CN108431600A - 用于确定细胞悬液的方法和系统 - Google Patents

用于确定细胞悬液的方法和系统 Download PDF

Info

Publication number
CN108431600A
CN108431600A CN201680075832.7A CN201680075832A CN108431600A CN 108431600 A CN108431600 A CN 108431600A CN 201680075832 A CN201680075832 A CN 201680075832A CN 108431600 A CN108431600 A CN 108431600A
Authority
CN
China
Prior art keywords
chamber
height
concentration
sample volume
chamber height
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201680075832.7A
Other languages
English (en)
Inventor
N·A·拉森
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Koninklijke Philips NV
Original Assignee
Koninklijke Philips Electronics NV
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Koninklijke Philips Electronics NV filed Critical Koninklijke Philips Electronics NV
Publication of CN108431600A publication Critical patent/CN108431600A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721—Haemoglobin
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502707—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by the manufacture of the container or its components
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03—Cuvette constructions
    • G01N21/0303—Optical path conditioning in cuvettes, e.g. windows; adapted optical elements or systems; path modifying or adjustment
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483—Physical analysis of biological material
    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/49—Blood
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
    • B01L2200/14—Process control and prevention of errors
    • B01L2200/148—Specific details about calibrations
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0816—Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0403—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces
    • B01L2400/0406—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific forces capillary forces
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03—Cuvette constructions
    • G01N2021/0378—Shapes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03—Cuvette constructions
    • G01N2021/0389—Windows
    • G01N2021/0392—Nonplanar windows
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
    • G01N2201/06—Illumination; Optics
    • G01N2201/066—Modifiable path; multiple paths in one sample

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
  • Optical Measuring Cells (AREA)

Abstract

本发明涉及一种确定细胞悬液中的物质的浓度的方法，所述方法包括以下步骤：通过以下操作来确定所述物质的浓度：使用在包括细胞悬液的腔室布置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积处执行的吸收测量的结果以及基于各自的吸收测量而确定的各自局部样本体积中的局部物质浓度；使用包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型，并且使用所述物质浓度模型和所确定的局部物质浓度来确定作为无限腔室高度物质浓度的物质浓度，其中，n至少为2，诸如至少为3，诸如至少为4，其中，任选地，所述细胞悬液是全血并且所述物质是Hb，并且其中，所述方法还包括基于所确定的Hb浓度和所确定的平均红细胞血红蛋白(MCH)来确定cRBC。本发明还涉及一种用于执行所述方法的系统。

