(5mL)水溶液猝灭并且用乙酸乙酯(10mL*2)萃取。将有机相分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过反相色谱纯化(乙腈45-75％，0.05％氨，在水中)，得到N-(2-甲基-7-吗啉代-1-氧代-3,4-二氢异喹啉-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(17mg，9％产率)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.86(s,1H),8.87-8.70(m,3H),8.56(s,1H),7.98(s,1H),7.12(s,1H),4.03-3.95(m,4H),3.59-3.56(m,2H),3.16(s,3H),3.04-2.99(m,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝407.0[M+H]+。
实施例402：N-(7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-氨基-5-氯-4-硝基苯-1-磺酰氯
将4-氯-3-硝基苯胺(10.0g，57.95mmol)分小批加入至充分搅拌的保持在10℃的氯磺酸(28mL，406.3mmol)溶液中，然后升至150℃达1小时。将反应冷却至室温，滴加入亚硫酰氯(7.5mL，102.41mmol)，并且将反应返回至150℃达1小时。将反应冷却至室温，倾倒在碎冰(50g)上并且用乙酸乙酯(150mL x 3)萃取。将有机相合并，经硫酸钠干燥，浓缩，并且通过柱色谱纯化(洗脱梯度15-20％乙酸乙酯:石油醚)，得到2-氨基-5-氯-4-硝基-苯磺酰氯(6.0g，38％产率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(s,1H),7.27(s,1H),5.57(s,2H)。
步骤B：2-氨基-5-氯-4-硝基苯硫醇
在装有氮气入口、回流冷凝器和氯化钙防护管的100mL三颈圆底烧瓶中在三苯膦(8.7g，33.20mmol)在甲苯(60mL)中的溶液中分批加入2-氨基-5-氯-4-硝基-苯磺酰氯(3.0g，11.07mmol)。将反应在15℃搅拌1小时，加入水(50mL)，并且将反应搅拌30分钟。完成后，将有机相分离并且用10％氢氧化钠水溶液(15mL x 2)洗涤。将碱水萃取物用乙酸乙酯(30mL x 2)洗涤，用2M盐酸酸化并且用二氯甲烷(30mL x 2)萃取。然后，将合并的有机萃取物用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩至干燥，得到2-氨基-5-氯-4-硝基-苯硫醇(1.7g，75％产率)，为橙色固体，将其直接应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(s,1H),7.81(s,1H)。
步骤C：7-氯-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-3(4H)-酮
在2-氨基-5-氯-4-硝基-苯硫醇(1.7g，8.31mmol)、乙硫醇(1.8mL，24.92mmol)和溴乙酸乙酯(4.2g，24.92mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中加入1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯(3.8g，24.92mmol)。将反应在20℃搅拌2分钟，浓缩至干燥，溶于乙酸乙酯(30mL)并且用水(30mL x 2)和盐水(30mL)洗涤。然后将有机相经硫酸钠干燥并且浓缩。然后将材料溶于乙酸(10mL)，在100℃搅拌10分钟，浓缩，并且通过快速柱色谱纯化(洗脱60％乙酸乙酯:石油醚)，得到7-氯-6-硝基-4H-1,4-苯并噻嗪-3-酮(1.3g，64％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.98(s,1H),7.83(s,1H),7.63(s,1H),3.63(s,2H)。
步骤D：7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-3-酮
将7-氯-6-硝基-4H-1,4-苯并噻嗪-3-酮(1.2g，4.90mmol)在吗啉(17mL，198.17mmol)中的混合物在120℃搅拌18小时。将反应用乙酸乙酯(40mL x 3)萃取并且将有机相合并，用水(40mL x 2)和盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱50％乙酸乙酯，在石油醚中)得到7-吗啉代-6-硝基-4H-1,4-苯并噻嗪-3-酮(700mg，48％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),7.42(s,1H),7.11(s,1H),3.87-3.85(m,4H),3.50(s,2H),3.04-3.03(m,4H)。
步骤E：7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-3-酮1,1-二氧化物
将在1,4-二烷(10mL)中的7-吗啉代-6-硝基-4H-1,4-苯并噻嗪-3-酮(700mg，2.37mmol)用3-氯过氧基苯甲酸(1.4g，7.11mmol)处理并且在40℃搅拌12小时。将反应浓缩至干燥并且将残留物溶于乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)中。将有机相分离，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱梯度0-33％乙酸乙酯:石油醚)，得到7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-3-酮1,1-二氧化物(500mg，64％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.71(s,1H),7.63(s,1H),5.75(s,1H),4.83(s,2H),3.67(t,J＝4.4Hz,4H),2.99(t,J＝4.4Hz,4H)。
步骤F：7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物
在20℃，在7-吗啉代-6-硝基-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-3-酮1,1-二氧化物(500mg，1.53mmol)在四氢呋喃(60mL)中的溶液中加入硼烷(1M，在四氢呋喃中，7.64mL，7.64mmol)。将混合物在65℃搅拌2小时，冷却至0℃，用滴加甲醇(10mL)处理并且在65℃搅拌1小时。浓缩后，得到7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(400mg，84％产率)，为红色油状物，将其用于下面的步骤而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ7.56(s,1H),7.37(s,1H),7.14(s,1H),3.75-3.74(m,2H),3.63-3.60(m,4H),3.49-3.46(m,2H),2.83-2.80(m,4H)。
步骤G：6-氨基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物
在7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(400mg，1.28mmol)在甲醇(50mL)中的溶液中加入10％钯炭(1.4g，1.28mmol)。将混合物在25℃、氢气(15psi)下搅拌2小时。将反应过滤并且将滤液浓缩，得到6-氨基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(350mg，97％产率)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝283.8[M+H]+。
步骤H：N-(7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-氨基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(260mg，0.92mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(150mg，0.92mmol)和((3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)氧基)三(吡咯烷-1-基)磷六氟磷酸盐(574mg，1.1mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(237mg，1.84mmol)。将混合物在90℃搅拌48小时，浓缩至干燥并且将残留物溶于乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)。将有机相分离，用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，并且通过硅胶柱色谱纯化(洗脱梯度0-60％乙酸乙酯，在石油醚中)。将粗固体用甲醇(10mL)洗涤并且真空干燥，得到N-(7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(104mg，25％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.83(s,1H),9.40-9.38(m,1H),8.96(m,1H),8.72(s,1H),8.10(s,1H),7.38-7.36(m,2H),7.10(s,1H),3.87-3.85(m,4H),3.71-3.69(m,2H),3.33-3.31(m,2H),2.80-2.78(m,4H)。LCMS(ESI)：m/z＝428.9[M+H]+。
实施例403：N-(3,3-二甲基-7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2-氨基-5-氟-4-硝基-苯基)硫烷基-2-甲基-丙-2-醇
在于水(10mL)中的2-氨基-5-氟-4-硝基-苯硫醇(实施例402，步骤B；1.82g，8.6mmol)中加入1,2-环氧基-2-甲基丙烷(6.2g，86.0mmol)和二氯甲烷(10mL)并且将混合物在10℃剧烈搅拌2小时。然后将有机层分离，用盐水(5mL x 2)洗涤，并且浓缩，得到1-(2-氨基-5-氟-4-硝基-苯基)硫烷基-2-甲基-丙-2-醇(0.86g，38％产率)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.35(m,1H),7.30-7.27(m,1H),4.33(s,2H),3.09(s,2H),1.99(s,1H),1.37(s,6H)。
步骤B：7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并噻嗪
将在二甲苯(10mL)中的1-(2-氨基-5-氟-4-硝基-苯基)硫烷基-2-甲基-丙-2-醇(0.76g，2.9mmol)用磷酸(5.69g，58.09mmol)处理并且在氮气气氛下加热至120℃。将混合物用1:1乙酸乙酯:水(10mL)稀释并且将有机相分离，用水(5mL x 2)洗涤，浓缩，并且通过硅胶柱纯化(洗脱20％乙酸乙酯:石油醚)，得到7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并噻嗪(0.53g，75％产率)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16(d,J＝6.4,1H),6.95(d,J＝10.8,1H),3.94(s,1H),2.83(s,2H),1.38(s,6H)。
步骤C：7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物
在7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-2,4-二氢-1,4-苯并噻嗪(0.5g，2.06mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入3-氯过氧基苯甲酸(2.09g，10.32mmol)并且将混合物在10℃搅拌1小时。将反应用饱和的1:1碳酸氢钠:亚硫酸钠(30mL)溶液猝灭并且将有机相分离。将有机相用盐水(20mL x 2)洗涤，过滤并且将滤液减压浓缩，得到7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(0.5g，88％产率)，为黄色固体。
步骤D：3,3-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物
在7-氟-3,3-二甲基-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(0.4g，1.46mmol)在二甲亚砜(10mL)中的溶液中加入吗啉(1.27g，14.58mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.95g，7.29mmol)并且将混合物在90℃搅拌2小时。冷却至20℃后，将反应用3:2乙酸乙酯:水(25mL)稀释。将有机相分离，用盐水(5mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，并且减压浓缩，得到粗残留物，将其通过硅胶柱纯化(洗脱5％甲醇:二氯甲烷)，得到3,3-二甲基-7-吗啉代-6-硝基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(160mg，32％产率)，为橙色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.59(s,1H),6.91(s,1H),4.36(s,1H),3.76(t,J＝4.4Hz,4H),3.33(s,2H),2.94(t,J＝4.4Hz,4H),1.53(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝341.9[M+H]+。
步骤E：6-氨基-3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物
标题化合物类似于实施例402步骤G的方法制备，得到6-氨基-3,3-二甲基-7-吗啉代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(0.14g，100％产率)，为白色固体。1HNMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ6.94(s,1H),6.26(s,1H),5.94(s,1H),5.44(s,2H),3.72(t,J＝4.4Hz,4H),3.26(s,2H),2.68(t,J＝4.4Hz,4H),1.33(s,6H)。
步骤F：N-(3,3-二甲基-7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例287步骤G的方法制备，得到N-(3,3-二甲基-7-吗啉代-1,1-二氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噻嗪-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，28％产率)，为灰色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.83(s,1H),9.40-9.39(m,1H),8.98-8.97(m,1H),8.73(s,1H),8.11(s,1H),7.39-7.37(m,1H),7.37(s,1H),6.94(s,1H),3.88-3.86(m,4H),3.43(s,2H),2.82-2.80(m,4H),1.40(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝457[M+H]+。
实施例404：N-(2,2-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1-甲基-1H-吡唑
在6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(0.2g，0.88mmol)、1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(64.3mg，0.09mmol)和碳酸铯(0.57g，1.76mmol)在1,4-二烷(2mL)和水(0.2mL)中的混合物中加入1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.37g，1.76mmol)。将混合物用氮气吹扫(3x)并且在120℃搅拌24小时。冷却至20℃，将混合物通过硅藻土过滤并且通过制备TLC纯化(洗脱50％乙酸乙酯:石油醚)，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1-甲基-1H-吡唑(0.2g，83％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝273.9[M+H]+。
步骤B：2,2-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
标题化合物以类似于实施例402步骤G的方法制备，得到2,2-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺(0.16g，90％产率)，为深绿色油状物。LCMS(ESI)：m/z＝244.0[M+H]+
步骤C：N-(2,2-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例138步骤D的方法制备，得到N-(2,2-二甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg，81％产率)，为绿色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ9.68(s,1H),9.33(m,1H),8.65(s,1H),8.63-8.62(m,1H),7.94(s,1H),7.91(s,1H),7.62(s,1H),7.28-7.25(m,1H),6.72(s,1H),3.84(s,3H),3.04(s,2H),1.44(s,6H)。
实施例405：N-(6-(5-氰基吡啶-3-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例404的方法制备，得到N-(6-(5-氰基吡啶-3-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CDCl3):9.40(s,1H),8.92-8.88(m,2H),8.77(d,J＝6.4Hz,1H),8.70(s,1H),8.35(s,1H),8.15-8.05(m,2H),7.01-6.97(m,1H),6.64(s,1H),3.13(s,2H),1.54(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝411.2[M+H]+。
实施例406：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-2-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(100.0mg，0.44mmol)和1-甲基-2-(三丁基锡烷基)咪唑(245mg，0.66mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的溶液在20℃用氮气吹扫15分钟。加入四(三苯膦)钯(0)(51mg，0.04mmol)并且将混合物在55℃搅拌16小时。加入乙酸(0.6mL)，然后加入水(20mL)并且将反应混合物用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将合并的有机相分离，用水(40mL x 4)和盐水(40mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩，得到2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑(34mg，28％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.55(s,1H),6.97(s,1H),6.67(s,1H),3.45(s,3H),3.13(s,2H),1.56(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝273.9[M+H]+。
步骤B：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-2-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-2-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺按照实施例404步骤B-C中描述的方法由2-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑制备，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.68(s,1H),8.73-8.68(m,2H),8.48-8.45(m,2H),7.56(s,1H),7.18(s,1H),6.95-6.92(m,1H),6.65(s,1H),3.40(s,3H),3.12(s,2H),1.52(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝389.2[M+H]+。
实施例407：6-氰基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在15℃、氮气气氛下，将5-氨基-1H-吡唑-4-甲酸(0.5g，3.93mmol)、甲烷三甲醛(0.47g，4.7mmol)和乙酸(1mL)在乙醇(6mL)中的混合物搅拌1小时，然后在70℃搅拌15小时。将悬浮液过滤并且将沉淀用乙醇(10mL)洗涤。收集固体并且干燥，得到6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(0.47g，63％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6):δ12.68(s,1H),10.06(s,1H),9.92(s,1H),9.11(d,J＝2.4Hz,1H),8.78(s,1H)。
步骤B：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例1步骤C的方法制备，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.21g，62％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝421.9[M+H]+。
步骤C：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-((羟基亚氨基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在搅拌的N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.15g，0.35mmol)在乙醇(5mL)中的溶液中加入盐酸羟胺(97mg，1.4mmol)和乙酸钠(0.11g，1.4mmol)。将混合物在20℃、氮气气氛下搅拌2小时。加入水(10mL)并且将混合物用二氯甲烷(50mL x 4)萃取，经硫酸钠干燥并且减压浓缩，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-((羟基亚氨基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(155mg，99％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝437.0[M+H]+。
步骤D：6-氰基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在搅拌的N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-((羟基亚氨基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg，0.41mmol)在四氯化碳(5mL)中的溶液中加入亚硫酰氯(0.15mL，2.06mmol)。将混合物在65℃、氮气气氛下搅拌2小时。加入水(10mL)并且将混合物用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩至干燥。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱3％甲醇:二氯甲烷)，然后在甲醇中重结晶，得到6-氰基-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(53mg，29％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.33(s,1H),9.20(d,J＝2.0Hz,1H),8.95(s,1H),8.85(d,J＝2.0Hz,1H),8.40(s,1H),6.68(s,1H),3.94(t,J＝4.0Hz,4H),3.05(s,2H),2.91(t,J＝4.0Hz,4H),1.50(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝419.1[M+H]+。
实施例408：1-(2-氨基-2-氧代乙基)-4-(2,2-二甲基-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)-1-甲基哌嗪-1-
在环境温度，将N-(6-(4-(2-氨基-2-氧代乙基)哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(27mg，0.06mmol)在四氢呋喃(1mL)中的溶液加入至氢化钠(60质量％，在油中，2.8mg，0.069mmol)在四氢呋喃(0.3mL)中的溶液中，然后在60℃加热2小时。将混合物冷却至室温并且用碘甲烷(4.3mL，0.069mmol)在二甲基甲酰胺N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的溶液处理。在40℃12小时后，将反应用水(1mL)猝灭。将反应混合物减压浓缩并且以类似于实施例145的方法纯化，得到标题化合物，为固体(7.6mg，27％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.05(s,1H),9.39(dd,J＝7.0,1.3Hz,1H),9.10(d,J＝2.9Hz,1H),8.69(s,1H),8.48(s,1H),8.29(s,1H),7.80(s,1H),7.36(dd,J＝6.9,4.2Hz,1H),6.95(s,1H),4.38(s,2H),3.88(d,J＝12.6Hz,2H),3.74(d,J＝12.4Hz,3H),3.42(s,3H),3.27(m,4H),3.02(s,2H),1.43(s,6H)。LCMS(ESI)m/z:464.2[M+H]+。
实施例409、410、411和412：N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；和N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。
步骤A：1,1,1-三氟-2-(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)丙-2-醇
将(6-氟-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)甲醇(中间体3)(250mg，1.10mmol)、1,1,1-三氟-2-(4-哌啶基)丙-2-醇(250mg，1.27mmol)和碳酸铯(1.18g，3.63mmol)在乙腈(5mL)中的混合物在80℃搅拌18小时。加入乙酸异丙酯、水和盐水并且分离有机相并且经硫酸钠干燥。过滤并且减压浓缩后，将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到1,1,1-三氟-2-(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)丙-2-醇化合物，含3-甲基-6-硝基-7-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-3-醇(359mg，81％产率)，为橙色油状物。MS(ESI)：m/z＝405.1[M+1]+。
步骤B：2-(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)-1,1,1-三氟丙-2-醇
将1,1,1-三氟-2-(1-(2-(羟基甲基)-2-甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)丙-2-醇(357mg，0.883mmol)、铁粉(247mg，4.41mmol)和氯化铵(236mg，4.41mmol)在乙醇(18mL)和水(6mL)中的混合物在50℃搅拌3小时。将反应过滤，将滤液减压浓缩，并且将残留物通过硅胶柱色谱纯化，(洗脱梯度0％-20％甲醇:二氯甲烷)，得到2-(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)-1,1,1-三氟丙-2-醇化合物，含6-氨基-3-甲基-7-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-3-醇(253mg，77％产率)。MS(ESI)：m/z＝375.1[M+1]+。
步骤C：N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-(1-(5-氨基-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌啶-4-基)-1,1,1-三氟丙-2-醇(253mg，0.676mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(135mg，0.744mmol)、4-二甲基氨基吡啶(16.7mg，0.135mmol)和二异丙基乙基胺(0.35mL，2.03mmol)在1,2-二氯乙烷(5.00mL)中的混合物在25℃搅拌18小时。将粗反应减压浓缩，得到N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-(3-羟基-3-甲基-7-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
步骤D：N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；N-((R)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；和N-((S)-2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。
将N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-6-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-(3-羟基-3-甲基-7-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例X)通过手性SFC拆分：(Jasco 2088 SFC(Chiralpak AD，250*21.2mm，5um)，25％甲醇/0.1％氢氧化铵，70mL/分钟，100bar，40℃，220nm)，然后(Jasco 2088 SFC(Whelk-O1,150*21.2mm，5um)，35％甲醇，含0.1％氢氧化铵，70mL/分钟，100bar，40℃，220nm)；(PIC 100 SFC(Chiralpak AD 250*21.2mm 5um)，25％IPA 2，含0.1％氢氧化铵，70mL/分钟，100bar，40℃，220nm。任意指定绝对和相对立体化学
