CN108315376A - 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法 - Google Patents

一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108315376A
CN108315376A CN201810354900.4A CN201810354900A CN108315376A CN 108315376 A CN108315376 A CN 108315376A CN 201810354900 A CN201810354900 A CN 201810354900A CN 108315376 A CN108315376 A CN 108315376A
Authority
CN
China
Prior art keywords
tylosin
quality
nutritive liquid
fermented nutritive
fermented
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810354900.4A
Other languages
English (en)
Inventor
连剑飞
高岭
居亚东
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
QILU PHARMACEUTICAL (INNER MONGOLIA) CO Ltd
Original Assignee
QILU PHARMACEUTICAL (INNER MONGOLIA) CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by QILU PHARMACEUTICAL (INNER MONGOLIA) CO Ltd filed Critical QILU PHARMACEUTICAL (INNER MONGOLIA) CO Ltd
Priority to CN201810354900.4A priority Critical patent/CN108315376A/zh
Publication of CN108315376A publication Critical patent/CN108315376A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
    • C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法，提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其配比如下：豆油1.7‑2.0％，鱼粉1.2‑1.5％，玉米粉1.2‑1.5％，玉米蛋白粉1.5‑2.0％，甜菜碱盐酸盐0.05‑0.08％，棉籽饼粉0.4‑0.8％，玉米浆0.1‑0.4％，氯化钾0.05‑0.08％，磷酸氢二铵0.02‑0.05％，硫酸镍0.0002‑0.0004％，氯化钴0.0002‑0.0004％，轻质碳酸钙0.1‑0.4％，其余为水。本发明的泰乐菌素发酵营养经过培养，可生成较高活性的泰乐菌素C向泰乐菌素A转化所需的酶，可以促使菌丝将泰乐菌素C不断向泰乐菌素A转化，最终减少发酵末期泰乐菌素C的转化耗时，缩短了转化时间，泰乐菌素D的增长量同比会减少。

