CN108441529A - 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法 - Google Patents

一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108441529A
CN108441529A CN201810536357.XA CN201810536357A CN108441529A CN 108441529 A CN108441529 A CN 108441529A CN 201810536357 A CN201810536357 A CN 201810536357A CN 108441529 A CN108441529 A CN 108441529A
Authority
CN
China
Prior art keywords
deacylase
enzyme
addition
cross
bsa
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201810536357.XA
Other languages
English (en)
Inventor
袁建栋
别
别一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
XINTAI PHARMACEUTICAL (SUZHOU) CO Ltd
Borui Pharmaceutical (suzhou) Ltd By Share Ltd
Brightgene Bio Medical Technology Co Ltd
Original Assignee
XINTAI PHARMACEUTICAL (SUZHOU) CO Ltd
Borui Pharmaceutical (suzhou) Ltd By Share Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by XINTAI PHARMACEUTICAL (SUZHOU) CO Ltd, Borui Pharmaceutical (suzhou) Ltd By Share Ltd filed Critical XINTAI PHARMACEUTICAL (SUZHOU) CO Ltd
Priority to CN201810536357.XA priority Critical patent/CN108441529A/zh
Publication of CN108441529A publication Critical patent/CN108441529A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
    • C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
    • C07K7/56—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation not occurring through 2,4-diamino-butanoic acid

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种全新的FR901379转化为FR179642的方法。该方法将交联酶聚体技术应用于FR901379转化为FR179642的过程中。该方法为通过将脱酰酶制备成脱酰酶交联酶聚体，该交联酶聚体将FR901379转化为FR179642。通过该方法，反应体系中FR901379底物投料浓度能达到20g/L，并且达到90～96％的摩尔转化率，同时简化生产过程，降低了成本。