实施例409，峰5：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.24(s,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),5.85(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.49-3.38(m,2H),3.26-3.15(m,2H),3.00(d,J＝11.6Hz,2H),2.82(d,J＝15.7Hz,1H),2.64(d,J＝24.0Hz,2H),1.88-1.60(m,6H),1.34(s,3H),1.27(s,4H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
实施例410，峰4：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.24(s,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),5.85(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.50-3.37(m,2H),3.25-3.10(d,J＝15.7Hz,1H),2.99(m,2H),2.82(d,J＝15.7Hz,1H),2.73-2.56(m,2H),1.91-1.63(m,5H),1.34(s,3H),1.27(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
实施例411，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.24(s,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),5.85(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.43(p,J＝5.5Hz,2H),3.19(d,J＝15.7Hz,1H),3.00(m,2H),2.82(d,J＝15.7Hz,1H),2.64(m 2H),1.86-1.65(m,5H),1.34(s,3H),1.27(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
实施例412，峰3：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.24(s,1H),7.33(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.65(s,1H),5.86(s,1H),5.03(t,J＝5.8Hz,1H),3.47-3.38(m,2H),3.19(d,J＝16.1Hz,1H),3.11-2.88(m,2H),2.82(d,J＝16.0Hz,1H),2.62(m,2H),1.92-1.59(m,5H),1.34(s,3H),1.27(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
表13.类似于实施例409-412的方法制备以下实施例
实施例421、422和423：N-((S)-3-羟基-3-甲基-7-(4-((S)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺；N-((R)-3-羟基-3-甲基-7-(4-((R)-1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-(3-羟基-3-甲基-7-(4-(1,1,1-三氟-2-羟基丙-2-基)哌啶-1-基)色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。
标题化合物以产生实施例409-412的方法制备并且在实施例409-412步骤D期间分离。任意指定绝对和相对立体化学。
实施例421，峰3:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),9.41-9.31(m,1H),8.90(d,J＝2.7Hz,1H),8.68(s,1H),8.12(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.66(s,1H),5.86(s,1H),4.82(s,1H),3.75(s,2H),3.03(m,2H),2.68(d,J＝7.7Hz,2H),2.65-2.55(m,2H),1.77(m,5H),1.28(s,3H),1.19(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
实施例422，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.12(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.66(s,1H),5.87(s,1H),4.82(s,1H),3.74(s,2H),3.02(m,2H),2.76-2.65(m,2H),2.66-2.54(m,2H),1.78(m,5H),1.28(s,3H),1.19(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
实施例423，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.90(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.12(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.66(s,1H),5.87(s,1H),4.82(s,1H),3.74(s,2H),3.01(m,2H),2.78-2.53(m,2H),2.66-2.54(m,2H),1.78(m,5H),1.28(s,3H),1.19(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝520.2[M+1]+。
表14.以类似于实施例423-425的方法制备以下实施例
实施例434：N-(6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(10.0g，43.9mmol)、哌嗪(4.16g，48.3mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(25.4mL，154mmol)在二甲亚砜(133mL)中的混合物在45℃加热12小时。将混合物用水、盐水和二氯甲烷稀释。分离各相并且将水相萃取至二氯甲烷。将合并的有机相经硫酸钠干燥，减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-20％甲醇:二氯甲烷)，得到1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪(5.96g，49％产率)，为亮橙色泡沫状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.83(s,1H),6.57(s,1H),3.00(d,J＝1.1Hz,2H),2.91(d,J＝10.5Hz,8H),1.44(s,6H)。
步骤B：2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯
将1-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪(5.96g，21.5mmol)、碳酸钾(4.46g，32.3mmol)和2-溴乙酸乙酯(2.55mL，22.6mmol)在二甲基甲酰胺(100mL)中的混合物在环境温度搅拌18小时。将混合物用水、盐水和乙酸异丙酯稀释。分离各层并且将水相用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(7.74g，99％产率)，为橙色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(t,J＝1.2Hz,1H),6.59(s,1H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),3.27(s,2H),3.00(d,J＝1.0Hz,2H),2.99-2.93(m,4H),2.68-2.58(m,4H),1.44(s,6H),1.24-1.14(m,4H)。
步骤C：2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯
在氢气气氛下，将2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(7.74g，21.3mmol)和10％钯炭(2.27g，2.13mmol)在乙醇(100mL)中的混合物搅拌18小时。将混合物过滤并且将滤液减压浓缩，并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-5％甲醇:二氯甲烷)，得到2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(6.36g，90％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.52(s,1H),6.34(s,1H),4.17(s,2H),4.10(q,J＝7.1Hz,2H),3.25(s,2H),2.83(s,2H),2.74(d,J＝4.4Hz,4H),2.63(s,4H),1.34(s,6H),1.24-1.14(m,3H)。
步骤D：2-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯
将2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(6.36g，19.1mmol)、碳酸钾(5.28g，38.2mmol)、碘化钾(634mg，3.82mmol)和4-甲氧基苯甲酰氯(2.64mL，20.0mmol)在二甲基甲酰胺(38mL)中的混合物在环境温度搅拌18小时。加入另外的碳酸钾(5.28g，38.2mmol)和4-甲氧基苯甲酰氯(2.64mL，20.0mmol)。18小时后，将反应过滤并且将滤液真空浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-50％乙酸异丙酯:庚烷)，得到2-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(4.66g，47％产率)，为褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.04(d,J＝8.7Hz,4H),6.82(d,J＝8.7Hz,4H),6.62(s,1H),6.36(s,1H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),4.05(s,4H),3.71(s,6H),3.29-3.25(m,2H),3.07(s,4H),2.80(s,2H),2.72(d,J＝12.1Hz,4H),1.35(s,6H),1.24-1.13(m,3H)。
步骤E：1-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇
在环境温度，将在乙醚中的甲基溴化镁(3M，0.150mL，0.442mmol)加入至在四氢呋喃(2.1mL)中的2-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)乙酸乙酯(102mg，0.177mmol)并且将反应搅拌18小时。将混合物用水、饱和的氯化铵和乙酸异丙酯稀释。分离各层并且将水相萃取入乙酸异丙酯。将合并的有机相经硫酸钠干燥，减压浓缩并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0％-100％乙酸异丙酯:庚烷)，得到1-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(90mg，91％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.99(d,J＝8.7Hz,4H),6.83-6.77(m,4H),6.51(s,1H),6.44(s,1H),4.99(p,J＝6.3Hz,0H),4.08(s,4H),3.79(s,7H),3.23(s,5H),2.86(s,2H),2.82(t,J＝4.2Hz,4H),2.39(s,2H),1.45(s,7H),1.21(s,6H)。
步骤F：1-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇
在氢气气氛下，将1-(4-(5-(二(4-甲氧基苄基)氨基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(90mg，0.161mmol)和10％钯炭(17.1mg，0.0161mmol)在乙醇(5mL)中的混合物搅拌18小时。将混合物通过硅藻土垫过滤并且将滤液减压浓缩，得到1-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(37.4mg，73％产率)，将其应用而无需进一步纯化。
步骤G：N-(6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将1-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-2-醇(37.4mg，0.117mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(31.9mg，0.176mmol)和4-二甲基氨基吡啶(2.86mg，0.0234mmol)在吡啶(5mL)中的混合物在环境温度搅拌36小时。然后将反应减压浓缩并且通过制备HPLC纯化((Xbridge 21.2*250mm c18，10um；A：乙腈10-20％；B：在水中的10mM碳酸氢铵)，得到标题化合物(33.6mg，62％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.91(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.39(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.68(s,1H),4.10(s,1H),3.00(s,2H),2.79(m,8H),2.32(s,2H),1.42(s,6H),1.13(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝465.3[M+1]+。
实施例435：N-(6-(4-(2-乙基-2-羟基丁基)哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例434的方法制备，得到N-(6-(4-(2-乙基-2-羟基丁基)哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70.4mg，33％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.91(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.39(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.68(s,1H),3.79(s,1H),3.00(s,2H),2.79(m,8H),2.32(s,2H),1.54-1.29(m,10H),0.80(t,J＝7.4Hz,6H)。MS(ESI)：m/z＝493.3[M+1]+。
实施例436和437：(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺在手性拆分实施例141后产生。
将N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的混合物通过手性SFC拆分(Amylose-1 15*2.1cm，5um(PIC)，A＝CO2，B＝甲醇{0.1％氢氧化铵}40％等度)，得到(R)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(羟基甲基)-2-甲基-7-吗啉代色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(16mg，38％)(16mg，38％)，为类白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例436(S)，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.21(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.62(s,1H),4.97-4.82(m,1H),3.83(m,4H),3.48-3.36(m,2H),2.89-2.75(m,4H),2.70(m,2H),1.89(dt,J＝14.0,7.2Hz,1H),1.68(dt,J＝12.9,6.1Hz,1H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.2[M+1]+。
实施例437(R)，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.21(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.62(s,1H),4.90(t,J＝5.8Hz,1H),3.90-3.73(m,4H),3.49-3.35(m,2H),2.87-2.76(m,4H),2.76-2.65(m,2H),1.89(dt,J＝14.0,7.2Hz,1H),1.68(dt,J＝12.9,6.1Hz,1H),1.20(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝424.1[M+1]+。
实施例438和439：(S)-N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺在手性拆分实施例23后产生。
将N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的混合物通过手性SFC拆分(Amylose-1 15*2.1cm，5um(PIC)，A＝CO2，B＝甲醇{0.1％氢氧化铵}40％等度)，得到(R)-N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(2-(二甲基氨基甲酰基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(14mg，34％)(15mg，34％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例438，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.35(d,J＝1.0Hz,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.84(s,1H),3.84(m,5H),3.16(m,3H),3.09-3.01(m,1H),2.90-2.86(m,3H),2.85-2.79(m,4H),1.58(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝451.2[M+1]+。
实施例439，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.69(s,1H),8.35(s,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.84(s,1H),3.91-3.76(m,5H),3.20-3.12(m,3H),3.10-2.98(m,1H),2.88(s,3H),2.85-2.80(m,4H),1.57(d,J＝2.0Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝451.1[M+1]+。
实施例440：N-(2,2-二甲基-6-(4-(2-氧代-2-(((四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(中间体1)(200mg，0.88mmol)和2-哌嗪-1-基-N-(四氢呋喃-2-基甲基)乙酰胺(220mg，0.97mmol)在二甲亚砜(1.3mL)中的混合物用N,N-二异丙基乙基胺(0.17mL，0.97mmol)处理并且在60℃搅拌24小时。将混合物倾倒至水中并且将反应通过乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且过滤，然后浓缩至干燥。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度在庚烷中的0-100％IPAC)，得到2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺(347mg，94％)，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(s,1H),7.72(t,J＝6.0Hz,1H),6.59(s,1H),4.08(q,J＝5.3Hz,1H),3.86(p,J＝6.5Hz,1H),3.80-3.70(m,1H),3.66-3.56(m,1H),3.17(dd,J＝5.5,2.2Hz,4H),3.05-2.93(m,8H),2.56(dtdt,J＝4.5,2.0,1.0,0.5Hz,4H),1.93-1.73(m,3H),1.50(ddd,J＝10.1,7.8,5.4Hz,1H),1.44(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝419.2[M+H]+。
步骤B：2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺
将2-(4-(2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺(342mg，0.82mmol)、铁粉(245mg，4.39mmol)和氯化铵(235mg，4.39mmol)在乙醇(25mL)和水(5mL)中的混合物在60℃加热2小时。将反应混合物冷却至室温，然后通过硅藻土过滤并且浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺(210mg，0.54mmol，62％产率)，为固体，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝389.2[M+1]+。
步骤C：实施例X：N-(2,2-二甲基-6-(4-(2-氧代-2-(((四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-(4-(5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)哌嗪-1-基)-N-(四氢呋喃-2-基)乙酰胺(210mg，0.54mmol)、吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(240mg，1.32mmol)和4-二甲基氨基吡啶(21.5mg，0.175mmol)在吡啶(5mL)中的混合物在环境温度搅拌36小时。然后将反应减压浓缩并且通过制备HPLC纯化((Gemini NX，5*3cm c18，5um；A：乙腈20-60％；B：在水中的0.1％氢氧化铵)，得到标题化合物(108mg，0.202mmol，23％产率)，为固体。HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.97(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.33(s,1H),7.74(t,J＝6.0Hz,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.69(s,1H),3.92-3.80(m,1H),3.80-3.69(m,1H),3.68-3.54(m,1H),3.26-3.13(m,2H),3.08(d,J＝3.2Hz,2H),3.00(s,2H),2.89-2.80(m,4H),2.72(s,4H),1.92-1.73(m,3H),1.56-1.45(m,1H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝534.2[M+1]+。
表15.以实施例440的类似方法制备以下实施例：
实施例444：(R)-N-(2-甲基-2-(2-(甲硫基)乙基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：甲磺酸(R)-2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙酯
在0℃，在(R)-N-(2-(2-羟基乙基)-2-甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例388)(32mg，0.076mmol)和三乙胺(0.016mL，0.11mmol)在二氯甲烷(1.0mL)中的混合物中加入甲磺酰氯(0.0070mL，0.091mmol)。15分钟后，将混合物用水稀释并且用二氯甲烷萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤，并且真空浓缩，得到甲磺酸(R)-2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙酯(38mg，0.076mmol)，将粗品应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝502.2[M+1]+。
步骤B：硫代乙酸(R)-S-(2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙基)酯
将甲磺酸(R)-2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙酯(38mg，0.076mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液用硫代甲醇钠(8.4mg，0.11mmol)处理并且加热至60℃达4小时。在60℃在混合物中加入碳酸钾(52mg，0.38mmol)。2小时后，加入硫代乙酸钾(43mg，0.38mmol)并且在90℃加热18小时。将混合物用水稀释并且用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯)，得到硫代乙酸(R)-S-(2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙基)酯(24mg，0.050mmol，66％产率)，为固体。MS(ESI)：m/z＝482[M+1]+。
步骤C：(R)-N-(2-甲基-2-(2-(甲硫基)乙基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将硫代乙酸(R)-S-(2-(2-甲基-6-吗啉代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)-2,3-二氢苯并呋喃-2-基)乙基)酯(24mg，0.050mmol)在甲醇(3mL)中的溶液在环境温度用氢氧化钠(3.0mg，0.075mmol)处理1小时。加入碘甲烷(4.0ul，0.061mmol)并且将反应混合物在该温度继续搅拌2小时。将混合物用水稀释并且用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过制备HPLC纯化((Gemini NX，5*3cm c18，5um；A：乙腈30-70％；B：在水中的0.1％氢氧化铵)，得到(R)-N-(2-甲基-2-(2-(甲硫基)乙基)-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2.6mg，0.0057mmol，11％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.37(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.68(s,1H),8.31(s,1H),7.34(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.73(s,1H),3.88-3.78(m,4H),3.14(d,J＝16.6Hz,1H),2.94(d,J＝16.6Hz,1H),2.85-2.77(m,4H),2.57-2.52(m,2H),2.07(s,3H),2.00-1.90(m,2H),1.39(s,3H)。MS(ESI)：m/z＝454.1[M+1]+。
实施例445：(R)-N-(6-((1-(2-氨基-2-氧代乙基)吡咯烷-3-基)氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(50mg，0.22mmol)和(R)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(82mg，0.44mmol)在DMSO(1.7mL)中的混合物用氢化钠(60％，在油状物中，18mg，0.44mmol)在室温处理1小时。将反应混合物用饱和的碳酸氢钠溶液、盐水和乙酸异丙酯稀释。分离各层并且将水相萃取入乙酸异丙酯(3x)。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并且减压吸附在硅藻土上。将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯)，得到(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(64mg，0.17mmol，77％产率)，为固体。
步骤B：(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷
将(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(64mg，0.17mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液在室温用三氟乙酸(0.50mL)处理。30分钟后，将溶剂真空除去，得到粗残留物(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷，将其应用而无需进一步纯化。
步骤C：(R)-2-(3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺
将(R)-3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷(47mg，0.17mmol)在1,4-二烷(13mL，0.013M)中的混合物用N,N-二异丙基乙基胺(0.088mL，0.50mmol)和2-溴乙酰胺(26mg，0.19mmol)处理并且在60℃加热18小时。将反应混合物吸附在硅藻土上并且将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯)，得到(R)-2-(3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺(82mg，0.17mmol)。