Description

一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法
技术领域
本发明涉及一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法，属于兽药产品加工技术领域。
背景技术
泰乐菌素(Tylosin)，是美国于1959年从弗氏链霉菌(Streptomyces fradiae)的培养液中获得的一种大环内酯类抗生素。泰乐菌素作为一种高效无残留的禽畜专用抗菌促生剂，其不仅对格兰氏阳性菌和支原体感染有特殊疗效，而且对禽畜的生长有明显促进作用。
目前在泰乐菌素发酵生产中，发酵液中除含有主要活性成分泰乐菌素A外，还存在其他三种泰乐菌素类似物，分别为大菌素、脱碳霉糖泰乐菌素、雷洛菌素，既泰乐菌素C、泰乐菌素B、泰乐菌素D。其中泰乐菌素C可转化为泰乐菌素A，在转化过程中，泰乐菌素D的含量会加速增长。泰乐菌素C的含量越高，转化时间越长，泰乐菌素D的增长量也越高。在发酵完成后，泰乐菌素D在发酵液所占比例较大，成为制约泰乐菌素发酵液质量的重要因素。
如何将泰乐菌素发酵液中的泰乐菌素D降低、泰乐菌素C高效转化，避免影响泰乐菌素的质量，提高泰乐菌素的质量成为目前急需解决的问题。
发明内容
针对现有泰乐菌素D组分较高的不足，本发明提供一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法。
一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.7-2.0％，鱼粉1.2-1.5％，玉米粉1.2-1.5％，玉米蛋白粉1.5-2.0％，甜菜碱盐酸盐0.05-0.08％，棉籽饼粉0.4-0.8％，玉米浆0.1-0.4％，氯化钾0.05-0.08％，磷酸氢二铵0.02-0.05％，硫酸镍0.0002-0.0004％，氯化钴0.0002-0.0004％，轻质碳酸钙0.1-0.4％，余量为水。
根据本发明优选的，提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.8-2.0％，鱼粉1.3-1.5％，玉米粉1.3-1.5％，玉米蛋白粉1.8-1.9％，甜菜碱盐酸盐0.06-0.08％，棉籽饼粉0.6-0.8％，玉米浆0.3-0.4％，氯化钾0.07-0.08％，磷酸氢二铵0.04-0.05％，硫酸镍0.0003-0.0004％，氯化钴0.0003-0.0004％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
根据本发明优选的，提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.8％，鱼粉1.3％，玉米粉1.3％，玉米蛋白粉1.8％，甜菜碱盐酸盐0.06％，棉籽饼粉0.6％，玉米浆0.3％，氯化钾0.07％，磷酸氢二铵0.04％，硫酸镍0.0003％，氯化钴0.0003％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
本发明的发酵营养液中豆油、玉米粉为菌丝生长及产物合成提供碳源，玉米浆、玉米蛋白粉、棉籽饼粉、鱼粉为菌丝生长及产物合成提供氮源，甜菜碱盐酸盐可以为泰乐菌素A的合成提供甲基，其余物质为菌丝代谢所需的无机盐。本发明的泰乐菌素发酵营养液经过培养后，可生成较高活性的泰乐菌素C向泰乐菌素A转化所需的酶，可以促使菌丝将泰乐菌素C不断向泰乐菌素A转化，最终减少发酵末期泰乐菌素C的转化耗时，缩短了转化时间，泰乐菌素D的增长量同比会减少。
一种利用发酵营养液提高泰乐菌素发酵液质量的发酵方法，将发酵营养液灭菌后，接种常规泰乐菌素三级发酵生产工艺中的二级种子液进行初步培养，得初步培养液，将初步培养液接种至泰乐菌素三级发酵中的发酵罐培养进行继续培养。
根据本发明优选的，所述的初步培养为在培养温度为29-31℃，搅拌转速为110-150转/分钟，通气量为发酵营养液体积的1/2/分钟条件下培养60-70小时，然后升温至34-38℃培养2-5小时，二级种子液的接种量为发酵营养液质量的5％-8％。
发酵营养液接种二级种子液经过升温培养，发酵营养液中泰乐菌素C向泰乐菌素A转化的相关酶被激活，转入到发酵后期的发酵罐中，有助于发酵罐中泰乐菌素C向泰乐菌素A转化。
根据本发明优选的，初步培养液的接种量为发酵液总体积的5％-10％。
目前泰乐菌素发酵生产中普遍采用三级发酵，即：一级种子罐培养→二级种子罐培养→发酵罐培养→发酵液。
本发明在二级种子罐培养后加入发酵营养液，然后进行发酵罐培养。
本发明所用原料及设备均为现有技术。
本发明的优点如下：
