CN108356072A - 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法 - Google Patents

一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108356072A
CN108356072A CN201810127775.3A CN201810127775A CN108356072A CN 108356072 A CN108356072 A CN 108356072A CN 201810127775 A CN201810127775 A CN 201810127775A CN 108356072 A CN108356072 A CN 108356072A
Authority
CN
China
Prior art keywords
heavy
contaminated soil
extracts
soil
metal contaminated
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
CN201810127775.3A
Other languages
English (en)
Inventor
邓新辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan University of Technology
Original Assignee
Hunan University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan University of Technology filed Critical Hunan University of Technology
Priority to CN201810127775.3A priority Critical patent/CN108356072A/zh
Publication of CN108356072A publication Critical patent/CN108356072A/zh
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/02—Extraction using liquids, e.g. washing, leaching, flotation

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种重金属污染土壤微生物浸提修复的方法。将经过液体培养基培养的Aspergillus niger F2的孢子液培养后，制备得到微生物浸提菌液；浸提风干、破碎的重金属污染土壤。采用本发明修复重金属（Pb Zn,Cd和Cu）复合污染土壤，土壤Pb的去除率达到77%，Cd的去除率达到100%，Zn的去除率达到92.3%，Cu的去除率达到54.4%。该发明修复重金属污染土壤成本低、见效快、重金属去除高效、不存在二次污染等优点。