步骤D：(R)-2-(3-((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺
将(R)-2-(3-((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺(82mg，0.17mmol)、铁粉(68mg，1.22mmol)和氯化铵(65mg，1.22mmol)在乙醇(5mL)和水(1.5mL)中的混合物在60℃加热4小时。将反应混合物冷却至室温，然后通过硅藻土过滤并且浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到(R)-2-(3-((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺(52mg，0.17mmol)，为固体，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝306.1[M+1]+。
步骤E：(R)-N-(6-((1-(2-氨基-2-氧代乙基)吡咯烷-3-基)氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(31mg，0.19mmol)、(R)-2-(3-((5-氨基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)吡咯烷-1-基)乙酰胺(52mg，0.17mmol)和(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(98mg，0.19mmol)在二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物用可力丁(0.025mL，0.19mmol)处理并且将产生的混合物在室温搅拌18小时。将反应减压浓缩并且将残留物纯化((Gemini NX,5*3cm c18,5um；A：乙腈5-50％；B：在水中的0.1％甲酸)，得到N-(6-(2,2-二甲基吗啉代)-2-(羟基甲基)-2-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为固体(12mg，0.026mmol，15％)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.20(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),8.85(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.66(s,1H),8.30(s,1H),7.32(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),7.15(s,1H),7.03(s,1H),6.49(s,1H),5.04-4.89(m,1H),3.13(dd,J＝10.5,6.1Hz,1H),3.05(s,2H),2.97(s,2H),2.87-2.77(m,2H),2.72-2.61(m,1H),2.41-2.27(m,1H),2.03(dd,J＝8.0,5.7Hz,1H),1.41(s,6H)。MS(ESI)：m/z＝451.2[M+1]+。
表16.以类似于实施例445的方法制备以下实施例：
实施例448：N-(6-((1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲醇
在25℃，将1-乙基吡唑-4-甲酸(200mg，1.43mmol)的混合物溶于四氢呋喃(20mL，0.07M)并且用硼烷-四氢呋喃复合物(4.4mL，4.4mmol)处理4小时。加入甲醇并且将混合物在室温搅拌30分钟。将混合物浓缩，得到(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲醇(180mg，1.43mmol)，将其应用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ8.00(s,1H),7.67(s,1H),5.06(t,J＝5.5Hz,1H),4.38-4.28(m,4H),1.34(m,3H)。MS(ESI)：m/z＝127[M+1]+。
步骤B：2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-醇
将6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(2.00g，8.79mmol)溶于叔-丁醇(67.6mL)中并且用氢氧化钾(567mg，10.1mmol)处理。将反应混合物在80℃加热24小时。加入氢氧化钾(1.13g，20.2mmol)并且将反应在85℃再搅拌24小时。冷却至室温后，用5％硫酸氢钾水溶液将pH调节至6。将混合物用水(100mL)稀释并且用乙酸乙酯(200mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将残留物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度在庚烷中的0-100％乙酸异丙酯)，得到2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-醇(1.54g，7.36mmol，84％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.96(s,1H),7.89(t,J＝1.3Hz,1H),6.44(s,1H),2.99(d,J＝1.2Hz,2H),1.44(s,6H)。
步骤C：4-(((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)-1-乙基-1H-吡唑
在2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-醇(200mg，0956mmol)、(1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲醇(180mg，1.43mmol)和三苯膦(326mg，1.24mmol)在四氢呋喃(7.35mL)中的混合物中滴加入偶氮二甲酸二异丙酯(0.25mL，1.2mmol)。将反应混合物在环境温度搅拌过夜。将反应用1N HCl猝灭并且用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-100％甲醇:二氯甲烷)，得到4-(((2,2-二甲基-5-硝基-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)氧基)甲基)-1-乙基-1H-吡唑(45mg，0.142mmol，15％产率)。MS(ESI)：m/z＝318[M+1]+。
步骤D：6-((1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺
6-((1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-胺以类似于实施例445步骤D的方法制备，得到希望的产物(41mg，定量)，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝288[M+1]+。
步骤E：N-(6-((1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例445步骤E的方法制备，得到N-(6-((1-乙基-1H-吡唑-4-基)甲氧基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(19mg，31％产率)。1H NMR(400MHz,二甲亚砜-d6)δ10.16(s,1H),9.33(dd,J＝7.1,1.4Hz,1H),8.63(s,1H),8.27(t,J＝2.8Hz,2H),7.88(s,1H),7.64(s,1H),7.30(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.70(s,1H),5.02(s,2H),4.15(q,J＝7.3Hz,2H),2.98(s,2H),1.42(s,6H),1.36(t,J＝7.3Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝433.2[M+1]+。
实施例449：N-(2-(((2R,5R)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-((2R,5R)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
在于甲醇(10mL)中的2-(溴甲基)-5-氯-4-硝基-苯甲酸甲酯(制备5，WO2013079505(300mg，0.97mmol)中加入三乙胺(0.16mL，1.2mmol)和2-[2-(氨基甲基)-1,3-二烷-5-基]异二氢吲哚-1,3-二酮(306mg，1.2mmol)。将反应加热至70℃达18小时，浓缩，并且通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到2-((2r,5r)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(301mg，68％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.05(s,1H),7.85(td,J＝4.3,2.5Hz,4H),4.91(t,J＝4.3Hz,1H),4.70(s,2H),4.29(d,J＝8.4Hz,3H),4.11-4.06(m,2H),3.74(d,J＝4.5Hz,2H)。LCMS(ESI)m/z:458.0[M+H]+。
步骤B：2-(((2R,5R)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酰基)苯甲酸
标题化合物以类似于实施例173步骤B的方法制备，得到希望的产物2-(((2r,5r)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酰基)苯甲酸(390mg，定量)，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝596.1[M+1]+。
步骤C：2-(((2R,5R)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-氯-5-硝基异二氢吲哚-1-酮
将2-(((2r,5r)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酰基)苯甲酸(390mg，0.66mmol)溶于甲醇(20mL)中并且用肼(5mL)处理并且在环境温度搅拌1周。将反应混合物真空浓缩并且将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-20％甲醇:二氯甲烷)，得到2-(((2r,5r)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-氯-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(164mg，0.432mmol，66％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(s,1H),7.58(s,1H),4.61(t,J＝4.7Hz,1H),4.55(s,2H),3.94(dd,J＝11.2,5.0Hz,2H),3.72-3.66(m,4H),3.63(d,J＝4.7Hz,2H),3.18(t,J＝10.9Hz,2H),3.03-2.97(m,4H),2.78(dt,J＝10.4,5.1Hz,1H),1.40(s,2H)。
步骤D：((2R,5R)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯
在环境温度，在2-(((2r,5r)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-氯-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(163mg，0.43mmol)、4-二甲基氨基吡啶(10mg，0.086mmol)和三甲胺(0.090mL，0.644mmol)在四氢呋喃(3mL)中的混合物中加入二碳酸二叔丁酯(145mg，0.644mmol)。16小时后，将混合物用水稀释并且用乙酸异丙酯萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化(洗脱梯度0-100％甲醇:二氯甲烷)，得到((2r,5r)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯(33mg，0.069mmol，16％产率)。(ESI)：m/z＝479.1[M+1]+。
步骤E：((2R,5R)-2-((5-氨基-6-氯-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯
在25℃、氢气气氛下，将((2r,5r)-2-((6-氯-5-硝基-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯(33mg，0.069mmol)和10％钯炭(1.5mg)在甲醇(5.3mL)中的混合物搅拌3小时。将反应通过硅藻土垫过滤并且减压浓缩，得到((2r,5r)-2-((5-氨基-6-氯-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯(31mg)，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝449[M+1]+。
步骤F：((2R,5R)-2-((6-吗啉代-1-氧代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例173步骤D的方法制备，应用((2r,5r)-2-((5-氨基-6-氯-1-氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯，步骤E)，得到希望的产物((2r,5r)-2-((6-吗啉代-1-氧代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯，将其应用而无需进一步纯化。MS(ESI)：m/z＝594[M+1]+。
步骤G：N-(2-(((2R,5R)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在环境温度，将((2R,5R)-2-((6-吗啉代-1-氧代-5-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基)异二氢吲哚-2-基)甲基)-1,3-二烷-5-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg，0.067mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物用三氟乙酸(0.5mL)处理。72小时后，将混合物浓缩并且将粗残留物通过制备HPLC纯化((Gemini NX，5*3cm c18，5um；A：乙腈5-50％；B：在水中的0.1％氢氧化铵)，得到N-(2-(((2r,5r)-5-氨基-1,3-二烷-2-基)甲基)-6-吗啉代-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(3mg，0.0061mmol，9％产率)，为固体：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),9.41(dd,J＝7.0,1.6Hz,1H),9.00(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.76(s,1H),8.74(s,1H),7.58(s,1H),7.39(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),4.60(t,J＝4.8Hz,1H),4.52(s,2H),3.95(dd,J＝11.2,4.8Hz,2H),3.92-3.88(m,4H),3.60(d,J＝4.8Hz,2H),3.18(t,J＝10.9Hz,2H),2.95-2.88(m,4H),2.80(dt,J＝10.4,5.2Hz,1H)。MS(ESI)：m/z＝494.2[M+1]+。
实施例450：N-(2,2-二甲基-6-(4-(2-(甲基磺酰基)乙基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，将过氧一硫酸钾(81mg，0.13mmol)加入至N-[2,2-二甲基-6-[4-(2-甲基硫烷基乙基)哌嗪-1-基]-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30.8mg，0.066mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2.2mL)中的溶液中达2小时。将反应混合物温至室温并且搅拌过夜。将粗残留物通过制备HPLC纯化((Gemini NX，5*3cm c18，5um；A：乙腈30-70％；B：在水中的0.1％氢氧化铵)，得到N-(2,2-二甲基-6-(4-(2-(甲基磺酰基)乙基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.3mg，0.0026mmol，4％产率)。MS(ESI)：m/z＝499.2[M+1]+。
实施例451：5-[[(1R,2S)-2-氨基环己基]氨基]-N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-[[(1R,2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)环己基]氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在微波小瓶中装入5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(500mg，2.36mmol)、N-[(1S,2R)-2-氨基环己基]氨基甲酸叔丁酯(506mg，2.36mmol)和甲醇(4.7mL)。将小瓶密封并且在90℃微波中搅拌30分钟，产生悬浮液。将反应混合物真空浓缩并且将粗产物通过柱色谱纯化(0-100％乙酸异丙酯/庚烷)，得到5-[[(1R,2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)环己基]氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(420.2mg，1.08mmol，46％产率)，为白色固体。MS：m/z＝390(M+1)。
步骤B：5-[[(1R,2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)环己基]氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在5-[[(1R,2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)环己基]氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(330mg，0.85mmol)在四氢呋喃(1.7mL)和水(3.40mL)中的混合物中加入氢氧化锂(61mg，2.54mmol)。将混合物在回流下搅拌2天，然后加入第二批氢氧化锂(61mg，2.54mmol)。再3小时后，将反应调至室温并且在二氯甲烷和水之间分配。将水相用1N盐酸酸化至pH 2并且用二氯甲烷(3x)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤，并且真空浓缩，得到5-[[(1R,2S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)环己基]氨基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(196.4mg，0.5232mmol)，为白色固体。MS:m/z＝376(M+1)。
步骤C：N-[(1S,2R)-2-[[3-[(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基]氨基]环己基]氨基甲酸叔丁酯
标题化合物以类似于实施例12的方法由6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(实施例34，步骤B)制备，得到N-[(1S,2R)-2-[[3-[(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基]氨基]环己基]氨基甲酸叔丁酯(97.3mg，0.177mmol，68.3％产率)。MS：m/z＝551(M+1)。
步骤D：5-[[(1R,2S)-2-氨基环己基]氨基]-N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃，在N-[(1S,2R)-2-[[3-[(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基]氨基]环己基]氨基甲酸叔丁酯(97.3mg，0.177mmol)在二氯甲烷(1.77mL)中的溶液中加入三氟乙酸(0.442mL，5.84mmol)。将产生的溶液调至室温并且搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩并且通过HPLC纯化，得到5-[[(1R,2S)-2-氨基环己基]氨基]-N-(6-甲氧基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(37mg，0.082mmol，46.5％产率)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),8.55(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.94(s,1H),7.71(s,1H),6.63-6.53(m,2H),4.22(s,1H),3.83(s,3H),3.09(s,1H),2.96(s,2H),1.78(s,1H),1.62-1.49(m,7H),1.41(s,6H),1.31(s,3H)。MS:m/z＝451.2(M+1)。
实施例452：N-(6-氨基甲酰基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-甲腈
在包含6-氯-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(100mg，0.44mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(20.1mg，0.022mmol)、S-Phos(18.6mg，0.044mmol)和氰化锌(56.7mg，0.48mmol)的微波小瓶中加入N,N-二甲基甲酰胺(2.2mL)和水(0.021mL)。将混合物用氮气吹扫5分钟，然后将小瓶密封并且在150℃微波中搅拌30分钟。将粗反应混合物在1N氢氧化钠和二氯甲烷之间分配。将水相用二氯甲烷(2x)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到橙色固体。将粗残留物在二氧化硅上纯化(0-70％乙酸异丙酯/庚烷)，得到2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-甲腈(75mg，0.34mmol，95％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.14(t,J＝1.2Hz,1H),7.10(s,1H),3.16(d,J＝1.2Hz,2H),1.56(s,6H)。
步骤B：2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-甲酰胺
将2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-甲腈(41.4mg，0.190mmol)和氢氧化钾(11.7mg，0.209mmol)在叔丁醇(0.632mL)中的混合物在60℃搅拌。水解完成(2小时)后，将混合物用水稀释并且用二氯甲烷萃取。将水层用二氯甲烷(2x)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到粗产物，为橙色固体(45mg，0.19mmol，定量产率)。MS：m/z＝237[M+1]+。
步骤C：5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-甲酰胺
将2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-甲酰胺(45mg，0.195mmol)悬浮于乙醇(1.9mL)中。加入N,N-二甲基甲酰胺(0.3mL)以溶解底物。加入10％钯炭(2mg，0.0019mmol)，并且通过3个循环的真空/H2将大气变为氢气。将混合物在H2(1atm)下搅拌过夜。将内容物通过0.45um注射器滤器过滤并且将滤液真空浓缩。快速柱色谱(0-100％乙酸异丙酯/庚烷)，得到5-氨基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-6-甲酰胺(22.6mg，0.110mmol，57％产率)，为白色固体。MS:m/z＝207[M+1]+。
步骤D：N-(6-氨基甲酰基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物以类似于实施例4步骤C的方法制备，得到N-(6-氨基甲酰基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(5mg，4.5％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.60(s,1H),9.31(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.81(dd,J＝4.1,1.7Hz,1H),8.63(s,1H),8.18(s,1H),7.97(s,1H),7.47(s,1H),7.27(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),7.02(s,1H),3.08(d,J＝1.2Hz,2H),2.62(s,1H),1.44(s,6H)。MS:m/z＝352.1[M+1]+。
实施例453：N-(6-(4-乙基哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(2,2-二甲基-6-哌嗪-1-基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例533)(50mg，0.127mmol)和溴乙烷(0.255mmol)溶于1,4-二烷(1.27mL，0.1M)并且用N,N-二异丙基乙基胺(0.067mL，0.382mmol)处理。将反应混合物在100℃搅拌16小时，减压浓缩并且将粗残留物通过制备HPLC纯化，得到N-(6-(4-乙基哌嗪-1-基)-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(7.7mg，0.018mmol，14％产率)，为固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.36(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.89(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.67(s,1H),8.30(d,J＝1.0Hz,1H),7.35(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),6.69(s,1H),3.17(d,J＝5.2Hz,2H),3.00(dq,J＝1.0,0.5Hz,2H),2.82(m,4H),2.61(m,2H),2.45(m,2H),1.41(s,6H),1.04(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)：m/z＝421.2[M+1]+。
表17.以类似于实施例453方法制备以下实施例：
实施例471：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-(羟基甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-溴-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.21mmol)在1,4-二烷(3mL)和水(0.30mL)中的溶液中加入乙酰氧基甲基(三氟)硼钾(115mg，0.64mmol)、碳酸钠(68mg，0.64mmol)、2-二环己基膦基-2’,6’-二-异丙氧基-1,1’-联苯(60mg，0.13mmol)和Ruphos-Pd-G2(44mg，0.06mmol)。将反应混合物在120℃微波照射下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并且浓缩。将残留物通过制备-TLC纯化(在二氯甲烷的5％甲醇)，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)-6-(羟基甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(48mg，53％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)10.42(s,1H),9.22(s,1H),8.95(s,1H),8.65(s,1H),8.32(s,1H),6.72(s,1H),5.64(t,J＝5.6Hz,1H),4.70(d,J＝5.6Hz,2H),3.90-3.80(m,4H),3.00(s,2H),2.90-2.80(m,4H),1.41(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝424.1[M+H]+。
实施例472和473：N-[6-[4-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[6-[4-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-[6-[4-(2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在N-(2,2-二甲基-6-哌嗪-1-基-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例533)(200mg，0.51mmol)在1,4-二烷(5mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(197.6mg，1.53mmol)和2-溴丙酰胺(85.2mg，0.56mmol)。将反应在100℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过制备-TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到N-[6-[4-(2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(162.0mg，68.6％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝464.2[M+H]+