Description

用于确定细胞悬液的方法和系统
技术领域
本发明总体涉及确定细胞悬液中的物质的浓度，并且特别用于确定全血样本中的血红蛋白浓度(cHb)。本发明还包括用于确定细胞悬液中的细胞浓度、特别是用于确定全血样本中的血红蛋白浓度(cHb)的系统。
背景技术
诸如血液分析法的细胞分析法是诊断领域内的标准工具，并且存在对于用户可用的许多不同的方法和系统。
在各种医学领域中，对生物学样本中的细胞浓度的准确测量是重要的。例如，血液中的血红蛋白(Hb)的浓度或者精液中的精子细胞或白细胞的浓度被用作诊断指示器。
确定细胞浓度或者细胞悬液中的物质的浓度的一种常常使用的方法是包括例如使用流式细胞计对细胞的计数的方法。通过获知流速，可以计算浓度。
许多常规的血液分析方法需要对诸如红细胞或白细胞的各血液部分的分离、昂贵的试剂的稀释和/或添加。
已经发现光学分析方法非常有利，因为这样的方法常常是相对快速的。然而，仍然有许多分析方法需要耗时的样本制备，例如涂片制备。
US 2011151502描述了一种对全血的样本中的血细胞进行计数的方法，其包括：(a)提供全血的样本；(b)将全血样本沉积在载玻片上；(c)采用涂布器创建血液涂片；(d)允许血液涂片在载玻片上干燥；(e)测量可归因于载玻片上的血液涂片中的红细胞中的血红蛋白的光的吸收或反射；(f)记录通过步骤(e)中的测量识别出的具有用于分析的适合厚度的分析区域的放大的二维数字图像；并且(g)从所述放大的二维数字图像收集数据、、对所述数据进行分析和存储。
还已经提出了直接对全血样本的血液分析。US 2015029492描述了一种用于确定血液样本中的总血红蛋白浓度的方法，其包括：以两个波长对血液样本的分光光度分析，并且确定在第一波长处检测到的辐射与在第二波长处检测到的辐射之间的比值；并且基于所述比值来确定所述血液样本中的总血红蛋白的浓度。所述样本被暴露于多个波长下的光。进行吸收率、透射率和反射率的测量，并且在两个波长处的测量结果的比值指示总血红蛋白的量。
然而，由于散射效应以及因为所检测到的样本的厚度层未明确限定，反射率测量趋向于导致高的不确定性。
使用吸收率或透射率的光学检测带来了另一问题。为了使可被贯穿全血层的血红蛋白吸收的波长具有足够的透射率，所述层必须非常薄，或者需要对样本的稀释。
然而，使用薄的层需要简单的操纵，所述操纵能够通过使用微流体设备来实现。流入到微流体设备中的薄流体层将由于Segré–Silberberg效应而导致颗粒浓度相对于原始流体样本发生变化。Segré–Silberberg效应导致在试管内的层流内流动的颗粒的浓度由于该流内的层流速度分布的抛物线属性而在与壁相距某一小的距离处积聚，这产生了剪切力诱发的惯性提升力，从而将颗粒向通道壁驱动。随着颗粒迁移更靠近于通道壁，所述颗粒周围的流诱发颗粒与壁之间的压力增大，这将阻止颗粒靠得更近。由于更靠近于壁的流比更远离壁的流更慢，因而填充到具有小的高度的流动池的腔室内的液体中的颗粒的浓度与被填充到所述流动池(flow cell)内之前的液体的原始颗粒浓度相比将下降。因此，确定低厚度(例如，30μm或更低)血液层中的Hb浓度将不得到针对所述血液样本的正确的结果。
在WO 2006031095中公开了一种避免这种Segré–Silberberg效应的方法。在此，具有相对低高度的特殊腔室被提供有层流扰动器，以确保能够在不触发Segré-Silberberg效应的情况下填充所述腔室。
WO 2010071430描述了已经被设计为避免由Segré-Silberberg效应造成的任何浓度变化的另一种微流体设备。这种微流体设备包括基底元件、具有相对于基底元件的开放条件和闭合条件的覆盖元件、具有明确限定和固定高度的流体室，所述流体室是当覆盖元件处在闭合条件下由所述基底元件和所述覆盖元件界定的。由此能够在不触发Segré-Silberberg效应的情况下填充所述腔室。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于确定细胞悬液中的物质的浓度的方法和系统，所述方法和系统是相对简单的，并且甚至可以在物质的浓度相对高而无需对细胞悬液的稀释的情况下使用。
本发明的另外的目的在于提供一种用于确定细胞悬液中的物质的浓度的方法和系统，所述方法和系统使用快速，并且可以获得非常准确的浓度确定。
在实施例中，本发明的目的在于提供一种用于确定全血样本中的血红蛋白浓度(cHb)的方法和系统，其中，所述确定是相对快速并且具有高准确度。
在实施例中，本发明的目的在于提供用于在不需要昂贵的添加剂或者对血液样本的稀释的情况下确定血红蛋白浓度(cHb)的方法和系统。
在实施例中，本发明的目的在于提供一种用于确定血红蛋白浓度(cHb)的方法和系统，所述方法和系统是非常有成本效益的，特别是相对于工作负荷而言。
已经通过权利要求中所定义的并且如下文在本文中所描述的本发明或者其实施例解决了这些以及其他目的。
已经发现，本发明或者其实施例具有许多额外的优点，本领域技术人员通过下文的描述将清楚这些优点。
应当强调，术语“包括/包含”以及“包括/内含”当被使用时在本文中应当被解释为开放性术语，即，应当将其理解为指定了(一个或多个)具体陈述的特征(诸如(一个或多个)元件、(一个或多个)单元、(一个或多个)整数、(一个或多个)步骤、(一个或多个)部件以及其组合)的存在，但是不排除一个或多个其他陈述的特征的存在或添加。
对“一个实施例”或“实施例”的引用意指在所公开的主题的至少一个实施例中包含了结合所述实施例而描述的特定特征、结构或特性。因而，在贯穿本说明书的各处出现的短语“在一个实施例中”或者“在实施例中”未必指代同一实施例。此外，本领域技术人员将理解，在由权利要求定义的本发明的范围内可以按照任何适当的方式对所述特定特征、结构或特性进行组合。
术语“基本上”在本文中应当被理解为意指包含普通的产品变异和容差。
得益于本发明，现在已经提供了非常简单并且快速的方法来确定细胞悬液中的物质的浓度。
所述方法包括：
通过以下操作来确定所述物质的所述浓度：
使用在包括细胞悬液的腔室装置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积处执行的吸收测量的结果以及基于各自的吸收测量而确定的各自局部样本体积中的局部物质浓度；
使用包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型，并且
使用所述物质浓度模型和所确定的局部物质浓度来将所述物质浓度确定为无限腔室高度物质浓度，其中，n至少为2，诸如至少为3，诸如至少为4。
所述方法的另一实施例包括：
使所述细胞悬液流入到所述腔室装置中，
对在所述腔室装置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积执行吸收测量。
基于各自的吸收测量来确定各自的局部样本体积中的局部物质浓度，
生成包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型，并且
使用所述物质浓度模型来确定物质浓度作为无限腔室高度物质浓度。
在不同平均高度处的局部样本体积的数量至少为2，但是有利地，所述数量更高，诸如至少为3或者优选至少为5。对于大部分确定而言，在不同平均腔室高度处包含的局部样本体积的数量n为2-10。
应当理解，所述腔室装置可以包括1个或多个腔室设备，诸如多达n个腔室设备。因此，所述腔室装置可以包括，但不限于：
多个腔室设备，每个腔室设备包括恒定高度的样本体积，但是其高度针对不同的腔室设备是不同的；
包括具有不同高度的多个局部样本体积的单腔室设备，其中，所述高度逐步地、连续地(例如，楔形样本体积)和/或逐步连续地(即，多个斜变区段，以斜变的角度体现每个区段)变化。
前述布置中的任何布置，但是还包括恒定高度、优选为使得所述局部样本体积包括仅存在研究中的单层颗粒类型的至少一个区域。例如，当研究红细胞时，这样的优选高度从大约2μm至大约3.5μm，诸如从大约2.5μm至大约3μm。
细胞可以是任何种类的细胞，诸如血液细胞、精子细胞、组织细胞以及细菌。细胞悬液有利地是全血。所述细胞悬液的物质可以是能够通过吸收测量光学地检测的任何种类的物质。在实施例中，利用能光学检测的标记对所述细胞中的至少一些细胞进行标记。在实施例中，要检测的物质是Hb。在实施例中，所述物质是细胞悬液中的细胞或者是细胞悬液中的某种类型的细胞。
在下文中，将主要参考对血液中的血红蛋白Hb的确定来描述本发明。应当理解，其仅仅是优选的范例，并且所述方法和系统能以类似的方式适用于确定其他悬液中的其他物质，其方式是等同或者对应的。
在实施例中，提供了一种非常简单并且快速的方法来确定全血样本中的血红蛋白(Hb)浓度(cHb)。确定全血中的Hb浓度的所述方法优选包括：
提供包括用于保持局部体积的n个不同腔室高度的腔室装置，其中，所述腔室装置在所述腔室高度处针对至少一个预选定波长的光至少部分光学透明，
使所述血液样本流入到所述腔室装置中，以在不同腔室高度处提供局部样本体积，
使用发射至少包括所述预选定波长的光的光源对在不同腔室高度处包含的局部样本体积执行吸收测量，
确定各自局部样本体积中的局部Hb浓度，
生成包括作为腔室高度的函数的局部Hb浓度的Hb浓度模型，并且
使用所述Hb浓度模型确定无限高度Hb浓度的Hb浓度。
在不同腔室高度上的局部样本体积的数量n越大，一般获得的可达特定水平的准确性越高，但是在实践中已经表明，当对全血执行Hb测量时，在不同腔室高度上的3个局部样本体积将足以用于大部分目的。
在不同腔室高度上的局部样本体积的数量为2的情况下，在不同腔室高度处的局部样本体积中的至少一个局部样本体积的高度应当优选是高于20μm、诸如高于30μm的高度处的局部体积，以确保与局部样本体积的内壁相接触的血液的量不过高，使得由于Segré-Silberberg效应引起的截面内流入血液的速度差异的综合影响不太大。其中，数量n大于2，但这不是必须的。
有利地，n至少为2，诸如至少为4，诸如为2-10。
术语“局部体积”和“局部样本体积”能互换地使用，除非另作指定。在某一腔室高度处包含的局部体积指定了执行该局部样本体积的吸收测量所针对的体积。
术语“高度”应当被解读为，在高度均匀时意指实际高度，患者在高度不均匀时意指平均高度。在高度均匀时，术语“平均高度”等同于实际高度，除非另作指定。
包含在腔室装置中的局部体积处的腔室高度可以是某一高度区段或者是某一高度区段的部分。
短语“在腔室装置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积”意指针对n个局部体积的每个局部体积的腔室装置的平均高度彼此不同。针对增大的吸收测量误差，所述方法可以包括例如通过双重或三重吸收测量来执行相同平均高度处的若干个局部体积。在所述方法包括执行相同平均高度处的若干个局部体积的情况下，对应于该高度(平均高度)的局部物质浓度的确定有利地以所确定的相同平均高度处的这些局部样本体积的平均吸收为基础。