Description

一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法
技术领域
本发明涉及土壤修复与环境保护领域，具体涉及一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法。
背景技术
冶金行业属于重污染行业，由于冶炼废渣的堆放和冶炼废水、废气的排放导致冶炼厂周边区域土壤遭受复合重金属的严重污染。土壤重金属污染具有隐蔽性、长期性、不可逆性和污染物在土壤中移动性差、滞留时间长、不能被微生物降解的特点，并可经水、植物等介质最终影响人类健康。因此，治理和恢复的难度大。世界各国对土壤重金属污染修复技术进行广泛的研究，取得了可喜的进展。
重金属污染土壤的修复思路可归纳为两种：一种是重金属仍然存在于土壤中，通过向土壤中添加化学试剂或微生物等方法降低重金属的毒性，从而达到治理的目的，该方法的一个潜在弱点在于，重金属仍存在于土壤中，如果土壤环境发生变化，有可能再次造成污染，而且使用化学试剂有可能还会导致二次污染。另一种是通过溶解络合等方式减少土壤中重金属的含量，该方法成本低，操作简单，起效快，不存在二次污染的可能性，但是现有技术中往往无法同时浸提多种重金属，无法同时修复土壤中的多种重金属，并且现有技术中对重金属的去除率偏低，往往低于40％，而且操作复杂。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种重金属污染土壤微生物浸提修复菌株的应用方法，利用 Aspergillus niger F2产生的代谢产物，通过溶解络合方式减少土壤中重金属的含量达到治理的目的。具体是利用该菌株治理重金属复合污染土壤的微生物浸提修复方法。该方法操作简便、成本低廉、修复快速、且不存在二次污染的风险。
一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法，是将菌株Aspergillus niger F2，GDMCC No.60213用于浸提修复重金属污染的土壤。
具体包括以下步骤：
S1.取已配好的液体培养基灭菌，待冷却后，接种菌株Aspergillus niger F2的孢子液，恒温培养，过滤，取滤液即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去杂质、风干破碎、过筛、灭菌；
S3.将步骤S2中灭菌后的土壤用步骤S1中制备得到的菌液浸提。
优选地，所述的菌液是经过液体培养基培养得到的菌液，液体培养基组成为：100g蔗糖，0.5g KH2PO4,1.5g NaNO3,0.025g MgSO4·7H2O,0.025g KCl,1.6g酵母浸膏，加水至1L，自然pH值。
优选地，所述步骤S1中的孢子液是挑取Aspergillus niger F2菌落，于LB固体培养基培养获取菌株孢子，7天后，用无菌枪头吸取无菌水冲洗Aspergillus niger F2的菌落表面，制备得到Aspergillus niger F2的孢子液。
优选地，所述Aspergillus niger F2孢子液为107～108数量级。
进一步地，优选Aspergillus niger F2的孢子液数量级为107。
优选地，所述步骤S1～S3中灭菌温度为115～121℃，灭菌时间为15～30min。
进一步地，优选灭菌温度为121℃时，灭菌时间为15min。
优选地，步骤S1中孢子液与液体培养基的体积比为1:99；所述恒温培养条件为26～29℃, 恒温振荡培养4～6天。
优选地，步骤S1中恒温培养条件为28℃，恒温振荡培养4天。
优选地，步骤S2中的重金属包括Pb、Zn、Cu和Cd，并且以上重金属在土壤中的含量分别不低于500mg/kg、500mg/kg、400mg/kg和1mg/kg。
优选地，步骤S2中过筛使用6～20目筛，进一步优选10目。
优选地，步骤S3中待修复土壤质量与菌液体积的比例为1:20～1:5。
优选地，步骤S3中浸提温度为26～29℃恒温；浸提速度110～130r/min；浸提6～8天。
进一步地，优选步骤S3中浸提温度为28℃恒温；浸提速度120r/min；浸提7天。
发明人采集湖南某冶炼厂周边区域土壤，经过筛选、分离，得到一株在代谢过程中能产生大量小分子有机酸的具重金属抗性的真菌，根据真菌分子系统发育谱，设计并合成ITS区扩增引物ITS4/ITS5和18S扩增引物，采用优化的CTAB法提取基因组DNA，以提取的基因组DNA为模板，ITS4/ITS5为引物，扩增ITS区序列；NS1/NS8为序列，扩增18SDNA区序列，PCR产物纯化与测序。以GenBank数据库作参考，对测序结果进行BLAST分析，经鉴定，该菌株为Aspergillus niger，命名为Aspergillus niger F2。该菌株已于2017年7月27日向广东省微生物研究所菌种保藏中心(GDMCC)提交专利生物保藏，保藏号GDMCC No.60213。
与现有技术相比本发明具有以下有益效果：
(1)本发明所公开的重金属污染土壤微生物浸提修复的方法创造性的从土壤中分离的黑曲霉菌作用于重金属污染土壤，同时结合浸提工艺，极大的提升了微生物对重金属污染土壤的净化能力，并且成本低，经济效益显著。本发明利用从冶炼厂周边区域土壤中分离出来的土著菌株修复重金属污染土壤，除培养基外，不需添加其他化学试剂，且浸提的重金属可回收，提纯后实现废物利用，因此该修复方法成本较低，经济效益广。
(2)本发明所公开的重金属污染土壤微生物浸提修复的方法操作简便，其作用时间短，效率高，所需菌液少，同时对多种重金属土壤污染物产生显著的过滤浸提作用。本发明修复重金属污染土壤的时间为7天，土壤Pb的去除率达到77％，Cd的去除率达到100％，Zn的去除率达到92.3％，Cu的去除率达到54.4％，对土壤中Pb、Cd、Zn的作用效果最为显著。
(3)相比直接接种或投放微生物至土壤中等修复方法，本发明的浸提修复法更安全环保，无二次污染。重金属已从土壤中提取出来，且浸提液中的重金属可回收利用，对周围环境和地下水不会造成二次污染，大大降低了土壤修复后的生态风险。
(4)本发明方法修复土壤后，大量培养基保留在土壤中，能改善土壤理化性质、提高土壤的肥力，有利于土壤生态修复。
(5)本发明所述的微生物浸提修复方法既适用于不同种类重金属污染土壤的修复，也适用于不同污染程度的土壤的修复，适用范围广。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定，除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备，除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1 Aspergillus niger F2的筛选与制备
(1)培养基的配制
称100g蔗糖，0.5g KH2PO4，1.5g NaNO3，0.025g MgSO4·7H2O，0.025g KCl，1.6 g酵母浸膏，加水至1L，自然pH值，制备得到液体培养基；
称取酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂15g，加入H2O至1L，自然pH值制备得到LB 固体培养基。
(2)Aspergillus niger F2的制备