Description

一种米卡芬净钠前体FR179642的发酵方法
技术领域
本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及抗真菌的发酵半合成药物前体的制备，更具体涉及米卡芬净钠前体FR179642的发酵方法。
背景技术
近年来，由于免疫低下患者逐年增多，真菌感染发病率明显升高，尤其是深部真菌感染的发病率和病死率显著增加。棘白菌素类抗生素是20世纪70年代发现的一组天然产物，具有类似的环状多肽核心和不同的脂肪酸侧链，能够非竞争性地抑制真菌细胞壁β-1,3-葡聚糖合成酶的活性，从而达到抗真菌的目的。与传统抗真菌药物相比，该类药物具有作用机制独特，毒副作用低，且对一些唑类和两性霉素B耐药的真菌具有很强的抗菌活性，是目前临床治疗深部真菌感染的常用药物。FDA已批准上市的这类药物包括卡泊芬净(Caspofungin)、米卡芬净(Micafungin)和阿尼芬净(Anidulafungin)。米卡芬净药用盐为米卡芬净钠。
FR901379是合成米卡芬净类药物的重要前体物质，由C.empetri经突变后获得的高产菌株发酵所得。FR901379通过脱酰酶脱除侧链后得到米卡芬净母核FR179642，FR179642经过化学修饰得到米卡芬净钠。
FR901379的结构如下：
FR179642的结构如下：
中国专利91104847.2公开了将FR901379通过菌丝体游动放线菌属utahensisIFO-13244在37℃脱酰基得到FR179642的钠盐。
中国专利CN102443050披露了以一种环脂肽化合物为前体通过酶解掉侧链得到FR179642，并报道了该种前体环脂肽化合物的分离提纯方法。此外还有文献中报道由FR179642制备米卡芬净的合成方法(Ueda,S.；Ezaki,M.；Tanaka,M.；et al.Studies on anovellipopeptide acylase from Streptomyces spp.for production of FR179642,akey intermediate of antifungal lipopeptide drug FK463.38th Intersci ConfAntimicrob Agents Chemother(Sept 24 1998,San Diego)1998,Abst F-145)。
中国专利CN106755221公开了一种FR179642的制备方法，FR179642菌株在培养基中发酵，在发酵过程中分两次添加米卡芬净前体FR901379，并通过多阶段控温的方法，提高FR179642的产量。
但长期以来FR179642的发酵一直停留在一个很低的水平，尽管人们都在为寻找一个廉价，高产的培养基而努力，但收效甚微。这就使得FR179642化合物的制备难度加大，成本提高，从而间接使米卡芬净钠长期处于一个较高的价位。因此人们迫切需要一种廉价高效合成FR179642的方法。
中国专利CN106544382公开了一种将FR901379转化成FR179642的方法，该方法通过控制转化液中FR901379的起始浓度以及转化过程中温度和pH控制，显著提高了酶的转化效率，转化率可高达83％，但该专利所公开的方法是收集菌体进行转化，转化体系存在大量微生物，转化速度较慢，酶的稳定性差，分离纯化步骤复杂，成本高。
华东理工大学硕士学位论文“棘白菌素脱酰酶基因工程菌的构建及应用研究”公开了一种ECB脱酰酶的固定化研究，由于游离的ECB脱酰酶存在储存时间短，回收利用难等缺点，该论文作者对LX-1000HA树脂进行戊二醛交联，将其用于EBC脱酰酶的固定化。通过该方法，虽然转化率较高，但操作复杂，成本较高，固定化过程的化学反应容易导致酶部分失活。
基于对扩大生产，降低成本的需要，在米卡芬净的生产领域，仍然需要更优的FR901379转化成FR179642的方法。
2000年荷兰Delft理工大学的Cao等在交联酶和交联酶晶体的基础上提出一种新型的固定化酶技术，交联酶聚体(cross-linked enzyme aggregates，CLEAs)。此通过改变性质使酶分子靠近而形成聚集体从溶剂中沉淀出来，之后将聚集体进行交联，形成交联酶聚体。交联酶聚体是酶本身作为载体的固定化酶，单位体积酶浓度高，稳定、可回收、催化活性高，生产成本低，具有潜在的应用前景。
目前报道的交联酶聚体使用的酶包括水解酶、裂合酶、氧化还原酶，目前未见在发酵半合成药物的发酵领域有报道，也未见将此技术应用于脱酰酶的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种全新的FR901379转化为FR179642的方法。该方法将交联酶聚体技术应用于FR901379转化为FR179642的过程中。
该方法为通过将脱酰酶制备成脱酰酶交联酶聚体，该交联酶聚体将FR901379转化为FR179642。通过该方法，反应体系中可以达到90～96％的摩尔转化率，同时简化生产过程，降低了成本。
本发明方法包括以下步骤：
1)发酵能将棘白菌素B脱酰酶表达在胞外的基因工程菌，获得棘白菌素B脱酰酶粗酶；
2)将脱酰酶粗酶制备为脱酰酶交联酶聚体；
3)FR901379和脱酰酶交联酶聚体反应，转化为FR179642。
其中，步骤1)中脱酰酶粗酶是由产生菌发酵制得，粗酶产生菌的发酵可使用表达在胞外的基因工程菌株，例如白色链霉菌基因工程菌株(Streptomyces albus)，(参见“Efficient Bioconversion of Echinocandin B to Its Nucleus by Overexpressionof Deacylase Genes in Different Host Strains[J].Appl Environ Microbiol,2013Feb；79(4):1126-33)，采用本领域技术人员熟知的条件进行发酵制备，例如包括但不限于CN102618606中公开的发酵方法。
按照上述方法制备得到的脱酰酶发酵液过滤或离心，向上清液加入硫酸铵进行盐析，通入空气，搅拌后静置，过滤或离心，收集沉淀，得到脱酰酶粗酶。
其中，所述的硫酸铵的用量为发酵上清液的40～80％(w/v)，优选50％；通入空气的每分钟流量相当于加入硫酸铵后料液总体积的10～30％(v/v)，优选20％；搅拌时间为20～60分钟，优选30分钟；搅拌速度为50～150rpm；静置条件为温度4～15℃、时间8～16小时，优选的静置条件为8℃静置12小时。
步骤2)中，脱酰酶交联酶聚体制备的具体方法为：将步骤1)制备得到的脱酰酶粗酶加入磷酸缓冲液后，再加入牛血清白蛋白(BSA)作为交联保护剂，通入空气，搅拌后静置。再向上述反应液中加入交联剂戊二醛，搅拌，以形成脱酰酶交联酶聚体。
其中，所述的磷酸缓冲液含磷酸二氢钾2～2.5g/L，磷酸氢二钠1～1.5g/L，pH调节至5.5～6.5；优选磷酸二氢钾2.24g/L，磷酸氢二钠1.24g/L，pH为6.0。粗酶的加入量为1～3％(w/v)，优选粗酶加入量2％。
