CN104502335A

CN104502335A - 谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法及其检测三价铬离子的方法

Info

Publication number: CN104502335A
Application number: CN201410810814.1A
Authority: CN
Inventors: 刘骞; 徐胜臻; 陈长水; 李雪刚; 李建洪
Original assignee: Huazhong Agricultural University
Current assignee: Huazhong Agricultural University
Priority date: 2014-12-23
Filing date: 2014-12-23
Publication date: 2015-04-08
Anticipated expiration: 2034-12-23
Also published as: CN104502335B

Abstract

本发明公开了一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法及其检测三价铬离子的方法。该制备方法首先将氯金酸溶液在95～110℃下加热，然后加入柠檬酸溶液，得到纳米金溶液；向制备得到纳米金溶液加入谷胱甘肽溶液，置于恒温摇床内摇动反应，静置后离心，去掉上层清液，得到谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，取上述制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，加入氯化钠溶液，混合均匀，得到混合液；将体积相同的待测样品溶液加入混合液中，静置10～20min，观察反应溶液颜色变化或者检测混合溶液的可见吸收变化，定性定量分析三价铬离子的存在或含量。本发明制备的纳米探针选择性好、灵敏度高、稳定性好，可达到国标中限量的检测水平。

Description

谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法及其检测三价铬离子的方法

技术领域

本发明涉及铬离子检测的技术领域，具体地指一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法及其检测三价铬离子的方法。

背景技术

重金属一般指比重大于4或5的金属，约有45种，如铜、铅、锌、铁、钴、镍、锰、镉、汞、钨、钼、金、银等，在环境污染方面的重金属主要是指汞、镉、铅、铬以及类金属砷等生物毒性大的金属元素，环境中重金属污染的加剧进而导致农产品中重金属含量超标，对人体健康构成越来越大的危险。重金属污染物在环境中难以降解，在生物体内难以代谢并能在生物体内累积，通过食物链逐步富集，最后进入人体造成健康危害。铬主要以六价和三价两种形式存在。电镀、制革、制铬酸盐或铬酐等工业废水，均可污染水源，使水中含有铬。医学研究发现，六价铬有致癌的危害。铬主要是通过吸入、皮肤接触等方式对人体造成严重的伤害。当皮肤些许擦伤时，一旦接触铬化合物便会对人体造成伤害，例如铬性皮肤溃疡(铬疮)。六价铬比三价铬毒性大，仅仅是接触六价铬也会发生铬性皮炎及湿疹等症状。另外，接触铬盐对呼吸道、眼、耳以及肠胃道都有不同程度的危害，最严重可导致全身中毒。六价铬在还原剂的作用下可以还原成毒性较小的三价铬，因此，寻求一种快速、简便、特异性高、灵敏度高的三价铬的探针和检测方法是非常有必要的。

现在常用的铬离子检测分析方法主要有原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法和二苯碳酰二肼分光光度发。这些常用的分析方法具有高准确度和高灵敏度的优点，但是往往需要昂贵的仪器设备、复杂的操作方法、较长时间的前处理过程，检测过程中使用的试剂污染环境，不适用于大规模的现场批量检测分析。因此目前一些快速的检测方法应运而生，如酶抑制法和酶联免疫法，但是这些方法中都会使用酶，导致这些检测方法稳定性弱、重现性差、成本高等缺点。

查阅相关文献，利用谷胱甘肽修饰的纳米金探针检测三价铬离子的方法还未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题就是提供一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法及其检测三价铬离子的方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，包括以下步骤：

1)将氯金酸溶液在95～110℃下加热，然后加入柠檬酸溶液，搅拌反应10～30min，然后室温搅拌10～20min；放置室温后，即得到纳米金溶液；避光4℃保存备用；其中，氯金酸与柠檬酸摩尔比为10︰38.8；

2)向步骤1)中制备得到纳米金溶液加入谷胱甘肽溶液，置于恒温摇床内摇动反应，静置后离心，去掉上层清液，加入超纯水将管底沉淀溶解；重复离心一次，去掉上清液，将沉淀重新溶解，即得到谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，避光4℃保存备用，其中，纳米金与谷胱甘肽的摩尔比为1︰100～1000。

