CN108410795A - 一种培养基的配方及制作方法和培养皿 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种培养基的配方，L‑半胱氨酸盐酸盐一水合物、重组人胰岛素、碱性成纤维细胞生长因子、L‑脯氨酸、L‑亮氨酸、白术多糖、维生素C、人参皂苷、胆固醇、卵磷脂、水溶性非聚电解质高分子、叶绿素、花青素、L‑抗坏血酸和凝聚液体。本发明的优点是：培养基成本低廉，培养效果好，不仅能满足细菌生长的需求，而且能保证细菌的菌液颜色鲜艳。

Description

一种培养基的配方及制作方法和培养皿
技术领域
本发明涉及一种培养基的配方及制作方法和培养皿。
背景技术
细胞培养技术在医学和生物学研究与应用领域广泛使用。通常，使用细胞培养皿盛装液体培养基，细胞在液体中贴壁生长或悬浮生长。常用的细胞培养皿依底部形状的不同可分为平底和圆底（U 型和 V 型）；培养孔的孔数有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等 ；根据材质的不同有 Terasaki 板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。但是，这些细胞培养皿有一个共同的特点，即各培养孔之间绝对分隔，不允许不同培养孔间细胞信息的相互沟通和作用。其不足之处在于：如果密封的培养皿每次的打开都有可能对实验效果产生影响。
现有的培养基，生长效果不好容易产生误操作和不可挽回的错误。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种培养基的配方及制作方法和培养皿。
一种培养基的配方，包括：L-半胱氨酸盐酸盐一水合物、重组人胰岛素、碱性成纤维细胞生长因子、L-脯氨酸、氯化钾、D-(+)-葡萄糖、硫代甘油、细胞增殖促进肽、酵母粉、重组人转铁蛋白、人血白蛋白、IL-2缓释微球、洋葱汁、IFN-γ缓释微球、核黄素、维生素、人参皂苷、D-葡萄糖、叶酸、胆酸亚铁、庆大霉素、氯化钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、氯化镁、胡萝卜素、荷叶碱、氯化钙、水溶性维生素、CD3激发型单抗、人血白蛋白、IL-2缓释微球、L-亮氨酸、白术多糖、维生素C、人参皂苷、胆固醇、卵磷脂、水溶性非聚电解质高分子、叶绿素、花青素、L-抗坏血酸和凝聚液体。
优选的，所述L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数和凝聚液体200-1000份。
一种培养基的制作方法，将包含粉末状营养物质的营养组分和凝聚液体引入包括流通型凝聚室的凝聚器中；其中所述营养组分促进微生物的生长；其中所述凝聚液体以雾化喷雾引入；在所述凝聚室中用所述凝聚液体使所述营养组分湿聚结一段预先确定的时间以形成凝聚的营养培养基颗粒；以及将所述凝聚的营养培养基颗粒暴露于干燥条件一段时间以形成所述干燥的凝聚营养培养基；其中将营养组分引入所述凝聚室中包括以100kg/h至500kg/h的进料速率引入所述营养组分；其中将凝聚液体引入所述凝聚室中包括以25kg/h至350kg/h的喷雾速率引入所述凝聚液体；其中所述凝聚器还包括搅拌叶片，其中所述搅拌叶片以80rpm至5000rpm的叶片旋转速率旋转；其中将所述凝聚的营养培养基暴露于干燥条件包括将所述凝聚的营养培养基暴露于60℃至85℃的预先确定的温度；其中所述进料速率、所述喷雾速率、所述叶片旋转速率和所述预先确定的温度经选择以生产具有100微米至1000微米的第一粒度分布范围的颗粒的干燥的凝聚营养培养基；选择所述颗粒的亚群，所述亚群具有窄于所述第一粒度分布范围的第二粒度分布范围，所述第二粒度分布范围为180微米至500微米。
