CN108635467A - 藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用 - Google Patents

藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。本发明主要探究藏药绿萝花醇提物对溶菌酶成纤维的影响，以期为防治淀粉样沉积疾病寻找到新的有效的治疗药物。本发明结果显示，绿萝花醇提物组的荧光强度与正常的单独培养组相比均呈现明显下降，表明其起到了抑制淀粉样蛋白成纤维的作用。

Description

藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的 应用
技术领域
本发明涉及医药保健品领域；具体涉及天然药物藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。
背景技术
根据报告显示，随着人们生活水平的提高，医疗条件的改善，人均寿命的延长，阿尔兹海默症等“老年病”的发病率逐年增长。阿尔兹海默症的一个病理表现是β-淀粉样蛋白的沉积，β-淀粉样蛋白大部分是由蛋白质错误折叠而产生，因与淀粉一样遇碘会发生阳性反应变蓝而得名；β-淀粉样蛋白富含β折叠结构，并能由此形成不溶的、更具惰性、无支链的纤维状物质淀粉样蛋白纤维。那些具有因蛋白错误折叠而在体内异常沉积特征的疾病又可以被统称为淀粉样疾病，包括神经退行性疾病(如帕金森综合征、阿尔兹海默症、疯牛病等)及各类全身性蛋白质沉积疾病(如二型糖尿病等)等。
溶菌酶在机体中存在范围广泛，是通过交联β折叠片机制成纤维的典型代表。如由人溶菌酶蛋白突变而导致的遗传性非神经性系统性淀粉样疾病是一种典型的淀粉样疾病。因为鸡溶菌酶与人溶菌酶相比在序列方面的相似度可达70％，高级结构也十分相似。同时具有出色的溶剂溶解性，方便经济等特点，因此是人溶菌酶的优良替代模型。鸡溶菌酶的成纤维过程伴随着β折叠片的增多，最终导致结合的硫黄素T(ThT)被440nm波长的激发光所激发，在480nm左右产生发射光，并伴有很大程度上的荧光增强。
化学药物治疗是目前针对淀粉样疾病的主流疗法，但该种治疗方法在耐药性及机体耐受度等方面的负面报道层出不穷。面对这一进退维谷的窘境，纯天然的本草类药物重新进入人们的视野。藏医药学是我国传统医药的重要组成部分，在藏地先民不断探索的基础上广泛的融合了汉地医学、印度医学的理论成果，从而形成了具有鲜明民族特色的藏医理论。西藏有一种学名结香的特有珍贵植物山桠皮，有报道称其干花品牌山桠皮-绿萝花可作为茶饮，对糖尿病、高血压、冠心病及各种血管炎症均有治疗效果。而淀粉样蛋白纤维常在心脑血管、神经系统及部分脏器中发生沉积，故山桠皮-绿萝花对鸡溶菌酶成纤维的作用效果值得研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种本草类藏药绿萝花在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用，以期为该类疾病的防治寻找到新的治疗药物。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：本草类藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。
优选的结香(绿萝花-山桠皮干花)醇提物在制备抑制淀粉样蛋白成纤维的药物中的应用。
上述的应用，所述的淀粉样蛋白是鸡溶菌酶。
上述的应用，所述的本草醇提物是结香(绿萝花-山桠皮干花)醇提物。
上述的应用，所述的绿萝花醇提物的制备方法是乙醇回流结合超声提取：绿萝花粉碎后称取5g绿萝花粉末，用75％乙醇按料液g/mL比1:8浸泡30分钟；60℃、350W超声提取30分钟；抽滤，得滤液A和滤渣；滤渣以75％乙醇65℃回流两次，每次1小时；抽滤，得滤液B和滤渣；合并滤液A和滤液B，并于60℃减压浓缩；烘干。回收提取物，-20℃保存。
上述的应用，所述的藏药绿萝花醇提物的IC50值为0.065mg/mL。