步骤B：N-[6-[4-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[6-[4-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[6-[4-(2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(162mg，0.35mmol)通过手性SFC拆分，得到N-[6-[4-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，27％；RT＝2.97分钟)和N-[6-[4-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代-乙基]哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，21％；RT＝3.45分钟)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例472，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.34-9.33(m,1H),8.94-8.93(m,1H),8.65(s,1H),8.31(s,1H),7.33(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),7.28(s,1H),7.06(s,1H),6.66(s,1H),3.09-3.07(m,1H),2.98(s,2H),2.81-2.80(m,4H),2.79-2.73(m,4H),1.39(s,6H),1.13(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝464.2[M+H]+
实施例473，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),9.37-9.35(m,1H),8.96-8.95(m,1H),8.67(s,1H),8.33(s,1H),7.35(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),7.30(s,1H),7.10(s,1H),6.68(s,1H),3.12-3.07(m,1H),2.99(s,2H),2.82(s,4H),2.75(s,4H),1.40(s,6H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝464.3[M+H]+
表18.类似于实施例472的方法制备以下实施例：
实施例484：5-(二氟甲基)-N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-[(E)-2-(二甲基氨基)乙烯基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1.30g，6.33mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中加入氢氧化锂(75mg，3.17mmol)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(2.26g，19mmol)。将混合物在120℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯)，得到5-[(E)-2-(二甲基氨基)乙烯基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(950mg，60％产率)，为深黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),7.90(d,J＝12.8Hz,1H),6.53(d,J＝7.6Hz,1H),5.18(d,J＝12.8Hz,1H),3.91(s,3H),3.04(br s,6H)。
步骤B：5-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在5-[(E)-2-(二甲基氨基)乙烯基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(950.0mg，3.86mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中加入在水(20mL)中的过碘酸钠(1.65g，7.72mmol)。将混合物在60℃搅拌16小时。除去甲醇并且将水溶液用乙酸乙酯(150mL x 2)萃取。将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠溶液(100mL)和盐水(150mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯)，得到5-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(630mg，79％产率)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.17(s,1H),8.92(d,J＝6.4Hz,1H),8.73(s,1H),7.62(d,J＝7.2Hz,1H),4.02(s,3H)。
步骤C：5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯
在0℃，在5-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(600mg，2.92mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中滴加入二乙基氨基三氟化硫(943mg，5.85mmol)。将反应在25℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的33％乙酸乙酯)，得到5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(430mg，64％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.91(d,J＝7.2Hz,1H),8.67(s,1H),7.35(d,J＝7.2Hz,1H),6.76(t,J＝54.4Hz,1H),3.98(s,3H)。
步骤D：5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(100mg，0.44mmol)和一水合氢氧化锂(24mg，0.57mmol)在四氢呋喃(1mL)和甲醇(1mL)中的混合物在100℃微波照射下搅拌100分钟。将反应用盐酸(1M，0.6mL)酸化并且浓缩，得到5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(90mg，95％产率)，为红色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(d,J＝7.2Hz,1H),8.40(s,1H),7.27(d,J＝7.2Hz,1H),7.02(t,J＝54.4Hz,1H)。
步骤E：5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯
在5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(70mg，0.33mmol)在草酰氯(2.8mL，32mmol)中的溶液中加入N,N-二甲基甲酰胺(24mg，0.33mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(70mg，92％产率)，为黄色固体，将其直接应用。
步骤F：5-(二氟甲基)-N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-(二氟甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(70mg，0.30mmol)在吡啶(5mL)中的溶液中加入5-氨基-2-异丙基-6-吗啉代-异二氢吲哚-1-酮(65mg，0.24mmol)。将反应混合物在50℃搅拌6小时。将反应浓缩，并且通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到粗产物，将其用甲醇(5mL)研磨，得到5-(二氟甲基)-N-(2-异丙基-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(39mg，35％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.04(s,1H),9.01(d,J＝7.2Hz,1H),8.92(s,1H),8.60(s,1H),7.69(s,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),6.84(t,J＝54.4Hz,1H),4.72-4.64(m,1H),4.35(s,2H),3.92-3.83(m,4H),3.04-2.95(m,4H),1.31(d,J＝6.4Hz,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝471.2[M+H]+。
表19.以类似于实施例484的方法制备以下实施例：
实施例487：N-[6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮
在氮气保护下，在6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(200mg，0.63mmol)、环丙基硼酸(82mg，0.95mmol)、磷酸钾(536mg，2.53mmol)和三苯膦(50mg，0.19mmol)在甲苯(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入乙酸钯(II)(21mg，0.09mmol)。将反应在120℃微波照射下搅拌2小时。将反应用水(5mL)稀释并且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在石油醚中的50％乙酸乙酯)，得到6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(含一些三苯膦氧化物；200mg，98％产率)，为黄色固体。
步骤B：5-氨基-6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮
在6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(200mg，0.62mmol)和铁(173mg，3.1mmol)在乙醇(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入氯化铵(166mg，3.1mmol)。将反应在80℃搅拌2小时。将反应过滤并且浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(20mL)，用水(20mL)稀释并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(100mLx 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到5-氨基-6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(110mg，61％产率)，为黄色固体。
步骤C：N-[6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-氨基-6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(100mg，0.34mmol)在吡啶(10mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(75mg，0.41mmol)。将反应在25℃搅拌2小时并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到N-[6-环丙基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(92.2mg，59％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.58(s,1H),9.40(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.0,1.2Hz,1H),8.76(s,1H),8.68(s,1H),7.46(s,1H),7.36(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),4.87(s,1H),4.59-4.37(m,3H),4.01-3.88(m,1H),3.74-3.64(m,1H),2.12-2.04(m,1H),1.24-1.15(m,8H),0.79-0.75(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝438.1[M+H]+。
实施例488：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑
在氮气下，在6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃(200mg，0.74mmol)、二(三苯膦)钯(II)二盐酸盐(103mg，0.15mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入三丁基-(1-甲基咪唑-4-基)锡烷(382mg，1.03mmol)。将混合物在100℃搅拌16小时。将反应混合物过滤，用水(20mL)稀释并且用乙酸乙酯(20mL x 2)萃取。将有机相用盐水(10mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速色谱纯化(在石油醚中的5-10％乙酸乙酯)，得到4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑(113mg，56％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62(s,1H),7.47(s,1H),7.13(s,1H),7.07(s,1H),3.73(s,3H),3.06(s,2H),1.52(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝274.0[M+H]+。
步骤B：2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-胺
在4-(2,2-二甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-6-基)-1-甲基-咪唑(120mg，0.44mmol)在甲醇(4mL)中的溶液中加入10％钯炭(46mg，0.22mmol)。将反应混合物在25℃、氢气气氛(15psi)下搅拌2小时。将反应过滤，并且将滤液浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的5％甲醇)，得到2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-胺(85mg，80％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝243.9[M+H]+。
步骤C：N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-胺(85mg，0.35mmol)在吡啶(2mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(95mg，0.52mmol)。将反应混合物在25℃搅拌2小时。将反应浓缩，并且将残留物通过制备TLC纯化(在石油醚中的10％乙酸乙酯)，得到N-[2,2-二甲基-6-(1-甲基咪唑-4-基)-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(45mg，33.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.45(s,1H),8.78-8.76(m,2H),8.67-8.65(m,1H),8.28(s,1H),7.48(s,1H),7.11(s,1H),6.98(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),6.92(s,1H),3.71(s,3H),3.08(s,2H),1.51(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝389.0[M+H]+。
表20.以类似于实施例488的方法制备以下实施例：
实施例490：6-(氮杂环丁烷-3-基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：3-[3-[(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在20℃、氮气下，在锌(211mg，3.23mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(2.5mL)中的混合物中加入氯三甲基硅烷(0.03mL，0.40mmol)和1,2-二溴乙烷(0.03mL，0.40mmol)。将产生的混合物搅拌15分钟。分批加入在N,N-二甲基乙酰胺(1mL)中的1-Boc-3-碘氮杂环丁烷(700mg，2.47mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，得到锌试剂的溶液。
在另外的反应容器中，在6-溴-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg，0.42mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(2mL)中的溶液中加入1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁钯二氯化物(75mg，0.10mmol)、碘化亚铜(39mg，0.20mmol)和新鲜制备的(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)-碘-锌(3.03mL，2.12mmol)。将反应混合物在80℃、氮气下搅拌16小时。将反应混合物用水(50mL)猝灭并且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用水(150mL x 3)、盐水(150mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(用在石油醚中的0-20-50-100％乙酸乙酯洗脱)，得到粗产物，将其进一步通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的5％甲醇)两次，得到3-[3-[(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，43％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝549.3[M+H]+。
步骤B：6-(氮杂环丁烷-3-基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐
将3-[3-[(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.16mmol)在在甲醇中的4M盐酸(2mL，8mmol)中的混合物在28℃搅拌30分钟。将反应混合物浓缩，得到残留物，将其用甲醇研磨，得到6-(氮杂环丁烷-3-基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(35mg，42％，HCl盐)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)10.34(s,1H),9.60-9.50(m,1H),9.05-8.95(m,1H),8.70(s,1H),8.31(s,1H),6.72(s,1H),4.50-4.25(m,5H),3.95-3.75(m,4H),3.00(s,2H),2.95-2.75(m,4H),1.42(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝449.1[M+H]+。
实施例491：N3-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺
步骤A：3-((2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯
将6-溴-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg，0.3mmol)、三乙胺(96mg，1.0mmol)和1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁钯二氯化物(23mg，0.03mmol)在无水乙醇(25mL)中的溶液在80℃、CO气氛(40psi)下搅拌20小时。将反应混合物浓缩，并且将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的4％甲醇)，得到3-[(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯(120.0mg，81％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝466.1[M+H]+。
步骤B：N3-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺
在3-[(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸乙酯(120.0mg，0.3mmol)中加入用氨(22.0mg，1.3mmol)饱和的无水乙醇(30mL)。将混合物在100℃搅拌48小时并且浓缩。将粗产物用在二氯甲烷中的10％甲醇研磨两次，得到N-3-(2,2-二甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺(37.1mg，32％)，为红紫色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.76(d,J＝2.0Hz,1H),9.26(d,J＝2.0Hz,1H),8.79(s,1H),8.41(s,1H),8.32(s,1H),7.92(s,1H),6.73(s,1H),3.87-3.84(m,4H),3.01(s,2H),2.83-2.81(m,4H),1.41(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝437.2[M+H]+。
实施例492：N3-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]-N6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺
步骤A：3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸甲酯
在6-溴-N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例269(100mg，0.18mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中加入三乙胺(54mg，0.53mmol)和1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁钯二氯化物(7mg，0.01mmol)。将反应在80℃、CO(50psi)下搅拌16小时。将反应用水(50mL)稀释并且用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。将有机相用盐水(100mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸甲酯(90mg，94％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)：m/z＝541.1[M+H]+。
步骤B：3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸
在3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸甲酯(80mg，0.15mmol)在甲醇(2mL)和水(1mL)中的溶液中加入氢氧化锂(18mg，0.74mmol)。将反应在30℃搅拌2小时。将反应用水(10mL)稀释并且用乙酸乙酯(50mL x 3)洗涤。用盐酸(2M)将水相调节至pH 5并且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水(50mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸(72mg，92％)，为棕色固体。LCMS(ESI)：m/z＝527.1[M+H]+。
步骤C：N3-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]-N6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺
在3-[[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]氨基甲酰基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-甲酸(72.0mg，0.14mmol)、甲胺盐酸盐(19mg，0.27mmol)和HATU(78mg，0.21mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(0.05mL，0.27mmol)。将反应在30℃搅拌30分钟。将反应过滤并且通过反相色谱纯化(Waters Xbridge Prep OBD C18 150mm*30mm，5μm，乙腈20-50％/在水中的0.05％氢氧化氨)，得到N3-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-6-吗啉代-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]-N6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3,6-二甲酰胺(14.1mg，18.5％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),9.71(d,J＝2.0Hz,1H),9.29(d,J＝2.0Hz,1H),8.96-8.95(m,1H),8.86(s,1H),8.76(s,1H),7.61(s,1H),4.92(s,1H),4.56-4.37(m,3H),3.97-3.86(m,5H),3.76-3.66(m,1H),2.94-2.88(m,7H),1.18(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝540.1[M+H]+。
实施例493：6-(二氟甲氧基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例530)(180mg，0.44mmol)在DMF(8mL)和水(0.8mL)中的溶液中加入碳酸铯(172mg，0.53mmol)和氯二氟乙酸钠(134mg，0.88mmol)。将混合物在100℃加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL)稀释，并且用H2O(20mL x 2)洗涤。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的2％甲醇)，得到6-(二氟甲氧基)-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(26mg，12％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.37(s,1H),8.82-8.81(m,2H),8.72(d,J＝2.4Hz,1H),8.43(s,1H),6.90-6.43(m,2H),4.09-3.88(m,4H),3.05(s,2H),2.99-2.86(m,4H),1.49(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝460.0[M+H]+。
实施例494和495：N-[(2R)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例131，155mg，0.32mmol)通过手性SFC拆分，得到N-[(2S)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70.44mg，44.1％)和N-[(2R)-6-[4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]-6-氟-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(71.18mg，44.5％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例494，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),9.85-9.75(m,1H),9.20-9.10(m,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),6.70(s,1H),6.40-6.05(m,1H),5.10-4.95(m,1H),3.50-3.40(m,2H),3.25-3.10(m,1H),3.00-2.70(m,11H),1.34(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝491.2[M+H]+。
实施例495，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),9.85-9.75(m,1H),9.20-9.10(m,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),6.70(s,1H),6.40-6.05(m,1H),5.06(s,1H),3.50-3.40(m,2H),3.25-3.10(m,1H),3.00-2.70(m,11H),1.34(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝491.2[M+H]+。
实施例496：N-[6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-溴-5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯
在环丙烷甲醇(0.92g，12.82mmol)和1-溴-5-氟-2-甲基-4-硝基苯(1.5g，6.41mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液中加入叔丁醇钠(0.74g，7.69mmol)。将混合物在50℃搅拌16小时。将混合物过滤并且浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的5％乙酸乙酯)，得到1-溴-5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯(1.1g，60％产率)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),7.25(s,1H),3.95(d,J＝6.4Hz,2H),2.38(s,3H),1.32-1.26(m,1H),0.71-0.64(m,2H),0.42-0.38(m,2H).