所述腔室装置中包含的局部体积所处的腔室高度被确定为所述腔室装置的腔室的第一内表面与相对的第二内表面之间的平均最小高度。第一内表面(例如，顶部)和相对的第二内表面(例如，底部)均为较大表面。由于相对较低的高度——即优选低于大约40μm——连接第一内表面与相对的第二内表面的侧表面将非常窄，并且可以忽略由这些侧表面的Segré-Silberberg效应所造成的任何影响，因为靠近这些侧表面的局部样本体积的相对量是不显著的。
细胞可以是任何种类的细胞，诸如血液细胞、精子细胞、组织细胞以及细菌。细胞悬液有利地是全血。所述细胞悬液的物质可以是能够通过吸收测量光学地检测的任何种类的物质。在实施例中，以可光学能检测的标记对所述细胞中的至少一些细胞进行标记。在实施例中，要检测的物质是Hb。在实施例中，所述物质是细胞悬液中的细胞或者是细胞悬液中的某种类型的细胞。
在细胞悬液是全血的情况下，在所述方法中所使用的样本有利地是未稀释的全血样本。
全血被定义为静脉、动脉和毛细血液样本，在所述血液样本中，细胞成分以及细胞外的成分的浓度和性质当与其活体内状态相比时保持相对不变。
在实施例中，所述全血样本没有任何添加剂。
在实施例中，所述全血样本包括抗凝血剂。抗凝血剂是众所周知的，并且包括例如肝素、柠檬酸盐或EDTA。
所述腔室装置原则上可以具有任何形状，从而为局部样本体积提供各种平均高度。一般而言，期望所述腔室装置的形状被设定为使得不同腔室高度上的所有n个局部样本体积是从公共的入口填充的，使得来自被应用于所述腔室装置的同一血液样本的血液体积将以不同腔室高度处的局部样本体积来填充各种高度。有利地，所述腔室装置具有用于填充不同腔室高度处的局部样本体积的单个入口。在附图中示出了优选腔室装置的范例。所述腔室装置有利地具有一个或多个微流体设备的形式。
在实施例中，所述腔室装置是单腔室，并且所述细胞悬液被供应给所述腔室装置，从而将各局部样本体积以毛细效应方式加载至所述腔室高度。优选地，所述腔室高度是沿着所述腔室装置的公共流动路径以逐渐下降的高度来布置的，并且优选地，所述流动路径包括至少3个不同腔室高度，所述至少3个不同腔室高度彼此的差异至少为大约2.5μm。
在实施例中，在不同腔室高度处的不同局部样本体积是沿着所述腔室装置的公共流动路径优选以逐渐下降的高度来布置的。
逐渐下降的高度可以包括连续下降和/或向下游逐步下降。
术语“下游”意指从所述腔室装置的腔室的入口到排气口(流动路径)的方向。排气布置可以是通风孔或者类似布置，诸如在流动池的领域所已知的。
在实施例中，在不同腔室高度处的n个不同的局部样本体积中的两个或更多局部样本体积被布置在单独的流动腔室中、例如沿着所述腔室装置的相同流动路径来布置，所述流动路径诸如是具有针对血液样本的公共入口的各单的独流动路径和/或是并排布置的流动路径。所述单独的流动路径可以有利地按照并排构造来布置，以允许按照简单的方式对不同腔室高度处的若干个局部样本体积同时地执行图像采集。
在本文中应当将图像解释为光传感器的阵列，其中，每个光传感器由像素表示。有利地，所述图像具有N×M像素的分辨率，其是至少1000个像素，诸如至少10000个像素，或者甚至高达数兆的像素。
在实施例中，在不同腔室高度处的n个不同局部样本体积中的两个或多多局部样本体积是按照分支构造来布置的，例如，在朝向下游的方向上包括处在具有第一高度h1的腔室高度处的第一局部样本体积、从具有处在高度h1处的局部样本体积的第一流动路径作为分支引出的处在分别具有第二高度h2和第三高度h3的不同腔室高度处的第二局部样本体积和第三局部样本体积，其中，h1>h2>h3。
不同腔室高度处的局部样本体积可以具有相等或不同的局部体积尺寸。在实践中，处在具有较大高度的不同腔室高度处的局部样本体积将有利地包括比处在具有较低高度的不同腔室高度处的局部样本体积更大的局部体积尺寸。
一个或多个腔室包括针对局部样本体积的高度，每个腔室具有垂直于流动方向的截面形状，其原则上可以具有任何形状。有利地，垂直于当填充(一个或多个)腔室时的流动方向的截面形状是规则形状，其允许在不因导致不规律背景噪声(其可能难以解决)的不规则性引起不希望的模糊的情况下采集图像。
有利地，垂直于所述腔室装置的(一个或多个)腔室的流动方向的截面形状是圆化的、椭圆形的、方形的或者矩形的。优选地，垂直于所述腔室装置的(一个或多个)腔室的流动方向的截面形状基本是矩形，所述矩形具有显著大于高度的宽度，诸如其宽度/高度比为2或更大，诸如至少为大约5，诸如至少为大约10，诸如至少为大约500或者甚至更高。
所述腔室装置能够具有任何材料，所述材料对于预选定波长的光是至少部分光学透明的。应当指出，所述腔室装置可以在包含局部样本体积的位置以外的其他位置上包括不透明材料。
有利地，所述腔室装置具有光学级品质的材料，例如，所述材料选自玻璃或聚合物，诸如能够被用于例如通过注塑成型来生成高精确度单元的非晶热塑性聚合物和类似材料。
所述腔室装置具有由其内表面限定的一个或多个流动路径。所述流腔室装置的所述内表面可以具有任何表面张力，例如，源自于制造所述腔室装置的材料的表面张力。期望的是，限定处在不同腔室高度处的局部样本体积中的每个局部样本体积一个或多个表面张力(例如，不同腔室高度处的各自局部样本体积的顶壁部分内的一个表面张力以及底壁部分内的另一表面张力)与处在不同腔室高度处的逐个局部样本体积基本上是等同的。
可以使用张力计、诸如由Data Physics Instruments GmbH销售的SVT 20旋转滴视频张力计来测量表面张力。在本申请中，术语“表面张力”表示宏观表面能，即，其与根据相对于水的接触角度而测得的表面的亲水特性成正比。
有利地，所述腔室装置的内表面的至少部分是亲水性的。
一般希望选择处在不同腔室高度处的局部样本体积中的最大高度，使得预选定波长不被完全吸收。
已经发现根据在吸收测量中所应用的图像采集设备的聚焦深度来选择针对局部样本体积的腔室高度中的最大高度将是高度有利的。由此，可以获得高质量的吸收测量，而不需要所述腔室高度处的局部体积的不同深度处的若干幅图像。例如，所述图像采集设备可以是CCD相机或CMOS检测器。
在实施例中，所述腔室高度中的最大高度低于在吸收测量中所应用的图像采集设备的聚焦深度。为了确保局部体积的良好吸收测量，一般希望所述腔室高度中的最大高度大约为40μm或更低，诸如大约为30μm或者更低，诸如大约为25μm或更低，诸如大约为20μm或更低。
在实施例中，所述腔室装置至少包括针对局部样本体积的3个不同腔室高度，各自腔室高度处在从大约2μm至大约25μm的区间内。优选腔室高度处在从大约2.5μm至大约20μm的区间内。
为了确保高准确性，希望包含局部样本体积的两个或更多个、并且优选至少3个腔室高度具有显著的高度差异。有利地，所述腔室装置包括包含局部样本体积的至少3个不同腔室高度，所述腔室高度彼此之间的高度差异至少为大约2.5μm，诸如至少为大约3μm。
有利地，将血液样本供应给所述腔室装置，以使其通过毛细力经由入口填充不同腔室高度处的局部样本体积。备选地，可以例如通过在腔室装置的流动路径的下游端部采用吸力或者通过注入血液样本而通过强迫流动使血液样本填充所述腔室装置，以填充不同腔室高度处的局部样本体积。为了使操纵简单，优选采取毛细效应方式填充。
有利地，所述血液样本，并且特别是血液样本的局部体积在吸收测量的执行期间保持静止。
在实施例中，所述腔室装置对于至少一个预选定波长的光是至少部分光学透明的，以至少部分地允许预选定波长的光束通过所述腔室高度处的腔室装置。优选地，在各自腔室高度处包含的局部样本体积的吸收测量包括使用发射至少包括所述预选定波长的光的光源。
朝向局部样本体积而发射的光的光轴可以基本上垂直于所述腔室装置的上表面。在实施例中，朝向局部样本体积而发射的光的光轴具有相对于所述腔室装置的上表面的一角度，所述角度高达临界角(光受到反射的角度)，诸如高达大约60度，诸如高达大约30度，优选小于大约20度。
有利地，优选波长包括处在物质(诸如Hb)的等吸收点处的波长。优选地，预选定波长包括以下波长中的至少一个：大约420nm、大约530nm以及大约570nm。通过使用包括处在Hb的等吸收点处的波长的预选定波长，确保了Hb的吸收测量与氧饱和度：Hb的状态(氧合血红蛋白和去氧血红蛋白)无关。
使用至少所述预选定波长作为光源来执行对腔室装置中包含的处在不同高度处的局部样本体积的吸收测量。
在实施例中，所述方法包括使用发射包括一定范围的波长(包括所述预选定波长)的光的光源对不同腔室高度处的各自局部样本体积中所包含的局部样本体积执行吸收测量，所述一定范围的波长诸如是包括至少大约5nm、诸如至少大约10nm、诸如至少大约25nm、诸如高达大约200nm的波长范围。
在实施例中，所述方法包括在针对所述测量中的每个测量使用不同波长或者不同波长范围的情况下对处在不同腔室高度处包含的每个局部样本体积执行两次或更多吸收测量。由此，Hb浓度确定可以更加准确，并且/或者可以同时地确定氧合/去氧合Hb的分数。
在实施例中，所述吸收测量中的每个测量包括使用光源从腔室装置的第一侧照射处在所述腔室高度处的细胞悬液的局部样本体积，并且通过在腔室装置的相对的第二侧采集至少一幅图像来记录所透射的光，其中，任选地，同时对所述腔室高度中的两个或更多腔室高度处的局部样本体积执行所述吸收测量。
可以对处在不同腔室高度处的各自局部样本体积逐一地执行吸收测量。任选地，对具有等同高度的处在不同腔室高度处的两个或更多局部样本体积执行吸收测量以改善结果。为了实现快速测量，同时地执行吸收测量中的两个或更多吸收测量可以是有利的。所述光源可以有利地在基本上垂直于高度(或者在整个高度区段内高度不等同的情况下的最短高度)方向的方向上发射光。在变型中，所述光源在不垂直于高度(或者在整个高度区段内高度不等同的情况下的最短高度)方向的方向上发射光，但是例如，发射光的方向与高度的方向具有高达大约30度的角。在后一实施例中，所述高度区段的局部样本体积是受到所述光照射的体积。
在实施例中，各自局部样本体积的每个局部样本体积中的局部Hb浓度的确定包括对所采集的研究中的不同腔室高度处的局部样本体积的一幅或多幅图像进行图像处理，以相对于背景强度对其进行归一化。因此，将无RBC的面积映射至单位一(unity)，同时将各RBC映射至小于单位一的归一化的强度。对背景照度分布的这样的归一化可以通过公知的方法来实现。
在实施例中，所述图像处理包括通过应用背景归一化并且使所采集的不同腔室高度处的局部样本体积的图像的总归一化光强与在研究中的高度(z)处的局部Hb浓度(即，与红细胞相结合的部分)相关联来移除由自由等离子体Hb生成的干扰。
在实施例中，所采集的图像被转换为Hb浓度图，并且使能对无RBC区域的量化，以使之理想地处在零级上，而填充有RBC的区域则是非零的并且源自于与血细胞结合的Hb。
干扰的移除可以有利地包括例如通过确定干扰光强Iref或者通过计算和/或校准而对背景强度进行补偿；
其中，ij指示图像Θ的像素位置(i，j)，Iij是像素ij的测得的光强，是像素ij的参考(背景光照)强度，γ是通过校准计算或确定的常数，z是包含研究中的局部样本体积的腔室高度，并且LV(z)是具有高度z的腔室高度处的局部体积，所述高度z是在域Θ上定义的。
