CN111374901A - 奈米金结合锌胜肽的工艺方法 - Google Patents

Abstract

本发明为一种奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其工艺方法包括：取得一锌胜肽溶液，其中将一胜肽加入氯化钠水溶液，再与一锌离子水溶液相混合，得到锌胜肽溶液；再取得一奈米金溶液，其中将一四氯金酸水溶液加入一柠檬酸钠进行加热程序，得到奈米金溶液；将奈米金结合锌胜肽，其中将锌胜肽溶液、奈米金溶液、一氯化钠水溶液及一牛血清白蛋白（buffer serum agent）进行混合，最后完成一锌胜肽奈米金水溶液；借此，通过将锌离子键结胺基酸（即结合胜肽），以进行表面接枝过程，再与另一奈米金进行结合，实现多重抗氧化、美白等多重功效的材料，借以进一步应用于如：化妆品、衣着等产业领域。

Description

奈米金结合锌胜肽的工艺方法

技术领域

本发明涉及一种奈米金结合锌胜肽的工艺方法，特别涉及将锌离子键结胜肽（即胺基酸），以进行表面接枝过程，再与另一奈米金进行结合；其工艺方法：先取得一锌胜肽溶液，再取得一奈米金溶液，将奈米金结合锌胜肽，即将锌胜肽溶液、奈米金溶液、一氯化钠水溶液及一牛血清白蛋白（buffer serum agent）进行混合，最后完成一锌胜肽奈米金水溶液，使得完成的锌胜肽奈米金水溶液具有多重抗氧化、美白等多重功效，即可进一步将完成的锌胜肽奈米金水溶液应用于如：化妆品、衣着等产业领域。

背景技术

近年来，医学界在针对老化的系列研究中，有了较新的研究与发现，即有关 “自由基－抗氧化物质”理论，也因此，使得人们对于所谓的“抗氧化物质”产生极大兴趣和期盼，积极地寻找这类抗氧化物质，以达成对抗老化目的。

前段所述的自由基（Free Radicals）经发现并得知，它是“带有一个单独不成对的电子的原子、分子或离子”，它们可能会在人体任何部位产生，例如：粒腺体，而且又是细胞内产生能量（进行氧化作用）的主要位置，因为是进行氧化作用的地方，因此也是产生自由基（过氧化物）的主要地点。

其实并不是所有的自由基都是有害的，例如：一氧化氮(NO)，它是人体自行产生的，具有许多功能，且是相当重要的物质，不过当它因为某些原因而产生过量时，就会产生危害，造成人体疾病。人体内的自由基有许多种，有人体自行合成的，具有重要功能；或是在新陈代谢过程中产生的；更有来自于外界环境的。

有些自由基相当活泼, 这些通常是小分子量的物质，具有抢夺其他物质电子的特性，而分子量较大的自由基通常并不活泼，例如维生素C、E自由基，它们可以利用自身结构的特性来稳定不成对的电子，所以并不太会攻击别的物质。

前述这些较活泼、带有不成对电子的自由基，因性质不稳定，具有抢夺其他物质的电子，使自己原本不成对的电子变得成对而稳定，而被抢走电子的物质也可能变得不稳定，可能会再去抢夺其他物质的电子，于是就产生一连串的连锁反应，造成被抢夺的物质遭到破坏；人体的老化以及位居人类高死因的癌症，其主因就是自由基所导致。

相对地，人体本身也具备了修复功能，以复原被破坏的组织结构，同时也有一套完整的抗氧化系统，以对抗害预防自由基的危害；所以人体内有数种自行制造的抗氧化物质，是人体对抗过氧化物（自由基）的第一道防线，抗氧化物质可以在过氧化物产生时，即刻发挥作用，利用氧化还原作用，将过氧化物转换为毒害较低或无害的物质。

