CN108420748B - 一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺,通过结合纳米金和纳米钻石,使得蓝铜胜肽对各种蛋白质、高聚合物的吸附作用大大加强,有效增加了其活性成分,且纳米金对制成的化妆品具有杀菌抑菌作用,不使用防腐剂的前提下,保存周期大大延长。
Description
技术领域
本发明涉及蓝铜胜肽加工工艺领域,具体是一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺。
背景技术
铜(Copper)是维持身体机能所需要的微量元素(每日需求2毫克),功能很多且复杂,是各种细胞酵素作用需要的元素。在皮肤组织的作用上,有抗氧化、促进胶原增生、协助伤口愈合的功能。科学家发现铜离子的除皱作用,主要是藉着胺基酸复合物(胜肽peptide)的载体,使具有生化效果的二价铜离子成分进入细胞,发挥生理功能。铜键结氨基酸,是科学家从血清中发现的一种由三个氨基酸及一个铜离子所组成的复合物,这种蓝铜胜肽可以有效促进胶原蛋白(Collagen)和弹性(Elastin)蛋白的制造,增加血管生长和抗氧化能力,并刺激葡萄糖聚胺(GAGs)产生,帮助皮肤回复自我修补的天赋能力。蓝铜胜肽CopperPeptide,以在不伤肌肤、不刺激肌肤的情况下,增加细胞的活力,逐渐修复体内流失的胶原蛋白,使皮下组织坚强,伤口迅速愈合,进而达到除皱抗老化的目的。
经过众多科学家测试,以下证实的功效:刺激胶原蛋白与弹力蛋白形成,紧实肌肤及减少细纹。恢复肌肤修复能力,增加皮肤细胞间黏质产生,减少皮肤受损。刺激葡萄糖聚胺形成,增加皮肤厚度,减少皮肤松垮紧实肌肤。促进血管增生,增加皮肤供氧量。辅助抗氧化酵素SOD,有强而有利的抗自由基功能。
刺激胶原蛋白增生的分析比较:科学家为实际了解各成分对抗皱纹的效果,实际测试A酸(Tretinoin)、维他命C、退黑激素(Melatonin)、铜键结氨基酸(Cooper Peptide),四种不同成分。使用一个月后,分析真皮层中初胶原蛋白(procollagen)含量,发现使用A酸者有40%的人有显著增加,使用维他命C、退黑激素者各有50%者有显著增加,而使用铜键结氨基酸者有70%有显著增加的情形。在临床实验中,发现铜键结氨基酸确实有改善细纹、脸部肤色及光伤害。研究者同时也注意到使用超音波测试实皮肤厚度平均增加17.8%。当然抗皱需相关实许多内外在因素,但唯一可被确定的是铜键结氨基酸为一无刺激性的成分,相当适用于极敏感性肌肤与雷射或果酸焕肤后使用,是一种最温和的抗老除皱产品。
中国发明专利CN105963153A公开了一种包含蓝铜胜肽的活性组合物及化妆品或护肤品,包含蓝铜胜肽的活性组合物包括如下重量百分比的各组分:0.001-2%蓝铜胜肽、1-5%维生素E、0.1-10%甲壳素低聚糖、0.1-2%4-MSK、0.1-5%海藻多糖、6-30%乳化剂、0-10%助乳化剂、0.1-0.8%稳定剂和0-10%赋形剂,余量为水。本发明的活性组合物及化妆品或护肤品具有促进细胞增殖以及显著的补水保湿和抗衰老等功效。但仍具有如下缺陷:蓝铜胜肽对各种蛋白质、高聚合物的吸附作用不强,导致活性成分不足,且化妆品富含有机物,容易滋生细菌。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺,以解决现有技术中存在的缺陷。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺,包括如下步骤:
制作蓝铜胜肽,取胜肽,其组成为甘氨酸-组氨酸-离氨酸,制作过程如下:1)取氯化钠水溶液1-5M,将胜肽稀释至1-10mg/ml,置于4℃,得胜肽溶液;2)另准备10%BSA,取5-10μl胜肽溶液加上,1-10ml铜离子水溶液其浓度为1-10um,(此处铜离子可选择硝酸铜、氯化铜、葡萄酸铜),最后总溶液量为10-20ml,得总蓝铜溶液。将溶液置于37℃环境中,时间20-120min,不停振动;3)取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入蓝铜溶液。取10%BSA 1-20ml。至蓝铜溶液,37℃20~120min,将蓝铜溶液置于4℃环境下,20,000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;4)重复上述步骤3)三次以上;5)最后加入PBS buffer solution,制成5~50ml蓝铜溶液,浓度约为1nM-500nM;
制作纳米金:取.5-50mM四氯金酸水溶液,大约5-50mL,搅拌均匀,加入10-50mL柠檬酸钠,浓度10-100mL.,加热5~60min,100-125℃,可得纳米金浓度,浓度大约5-100nM,加若干氢氧化钠,调至pH 9.0~pH 7.4。