可以通过在若干曲线图的基础上使用曲线拟合软件来执行包括作为腔室高度的函数的局部Hb浓度的Hb浓度模型的生成。
在实施例中，所述Hb浓度模型的生成包括对作为高度z的函数(cHb(z))的局部Hb浓度(LcHb)进行绘图，并且计算针对所述cHb(z)绘图的最佳拟合曲线，并且将所述最佳拟合曲线外推至针对z→∞的高度以及所述Hb浓度。可以计算所述最佳拟合曲线或者可以使用诸如如最小二乘法的标准曲线拟合技术来确定所述最佳拟合曲线。
在实施例中，所述方法还包括确定平均红细胞血红蛋白量(MCH)。已经发现，本发明的方法非常适合于确定MCH。用于确定MCH的方法包括对处在大约5μm或更低的低腔室高度处的局部样本体积执行至少一次吸收测量，并且根据处在低腔室高度处的局部样本体积的吸收测量来确定MCH。
低腔室高度处的局部样本体积可以是被用于Hb确定的不同腔室高度处的局部样本体积之一，或者其可以是处在所述腔室装置的不同的低腔室高度处的额外的局部样本体积。
为了确保高质量的MCH确定，希望所述低腔室高度足够低，以确保红细胞中的至少一些是非重叠的红细胞。优选地，不同腔室高度处的低局部样本体积具有从大约2μm至大约3.5μm、诸如从大约2.5μm至大约3μm的高度。
在实施例中，低腔室高度处的局部样本体积的吸收测量包括采集至少一幅图像，并且识别多个个体红细胞的图像区域，并且确定所识别的区域的吸收率，并且使所确定的吸收率与MCH相关联。优选地，所述方法包括对所述多个个体红细胞的数量进行计数，确定血细胞的平均吸收率，并且使血细胞的平均吸收率与MCH相关联。
可以按照与针对cHb的确定所描述的类似的方案来确定单红细胞的Hb质量mHb；
其中，Ω是形成图像中的红细胞的像素位置的集合。因而，平均红细胞血红蛋白量(MCH)是红细胞的代表性全体的mHb的平均值。
根据抽取血液样本的患者的状况，血红蛋白的红细胞浓度可能在逐细胞之间或多或少地改变。为了确保高质量的MCH确定，希望在所述确定中使用相对大数量的血细胞的吸收。有利地，所述多个个体红细胞至少包括大约1000个细胞，诸如至少大约2000个细胞，诸如至少大约4000个细胞，诸如至少大约4200个细胞，诸如至少大约4400个细胞。
同样地，至少处在所述低腔室高度处的局部样本体积具有垂直于所述高度的2D扩展范围也是有利的，所述2D扩展范围至少大约为0.1mm2，诸如至少大约为0.2mm2，诸如至少大约为0.4mm2，诸如至少大约为0.3mm2。
所述多个个体红细胞被有利地识别为非重叠的红细胞。
在实施例中，所述方法还包括确定血液样本中的红细胞浓度cRBC，所述方法包括使所确定的Hb浓度与MCH相关联，由此确定cRBC。
使所确定的Hb浓度与MCH相关联以确定cRBC可以如下简单地执行：
有利地，所述方法还包括确定红细胞比容值(Hct)，所述方法包括根据Hb浓度经验地导出导出Hct值，例如，
已经发现所述方法还适合于确定可以被发现作为导出的参数值的许多其他血液参数。优选的血液参数包括以下中的一项或多项：
平均红细胞体积(MCV)，
红细胞血红蛋白质量(mHb)分布，
红细胞体积分布(RDW-SD)，或者
RBC细胞体积(RDW-SD)的变化系数。
可以如下地确定MCV：
其中，MCHC是在假定上文所描述的经验关系式的情况下变为常数的平均红细胞血红蛋白浓度。
RDW-SD可以如下地确定：
RDW-SD可以如下地确定：
RDW-SD＝RBC细胞Hb质量的变化系数
本发明还包括一种用于确定全血样本、例如上文所描述的全血样本中的血红蛋白(Hb)浓度(cHb)的系统。
用于确定细胞悬液中的物质的浓度的所述系统包括被编程为使所述系统执行所述方法的计算机系统。
在实施例中，用于确定细胞悬液中的物质的浓度的所述系统包括被编程用于生成包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型并且使用所述物质浓度模型将所述物质浓度确定为无限高度物质浓度的计算机系统。
所述系统优选被配置为执行如上文所描述的本发明的方法以及其实施例。
在实施例中，所述系统包括：
包括n个不同腔室高度的腔室装置，其被配置用于通过流动而加载所述细胞悬液，所述腔室装置对于至少一个预选定波长是至少部分光学透明的，以至少部分地允许所述预选定波长的光束在所述腔室高度处穿过所述腔室装置，
光源，其被配置用于发射至少包括所述预选定波长的光，并且被布置为照射处在所述n个样本高度中的一个样本高度处的至少一个局部样本体积，
图像采集设备，其被配置用于采集通过所述局部样本体积的光的图像。
有利地，所述计算机系统还被编程用于对由所述图像采集设备获得的处在n个不同高度处的局部样本体积的图像进行处理，以确定各自局部样本体积的每个局部样本体积中的局部物质浓度。整数“n”有利地如上文针对所述方法所描述的。
在所述系统适合于确定全血样本中的血红蛋白(Hb)浓度(cHb)的实施例中，所述系统有利地包括：
包括针对局部样本体积的n个不同腔室高度的腔室装置，并且其中，所述腔室装置对于至少一个预选定波长至少部分光学透明，以至少部分地允许所述预选定波长的光束在不同腔室高度处的局部样本体积中穿过所述腔室装置，
光源，其被配置用于发射至少包括预选定波长的光并且被布置为照射样本区域，
图像采集设备，其被定位为并且被配置用于采集穿过所述样本区域的光，
样本保持器，其适于将所述腔室装置保持在所述样本区域中，以及
计算机系统。
所述计算机系统有利地被编程用于：
控制所述腔室装置、所述光源以及所述图像采集设备的相对位置；
控制所述光源和所述图像采集设备，以照射所述样本区域并且采集透射通过不同腔室高度处的各自局部样本体积的光的图像；
采集由所述图像采集设备获得的图像；并且
对所述图像进行处理，以确定血液样本的Hb浓度。
所述腔室装置有利地如上文所描述的。
所述光源有利地是能调谐的光源，使得波长或波长范围能由用户选择，或者所述计算机系统可以有利地被编程为选择波长或波长范围，以至少包含所选择的波长。
所述光源被配置用于发射至少所选择的波长的光，并且被布置为照射样本区域。有利地，所述计算机系统被编程为确保所述腔室装置通过样本保持器被固定到的样本区域受到充分照射，以执行吸收测量。
所述图像采集设备原则上可以是任何种类的图像采集设备，其优选具有高分辨率，诸如至少10000像素、诸如至少1兆像素的像素分辨率。所述图像采集设备优选具有至少大约为最大腔室高度的景深。
所述图像采集设备被定位为并且被配置用于采集穿过所述样本区域的光，并且优选被布置为同时地、逐一按顺序地、每两个按顺序地或者按照任何其他配置来采集各自腔室高度处的局部体积的聚焦图像。
所述计算机系统可以包括单个计算机或者以无线方式、有线方式和/或经由因特网进行数据连接的多个计算机。
所述计算机系统有利地包括含有计算机程序的存储介质，所述计算机程序包括当由所述计算机系统执行时使所述计算机系统执行以下操作的指令：
控制所述腔室装置、所述光源以及所述图像采集设备的相对位置；
通过控制对透射通过各自局部样本体积的光的图像的采集来执行对不同腔室高度处的局部样本体积的吸收测量；并且
对所述图像进行处理，以确定血液样本的Hb浓度。
有利地，对所述图像的所述处理包括：
确定各自局部样本体积内的局部Hb浓度，
生成包括作为腔室高度的函数的局部Hb浓度的Hb浓度模型，并且
使用所述Hb浓度模型将Hb浓度确定为无限高度Hb浓度。
对每幅图像进行处理以确定各自局部样本体积中的每个局部样本体积中的局部Hb浓度包括有利地优选通过确定和/或监测背景强度(Iref)而针对背景噪声对所述图像进行校正，例如，如上文的方法中所描述的。
在实施例中，所述系统被配置用于确定全血中的Hb浓度，所述腔室装置的所述腔室高度的至少一个腔室高度是大约5μm或更低的低腔室高度，并且所述计算机系统被编程用于通过采集所述低腔室高度处的局部血液体积的至少一幅图像而执行吸收测量，并且根据所述低腔室高度处的所述局部血液体积的所述吸收测量来确定MCH。
在实施例中，对所述低腔室高度处的局部血液体积的吸收测量包括识别多个个体红细胞的图像区域，并且确定所识别的区域的吸收率，并且使所确定的吸收率与MCH相关联，优选地，所述吸收测量包括对所述多个个体红细胞的数量进行计数，确定红细胞的平均吸收率，并且使红细胞的平均吸收率与MCH相关联。
确定MCH的所述方法如上文所描述的。
所述计算机被有利地编程为将多个个体红细胞识别为非重叠红细胞。
在实施例中，所述系统还被配置用于确定血液样本的红细胞浓度cRBC，所述计算机系统被编程为通过使所确定的Hb浓度与MCH相关联来确定血液样本的红细胞浓度CRBC，由此确定所述cRBC。
在实施例中，所述计算机系统还被编程为通过以下方法来确定红细胞比容值(Hct)，所述方法包括：例如使用上文所描述的方法根据Hb浓度经验地导出Hct值。
在实施例中，所述计算机系统还包括确定以下中的至少一项：
平均红细胞体积(MCV)，
红细胞血红蛋白质量(mHb)分布，
红细胞体积分布(RDW-SD)，或者
RBC细胞体积(RDW-SD)的变化系数。
所应用的方法可以如上文所描述的。
在本发明的范围内能够对包括范围和优选范围在内的本发明的所有特征进行各种组合，除非有具体的理由不对这样的特征进行组合。
附图说明
将参考附图进一步说明本发明的优选实施例。
图1是适合于在本发明的方法和系统中使用的具有高度在朝向下游的方向上持续下降的腔室流动路径的腔室装置的实施例的示意性侧视图。
图2是适合于在本发明的方法和系统中使用的具有高度在朝向下游的方向上逐步下降的腔室流动路径的腔室装置的实施例的示意性侧视图。
图3是适合于在本发明的方法和系统中使用的具有3个具有不同高度的单独流动路径的腔室装置的实施例的示意性顶视图。
图4是适合于在本发明的方法和系统中使用的具有腔室高度的分支配置的腔室装置的实施例的示意性顶视图。
图5是处在不同腔室高度处的各个局部样本体积按照圆形配置布置的腔室装置的实施例的示意性顶视图。
图6a是使用420nm背部照射的聚焦成像获得的浅腔室高度中的全血图像，其中RBC由于强的吸收而呈现为暗色物体。
图6b是根据图6a的图像计算出的Hb质量密度图。
图7顶部示出了使用420nm的背部照射获得的浅腔室(4.0μm)中的全血样本的图像。
图7中间示出了所述顶部图像的被映射为血红蛋白2D浓度的对应图像。
图7底部示出了RBC分割的范例。
图8示出了全血样本中的红细胞血红蛋白质量mHb的分布。针对该特定血样的平均红细胞血红蛋白量(MCH)为28.2pg。
图9是已经在朝向下游的方向上向其中填充了血液样本的腔室装置的截面侧视图。在腔室高度C1(大约20μm)中，铺设了若干层红细胞。在腔室高度C2(大约10μm)中，铺设了大约3-4层红细胞，而在腔室高度C3(大约3μm)中，基本仅铺了单层红细胞。
图10是示出了从高度为3μm、10μm和20μm的不同腔室测得的Hb浓度的曲线图。由于Segre-Silberberg效应，所述浓度比真实浓度低。真实值为120g/L，而拟合模型预测cHb(∞)＝120.7g/L。
附图仅是示意性的，而非按比例描绘的，并且其可能因清楚起见而被简化。通篇针对等同或对应的部分使用相同的附图标记。
具体实施方式