Y1.称取10g土壤样品置于150mL已灭菌的锥形瓶中，加入10mL灭菌液体培养基，于30℃培养箱中培养4天后取0.1mL用灭菌水稀释成10-5的土壤悬液；
Y2.充分振荡后取0.1mL接种于添加了重金属的LB固体培养基上(LB固体培养基中重金属质量浓度为Pb 1500mg/L、Cd 80mg/L、Cu 2000mg/L、Zn 2000mg/L)，将菌液用三角棒涂布于培养基上，将平板倒置于28℃培养箱中培养6～7天，采用常规平板划线法分离纯化，即得Aspergillus niger F2菌落；
Y3.分别挑取Aspergillus niger F2菌落，于LB固体培养基培养以获取菌株孢子，7天后，用无菌枪头吸取无菌水冲洗Aspergillus niger F2的菌落表面，制备得到Aspergillus niger F2孢子液。
实施例2重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体步骤包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌15min；
S3.取步骤S2中灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃，120r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提效率。
经检测土壤中重金属Pb,Zn,Cu和Cd的含量由原来的771mg/kg，6724mg/kg，494mg/kg和306mg/kg降低至Pb177.33mg/kg,Zn 517.75mg/kg，Cu 225.26mg/kg和Cd 0 mg/kg，Pb的去除率达到77％，Zn的去除率达到92.3％，Cu的去除率达到54.4％，Cd的去除率达到100％，土壤中重金属的总去除率为88.9％。
实施例3重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于115℃灭菌锅中灭菌30min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过8目筛，再放置于115℃灭菌锅中灭菌30min；S3.取步骤S2中灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃，110r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES 测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提效率。
经检测土壤中重金属Pb,Zn,Cu和Cd的含量由原来的771mg/kg，6724mg/kg，494mg/kg和306mg/kg降低至Pb 198.33mg/kg,Zn 564.14mg/kg，Cu 244.12mg/kg和Cd 0 mg/kg，Pb的去除率达到74.3％，Zn的去除率达到91.6％，Cu的去除率达到50.6％，Cd 的去除率达到100％，重金属总去除率为87.9％。
实施例4重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于115℃灭菌锅中灭菌30min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过14目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌30min；
S3.取步骤S2中灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃，130r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提效率。
经检测土壤中重金属Pb,Zn,Cu和Cd的含量由原来的771mg/kg，6724mg/kg，494mg/kg和306mg/kg降低至Pb 188.56mg/kg,Zn 551.35mg/kg，Cu 236.21mg/kg和Cd 0 mg/kg，Pb的去除率达到75.5％，Zn的去除率达到91.8％，Cu的去除率达到52.2％，Cd 的去除率达到100％，重金属总去除率为88.2％。
实施例5重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体步骤包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌15min；
S3.取步骤S2中灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃，120r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提量。
经检测土壤中仅含一种重金属Zn，Zn的含量由原来的8301mg/kg降低至1282mg/kg。
实施例6重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体步骤包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌15min；
S3.取步骤S2中灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃，120r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提效率。
经检测土壤中重金属Pb,Zn,Cu和Cd的含量由原来的1123mg/kg，8321mg/kg，621mg/kg和426mg/kg降低至Pb 464.9mg/kg,Zn 1811.2mg/kg，Cu 325.3mg/kg和Cd 102.9mg/kg，每公斤土壤重金属的总去除量为3993.79mg。
对比例1重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体步骤包括以下步骤：
取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，同时加入5g按实施例2中步骤S2制备的灭菌土壤，置于恒温振荡培养箱中(28℃，120r/min)振荡培养11 天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，11天后过滤，采用ICP-OES测定滤液中重金属浓度；
经检测土壤中Pb的去除率60.9％，Zn的去除率63.7％，Cu的去除率22.9％，Cd的去除率92.5％，重金属总去除率为62.1％。
对比例2重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体步骤包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌15min；
S3.取灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃， 120r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提效率。
经检测土壤中Pb的去除率1.0％，Zn的去除率1.5％，Cu的去除率0％，Cd的去除率0.5％，重金属总去除率为1.33％