纳米金结合蓝铜胜肽:1)取蓝铜胜肽溶液10~100μl,1-20ml氯化钠水溶液,10-100mL 10%BSA,5-50mL纳米金水溶液,混合后,静置于37℃24小时,搅拌子转动,得蓝铜胜肽纳米金水溶液。
2):取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入铜胜肽纳米金水溶液,加入10%BSA 1-20ml;至铜胜肽纳米金水溶液,37℃,50min,再将铜胜肽纳米金水溶,液置于4℃环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;
重复步骤2)三次以上,完成后加入100mL PBS buffer solution,制成1-100ml纳米金结合蓝铜胜肽溶液;
纳米钻石结合蓝铜胜肽纳米金:取纳米钻石1-10ug,浸置于50%盐酸水溶液中,时间2~24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,再将纳米钻石浸泡于5-50%硫酸水溶液中,时间2-24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,将纳米钻石浸泡于去离子水120度高温煮5-50min,去除水;将纳米钻石浸泡于3-氨基丙基三甲氧基硅烷(aminopropyltrimethoxysilane,APTMS)溶液中,该溶液浓度为1-50mM于二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)溶液中,时间24-48小时;再将溶液浸泡于去离子水室温清洗,5-50min,去除水;溶液置于室温环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;将表面结合3-氨基丙基三甲氧基硅烷之纳米钻石,1-10ug,置于纳米金结合蓝铜胜肽溶液,500-1000uL,时间24-48小时,温度37℃,即完成纳米钻石结合铜胜肽纳米金之制程。
本发明的有益效果是:通过结合纳米金和纳米钻石,使得蓝铜胜肽对各种蛋白质、高聚合物的吸附作用大大加强,有效增加了其活性成分,且纳米金对制成的化妆品具有杀菌抑菌作用,不使用防腐剂的前提下,保存周期大大延长。
附图说明
图1为本发明胜肽结构图;
图2为本发明蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构示意图;
具体实施方式
以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
如图1-2所示,一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺,包括如下步骤:
制作蓝铜胜肽,取胜肽,其组成为甘氨酸-组氨酸-离氨酸,制作过程如下:1)取氯化钠水溶液1-5M,将胜肽稀释至1-10mg/ml,置于4℃,得胜肽溶液;2)另准备10%BSA,取5-10μl胜肽溶液加上,1-10ml铜离子水溶液其浓度为1-10um,(此处铜离子可选择硝酸铜、氯化铜、葡萄酸铜),最后总溶液量为10-20ml,得总蓝铜溶液。将溶液置于37℃环境中,时间20-120min,不停振动;3)取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入蓝铜溶液。取10%BSA 1-20ml。至蓝铜溶液,37℃20~120min,将蓝铜溶液置于4℃环境下,20,000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;4)重复上述步骤3)三次以上;5)最后加入PBS buffer solution,制成5~50ml蓝铜溶液,浓度约为1nM-500nM;
制作纳米金:取.5-50mM四氯金酸水溶液,大约5-50mL,搅拌均匀,加入10-50mL柠檬酸钠,浓度10-100mL.,加热5~60min,100-125℃,可得纳米金浓度,浓度大约5-100nM,加若干氢氧化钠,调至pH 9.0~pH 7.4。
纳米金结合蓝铜胜肽:1)取蓝铜胜肽溶液10~100μl,1-20ml氯化钠水溶液,10-100mL 10%BSA,5-50mL纳米金水溶液,混合后,静置于37℃24小时,搅拌子转动,得蓝铜胜肽纳米金水溶液。
2):取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入铜胜肽纳米金水溶液,加入10%BSA 1-20ml;至铜胜肽纳米金水溶液,37℃,50min,再将铜胜肽纳米金水溶,液置于4℃环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;
