一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液
技术领域
本发明涉及临床病理诊断试剂领域,尤其是一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液。
背景技术
据报道中国每年新增癌症患者占到全球新增数量的20%以上,癌症患者的早期诊断和早期治疗是提高患者存活率的关键。目前癌症的早期诊断主要依靠病理切片进行判断。然而,传统的病理制片需要固定、脱水、透明等十余个步骤,整个过程持续16-22个小时,导致常规病理诊断需要3-5个工作日才能完成,不能及时为病人提供诊断和治疗依据,因此病理切片技术的快速高效就显的非常重要。此外,本领域技术人员使用的固定剂大多为10%的中性福尔马林溶液,使用的透明剂大多为二甲苯;福尔马林、二甲苯易挥发且具有一定的毒性,对人的神经系统、呼吸系统、造血系统、免疫系统及生殖系统具有毒害作用,是致突变、致癌物质之一,长期接触会出现神经衰弱综合症及机体免疫力下降等症状,快速石蜡制片的过程中因需要加热,导致试剂挥发加速,不仅不利于工作人员的健康,而且不利于环境的保护。因此,发明一种不含福尔马林、二甲苯的新型环保快速生物组织处理液是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,克服现有技术的不足,将病理诊断时间缩短至1-3小时,并且生物组织处理液不含对人体有害的挥发性物质,确保医护工作人员的健康和环境的保护。
本发明解决其技术问题所采取的技术方案是:
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,所述A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物70-90份、脂肪酸10-30份;所述B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物30-60份、异构烷烃10-40份、高级醇10-20份。
进一步的,所述A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物80份、脂肪酸20份;所述B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物45份、异构烷烃25份、高级醇15份。
进一步的,所述醇类化合物为乙醇,或为异丙醇,或为乙醇和异丙醇按8:1-3的体积比配制而成。
进一步的,所述脂肪酸为冰醋酸,或为蚁酸,或为冰醋酸和蚁酸按1-5:4-7的体积比配制而成。
进一步的,所述长链碳氢化合物为正庚烷,或为正己烷,或为正庚烷和正己烷按2-5:3的体积比配制而成。
进一步的,所述异构烷烃为为异构十二烷、异构十六烷、异构二十烷中的任意一种,或为异构十二烷和异构十六烷按2-3:1-5的体积比配制而成,或为异构十二烷和异构二十烷按4:5-7的体积比配制而成,或为异构十六烷和异构二十烷按3:5-8的体积比配制而成,或为异构十二烷、异构十六烷、异构二十烷按2-3:3-5:5-8的体积比配制而成。
进一步的,所述高级醇为正己醇,或为正庚醇,或为正己醇和正庚醇按5:4-9的体积比配制而成。
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法,包括如下步骤:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为80-130r/min,搅拌8-15min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为80-130r/min,搅拌5-10min,即得B液。
进一步的,所述步骤S2中液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min;所述步骤S4中液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min。
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备甲状腺/肺/肝/卵巢/乳腺/前列腺的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将甲状腺/肺/肝/卵巢/乳腺/前列腺的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用所述的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的甲状腺/肺/肝/卵巢/乳腺/前列腺的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为10-40min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用所述的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的甲状腺/肺/肝/卵巢/乳腺/前列腺的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为30-90min。
S4、将步骤S3中处理后的甲状腺/肺/肝/卵巢/乳腺/前列腺的活检标本取出,浸蜡5-30min,包埋、切片、HE染色、封片。
本发明的有益效果是:与现有技术相比,本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液包括A液和B液,A液主要由醇类化合物和脂肪酸配制而成,一液多用,兼具固定、脱水和透明效果,尤其是固定和脱水效果显著,B液主要由长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇配制而成,一液多用,兼具固定、脱水和透明效果,尤其是脱水和透明效果效果显著;经过A液和B液对病理组织的固定、脱水、透明一站式处理,与传统的分部组织处理比较,将诊断速度从3-5天缩减到1-3小时,极大地提高了诊断效率,减少了患者等待的时间和焦虑之苦,尤其对需要接受特殊治疗,为手术的患者赢得了时间,降低了病人住院天数和住院费用;本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液配方简单、搭配合理、制备迅速,且不含对人体有害的福尔马林、二甲笨易挥发性物质,确保了病理切片制备过程中不影响医护人员的身体健康和环境的保护;本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液能够应用于甲状腺、肺、肝、乳腺、卵巢和前列腺等组织的病理切片制备,与传统的组织处理试剂处理的组织制成的切片相比,无明显的差别,效果优于传统的组织处理试剂,是一种完全可以替代传统组织处理试剂的生物组织处理试剂。
附图说明
图1为本发明实施例7中制备得到的前列腺组织石蜡切片;
图2为本发明实施例6中制备得到的前列腺组织石蜡切片。
具体实施方式
实施例1