结香(绿萝花-山桠皮干花)是瑞香科、结香属植物，灌木，高约0.7-1.5米，小枝粗壮，褐色，常作三叉分枝，幼枝常被短柔毛，韧皮极坚韧，叶痕大，直径约5毫米。叶在花前凋落，长圆形，披针形至倒披针形，先端短尖，基部楔形或渐狭。产自河南、陕西及长江流域以南诸省区。野生或栽培。茎皮纤维可做高级纸及人造棉原料，全株入药能舒筋活络，消炎止痛，可治跌打损伤，风湿痛；也可作兽药，治牛跌打。亦可栽培供观赏。
本发明的有益效果是：本发明探究了藏药结香(绿萝花)的乙醇提取物对淀粉样蛋白(如鸡溶菌酶)成纤维的影响。结果显示藏药结香(绿萝花)乙醇提取物组的荧光强度与正常组相比均呈现明显下降，均表现出了浓度依赖性。表明藏药结香(绿萝花)乙醇提取物能通过显著延长成核期而起到抑制蛋白成纤维的作用，其IC50值约为0.065mg/mL。
附图说明
图1单独培养的鸡溶菌酶成纤维的ThT荧光检测图。
图2在8天培养中各浓度藏药绿萝花醇提物对鸡溶菌酶成纤维的ThT荧光检测图。
图3培养第8天时绿萝花醇提物的剂量-效应图。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。
实施例1藏药绿萝花醇提物抑制鸡溶菌酶成纤维的研究
(一)藏药绿萝花醇提物
绿萝花醇提物的制备方法是乙醇回流结合超声提取：
1)称取5g绿萝花粉末，用75％乙醇按料液比1:8浸泡30分钟；60℃、350W超声提取30分钟；抽滤，得滤液A和滤渣；
2)滤渣以75％乙醇65℃回流两次，每次1小时；抽滤，得滤液B和滤渣；
3)合并滤液A和滤液B，并于60℃减压浓缩；烘干。回收提取物，-20℃保存，得藏药绿萝花醇提物。
(二)溶液配制
1、鸡溶菌酶以50mM、pH2.0的甘氨酸-盐酸溶成终浓度为1mg/mL(现用现溶)的溶液；
2、绿萝花醇提物以二甲基亚砜(DMSO)溶成浓度为50mg/mL的母液，放入-20℃冰箱存储待用；
3、对照品三七醇提物以二甲基亚砜(DMSO)溶成终浓度为50mg/mL的母液，放入-20℃冰箱存储待用；
4、硫磺素T(Thioflavine T，ThT)以50mM、pH7.0的磷酸缓冲液溶成浓度为1mM的溶液，于4℃冰箱内避光保存。
(三)鸡溶菌酶成纤维培养
向2mL冻存管中加入500uL配制好的鸡溶菌酶；实验组加入相同体积的鸡溶菌酶，然后按0.5、1、1.5mg/mL的浓度梯度加入不同体积的绿萝花醇提物溶液；阳性对照组使三七醇提物的工作浓度为0.6mg/mL；以封口膜密封；65℃，90转/分气浴震荡培养。每组样品做三个平行样，鸡溶菌酶培养时间梯度为0-7天，绿萝花醇提物组为1、3、5、7天取样。
(四)样品ThT荧光检测
取培养样品300uL，加入1mM的ThT储液30uL充分混匀，以pH7.0的磷酸缓冲液稀释至3mL，充分混匀后进行检测。激发波长为440nm，全波长扫描发射光谱，记录480nm波长左右的峰值强度；记录的数据以统计学软件GraphPad Prism5进行统计分析，先做散点图，后以公式Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^(X-LogIC50))进行拟合。作图时绿萝花简称为LLH，三七简计为SQ。
如图1所示，在培养5天后，单独鸡溶菌酶培养组的成纤维量达到一个稳定值，平台期的荧光强度约为375.40a.u.，即该培养条件下鸡溶菌酶成纤维明显；而绿萝花各浓度单独培养组的ThT数值在5-15a.u.之间浮动，即该条件下单独提取物不会成纤维，不会对实验组检测造成干扰。
如图2所示，以前期验证有效的三七提取物的IC50浓度为对照组，进行对照试验。结果如图，绿萝花醇提物对鸡溶菌酶成纤维的抑制能力呈现为浓度依赖性抑制。实验中选取的绿萝花醇提物的最低浓度为0.5mg/mL，其在第7天的荧光值为221.5a.u.，显著低于三七提取物组的298.6a.u.，即抑制效果更强。
如图3所示，对培养至第7天的样品数据进行剂量-效应分析可知，绿萝花醇提物抑制鸡溶菌酶成纤维的IC50值约为0.51mg/mL。

Claims (7)

1.藏药绿萝花醇提物在制备防治淀粉样蛋白疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述藏药绿萝花醇提物在制备抑制淀粉样蛋白成纤维的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的淀粉样蛋白是鸡溶菌酶。
4.根据权利要求1、2和3所述的应用，其特征在于：所述的淀粉样蛋白是以气浴的方式加以培养。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的藏药绿萝花醇提物的制备方法是采用乙醇回流结合超声提取，具体步骤如下：1)将藏药绿萝花粉末用75％乙醇浸泡30分钟；60℃、350W超声提取30分钟；抽滤，得滤液A和滤渣；2)滤渣以75％乙醇65℃回流两次，每次1小时；抽滤，得滤液B和滤渣；3)合并滤液A和滤液B，并于60℃减压浓缩；烘干；回收提取物，-20℃保存，得藏药绿萝花醇提物。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：步骤1)中所述藏药绿萝花粉末与75％乙醇按料液g/mL比1:8的比例进行投料。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的藏药绿萝花醇提物的IC50值为0.065mg/mL。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110904080A (zh) * 2019-12-10 2020-03-24 陕西理工大学 一种溶菌酶淀粉样纤维模型的诱导方法
CN114259531A (zh) * 2022-02-09 2022-04-01 西藏天虹科技股份有限责任公司 绿萝花提取工艺及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USPP4054P (en) * 1976-06-15 1977-05-10 Kim; Heeyoung Scindapsus aureus marble queen Heeyoung Kim
CN101181446A (zh) * 2007-11-23 2008-05-21 广东工业大学 西藏绿萝花及其提取物在制备糖尿病药物中的应用
KR20180020573A (ko) * 2016-08-18 2018-02-28 (주)진셀팜 팬다 고무나무 및 스킨답서스 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속 또는 미세먼지 제거용 화장료 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USPP4054P (en) * 1976-06-15 1977-05-10 Kim; Heeyoung Scindapsus aureus marble queen Heeyoung Kim
CN101181446A (zh) * 2007-11-23 2008-05-21 广东工业大学 西藏绿萝花及其提取物在制备糖尿病药物中的应用
KR20180020573A (ko) * 2016-08-18 2018-02-28 (주)진셀팜 팬다 고무나무 및 스킨답서스 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속 또는 미세먼지 제거용 화장료 조성물

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KULJEET KAUR: ""Ethnobotanical and phytopharmacological review of Scindapsus officinalisGajapippali"", 《ASIAN PACIFIC JOURNAL OF TROPICAL BIOMEDICINE》 *
何剑为: ""淀粉样蛋白纯化方法的研究进展"", 《生物技术通报》 *
刘怡萱: ""藏药绿萝花治疗糖尿病的研究进展"", 《高原科学研究》 *
竺琴: ""西藏绿萝花提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制及抗氧化作用"", 《中药材》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110904080A (zh) * 2019-12-10 2020-03-24 陕西理工大学 一种溶菌酶淀粉样纤维模型的诱导方法
CN114259531A (zh) * 2022-02-09 2022-04-01 西藏天虹科技股份有限责任公司 绿萝花提取工艺及其应用

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