进一步地，所述步骤1)中，纳米金溶液颜色为酒红色。

再进一步地，所述氯金酸溶液的摩尔浓度为1mmol/L，所述柠檬酸溶液的摩尔浓度为38.8mmoL/L，所述谷胱甘肽溶液的摩尔浓度为1×10^-4moL/L，其中，纳米金与谷胱甘肽的摩尔比为1︰200～500。

再进一步地，所述步骤2)中，将纳米金溶液和谷胱甘肽溶液的混合溶液置于25℃的恒温摇床内摇动反应1～2h，静置3～5h。

再进一步地，所述步骤2)中，在转速为5000～14000rmp、温度4℃条件下离心10～30min。

再进一步地，所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针的摩尔浓度为14.88nmoL/L，粒径为13～18nm。

本发明还提供了一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针检测三价铬离子的方法，包括以下步骤：

1)取上述制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，加入氯化钠溶液，混合均匀，得到混合液；

2)将体积相同的待测样品溶液加入混合液中，静置10～20min，观察反应溶液颜色变化或者检测混合溶液的紫外吸收变化，定性定量分析三价铬离子的存在或含量。

在上述技术方案中，所述反应溶液颜色由红色变成蓝紫色，则待测样品溶液中含有三价铬离子，且溶液中三价铬离子的浓度大于等于0.5mg/L，若需要定量分析，检测混合溶液的可见吸收变化，确定溶液中三价铬离子的浓度；

或者，所述反应溶液颜色没有变化，说明溶液中没有三价铬离子，或者溶液中三价铬离子的浓度小于0.5mg/L；若需要定量分析，检测混合溶液的可见吸收变化，确定溶液中三价铬离子的浓度或有无三价铬离子。

在上述技术方案中，所述定量分析中，建立标准曲线进行定量检测：

1)配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，其中，三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L；

2)取100μL谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积20μl的0.02MNacl溶液，混合均匀后分别加入120μL不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，10min后测定其混合溶液的吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线，加入不同浓度三价铬离子的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值同三价铬离子浓度之间线性关系为y＝0.57315x+0.09817，线性相关系数R²为0.99554，可用于三价铬离子的定量检测。

在上述技术方案中，所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针检测三价铬离子溶液的检测范围为：0.03～1mg/L。

本发明的设计原理和理论基础：

1、纳米金是指直径在1～100nm尺寸的微小金颗粒，一般以分散在水中的溶胶形式存在，因此又称为胶体金。纳米金具有很高的消光系数和很强的表面等离子体共振性能。纳米金颗粒的特征等离子体吸收峰在510～550nm处，并且随着粒子尺寸的增加或粒子间距的减小，吸收峰的位置发生红移。纳米金比色法是基于加入体系的重金属离子与修饰在纳米金表面的功能化基团发生相互作用从而拉近纳米金颗粒间的距离，当金纳米颗粒聚集到一定的程度，两个颗粒的距离小于粒径的2倍，溶液的颜色就会发生明显的变化，胶体溶液由原来的红色变为蓝紫色，产生明显的红移，这一变化可以定量检测重金属离子从而实现裸眼检测的目的。

2、谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针检测三价铬离子，谷胱甘肽由于静电作用吸附在纳米金表面，由于谷胱甘肽分子中含有丰富的-COOH、-NH₂、-SH，当检测体系中加入三价铬离子，修饰在纳米金表面的-COOH、-NH₂、-SH与三价铬离子相互作用，从而拉近纳米金颗粒间的距离，当三价铬离子的浓度增加到一定的程度时是纳米金颗粒发生聚集，导致溶液由原来的红色变成蓝紫色，从而实现裸眼检测三价铬离子，并根据其可见吸收值的变化与三价铬离子浓度之间的线性关系定量测定铬离子的浓度。