优选的，粉末状营养物质为L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数的干燥粉末。
一种培养基的培养皿，包括培养皿，培养皿的底部设有一凹陷，凹陷内从上至下依次设有透明电极层、发光片、导电层和绝缘层；导电层连接一根金属线，金属线呈环状粘贴在凹陷的边缘，金属线连接一电源的正极，透明电极层连接一电源的负极，凹陷内还设有一环状加热管，环状加热管固定在凹陷的内壁，环状加热管设有一电源接口，环状加热管和金属线共用一个电源，环状加热管的加热方向朝上，环状加热管的上方设有一导热层，环状加热管设在导电层上方，导热层为封闭的机油层，机油层上方电镀银箔，导电层是由金属铝制成的导电层，凹陷内还设有一隔热层，以绝缘层作为隔热层，绝缘层是由气凝胶毡制成的绝缘层。
优选的，培养皿的侧壁设有两圈隔层，内隔层形成培养皿内圈，外隔层形成培养皿外圈，外圈内设有温度及酸碱度传感器。
优选的，培养皿包括皿盒和连接件，皿盒与连接件可拆卸连接，皿盒底部覆有荧光片，皿盒表面均布有若干培养槽，培养槽呈矩形阵列排布，培养槽呈圆形，横向和纵向上两相邻培养槽均通过连接渠连通，连接渠的深度小于培养槽的深度，位于阵列边缘的所述培养槽沿横向和纵向连有连接渠，连接件与皿盒之间连有增益片，增益片包括从上至下顺序连接的透光层一，增益层和透光层二，透光层一和透光层二均由高透光材料制成；连接件中部设有台阶孔，台阶孔包括上孔和下孔，上孔的直径大小等于增益片的直径大小；上孔内壁上设有齿形卡接槽，增益片底部设有卡接配合槽；增益片和皿盒通过螺纹活动连接，上孔的孔深等于增益片的厚度。
优选的，培养皿上设有通过螺纹与培养皿的侧壁外连接的盖体，盖体为透明材料制成，盖体上还设有通孔，通孔有可开启盖片覆盖并由一圈密封垫片密封，培养皿外壁设有一圈减震环凹槽，减震环设在减震环凹槽内并凸起与减震环凹槽，内圈内还设有采集圈，采集圈对应间通孔，采集圈壁与通孔形成密封。
优选的，外圈内设有一电路盒，电路盒内设有智能检查电路；智能检查电路包括有CPU单元以及与CPU单元信号连接的通信装置，通信装置用于发送信号；还包括有一CCD感应器，CCD感应器设于电路盒上、用于实时拍摄培养皿内圈的情况；通信装置包括有天线，天线设于通信腔内；还包括有存储记录装置，所述存储记录装置与CPU单元信号连接，所述存储记录装置用于实时记录CCD感应器拍摄到的信息；温度传感器与CPU单元信号连接，温度传感器用于实时探测培养皿中的温度情况；温度传感器设于电路盒上；还包括有一LED照明灯，LED照明灯设于电路盒上，LED照明灯用于给培养皿内提供光源。
优选的，盖体上设有插孔，插孔内竖向插入的插片，盖体对应插片处设有横向的顶板，顶板一端设在盖体插孔一侧下端的轨道内，顶板一端与轨道一侧之间设有弹簧，弹簧推送顶板抵在插片上，顶板另一端与插孔下端另一端配合密封，轨道下方设有挡片扣合覆盖。
与现有技术相比，本发明技术方案的有益效果为：培养皿不仅可以实现培养皿的基本功能，而且可以随时随地的移动，而且能随时将CCD数据进行传输外界，极大的方便了科研人员的研究；本发明培养基成本低廉，培养效果好，不仅能满足细菌生长的需求，而且能保证细菌的菌液颜色鲜艳；本发明培养基制备方法简单，步骤少，容易操作。
附图说明
附图 1 为本发明的设备结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图1和具体实施例对本发明作进一步解说。
实施例1本发明提出的一种培养基的配方，包括：L-半胱氨酸盐酸盐一水合物、重组人胰岛素、碱性成纤维细胞生长因子、L-脯氨酸、氯化钾、D-(+)-葡萄糖、硫代甘油、细胞增殖促进肽、酵母粉、重组人转铁蛋白、人血白蛋白、IL-2缓释微球、洋葱汁、IFN-γ缓释微球、核黄素、维生素、人参皂苷、D-葡萄糖、叶酸、胆酸亚铁、庆大霉素、氯化钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、氯化镁、胡萝卜素、荷叶碱、氯化钙、水溶性维生素、CD3激发型单抗、人血白蛋白、IL-2缓释微球、L-亮氨酸、白术多糖、维生素C、人参皂苷、胆固醇、卵磷脂、水溶性非聚电解质高分子、叶绿素、花青素、L-抗坏血酸和凝聚液体。