步骤B：5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯
在1-溴-5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯(500mg，1.75mmol)在三乙胺(10mL，72mmol)和乙醇(20mL)中的溶液中加入二(三苯膦)钯(II)二氯化物(122mg，0.17mmol)。将反应在80℃、CO(40～50psi)下搅拌16小时。将反应过滤并且浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的3％乙酸乙酯)，得到5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(340mg，69％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65(s,1H),7.57(s,1H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),4.00(d,J＝6.8Hz,2H),2.55(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H),1.31-1.27(m,1H),0.70-0.62(m,2H),0.43-0.36(m,2H)。
步骤C：2-(溴甲基)-5-(环丙基甲氧基)-4-硝基-苯甲酸乙酯
在5-(环丙基甲氧基)-2-甲基-4-硝基-苯甲酸乙酯(400mg，1.43mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中加入1-溴-2,5-吡咯烷二酮(305mg，1.72mmol)和2,2’-偶氮二(2-甲基丙腈)(35mg，0.21mmol)。将混合物在80℃、氮气气氛下搅拌16小时并且浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的2％乙酸乙酯)，得到2-(溴甲基)-5-(环丙基甲氧基)-4-硝基-苯甲酸乙酯(260mg，50％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(s,1H),7.61(s,1H),4.87(s,2H),4.46(q,J＝7.2Hz,2H),4.04(d,J＝6.8Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H),1.34-1.29(m,1H),0.73-0.64(m,2H),0.45-0.37(m,2H)。
步骤D：6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮
在2-(溴甲基)-5-(环丙基甲氧基)-4-硝基-苯甲酸乙酯(370mg，1.03mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中加入(3R)-4-氨基-3-氟-2-甲基-丁-2-醇(187mg，1.55mmol)和三乙胺(209mg，2.07mmol)。将反应在60℃搅拌5小时。将反应浓缩，并且通过快速色谱纯化(在石油醚中的70％乙酸乙酯)，得到6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(190mg，52％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(s,1H),7.51(s,1H),4.69-4.42(m,3H),4.35-4.15(m,1H),4.05(d,J＝6.4Hz,2H),3.73-3.63(m,1H),2.31-2.15(m,1H),1.36-1.32(m,6H),1.31-1.28(m,1H),0.71-0.63(m,2H),0.45-0.35(m,2H)。
步骤E：5-氨基-6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮
在6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(190mg，0.54mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入铁(150mg，2.7mmol)和氯化铵(144mg，2.7mmol)。将反应在80℃搅拌2小时。将反应过滤，然后浓缩。将反应溶于二氯甲烷(80mL x 2)，用盐水(80mL)洗涤，经硫酸钠干燥，并且浓缩，得到5-氨基-6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(170mg，97％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝323.0[M+H]+。
步骤F：N-[6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(148mg，0.82mmol)在吡啶(5mL)中的溶液中加入5-氨基-6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(220mg，0.68mmol)。将反应混合物在50℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的75％乙酸乙酯)，得到N-[6-(环丙基甲氧基)-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(252mg，77％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.38(d,J＝7.2Hz,1H),8.87(d,J＝3.2Hz,1H),8.76-8.68(m,2H),7.35-7.30(m,1H),7.25(s,1H),4.91(s,1H),4.55-4.35(m,3H),4.09-3.84(m,3H),3.75-3.61(m,1H),1.49-1.43(m,1H),1.23-1.13(m,6H),0.73-0.65(m,2H),0.49-0.41(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝468.1[M+H]+。
实施例497和498：N-((2R,3’S)-1’,3’-二甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-((2R,3’R)-1’,3’-二甲基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在1’,3’-二甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-胺(900mg，2.84mmol；按照实施例152描述的方法由1,3-二甲基哌啶-4-酮制备)在吡啶(50mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(669mg，3.69mmol)。将混合物在60℃搅拌3小时。将反应浓缩，并且将残留物用甲醇(5mL)研磨，得到N-(1’,3’-二甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.0g，76％产率)，为黄色固体。将其通过手性制备SFC拆分，得到N-[(2R,3’S)-1’,3’-二甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(325mg，25％；RT＝2.105分钟)和N-[(2R,3’R)-1’,3’-二甲基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(350mg，26.4％；RT＝2.822分钟)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例497，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.46(s,1H),8.89-8.81(m,1H),8.79(s,1H),8.78-8.76(m,1H),8.41(s,1H),7.07(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),6.68(s,1H),3.96-3.94(m,4H),3.22(d,J＝15.6Hz,1H),2.93-2.89(m,5H),2.70-2.63(m,2H),2.42-2.39(m,1H),2.34(s,3H),2.22-2.18(m,1H),2.05-2.01(m,1H),1.93-1.84(m,1H),1.82-1.81(m,1H),0.87(d,J＝6.4Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝463.3[M+H]+。
实施例498，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.44(s,1H),8.85(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.79(s,1H),8.77(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.45(s,1H),7.08(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),6.64(s,1H),3.96-3.94(m,4H),3.42-3.37(m,1H),3.30(d,J＝16.8Hz,1H),3.27-3.22(m,1H),3.20-3.12(m,1H),2.94(d,J＝16.8Hz,1H),2.93-2.90(m,5H),2.82(s,3H),2.68-2.62(m,1H),2.61-2.55(m,1H),2.17-2.13(m,1H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝463.1[M+H]+。
实施例499：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：N-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)乙酰胺
在搅拌的2,3-二氢-1H-茚-5-基胺(15.0g，112.6mmol)和三乙胺(17.1g，168.9mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液中滴加入乙酰氯(26.5g，337.9mmol)。将混合物在26℃搅拌2.5小时，用甲醇(20mL)和水(100mL)猝灭，并且用二氯甲烷(150mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的20-45％乙酸乙酯)，得到N-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)乙酰胺(19.0g，96％)，为淡棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65(s,1H),7.43(s,1H),7.17-7.12(m,2H),2.89-2.83(m,4H),2.14(s,3H),2.06(五重峰,J＝7.2Hz,2H)。
步骤B：N-(6-溴茚满-5-基)乙酰胺
在0℃，历经20分钟，在搅拌的N-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)乙酰胺(19.0g，108.4mmol)在乙酸(350mL)中的溶液中加入在乙酸(3mL)中的溴(6.83mL，133.4mmol)。将混合物在26℃、氮气下搅拌1小时，并且用水稀释直至没有更多的沉淀形成。收集沉淀，用洗涤水，并且真空干燥，得到N-(6-溴茚满-5-基)乙酰胺(27.0g，98％)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝255.8[M+H]+。
步骤C：N-(6-溴-1-氧代-茚满-5-基)乙酰胺
在50℃，在搅拌的N-(6-溴茚满-5-基)乙酰胺(27.0g，106.3mmol)在乙酸(300mL)的溶液中滴加入在50％乙酸水溶液(34mL)中的三氧化钼(44.0g，439.9mmol)并且再搅拌20分钟。然后将其冷却至0℃，用2-丙醇(10mL)将反应猝灭。将溶剂真空除去，并且将残留物用水(100mL)稀释并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用0.5M NaOH水溶液(50mL)和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-4％甲醇)，得到N-(6-溴-1-氧代-茚满-5-基)乙酰胺(13.1g，46％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.59(s,1H),7.94(s,1H),7.91(br s,1H),3.11(t,J＝6.0Hz,2H),2.71(t,J＝6.0Hz,2H),2.30(s,3H)。
步骤D：5-氨基-6-溴-茚满-1-酮
将N-(6-溴-1-氧代-茚满-5-基)乙酰胺(13.1g，48.9mmol)和6M盐酸水溶液(260mL，1.560mol)的混合物在100℃、氮气下搅拌1小时。将溶液冷却至0℃并且用10M氢氧化钠水溶液调节至pH＝8。收集形成的沉淀，用水洗涤，并且真空干燥，得到5-氨基-6-溴-茚满-1-酮(10.8g，98％)，为淡棕色粉末。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.86(s,1H),6.74(s,1H),4.68(s,2H),2.98(t,J＝6.0Hz,2H),2.64(t,J＝6.0Hz,2H)。
步骤E：6-溴-5-硝基-茚满-1-酮
在0℃，历经5分钟，在5-氨基-6-溴-茚满-1-酮(4.0g，17.7mmol)在20％HBF4水溶液(16mL)中的悬浮液中滴加入4M亚硝酸钠水溶液(1.9g，27.3mmol)。加入完成后将混合物搅拌50分钟。在26℃，历经30分钟，将产生的泡沫状物悬浮液分批加入至剧烈搅拌的在水(32mL)中的铜(5.3g，83.2mmol)和亚硝酸钠(16.3g，236.7mmol)混合物中。在加入过程中，通过加入少量的乙醚，过量的泡沫被打破。将混合物再搅拌50分钟后，通过硅藻土垫过滤并且用乙酸乙酯(300mL)洗涤。将有机相分离，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的10-20％乙酸乙酯)，得到6-溴-5-硝基-茚满-1-酮(2.1g，47％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.85(s,1H),3.21(t,J＝6.0Hz,2H),2.83(t,J＝6.0Hz,2H)。
步骤F：6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-茚满-1-酮
在0℃，在6-溴-5-硝基-茚满-1-酮(1.2g，4.5mmol)和碘甲烷(1.4mL，22.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物中分批加入60％氢化钠矿物油(544mg，13.6mmol)。将混合物在0℃搅拌10分钟，通过饱和的氯化铵溶液(10mL)猝灭并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的2-5％乙酸乙酯)，得到6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-茚满-1-酮(450mg，35％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝284.1[M+H]+。
步骤G：2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-茚满-1-酮
在搅拌的6-溴-2,2-二甲基-5-硝基-茚满-1-酮(450mg，1.6mmol)在二甲亚砜(18mL)中的溶液中加入吗啉(276mg，3.2mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(614mg，4.8mmol)。将混合物在110℃搅拌16小时，用水(50mL)稀释，并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的10％乙酸乙酯)，得到2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-茚满-1-酮和6-溴-2,2-二甲基-5-吗啉代-茚满-1-酮的混合物(340mg，74％)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤。LCMS(ESI)：m/z＝290.9[M+H]+。
步骤H：5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-酮
在搅拌的2,2-二甲基-6-吗啉代-5-硝基-茚满-1-酮和6-溴-2,2-二甲基-5-吗啉代-茚满-1-酮(340mg)在乙醇(25mL)和水(5mL)中的混合物中加入铁(327mg，5.9mmol)和氯化铵(313mg，5.9mmol)。将混合物在80℃、氮气下搅拌2小时。将反应混合物过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的20-60％乙酸乙酯)，得到5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-酮(190mg，62％)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝261.0[M+H]+。
步骤I：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-酮(50mg，0.2mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(52mg，0.3mmol)在吡啶(5mL)中的混合物在28℃搅拌20小时并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在二氯甲烷中的0-1％甲醇)，然后通过制备TLC纯化(100％乙酸乙酯)。将粗产物用甲醇进一步研磨，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-1-氧代-茚满-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(54mg，68％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.94(s,1H),9.40(d,J＝6.8Hz,1H),8.98(d,J＝4.4Hz,1H),8.75(s,1H),8.68(s,1H),7.53(s,1H),7.38(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),3.91-3.85(m,4H),2.98(s,2H),2.91-2.86(m,4H),1.14(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝406.1[M+H]+。
实施例500：N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-氨基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮
在6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(100mg，0.32mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中加入10％钯炭(7mg，0.06mmol)。将反应混合物在25℃、氢气气氛(15psi)下搅拌6小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩。将残留物通过快速色谱纯化(在石油醚中的0-50％乙酸乙酯)，得到5-氨基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(50mg，63％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝253.1[M+H]+。
步骤B：N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(47mg，0.26mmol)在吡啶(2mL)中的溶液中加入5-氨基-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]异二氢吲哚-1-酮(55mg，0.22mmol)。将反应混合物在50℃搅拌16小时并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的3％甲醇)，得到N-[2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(29mg，32％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.13(s,1H),8.88-8.85(m,1H),8.79(s,1H),8.77-8.75(m,1H),8.33(s,1H),7.84(d,J＝8.0Hz,1H),7.53-7.50(m,1H),7.11(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),4.69-4.45(m,3H),4.25-4.15(m,1H),3.68-3.64(m,1H),2.42(s,1H),1.35(s,3H),1.33(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝398.2[M+H]+。
实施例501：N-(1’-(2-氟乙基)-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(80mg，0.18mmol)、1-溴-2-氟乙烷(70mg，0.55mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(71mg，0.55mmol)。将反应在60℃搅拌16小时。将反应用水(10mL)稀释并且用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物用乙腈(3mL)研磨，得到N-[1’-(2-氟乙基)-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(48mg，54％产率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.48(s,1H),8.84(dd,J＝6.8Hz,1.6Hz,1H),8.79(s,1H),8.78(dd,J＝4.0Hz,1.6Hz,1H),8.43(s,1H),7.07(dd,J＝6.8Hz,4.0Hz,1H),6.69(s,1H),4.71-4.68(m,1H),4.60-4.57(m,1H),3.97-3.94(m,4H),3.03(s,2H),2.94-2.90(m,4H),2.86-2.83(m,1H),2.80-2.70(m,5H),2.05-2.01(m,2H),2.00-1.91(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝481.3[M+H]+。
实施例502：N-(1’-乙基-6-吗啉代-3H-螺[苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[15-a]嘧啶-3-甲酰胺
在N-(6-吗啉代螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg，0.46mmol)、乙醛(61mg，1.38mmol)和乙酸(0.6mL)在甲醇(20mL)中的溶液中加入氰基硼氢化钠(34.7mg，0.55mmol)。将溶液在20℃搅拌3小时。将反应浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(20mL)并且用水(20mL x 2)和盐水(20mL)洗涤。将有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将粗产物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的5％甲醇)，得到N-(1’-乙基-6-吗啉代-螺[3H-苯并呋喃-2,4’-哌啶]-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(32mg，15％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.43(s,1H),9.36(d,J＝6.0Hz,1H),8.96-8.91(m,1H),8.67(s,1H),8.30(s,1H),7.34(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),6.75(s,1H),3.90-3.81(m,4H),2.98(s,2H),2.81-2.79(m,4H),2.60-2.55(m,2H),2.40-2.37(m,4H),1.84-1.74(m,4H),1.01(t,J＝6.8Hz,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝463.3[M+H]+。
表21.以类似于实施例502的方法制备以下实施例：
实施例510和511：(R)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基-6-硝基色满-3-醇
在搅拌的(6-氟-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基)甲醇(440mg，1.94mmol)在二甲亚砜(8mL)中的溶液中加入碳酸钾(669mg，4.84mmol)和1-(2,2-二氟乙基)哌嗪(349mg，2.32mmol)。将混合物在140℃搅拌72小时，用水(30mL)稀释并且用乙酸乙酯(50mL x3)萃取。分离有机相并且浓缩至干燥。将粗产物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的0-50％乙酸乙酯)，得到7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基-6-硝基色满-3-醇(600mg，86.7％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝358.1[M+H]+。
步骤B：6-氨基-7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基色满-3-醇
在25℃、H2(15psi)下，在7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基-6-硝基色满-3-醇(600mg，1.68mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中加入10％钯炭(268mg，0.25mmol)。将混合物搅拌12小时。将溶液过滤并且浓缩，得到6-氨基-7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基色满-3-醇(320mg，58％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝328.1[M+H]+。
步骤C：(S)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-氨基-7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-甲基色满-3-醇(270mg，0.82mmol)在吡啶(2mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(173mg，0.95mmol)。将混合物在28℃搅拌16小时。将溶液浓缩，并且通过色谱在二氧化硅上纯化(溶剂梯度：在石油醚中的0-50％乙酸乙酯)并且将其通过手性制备SFC进一步拆分，得到(S)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(98mg，22.1％；RT＝4.715分钟)和(R)-N-(7-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)-3-羟基-3-甲基色满-6-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，24％；RT＝5.362分钟)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例510，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.35(s,1H),8.84(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.78(s,1H),8.73(dd,J＝4.0,2.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.08(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),6.75(s,1H),5.96(tt,J＝56.0,4.4Hz,1H),3.94(d,J＝12.8Hz,1H),3.83(d,J＝11.2Hz,1H),3.00-2.80(m,12H),2.18(br s,1H),1.37(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝473.1[M+H]+。
实施例511，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.35(s,1H),8.85(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.79(s,1H),8.74(dd,J＝4.4,2.0Hz,1H),8.33(s,1H),7.09(dd,J＝7.2,4.8Hz,1H),6.76(s,1H),5.98(tt,J＝52.0,4.4Hz,1H),3.95(d,J＝10.4Hz,1H),3.84(d,J＝10.4Hz,1H),3.00-2.80(m,12H),2.13(s,1H),1.38(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝473.1[M+H]+。