3、选择性测试：

取0.1mL浓度为14.88nmoL/L谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl，混合均匀后加入与谷胱甘肽修饰的纳米金溶液等体积的超纯水，10min～20min后观察混合溶液的颜色，并测定可见吸收光谱。以相同的方法，取等量的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl，混匀后依次加入与混合溶液等体积1mg/L的氯化钠、硝酸镁、氯化钙、硫酸铜、硝酸铬、醋酸锰、醋酸钴、醋酸锌、氯化镉、硝酸镍、硝酸汞、硝酸铅、氯化铁、氯化亚铁、硫酸铝、重铬酸钾、硝酸钡的超纯水溶液，10～20min后测定其混和溶液的可见吸收光谱，并观察比较之间的区别，参见附图4。

如图所示：只有加入含有三价铬离子的超纯水溶液后，谷胱甘肽修饰的纳米金溶液由红色变成紫色，在其可见吸收光谱中，最大吸收波长发生明显的红移，而加入其他金属离子的超纯水溶液后，谷胱甘肽修饰的纳米金溶液颜色和可见光谱图与加入超纯水后的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液没有明显的差异。

4、方法可行性

为验证该方法的可行性，做了空白加标实验。先配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，取等量的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl溶液后依次加入与混合溶液等体积的不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，10min后测定其混合溶液的紫外-吸收吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线，参见附图4。向超纯水中添加一定量的铬离子(添加后的浓度为0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L)，按照上述相同的方法与谷胱甘肽修饰的纳米金溶液混合，测定其可见吸收光谱，并根据标准曲线计算出铬离子的浓度，最终得出空白加标回收率为109％、91.3％、87.6％。

本发明的有益效果在于：

1、本发明制备的纳米探针选择性好、灵敏度高、稳定性好，可达到国标中限量的检测水平。食品安全国家标准GB2762—2012中规定蔬菜及其制品中铬的限量为0.5mg/kg，而本方法中裸眼检测三价铬离子浓度已经达到0.5mg/kg，比色法检测三价铬离子的检出限已经达到0.03mg/L。

2、本发明中制备探针所使用的试剂均无毒副作用，探针的合成方法简单且制备过程中也不产生有毒污染环境的物质。

3、本发明的纳米比色探针是谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，谷胱甘肽由于静电作用与纳米金颗粒结合，从而修饰到纳米金表面，得到谷胱甘肽修饰的纳米金颗粒，因为探针结构中含有-COOH、-NH₂、-SH可以与三价铬离子作用。因此在纳米探针体系中加入三价铬离子后，修饰在纳米金表面的-COOH、-NH₂、-SH与三价铬离子相互作用，从而拉近纳米金颗粒间的距离，当三价铬离子的浓度增加到一定的程度时是纳米金颗粒发生聚集，导致溶液由原来的红色变成蓝紫色，实现对三价铬离子的裸眼检测。合成的谷胱甘肽修饰的纳米金颗粒尺寸均匀、稳定性、方便携带、成本低廉，可适用于大规模的现场快速检测。

4、本发明中的检测方法简单、快捷，不需要借助复杂昂贵的大型仪器，成本低廉，可实现裸眼检测，适用于大规模的现场快速检测。

5、本发明的检测结果具有可视化、选择性好、灵敏度高、检测时间短、试剂无污染、成本低廉等优点。

附图说明

图1为不同金属离子中加入谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针的效果图；

图中，图1A为谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的可见吸收光谱图；

图B为颜色变化效果图；

图2为不同浓度三价铬离子中加入谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值同三价铬离子浓度之间线性关系的标准曲线图；

图3为实施例1制备谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的可见吸收光谱图；

图4为实施例1制备谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的TEM图4A和粒径分布直方图4B；

图5为0.5mg/L三价铬离子中加入实施例1制备谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的透射电镜图5A和粒径分布直方图5B；

图6为加入0.5mg/L三价铬离子前(a)后(b)的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的可见吸收光谱图及加入三价铬离子前后的颜色变化效果图。

具体实施方式

为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。

一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，包括以下步骤：

1)将氯金酸溶液在95～110℃下加热，然后加入柠檬酸溶液，搅拌反应10～30min，然后室温搅拌10～20min；放置室温后，即得到纳米金溶液；避光4℃保存备用；其中，氯金酸与柠檬酸摩尔比为10︰38.8；其中，纳米金溶液颜色为酒红色；