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物70份、脂肪酸10份;B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物30份、异构烷烃10份、高级醇10份。所述醇类化合物为乙醇,所述脂肪酸为冰醋酸,所述长链碳氢化合物为正庚烷,所述异构烷烃为为异构十二烷,所述高级醇为正己醇。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌5min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备甲状腺病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将甲状腺的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的甲状腺的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为30min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的甲状腺的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为60min;
S4、将步骤S3中处理后的甲状腺的活检标本取出,浸蜡15min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备甲状腺病理切片时仅需2.42小时患者即可得到病理诊断结果;得到的甲状腺病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例2
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物90份、脂肪酸30份;B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物60份、异构烷烃40份、高级醇20份。所述醇类化合物为异丙醇,所述脂肪酸为蚁酸,所述长链碳氢化合物为正己烷,所述异构烷烃为异构十二烷和异构十六烷按2:3的体积比配制而成。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌15min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备肺的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将肺的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的肺的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为20min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的肺的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为50min;
S4、将步骤S3中处理后的肺的活检标本取出,浸蜡20min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备肺的病理切片时仅需2.17小时患者即可得到病理诊断结果;得到的肺的病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例3
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物78份、脂肪酸26份;B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物47份、异构烷烃22份、高级醇16份。所述醇类化合物为异丙醇,所述脂肪酸为冰醋酸和蚁酸按1:6的体积比配制而成,所述长链碳氢化合物为正庚烷和正己烷按4:3的体积比配制而成,所述异构烷烃为异构十六烷,所述高级醇为正己醇和正庚醇按5:4的体积比配制而成。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备肝的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将肝的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的肝的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为25min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的肝的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为60min;
S4、将步骤S3中处理后的肝的活检标本取出,浸蜡15min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备肝的病理切片时仅需2.33小时患者即可得到病理诊断结果;得到的肝的病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例4
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,所述A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物75份、脂肪酸15份;所述B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物20份、异构烷烃20份、高级醇12份。所述醇类化合物为乙醇和异丙醇按8:1的体积比配制而成,所述脂肪酸为冰醋酸,所述长链碳氢化合物为正庚烷和正己烷按4:3的体积比配制而成,所述异构烷烃为异构十二烷和异构二十烷按4:5的体积比配制而成,所述高级醇为正己醇。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备卵巢的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将卵巢的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的卵巢的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为20min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的卵巢的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为45min;
S4、将步骤S3中处理后的卵巢的活检标本取出,浸蜡10min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备卵巢的病理切片时仅需1.92小时患者即可得到病理诊断结果;得到的卵巢的病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例5
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物85份、脂肪酸25份;B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物45份、异构烷烃35份、高级醇18份。所述醇类化合物为乙醇,所述脂肪酸为蚁酸,所述长链碳氢化合物为正庚烷和正己烷按5:3的体积比配制而成,所述易购烷烃为异构十六烷和异构二十烷按3:7的体积比配制而成,所述高级醇为正己醇。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备乳腺的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将乳腺的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的乳腺的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为35min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的乳腺的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为70min;