所述的牛血清白蛋白(BSA)的加入量为1～3g/L，优选2g/L，通入空气的每分钟流量相当于料液体积的10～30％(v/v)，优选20％；搅拌时间为20～60分钟，优选30分钟；搅拌速度为50～150rpm；静置条件为温度4～15℃、时间0.5～2小时，优选的静置条件为8℃静置1小时。
所述的戊二醛加入量为10～30mmol/L，优选20mmol/L；搅拌温度为28～32℃；搅拌速度为50～150rpm，优选100rpm，搅拌时间1～3小时，优选2小时。
步骤3)中，向上述步骤2)得到的反应液中加入米卡芬净前体FR901379，搅拌，使米卡芬净前体FR901379转化为米卡芬净母核，监测转化体系中米卡芬净前体FR901379和米卡芬净母核浓度，当米卡芬净前体FR901379浓度不再减少，米卡芬净母核浓度不再增加时，结束转化。
其中，所述的米卡芬净前体FR901379的加入量为5～20g/L，优选20g/L，搅拌温度为28～32℃，搅拌速度为50～150rpm，优选100rpm，转化时间为6～24小时，结束转化的指标为HPLC检测反应体系中米卡芬净前体FR901379浓度不再减少，米卡芬净母核浓度不再增加。
本发明所述FR901379可采用本领域技术人员熟知的方法进行发酵制备，例如，包括但不限于201611019780.X中公开的制备方法。
本发明通过添加牛血清白蛋白(BSA)作为交联保护剂，同时控制空气的流量和搅拌速度、时间，形成粒径大小合适的酶聚体，既避免了交联酶聚体粒径过大使得内部的酶分子不能很好地和底物接触，又避免了酶分子过多暴露在有机溶剂体系中导致失活。本发明脱酰酶交联后酶活更高。本发明成本低廉，操作简便，大幅提高转化速度和酶的稳定性，降低分离纯化的成本。
具体实施例
在下面将对本发明进行详细描述。然而，本发明可能具体体现为许多不同的形式，而且它不应该被局限于此处所描述的实施例中，提供这些实施例中的目的是使所披露内容更完整与全面。所用试剂和原料，除了提供制备方法的除外，其余均为市售。除非另有定义，否则本文中所有科技术语具有的含义与权利要求主题所属技术领域人员通常理解的含义相同。
实施例1产脱酰酶菌株的发酵及粗酶制备
菌种：白色链霉菌(Streptomyces albus)，保藏号：ATCC21725；-80℃冷冻管保存；
种子培养基：热炸黄豆饼粉0.5％(w/v，下同)，酵母粉0.5％，蛋白胨0.5％，葡萄糖1％，pH约6.8～7.2，30℃培养1～2天；
发酵培养基：热炸黄豆饼粉1％，酵母粉1％，蛋白胨1％，葡萄糖3％，氯化钠0.5％，七水硫酸镁0.2％，磷酸氢二钾0.1％，pH约6.8～7.2，30℃培养2～3天；
将白色链霉菌基因工程菌株接种于种子培养基，30℃培养1～2天，然后按照发酵体积的5％接种于发酵培养基，30℃培养2～3天；
发酵完成后，将发酵液过滤得到上清液，按照上清液体积的50％加入硫酸铵，通入空气，每分钟流量相当于料液体积的20％，同时搅拌30分钟，8℃静置12小时，过滤收集沉淀，得到粗酶。
实施例2 FR901379的制备
将Coleophoma empetri菌种在种子培养基中培养。所述的种子培养基为葡萄糖10g/L、可溶性淀粉30g/L、棉籽饼粉20g/L、干粉玉米浆5g/L、磷酸氢二钾2g/L、碳酸钙3g/L、消泡剂1g/L。
配制适量的种子培养基，120℃灭菌30min后冷却至24-26℃，按种子培养基体积比0.5～1％的接种量接入48h种龄的摇瓶种子，然后24-26℃培养48h。
将培养好的种子以2％比例转入12000L的120℃灭菌30min后冷却至24-26℃的发酵培养基中，该发酵培养基组成，质量(g)/体积(L)比为：果糖140、玉米蛋白粉10、干酪素6、酵母蛋白胨7、硫酸镁2、磷酸氢二钾0.5、碳酸钙3、消泡剂0.5，其余为水。
发酵过程中温度24-26℃，通气量1VVM，初始转速50rpm，过程中调控转速50～180rpm之间使溶氧不低于20％。
将果糖配制成500g/L水溶液120℃灭菌30min后待用,双氧水稀释为30％水溶液待用。发酵72h开始，将果糖和双氧水分别补加到发酵罐中，补加方式为连续不间断补加，144h停止补加，过程中控制补加量使总的补加质量(g)/发酵体积(L)比为果糖120、双氧水1.5。发酵周期为8天，测定FR901379放罐浓度为3.4g/L。
实施例3脱酰酶交联转化生产米卡芬净母核
在反应罐内配制磷酸盐缓冲液1000L，含磷酸二氢钾2.24g/L和磷酸氢二钠1.24g/L，用盐酸或氢氧化钠调节pH为6.0。
向磷酸缓冲液中加入20kg粗酶，2kg牛血清白蛋白(BSA)，通入空气，每分钟流量为200L，同时搅拌30分钟，搅拌速度为80rpm，8℃静置1小时。
向反应液中加入戊二醛20mmol/L，30℃搅拌2小时，搅拌速度为100rpm。
向反应液中加入20kg米卡芬净前体FR901379，，30℃搅拌反应6～24小时，搅拌的速度为100rpm，转化过程中HPLC监测转化体系中米卡芬净前体FR901379和米卡芬净母核浓度，当米卡芬净前体FR901379浓度不再减少，米卡芬净母核浓度不再增加时，结束转化。反应液过滤，取滤液HPLC定量检测米卡芬净母核含量，计算摩尔转化率为95.86％。
实施例4脱酰酶交联转化生产米卡芬净母核
在反应罐内配制磷酸盐缓冲液1000L，含磷酸二氢钾2.24g/L和磷酸氢二钠1.24g/L，用盐酸或氢氧化钠调节pH为6.0。
向磷酸缓冲液中加入20kg粗酶，2kg牛血清白蛋白(BSA)，通入空气，每分钟流量为100L，同时搅拌60分钟，搅拌速度为150rpm，8℃静置1小时。
向反应液中加入戊二醛20mmol/L，30℃搅拌2小时，搅拌速度为100rpm。
向反应液中加入20kg米卡芬净前体FR901379，，30℃搅拌反应6～24小时，搅拌的速度为100rpm，转化过程中HPLC监测转化体系中米卡芬净前体FR901379和米卡芬净母核浓度，当米卡芬净前体FR901379浓度不再减少，米卡芬净母核浓度不再增加时，结束转化。反应液过滤，取滤液HPLC定量检测米卡芬净母核含量，计算摩尔转化率为93.24％。
实施例5脱酰酶交联转化生产米卡芬净母核
在反应罐内配制磷酸盐缓冲液1000L，含磷酸二氢钾2.24g/L和磷酸氢二钠1.24g/L，用盐酸或氢氧化钠调节pH为6.0。
向磷酸缓冲液中加入20kg粗酶，2kg牛血清白蛋白(BSA)，通入空气，每分钟流量为300L，同时搅拌20分钟，搅拌速度为50rpm，8℃静置1小时。
向反应液中加入戊二醛20mmol/L，30℃搅拌2小时，搅拌速度为100rpm。
向反应液中加入20kg米卡芬净前体FR901379，30℃搅拌反应6～24小时，搅拌的速度为100rpm，转化过程中HPLC监测转化体系中米卡芬净前体FR901379和米卡芬净母核浓度，当米卡芬净前体FR901379浓度不再减少，米卡芬净母核浓度不再增加时，结束转化。反应液过滤，取滤液HPLC定量检测米卡芬净母核含量，计算摩尔转化率为90.48％。