在图1中所示的腔室装置是一种非常简单的构造，其包括顶壁1和底壁2(在该图中未描绘任何侧壁)，其一起界定了流动池腔室3，流动池腔室3从入口4在朝下游的方向上具有不断下降的腔室高度，由此针对局部样本体积提供了原则上无限数量的不同腔室高度。在下游端部5处，所述腔室装置包括排气开口，所述排气开口气体(空气)随着利用血液样本填充流动池腔室3而逸出。所述排气开口被有利地配置为使得不允许血液通过所述排气开口，由此降低血液溢出的风险。所述腔室装置是一次性单元，并且被布置用于在单次使用之后被舍弃。
在图2所示的所述腔室装置包括顶壁和底壁，其连同未示出的侧壁一起界定的流动池腔室具有以不同腔室高度13a、13b、13c容纳局部样本体积的3个不同区段以及在原则上也可以用作针对局部样本体积的腔室高度但优选不这样使用的2个中间区段16。所述中间区段在朝向下游的方向上被确定为长或短，并且有利地在考虑以简单的方式制造具有高精确度的腔室高度的腔室装置的情况下选择中间区段16的长度。在从入口14朝向下游的方向上，腔室高度13a、13b、13c在高度上逐渐下降。在一种未示出的修改方案中，腔室装置具有4个、5个、6个或者甚至更多不同腔室高度，其被布置为具有朝向下游的方向的下降的高度。在下游端部15处，所述腔室装置包括排气开口，以允许气体(空气)随着局部样本体积以不同腔室高度13a、13b、13c填充所述腔室而逸出。
在图3中所示的腔室装置22包括具有被布置为彼此平行的3个腔室高度23a、23b、23c以及2个中间区段26的微流体腔室，所述2个中间区段26处在入口24与各自的腔室高度23a和23c之间，以将血液从入口24引导至这些区段23a、23c。中间区段26也可以用作用于包含局部样本体积的腔室高度，但是这一般不是优选的。所述中间区段在朝向下游的方向上被确定为长或短，并且有利地在考虑用于包含局部样本体积的不同腔室高度23a、23b、23c的情况下选择中间区段26的长度，所述各局部样本体积具有不同高度，但是从公共入口24填充的，或者能从公共入口24进行填充。在下游端部处，腔室高度23a、23b、23c中的每个具有排气开口25，以允许气体(空气)随着局部样本体积被填充到腔室高度23a、23b、23c内而逸出。
在图4中所示的腔室装置32包括的微流体腔室具有针对不同腔室高度处的局部样本体积的5个腔室高度33a、33b、33b'、33c、33c'。腔室高度33a、33b、33b'、33c、33c'被部分平行地布置，并且部分以下游配置来布置。能够看到，所有腔室高度33a、33b、33b'、33c、33c'具有公共入口34。腔室高度33a、33b、33b'、33c、33c'还具有未示出的一个或多个排气开口。腔室高度33a比相对于腔室高度33a处在下游的不同腔室高度33b和33b'中的每个的高度更高。紧挨着处在腔室高度33a的下游的腔室高度33b和33b'在高度上可以相等或者不同。腔室高度33b所具有的高度比相对于腔室高度33b处在下游的腔室高度33c和33c'中的每个的高度更高。紧挨着处在腔室高度33b的下游的腔室高度33c和33c'在高度上可以相等或者不同。
在图5中所示的腔室装置包括的微流体腔室原则上可以包含沿其环形扩展范围处在不同腔室高度处的任何数量的局部样本体积。所示的实施例被图示为具有处在不同腔室高度43a、44b、43b、43b'、43c、43c'处的6个局部样本体积，其按照环形配置来布置，并且具有公共入口44和公共排气开口45。不同腔室高度43a、43b、43c沿着从入口44到排气开口45的下游方向具有逐渐降低的高度，其中，例如，腔室高度43a具有大的高度，腔室高度43b具有中等高度，并且腔室高度43c具有浅的高度。腔室高度43a'、43b'、43c'按照同样的方式沿着从入口44到排气开口45的下游方向具有逐渐降低的高度。腔室高度43a、44b、43b、43b'、43c、43c'可以有利地具有成对相等的高度，以仅利用一种腔室装置来提供双重测试。
如在图8所示的，可以应用本发明的方法和系统以确定全血样本中的红细胞血红蛋白质量mHb的分布。其可以具有如所示的直方图的形式。例如，这样的直方图的结果可以用于诊断和/或用于跟踪患者从疾病等中恢复的情况。
本发明还涉及以下方面：
1、一种确定细胞悬液中的物质的浓度的方法，所述方法包括：
使所述细胞悬液流入到腔室装置中，
对所述腔室装置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积执行吸收测量，
基于各自的吸收测量来确定各自的局部样本体积中的局部物质浓度，
生成包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型，并且
使用所述物质浓度模型来将所述物质浓度确定为无限腔室高度物质浓度，
其中，n至少为2，诸如至少为3，诸如至少为4。
2、根据权利要求1所述的方法，其中，所述腔室装置是单腔室设备，并且所述细胞悬液被供应至所述腔室装置，从而将所述局部样本体积以毛细效应方式加载至所述腔室高度，所述腔室高度优选是沿着所述腔室装置的公共流动路径以逐渐降低的高度来布置的，并且优选包括至少3个不同腔室高度，所述至少3个不同腔室高度彼此的差异至少为大约2.5μm。
3、根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，所述腔室高度中的最大高度为大约40μm或更低，诸如大约30μm或更低，诸如大约25μm或更低，诸如大约20μm或更低。
4、根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述腔室装置对于至少一个预选定波长的光至少部分光学透明，以至少部分地允许所述预选定波长的光束在所述不同腔室高度处穿过所述腔室装置，对包含在所述各自腔室高度处的局部样本体积的所述吸收测量包括使用发射至少包括所述预选定波长的光的光源。
5、根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述吸收测量中的每次吸收测量包括使用所述光源从所述腔室装置的第一侧照射处在所述腔室高度处的所述细胞悬液的所述局部样本体积，并且通过在所述腔室装置的相对的第二侧上采集至少一幅图像来记录所透射的光，其中，任选同时对所述腔室高度中的两个或更多腔室高度处的局部样本体积执行所述吸收测量。
6、根据权利要求4或权利要求5所述的方法，其中，所述预选定波长包括处在所述物质的等吸收点处的波长，所述物质优选为Hb，并且所述等吸收点包括以下波长中的至少一个：大约420nm、大约530nm以及大约570nm。
7、根据权利要求6所述的方法，其中，对所述各自局部样本体积的每个局部样本体积中的局部物质浓度的所述确定包括对所采集的局部样本体积的图像进行图像处理，其中，所述物质是Hb，所述图像处理包括去除由自由等离子体Hb生成的干扰，并且将所采集的腔室高度区段的图像的总归一化的光强度与在研究中的所述高度(z)处的局部Hb浓度相关联。
8、根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，对所述物质浓度模型的所述确定包括对作为高度的函数Lc-物质(z)的局部样本体积的局部物质浓度(Lc-物质)绘图，并且计算针对所述绘图的最佳拟合曲线，并且将所述最佳拟合曲线外推至高度z→∞，并且将所述物质浓度确定为在高度Z＝∞处的物质浓度。
9、根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述细胞悬液是全血并且所述物质是Hb，所述方法还包括确定平均红细胞血红蛋白量(MCH)，所述方法包括在大约5μm或更低的低腔室高度处执行至少一次吸收测量并且根据所述低腔室高度处的所述吸收测量来确定所述MCH，其中，所述低腔室高度从大约2μm至大约3.5μm，诸如从大约2.5μm至大约3μm。
10、根据权利要求9所述的方法，其中，在所述低腔室高度处的所述吸收测量包括采集至少一幅图像，并且识别多个个体红细胞的图像区域，并且确定所识别的区域的吸收率，并且使所确定的吸收率与所述MCH相关联，所述方法优选包括对所述多个个体红细胞的数量进行计数，确定血细胞的平均吸收率，并且将血细胞的所述平均吸收率与所述MCH相关联，所述多个个体红细胞优选被识别为非重叠的红细胞。
11、根据权利要求9或权利要求10所述的方法，其中，所述方法还包括确定所述血液样本的红细胞浓度cRBC，所述方法包括将所确定的Hb浓度与MCH相关联，由此确定cRBC。
12、一种用于确定细胞悬液中的物质的浓度的系统，所述系统包括被编程用于生成包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型并且使用所述物质浓度模型将所述物质浓度确定为无限高度物质浓度的计算机系统。
13、根据权利要求12所述的系统，其中，所述系统包括：
包括n个不同腔室高度的腔室装置，其被配置用于通过流动而加载所述细胞悬液，并且所述腔室装置针对至少一个预选定波长是至少部分光学透明的，以至少部分地允许所述预选定波长上的光束在所述腔室高度处穿过所述腔室装置，
光源，其被配置用于发射至少包括所述预选定波长的光，并且被布置为照射处在所述n个样本高度中的一个样本高度处的至少一个局部样本体积，
图像采集设备，其被配置用于采集穿过所述局部样本体积的光的图像，
其中，所述计算机系统还被编程用于对由所述图像采集设备获得的处在n个不同高度处的局部样本体积的图像进行处理，以确定所述各自局部样本体积的每个局部样本体积中的局部物质浓度。
14、根据权利要求13所述的系统，其中，所述最大腔室高度小于所述图像采集设备的聚焦深度，并且其中，所述计算机系统被编程为：
控制所述腔室装置、所述光源以及所述图像采集设备的相对位置，以控制使得所述聚焦深度包括处在所述各自的腔室高度处的局部样本体积，以采集所述各自的图像；
控制所述光源和所述图像采集设备以照射所述局部样本体积并且采集透射通过所述腔室高度处的所述局部样本体积的光的图像；
接收由所述图像采集设备获得的图像；并且
对所述图像进行处理以确定所述细胞悬液的物质浓度。
15、根据权利要求13或权利要求14所述的系统，其中，所述系统被配置用于确定全血中的所述Hb浓度，所述腔室装置的所述腔室高度中的至少一个腔室高度是大约5μm或更低的低腔室高度，并且所述计算机系统被编程用于通过采集所述低腔室高度处的局部血液体积的至少一幅图像来执行吸收测量，并且根据所述低腔室高度处的所述局部血液体积的所述吸收测量来确定所述MCH。
16、根据权利要求15所述的系统，其中，对处在所述低腔室高度处的所述局部血液体积的所述吸收测量包括识别多个个体红细胞的图像区域，并且确定所述的所识别的区域的吸收率，并且使所确定的吸收率与所述MCH相关联，所述吸收测量优选包括对所述多个个体红细胞的数量进行计数，确定血细胞的平均吸收率，并且使血细胞的所述平均吸收率与所述MCH相关联。
17、根据前述权利要求中的任一项所述的系统，其中，所述系统还被配置用于确定所述血液样本的红细胞浓度cRBC，所述计算机系统被编程为通过使所确定的Hb浓度与所述MCH相关联来确定所述红细胞浓度cRBC，由此确定所述cRBC。