2)向步骤1)中制备得到纳米金溶液加入谷胱甘肽溶液，置于25℃恒温摇床内摇动反应1～2h，静置3～5h后，在转速为5000～14000rmp、温度4℃条件下离心10～30min，去掉上层清液，加入超纯水将管底沉淀溶解；重复离心一次，去掉上清液，将沉淀重新溶解，即得到谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，避光4℃保存备用，其中，纳米金与谷胱甘肽的摩尔比为1︰100～1000。

上述技术方案中，氯金酸溶液的摩尔浓度为1mmol/L，所述柠檬酸溶液的摩尔浓度为38.8mmol/L，所述谷胱甘肽溶液的摩尔浓度为1×10^-4mol/L，其中，纳米金与谷胱甘肽的摩尔比为1︰200～500。谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针的摩尔浓度为14.88nmoL/L，粒径为13～18nm。

将上述制备得到的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针进行检测

1)选择性测试：

取0.1mL浓度为14.88nmoL/L谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl，混合均匀后加入与谷胱甘肽修饰的纳米金溶液等体积的超纯水，10min～20min后观察混合溶液的颜色，并测定可见吸收光谱。以相同的方法，取等量的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl，混匀后依次加入1mg/L的氯化钠、硝酸镁、氯化钙、硫酸铜、硝酸铬、醋酸锰、醋酸钴、醋酸锌、氯化镉、硝酸镍、硝酸汞、硝酸铅、氯化铁、氯化亚铁、硫酸铝、重铬酸钾、硝酸钡的超纯水溶液，10～20min后测定其混和溶液的可见吸收光谱，并观察比较之间的区别，参见附图1。

如图1所示：只有加入含有三价铬离子的超纯水溶液后，谷胱甘肽修饰的纳米金溶液由红色变成紫色，在其可见吸收光谱中，最大吸收波长发生明显的红移，而加入其他金属离子的超纯水溶液后，谷胱甘肽修饰的纳米金溶液颜色和可见光谱图与加入超纯水后的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液没有明显的差异。

2)方法可行性

为验证该方法的可行性，做了空白加标实验。先配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，取等量的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积10％的0.02MNaCl溶液后依次加入等体积不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，10min后测定其混合溶液的可见吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线，参见附图2。向超纯水中添加一定量的铬离子(添加后的浓度为0.1mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L)，按照上述相同的方法与谷胱甘肽修饰的纳米金溶液混合，测定其可见吸收光谱，并根据标准曲线计算出铬离子的浓度，最终得出空白加标回收率为109％、91.3％、87.6％。

实施例1

向250mL圆底两口烧瓶(新制王水浸泡过夜，超纯水洗净干燥备用)中加入1mM氯金酸溶液100mL水浴98℃加热，然后迅速加入38.8mM柠檬酸溶液10mL，剧烈搅拌10min，溶液由黑色变为酒红色，然后再室温搅拌15min，放置室温后避光4℃保存备用。

取上述制备的纳米金溶液4mL与2mL超纯水混合，然后加入600μL的1×10^-4M新鲜配置的谷胱甘肽溶液，置于25℃的恒温摇床内摇1h，取出静止4h，再以转速14000rmp温度4℃离心25min，去掉上层清液，用超纯水将管底沉淀溶解，重复离心一次，去掉上清液，将沉淀重新溶解后避光4℃保存备用。测定其紫外-可见吸收光谱，在523nm处有特征吸收(附图3)。经过透射显微镜测试表明本实施例制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针颗粒均匀、尺寸为14.48nm、分布在较窄的范围内(图4)。

实施例2

根据实施例1制备得到的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针，制备标准曲线，具体方法如下：

配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，取100μl谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积20μl的0.02MNacl溶液，混合均匀后分别加入120μl不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，10min后测定其混合溶液的可见吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线(附图4)，加入不同浓度三价铬离子的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值同三价铬离子浓度之间线性关系为y＝0.57315x+0.09817，线性相关系数R²为0.99554，可用于三价铬离子的定量检测。