L-抗坏血酸能起到氧化还原作用，促进吧脂肪、蛋白质的合成。L-脯氨酸是合成蛋白质的重要原料，而且能促进生长，进行正常代谢。氯化胆碱能增加培养基内细胞的数量，核黄素能促进细胞的分裂和再生。叶酸能促进细胞的分裂和再生。硫代甘油用作抗氧剂。配方还包括荷叶碱0.1～100mg/L。荷叶碱具有抗有丝分裂的作用，有较强的抑菌效果。庆大霉素作用于细菌体内的核糖体，抑制细菌蛋白质合成。氯化亚锰作为催化剂。
一种培养基的配方，所述L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数和凝聚液体200-1000份。
一种培养基的配方，所述所述IFN-γ缓释微球通过以下方法制备得到：
(1)将IFN-γ和聚乙二醇分别加入预先添加有葡聚糖、硫酸锌和季戊四醇锌盐的水溶液中，搅拌均匀；其中，IFN-γ、聚乙二醇、葡聚糖、硫酸锌和季戊四醇锌盐的终浓度分别为3-6wt％、5-10wt％、5-6wt％、1-3wt％和2-4wt％；
(2)将聚乳酸-聚羟基乙酸加入二氯甲烷溶液中，超声分散2-3min，得混合物，该混合物中聚乳酸-聚羟基乙酸浓度为20-25wt％；
(3)将步骤(1)所得物与步骤(2)所得物按体积比为1：2-3混合；
(4)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠加入水中，搅拌均匀，聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠的浓度分别为1-2wt％、0.6-1.2wt％和1-2wt％，然后加入步骤(3)所得物，搅拌1-1.5h，用水洗涤，然后离心分离，最后真空冷冻干燥，制得第二细胞因子缓释球体。
一种培养基的制作方法，将包含粉末状营养物质的营养组分和凝聚液体引入包括流通型凝聚室的凝聚器中；其中所述营养组分促进微生物的生长；其中所述凝聚液体以雾化喷雾引入；在所述凝聚室中用所述凝聚液体使所述营养组分湿聚结一段预先确定的时间以形成凝聚的营养培养基颗粒；以及将所述凝聚的营养培养基颗粒暴露于干燥条件一段时间以形成所述干燥的凝聚营养培养基；其中将营养组分引入所述凝聚室中包括以100kg/h至500kg/h的进料速率引入所述营养组分；其中将凝聚液体引入所述凝聚室中包括以25kg/h至350kg/h的喷雾速率引入所述凝聚液体；其中所述凝聚器还包括搅拌叶片，其中所述搅拌叶片以80rpm至5000rpm的叶片旋转速率旋转；其中将所述凝聚的营养培养基暴露于干燥条件包括将所述凝聚的营养培养基暴露于60℃至85℃的预先确定的温度；其中所述进料速率、所述喷雾速率、所述叶片旋转速率和所述预先确定的温度经选择以生产具有100微米至1000微米的第一粒度分布范围的颗粒的干燥的凝聚营养培养基；选择所述颗粒的亚群，所述亚群具有窄于所述第一粒度分布范围的第二粒度分布范围，所述第二粒度分布范围为180微米至500微米。
一种培养基的制作方法，粉末状营养物质为L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数的干燥粉末。