本发明的发酵营养液泰乐菌素发酵液在转化前，泰乐菌素A的比例有60％-80％，可减少泰乐菌素C向泰乐菌素A转化用时约10-15小时。泰乐菌素发酵液中D组分的比例可同比下降10％-20％，正常情况下能够将泰乐菌素发酵液中D组分的比例控制在4％以下，泰乐菌素A的比例在90％以上。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。
实施例1
一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.8％，鱼粉1.3％，玉米粉1.3％，玉米蛋白粉1.8％，甜菜碱盐酸盐0.06％，棉籽饼粉0.6％，玉米浆0.3％，氯化钾0.07％，磷酸氢二铵0.04％，硫酸镍0.0003％，氯化钴0.0003％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
采用上述发酵营养液提高泰乐菌素发酵液质量的发酵方法，采用常规泰乐菌素三级发酵生产工艺进行泰乐菌素一级种子、二级种子、发酵罐的配置、消毒、移种、培养；
发酵周期：摇瓶培养30-40h，一级种子罐培养20-30h，二级种子罐培养26-35h，发酵罐培养120-150h；
泰乐菌素发酵罐培养至20-30小时开始准备上述发酵营养液，灭菌后接种常规泰乐菌素三级发酵生产工艺中的二级种子液进行初步培养，在培养温度为30℃，搅拌转速为120转/分钟，通气量为发酵营养液体积的1/2/分钟条件下培养60小时，然后升温至34℃培养2小时，二级种子液的接种量为发酵营养液质量的5％，得初步培养液；
将初步培养液接种至泰乐菌素三级发酵中的发酵罐培养进行继续培养至合适周期，经转化合格后放罐，初步培养液的接种量为发酵液总体积的10％。
具体实际应用生产实例：
主要生产设备：3m3一级种子罐、35m3二级种子罐、160m3发酵罐。
1)配置1.0t一级种子液，在121-125℃条件下灭菌25-35分钟，降温至28-30℃后进行接种培养，培养条件为：通气量0.8-7.0m3/min，温度28.0-31.0℃、压力0.030-0.060MPa，搅拌110-150r/min，得一级种子液，待符合移种指标后转入二级种子罐；
2)在121-125℃条件下灭菌25-35分钟，液降温至28-30℃后转入合格的一级种子液开始培养，培养条件为：通气量10.0-50.0m3/min，温度28.0-31.0℃，压力为0.030-0.060MPa，搅拌110-150r/min，得二级种子液，培养至符合移种指标后转入发酵罐罐。
发酵营养液，灭菌后接种二级种子液进行初步培养，在培养温度为30℃，搅拌转速为120转/分钟，通气量为发酵营养液体积的1/2/分钟条件下培养60小时，然后升温至34℃培养2小时，二级种子液的接种量为发酵营养液质量的5％，得初步培养液；
3)配置85t发酵罐培养基，在121-125℃条件下灭菌25-35分钟，灭菌后降温至28-30℃，接种合格的二级种子液，开始培养。培养条件为：压力0.010-0.050MPa，温度27.0-31.0℃，通气量30.0-150.0m3/min，搅拌110-150r/min。培养期间通过补水、补油维持菌丝正常代谢，在90小时时控制发酵液体积在125-135t。
4)当发酵罐运行至20小时，配置10t初步培养液，在121—125℃条件下灭菌25—35分钟，降温至28-30℃后，接种0.6t合格的二级种子液，开始培养。培养条件为：压力为0.030-0.060MPa，温度29-31℃，搅拌转速110-150r/min，通气量为6m3/min。
5)接入初步培养液的发酵罐培养至140-150小时进行转化。转化具体操作方式是让发酵液自然升温至36-39℃培养。待发酵液中泰乐菌素C完全转化为泰乐菌素A后，即完成发酵。
具体实际应用生产实例中取得的效果见下表1：
表1 常规泰乐菌素三级发酵与本发明的发酵方法对组分情况的影响
从实际生产取得的数据显示，泰乐菌素发酵液中D组分的含量明显降低，泰乐菌素A的比例相对有所提高，提升了泰乐菌素发酵液的质量。
实施例2
一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油2.0％，鱼粉1.5％，玉米粉1.5％，玉米蛋白粉1.9％，甜菜碱盐酸盐0.08％，棉籽饼粉0.8％，玉米浆0.4％，氯化钾0.08％，磷酸氢二铵0.05％，硫酸镍0.0004％，氯化钴0.0004％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
对比例1
一种发酵营养液，该组分中不含有甜菜碱盐酸盐，其他组分同实施例1，不足百分之百，用水补齐。
采用实施例1的发酵方法进行发酵培养，发酵培养结束后，测试发酵液D组分含量，D组分含量为4.13％，发酵营养液中缺少了甜菜碱盐酸盐，发酵液中的D组分含量明显比本发明的高。