就目前对抗老化与活化细胞的物质当属锌胜肽，可以说是胜肽始祖，在1970年代，美国人罗伦、皮卡特(Dr.Loren Pickart)，发现使用锌胜肽来治疗伤口和皮肤损伤非常有效，不但可减少疤痕组织生成，同时能刺激皮肤自行愈合；此外在除皱方面，锌胜肽可以把日常的皮肤损伤减到最低程度，延缓老化现象，也使得利用锌用于除皱方面也逐渐被推广及运用。

又，现今所研发出的奈米金，主要是将黄金通过纳米技术的特殊处理和加工，重新制作成纳米，通过可被人体吸收的奈米金渗入到皮肤的真皮乳头层，透过组织代谢理论、循环改善理论及金球体释放理论，三大原理，缓慢释放活性金离子，以激活细胞使细胞年轻化，中和自由基，使细胞具有自动修复功能，还能刺激皮下自行产生更多的胶原蛋白的纤维细胞大量生成，对抗自由基，迅速抵消导致肌肤老化的根本原因，借以减缓肌肤衰老，达到具美容抗衰老目的。

因此，如何研发一种将奈米金结合锌胜肽，特别是将抗氧化缓释，增长抗氧化效果，而成为一种超级抗氧化物质，借以有效降低皮肤的自由基，达成抗老化目的，即为本发明主要解决的课题。

发明内容

为了解决上述现有技术的问题与缺陷，本发明公开一种奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其工艺方法包括有：１、取得一锌胜肽溶液，其取得方法包括有：第一阶段：取一胜肽并加入氯化钠水溶液１～５M，将胜肽稀释至１～１０mg/ml并置于３℃～５℃环境中，得一胜肽溶液；

第二阶段：再取１～１０ml其浓度为１～１０um的锌离子水溶液与５～１０μl胜肽溶液相混合，最后总溶液量为１０～２０ml，得锌胜肽溶液，并可将锌胜肽溶液置于３６℃～３８℃环境中，时间２０～１２０min不停振动；

第三阶段：取５～１００ul氯化钠水溶液并加入锌胜肽溶液，再取１～２０mL１０％牛血清白蛋白（buffer serum agent；简称ＢＳＡ）至锌胜肽溶液中，静置于３６℃～３８℃环境中２０～１２０min，之后将锌胜肽溶液置于３℃～５℃ 环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复第一步骤的第三阶段流程三次以上，最后加入磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution；简称ＰＢＳ），以得５～５０ml其浓度为１nM～５００ nM的锌胜肽溶液。

２、再取得一奈米金溶液，其取得方法包括有：取浓度为５～５０ mM的四氯金酸水溶液，加入浓度为１０～１００mL的柠檬酸钠，再进行加热程序，得浓度为５～１００nM的奈米金溶液。

３、将奈米金结合锌胜肽，其方法包括有：第一阶段：取１０～１００μl锌胜肽溶液、５～５０mL奈米金溶液、１～２０mL氯化钠水溶液及１０～１００mL１０％牛血清白蛋白（buffer serumagent；ＢＳＡ）进行混合，并静置于３６℃～３８℃环境中２２～２８小时，再以搅拌子转动，完成一锌胜肽奈米金水溶液；第二阶段：将完成的锌胜肽奈米金水溶液进一步加入５～１００ul氯化钠水溶液，再加入１～２０mL１０％牛血清白蛋白（buffer serum agent；简称ＢＳＡ），将锌胜肽奈米金水溶液置于３６℃～３８℃环境中５０～６０min，之后将锌胜肽奈米金水溶液置于３℃～５℃环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复第三步骤的第二阶段流程三次以上，最后加入１～１００ml磷酸盐缓冲液（phosphate bufferedsolution；简称ＰＢＳ），最后完成总１～１００ml锌胜肽奈米金水溶液。