实施例3

取100μl上述制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液，加入体积20μl的0.02MNaCl溶液，混匀后加入120μl待测样品溶液，10～20min后观察溶液的颜色变化。若待测样品溶液中没有三价铬离子，则混合溶液没有颜色变化，若待测样品溶液中含有的三价铬离子浓度大于等于0.5mg/L，则混合溶液的颜色由红色变成蓝紫色(图6)。则可以半定量检测三价铬离子浓度。加入0.5mg/L三价铬离子后的谷胱甘肽修饰的纳米金溶液的透射电镜图和粒径分布直方图表明修饰的纳米金发生了一定的团聚(图5)。测定其混合溶液的可见吸收光谱，若待测样品溶液中不含三价铬离子，则混合溶液的可见吸收光谱不发生红移，若待测样品溶液中含有三价铬离子，则混合溶液的可见吸收光谱发生红移(图6)。

实施例4

取100μl上述制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液，加入体积20μl的0.02MNaCl溶液，混匀后加入120μl待测样品溶液，10～20min后观察溶液的颜色变化。若颜色没有发生明显改变，待测样品溶液中含有的三价铬离子浓度小于0.5mg/L，利用标准曲线法对样品中三价铬离子浓度的定量分析，配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，取100μl谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积20μl的0.02MNacl溶液，混合均匀后分别加入120μl不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，10min后测定其混合溶液的可见吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线(附图4)，加入不同浓度三价铬离子的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值同三价铬离子浓度之间线性关系为y＝0.57315x+0.09817，线性相关系数R²为0.99554，根据标准曲线方程和样品溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值可以计算出样品中三价铬离子的浓度。

实施例5

取100μL上述制备的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液，加入体积20μL的0.02MNaCl溶液，混匀后加入120μL待测样品溶液，10～20min后观察溶液的颜色变化。若颜色由红色变成蓝紫色，待测样品溶液中含有的三价铬离子浓度大于或者等于0.5mg/L，利用标准曲线法对样品中三价铬离子浓度的定量分析，配置不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液(三价铬离子的浓度分别为0.02mg/L、0.08mg/L、0.3mg/L、0.5mg/L、1mg/L)，取100μl谷胱甘肽修饰的纳米金溶液，加入体积20μl的0.02MNaCl溶液，混合均匀后分别加入120μl不同浓度的三价铬离子的超纯水溶液，10min后测定其混合溶液的可见吸收光谱，以A₇₀₀/A₅₂₀的值为纵坐标，铬离子浓度值为横坐标绘制标准曲线(附图4)，加入不同浓度三价铬离子的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值同三价铬离子浓度之间线性关系为y＝0.57315x+0.09817，线性相关系数R²为0.99554，根据标准曲线方程和样品溶液的A₇₀₀/A₅₂₀值可以计算出样品中三价铬离子的浓度。

其它未详细说明的部分均为现有技术。尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims

1.一种谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，纳米金溶液颜色为酒红色。

3.根据权利要求1或2所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：所述氯金酸溶液的摩尔浓度为1mmol/L，所述柠檬酸溶液的摩尔浓度为38.8mmol/L，所述谷胱甘肽溶液的摩尔浓度为1×10^-4mol/L，其中，纳米金与谷胱甘肽的摩尔比为1︰200～500。

4.根据权利要求1或2所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，将纳米金溶液和谷胱甘肽溶液的混合溶液置于25℃的恒温摇床内摇动反应1～2h，静置3～5h。

5.根据权利要求1或2所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，在转速为5000～14000rmp、温度4℃条件下离心10～30min。

6.根据权利要求1或2所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针制备方法，其特征在于：所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针的摩尔浓度为14.88nmol/L，粒径为13～18nm。

7.一种权利要求1制备得到的谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针检测三价铬离子的方法，其特征在于：包括以下步骤：

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述反应溶液颜色由红色变成蓝紫色，则待测样品溶液中含有三价铬离子，且溶液中三价铬离子的浓度大于等于0.5mg/L，若需要定量分析，检测混合溶液的可见吸收变化，确定溶液中三价铬离子的浓度；

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述定量分析中，建立标准曲线进行定量检测：

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述谷胱甘肽修饰的纳米金比色探针检测三价铬离子溶液的检测范围为：0.03～1mg/L。