一种培养基的培养皿，包括培养皿1，培养皿的底部设有一凹陷2，凹陷内从上至下依次设有透明电极层、发光片、导电层和绝缘层；导电层连接一根金属线，金属线呈环状粘贴在凹陷的边缘，金属线连接一电源的正极，透明电极层连接一电源的负极，凹陷内还设有一环状加热管，环状加热管固定在凹陷的内壁，环状加热管设有一电源接口，环状加热管和金属线共用一个电源，环状加热管的加热方向朝上，环状加热管的上方设有一导热层，环状加热管设在导电层上方，导热层为封闭的机油层，机油层上方电镀银箔，导电层是由金属铝制成的导电层，凹陷内还设有一隔热层，以绝缘层作为隔热层，绝缘层是由气凝胶毡制成的绝缘层。通过在培养皿的底部设有场致发光片能够使培养皿底部发光照亮培养皿的内部。本发明通过将金属线固定在凹陷的边缘能够防止金属线遮挡视线。通过环状加热管能够对培养皿进行加热，从而能够提高培养基的培养效果。将环状加热管固定在边缘能够防止直接对培养皿底部加热。通过一个电源为环状加热管和金属线供电，能够便于使用。通过银箔不仅能够提高了导电层的导电性，还能提高了导热性，使培养基内的物质均匀受热。
一种培养基的培养皿，培养皿的侧壁设有两圈隔层，内隔层形成培养皿内圈3，外隔层形成培养皿外圈4，外圈内设有温度及酸碱度传感器。
一种培养基的培养皿，培养皿包括皿盒和连接件，皿盒与连接件可拆卸连接，皿盒底部覆有荧光片，皿盒表面均布有若干培养槽，培养槽呈矩形阵列排布，培养槽呈圆形，横向和纵向上两相邻培养槽均通过连接渠连通，连接渠的深度小于培养槽的深度，位于阵列边缘的所述培养槽沿横向和纵向连有连接渠，连接件与皿盒之间连有增益片，增益片包括从上至下顺序连接的透光层一，增益层和透光层二，透光层一和透光层二均由高透光材料制成；连接件中部设有台阶孔，台阶孔包括上孔和下孔，上孔的直径大小等于增益片的直径大小；上孔内壁上设有齿形卡接槽，增益片底部设有卡接配合槽；增益片和皿盒通过螺纹活动连接，上孔的孔深等于增益片的厚度。
一种培养基的培养皿，培养皿上设有通过螺纹与培养皿的侧壁外连接的盖体5，盖体为透明材料制成，盖体上还设有通孔6，通孔有可开启盖片覆盖并由一圈密封垫片密封，培养皿外壁设有一圈减震环凹槽，减震环设在减震环凹槽内并凸起与减震环凹槽，内圈内还设有采集圈，采集圈对应间通孔，采集圈壁与通孔形成密封。方便采样，又不影响内圈培养液；同环境下大概了解目前培养皿内情况。
一种培养基的培养皿，内隔层内还设有软质材料包裹的拉伸层，拉伸层内设有支撑架，更好的形成独立腔体，避免外界因素干扰。
一种培养基的培养皿，外圈内设有一电路盒，电路盒内设有智能检查电路；智能检查电路包括有CPU单元以及与CPU单元信号连接的通信装置，通信装置用于发送信号；还包括有一CCD感应器，CCD感应器设于电路盒上、用于实时拍摄培养皿内圈的情况；通信装置包括有天线，天线设于通信腔内；还包括有存储记录装置，所述存储记录装置与CPU单元信号连接，所述存储记录装置用于实时记录CCD感应器拍摄到的信息；温度传感器与CPU单元信号连接，温度传感器用于实时探测培养皿中的温度情况；温度传感器设于电路盒上；还包括有一LED照明灯，LED照明灯设于电路盒上，LED照明灯用于给培养皿内提供光源。天线为非对称微带天线；包括有一PCB板，PCB板上设有第一振臂单元，所述第一振臂单元的一端包括有第一凹槽，所述第一凹槽的底部为圆弧形凹陷；所述第一振臂单元的上侧设有多个梯形辐射臂，所述第一振臂单元的下侧设有多个三角形辐射臂；第一振臂单元的另一端设有第二凹槽，第二凹槽向上和向下分别延伸出有多条第三凹槽；还包括有第二振臂单元，所述第二振臂单元的一侧设有第一耦合臂，所述第一耦合臂设于第一凹槽内，所述第一耦合臂的自由端为圆弧形凹陷；所述第二振臂单元的两侧均设有两个半圆形的第一耦合凹陷，所述第二振臂单元的另一侧排列设有多个矩形的第二耦合凹陷。每个第一耦合凹陷内均设有一个圆形的寄生振子片，梯形辐射臂的数量为五个；所述三角形辐射臂的数量为五个，第二振臂单元的上端和下端均设有一个矩形的矩形辐射臂，PCB板上还包括有一隔离臂，第一振臂单元设于隔离臂围绕的区域内，第一振臂单元的横向长度为L、第二振臂单元的纵向高度为K；则K=1.23*L；第二凹槽一侧延伸出的第三凹槽的数量为8至10个。