Claims (9)

1.一种FR901379转化为FR179642的方法，该方法为FR901379和脱酰酶交联酶聚体反应，转化为FR179642。
2.如权利要求1所述的方法，脱酰酶交联酶聚体的制备方法为将脱酰酶粗酶与交联保护剂牛血清白蛋白、交联剂戊二醛反应，以形成脱酰酶交联酶聚体。
3.如权利要求2所述的方法，脱酰酶交联酶聚体的制备方法为将脱酰酶粗酶加入磷酸缓冲液后，再加入牛血清白蛋白作为交联保护剂，通入空气，搅拌后静置，再向上述反应液中加入交联剂戊二醛，搅拌，以形成脱酰酶交联酶聚体。
4.如权利要求3所述的方法，磷酸缓冲液含磷酸二氢钾2～2.5g/L，磷酸氢二钠1～1.5g/L，pH为5.5～6.5，粗酶的加入量为1～3％，牛血清白蛋白的加入量为1～3g/L，通入空气的每分钟流量相当于料液体积的10～30％，搅拌时间为20～60分钟，搅拌速度为50～150rpm，静置条件为温度4～15℃、时间0.5～2小时，戊二醛加入量为10～30mmol/L，加入戊二醛后的搅拌条件为温度28～32℃、时间1～3小时。
5.如权利要求4所述的方法，磷酸缓冲液含磷酸二氢钾2.24g/L，磷酸氢二钠1.24g/L，pH为6.0。
6.如权利要求4所述的方法，粗酶的加入量为2％。
7.如权利要求4所述的方法，牛血清白蛋白的加入量为2g/L。
8.如权利要求4所述的方法，戊二醛加入量为20mmol/L。
9.如权利要求1所述的方法，FR901379的加入量为5～20g/L。
CN201810536357.XA 2018-05-30 2018-05-30 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法 Withdrawn CN108441529A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810536357.XA CN108441529A (zh) 2018-05-30 2018-05-30 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810536357.XA CN108441529A (zh) 2018-05-30 2018-05-30 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108441529A true CN108441529A (zh) 2018-08-24