对比例3重金属污染土壤微生物浸提修复方法
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于115℃灭菌锅中灭菌30min，待冷却至室温后，接种107数量级的Aspergillus niger F2的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛；
S3.取5g步骤S2中处理后的土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃,120r/min)振荡培养7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度。
经检测土壤中重金属Pb、Zn、Cu和Cd的去除率分别为：Pb的去除率100％，Zn 的去除率78.5％，Cu的去除率17.1％，Cd的去除率100％，重金属总去除率为79.2％。
对比例4重金属污染土壤微生物浸提修复方法
具体包括以下步骤：
S1.取99mL已配好的液体培养基，装入250mL锥形瓶中，于121℃灭菌锅中灭菌15min，待冷却至室温后，接种107数量级的Penicillium Chrysogenum F1的孢子液1mL，置于28℃恒温振荡培养箱中培养4天，过滤，取滤液，即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去掉明显杂质后风干破碎，过10目筛，再放置于121℃灭菌锅中灭菌15min；
S3.取灭菌后的5g土壤加入步骤S1中制备得到的菌液中，置于恒温振荡培养箱中(28℃， 120r/min)振荡培养，浸提7天，每隔一天取出称重，由于水分蒸发减少的重量通过添加无菌水恒重，7天后过滤，测滤液中重金属浓度；采用ICP-OES测定滤液中各重金属的浓度，根据所测的浓度及5g土壤所含重金属在100mL培养基中的浓度，计算各重金属的浸提量。
经检测，土壤中重金属Pb,Zn,Cu和Cd的含量由原来的771mg/kg，6724mg/kg，494mg/kg和306mg/kg降低至Pb 650.01mg/kg、Zn 3280.16mg/kg、Cu 239.63mg/kg和Cd131.41mg/kg，重金属总去除量为3993.79mg/kg。
实施例2～4与对比例1～3中不同种类的重金属去除率与重金属总去除率结果如表1 所示，对比例1接种孢子液的同时加入灭菌土壤，降低了各项重金属的去除率，总重金属去除率也受到了很大影响；对比例2未接种孢子液，极大的降低了各项重金属的去除率；对比例3中的土壤未灭菌，虽然Pb的去除率有所增加，但是Zn与Cu的去除率大大降低，重金属的总去除率也略低于所有实施例。
表1重金属去除率对比表
实施例2、实施例5、实施例6与对比例4中重金属种类与每千克土壤中重金属的总去除量结果如表2所示，实施例2中重金属总去除量为对比例4使用其他真菌浸提重金属量的两倍；实施例2中多种重金属总去除量与实施例5中单一重金属去除量略高；实施例2 的重金属总去除量与实施例6中高度污染的土壤中重金属总去除量相近，由此可见，本发明所述的微生物浸提修复方法既适用于不同种类重金属污染土壤的修复，也适用于不同污染程度的土壤的修复，适用范围广。
表2重金属总去除量对比表
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明的技术方案所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，将菌株Aspergillus niger F2，GDMCC No.60213的菌液用于浸提修复重金属污染土壤；具体包括以下步骤：
S1.取已配好的液体培养基灭菌，待冷却后，接种菌株Aspergillus niger F2的孢子液，恒温培养，过滤，取滤液即得菌液；
S2.将重金属污染土壤去杂质、风干破碎、过筛、灭菌；
S3.将步骤S2中灭菌后的土壤用步骤S1中制备得到的菌液浸提。
2. 根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，所述菌液是经过液体培养基培养得到的菌液，所述液体培养基组成为：100g蔗糖，0.5g KH2PO4,1.5g NaNO3, 0.025g MgSO4ˑ7H2O, 0.025g KCl, 1.6 g 酵母浸膏，加水至1L，自然pH值。
3. 根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S1中的孢子液是挑取Aspergillus niger F2菌落，于LB固体培养基培养获取菌株孢子，7天后，用无菌枪头吸取无菌水冲洗Aspergillus niger F2的菌落表面，制备得到Aspergillus niger F2孢子液。
4. 根据权利要求3所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于， 所述Aspergillus niger F2孢子液为107~108数量级。
5. 根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于， 所述步骤S1~S3中灭菌温度为115~121℃，灭菌时间为15~30min。
6.根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S1中孢子液与液体培养基的体积比为1:99；所述恒温培养条件为26~29℃,恒温振荡培养4~6天。
7. 根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S2中的重金属包括Pb、Zn、Cu 、Cd，并且以上重金属在土壤中的含量分别不低于500mg/kg、500mg/kg、400 mg/kg和1 mg/kg。
8.根据权利要求3所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S2中过筛使用6~20目筛。
9.根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S3中待修复土壤质量与菌液体积的比例为1:20~1:5。
10. 根据权利要求1所述的重金属污染土壤微生物浸提修复方法，其特征在于，步骤S3中浸提温度为26~29℃恒温；浸提速度110~130 r/min；浸提6~8天。
CN201810127775.3A 2018-02-08 2018-02-08 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法 Withdrawn CN108356072A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810127775.3A CN108356072A (zh) 2018-02-08 2018-02-08 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810127775.3A CN108356072A (zh) 2018-02-08 2018-02-08 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108356072A true CN108356072A (zh) 2018-08-03