进一步的，该胜肽是甘氨酸-组氨酸-离氨酸(glycyl- L-histidyl-L-lysine )。

进一步的，该锌离子水溶液的锌离子选择硝酸锌、氯化锌或葡萄酸锌中的其中一种。

进一步的，该加热程序的加热温度介于１００～１２５℃其时间为５～６０min。

进一步的，该第二步骤所取得的该奈米金溶液可进一步加入氢氧化钠，使其酸碱值介于pH ９.０～pH ７.４。

本发明的技术特征在于，将奈米金结合锌胜肽，其中先将锌离子键结胜肽（即胺基酸）以进行表面接枝过程，再与另一奈米金进行结合，最后完成一锌胜肽奈米金水溶液，可将抗氧化缓释，增长抗氧化效果，借以有效降低皮肤的自由基，使得完成的锌胜肽奈米金水溶液具多重抗氧化、美白等多重功效，即可进一步将完成的奈米金结合锌胜肽水溶液应用于如：化妆品、衣着等产业领域。

附图说明

图1为说明由甘氨酸-组氨酸-离氨酸（glycyl- L-histidyl-L-lysine）所组成的胜肽结构图。

图2为说明由图1的胜肽所组成的锌胜肽结构图。

图3为本发明奈米金结合锌胜肽的工艺方法。

图4为本发明奈米金结合锌胜肽的结构图。

附图标记说明

１、由甘氨酸-组氨酸-离氨酸（glycyl- L-histidyl-L-lysine）所组成的胜肽。

2、锌离子

3、奈米金。

具体实施方式

下面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。

请参阅图3、图4所示，本发明公开一种奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其工艺方法包括有：

步骤１００：取得一锌胜肽溶液，其取得方法包括有：第一阶段：取一胜肽１（如：甘氨酸-组氨酸-离氨酸(glycyl- L-histidyl-L-lysine )）并加入氯化钠水溶液１～５M，将胜肽１稀释至１～１０mg/ml并置于３℃～５℃环境中，得一胜肽溶液；

第二阶段：再取１～１０ml其浓度为１～１０um的锌离子水溶液与５～１０μl胜肽溶液相混合，最后总溶液量为１０～２０ml，得该锌胜肽溶液，并可将锌胜肽溶液进一步置于３６℃～３８℃环境中，时间２０～１２０min不停振动；

第三阶段：取５～１００ul氯化钠水溶液并加入锌胜肽溶液，再取１～２０mL１０％牛血清白蛋白（buffer serum agent；简称ＢＳＡ）至锌胜肽溶液中，静置于３６℃～３８℃环境中２０～１２０min，之后将锌胜肽溶液置于３℃～５℃ 环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复第三阶段的流程三次以上，最后加入磷酸盐缓冲液（phosphatebuffered solution；简称ＰＢＳ），以得５～５０ml其浓度为１nM～５００ nM的锌胜肽溶液。

步骤１１０：取得一奈米金３的溶液，其取得方法包括有：取５ ～５０mL其浓度为５～５０mM的四氯金酸水溶液，加入５～５０mL其浓度为１０～１００mL的柠檬酸钠，再进行加热程序（如：加热温度介于１００～１２５℃其时间为５～６０min），以得浓度为５～１００nM的奈米金溶液。步骤１１０所取得奈米金３的溶液可进一步加入氢氧化钠，使其酸碱值介于pH ９.０～pH ７.４。

步骤１２０：将奈米金结合锌胜肽，其方法包括有：第一阶段：取１０～１００μl锌胜肽溶液、５～５０mL奈米金溶液、一１～２０mL氯化钠水溶液及一１０～１００mL１０％牛血清白蛋白（buffer serum agent；简称ＢＳＡ）进行混合，并静置于３６℃～３８℃环境中２２～２８小时，再以搅拌子转动，完成一锌胜肽奈米金水溶液；第二阶段：将完成的锌胜肽奈米金水溶液进一步加入５～１００ul氯化钠水溶液，再加入１～２０mL１０％牛血清白蛋白（buffer serum agent；简称ＢＳＡ），将锌胜肽奈米金水溶液置于３６℃～３８℃环境中５０～６０min，之后将锌胜肽奈米金水溶液置于３℃～５℃环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复第二阶段的流程三次以上，最后加入１～１００ml磷酸盐缓冲液（phosphatebuffered solution；简称ＰＢＳ），以得总１～１００ml锌胜肽奈米金水溶液。