Claims (6)

1.一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.7-2.0％，鱼粉1.2-1.5％，玉米粉1.2-1.5％，玉米蛋白粉1.5-2.0％，甜菜碱盐酸盐0.05-0.08％，棉籽饼粉0.4-0.8％，玉米浆0.1-0.4％，氯化钾0.05-0.08％，磷酸氢二铵0.02-0.05％，硫酸镍0.0002-0.0004％，氯化钴0.0002-0.0004％，轻质碳酸钙0.1-0.4％，余量为水。
2.根据权利要求1所述的提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，其特征在于，提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.8-2.0％，鱼粉1.3-1.5％，玉米粉1.3-1.5％，玉米蛋白粉1.8-1.9％，甜菜碱盐酸盐0.06-0.08％，棉籽饼粉0.6-0.8％，玉米浆0.3-0.4％，氯化钾0.07-0.08％，磷酸氢二铵0.04-0.05％，硫酸镍0.0003-0.0004％，氯化钴0.0003-0.0004％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
3.根据权利要求1所述的提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，其特征在于，提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液，原料组成及其重量百分比如下：
豆油1.8％，鱼粉1.3％，玉米粉1.3％，玉米蛋白粉1.8％，甜菜碱盐酸盐0.06％，棉籽饼粉0.6％，玉米浆0.3％，氯化钾0.07％，磷酸氢二铵0.04％，硫酸镍0.0003％，氯化钴0.0003％，轻质碳酸钙0.3％，余量为水。
4.一种利用权利要求1所述的发酵营养液提高泰乐菌素发酵液质量的发酵方法，将发酵营养液灭菌后，接种常规泰乐菌素三级发酵生产工艺中的二级种子液进行初步培养，得初步培养液，将初步培养液接种至泰乐菌素三级发酵中的发酵罐培养进行继续培养。
5.根据权利要求4所述的提高泰乐菌素发酵液质量的发酵方法，其特征在于，所述的初步培养为在培养温度为29-31℃，搅拌转速为110-150转/分钟，通气量为发酵营养液体积的1/2/分钟条件下培养60-70小时，然后升温至34-38℃培养2-5小时，二级种子液的接种量为发酵营养液质量的5％-8％。
6.根据权利要求4所述的提高泰乐菌素发酵液质量的发酵方法，其特征在于，初步培养液的接种量为发酵液总体积的5％-10％。
CN201810354900.4A 2018-04-19 2018-04-19 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法 Pending CN108315376A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810354900.4A CN108315376A (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810354900.4A CN108315376A (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108315376A true CN108315376A (zh) 2018-07-24

Family

ID=62894411

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810354900.4A Pending CN108315376A (zh) 2018-04-19 2018-04-19 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108315376A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111139197A (zh) * 2019-11-19 2020-05-12 湖北回盛生物科技有限公司 一种弗氏链霉菌及其在泰乐菌素发酵时的应用
CN112779306A (zh) * 2021-01-26 2021-05-11 浙江普洛生物科技有限公司 一种从发酵液中筛选碳酸钙最佳配比的方法及其用途

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3433711A (en) * 1965-06-25 1969-03-18 Lilly Co Eli Process for tylosin production
CN1443851A (zh) * 2002-03-13 2003-09-24 宁夏多维药业有限公司 以玉米为主要原料生产泰乐菌素的方法
US20100279367A1 (en) * 2009-04-29 2010-11-04 Fermalogic, Inc. Soybean-Based Fermentation Media, Methods of Making And Use
CN102690775A (zh) * 2012-06-04 2012-09-26 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种泰乐菌素基因工程菌及其应用
CN103074402A (zh) * 2013-02-05 2013-05-01 宁夏泰瑞制药股份有限公司 弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基及发酵方法
CN104017845A (zh) * 2014-06-03 2014-09-03 浦城正大生化有限公司 泰乐菌素发酵配方
CN106244650A (zh) * 2016-07-29 2016-12-21 山东鲁抗生物制造有限公司 泰乐菌素发酵新工艺
CN106591402A (zh) * 2015-10-14 2017-04-26 山东东药药业股份有限公司 一种泰乐菌素发酵配方

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3433711A (en) * 1965-06-25 1969-03-18 Lilly Co Eli Process for tylosin production
CN1443851A (zh) * 2002-03-13 2003-09-24 宁夏多维药业有限公司 以玉米为主要原料生产泰乐菌素的方法
US20100279367A1 (en) * 2009-04-29 2010-11-04 Fermalogic, Inc. Soybean-Based Fermentation Media, Methods of Making And Use
CN102690775A (zh) * 2012-06-04 2012-09-26 宁夏泰瑞制药股份有限公司 一种泰乐菌素基因工程菌及其应用
CN103074402A (zh) * 2013-02-05 2013-05-01 宁夏泰瑞制药股份有限公司 弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基及发酵方法
CN104017845A (zh) * 2014-06-03 2014-09-03 浦城正大生化有限公司 泰乐菌素发酵配方
CN106591402A (zh) * 2015-10-14 2017-04-26 山东东药药业股份有限公司 一种泰乐菌素发酵配方
CN106244650A (zh) * 2016-07-29 2016-12-21 山东鲁抗生物制造有限公司 泰乐菌素发酵新工艺