Family

ID=63205693

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810536357.XA Withdrawn CN108441529A (zh) 2018-05-30 2018-05-30 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108441529A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023037252A1 (en) * 2021-09-07 2023-03-16 Biocon Limited Preparation method of echinocandin nucleus
CN116496911A (zh) * 2023-04-23 2023-07-28 浙江昊清生物科技有限公司 一种米卡芬净中间体fr901379高产菌株及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105154424A (zh) * 2015-09-28 2015-12-16 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法及其应用
CN106047848A (zh) * 2016-07-15 2016-10-26 电子科技大学 一种交联卤醇脱卤酶聚集体的制备方法
CN106544382A (zh) * 2016-12-07 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种环己肽类化合物fr179642的制备方法
CN108085354A (zh) * 2016-11-21 2018-05-29 重庆乾泰生物医药有限公司 一种发酵生产fr901379的培养基及其方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105154424A (zh) * 2015-09-28 2015-12-16 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法及其应用
CN106047848A (zh) * 2016-07-15 2016-10-26 电子科技大学 一种交联卤醇脱卤酶聚集体的制备方法
CN108085354A (zh) * 2016-11-21 2018-05-29 重庆乾泰生物医药有限公司 一种发酵生产fr901379的培养基及其方法
CN106544382A (zh) * 2016-12-07 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种环己肽类化合物fr179642的制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LINQIU CAO 等: "Immobilised enzymes: carrier-bound or carrier-free?", 《CURR OPIN BIOTECHNOL》 *
SATOSHI UEDA 等: "Screening and characterization of microorganisms with FR901379 acylase activity", 《J ANTIBIOT (TOKYO)》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023037252A1 (en) * 2021-09-07 2023-03-16 Biocon Limited Preparation method of echinocandin nucleus
CN116496911A (zh) * 2023-04-23 2023-07-28 浙江昊清生物科技有限公司 一种米卡芬净中间体fr901379高产菌株及其应用
CN116496911B (zh) * 2023-04-23 2023-12-26 浙江昊清生物科技有限公司 一种米卡芬净中间体fr901379高产菌株及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101899410B (zh) 一种小链霉菌及其在达托霉素制备中的应用
CN103497911A (zh) 金黄杆菌及其羰基还原酶用于阿瑞匹坦手性中间体生产
CN108753880A (zh) 米卡芬净钠前体的新的制备方法
CN103087928B (zh) 真菌Glarea lozoyensis及其在调控微生物代谢物纽莫康定B0中的应用
CN104845896B (zh) 生产威兰胶的菌株及方法
CN101486976B (zh) 一种吸水链霉菌及其应用
CN108441529A (zh) 一种米卡芬净钠前体fr179642的发酵方法
CN107557407B (zh) 一种调控裂褶菌发酵产物裂褶多糖分子量的方法
CN106544382A (zh) 一种环己肽类化合物fr179642的制备方法
CN100497593C (zh) 一种低温淀粉酶菌株、低温淀粉酶及其生产方法
CN108823110B (zh) 一株产灰黄霉素的菌株及其应用
CN108841889B (zh) 利用微生物发酵生产松刚霉素主份——灰黄霉素的方法
CN102220244B (zh) 一种哈茨木霉菌株及其用该菌株制备右旋糖酐酶的方法
CN112852780B (zh) 黄柄曲霉及其在制备单宁酶和降解单宁中的应用
CN112063532B (zh) 林生地霉及其制备(s)-1-(2-三氟甲基苯基)乙醇的应用
CN108753881A (zh) Fr179642的制备方法
CN108410929B (zh) 阿尼芬净前体的制备方法
JP5818915B2 (ja) 環状リポペプチド化合物の製造方法
CN108467880A (zh) 米卡芬净钠前体的制备方法
CN105506041A (zh) 一种发酵生产去甲万古霉素的方法
CN113564057B (zh) 一株解毒抑菌生防菌及其应用
CN108441534A (zh) 一种米卡芬净钠前体的新的制备方法
CN108676831A (zh) 棘白菌素b母核的制备方法
CN112094762B (zh) 一株葡萄牙棒孢酵母菌株及其应用
CN112458022B (zh) 高产几丁质脱乙酰酶的地衣芽孢杆菌Bl22及其相关产品和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20180824

WW01 Invention patent application withdrawn after publication