Family

ID=63004831

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810127775.3A Withdrawn CN108356072A (zh) 2018-02-08 2018-02-08 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108356072A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109772868A (zh) * 2019-03-07 2019-05-21 新昌县以琳环保科技有限公司 防治重金属污染的土壤生态环境修复方法
CN111657304A (zh) * 2020-06-30 2020-09-15 安徽农业大学 黄曲霉tl-f3强化黑麦草修复重金属污染土壤的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101624575A (zh) * 2008-12-26 2010-01-13 魏蒙 一种高活性医用光合菌的培养方法和固体活菌的加工方法
CN102527713A (zh) * 2011-12-29 2012-07-04 中南大学 一种重金属污染土壤生物淋滤修复方法
CN102911875A (zh) * 2012-04-27 2013-02-06 河南省科学院生物研究所有限责任公司 一种多功能土壤修复菌剂的制备方法
CN103992955A (zh) * 2014-05-17 2014-08-20 青岛科技大学 一株黑曲霉ny-1及提高其杀虫活性的改进技术和应用
CN104479682A (zh) * 2014-11-28 2015-04-01 云南民族大学 一种重金属铅污染土壤淋洗液的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101624575A (zh) * 2008-12-26 2010-01-13 魏蒙 一种高活性医用光合菌的培养方法和固体活菌的加工方法
CN102527713A (zh) * 2011-12-29 2012-07-04 中南大学 一种重金属污染土壤生物淋滤修复方法
CN102911875A (zh) * 2012-04-27 2013-02-06 河南省科学院生物研究所有限责任公司 一种多功能土壤修复菌剂的制备方法
CN103992955A (zh) * 2014-05-17 2014-08-20 青岛科技大学 一株黑曲霉ny-1及提高其杀虫活性的改进技术和应用
CN104479682A (zh) * 2014-11-28 2015-04-01 云南民族大学 一种重金属铅污染土壤淋洗液的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
邓新辉等: "具重金属抗性产酸菌的分离及生物学特性研究", 《生态环境学报》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109772868A (zh) * 2019-03-07 2019-05-21 新昌县以琳环保科技有限公司 防治重金属污染的土壤生态环境修复方法
CN111657304A (zh) * 2020-06-30 2020-09-15 安徽农业大学 黄曲霉tl-f3强化黑麦草修复重金属污染土壤的方法
CN111657304B (zh) * 2020-06-30 2021-10-08 安徽农业大学 黄曲霉tl-f3强化黑麦草修复重金属污染土壤的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Shin et al. Characterization of lead resistant endophytic Bacillus sp. MN3-4 and its potential for promoting lead accumulation in metal hyperaccumulator Alnus firma
CN104450552B (zh) 一种硫酸盐还原菌‑解磷菌及其在联合修复镉污染土壤中的应用
CN102527713B (zh) 一种重金属污染土壤生物淋滤修复方法
CN105670980B (zh) 一种修复重金属污染土壤的微生物菌株的应用
CN107236693A (zh) 贝莱斯芽孢杆菌js25r及其应用
CN104531537B (zh) 一种黄曲霉菌株及其应用
CN106493167A (zh) 地衣芽孢杆菌和菌剂及它们的应用和钝化重金属的方法
CN108893419A (zh) 微生物菌株及其筛选方法与在处理重金属污染土壤中的应用
CN102652957A (zh) 表面活性剂产生菌-菌根联用修复土壤多环芳烃的方法
CN107338199A (zh) 一种促进磷矿粉溶解的菠萝泛菌及其应用
CN100560713C (zh) 净化砷污染的木糖氧化无色杆菌sy8及用途
CN109055258A (zh) 一种贪铜菌及贪铜菌制剂和贪铜菌制剂在重金属污染土壤修复中的应用
CN113122463B (zh) 巨大芽孢杆菌及该菌修复铬污染土壤的方法
CN107032505A (zh) 用于修复含铅废水的复合菌剂
CN108356072A (zh) 一种重金属污染土壤微生物浸提修复方法
Yang et al. Inhibition of biofilm formation by Cd2+ on Bacillus subtilis 1JN2 depressed its biocontrol efficiency against Ralstonia wilt on tomato
CN108866105B (zh) 用肠杆菌ly6生产纳米硫化镉的方法
CN114134086A (zh) 一株暹罗芽孢杆菌yw17菌株、生防菌剂及在土传病害防治和/或促进植物生长中的应用
CN105861362A (zh) 一株耐重金属的放线菌菌株及其应用
CN109593667A (zh) Cr(VI)还原菌的鉴定及其培养方法
CN111334457A (zh) 一株具有土壤重金属修复作用的天神芽孢杆菌及其应用
CN104805018B (zh) 一株可同时降解多种邻苯二甲酸酯的壤霉菌(Agromyces sp．)MT‑E
CN102676440A (zh) 一种重金属抗性菌在强化蕈菌富集土壤重金属上的应用及制剂
CN114657090A (zh) 一株微杆菌及其修复铬污染土壤的微生物还原方法
CN108085275A (zh) 一种抑制家蚕白僵病病原真菌的路德维希肠杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WW01 Invention patent application withdrawn after publication

Application publication date: 20180803

WW01 Invention patent application withdrawn after publication