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
STARK W M 等: "A fermentation study of the biosynthesis of tylosin in synthetic media", 《SCIENTIFIC REPORTS OF THE ISTITUTO SUPERIORE DI SANITA》 *
任翔 等: "变温培养对泰乐菌素发酵的影响", 《医药产业资讯》 *
李康乐 等: "利用响应面法优化泰乐菌素发酵培养基", 《中国兽药杂志》 *
杨玉红 等: "《生物技术概论》", 31 August 2011, 武汉理工大学出版社 *
王成迎 等: "泰乐菌素发酵中通气量与DO的分析控制", 《黑龙江八一农垦大学学报》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111139197A (zh) * 2019-11-19 2020-05-12 湖北回盛生物科技有限公司 一种弗氏链霉菌及其在泰乐菌素发酵时的应用
CN111139197B (zh) * 2019-11-19 2023-03-31 湖北回盛生物科技有限公司 一种弗氏链霉菌及其在泰乐菌素发酵时的应用
CN112779306A (zh) * 2021-01-26 2021-05-11 浙江普洛生物科技有限公司 一种从发酵液中筛选碳酸钙最佳配比的方法及其用途
CN112779306B (zh) * 2021-01-26 2022-05-27 安徽普洛生物科技有限公司 一种从发酵液中筛选碳酸钙最佳配比的方法及其用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108522153A (zh) 一种利用液体菌种快速扩繁羊肚菌栽培种的方法
CN102442853A (zh) 黄色金针菇液体菌种培养基配方及其制备方法
CN102533889B (zh) 一种赖氨酸连续发酵的方法
CN105385607A (zh) 一种香菇液体深层发酵培养基配方及发酵工艺
CN108315376A (zh) 一种提高泰乐菌素发酵液质量的发酵营养液及发酵方法
CN102381896B (zh) 蟹味菇液体菌种培养基配方及其制备方法
CN110982750A (zh) 一种沼泽红假单胞菌高密度发酵方法及其应用
CN107164289A (zh) 一种高效降解除臭的微生物制剂及其制备方法
CN108034687B (zh) 一种含类胡萝卜素的组合物及含类胡萝卜素的组合物的制备方法
CN106635919A (zh) 一种螺旋藻的养殖方法
CN103966271A (zh) 发酵生产dha的方法
CN101434921B (zh) 一种培养磁细菌生产磁小体的方法
CN102787153B (zh) 微生物发酵补料生产恩拉霉素的方法
CN102071226A (zh) 长链二元酸制备过程中的串罐发酵工艺
CN102399834A (zh) 一种赖氨酸的制备方法
CN106831037A (zh) 一种食用菌液体菌种培养基及其制备方法
CN102533891A (zh) 一种赖氨酸的生产方法
CN101967461B (zh) 一种固氮螺菌的发酵方法与由该方法得到的发酵液及其用途
CN107699595A (zh) 一种微生物发酵法生产l‑羟脯氨酸的方法
CN111073922B (zh) 一种维生素b12发酵补料培养基及补料方法
CN111733202A (zh) 一种泰乐菌素混种发酵方法
CN109628526B (zh) 一种提高n-乙酰氨基葡萄糖产量的发酵方法
CN110129205A (zh) 一种白灵菇液体菌种培养基及白灵菇液体菌种制备方法
CN103211102A (zh) 饲用生物酸的加工制造方法
CN107058193A (zh) 一种布氏菌病活疫苗s2菌体的高密度发酵方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180724

RJ01 Rejection of invention patent application after publication