实施例512和513：(S)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯
将2,4-二甲氧基苄基胺(7.0g，41.86mmol)和衣康酸二甲酯(7.94g，50.24mmol)在甲醇(100mL)中的溶液在28℃搅拌14小时。将反应混合物浓缩，并且将残留物通过硅胶柱纯化(在石油醚中的10-20％乙酸乙酯)，得到1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯(8g，65％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):7.12(d,J＝8.8Hz,1H),6.45-6.42(m,2H),4.45-4.40(m,2H),3.79(s,6H),3.69(s,3H),3.46(d,J＝8.0Hz,2H),3.18-3.14(m,1H),2.70-2.63(m,2H)。
步骤B：1-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮
在1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-甲酸甲酯(5.0g，17.05mmol)在四氢呋喃(60mL)和甲醇(30mL)中的溶液中加入硼氢化锂(928mg，42.62mmol)。将反应在25℃搅拌2.5小时。将反应用水(50mL)猝灭并且用乙酸乙酯(150mL x3)萃取。将合并的有机相用盐水(60mL x 2)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到1-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(4.1g，91％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝266.2[M+H]+。
步骤C：1-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(碘甲基)吡咯烷-2-酮
在26℃，在1-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(羟基甲基)吡咯烷-2-酮(4.1g，15.45mmol)、三苯膦(6.1g，23.18mmol)和咪唑(3.16g，46.36mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入碘(5.9g，23.18mmol)。将混合物在26℃、氮气下搅拌16小时。将反应用饱和的亚硫酸钠溶液(20mL)猝灭并且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-5％乙酸乙酯)，得到1-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(碘甲基)吡咯烷-2-酮(1.6g，27.6％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.13(d,J＝9.2Hz,1H),6.46-6.43(m,2H),4.41(s,2H),3.81(s,3H),3.80(s,3H),3.42-3.38(m,1H),3.22-3.14(m,2H),3.02-2.98(m,1H),2.62-2.57(m,2H),2.24-2.18(m,1H)。
步骤D：5-((1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在20℃、氮气下，在锌(362mg，5.54mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(10mL)中的溶液中加入氯三甲基硅烷(0.11mL，0.85mmol)和1,2-二溴乙烷(0.06mL，0.85mmol)。将产生的混合物在20℃搅拌15分钟。滴加1-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-(碘甲基)吡咯烷-2-酮(1.6g，4.26mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(12mL)中的溶液。将反应混合物搅拌30分钟，得到锌试剂的溶液。
在另外的反应容器中，在5-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(520mg，1.94mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(10mL)中的溶液中加入碘化亚铜(74mg，0.39mmol)、1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁钯二氯化物(142mg，0.19mmol)。将混合物用氮气气氛吹扫三次并且滴加入新鲜制备的(1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-基)碘化锌(II)溶液。将反应混合物在80℃、氮气下搅拌16小时。将反应用水(20mL)猝灭并且用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-2％甲醇)，得到5-((1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(800mg，94％)，为棕色固体。LCMS(ESI)：m/z＝439.0[M+H]+。
步骤E：5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在5-((1-(2,4-二甲氧基苄基)-5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(400mg，0.91mmol)中加入三氟乙酸(8.0mL，107.70mmol)。将混合物在50℃搅拌16小时。将反应用饱和的碳酸氢钠溶液猝灭以调节pH至7并且用二氯甲烷(30mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-10％甲醇)，得到5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(330mg，99％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝289.0[M+H]+。
步骤F：5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
将水合氢氧化锂(67mg，1.60mmol)和5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(230mg，0.80mmol)在四氢呋喃(6mL)、水(6mL)和甲醇(3mL)中的混合物在30℃搅拌1小时。将溶液真空浓缩，得到5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(200mg，96％)，为黄色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。LCMS(ESI)：m/z＝261.0[M+H]+。
步骤G：N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(5-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(200mg，0.77mmol)、6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(234mg，1.15mmol)和(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷子基磷六氟磷酸盐(481mg，0.92mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(0.27mL，1.54mmol)。将混合物在25℃搅拌12小时。将反应混合物浓缩，并且将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-9％甲醇)，得到N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(5-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(130mg，38％)，为无色油状物。
步骤H：(S)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(R)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(5-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(130mg，0.29mmol)通过手性SFC分离(Chiralpak OJ250mm x 30mm x 5μm；超临界CO2/MeOH+NH3·H2O＝30/30；50mL/分钟)，得到(S)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(19mg，14％，RT＝5.15分钟)和(R)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((5-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(15mg，11％，RT＝5.58分钟)，为白色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例512，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),8.78-8.70(m,2H),7.84(s,1H),6.89(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(s,1H),5.58(br s,1H),3.59-3.51(m,1H),3.24-3.17(m,1H),3.12-3.01(m,5H),2.56-2.52(m,1H),2.20-2.11(m,1H),2.03-1.93(m,1H),1.48(s,6H),0.98-0.90(m,2H),0.76-0.69(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝446.2[M+H]+。
实施例513，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),8.80-8.70(m,2H),7.84(s,1H),6.89(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(s,1H),5.48(br s,1H),3.57-3.50(m,1H),3.20-3.15(m,1H),3.12-3.00(m,5H),2.59-2.48(m,1H),2.22-2.12(m,1H),2.00-1.91(m,1H),1.48(s,6H),0.96-0.92(m,2H),0.74-0.70(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝446.3[M+H]+。
实施例514和515：(R)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯
在-78℃、氮气下，在1-(叔丁氧基羰基)-2-吡咯烷酮(2.3g，12.4mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中滴加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺锂(1.0M，在THF中，16.1mL，16.14mmol)。将反应在-78℃搅拌30分钟。在以上溶液中滴加入氯甲酸甲酯(1.72mL，22.22mmol)。将混合物在-78℃搅拌1小时，用饱和的氯化铵溶液(40mL)猝灭，并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-30％乙酸乙酯)，得到2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯(1.9g，63％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.89-3.78(m,1H),3.74(s,3H),3.72-3.69(m,1H),3.56-3.53(m,1H),2.41-2.37(m,1H),2.26-2.21(m,1H),1.53(s,9H)。
步骤B：5-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在5-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1.0g，4.87mmol)在四氯化碳(20mL)中的溶液中加入苯甲酰基过氧化物(118mg，0.49mmol)和1-溴-2,5-吡咯烷二酮(954mg，5.36mmol)。将混合物在80℃、氮气保护下搅拌16小时并且浓缩。将粗产物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-10％乙酸乙酯)，得到5-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(580mg，42％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.72(d,J＝7.2Hz,1H),8.57(s,1H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),4.65(s,2H),4.42(q,J＝7.2Hz,2H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤C：3-((3-(乙氧基羰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)甲基)-2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯
在2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯(1.0g，4.12mmol)和5-(溴甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(780mg，2.75mmol)在乙腈(50mL)中的溶液中加入碳酸钾(759mg，5.49mmol)。将混合物在100℃搅拌2小时，用水(150mL)稀释并且用二氯甲烷(50mLx 3)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL x 2)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-50％乙酸乙酯)，得到3-((3-(乙氧基羰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)甲基)-2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯(750mg，61％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.59(d,J＝6.8Hz,1H),8.49(s,1H),6.94(d,J＝7.6Hz,1H),4.38(q,J＝6.8Hz,2H),3.91-3.80(m,3H),3.72(s,3H),3.32(d,J＝16.8Hz,1H),2.93-2.89(m,1H),2.42-2.36(m,1H),1.52(s,9H),1.39(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤D：5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在3-((3-(乙氧基羰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)甲基)-2-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-叔丁基3-甲基酯(500.0mg，1.12mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入碘化锂(1.5g，11.2mmol)。将混合物在150℃搅拌3小时，用水(30mL)稀释并且用二氯甲烷(30mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在二氯甲烷中的5％甲醇)，得到5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(300mg，93％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(d,J＝6.8Hz,1H),8.53(s,1H),6.99(d,J＝7.2Hz,1H),5.58(br s,1H),4.40(q,J＝6.8Hz,2H),3.53-3.50(m,1H),3.41-3.38(m,2H),3.11-3.06(m,2H),2.61-2.58(m,1H),2.09-2.03(m,1H),1.42(t,J＝6.8Hz,3H)。
步骤E：5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(300mg，1.04mmol)在乙醇(2mL)、水(2mL)和四氢呋喃(2mL)中的溶液中加入一水合氢氧化锂(131mg，3.12mmol)。将混合物在30℃搅拌1小时并且真空浓缩，得到5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(230mg，85％)，为白色固体。
步骤F：N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(200.0mg，0.77mmol)、6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-胺(187.46mg，0.92mmol)和PyAOP(480.81mg，0.92mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(198.64mg，1.54mmol)。将混合物在20℃搅拌12小时，用水(30mL)稀释并且用二氯甲烷(30mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(30mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在二氯甲烷中的0-10％甲醇)，得到N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(220mg，64％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝446.3[M+H]+。
步骤G：(R)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(S)-N-(6-环丙基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-5-((2-氧代吡咯烷-3-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[(2-氧代吡咯烷-3-基)甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(220mg，0.49mmol)通过手性SFC拆分(AD，250mm x 30mm，10μm，超临界CO2/在乙醇中的氢氧化铵＝40/40，60mL/分钟)，得到N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[[(3S)-2-氧代吡咯烷-3-基]甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(38.34mg，17％；RT＝4.633分钟)和N-(6-环丙基-2,2-二甲基-3H-苯并呋喃-5-基)-5-[[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]甲基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(36.75mg，17％；RT＝5.202分钟)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例514，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.69(s,1H),8.74(s,1H),8.70(d,J＝7.2Hz,1H),7.88(s,1H),7.01(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(s,1H),5.55(s,1H),3.43-3.38(m,1H),3.35-3.31(m,2H),3.06-3.05(m,3H),3.04-3.02(m,1H),2.30-2.24(m,1H),2.01-1.95(m,2H),1.48(s,6H),0.98-0.95(m,2H),0.73-0.70(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝446.3[M+H]+。
实施例515，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.69(s,1H),8.74(s,1H),8.70(d,J＝7.2Hz,1H),7.88(s,1H),7.01(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(s,1H),5.53(s,1H),3.43-3.38(m,1H),3.35-3.31(m,2H),3.06-3.05(m,3H),3.04-3.02(m,1H),2.30-2.24(m,1H),2.01-1.95(m,2H),1.48(s,6H),0.98-0.94(m,2H),0.73-0.70(m,2H)。LCMS(ESI)：m/z＝446.3[M+H]+。
实施例516和517：N-[(1S)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(1R)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-醇
在0℃，在搅拌的5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-酮(150mg，0.6mmol)(实施例499，步骤H)在四氢呋喃(9mL)和甲醇(3mL)中的溶液中加入硼氢化钠(65mg，1.7mmol)。将混合物在0℃、氮气下搅拌10分钟，然后在28℃搅拌8.5小时。将反应混合物用水(15mL)猝灭并且用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到粗5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-醇(150mg，99％)，为淡棕色固体，将其直接用于下面的步骤而无需进一步纯化。LCMS(ESI)：m/z＝263.1[M+H]+。
步骤B：N-(1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-氨基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-1-醇(150.0mg，0.6mmol)和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(135.0mg，0.7mmol)在吡啶(15mL)中的混合物在28℃搅拌18小时并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-2％甲醇)，得到N-(1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(220.0mg，94％)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝408.1[M+H]+。
步骤C：N-[(1S)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(1R)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-(1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(220mg，0.5mmol)通过手性SFC拆分(AD(250mm x 30mm，10μm)；超临界CO235％/在乙醇中的0.1％氢氧化铵)，得到N-[(1S)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(59.4mg，27％；RT＝4.667分钟)和N-[(1R)-1-羟基-2,2-二甲基-6-吗啉代-茚满-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(56.6mg，26％；RT＝4.955分钟)，为淡黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例516，峰1：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.13(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.93(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.66(s,1H),8.31(s,1H),7.31-7.27(m,2H),4.61(s,1H),3.99-3.95(m,4H),2.95-2.90(m,4H),2.77(d,J＝15.2Hz,1H),2.64(d,J＝15.2Hz,1H),1.18(s,3H),1.03(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝408.2[M+H]+。
实施例517，峰2：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.13(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.94(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.32(s,1H),7.32-7.28(m,2H),4.61(s,1H),3.99-3.95(m,4H),2.95-2.90(m,4H),2.77(d,J＝15.6Hz,1H),2.64(d,J＝15.2Hz,1H),1.18(s,3H),1.03(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝408.2[M+H]+。
实施例518：N-(4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-(5-氯-2-硝基-苯基)吗啉
在4-氯-2-氟硝基苯(3.0g，17.09mmol)在甲苯(40mL)中的溶液中加入碳酸钾(2.36g，17.09mmol)和吗啉(1.50mL，17.09mmol)。将反应混合物在30℃搅拌16小时。将反应用水(200mL)猝灭并且用乙酸乙酯(200mL x 2)萃取。将合并的有机相用水(400mL x 3)和盐水(400mL)洗涤。将有机层分离，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱在硅胶上纯化(洗脱：在石油醚中的0-9％乙酸乙酯)，得到4-(5-氯-2-硝基-苯基)吗啉(3.9g，94％)，为红色固体。LCMS(ESI)：m/z＝242.9[M+H]+。
步骤B：4-(5-二甲基磷酰基-2-硝基-苯基)吗啉
在4-(5-氯-2-硝基-苯基)吗啉(500mg，2.06mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中加入甲基磷酰基甲烷(193mg，2.47mmol)、磷酸钾(481mg，2.27mmol)、4,5-二(二苯基膦基)-9,9-二甲基吨(60mg，0.10mmol)和乙酸钯(II)(23mg，0.10mmol)。将反应混合物在120℃、氮气下搅拌16小时。将反应混合物过滤并且将滤液用水(50mL)稀释。将混合物用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-100％乙酸乙酯，然后在二氯甲烷中的0-10％甲醇)，得到4-(5-二甲基磷酰基-2-硝基-苯基)吗啉(150mg，26％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝285.0[M+H]+。
步骤C：4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯胺
在4-(5-二甲基磷酰基-2-硝基-苯基)吗啉(250mg，0.88mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入铁(246mg，4.4mmol)和氯化铵(0.15mL，4.4mmol)。将反应混合物在80℃、氮气下搅拌16小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯胺(160mg，72％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.50-7.40(m,1H),7.25-7.10(m,1H),6.85-6.75(m,1H),4.30(s,2H),3.95-3.75(m,4H),3.00-2.85(m,4H),1.70(s,3H),1.66(s,3H)。