Claims (15)

1.一种确定细胞悬液中的物质的浓度的方法，所述方法包括以下步骤：
使用在包括所述细胞悬液的腔室装置的不同平均腔室高度处包含的n个局部样本体积处执行的吸收测量的结果以及基于各自的所述吸收测量而确定的各自的所述局部样本体积中的局部物质浓度；
使用包括作为腔室高度的函数的局部物质浓度的物质浓度模型；并且
使用所述物质浓度模型和所确定的局部物质浓度来将所述物质浓度确定为无限腔室高度物质浓度，其中，n至少为2，诸如至少为3，诸如至少为4。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞悬液是全血，并且所述物质是Hb，并且其中，所述方法还包括基于所确定的Hb浓度和确定的平均红细胞血红蛋白量(MCH)来确定cRBC，所述确定的MCH已经通过在大约5μm或更低的低腔室高度处执行至少一次吸收测量并且根据在所述低腔室高度处的所述吸收测量确定所述MCH而确定，其中，所述低腔室高度为从大约2μm至大约3.5μm，诸如从大约2.5μm至大约3μm。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，所述腔室装置是单腔室设备，并且所述细胞悬液被供应至所述腔室装置，从而将所述局部样本体积以毛细效应方式加载至所述腔室高度，所述腔室高度优选是沿着所述腔室装置的公共流动路径以逐渐降低的高度来布置的，并且优选包括至少3个不同腔室高度，所述至少3个不同腔室高度彼此的差异至少为大约2.5μm。
4.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述腔室高度中的最大高度为大约40μm或更低，诸如大约30μm或更低，诸如大约25μm或更低，诸如大约20μm或更低。
5.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述吸收测量中的每次吸收测量包括使用光源从所述腔室装置的第一侧照射在所述腔室高度处的所述细胞悬液的所述局部样本体积，并且通过在所述腔室装置的相对的第二侧上采集至少一幅图像来记录透射的光，其中，任选同时对在所述腔室高度中的两个或更多腔室高度处的局部样本体积执行所述吸收测量。
6.根据权利要求4或权利要求5所述的方法，其中，预选定波长包括在所述物质的等吸收点处的波长，所述物质优选为Hb，并且所述等吸收点包括以下波长中的至少一个：大约420nm、大约530nm以及大约570m。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，对各自的所述局部样本体积的每个局部样本体积中的所述局部物质浓度的所述确定包括对所采集的所述局部样本体积的图像进行图像处理，其中，所述物质是Hb，所述图像处理包括去除由自由等离子体Hb生成的干扰，并且将所采集的腔室高度区段的图像的总归一化光强度与在研究中的高度(z)处的局部Hb浓度相关联。
8.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，对所述物质浓度模型的所述确定包括：对作为所述高度的函数Lc-物质(z)的所述局部样本体积的所述局部物质浓度(Lc-物质)进行绘图，并且计算针对所述绘图的最佳拟合曲线，并且将所述最佳拟合曲线外推至高度z→∞，并且将所述物质浓度确定为在所述高度Z＝∞处的物质浓度。
9.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述细胞悬液是全血并且所述物质是Hb，所述方法还包括确定所述平均红细胞血红蛋白量(MCH)，所述方法包括在大约5μm或更低的低腔室高度处执行至少一次吸收测量，并且根据在所述低腔室高度处的所述吸收测量来确定所述MCH，其中，所述低腔室高度为从大约2μm至大约3.5μm，诸如从大约2.5μm至大约3μm。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，在所述低腔室高度处的所述吸收测量包括采集至少一幅图像，并且识别多个个体红细胞的图像区域，并且确定所识别的所述区域的吸收率，并且将所确定的吸收率与所述MCH相关联，所述方法优选包括对所述多个个体红细胞的数量进行计数，确定血细胞的平均吸收率，并且将血细胞的所述平均吸收率与所述MCH相关联，所述多个个体红细胞优选被识别为非重叠的红细胞。
11.根据前述权利要求中的任一项所述的方法，其中，所述方法还包括以下步骤中的至少一项：
使所述细胞悬液流入到所述腔室装置中，
对在所述腔室装置的不同平均腔室高度处包含的所述n个局部样本体积执行吸收测量。
12.一种用于确定细胞悬液中的物质的浓度的系统，所述系统包括被编程用于使所述系统执行根据权利要求1-11所述的方法的计算机系统。
13.根据权利要求12所述的系统，其中，所述系统还包括：
包括n个不同腔室高度的腔室装置，其被配置用于通过流动而加载所述细胞悬液，并且针对至少一个预选定波长是至少部分光学透明的，以至少部分地允许所述预选定波长的光束在所述腔室高度处穿过所述腔室装置，
光源，其被配置用于发射至少包括所述预选定波长的光，并且被布置为照射在所述n个样本高度中的一个样本高度处的至少一个局部样本体积，
图像采集设备，其被配置用于采集穿过所述局部样本体积的光的图像，
其中，所述计算机系统还被编程用于对由所述图像采集设备获得的在n个不同高度处的局部样本体积的图像进行处理，以确定各自的所述局部样本体积的每个局部样本体积中的所述局部物质浓度，
其中，n至少为2，诸如至少为3，诸如至少为4，诸如为2-10。
14.根据权利要求13所述的系统，其中，所述最大腔室高度小于所述图像采集设备的聚焦深度，并且其中，所述计算机系统被编程为：
控制所述腔室装置、所述光源以及所述图像采集设备的相对位置，以控制使得所述聚焦深度包括在各自的所述腔室高度处的局部样本体积，以采集各自的所述图像；
控制所述光源和所述图像采集设备，以照射所述局部样本体积并且采集透射通过各自的所述腔室高度处的所述局部样本体积的光的图像；
接收由所述图像采集设备获得的图像；并且
对所述图像进行处理，以确定所述细胞悬液的所述物质浓度。
15.根据权利要求13或权利要求14所述的系统，其中，所述系统被配置用于确定全血中的所述Hb浓度，所述腔室装置的所述腔室高度中的至少一个腔室高度是大约5μm或更低的低腔室高度，并且所述计算机系统被编程用于通过采集所述低腔室高度处的局部血液体积的至少一幅图像来执行吸收测量，并且用于根据所述低腔室高度处的所述局部血液体积的所述吸收测量来确定所述MCH。
CN201680075832.7A 2015-12-24 2016-12-22 用于确定细胞悬液的方法和系统 Pending CN108431600A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15202725.6 2015-12-24
EP15202725 2015-12-24
PCT/EP2016/082372 WO2017109068A1 (en) 2015-12-24 2016-12-22 A method and a system for determinations of cell suspensions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108431600A true CN108431600A (zh) 2018-08-21