本发明的技术特征在于，将奈米金结合锌胜肽，其中先将锌离子键结胜肽（即胺基酸）于进行表面接枝过程，再与另一奈米金进行结合，最后完成的锌胜肽奈米金水溶液，可将抗氧化缓释，增长抗氧化效果，借以有效降低皮肤的自由基，使得完成的锌胜肽奈米金水溶液具多重抗氧化、美白等多重功效，即可进一步将完成的锌胜肽奈米金水溶液应用于如：化妆品、衣着等产业领域。

当将本发明的锌胜肽奈米金水溶液应用于化妆品领域时，通过锌胜肽奈米金水溶液可使人体自行产生更多的胶原蛋白对抗自由基，借以解决皱纹、松弛、晦暗、色斑、缺水肌肤老化的问题。

显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (5)

1.一种奈米金结合锌胜肽之工艺方法，其特征在于：工艺方法包括：

1﹒取得一锌胜肽溶液，其取得方法包括：第一阶段：取一胜肽并加入氯化钠水溶液1～５M，将该胜肽稀释至1～1０mg/ml并置于３℃～５℃环境中，以得一胜肽溶液；第二阶段：再取1～1０ml其浓度为1～1０um的锌离子水溶液与５～1０μl该胜肽溶液相混合，最后总溶液量为1０～２０ml，以得该锌胜肽溶液，并可将该锌胜肽溶液置于３６℃～３８℃环境中，时间２０～1２０min不停振动；第三阶段：取５～1００ul氯化钠水溶液并加入该锌胜肽溶液，再取1～２０mL1０％牛血清白蛋白至该锌胜肽溶液中，静置于３６℃～３８℃环境中２０～1２０min，之后将锌胜肽溶液置于３℃～５℃ 环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复该第一步骤的第三阶段流程三次以上，最后加入磷酸盐缓冲液，以得５～５０ml其浓度为1nM～５００ nM的该锌胜肽溶液；

２﹒再取得一奈米金溶液，其取得方法包括：取浓度为５～５０ mM的四氯金酸水溶液，加入浓度为1０～1００mL的柠檬酸钠，再进行加热程序，以得浓度为５～1００nM的该奈米金溶液；

３﹒将奈米金结合锌胜肽，其方法包括：第一阶段：取1０～1００μl该锌胜肽溶液、５～５０mL该奈米金溶液、一1～２０mL氯化钠水溶液及一1０～1００mL1０％牛血清白蛋白进行混合，并静置于３６℃～３８℃环境中２２～２８小时，再以搅拌子转动，完成一锌胜肽奈米金水溶液；第二阶段：将完成的该锌胜肽奈米金水溶液进一步加入５～1００ul氯化钠水溶液，再加入1～２０mL1０％牛血清白蛋白，将该锌胜肽奈米金水溶液置于３６℃～３８℃环境中５０～６０min，之后将该锌胜肽奈米金水溶液置于３℃～５℃环境中并以２００００转持续一小时，将上层浮出物及溶液吸出并弃置，并重复该第三步骤的第二阶段流程三次以上，最后加入1～1００ml磷酸盐缓冲液，最后完成总1～1００ml锌胜肽奈米金水溶液。

2.如权利要求1所述的奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其特征在于：该胜肽是甘氨酸-组氨酸-离氨酸。

3.如权利要求1所述的奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其特征在于：该锌离子水溶液的锌离子选择硝酸锌、氯化锌或葡萄酸锌中的其中一种。

4.如权利要求1所述的奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其特征在于：该加热程序的加热温度介于1００～1２５℃其时间为５～６０min。

5.如权利要求1所述的奈米金结合锌胜肽的工艺方法，其特征在于：该第二步骤所取得的该奈米金溶液可进一步加入氢氧化钠，使其酸碱值介于pH ９.０～pH ７.４。

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