步骤D：N-(4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(120mg，0.66mmol)和4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯胺(120mg，0.47mmol)在吡啶(2mL)中的混合物在28℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到粗产物，将其用甲醇(5mL)研磨，得到N-(4-二甲基磷酰基-2-吗啉代-苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(97mg，51％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)10.81(s,1H),8.95-8.60(m,4H),7.85-7.70(m,1H),7.45-7.30(m,1H),7.20-7.05(m,1H),4.05-3.95(m,4H),3.05-3.95(m,4H),1.76(s,3H),1.73(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝400.1[M+H]+。
实施例519和520：N-[(3R)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(3S)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-(2,4-二氟苄基)-2-甲基丙二酸二乙酯
在0℃，在60％氢化钠(1.4g，34.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的悬浮液中滴加入甲基丙二酸二乙酯(5.0g，28.7mmol)。将混合物在0℃搅拌30分钟，然后滴加入在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的2,4-二氟苄基溴(6.5g，31.6mmol)。将混合物从0℃至28℃搅拌2.5小时。将反应用饱和的氯化铵溶液(10mL)猝灭并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的3-7％乙酸乙酯)，得到2-[(2,4-二氟苯基)甲基]-2-甲基-丙二酸二乙酯(8.4g，97％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.14-7.09(m,1H),6.80-6.74(m,2H),4.23-4.17(m,4H),3.25(s,2H),1.34(s,3H),1.26(t,J＝7.2Hz 6H)。
步骤B：2-(2,4-二氟苄基)-2-甲基丙-1,3-二醇
在-10℃，在搅拌的2-[(2,4-二氟苯基)甲基]-2-甲基-丙二酸二乙酯(6.4g，21.2mmol)在四氢呋喃(70mL)中的溶液中分批加入氢化锂铝(2.0g，53.0mmol)。将混合物从-10℃至25℃搅拌3.5小时。将反应用水(30mL)猝灭并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的20-60％乙酸乙酯)，得到2-[(2,4-二氟苯基)甲基]-2-甲基-丙-1,3-二醇(4.5g，97％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31-7.25(m,1H),6.87-6.80(m,2H),3.61-3.54(m,4H),2.77(s,2H),2.56(s,2H),0.77(s,3H)。
步骤C：(7-氟-3-甲基色满-3-基)甲醇
在0℃，在搅拌的2-[(2,4-二氟苯基)甲基]-2-甲基-丙-1,3-二醇(4.7g，21.6mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)和甲苯(80mL)中的溶液中加入在矿物油中的60％氢化钠(1.9g，47.6mmol)。将反应在100℃、氮气下加热2小时。将反应用饱和的氯化铵溶液(25mL)猝灭并且用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-15％乙酸乙酯)，得到(7-氟-3-甲基-色满-3-基)甲醇(3.9g，92％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.98-6.94(m,1H),6.61-6.53(m,2H),4.06-4.03(m,1H),3.80-3.77(m,1H),3.55(d,J＝10.8Hz,1H),3.46(d,J＝10.8Hz,1H),2.64(d,J＝16.8Hz,1H),2.48(d,J＝16.0Hz,1H),1.65(s,1H),1.05(s,3H)。
步骤D：甲磺酸(7-氟-3-甲基色满-3-基)甲酯
在0℃，在搅拌的(7-氟-3-甲基-色满-3-基)甲醇(3.4g，17.3mmol)在二氯甲烷(60mL)中的溶液中加入三乙胺(4.4g，43.3mmol)和甲磺酰氯(3.2g，28.3mmol)。将混合物在28℃搅拌2小时。将反应用水(50mL)猝灭并且用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到粗甲磺酸(7-氟-3-甲基-色满-3-基)甲酯(4.9g，99％)，为橙色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.99-6.96(m,1H),6.65-6.55(m,2H),4.10(d,J＝10.4Hz,1H),4.07-4.01(m,2H),3.79(d,J＝10.8Hz,1H),3.00(s,3H),2.68(d,J＝16.4Hz,1H),2.61(d,J＝16.4Hz,1H),1.14(s,3H)。
步骤E：2-(7-氟-3-甲基色满-3-基)乙腈
在搅拌的甲磺酸(7-氟-3-甲基-色满-3-基)甲酯(4.9g，17.9mmol)在二甲亚砜(80mL)中的溶液中加入氰化钾(3.5g，53.4mmol)。将混合物在110℃、氮气下搅拌17小时。将反应用水(100mL)猝灭并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的0-10％乙酸乙酯)，得到2-(7-氟-3-甲基-色满-3-基)乙腈(3.3g，90％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.00-6.97(m,1H),6.66-6.56(m,2H),3.99-3.96(m,1H),3.81(d,J＝11.2Hz,1H),2.70(s,2H),2.40(s,2H),1.24(s,3H)。
步骤F：2-(7-氟-3-甲基-6-硝基色满-3-基)乙腈
在0℃，在搅拌的2-(7-氟-3-甲基-色满-3-基)乙腈(1.5g，7.31mmol)在乙酸(5mL)和乙酸酐(10mL)中的溶液中加入硝酸铜(II)(4.1g，21.9mmol)。将混合物在0℃搅拌15分钟并且在28℃搅拌0.5小时。加入水(100mL)并且用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用饱和的碳酸氢钠溶液(100mL x 3)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的15-30％乙酸乙酯)，得到2-(7-氟-3-甲基-6-硝基-色满-3-基)乙腈(1.8g，98％)，为淡黄色固体。
步骤G：2-(3-甲基-7-吗啉代-6-硝基色满-3-基)乙腈
在搅拌的2-(7-氟-3-甲基-6-硝基-色满-3-基)乙腈(1.5g，6.1mmol)在二甲亚砜(30mL)中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺(2.4g，18.4mmol)和吗啉(1.1g，12.3mmol)。将混合物在90℃、氮气下搅拌16小时。加入水(100mL)并且将混合物用乙酸乙酯(200mL x 3)萃取，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的10-20％乙酸乙酯)得到2-(3-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-3-基)乙腈(640mg，33％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDl3)δ7.75(s,1H),6.53(s,1H),4.07(d,J＝11.2Hz,1H),3.87(d,J＝12.4Hz,1H),3.86-3.83(m,4H),3.02-2.99(m,4H),2.71(s,2H),2.45-2.33(m,2H),1.25(s,3H)。
步骤H：2-(6-氨基-3-甲基-7-吗啉代色满-3-基)乙腈
在搅拌的2-(3-甲基-7-吗啉代-6-硝基-色满-3-基)乙腈(300mg，1.0mmol)在乙醇(20mL)和水(4mL)中的溶液中加入铁(264mg，4.7mmol)和氯化铵(253mg，4.7mmol)。将混合物在80℃、氮气下搅拌2小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱：在石油醚中的20-70％乙酸乙酯)，得到2-(6-氨基-3-甲基-7-吗啉代-色满-3-基)乙腈(270mg，99％)，为红紫色固体。LCMS(ESI)：m/z＝288.0[M+H]+。
步骤I：2-(3-甲基-7-吗啉代-6-硝基色满-3-基)乙腈
在搅拌的2-(6-氨基-3-甲基-7-吗啉代-色满-3-基)乙腈(220.0mg，0.8mmol)在吡啶(25mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(167mg，0.9mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时并且浓缩。将残留物通过柱色谱纯化(洗脱：在二氯甲烷中的0-1％甲醇)，得到N-[3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(340.0mg，99％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝433.2[M+H]+。
步骤J：N-[(3R)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(3S)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(340mg，0.8mmol)通过手性制备SFC拆分，得到N-[(3R)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(124.8mg，36％；RT＝3.341分钟)和N-[(3S)-3-(氰基甲基)-3-甲基-7-吗啉代-色满-6-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(113.1mg，33％；RT＝4.977分钟)，为淡黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例519，峰1：1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.14(d,J＝6.8Hz,1H),8.93(s,1H),8.67(s,1H),8.17(s,1H),7.29(s,1H),6.77(s,1H),4.05-3.91(m,5H),3.83(d,J＝10.8Hz,1H),3.00-2.84(m,4H),2.77(d,J＝16.4Hz,1H),2.71(d,J＝17.6Hz,1H),2.54(s,2H),1.21(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝433.2[M+H]+。
实施例520，峰2：1H NMR(400MHz,CD3OD)for second峰on SFC:9.14(d,J＝5.6Hz,1H),8.92(s,1H),8.67(s,1H),8.17(s,1H),7.29(s,1H),6.77(s,1H),4.00-3.91(m,5H),3.84(d,J＝11.2Hz,1H),2.96-2.86(m,4H),2.77(d,J＝17.2Hz,1H),2.71(d,J＝17.2Hz,1H),2.54(s,2H),1.21(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝433.2[M+H]+。
实施例521：N-[6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：4-氨基-5-氯-2-甲基-苯甲酸甲酯
在5-氯-2-甲基-4-硝基-苯甲酸甲酯(600mg，2.61mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入铁(729.7mg，13.07mmol)和氯化铵(699mg，13.07mmol)。将混合物在80℃搅拌2小时。将反应混合物过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的0-10％乙酸乙酯)，得到4-氨基-5-氯-2-甲基-苯甲酸甲酯(450mg，86％)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝199.8[M+H]+。
步骤B：5-氯-2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯
在25℃，在4-氨基-5-氯-2-甲基-苯甲酸甲酯(400mg，2.0mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中加入氢化钠(60％，在矿物油中，160mg，4.0mmol)。在25℃搅拌30分钟后，在溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(546mg，3.0mmol)。将反应混合物在25℃搅拌4小时。将反应用水(10mL)稀释并且用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL x3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物用甲醇研磨，得到5-氯-2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯(77mg，11％)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝345.0[M+H]+。
步骤C：2-(溴甲基)-5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯
在氮气下，在5-氯-2-甲基-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯(77mg，0.22mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中加入2,2’-偶氮二(2-甲基丙腈)(4mg，0.02mmol)和1-溴-2,5-吡咯烷二酮(44mg，0.25mmol)。将混合物在80℃搅拌16小时并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的0-10％甲醇)，得到2-(溴甲基)-5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯(40mg，42％产率)，为白色固体。LCMS(ESI)：m/z＝424.8[M+H]+。
步骤D：N-[6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在2-(溴甲基)-5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氨基)苯甲酸甲酯(40mg，0.09mmol)和(3R)-4-氨基-3-氟-2-甲基-丁-2-醇(14mg，0.11mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入三乙胺(0.04mL，0.28mmol)。将反应在70℃搅拌2小时并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到N-[6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-1-氧代-异二氢吲哚-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(20mg，47％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.63(s,1H),8.88-8.85(m,2H),8.79-8.77(m,2H),7.91(s,1H),7.13-7.09(m,1H),4.67-4.46(m,3H),4.28-4.15(m,1H),3.71-3.60(m,1H),2.44(s,1H),1.35(s,3H),1.33(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝432.0[M+H]+。
实施例522和523：N-[(2R)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：2-[6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇
在1H-咪唑-4-甲醛(44mg，0.47mmol)在甲醇(5mL)、乙酸(0.25mL)和二氯甲烷(5mL)中的溶液中加入2-(2-甲基-5-硝基-6-哌嗪-1-基-3H-苯并呋喃-2-基)丙-2-醇(100mg，0.31mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时，加入氰基硼氢化钠(29mg，0.47mmol)。将反应在25℃搅拌16小时。将反应用水(20mL)稀释并且用二氯甲烷(50mL x 2)萃取。将有机相用盐水(50mL x 2)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到2-[6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇(100mg，80％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝402.3[M+H]+。
步骤B：2-[5-氨基-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇
在2-[6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-5-硝基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇(510mg，1.27mmol)在乙醇(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入铁(354mg，6.35mmol)和氯化铵(339mg，6.35mmol)。将反应在80℃搅拌2小时。将反应过滤并且浓缩。将残留物溶于二氯甲烷(80mL x 2)，用饱和的盐水溶液(80mL)洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩，得到2-[5-氨基-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇(450mg，95％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝372.0[M+H]+。
步骤C：N-[2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(263mg，1.45mmol)在吡啶(10mL)中的溶液中加入2-[5-氨基-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-2-基]丙-2-醇(450mg，1.21mmol)。将反应混合物在50℃搅拌16小时。将反应浓缩，并且通过快速柱色谱纯化(在二氯甲烷中的10％甲醇)，得到N-[2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(480mg，76％产率)，为黄色固体。LCMS(ESI)：m/z＝517.3[M+H]+。
步骤D：N-[(2R)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2S)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(480mg，0.93mmol)通过手性制备SFC拆分，得到N-[(2R)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(121mg，25％)和N-[(2S)-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-6-[4-(1H-咪唑-4-基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(161mg，33％)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例522，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.37(s,1H),8.78(d,J＝6.8Hz,1H),8.71(s,1H),8.49-8.44(m,1H),8.35(s,1H),7.60(s,1H),7.11-7.01(m,1H),6.93(s,1H),6.60(s,1H),3.63(s,2H),3.51(d,J＝15.6Hz,1H),2.97-2.59(m,10H),1.40(s,3H),1.38(s,3H),1.25(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝517.2[M+H]+。
实施例523，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.40(s,1H),8.80(d,J＝6.8Hz,1H),8.75(s,1H),8.57-8.51(m,1H),8.38(s,1H),7.62(s,1H),7.11-7.02(m,1H),6.97(s,1H),6.64(s,1H),3.65(s,2H),3.51(d,J＝15.6Hz,1H),2.98-2.58(m,10H),1.41(s,3H),1.38(s,3H),1.26(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝517.1[M+H]+。
实施例524和525：N-[(2S)-6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[(2R)-6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(实施例356)(650mg，1.32mmol)通过手性SFC拆分(OD(250mm x 30mm，5μm)，45％/在MeOH中的0.1％NH3H2O)，得到N-[(2S)-6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(271.7mg，41.4％；RT＝5.11分钟)和N-[(2R)-6-[4-(2-氨基-2-氧代-乙基)哌嗪-1-基]-2-(1-羟基-1-甲基-乙基)-2-甲基-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(278.4mg，42.4％；RT＝5.99分钟)，为黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例524，峰1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.40(s,1H),9.36(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.97(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.31(s,1H),7.35(dd,J＝6.8,4.0Hz,1H),7.23(s,1H),7.17(s,1H),6.68(s,1H),4.52(s,1H),3.45(d,J＝15.6Hz,1H),3.01(s,2H),2.90-2.80(m,4H),2.75-2.65(m,5H),1.32(s,3H),1.17(s,3H),1.15(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝494.2[M+H]+。
实施例525，峰2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.34(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.95(dd,J＝4.4,1.6Hz,1H),8.65(s,1H),8.29(s,1H),7.33(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),7.21(s,1H),7.15(s,1H),6.66(s,1H),4.50(s,1H),3.43(d,J＝16.0Hz,1H),2.99(s,2H),2.90-2.80(m,4H),2.75-2.65(m,5H),1.30(s,3H),1.15(s,3H),1.14(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝494.2[M+H]+。
实施例526和527：(N-[(2R)-2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和(N-[(2S)-2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将N-[2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg，0.40mmol)按照实施例6中描述的方法由1-(2,4-二氟苯基)-2,4-二甲基-戊-2,4-二醇制备。将其通过手性SFC拆分(Chiralpak AD 100×4.6mm x3μm；40％/在乙醇中的0.05％DEA)，得到N-[(2R)-2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg，33.3％；RT＝4.731分钟)和N-[(2S)-2-(2-羟基-2-甲基-丙基)-2-甲基-6-吗啉代-3H-苯并呋喃-5-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，27.8％；RT＝5.207分钟)，为淡黄色固体，任意指定的绝对立体化学。
实施例526，峰1：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.46(s,1H),8.85-8.81(m,1H),8.80-8.76(m,2H),8.42(s,1H),7.06(dd,J＝6.8,4.4Hz,1H),6.66(s,1H),3.99-3.88(m,4H),3.31(d,J＝15.6Hz,1H),3.05(br s,1H),2.98(d,J＝15.6Hz,1H),2.92-2.90(m,4H),2.05(s,2H),1.52(s,3H),1.32(s,3H),1.27(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝452.1[M+H]+。
实施例527，峰2：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.46(s,1H),8.83(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),8.80-8.76(m,2H),8.42(s,1H),7.06(dd,J＝7.2,4.0Hz,1H),6.66(s,1H),3.98-3.90(m,4H),3.31(d,J＝15.6Hz,1H),3.04(s,1H),2.98(d,J＝15.6Hz,1H),2.92-2.90(m,4H),2.06(s,2H),1.52(s,3H),1.33(s,3H),1.27(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝452.1[M+H]+。
实施例528：(R)-N-(6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(R)-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-6-乙烯基异二氢吲哚-1-酮
在6-氯-2-[(2R)-2-氟-3-羟基-3-甲基-丁基]-5-硝基-异二氢吲哚-1-酮(100mg，0.32mmol)在1，4-二烷(3mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(80mg，0.47mmol)、乙酸钯(II)(7mg，0.03mmol)、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯(26mg，0.06mmol)和磷酸钾(201mg，0.95mmol)。将混合物在90℃微波照射条件下搅拌30分钟并且浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(50mL)，并且用水(40mL)和盐水(40mL)洗涤。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的50％乙酸乙酯)，得到(R)-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-6-乙烯基异二氢吲哚-1-酮(90mg，93％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,1H),7.98(s,1H),7.13(dd,J＝17.6,11.2Hz,1H),5.89(d,J＝16.8Hz,1H),5.58(d,J＝11.2Hz,1H),4.74(d,J＝18.0Hz,1H),4.63-4.45(m,2H),4.35-4.21(m,1H),3.72-3.64(m,1H),2.15(s,1H),1.35(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝309[M+H]+。