重复步骤2)三次以上,完成后加入100mL PBS buffer solution,制成1-100ml纳米金结合蓝铜胜肽溶液;
纳米钻石结合蓝铜胜肽纳米金:取纳米钻石1-10ug,浸置于50%盐酸水溶液中,时间2~24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,再将纳米钻石浸泡于5-50%硫酸水溶液中,时间2-24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,将纳米钻石浸泡于去离子水120度高温煮5-50min,去除水;将纳米钻石浸泡于3-氨基丙基三甲氧基硅烷(aminopropyltrimethoxysilane,APTMS)溶液中,该溶液浓度为1-50mM于二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)溶液中,时间24-48小时;再将溶液浸泡于去离子水室温清洗,5-50min,去除水;溶液置于室温环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;将表面结合3-氨基丙基三甲氧基硅烷之纳米钻石,1-10ug,置于纳米金结合蓝铜胜肽溶液,500-1000uL,时间24-48小时,温度37℃,即完成纳米钻石结合铜胜肽纳米金之制程。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种蓝铜胜肽结合纳米金及纳米钻石结构的加工工艺,其特征在于:包括如下步骤:
制作蓝铜胜肽,取胜肽,其组成为甘氨酸-组氨酸-离氨酸,制作过程如下:1)取氯化钠水溶液1-5M,将胜肽稀释至1-10mg/ml,置于4℃,得胜肽溶液;2)另准备10%BSA,取5-10μl胜肽溶液加上,1-10ml铜离子水溶液其浓度为1-10um,最后总溶液量为10-20ml,得总蓝铜溶液,将溶液置于37℃环境中,时间20-120min,不停振动;3)取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入蓝铜溶液,取10%BSA 1-20ml,至蓝铜溶液,37℃20-120min,将蓝铜溶液置于4℃环境下,20,000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;4)重复上述步骤3)三次以上;5)最后加入PBS buffer solution,制成5-50ml蓝铜溶液,浓度为1nM-500nM;
制作纳米金:取.5-50mM四氯金酸水溶液,5-50mL,搅拌均匀,加入10-50mL柠檬酸钠,浓度10-100mL,加热5~60min,100-125℃,可得纳米金浓度,浓度5-100nM,加若干氢氧化钠,调至pH 9.0~pH 7.4;
纳米金结合蓝铜胜肽:1)取蓝铜胜肽溶液10~100μl,1-20ml氯化钠水溶液,10-100mL10%BSA,5-50mL纳米金水溶液,混合后,静置于37℃24小时,搅拌子转动,得蓝铜胜肽纳米金水溶液;
2):取5-100ul的氯化钠水溶液加,加入铜胜肽纳米金水溶液,加入10%BSA 1-20ml;至铜胜肽纳米金水溶液,37℃,50min,再将铜胜肽纳米金水溶,液置于4℃环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;
重复步骤2)三次以上,完成后加入100mL PBS buffer solution,制成1-100ml纳米金结合蓝铜胜肽溶液;
纳米钻石结合蓝铜胜肽纳米金:取纳米钻石1-10ug,浸置于50%盐酸水溶液中,时间2~24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,再将纳米钻石浸泡于5-50%硫酸水溶液中,时间2-24hr,再用去离子水清洗,重复三次以上;去除水,将纳米钻石浸泡于去离子水120度高温煮5-50min,去除水;将纳米钻石浸泡于3-氨基丙基三甲氧基硅烷溶液中,该溶液浓度为1-50mM于二甲基亚砜溶液中,时间24-48小时;再将溶液浸泡于去离子水室温清洗,5-50min,去除水;溶液置于室温环境下,20000转一小时,将上层浮出物及溶液吸出,并弃置;将表面结合3-氨基丙基三甲氧基硅烷之纳米钻石,1-10ug,置于纳米金结合蓝铜胜肽溶液,500-1000uL,时间24-48小时,温度37℃,即完成纳米钻石结合铜胜肽纳米金之制程。
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