S4、将步骤S3中处理后的乳腺的活检标本取出,浸蜡20min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备乳腺的病理切片时仅需2.75小时患者即可得到病理诊断结果;得到的乳腺的病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例6
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液,包括A液和B液,A液主要由以下体积份数的原料配制而成:醇类化合物80份、脂肪酸20份;B液主要由以下体积份数的原料配制而成:长链碳氢化合物45份、异构烷烃25份、高级醇15份。所述醇类化合物为乙醇和异丙醇按8:3的体积比配制而成,所述脂肪酸为冰醋酸和蚁酸按3:5的体积比配制而成,所述长链碳氢化合物为正庚烷和正己烷按4:3的体积比配制而成,所述异构烷烃为异构十二烷、异构十六烷、异构二十烷按2:5:6的体积比配制而成,所述高级醇为正己醇和正庚醇按5:8的体积比配制而成。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备方法步骤如下:
S1、按规定体积分数依次称取醇类化合物和脂肪酸;
S2、将步骤S1中称取的醇类化合物和脂肪酸倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌10min,即得A液;
S3、按规定体积分数依次称取长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇;
S4、将步骤S3中称取的长链碳氢化合物、异构烷烃和高级醇倒入液体搅拌机中,液体搅拌机转数设置为105r/min,搅拌8min,即得B液。
本实施例的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液在制备前列腺的病理切片中的用途:
S1、将微波或超声组织处理仪开机后设定工作时间,将肝的活检标本放入处理缸内,活检标本的大小不大于15mm*10mm*3mm;
S2、开启微波或超声波,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液对步骤S1中的前列腺的活检标本进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为10min;
S3、待步骤S2处理完成后,采用本实施例制备的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的B液对步骤S2中的前列腺的活检标本继续进行固定、脱水和透明处理,处理温度为50℃,处理时间为30min;
S4、将步骤S3中处理后的前列腺的活检标本取出,浸蜡10min,包埋、切片、HE染色、封片。
本实施例中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的A液和B液制备过程均简单、快速;在制备前列腺的病理切片时仅需1.5小时患者即可得到病理诊断结果;得到的前列腺的病理切片完整、染色鲜艳、结构清晰、层次分明、组织无明显收缩,符合优质HE切片的要求。
实施例7
本实施例为对比例,采用背景技术中所述的传统的病理组织制片方法制备前列腺病理切片,前列腺组织取材来源与实施例6相同,本实施例的固定剂选用10%中性缓冲福尔马林,脱水剂选用乙醇,透明剂选用二甲苯,固定时间为24小时,脱水时间为2小时、透明时间为2h,病理诊断结果需3个工作日完成。
实验例8
一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备耗时实验:采用计时器记录实施例1-6中的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液制备过程耗费的时间;
实施例1-7制备病理切片到得出病理诊断结构的耗时实验:采用计时器记录实施例1-7中从病理切片制备到得出病理检测结果所耗费的时间;
本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液制备得到的病理切片与传统方法制备得到的病理切片外形对比:观察实施例6和实施例7中制备得到的前列腺组织石蜡切片,对比分析两者之间的差别。
上述实验结果如表1和表2所示:
表1
实施例 |
用于病理切片的新型环保快速组织处理液的制备耗时(min) |
病理切片制备至拿到诊断结果耗时(h) |
实施例1 |
23 |
2.42 |
实施例2 |
35 |
2.17 |
实施例3 |
28 |
2.33 |
实施例4 |
28 |
1.92 |
实施例5 |
28 |
2.75 |
实施例6 |
28 |
1.5 |
实施例7 |
- |
72 |
由表1可知,本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液制备过程仅需20-30min,采用本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液制备病理切片,从病理切片制备到病人拿到病理诊断结果仅需1.5-2.75h,其中实施例6中从前列腺病理切片制备到病人拿到病理诊断结果仅耗费1.5h,而传统的病理切片制备方法中不仅采用了对医护人员身体有害的福尔马林做固定剂,采用了对医护人员身体有害的二甲苯做透明剂,而且从病理切片制备到病人拿到诊断结果需要耗费72h,这表明本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液配方简单,搭配合理,能够极大地提高诊断效率,减少患者等待的时间和焦虑之苦,尤其对需要接受特殊治疗,为手术的患者赢得了时间,降低了病人住院天数和住院费用。
表2
项目 |
实施例6 |
实施例7 |
切片裂痕 |
切片完整,无裂痕 |
切片完整、无裂痕 |
硬度 |
硬度适中 |
硬度较大 |
组织收缩情况 |
组织无明显收缩 |
组织无明显收缩 |
颜色 |
染色鲜艳 |
染色鲜艳 |
结构及层次 |
结构清晰、层次分明 |
结构清晰、层次分明 |
由表2结合图1和图2对比分析可知,本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液制备得到的前列腺组织切片完整,无裂痕,硬度适中,组织无明显收缩,染色鲜艳,结构清晰,层次分明,与传统方法制备得到的前列腺组织石蜡切片无明显差别,甚至硬度效果优于传统方法制备得到的前列腺石蜡切片。
综上所述:本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液配方简单,搭配合理,无毒,无刺激性气味,制备迅速;采用本发明的一种用于病理切片的新型环保快速组织处理液处理得到的病理组织切片完整,无裂痕,硬度适中,组织无明显收缩,染色鲜艳,结构清晰,层次分明;将诊断速度从3-5天缩减到1-3小时,是一种完全可以替代传统组织处理试剂的生物组织处理试剂。
上述具体实施方式仅是本发明的具体个案,本发明的专利保护范围包括但不限于上述具体实施方式的产品形态和式样,任何符合本发明权利要求书且任何所属技术领域的普通技术人员对其所做的适当变化或修饰,皆应落入本发明的专利保护范围。