Family

ID=55129454

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680075832.7A Pending CN108431600A (zh) 2015-12-24 2016-12-22 用于确定细胞悬液的方法和系统

Country Status (6)

Country Link
US (1) US10782306B2 (zh)
EP (1) EP3394616B1 (zh)
JP (1) JP6518016B2 (zh)
CN (1) CN108431600A (zh)
TR (1) TR201909510T4 (zh)
WO (1) WO2017109068A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113899659A (zh) * 2020-06-22 2022-01-07 苏州中加康美科技有限公司 一种载玻片及血细胞分析仪

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11389799B2 (en) * 2019-01-17 2022-07-19 The Regents Of The University Of Michigan Microfluidic device for size and deformability measurements and applications thereof

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1610827A (zh) * 2001-12-28 2005-04-27 海莫库公司 定量测定未稀释未溶血全血中血红蛋白的方法
JP2007040814A (ja) * 2005-08-03 2007-02-15 Matsushita Electric Ind Co Ltd 吸光度測定用センサ及び吸光度測定方法
CN101312685A (zh) * 2005-11-23 2008-11-26 皇家飞利浦电子股份有限公司 用于对混浊介质的内部成像的设备
CN102215965A (zh) * 2008-11-13 2011-10-12 布勒医药股份公司 一次性盒子和在血液分析器上用于血液分析的使用方法
CN102216954A (zh) * 2008-01-18 2011-10-12 海默库伊公司 用于分析液体样本中的微粒的方法和装置
US20140334712A1 (en) * 2013-05-09 2014-11-13 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for determining hemoglobin based parameters in an unlysed blood sample
US20150029492A1 (en) * 2012-04-09 2015-01-29 Mec Dynamics Corporation Measurement of total hemoglobin in whole blood
WO2015176744A1 (en) * 2014-05-20 2015-11-26 Siemens Aktiengesellschaft Cartridge for a magnetic flow cytometer, a magnetic flow cytometer, and method for analysing a sample with such a cartridge