步骤B：(R)-5-氨基-6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)异二氢吲哚-1-酮
在搅拌的(R)-5-氨基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-乙烯基异二氢吲哚-1-酮(90mg，0.29mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入10％钯炭(31mg，0.029mmol)。将混合物在26℃、氢气气氛(15psi)下搅拌2小时。将混合物过滤并且将滤液浓缩，得到(R)-5-氨基-6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)异二氢吲哚-1-酮(75mg，92％)，为无色油状物。LCMS(ESI)：m/z＝281[M+H]+。
步骤C：(R)-N-(6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在(R)-5-氨基-6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)异二氢吲哚-1-酮(75mg，0.27mmol)在吡啶(2mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(63mg，0.35mmol)。将混合物在26℃搅拌16小时并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的9％甲醇)，得到(R)-N-(6-乙基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(54mg，46％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.11(s,1H),8.87(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),8.79(s,1H),8.74(dd,J＝4.4,2.0Hz,1H),8.64(s,1H),7.72(s,1H),7.10(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),4.67-4.44(m,3H),4.28-4.12(m,1H),3.73-3.63(m,1H),2.95(q,J＝7.2Hz,2H),2.61(s,1H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H),1.34(s,3H),1.32(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝426.1[M+H]+。
实施例529：(R)-N-(2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤A：(R)-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-6-(丙-1-烯-2-基)异二氢吲哚-1-酮
在(R)-6-氯-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基异二氢吲哚-1-酮(100mg，0.32mmol)在1,4-二烷(3mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(80mg，0.47mmol)、乙酸钯(II)(7mg，0.03mmol)、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯(26mg，0.06mmol)和磷酸钾(201mg，0.95mmol)。将混合物在90℃微波条件下搅拌30分钟并且浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯(50mL)，用水(40mL)和盐水(40mL)洗涤。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。将残留物通过快速柱色谱纯化(在石油醚中的50％乙酸乙酯)，得到(R)-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-6-(丙-1-烯-2-基)异二氢吲哚-1-酮(80mg，78％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.82(s,1H),5.24(s,1H),4.99(s,1H),4.73(d,J＝17.6Hz,1H),4.65-4.45(m,2H),4.37-4.21(m,1H),3.72-3.65(m,1H),2.13(s,3H),1.35(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝323.0[M+H]+。
步骤B：(R)-5-氨基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基异二氢吲哚-1-酮
在搅拌的(R)-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5-硝基-6-(丙-1-烯-2-基)异二氢吲哚-1-酮(120mg，0.37mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入10％钯炭(40mg，0.029mmol)。将混合物在26℃、氢气气氛(15psi)下搅拌2小时。将反应混合物过滤并且将滤液浓缩，得到(R)-5-氨基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基异二氢吲哚-1-酮(96mg，88％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64(s,1H),6.69(s,1H),4.60-4.29(m,3H),4.24-3.98(m,3H),3.70-3.55(m,1H),3.94-2.83(m,1H),2.62(s,1H),1.32-1.29(m,12H)。
步骤C：(R)-N-(2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在(R)-5-氨基-2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基异二氢吲哚-1-酮(96mg，0.33mmol)在吡啶(2mL)中的溶液中加入吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(77mg，0.42mmol)。将混合物在26℃搅拌16小时并且浓缩。将残留物通过制备TLC纯化(在二氯甲烷中的9％甲醇)，得到(R)-N-(2-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-6-异丙基-1-氧代异二氢吲哚-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(57mg，39％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.14(s,1H),8.88(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),8.80(s,1H),8.74(dd,J＝4.4,2.0Hz,1H),8.56(s,1H),7.84(s,1H),7.10(dd,J＝7.2,4.4Hz,1H),4.68-4.43(m,3H),4.27-4.10(m,1H),3.76-3.65(m,1H),3.51-3.42(m,1H),2.47(s,1H),1.47(d,J＝6.8Hz,6H),1.34(s,3H),1.32(s,3H)。LCMS(ESI)：m/z＝440.1[M+H]+。
实施例530：N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在6-溴-N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg，0.42mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中加入氢氧化钾(143mg，2.54mmol)。将混合物在65℃搅拌72小时并且浓缩。将残留物溶于水(20mL)并且用二氯甲烷(30mL x 3)洗涤。用2N HCl水溶液将水相酸化至pH＝3，并且用在二氯甲烷中的20％甲醇(20mL x 3)萃取。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并且浓缩，得到N-(2,2-二甲基-6-吗啉代-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(40mg，22％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),8.76-8.72(m,2H),8.49(s,1H),8.29(s,1H),6.70(s,1H),3.82(s,4H),2.99(s,2H),2.80(s,4H),1.41(s,6H)。LCMS(ESI)：m/z＝410.0[M+H]+。
表22.以类似于实施例4的方法制备以下实施例：
表23.以类似于实施例64的方法制备以下实施例：
表24.以类似于实施例173的方法制备以下实施例：
表25.以类似于实施例250的方法制备以下实施例：
生物学实施例
使用从昆虫细胞产生的重组酶来测定化合物对人IRAK4和IRAK1催化活性的抑制。携带N-端His6-标签的全长IRAK4蛋白质从Life Technologies(Carlsbad,CA,USA)获得。IRAK1构建体在内部产生并且包含IRAK1残基Arg194至Ser712，其前面是NH2-末端His6标签和谷胱甘肽-S-转移酶的编码序列。
使用测量反应产物ADP量的Transcreener-Fluorecescence极化平台(BelBrookLabs,Madison,WI,USA)测定激酶活性。使用IRAK1衍生肽(序列H-KKARFSRFAGSSPSQSSMVAR)优化IRAK4反应条件以在90分钟温育过程中提供线性反应速率，其导致起始ATP转化成ADP10-12％。最终的IRAK4测定条件为1.25nM IRAK4；125uM ATP；10uM MgCl2；125uM肽，在反应缓冲液(25mM HEPES(pH7.4))中；2mM二硫苏糖醇；0.015％Brij-35；和0.5％二甲亚砜。类似优化IRAK1活性，产生最终测定条件为3mM IRAK1；62.5uM ATP；5uM MgCl2和62.5uM IRAK1肽，在反应缓冲液中，60分钟。
化合物用于激酶抑制的分析使用系列稀释在二甲亚砜中的抑制剂进行，其使用LabCyte Echo 555液体分配器完成。用化合物点样的384孔测定板接受在反应缓冲液中4uL2×底物(ATP+肽)混合物，接着是在反应缓冲液中稀释的4uL 2×酶。通过加入6uL含有EDTA(40nM终浓度)、0.95ug ADP结合抗体ADP2、ADP示踪剂(3nM终浓度)和25uM HEPES的检测缓冲液在60分钟(IRAK1)或90分钟(IRAK4)停止反应。温育1小时后，使用635/20激发滤光片和670/20发射滤光片，在Tecan M1000读板器上读取ADP2-抗体:TRACER复合物的荧光偏振。使用Genedata软件分析Delta milli-P值以拟合剂量-响应曲线并且计算化合物Ki值，对于IRAK4和IRAK1分别使用642um和83.2um的ATP Km值。表15、16和17提供了代表性本发明化合物的IRAK4 Ki值。
表26.代表性本发明化合物的IRAK4 Ki值
空白＝未测定
表27.代表性本发明化合物的IRAK4 Ki值
空白＝未测定
表28.代表性本发明化合物的IRAK4 Ki值
表29.代表性本发明化合物的IRAK4 Ki值
空白＝未测定
在前面的描述或下面的权利要求中公开的特征，以它们的具体形式或者用于执行所公开的功能的方式，或者用于获得所公开的结果的方法或过程，在适当的情况下，可以分开地或在可以利用这些特征的任何组合来以其不同形式实现本发明表示。
出于清楚和理解的目的，已经通过说明和实施例的方式详细描述了前述发明。对于本领域技术人员而言显而易见的是，可以在所附权利要求的范围内实施改变和修饰。因此，应该理解的是，以上描述旨在是说明性的而非限制性的。因此，本发明的范围不应参照上面的描述来确定，而应该参照下面的所附权利要求以及这些权利要求所享有的等同物的全部范围来确定。
本文提到的专利、公开申请和科学文献确立了本领域技术人员的知识，并且通过引用将其全部内容并入本文，其程度如同每一个都是特定且单独地被引用。

Claims (39)

1.式0化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、-O-C1-3烷基、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
其中任何环烷基、杂环基、杂芳基环或芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、-C(O)NR8R9或-NR8R9，
其中任何烷基、链烯基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被氧代取代的3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基；
R5是氢、-CN、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C0-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或可以任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：(i)任选被卤素取代的-C(O)(C1-3烷基)或(ii)任选被卤素取代的C1-3烷基，并且
其中任何环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1-2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-3-11元杂环基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-(C0-3烷基)-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OR13；C1-3卤代烷氧基；-C(O)(C1-3烷基)；-S-C1-3烷基；或任选被以下取代的C1-3烷基：OH、卤素、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基，并且
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成5-8元杂环基，
其中任何烷基、环烷基、苯基、杂环基或杂芳基环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13、-NR6R7或5-6元单环杂芳基环；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是氢、卤素、CN或任选被-NH2、卤素或CN取代的C1-3烷基。
2.权利要求1的化合物，其进一步被定义为式I化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、-O(C1-3烷基)-3-8元环烷基、-O(C1-3烷基)-3-8元饱和的或部分饱和的杂环基、-O(C1-3烷基)-苯基、-O(C1-3烷基)-5-6元杂芳基环、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷氧基、-C(O)(C1-3烷基)、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR8R9、-OP(O)(OC1-3烷基)2，任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环，或任选被卤素、氧代、CN、OH、苯基、3-8元饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、-(C0-3烷基)-C3-6环烷基，任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的-(C0-3烷基)-3-11元杂环基，-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)(C1-3烷基)、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13、-S(O)1-2NR10R11或-OP(O)(OC1-3烷基)2，
其中任何烷基、环烷基或杂环基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基或3-8元杂环基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、-(C0-3烷基)-苯基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，或者R10和R11一起形成任选被以下取代的5-8元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
3.权利要求1的化合物，其进一步被定义为式II化合物：
或其立体异构体或可药用盐，
其中：
R1是氢或卤素；
R3是氢、卤素、CN、OH、C1-3烷基、C2-3链烯基、C3-7环烷基、C1-C3烷酰基、-(C0-C3烷基)C(O)NR6R7、-(C2-3链烯基)C(O)NR6R7、-S(O)1-2NR6R7、-NR8R9、3-7元单环饱和的或部分饱和的杂环基、5-6元单环杂芳基环或5-6元单环芳基环，
其中任何烷基、烷酰基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R4是氢、卤素、C1-3烷基、C2-3链烯基、-(C0-C3烷基)C(O)R13、-(C2-3链烯基)C(O)NR10R11、-S(O)1-2NR10R11或-NR8R9；
其中任何烷基或链烯基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R5是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10环烷基、-NR8R9、-O(C3-7环烷基)、3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或5-6元单环杂芳基环，
其中任何烷基或烷氧基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基，并且
任何环烷基或其它环任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基；
A是任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
其中当A是5元含氮杂环基时，氮原子被取代；
R6和R7在每次出现时独立地是氢、C1-3烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R8、R9、R10和R11在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-6环烷基、3-11元饱和的杂环基、-C(O)R13、-C(O)OR13、-C(O)NR6R7或-S(O)1-2R13，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR13或-NR6R7；
R12在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基或C3-6环烷基，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
R13在每次出现时独立地是氢、C1-6烷基、C3-10环烷基或3-11元饱和的杂环基，
其中任何烷基、环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、-OR12或-NR6R7；并且
R16是H、-Cl、-CN或-CH3。
4.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1和R4各自是氢，并且R3是氢、OH、卤素、CH3、CH2OH、CH2F、OCHF2、CHF2、CF3、环丙基、氮杂环丁烷基、CN、-C(O)CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-NHCH3、-SO2-NH2或-SO2-NHCH3。
5.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1和R4各自是氢，并且R3是氢、OH、CH3或CH2OH。
6.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1和R4各自是氢，并且R3是Br、Cl、F、OCHF2、CHF2或CF3。
7.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1和R4各自是氢，并且R3是环丙基、氮杂环丁烷基、CN、-C(O)CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-NHCH3、-SO2-NH2或-SO2-NHCH3。
8.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1和R3各自是氢，并且R4是Cl、CHF2、 或其立体异构体。
9.权利要求1-3任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R1、R3和R4各自是氢。
10.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是任选被以下取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基。
11.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是任选被以下取代的N-连接的3-11元饱和的杂环基：卤素、氧代、CN、OH、-(C0-3烷基)C(O)NR10R11、-OP(O)(OC1-3烷基)2或任选被卤素、氧代、CN、OH或-NR8R9取代的C1-3烷基。
12.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基的环杂原子选自氮和氧。
13.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是哌啶基、哌嗪基或吗啉基，其中任何R5任选被以下取代：卤素；氧代；CN；OH；C1-6烷氧基；-NR8R9；-C(O)(C1-3烷基)；-(C0-3烷基)C(O)NR10R11；-S(O)1-2NR8R9；-OP(O)(OC1-3烷基)2；任选被OH或卤素取代的C3-10环烷基；任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基；任选被卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基或C1-3卤代烷基取代的5-6元单环杂芳基环；或任选被以下取代的C1-4烷基：卤素、氧代、CN、OH、-O-C1-3烷基、-S-C1-3烷基、-SO2-C1-3烷基、-NR8R9、-C(O)NR8R9、苯基、C3-10环烷基、任选被氧代或C1-3烷基取代的3-11元饱和的或部分饱和的杂环基或者任选被氧代、卤素或C1-3烷基取代的5-6元单环杂芳基环。
14.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是N-连接的哌啶基、N-连接的哌嗪基或N-连接的吗啉基，其中任何R5任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH或任选被卤素、氧代、CN或OH取代的C1-3烷基。
15.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是-CH2CH3、-C(CH3)2、Cl、CN、环丙基、-C(O)NH2、-OCH3、-OCH2CF3、-OCH2CHF2、-CF3、-CHF2、-OCF3、-OCHF2、-NHCH3、-N(CH3)2、
或其立体异构体。
16.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是
或其立体异构体。
17.权利要求1-9任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中R5是
18.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中A是3-11元非芳族杂环基。
19.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中A是包含至少一个氧作为环原子并且任选被以下取代的3-11元杂环基：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
20.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-A、I-A或II-A：
0-A、I-A或II-A
其中A是任选包含另外的环杂原子的5或6元环并且其中A任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
21.权利要求20的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中0-A、I-A或II-A进一步被定义为0-B、I-B或II-B：
0-B、I-B或II-B
其中R14和R15各自选自卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13和-S(O)1-2NR10R11，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基；
或者R14和R15一起形成C3-6环烷基或者饱和的或部分饱和的3-6元杂环基，
其中任何环烷基或其它环独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
22.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中A不包含氧作为环原子并且任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-6烷基、C3-6环烷基、-NR8R9、-NR12C(O)R13、-NR12S(O)1-2R13、-C(O)NR10R11、-C(O)OR13或-S(O)1-2NR10R11，其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
23.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-C、I-C或II-C：
0-C、I-C或II-C
其中氮包含权利要求1中定义的取代基。
24.权利要求23的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中式0、式I或式II的以下部分
进一步被定义为0-C、I-C或II-C：
0-C、I-C或II-C
其中A的氮被C1-6烷基或C3-6环烷基取代，
其中任何烷基或环烷基独立地任选被以下取代：卤素、氧代、CN、OH、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基或C1-3卤代烷氧基。
25.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中式0、式I或式II的以下部分
选自
或其立体异构体。
26.权利要求1-17任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其中式0、式I或式II的以下部分
选自
及其立体异构体。
27.权利要求1-26任一项的化合物，其中化合物不是
28.权利要求1-26任一项的化合物，其选自表1、2和3的化合物或其立体异构体或可药用盐。
29.药物组合物，其包含权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，以及可药用赋形剂、载体或稀释剂。
30.在患者中预防、治疗对抑制IRAK4有响应的疾病或病症或者减轻对抑制IRAK4有响应的疾病或病症的严重程度的方法，该方法包括给患者施用治疗有效量的权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐。
31.在患者中治疗癌症的方法，该方法包括给患者施用治疗有效量的权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐。
32.在患者中治疗炎性或自身免疫疾病的方法，该方法包括给患者施用治疗有效量的权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐。
33.权利要求32的方法，其中疾病选自克罗恩病、溃疡性结肠炎、肠易激惹障碍(IBD)、哮喘、移植物抗宿主病、同种异体移植排斥、慢性阻塞性肺病(COPD)、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、狼疮肾炎、皮肤狼疮、银屑病、全身性发作的幼年特发性关节炎、多发性硬化、神经性疼痛、痛风和痛风性关节炎。
34.权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐在治疗中的用途。
35.权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐在治疗炎性疾病中的用途。
36.权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。
37.权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或可药用盐，其用于治疗炎性疾病。
38.在离体细胞中抑制IRAK4的方法，该方法包括使细胞与权利要求1-26任一项的化合物或其立体异构体或盐接触。
39.在需要治疗的患者中抑制IRAK4的方法，该方法包括给患者施用权利要求1-26任一项的化合物。
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