一种培养基的培养皿，盖体上设有插孔，插孔内竖向插入的插片7，盖体对应插片处设有横向的顶板8，顶板一端设在盖体插孔一侧下端的轨道内，顶板一端与轨道一侧之间设有弹簧8，弹簧推送顶板抵在插片上，顶板另一端与插孔下端另一端配合密封，轨道下方设有挡片9扣合覆盖,方便抽样，又不会有外界因素导致培养变化。精确了解培养皿内圈的情况。插片伸入到培养皿内的培养液中，插片上端设有覆盖在盖体上保持密封的遮片。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种培养基的配方，其特征在于：包括：L-半胱氨酸盐酸盐一水合物、重组人胰岛素、碱性成纤维细胞生长因子、L-脯氨酸、氯化钾、D-(+)-葡萄糖、硫代甘油、细胞增殖促进肽、酵母粉、重组人转铁蛋白、人血白蛋白、IL-2缓释微球、洋葱汁、IFN-γ缓释微球、核黄素、维生素、人参皂苷、D-葡萄糖、叶酸、胆酸亚铁、庆大霉素、氯化钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钠、氯化镁、胡萝卜素、荷叶碱、氯化钙、水溶性维生素、CD3激发型单抗、人血白蛋白、IL-2缓释微球、L-亮氨酸、白术多糖、维生素C、人参皂苷、胆固醇、卵磷脂、水溶性非聚电解质高分子、叶绿素、花青素、L-抗坏血酸和凝聚液体。
2.根据权利要求1所述的一种培养基的配方，其特征在于：所述L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数和凝聚液体200-1000份。
3.一种权利要求1所述的培养基的制作方法，其特征在于：将包含粉末状营养物质的营养组分和凝聚液体引入包括流通型凝聚室的凝聚器中；其中所述营养组分促进微生物的生长；其中所述凝聚液体以雾化喷雾引入；在所述凝聚室中用所述凝聚液体使所述营养组分湿聚结一段预先确定的时间以形成凝聚的营养培养基颗粒；以及将所述凝聚的营养培养基颗粒暴露于干燥条件一段时间以形成干燥的凝聚营养培养基；其中将营养组分引入凝聚室中包括以100kg/h至500kg/h的进料速率引入所述营养组分；其中将凝聚液体引入所述凝聚室中包括以25kg/h至350kg/h的喷雾速率引入所述凝聚液体；其中所述凝聚器还包括搅拌叶片，其中搅拌叶片以80rpm至5000rpm的叶片旋转速率旋转；其中将所述凝聚的营养培养基暴露于干燥条件包括将所述凝聚的营养培养基暴露于60℃至85℃的预先确定的温度；其中所述进料速率、所述喷雾速率、所述叶片旋转速率和所述预先确定的温度经选择以生产具有100微米至1000微米的第一粒度分布范围的颗粒的干燥的凝聚营养培养基；选择所述颗粒的亚群，所述亚群具有窄于所述第一粒度分布范围的第二粒度分布范围，所述第二粒度分布范围为180微米至500微米。
4.根据权利要求3的一种培养基的制作方法，其特征在于：粉末状营养物质为L-半胱氨酸盐酸盐一水合物1-5质量份数、重组人胰岛素3-4质量份数、碱性成纤维细胞生长因子1-2质量份数、L-脯氨酸1-2质量份数、氯化钾5-10质量份数、D-(+)-葡萄糖4-6质量份数、硫代甘油4-5质量份数、细胞增殖促进肽1-2质量份数、酵母粉7-11质量份数、重组人转铁蛋白1-2质量份数、人血白蛋白1-2质量份数、IL-2缓释微球1-2质量份数、洋葱汁6-11质量份数、IFN-γ缓释微球6-11质量份数、核黄素3-5质量份数、维生素1-9质量份数、人参皂苷1-8质量份数、D-葡萄糖1-11质量份数、叶酸1-11质量份数、胆酸亚铁1-12质量份数、庆大霉素1-13质量份数、氯化钠7-11质量份数、碳酸氢钠8-10质量份数、磷酸二氢钠10-20质量份数、氯化镁1-5质量份数、胡萝卜素2-8质量份数、荷叶碱3-9质量份数、氯化钙4-7质量份数、水溶性维生素10-15质量份数、CD3激发型单抗11-15质量份数、人血白蛋白12-15质量份数、IL-2缓释微球11-19质量份数、L-亮氨酸1-5质量份数、白术多糖1-5质量份数、维生素C1-5质量份数、人参皂苷1-8质量份数、胆固醇3-5质量份数、卵磷脂2-5质量份数、水溶性非聚电解质高分子1-5质量份数、叶绿素1-5质量份数、花青素2-6质量份数、L-抗坏血酸1-5质量份数的干燥粉末。