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4790640A (en) 1985-10-11 1988-12-13 Nason Frederic L Laboratory slide
JP2652293B2 (ja) * 1991-12-06 1997-09-10 キヤノン株式会社 検体測定装置
NL1000607C1 (nl) 1995-02-07 1996-08-07 Hendrik Jan Westendorp Telkamer en werkwijze voor het vervaardigen van een telkamer
US5692503A (en) 1995-03-10 1997-12-02 Kuenstner; J. Todd Method for noninvasive (in-vivo) total hemoglobin, oxyhemogolobin, deoxyhemoglobin, carboxyhemoglobin and methemoglobin concentration determination
JP3586743B2 (ja) * 1995-10-09 2004-11-10 アークレイ株式会社 ヘマトクリット値を補正した測定方法
AT403412B (de) 1996-04-02 1998-02-25 Avl Verbrennungskraft Messtech Vorrichtung und verfahren zur bestimmung der konzentration von hämoglobinderivaten in einer unverdünnten, unhämolysierten vollblutprobe
AT404513B (de) 1996-07-12 1998-12-28 Avl Verbrennungskraft Messtech Verfahren und messanordnung zur optischen bestimmung der totalen hämoglobinkonzentration
FR2751088B1 (fr) 1996-07-12 1998-11-06 Thomson Csf Procede de determination du module de la vitesse du porteur d'un radar
US6723290B1 (en) * 1998-03-07 2004-04-20 Levine Robert A Container for holding biologic fluid for analysis
US6127184A (en) 1998-03-07 2000-10-03 Robert A. Levine Calibration of a whole blood sample analyzer
US6350613B1 (en) 1998-03-07 2002-02-26 Belton Dickinson & Co. Determination of white blood cell differential and reticulocyte counts
US6358475B1 (en) 1998-05-27 2002-03-19 Becton, Dickinson And Company Device for preparing thin liquid for microscopic analysis
US6180314B1 (en) 1998-05-27 2001-01-30 Becton, Dickinson And Company Method for preparing thin liquid samples for microscopic analysis
DE19834457A1 (de) 1998-07-30 2000-02-10 Siemens Ag Röntgenanordnung
US6387325B1 (en) 1999-10-08 2002-05-14 Becton Dickinson & Company Assembly for separating formed constituents from a liquid constituent in a complex biologic fluid sample
SE518539C2 (sv) 2000-06-28 2002-10-22 Migrata U K Ltd Sätt och kyvett för kvantitativ hemoglobinbestämning i outspätt helblod
US6555387B1 (en) 2000-09-27 2003-04-29 Becton, Dickinson And Company Method for producing thin liquid samples for microscopic analysis
DE10313201A1 (de) * 2003-03-21 2004-10-07 Steag Microparts Gmbh Mikrostrukturierte Trennvorrichtung und mikrofluidisches Verfahren zum Abtrennen von flüssigen Bestandteilen aus einer Flüssigkeit, die Partikel enthält
JP2005024472A (ja) 2003-07-04 2005-01-27 Sysmex Corp 幼若血小板測定装置
CA2563002C (en) 2004-04-07 2011-07-12 Wardlaw Partners Lp Disposable chamber for analyzing biologic fluids
WO2006031095A1 (en) 2004-09-13 2006-03-23 Leja Holding B.V. Capillary-loading slide and method of microscopic research with correction of the serge silberberg effect
SE530896C2 (sv) * 2005-04-01 2008-10-14 Diaspect Medical Ab Anordning för att fastställa en hemoglobinkoncentration i blod
SE530244C2 (sv) 2006-05-05 2008-04-08 Hemocue Ab Förfarande och system för kvantitativ hemoglobinbestämning
SE531041C2 (sv) 2006-07-17 2008-11-25 Hemocue Ab Räkning av trombocyter
US7773901B2 (en) 2006-12-18 2010-08-10 Samsung Electronics Co., Ltd. Image forming apparatus and control method thereof
TWI336854B (en) 2006-12-29 2011-02-01 Ibm Video-based biometric signature data collecting method and apparatus
US8310695B2 (en) 2007-09-12 2012-11-13 Xerox Corporation Integrated adaptable accounting system for a print job
TW200951061A (en) 2008-03-19 2009-12-16 Oncnosis Pharma Aie Method and apparatus for separating particles in a fluid
US7903241B2 (en) * 2008-03-21 2011-03-08 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for determining red blood cell indices of a blood sample utilizing the intrinsic pigmentation of hemoglobin contained within the red blood cells
WO2009117682A1 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for detecting and counting platelets individually and in aggregate clumps
WO2009152269A2 (en) 2008-06-11 2009-12-17 Health Research, Inc. Methods of quantifying biomarkers
EP2198966A1 (en) 2008-12-19 2010-06-23 Nederlandse Organisatie voor toegepast-natuurwetenschappelijk Onderzoek TNO Micro-fluidic device and a method of providing a sample
FR2945126B1 (fr) 2009-04-29 2019-11-01 Commissariat A L'energie Atomique Procede et appareil de comptage des thrombocytes
US8748186B2 (en) 2009-12-22 2014-06-10 Abbott Laboratories Method for performing a blood count and determining the morphology of a blood smear
WO2011082342A1 (en) 2009-12-31 2011-07-07 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for determining mean cell volume of red blood cells
US8906308B2 (en) 2010-01-15 2014-12-09 Abbott Laboratories Method for determining volume and hemoglobin content of individual red blood cells
US8472693B2 (en) * 2010-03-18 2013-06-25 Abbott Point Of Care, Inc. Method for determining at least one hemoglobin related parameter of a whole blood sample
US20130045535A1 (en) * 2010-04-27 2013-02-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. At The Weizmann Institute Of Science Niche system for biological culturing
ES2774942T3 (es) * 2011-07-22 2020-07-23 Roche Diagnostics Hematology Inc Detección y posicionamiento de aplicador de muestras
US9046473B2 (en) 2011-09-28 2015-06-02 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for detecting the presence of intraerythrocytic parasites
DE102013210952B4 (de) * 2013-06-12 2020-03-19 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Verfahren zur Bestimmung von ungelösten Teilchen in einem Fluid
CN105765440B (zh) * 2013-06-26 2020-08-18 阿兰蒂克微科学股份有限公司 用于显微的样品处理改进装置及方法
KR20150039050A (ko) 2013-10-01 2015-04-09 삼성전자주식회사 시료 중의 당화단백질을 측정하는 카트리지, 시스템, 및 이를 이용한 당화단백질 측정 방법
EP3071515A2 (en) * 2013-11-18 2016-09-28 Rubius Therapeutics, Inc. Synthetic membrane-receiver complexes
WO2016183482A1 (en) * 2015-05-13 2016-11-17 Rubius Therapeutics, Inc. Membrane-receiver complex therapeutics

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1610827A (zh) * 2001-12-28 2005-04-27 海莫库公司 定量测定未稀释未溶血全血中血红蛋白的方法
JP2007040814A (ja) * 2005-08-03 2007-02-15 Matsushita Electric Ind Co Ltd 吸光度測定用センサ及び吸光度測定方法
CN101312685A (zh) * 2005-11-23 2008-11-26 皇家飞利浦电子股份有限公司 用于对混浊介质的内部成像的设备
CN102216954A (zh) * 2008-01-18 2011-10-12 海默库伊公司 用于分析液体样本中的微粒的方法和装置
CN102215965A (zh) * 2008-11-13 2011-10-12 布勒医药股份公司 一次性盒子和在血液分析器上用于血液分析的使用方法
US20150029492A1 (en) * 2012-04-09 2015-01-29 Mec Dynamics Corporation Measurement of total hemoglobin in whole blood
US20140334712A1 (en) * 2013-05-09 2014-11-13 Abbott Point Of Care, Inc. Method and apparatus for determining hemoglobin based parameters in an unlysed blood sample
WO2015176744A1 (en) * 2014-05-20 2015-11-26 Siemens Aktiengesellschaft Cartridge for a magnetic flow cytometer, a magnetic flow cytometer, and method for analysing a sample with such a cartridge

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113899659A (zh) * 2020-06-22 2022-01-07 苏州中加康美科技有限公司 一种载玻片及血细胞分析仪

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017109068A1 (en) 2017-06-29
US10782306B2 (en) 2020-09-22
TR201909510T4 (tr) 2019-07-22
EP3394616A1 (en) 2018-10-31
JP6518016B2 (ja) 2019-05-22
EP3394616B1 (en) 2019-04-24
US20180372758A1 (en) 2018-12-27
JP2019506600A (ja) 2019-03-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10281382B2 (en) Measuring volume and constituents of cells
US9976945B2 (en) Method for performing a blood count and determining the morphology of a blood smear
JP4758507B2 (ja) 血小板の計数
US7951599B2 (en) Method and apparatus for determining the hematocrit of a blood sample utilizing the intrinsic pigmentation of hemoglobin contained within the red blood cells
JP2019090825A (ja) 顕微鏡法に関するサンプル処理の改善
US20170059588A1 (en) Method and apparatus for determining hemoglobin based parameters in an unlysed blood sample
CN103308497B (zh) 用于研究生物细胞或细胞培养物的方法和酶标仪
CN103827658A (zh) 识别和测量网状细胞
WO2021079306A1 (en) Accounting for errors in optical measurements
US20230003622A1 (en) Detecting platelets in a blood sample
KR101885964B1 (ko) 적혈구의 광 특성을 이용한 당화혈색소 농도 측정 방법 및 장치
CN108431600A (zh) 用于确定细胞悬液的方法和系统
TW202411633A (zh) 游移細胞之偵測系統及方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20180821

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication