CN108375645A - 一种芭蕉根的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种芭蕉根的检测方法,该方法包括性状、鉴别、检查和浸出物的测定方法。该检测方法准确,灵敏度高,重复性好,结果可靠,能有效控制芭蕉根的质量,确保芭蕉根的药效。
Description
技术领域
本发明涉及一种芭蕉根的检测方法,属于药品技术的领域。
背景技术
芭蕉根为芭蕉科植物芭蕉Musa basjooSieb.et Zucc的干燥根茎。在贵州黔东南苗族地区称为嘎脑修,各苗乡侗寨均有栽培,为苗族地区习用药材。收载于2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中,具有清热解毒、止渴、利尿之功效。主治天行热病、烦闷、消渴、黄疸、水肿、脚气、血淋、血崩及痈肿疗疮、丹毒。芭蕉始载于《汉书》,又名:巴且,《史记》中称之为天苴,《群芳谱》中称之为绿天、扇仙,《分类草药性》称之为香蕙、甘露树、大叶芭蕉、芭蕉头。现代研究表明,芭蕉根中含有蛋白质、氨基酸、糖类、有机酸、皂苷和黄酮等物质,药理实验研究发现芭蕉根具有抗炎镇痛、抑菌和抑制α-葡萄糖苷酶活性,临床上鲜芭蕉根外敷治疗阑尾周围脓肿,民间用于治疗乳糜尿,效果良好[3]。目前贵州制药企业将芭蕉根与其他药材配伍开发了“骨康胶囊”、“肿痛舒喷雾剂”等制剂,“骨康胶囊”主要用于消肿止痛、活血化瘀、舒筋痛络、补肾壮骨,也可用于骨折。“肿痛舒喷雾剂”则主要具有活血化瘀,消肿止痛之功效。用于跌打损伤,淤血肿痛肿痛,软组织挫伤等疾病。
综上,芭蕉根具有良好的临床药用价值,值得深入研究开发。目前《贵州身中药材、民族药材质量标准》2003年版收载芭蕉根,其只有性状和鉴别等项目,且鉴别中只有粉末显微鉴别和一项理化鉴别,不能较全面的控制芭蕉根的质量,因此本研究将对芭蕉根的质量控制方法进行系统研究,为提升芭蕉根的质量标准奠定基础,为了更好地控制芭蕉根的质量,确保药效,本发明提供了芭蕉根的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于,提供一种芭蕉根的检测方法;该检测方法准确,灵敏度高,重复性好,结果可靠,能有效控制芭蕉根的质量,确保芭蕉根的药效。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案实现:一种芭蕉根的检测方法,包括性状、鉴别、检查和浸出物测定法。
前述的芭蕉根的检测方法中,所述鉴别方法为:取本品粉末0.5~1.5g,加甲醇10~50ml,超声处理5~25分钟,滤过,滤液浓缩至0.5~2ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材0.5~1.5g,加甲醇10~50ml,超声处理5~25分钟,滤过,滤液浓缩至0.5~2ml,作为对照药材溶液;按照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各1~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚:乙酸乙酯=10~30:0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5~15%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为0.5~1.5:5~15;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或360-370nm紫外光灯下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
前述的芭蕉根的检测方法中,所述鉴别方法为:取本品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为对照药材溶液;按照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚:乙酸乙酯=20:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或365nm紫外光灯,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
前述的芭蕉根的检测方法中,所述展开剂中石油醚的温度为60~90℃。
前述的芭蕉根的检测方法中,所述检测方法为:
【性状】本品呈圆柱形,具棕色鳞片,直径10~20cm;切片不规则,表面棕黄色,凹凸不平,可见明显纤维束,质韧,不易折断,断面不整齐,纤维状;气香,味淡;
【鉴别】(1)粉末灰褐色;淀粉粒极多,直径6~105μm,多为单粒,复粒少见,海螺状、肾形、类多边形或不规则形,脐点点状、短缝状或人字形,层纹明显;导管为螺纹导管及网纹导管;草酸钙针成束或散在;
(2)取本品粉末2g,加水20ml,置50~60℃水浴浸提30分钟,滤过,取滤液5ml置具塞试管中,强力振摇1分钟,产生大量持久的泡沫;
(3)取本品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材1g,同法制成对照药材溶液;照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以60~90℃的石油醚:乙酸乙酯=20:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或365nm紫外光灯下检视;供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点及荧光斑点;
【检查】水分 照《中国药典》2015年版四部通则0832第二法进行测定;
总灰分 照《中国药典》2015年版四部通则2302进行测定;
【浸出物】照《中国药典》2015年版四部通则2201水溶性浸出物测定法项下的热浸法测定;
【性味归经】甘,寒;归胃、脾、肝经。
发明人进行了大量的实验,以下是本发明所述检测方法的研究
实验例1:薄层色谱鉴别
1仪器与试药
1.1仪器
REPROSTAR3薄层数码成像系统(瑞士CAMAG);EL204电子天平(METTLER);DK-98-Ⅱ型水浴锅(天津泰斯特有限公司);超声波清洗仪(上海跃进医用光学器械厂);超纯水机(四川沃特尔科技发展有限公司);青岛海洋化工有限公司薄层色谱硅胶板G、烟台江友硅胶开发有限公司薄层色谱硅胶板G、青岛鼎康硅胶有限公司薄层色谱硅胶板G。
1.2试药
对照药材(中国食品药品检定研究院,批号:121264-200502),甲醇、石油醚、乙酸乙酯、乙醇、硫酸均为分析纯,购于国药集团化学试剂有限公司。
芭蕉根,共12批,由贵州医科大学大学中药标本馆龙庆德副教授鉴定其为芭蕉的干燥根茎,样品信息见表1。
表1芭蕉根药材信息
2、试验方法
2.1色谱条件优化和系统适用性试验
在薄层色谱鉴别试验中,分别对供试品溶液制备的提取方法、提取溶剂、展开条件等进行了考察,曾经采用芭蕉根药材甲醇超声处理,作为样品溶液,点样,以石油醚-丙酮(7:4)为展开剂,置紫外光灯(365nm)下检视,多数药材斑点对应较好,但放置时间较长药材斑点对应不好;因此,进一步进行有关提取、薄层色谱条件和显色条件摸索研究,最终拟确定的试验条件为:取待测品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液。另取芭蕉根对照药材1g,同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60~90℃):乙酸乙酯(20:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点。
利用该方法对4批芭蕉根样品进行分析,结果如图1所示。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2.2耐用性试验
2.2.1不同品牌薄层色谱硅胶G板考察
照上述的薄层色谱鉴别方法,分别考察青岛鼎康硅胶G板、青岛海洋硅胶G板和烟台江友牌硅胶HSG板的展开效果,结果见图2。
结果表明,三个不同品牌的硅胶G板下色谱图斑点清晰,说明三个不同品牌硅胶G板能用于芭蕉根的鉴别。
2.2.2不同展开湿度的考察
分别以不同浓度硫酸调节的展开环境相对湿度为30%,50%,70%,在25℃温度下分别考察不同相对湿度展开的效果,如图3所示。
从图5结果所示,不同湿度下色谱图的斑点清晰,均能较好的鉴别芭蕉根,说明该方法受湿度的影响不明显。
2.2.3不同展开温度的考察
分别在10℃,25℃,35℃,相对湿度为50%下展开,考察不同温度对展开的影响,如图4所示。
从图4结果所示,不同温度下色谱图的斑点清晰,均能较好的鉴别芭蕉根,说明该方法受湿度的影响不明显。
2.2.4供试品溶液稳定性考察
将同一批次的本品粉末于3天前、2天前、1天前、当天按上述的方法制备供试品溶液,分别点于同一硅胶G板上,展开,显色,如图5所示。
结果显示,放置1~3天的供试品溶液展开后的色谱图基本一致,表明供试品溶液在3天稳定性良好。
3.样品测定
照上述薄层色谱鉴别方法,对12批样品进行测定,结果图6所示。
结果显示,各批样品均符合规定。
实验例2:水分测定
照《中国药典》2015年版通则0832水分测定法(第二法烘干法)测定,取待测品粉末(过二号筛)2g,精密称定,平铺于干燥恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,精密称定,开启瓶盖在105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,放冷30分钟,精密称定,再在上述温度干燥1小时,放冷,称重,至连续称重的差异不超过5mg为止,根据减失重量,计算含水量(%),结果如表2所示。
表2芭蕉根的水分测定结果
从表2结果可见,12批芭蕉根水分含量范围是10.04%~13.85%。
实验例3:总灰分测定
照《中国药典》2015年版通则2302灰分测定法测定,取待测品粉末2g,置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确0.01g)缓缓炽灼,注意避免燃烧,至完全炭化,逐渐升高温度至550℃,使完全灰化并恒重,根据残渣重量,计算供试品中总灰分的含量(%),结果见表3,12批芭蕉根药材中总灰分含量为4.17%~7.93%。
表3芭蕉根的总灰分测定结果
实验例4:浸出物测定
根据钱海兵,孙宜春,黄婕,王祥培,时珍国医国药.2010,21(4):780-1,对芭蕉根不同提取物进行抗炎镇痛研究,发现其水提取物和80%乙醇提取物均具有较好的镇痛活性,此外,传统用药方式也常为水煮,故确定采用水为溶剂,照《中国药典》2015年版四部通则2201浸出物测定法中热浸法进行浸出物测定。
取待测品粉末(过二号筛)2g,精密称定,置100ml的锥形瓶中,精密加水50ml,密塞,称定重量,静置1小时后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1小时,放冷后,取下锥形瓶,密塞,再称定重量,用水补足减失重量,摇匀,用干燥滤器滤过,精密量取滤液25ml置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小时,置干燥器中冷却30分钟,迅速精密称定重量,以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%),结果如表4所示。
表4芭蕉根的水溶性浸出物检测结果
根据上表结果可知,12批次芭蕉根水溶性浸出物含量为6.16%~13.0%。
本发明的有益效果在于:本发明的目的在于,提供一种芭蕉根的检测方法;采用薄层色谱鉴别试验对芭蕉根进行鉴别,并对芭蕉根水分、总灰分和浸出物的含量进行测定,该检测方法准确,灵敏度高,重复性好,结果可靠,能有效控制芭蕉根的质量,确保芭蕉根的药效。
附图说明
图1是芭蕉根薄层色谱鉴别系统适用性试验结果;1~4为4批芭蕉根样品;
5为对照药材;
图2是不同品牌薄层色谱硅胶G板展开TLC图;A.青岛鼎康硅胶G板;B.青岛海洋硅胶G板;C.烟台江友牌硅胶HSG板;1~4为4批芭蕉根样品溶液;5为对照药材
图3是不同展开湿度TLC图;A.30%;B.50%;C.70%;1~4为4批芭蕉根样品;5为对照药材;
图4是不同展开温度TLC图;A.10℃;B.25℃;B.35℃;1~4为4批样品;5为对照药材;
图5是供试品溶液稳定性考察TLC图;1.当天;2.放置1天;3.放置2天;4.放置3天;5为对照药材;
图6是不同批次样品的TLC图;1~12为12批样品,序号同表1;13为对照药材;
图7是芭蕉根粉末显微特征图;1.淀粉粒;2.导管;3.草酸钙针晶。
下面结合实施例对本发明作进一步的说明
具体实施方式
实施例:
一种芭蕉根的检测方法,
芭蕉根为芭蕉科植物芭蕉Musa basjooSied.et Zucc.的干燥根茎。全年均可采收,除去须根及泥沙,切片晒干。芭蕉根为贵州省少数民族用药。
【性状】芭蕉根呈圆柱形,具棕色鳞片,直径10~20cm。切片不规则,表面棕黄色,凹凸不平,可见明显纤维束,质韧,不易折断,断面不整齐,纤维状。气香,味淡。
【鉴别】
(一)显微鉴别
《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版规定本品粉末特征为:“粉末灰褐色。淀粉粒极多,直径6~65μm,多为单粒,复粒少见,海螺状、肾形、类多边形或不规则形,脐点点状、短缝状或人字形,层纹明显。螺纹或网纹导管。”经试验研究,发现特征除了淀粉粒、导管外,芭蕉根粉末中还存在草酸钙针晶,因此根据观察的显微特征(如图7所示),芭蕉根显微特征为:粉末灰褐色。淀粉粒极多,直径6~105μm,多为单粒,复粒少见,海螺状、肾形、类多边形或不规则形,脐点点状、短缝状或人字形,层纹明显。螺纹或网纹导管。针晶甚多,散在或成束存在。
(二)理化鉴别
《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版收载了芭蕉根理化鉴别,取本品粉末2g,加水20ml,置50~60℃水浴浸提30分钟,滤过,取滤液5ml置具塞试管中,强力振摇1分钟,产生大量持久的泡沫。
(三)薄层色谱鉴别
取本品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液。另取芭蕉根对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(75℃)-乙酸乙酯(20:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
【含量测定】
(一)水分含量测定:照《中国药典》2015年版通则0832水分测定法(第二法烘干法)测定,取本品粉末(过二号筛)2g,精密称定,平铺于干燥恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,精密称定,开启瓶盖在105℃干燥5小时,将瓶盖盖好,移置干燥器中,放冷30分钟,精密称定,再在上述温度干燥1小时,放冷,称重,至连续称重的差异不超过5mg为止,根据减失重量,计算含水量(%);
本品水分不得超过15.0%。
(二)总灰分含量测定:照《中国药典》2015年版通则2302灰分测定法测定,取本品粉末2g,置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确0.01g)缓缓炽灼,注意避免燃烧,至完全炭化,逐渐升高温度至550℃,使完全灰化并恒重,根据残渣重量,计算供试品中总灰分的含量(%);
本品总灰分不得超过9.0%
(三)浸出物含量测定:取本品粉末(过二号筛)2g,精密称定,置100ml的锥形瓶中,精密加水50ml,密塞,称定重量,静置1小时后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1小时,放冷后,取下锥形瓶,密塞,再称定重量,用水补足减失重量,摇匀,用干燥滤器滤过,精密量取滤液25ml置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小时,置干燥器中冷却30分钟,迅速精密称定重量,以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(%);
本品水溶性浸出物不得少于5.5%。
【性味归经】甘,寒。归胃、脾、肝经。
【功能主治】清热解毒,止渴利尿。用于风热头痛,水肿脚气,血淋,肌肤肿痛,丹毒。
【用法用量】15~30g。或研末服用。
【贮藏】置通风干燥处。
Claims (5)
1.一种芭蕉根的检测方法,其特征在于:包括性状、鉴别、检查和浸出物的测定方法。
2.根据权利要求1所述的芭蕉根的检测方法,其特征在于:所述鉴别方法为:取本品粉末0.5~1.5g,加甲醇10~50ml,超声处理5~25分钟,滤过,滤液浓缩至0.5~2ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材0.5~1.5g,加甲醇10~50ml,超声处理5~25分钟,滤过,滤液浓缩至0.5~2ml,作为对照药材溶液;按照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各1~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚:乙酸乙酯=10~30:0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5~15%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为0.5~1.5:5~15);在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或360-370nm紫外光灯下检视;
供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
3.根据权利要求2所述的芭蕉根的检测方法,其特征在于:所述鉴别方法为:取本品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为对照药材溶液;按照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚:乙酸乙酯=20:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或365nm紫外光灯,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
4.根据权利要求2或3所述的芭蕉根的检测方法,其特征在于:所述展开剂中石油醚的温度为60~90℃。
5.根据权利要求1所述的芭蕉根的检测方法,其特征在于:所述检测方法为:
【性状】本品呈圆柱形,具棕色鳞片,直径10~20cm;切片不规则,表面棕黄色,凹凸不平,可见明显纤维束,质韧,不易折断,断面不整齐,纤维状;气香,味淡;
【鉴别】(1)粉末灰褐色;淀粉粒极多,直径6~105μm,多为单粒,复粒少见,海螺状、肾形、类多边形或不规则形,脐点点状、短缝状或人字形,层纹明显;导管为螺纹导管及网纹导管;草酸钙针成束或散在;
(2)取本品粉末2g,加水20ml,置50~60℃水浴浸提30分钟,滤过,取滤液5ml置具塞试管中,强力振摇1分钟,产生大量持久的泡沫;
(3)取本品粉末1g,加甲醇30ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至1ml,作为供试品溶液;另取芭蕉根对照药材1g,同法制成对照药材溶液;照《中国药典》薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以60~90℃的石油醚:乙酸乙酯=20:1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,硫酸乙醇溶液中硫酸与乙醇的体积比为1:10;在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光或365nm紫外光灯下检视;供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点及荧光斑点;
【检查】 水分 照《中国药典》2015年版四部通则0832第二法进行测定;
总灰分 照《中国药典》2015年版四部通则2302进行测定;
【浸出物】照《中国药典》2015年版四部 通则2201水溶性浸出物测定法项下的热浸法测定;
【性味归经】 甘,寒;归胃、脾、肝经。
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2018
- 2018-02-01 CN CN201810101832.0A patent/CN108375645A/zh active Pending
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