5.一种根据权利要求1所述的培养基的培养皿，其特征在于：包括培养皿，培养皿的底部设有一凹陷，凹陷内从上至下依次设有透明电极层、发光片、导电层和绝缘层；导电层连接一根金属线，金属线呈环状粘贴在凹陷的边缘，金属线连接一电源的正极，透明电极层连接一电源的负极，凹陷内还设有一环状加热管，环状加热管固定在凹陷的内壁，环状加热管设有一电源接口，环状加热管和金属线共用一个电源，环状加热管的加热方向朝上，环状加热管的上方设有一导热层，环状加热管设在导电层上方，导热层为封闭的机油层，机油层上方电镀银箔，导电层是由金属铝制成的导电层，凹陷内还设有一隔热层，以绝缘层作为隔热层，绝缘层是由气凝胶毡制成的绝缘层。
6.根据权利要求5所述的一种培养基的培养皿，其特征在于：培养皿的侧壁设有两圈隔层，内隔层形成培养皿内圈，外隔层形成培养皿外圈，外圈内设有温度及酸碱度传感器。
7.根据权利要求5所述的一种培养基的培养皿，其特征在于：培养皿包括皿盒和连接件，皿盒与连接件可拆卸连接，皿盒底部覆有荧光片，皿盒表面均布有若干培养槽，培养槽呈矩形阵列排布，培养槽呈圆形，横向和纵向上两相邻培养槽均通过连接渠连通，连接渠的深度小于培养槽的深度，位于阵列边缘的所述培养槽沿横向和纵向连有连接渠，连接件与皿盒之间连有增益片，增益片包括从上至下顺序连接的透光层一，增益层和透光层二，透光层一和透光层二均由高透光材料制成；连接件中部设有台阶孔，台阶孔包括上孔和下孔，上孔的直径大小等于增益片的直径大小；上孔内壁上设有齿形卡接槽，增益片底部设有卡接配合槽；增益片和皿盒通过螺纹活动连接，上孔的孔深等于增益片的厚度。
8.根据权利要求5所述的一种培养基的培养皿，其特征在于：培养皿上设有通过螺纹与培养皿的侧壁外连接的盖体，盖体为透明材料制成，盖体上还设有通孔，通孔有可开启盖片覆盖并由一圈密封垫片密封，培养皿外壁设有一圈减震环凹槽，减震环设在减震环凹槽内并凸起与减震环凹槽，内圈内还设有采集圈，采集圈对应间通孔，采集圈壁与通孔形成密封。
9.根据权利要求6所述的一种培养基的培养皿，其特征在于：外圈内设有一电路盒，电路盒内设有智能检查电路；智能检查电路包括有CPU单元以及与CPU单元信号连接的通信装置，通信装置用于发送信号；还包括有一CCD感应器，CCD感应器设于电路盒上、用于实时拍摄培养皿内圈的情况；通信装置包括有天线，天线设于通信腔内；还包括有存储记录装置，所述存储记录装置与CPU单元信号连接，所述存储记录装置用于实时记录CCD感应器拍摄到的信息；温度传感器与CPU单元信号连接，温度传感器用于实时探测培养皿中的温度情况；温度传感器设于电路盒上；还包括有一LED照明灯，LED照明灯设于电路盒上，LED照明灯用于给培养皿内提供光源。
10.根据权利要求8所述的一种培养基的培养皿，其特征在于：盖体上设有插孔，插孔内竖向插入的插片，盖体对应插片处设有横向的顶板，顶板一端设在盖体插孔一侧下端的轨道内，顶板一端与轨道一侧之间设有弹簧，弹簧推送顶板抵在插片上，顶板另一端与插孔下端另一端配合密封，轨道下方设有挡片扣合覆盖。
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CN110777111A (zh) * 2019-10-28 2020-02-11 浙江大学 一种含人参皂苷的湖羊胚胎体外培养液

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